KASUTAMISEKS AINULT KOOS ANALÜSAATORIGA SOFIA puhul ... · voolamine testis toimus õigesti ning säilis testkasseti funktsionaalne terviklikkus. Analüsaator Sofia tõlgendab protseduuri

_________________________________________________________________________________ Sofia Influenza A+B FIA Lk 1/27

KASUTAMISEKS AINULT KOOS ANALÜSAATORIGA SOFIA

CLIA keerukuse aste: vabastatud (ninakaabete, ninaneelu kaabete ja ninaneelu aspiraatide/loputiste puhul)

CLIA keerukuse aste: keskmine (kõigi transpordisöötmes elueeritud proovide puhul)

Ainult in vitro kasutamiseks. Testi kasutamiseks CLIA vabastusega asutuses on vajalik vabastuse sertifikaat. Testi võib kasutada ka laborites, milles tehakse keskmise ja suure keerukusega analüüse. Vabastuse sertifikaadi saamiseks võtke ühendust osariigi tervishoiuministeeriumiga. Täiendavat teavet CLIA vabastuse kohta leiate USA Centers for Medicare and Medicaidi veebilehelt www.cms.hhs.gov/CLIA või osariigi tervishoiuministeeriumist. Testisüsteemi kasutusjuhendi eiramise või selle muutmise korral ei vasta test enam CLIA „vabastatud” kategooria nõuetele.

ETTENÄHTUD KASUTUS

Sofia Influenza A+B FIA testis rakendatakse immunofluorestsentsi meetodit, et tuvastada sümptomitega patsientidelt võetud värsketest või transpordisöötmes ninakaabetest ja ninaneelu aspiraatidest/loputistest A- ning B-gripiviiruse antigeene (nukleoproteiine). See kvalitatiivne test on mõeldud ägeda A- või B-gripiviirusinfektsiooni kiire eristava diagnoosimise hõlbustamiseks. Test ei ole mõeldud C-gripiviiruse antigeenide tuvastamiseks. Negatiivne testitulemus on oletatav, soovitatavalt tuleb see kinnitada viiruse kasvatamisega kultuuris või A- ja B-gripiviiruse molekulaarse analüüsiga, mille FDA on heaks kiitnud. Negatiivsed tulemused ei välista gripiviirusinfektsiooni ning neid ei tohiks käsitleda ainsate tõenditena, mille põhjal ravi- või muid patsiendi hooldamisega seotud otsuseid teha. Test on mõeldud professionaalseks ja laboratoorseks kasutamiseks. Tulemusnäitajad A- ning B-gripiviiruse puhul tehti kindlaks veebruarist märtsini 2011. a, mil USA Haiguste Kontrolli ja Tõrje Keskuse iganädalase haigestumuse ning suremuse raporti (pealkirjaga „Update: Influenza Activity-United States, 2010–2011 Season, and Composition of the 2011–2012 Influenza Vaccine.”) andmetel olid peamised ringlevad viirustüved A/California/7/2009 (2009 H1N1), A/Perth/16/2009 (H3N2) ja B/Brisbane/60/2008 (Victoria-sarnane). Muude uute gripiviiruste puhul võivad tulemusnäitajad teistsugused olla. Kui rahvaterviseasutuse soovitatud kehtivate kliiniliste ning epidemioloogiliste sõelumiskriteeriumide põhjal kahtlustatakse nakatumist uue gripiviirusega, tuleb proovi võtmisel järgida asjakohaseid uute virulentsete gripiviiruste nakkuskontrolli ettevaatusabinõusid ja proov saata testimiseks riiklikku või kohalikku tervishoiuministeeriumi. Sellistel puhkudel ei tohiks viirust kultuuris kasvatada, v.a juhul, kui on olemas ligipääs ruumidele bioohutuse tasemega 3+, kus proove vastu võtta ja kasvatada. KOKKUVÕTE JA SELGITUSED Gripiviirused põhjustavad hingamisteede ägedaid ja väga nakkavaid viirusinfektsioone.


Gripiviirused on immunoloogilises mõttes eriilmelised üheahelalise RNA-genoomiga viirused. Gripiviiruseid on kolme tüüpi. Kõige levinumad on A-, B- ja C-gripiviirused, mis on seotud kõige raskemate epideemiatega. B-gripiviirusest põhjustatud haigestumine on üldjuhul A-gripiviirusest kergem. C-gripiviirust pole kunagi inimeste epideemilise haigestumisega seostatud. A- ja B-gripiviirused võivad samal ajal ringelda, kuid harilikult domineerib konkreetsel hooajal üks tüüp.1 USA-s haigestub igal aastal grippi keskmiselt 5–20% populatsioonist, rohkem kui 200 000 inimest hospitaliseeritakse gripi tüsistuste tõttu ning umbes 36 000 inimest sureb gripiga seotud põhjustel. Mõnedel inimestel, nagu 65-aastastel ja vanematel täiskasvanutel, väikelastel ning teatud südamehaigustega inimestel, on suur risk gripi raskete tüsistuste tekkeks.2 TESTI TÖÖPÕHIMÕTE Sofia Influenza A+B FIA testis rakendatakse immunofluorestsentsi tehnoloogiat, mida kasutatakse koos analüsaatoriga Sofia, et saavutada gripiviiruse antigeenide (nukleoproteiinide) kiire tuvastamine. Test võimaldab A- ning B-gripiviiruse antigeenide eristavat tuvastamist. Patsiendiproov viiakse reaktiivikatsutisse, kus proovis leiduvad viirusosakesed lõhustatakse, mille tulemusel paljastuvad viiruse sisemuses asuvad nukleoproteiinid. Lõhustamise järel tilgutatakse proov testkasseti proovisüvendisse. Proovisüvendist liigub proov läbi testriba, mis sisaldab mitmesuguseid unikaalseid keemilisi keskkondi. Kui proovis esinevad gripiviiruse antigeenid, püütakse need kindlasse asukohta kinni. Märkus. Olenevalt kasutaja otsusest asetatakse testkassett kohe analüsaatorisse Sofia, kus tulemuste ilmnemiseks vajalikku aega mõõdetakse automaatselt (režiim WALK AWAY ehk Käed-vaba), või pannakse kassett lauale, mõõdetakse tulemuste ilmnemiseks vajalik aeg käsitsi ja asetatakse kassett skannimiseks analüsaatorisse Sofia (režiim READ NOW ehk Loe kohe). Sofia skannib testriba, mõõdab fluorestsentsi signaali ning töötleb tulemusi meetodispetsiifiliste algoritmidega. Seejärel kuvab Sofia tulemused (positiivne, negatiivne või vigane) ekraanile. Kui see suvand on valitud, saab tulemused integreeritud printeri abil ka automaatselt välja trükkida. KAASAS OLEVAD REAKTIIVID JA VAHENDID 25 testist koosnev komplekt Üksikult pakitud testkassetid (25): hiire monokloonsed A-gripiviiruse ning B-gripiviiruse vastased antikehad Reaktiivikatsutid (25): lüofiliseeritud puhver detergentide ja redutseerivate ainetega Reaktiivilahus (25): ampullid soolalahusega Steriilsed ninatampoonid (25) Väikesed (120 µl) läbipaistvad fikseeritud mahuga pipetid (25) Suured (250 µl) roosad fikseeritud mahuga pipetid (25) A-gripiviiruse ja B-gripiviiruse positiivne kontrolltampoon (1): tampoon on kaetud mittenakkavate

rekombinantsete A- ja B-gripiviiruse antigeenidega Negatiivne kontrolltampoon (1): tampoon on kaetud kuumuse toimel inaktiveeritud mittenakkava C-

streptokoki antigeeniga Pakendi infoleht (1) Kiirjuhend (1) QC-kaart (asub komplekti karbil) Printeripaber (1)


VAHENDID, MIS POLE KOMPLEKTIGA KAASAS Taimer või kell Analüsaator Sofia Proovimahuti Steriilne füsioloogiline lahus proovi võtmiseks Vahendid ninaneelu aspiraatide või loputiste võtmiseks Nailonpeaga ninaneelu tampoon Kaliibrimiskassett (kaasas analüsaatori Sofia installipakiga) HOIATUSED JA ETTEVAATUSABINÕUD In vitro diagnostiliseks kasutamiseks Ärge kasutage komplekti osi pärast karbi välisküljele trükitud kõlblikkusaja möödumist. Järgige patsiendiproovide ja komplekti kasutatud osade kogumisel, käitlemisel, säilitamisel ning

kõrvaldamisel asjakohaseid ettevaatusabinõusid.3 Patsiendiproovide käitlemisel on soovitatav kasutada nitriilist või lateksist (või nendega samaväärseid)

kindaid.3 Mahutite ja kasutamata reaktiivide kõrvaldamisel järgige föderaalseid, riiklikke ning kohalikke nõudeid. Ärge kasutage juba kasutatud testkassette, fikseeritud mahuga pipette, reaktiivikatsuteid, lahuseid või

kontrolltampoone uuesti. Kasutaja ei tohi testkasseti fooliumkotikest avada ja kassetti ümbritseva õhuga kokkupuutesse viia enne,

kui ta on valmis testkassetti otsekohe kasutama. Vigastatud testkassette ega vahendeid ei tohi kasutada, vaid need tuleb ära visata. Reaktiivilahus sisaldab soolalahust (füsioloogiline). Lahusega kokku puutunud nahka või silmi tuleb

loputada ohtra veega. Täpsete tulemuste saamiseks tuleb järgida suuniseid pakendi infolehel. Kasutuskordade vahel tuleb kaliibrimiskassetti hoida kaasasolevas säilituskotis. Ebapiisav või sobimatu proovi võtmine, säilitamine või transport võib põhjustada vigaseid testitulemusi. Proovi võtmise ja käitlemise protseduurid vajavad spetsiifilist väljaõpet ning suuniseid. Täpsete tulemuste saamiseks kasutage pakendi infolehes soovitatud viiruste transpordisöötmeid. Ninakaape võtmisel kasutage komplektiga kaasas olevat ninatampooni. Ninaneelu kaape võtmisel kasutage nailonpeaga ninaneelu tampooni. Kasutage sobivat fikseeritud mahuga pipetti, mis on kooskõlas testi protseduuriga:

Kõigi proovitüüpide puhul tohib patsiendiproovi testkassetile lisamiseks kasutada ainult väikest läbipaistvat 120 µl fikseeritud mahuga pipetti;

aspiraadi/loputise või viiruste transpordisöötmes olevate proovide kogumistopsist reaktiivikatsutisse pipeteerimiseks tohib kasutada ainult suurt roosat 250 μl fikseeritud mahuga pipetti.

Ärge valage proovi reaktiivikatsutist testkasseti proovisüvendisse. Kasutage proovi testkassetile lisamiseks kaasas olevat väikest läbipaistvat 120 μl fikseeritud mahuga pipetti.

Täpsete tulemuste saamiseks ärge kasutage nähtavalt verega saastunud või liiga viskoosseid proove. Ärge kirjutage testkasseti vöötkoodi peale. Analüsaator Sofia kasutab ribakoodi testi tüübi ning eraldi

testkassettide tuvastamiseks, nii et sama analüsaator ühte testkassetti teist korda ei loeks. Kui rahvaterviseasutuse soovitatud kehtivate kliiniliste ning epidemioloogiliste sõelumiskriteeriumide

põhjal kahtlustatakse nakatumist uue A-gripiviirusega, tuleb proovi võtmisel järgida asjakohaseid uute virulentsete gripiviiruste nakkuskontrolli ettevaatusabinõusid ja proov saata testimiseks riiklikku või kohalikku tervishoiuasutusse. Sellistel puhkudel ei tohiks viirust kultuuris kasvatada, v.a juhul, kui on olemas ligipääs ruumidele bioohutuse tasemega 3+, kus proove vastu võtta ja kasvatada.

Kuigi on näidatud, et test võib tuvastada kultuuris kasvatatud linnugripiviirusi, sh A-linnugripiviiruse H5N1 alamtüüpi, ei ole testi tulemusnäitajad H5N1 või muu linnugripiviirusega nakatunud inimestelt võetud proovide puhul teada.


Kuna tuvastusreaktiiv on fluorestseeruv ühend, ei teki testribale silmaga nähtavat tulemust. Tulemuste tõlgendamiseks peab kasutama analüsaatorit Sofia.

Täpsete tulemuste saamiseks ei tohi kotist välja võetud testkassetti kasutada laminaari all või tugeva ventilatsiooniga alal.

Testida tuleks piisava ventilatsiooniga ruumis. Kandke komplekti osade käitlemise ajal sobivat kaitseriietust, kindaid ja silmade/näo kaitset. Pärast käitlemist peske põhjalikult käsi. Täiendavat teavet ohumärkide, ohutuse, käitlemise ja komplekti koostisosade kõrvaldamise kohta leiate

toote ohutuskaardilt (SDS, ingl Safety Data Sheet), mis on saadaval veebilehel quidel.com. KOMPLEKTI SÄILITAMINE JA STABIILSUS Säilitage komplekti toatemperatuuril, 15–30 °C (59–86 °F), varjatuna otsese päikesevalguse eest. Komplekti osad püsivad stabiilsena kuni karbi välisküljele trükitud kõlblikkusajani. Komplekti ei tohi külmutada. KVALITEEDIKONTROLL Analüsaatori Sofia ja testkasseti jaoks on olemas kolm erinevat kvaliteedikontrolli tüüpi: Sofia kalibratsioonikontrolli protseduur, sisseehitatud protseduuri kontroll ning välised kontrollid. Sofia kalibratsioonikontrolli protseduur Märkus. See on kalibratsioonikontrolli protseduur. Kalibratsiooni tuleks kontrollida iga 30 päeva tagant. Analüsaatorit Sofia saab hõlpsasti seadistada nii, et see kasutajale kalibratsioonikontrolli protseduuri meelde tuletaks. Kalibratsioonikontroll on vajalik funktsioon, mille käigus kontrollitakse spetsiaalse kaliibrimiskasseti abil analüsaatori Sofia optikat ja arvutussüsteeme. Kaliibrimiskassett on kaasas analüsaatori Sofia installipakiga. Üksikasjalikku teavet kalibratsioonikontrolli protseduuri kohta leiate analüsaatori Sofia kasutusjuhendist. Tähtis! Veenduge, et kaliibrimiskassetti hoitaks kasutuskordade vahel kaasas olevas säilituskotis, kus kassett on valguse eest kaitstud.

1. Analüsaatori Sofia kalibratsiooni kontrollimiseks valige peamenüüst „Calibration” (Kalibratsioon).


2. Viiba kuvamisel sisestage kaliibrimiskassett

analüsaatorisse Sofia ning sulgege sahtel. Analüsaator Sofia kontrollib kahe minuti jooksul automaatselt kalibratsiooni, ilma et kasutaja selleks midagi tegema peaks.

Kui kontroll on tehtud, annab Sofia sellest märku. Tagasi peamenüüsse pöördumiseks valige OK. MÄRKUS. Kui kalibratsioonikontroll ei õnnestu, teavitage oma juhti või võtke ühendust Quideli tehnilise toega, E–R 7.00–17.00 Vaikse ookeani aja järgi telefonil 800 874 1517 (USA-s); 858 552 1100 (väljaspool USA-d); faks: 858 455 4960; [email protected] (klienditeenindus); [email protected] (tehniline tugi); või võtke ühendust edasimüüjaga. Sisseehitatud protseduuri kontroll Sofia Influenza A+B FIA testi on sisse ehitatud protseduuri kontroll. Iga kord kui testi analüsaatoris Sofia jooksutatakse, skannib masin protseduuri kontrolli piirkonda ja kuvab tulemuse ekraanile. Igapäevaseks kontrolliks soovitab tootja iga päeva esimese proovi kohta kuvatava sisseehitatud protseduuri kontrolli tulemuse dokumenteerida. Analüsaator Sofia kirjutab iga testi sisseehitatud protseduuri kontrolli tulemused automaatselt logisse. Protseduuri kontrolli nõuetekohane tulemus näitab, et proovi voolamine testis toimus õigesti ning säilis testkasseti funktsionaalne terviklikkus. Analüsaator Sofia tõlgendab protseduuri kontrolli tulemusi siis, kui kasseti ilmutamiseks on kulunud 15 minutit. Kui proov ei ole testkassetis õigesti voolanud, annab analüsaator Sofia teada, et tulemus on vigane. Kui see peaks juhtuma, vaadake tööprotseduur uuesti üle ning korrake testi uue patsiendiproovi ja uue kassetiga. Väline kvaliteedikontroll Näitamaks, et reaktiivid ja analüüsiprotseduur töötavad õigesti, võib kasutada väliseid kontrolle. Quidel soovitab positiivse ning negatiivse välise kontrolli kasutamist järgmistel juhtudel:

• üks kord iga väljaõppeta kasutaja puhul; • üks kord iga uue testide komplekti saabumisel – eeldusel, et kontrollitakse kõiki saadetises olevaid

erinevaid partiisid; • täiendavalt juhtudel, mis on ette nähtud sisemise kvaliteedikontrolli protseduuride järgi ning kooskõlas

kohalike, riiklike ja föderaalsete eeskirjadega või akrediteerimise nõuetega.

Näide: siin on kuvatud vigane tulemus (Invalid).


Kasutaja peab esmalt valima analüsaatori Sofia peamenüüs „Run QC” (Tee kvaliteedikontroll) ja viiba kuvamisel skannima QC-kaardi (asub komplekti karbil). Kaart sisaldab komplekti konkreetse partiiga seotud teavet, nagu partiinumber ja kõlblikkusaeg. Analüsaator Sofia palub kasutajal soovitud režiimi valida (WALK AWAY või READ NOW) ja seejärel välised kontrolltampoonid analüüsida. Välised positiivsed ja negatiivsed kontrolltampoonid on komplektiga kaasas, nende testimisel tuleks järgida pakendi infolehel või kiirjuhendis toodud kaape testimise protseduuri. Gripiviiruse positiivne kontrolltampoon sisaldab nii A- kui ka B-gripiviiruse antigeene. Positiivne kontrolltampoon tuleb testida esimesena, enne negatiivset kontrolltampooni. Kui kvaliteedikontrolli analüüs on tehtud, kuvatakse positiivse ja negatiivse kontrolli kohta tulemus kujul „Passed” (Õnnestus) või „Failed” (Ebaõnnestus). Kui ükskõik kumb kvaliteedikontrolli testidest ebaõnnestus, ärge testige patsiendiproove ega väljastage patsiendiproovide tulemusi. Enne patsiendiproovide testimist korrake kontrollteste või võtke ühendust Quideli tehnilise toega. Täiendavate väliste kontrolltampoonide hankimiseks võtke ühendust Quideli klienditoega telefonil 800 874 1517 (USA-s) või 858 552 1100. PROOVI VÕTMINE JA KÄITLEMINE PROOVI VÕTMINE Ninakaabe Kasutage komplektiga kaasas olevat ninatampooni. Ninakaape võtmiseks sisestage tampoon (komplektiga kaasas) ettevaatlikult sellesse ninasõõrmesse, kust eritub visuaalsel hinnangul kõige rohkem sekreeti. Tampooni õrnalt keerates lükake see sõõrmesse, kuni tunnete ninakarbiku piirkonnas vastupanu (vähem kui 2,5 cm sügavusel ninasõõrmes). Keerutage tampooni mitu korda vastu ninaseina ja eemaldage see siis sõõrmest. Ninaneelu kaabe Kasutage nailonpeaga ninaneelu tampooni, mis ei ole komplektiga kaasas. Ninaneelu kaape võtmiseks sisestage tampoon ettevaatlikult sellesse ninasõõrmesse, kust eritub visuaalsel hinnangul kõige rohkem sekreeti. Hoidke tampooni ninavaheseina põhja lähedal, tampooni samal ajal õrnalt posterioorsesse ninaneelu lükates. Keerutage tampooni mitu korda ja eemaldage see siis ninaneelust. Ninaneelu aspiraat/loputis Järgige oma asutuse protokolli ninaneelu aspiraadi/loputise võtmiseks. Kasutage kõige väiksemat füsioloogilise lahuse kogust, mida protseduur võimaldab. Teise võimalusena, kui teie asutuses selline protokoll puudub, võite kaaluda järgmist protseduuri, mida kasutavad klinitsistid. Ninaneelu aspiraadi võtmine: tilgutage paar tilka steriilset füsioloogilist lahust ninasõõrmesse, kust kavatsete aspiraadi võtta. Sisestage painduv voolik piki sõõrmepõhja, suulaega paralleelselt. Pärast ninaneelu jõudmist aspireerige sekreet ja eemaldage voolik. Kui esimesest sõõrmest saadi liiga vähe sekreeti, tuleb protseduuri korrata teise sõõrmega. Ninaneelu loputise võtmine: laps võib istuda vanema süles, näoga ettepoole, nii et lapse pea on vastu vanema rinda. Täitke süstal või aspiraator füsioloogilise lahuse kõige väiksema kogusega, mis on ravialuse suurust ning


vanust arvesse võttes vajalik. Tilgutage füsioloogilist lahust ühte ninasõõrmesse, nii et ravialuse pea on samal ajal tahapoole kallutatud. Aspireerige loputis tagasi süstlasse või aspiraatorisse. Aspireeritud loputise tõenäoline maht on umbes 1 cm3. Teise võimalusena kallutage pärast füsioloogilise lahuse tilgutamist ravialuse pead ettepoole ja laske füsioloogilisel lahusel puhtasse kogumistopsi voolata. PROOVI TRANSPORTIMINE JA SÄILITAMINE Proove tuleb testida nii ruttu pärast võtmist kui võimalik. Kui vajalik on proovide transportimine, on soovitatav proovi viiruste transpordisöötmega võimalikult vähe lahjendada, kuna lahjendamine võib testi tundlikkust vähendada. Kui võimalik, on parim kasutada 1 ml söödet või vähem, et patsiendiproovi mitte liigselt lahjendada.

Quidel on järgmisi viiruste transpordisöötmeid kontrollinud ning kindlaks teinud, et need sobivad kasutamiseks Sofia Influenza A+B FIA testiga. Samas võivad viiruste transpordisöötmete partiide vahelised erinevused nende toimivust mõjutada. Pärast analüüsimeetodi nõuetekohast valideerimist võib kasutada ka muid viiruste transpordisöötmeid.

Tabel 1 Soovitatavad viiruste transpordisöötmed

Viiruste transpordisööde Soovitatavad säilitustingimused

2 °C kuni 8 °C 25 °C

Copani universaalne transpordisööde 72 tundi 72 tundi Hanksi tasakaalustatud soolalahus 24 tundi Pole soovitatav M4 72 tundi 72 tundi M4-RT 72 tundi 72 tundi M5 72 tundi 72 tundi M6 72 tundi 72 tundi Modifitseeritud Stuarti vedelsööde 6 tundi Pole soovitatav Füsioloogiline lahus 24 tundi 4 tundi Starplexi sööde Multitrans 72 tundi 72 tundi

Märkus. Viiruste transpordisöötme kasutamisel on oluline veenduda, et proovi sisaldav sööde oleks toatemperatuurini soojenenud. Külmad proovid ei pruugi õigesti voolata ning võivad põhjustada valesid või vigaseid tulemusi. Külma proovi toatemperatuurini soojenemiseks kulub mitu minutit. TESTI TEGEMINE Kõik kliinilised proovid, sh viiruste transpordisöötmes olevad proovid, peavad enne analüüsimist olema saavutanud toatemperatuuri. Kõlblikkusaeg: enne kasutamist kontrollige testile või karbi välisküljele kantud kõlblikkusaega. Ärge kasutage ühtegi testi, mille etiketil olev kõlblikkusaeg on möödunud.


Kaape testimise protseduur (nina- või ninaneelu kaabe) 1. Veenduge, et analüsaator Sofia on seadistatud soovitud režiimi: WALK AWAY

(Käed-vaba) või READ NOW (Loe kohe). Rohkem teavet leiate jaotisest „Analüsaatori Sofia kasutamine”.

2. Tilgutage kogu reaktiivilahus reaktiivikatsutisse. Keerutage reaktiivikatsutit, et selle sisu lahustada.

3. Asetage patsiendi kaapega tampoon reaktiivikatsutisse. Keerutage tampooni vähemalt 3 korda samal ajal tampooni otsa reaktiivikatsuti põhja ning külje vastu surumisega. Jätke tampoon 1 minutiks reaktiivikatsutisse seisma.

4. Tampooni välja võttes keerutage selle otsa reaktiivikatsuti sisemuse vastu. Visake kasutatud tampoon ohtlike biojäätmete hulka.

5. Täitke kaasas olev väike läbipaistev 120 µl fikseeritud mahuga pipett reaktiivikatsutis oleva patsiendiprooviga. Fikseeritud mahuga pipeti täitmiseks patsiendiprooviga toimige järgmiselt. a. Pigistage TUGEVALT ülemist ballooni. b. Ballooni kokkupigistatuna hoidmise ajal asetage pipeti ots

patsiendiproovi sisse. c. Pipeti otsa endiselt patsiendiproovi sees hoides laske balloon aeglaselt

lahti, nii et pipett täitub.

6. Pigistage tugevalt ülemist ballooni ja tühjendage väikese läbipaistva 120 μl fikseeritud mahuga pipeti sisu testkasseti proovisüvendisse. Ülevoolu ballooni jäänud vedelik jätke pipeti sisse. MÄRKUS. Fikseeritud mahuga pipetid on tehtud spetsiaalselt vedela proovi õige koguse pipeteerimiseks. Visake pipett ohtlike biojäätmete hulka.

7. Jätkake jaotisega „Analüsaatori Sofia kasutamine”, et testimine lõpetada.


Viiruste transpordisöötmes oleva ninaneelu aspiraadi/loputise testimise protseduur 1. Veenduge, et analüsaator Sofia on seadistatud soovitud režiimi: WALK

AWAY (Käed-vaba) või READ NOW (Loe kohe). Rohkem teavet leiate jaotisest „Analüsaatori Sofia kasutamine”. Lisaks veenduge enne jätkamist, et vedel proov on saavutanud toatemperatuuri.

2. Tilgutage kogu reaktiivilahus reaktiivikatsutisse. Keerutage reaktiivikatsutit, et selle sisu lahustada.

3. Täitke kaasas olev suur roosa 250 µl fikseeritud mahuga pipett kogumistopsis või katsutis oleva patsiendiprooviga.

Fikseeritud mahuga pipeti täitmiseks prooviga toimige järgmiselt. a) Pigistage TUGEVALT ülemist ballooni. b) Ballooni kokkupigistatuna hoidmise ajal asetage pipeti ots patsiendiproovi sisse. c) Pipeti otsa patsiendiproovi sees hoidmise ajal laske balloon aeglaselt lahti, nii et pipett täitub. MÄRKUS. Täpsete tulemuste saamiseks ärge tõmmake suure roosa fikseeritud mahuga pipeti täitmisel patsiendiprooviga pipetti limaseid tükke.

4. Pigistage tugevalt ülemist ballooni ja tühjendage suure roosa fikseeritud mahuga pipeti sisu reaktiivikatsutisse. Ülevoolu ballooni jäänud vedelik jätke pipeti sisse.

MÄRKUS. Kui proov on reaktiivikatsutisse lisatud, segage see enne testkassetile lisamist tugevalt läbi. MÄRKUS. Fikseeritud mahuga pipetid on tehtud spetsiaalselt vedela proovi õige koguse pipeteerimiseks. Visake pipett ohtlike biojäätmete hulka.

5. Täitke kaasas olev väike läbipaistev 120 µl fikseeritud mahuga pipett reaktiivikatsutis oleva patsiendiprooviga aeglaselt ballooni lahti laskmise teel.


6. Pigistage tugevalt ülemist ballooni ja tühjendage väikese läbipaistva fikseeritud mahuga pipeti sisu testkasseti proovisüvendisse. Ülevoolu ballooni jäänud vedelik jätke pipeti sisse. Visake pipett ohtlike biojäätmete hulka.

7. Jätkake jaotisega „Analüsaatori Sofia kasutamine”, et testimine lõpetada.

ANALÜSAATORI SOFIA KASUTAMINE Režiimid WALK AWAY (Käed-vaba) ja READ NOW (Loe kohe) Teavet seadme kasutamise kohta leiate analüsaatori Sofia kasutusjuhendist. Analüsaatorit Sofia saab seadistada kahte erinevasse režiimi (WALK AWAY ehk Käed-vaba ning READ NOW ehk Loe kohe). Kummagi režiimi kasutamist kirjeldatakse allpool. Režiim WALK AWAY (Käed-vaba) Režiimis WALK AWAY (Käed-vaba) sisestab kasutaja testkasseti kohe analüsaatorisse Sofia. 15 minuti pärast pöördub kasutaja tagasi ning saab testi tulemused. Selles režiimis mõõdab analüsaator Sofia automaatselt testi ilmutamiseks kuluvat aega, skannib siis testi ja kuvab tulemused. Režiim READ NOW (Loe kohe) Väga tähtis! Laske testil ENNE, kui selle analüsaatorisse Sofia asetate, tulemuste ilmutamiseks TÄPSELT 15 minutit seista. Esmalt peab kasutaja testkasseti 15 minutiks lauale seisma jätma (analüsaatorist Sofia väljapoole) ja ilmutamiseks kuluvat aega käsitsi mõõtma. Seejärel sisestab kasutaja testkasseti analüsaatorisse Sofia. Režiimis READ NOW (Loe kohe) skannib analüsaator Sofia testi ja kuvab tulemused 1 minuti jooksul. Märkus. Tulemused püsivad stabiilsena täiendavad 15 minutit pärast testi ilmutamiseks kuluvat soovitatud 15 minutit. Soovitused suure koguse proovide testimiseks Olenevalt töömahust on suure koguse proovide testimise lihtsustamiseks mitu võimalust. Kasutaja võib reaktiivilahuse lisada ühte või enamasse reaktiivikatsutisse, keerata korgi tagasi peale ning hoida katsuteid enne proovi lisamist laual toatemperatuuril kuni 12 tundi, ilma et lahuse aktiivsus väheneks. Teise võimalusena võib kasutaja pärast reaktiivilahuse lisamist kaape või vedela proovi reaktiivikatsutis töödelda ning seejärel, pärast tampooni eemaldamist (kui võimalik), võib katsuti uuesti kinni keerata ja lasta sellel enne testimist kuni 12 tundi toatemperatuuril seista, ilma et lahuse aktiivsus väheneks. Väga tähtis! Kasutaja ei tohi kunagi testkasseti fooliumkotikest avada ja kassetti ümbritseva õhuga kokkupuutesse viia enne, kui ta on valmis testkassetti kohe kasutama. Testi jooksutamine 1. Skannige kasutaja tunnusnumber vöötkoodilugejaga või trükkige see klahvistiku abil käsitsi sisse.


MÄRKUS. Kui skannite kogemata vale vöötkoodi, tõstke see väli analüsaatori Sofia klahvistikul olevate noolte abil uuesti esile. Seejärel lihtsalt skannige uuesti õige vöötkood ning eelmine kirjutatakse õige vöötkoodiga üle. 2. Skannige patsiendi tunnusnumber (Patient ID) või tellimuse number (Order #) vöötkoodilugejaga või

trükkige see klahvistiku abil käsitsi sisse.

3. Vajutage Start Test (Alusta testimist) ning analüsaatori Sofia sahtel avaneb automaatselt.


4. Veenduge, et valitud on õige ilmutamisrežiim, WALK AWAY (Käed-vaba) või READ NOW (Loe kohe). Sisestage ette valmistatud testkassett analüsaatori Sofia sahtlisse ja sulgege see.

5. Analüsaator Sofia käivitub automaatselt ning kuvab testi lõpuni

jääva aja, nagu näha allolevas näites. Režiimis WALK AWAY (Käed-vaba) kuvatakse tulemused ekraanile umbes 15 minuti pärast. Režiimis READ NOW (Loe kohe) kuvatakse tulemused ekraanile 1 minuti jooksul. Vt jaotist „Tulemuste tõlgendamine”.

TULEMUSTE TÕLGENDAMINE Kui test on tehtud, kuvatakse tulemused analüsaatori Sofia ekraanile. Kui see suvand on valitud, saab tulemused integreeritud printeri abil automaatselt välja trükkida. Fluorestseeruvaid testjooni ei ole silmaga näha. Analüsaatori Sofia ekraanil kuvatakse teave, kas protseduuri kontroll oli „valid” (kehtiv) või „invalid” (vigane), ning nii A- kui ka B-gripiviiruse positiivne või negatiivne tulemus. Kui protseduuri kontroll on vigane, korrake testi uue patsiendiproovi ja uue kassetiga. Positiivsed tulemused

Näide: ekraanil on näidatud, et testi lõpuni režiimis WALK AWAY (Käed-vaba) on jäänud 12 minutit 13 sekundit. Analüsaator Sofia loeb tulemused ja kuvab need 15 minuti pärast.

Näide: siin on kuvatud kehtiv A-gripiviiruse suhtes positiivne tulemus. MÄRKUS. Positiivne tulemus ei välista koinfektsioone teiste patogeenidega.


Negatiivsed tulemused

Vigased tulemused

Näide: siin on kuvatud kehtiv B-gripiviiruse suhtes positiivne tulemus. MÄRKUS. Positiivne tulemus ei välista koinfektsioone teiste patogeenidega.

Näide: siin on kuvatud kehtiv nii A- kui ka B-gripiviiruse suhtes negatiivne tulemus. MÄRKUS. Negatiivne tulemus ei välista gripiviirusinfektsiooni. Negatiivsed vastused tuleks kinnitada viiruste kasvatamisega kultuuris või A- ja B-gripiviiruse molekulaarse analüüsimeetodiga, mille FDA on heaks kiitnud.

Näide: siin on kuvatud vigane tulemus (Invalid). Vigane tulemus: kui testi tulemus on vigane, tuleb teha uus test uue patsiendiproovi ning uue testkassetiga.

Näide: siin on kuvatud kehtiv nii A- kui ka B-gripiviiruse suhtes positiivne tulemus. MÄRKUS. Positiivne tulemus ei välista koinfektsioone teiste patogeenidega ega näita, millise A-gripiviiruse alamtüübiga on tegemist. MÄRKUS. Koinfektsioon nii A- kui ka B-gripiviirusega esineb väga harva. Sofia Influenza A+B FIA testi topeltpositiivne (nii A- kui ka B-gripiviiruse suhtes positiivne) tulemus tuleks uuesti testida. A- ning B-gripiviiruse suhtes korduvalt topeltpositiivsed proovid tuleks enne tulemuste esitamist üle kontrollida viiruste kasvatamisega kultuuris või A- ja B-


PIIRANGUD Komplekti osad on mõeldud A- ja B-gripiviiruse antigeenide kvalitatiivseks tuvastamiseks ninakaabetest,

ninaneelu kaabetest ning ninaneelu aspiraatidest/loputistest. Test tuvastab nii eluvõimelise kui ka eluvõimetu A- või B-gripiviiruse. Testi toimivus oleneb viiruse

(antigeeni) kogusest proovis ja võib, kuid ei pruugi korreleeruda sama prooviga tehtud viiruse kultuuris kasvatamise tulemustega.

Sofia Influenza A+B FIA testi kliiniline toimivus 22-aastastelt ning vanematelt patsientidelt võetud ninaneelu aspiraatide/loputistega ei ole kindlaks tehtud ja see võib erineda nooremate patsientide puhul kirjeldatud kliinilisest toimivusest.

Negatiivne tulemus võidakse saada ka siis, kui antigeeni tase proovis on allpool tuvastuspiiri või kui proov võeti või transporditi valesti.

Testi protseduurist mitte kinni pidamine võib testi toimivust kahjustada ja/või muuta tulemused kehtetuks. Testi tulemusi peab tõlgendama koos arstile teada oleva muu kliinilise teabega. Positiivne testitulemus ei välista koinfektsioone teiste patogeenidega. Positiivne testitulemus ei näita, millise A-gripiviiruse alamtüübiga on tegemist. Negatiivne testitulemus ei ole mõeldud välistama muud, gripiviirusest erinevat viirus- või bakteriaalset

infektsiooni. Lapsed kalduvad eritama suuremas koguses viirusosakesi ning pikema perioodi vältel. Seega on

täiskasvanute proovide puhul testid sageli väiksema tundlikkusega kui laste proovide puhul. Positiivsed ja negatiivsed eeldatavad väärtused on tugevas seoses levimusega. Valenegatiivsed

testitulemused on tõenäolisemad haiguse leviku tippajal, kui levimus on suur. Valepositiivsed testitulemused on tõenäolisemad gripiviiruse vähese levikuga perioodidel, kui levimus on mõõdukas või väike.

Isikute, kes on saanud nina kaudu manustatavat A-gripiviiruse vaktsiini, proovid võivad olla positiivsed kuni 3 päeva pärast vaktsineerimist.

Monokloonsed antikehad ei pruugi ära tunda või on vähem tundlikud selliste A-gripiviiruste, mille epitoobis on toimunud mõned aminohapete muutused, suhtes.

Konkreetsete A-gripiviiruste alamtüüpide ja tüvede eristamiseks on vajalik täiendav testimine, milleks tuleb konsulteerida riiklike või kohalike tervishoiuasutustega.

Täisverega (> 4 mahuprotsenti) või mutsiiniga (> 0,5 mahuprotsenti) saastunud proovid võivad testi tulemuste tõlgendamist segada. Nähtavalt verega saastunud või liiga limaseid proove ei tohiks kasutada.

Testi toimivust ei ole hinnatud patsientidega, kellel puuduvad hingamisteede infektsiooni sümptomid. OODATAVAD VÄÄRTUSED Üle maailma, nii põhja- kui ka lõunapoolkeral esinevad sesoonsed gripipuhangud, mis põhjustavad igal talvel laia levikuga haigestumist. Keskmine grippi nakatumise määr on 26–33 juhtu 100 inimese kohta aastas. Nakatunud väikelaste ning eakate seas on hospitaliseerimise risk ligikaudu 1 : 300. 30 aasta vältel (aastatel 1976–2006) jäi gripiga seotud põhjustel surnud inimeste hulk USA-s hinnanguliselt umbes 3000–49 000 vahele.2 Üheksakümmend protsenti (90%) surmajuhtumitest puudutavad 65-aastaseid ja vanemaid patsiente.4 Gripipandeemiad on puhkenud aastatel 1918, 1957, 1968 ning 2009. 1918. aasta pandeemia tõi üle maailma kaasa hinnanguliselt 40–50 miljonit surmajuhtumit. 2011. aastal korraldatud Sofia Influenza A+B FIA testi kliinilises uuringus oli võrdlusmeetodi (viiruste kasvatamine kultuuris) abil tuvastatud levimus A-gripiviirusel 15% ning B-gripiviirusel 13%. TOIMIVUSNÄITAJAD Sofia Influenza A+B FIA testi toimivus võrreldes rakukultuuriga Sofia Influenza A+B FIA testi toimivust võrreldi viiruste rakukultuuris kasvatamise meetodiga, millele järgnes proovi testimine fluorestseeruva antikehaga mitmekeskuselise kliinilise uuringu raames, mis toimus USA-s 2011. a veebruarist märtsini. Uuringu tegid tervishoiutöötajad (kokku) seitsmeteistkümnes (17) erinevas


professionaalses või CLIA vabastusega asutuses, mis paiknesid USA erinevates geograafilistes piirkondades. Selles mitmekeskuselises patsientide lähiuuringus koguti kõigilt kahe tuhande kuuekümne kuuelt (2066) patsiendilt kaks (2) ninakaabet või kaks (2) ninaneelu kaabet või ninaneelu aspiraat/loputis. Kuuesaja seitsmekümne ühelt (671) patsiendilt võeti ninakaabete paar, seitsmesaja kolmekümne neljalt (734) ninaneelu kaabete paar ja kuuesaja kuuekümne ühelt (661) ninaneelu aspiraat/loputis. Kõik kliinilised proovid koguti sümptomitega patsientidelt, kellest 74% olid < 6-aastased, 22% 6- kuni 21-aastased, 4% 22- kuni 59-aastased ning 1% ≥ 60-aastased. Viiskümmend kolm protsenti (53%) patsientidest oli meessoost ja nelikümmend seitse protsenti (47%) naissoost. Kliinilise uuringu raames testiti Sofia Influenza A+B FIA testiga kokku kaks tuhat nelikümmend seitse (2047) prospektiivset proovi, mis andsid kehtiva tulemuse. Tulemused on kaasatud tabelitesse 2–6. Vigaste tulemuste osakaal oli 0,9% (19/2066), 95% CI 0,6% kuni 1,4%. Vigased tulemused jäeti tabelitest 2–6 välja, sest uusi proove kordustestimiseks ei võetud. Ühe ninakaape või ninaneelu kaape või osa ninaneelu aspiraadi/loputise koha peal testimise tegi arstikabineti või haigla meditsiinipersonal Sofia Influenza A+B FIA testiga. Kõik proovid olid hiljuti kogutud ja testiti kohe. Allesjääv proov viidi rakukultuuri jaoks viiruste transpordisöötmesse. See, milline kahest nina või ninaneelu kaapeproovist või aspiraatidest/loputistest testiti Sofia Inlfuenza A+B FIA testiga ning milline rakukultuuris, valiti juhuslikult. Viiruste kasvatamine rakukultuuris toimus kas koha peal kliiniku laboris või transporditi proovid üle öö jahedas, külmapakkide peal (mitte külmutatuna) kesklaborisse, kus 48 tunni jooksul kultuuri kasvatati. Tulemused on esitatud tabelites 2–6.

Tabel 2 Sofia Influenza A+B FIA testiga saadud ninakaabete tulemused võrreldes rakukultuuriga

(kõik vanuserühmad) A-GRIPIVIIRUS B-GRIPIVIIRUS

Rakukultuur Tundl. = 124/138 = 90% Rakukultuur Tundl. = 100/112 = 89% Pos Neg (95% CI 84–94%) Pos Neg (95% CI 82–94%)

Sofia pos 124 27 Spets. = 500/527 = 95% Sofia pos 100 23 Spets. = 530/553 = 96% Sofia neg 14 500 (95% CI 93–96%) Sofia neg 12 530 (95% CI 94–97%)

Tabel 3 Sofia Influenza A+B FIA testiga saadud ninaneelu kaabete tulemused võrreldes rakukultuuriga





Tabel 4 Sofia Influenza A+B FIA testiga saadud ninaneelu aspiraatide/loputiste tulemused võrreldes rakukultuuriga




Tabel 5 Testi toimivuse võrdlus rakukultuuriga A-gripiviiruse tuvastamisel kõigist proovitüüpidest vanuserühmade

kaupa Ninakaaped Ninaneelu kaaped Ninaneelu aspiraat/loputis Tundlikkus Spetsiifilisus Tundlikkus Spetsiifilisus Tundlikkus Spetsiifilisus

Kõik vanuse-rühmad

90% (124/138) (95% CI = 84–94%)

95% (500/527) (95% CI = 93–96%)

97% (100/103) (95% CI = 91–99%)

95% (596/630) (95% CI = 93–96%)

99% (68/69) (95% CI = 91–100%)

96% (554/580) (95% CI = 93–97%)

< 6-aastased

95% (62/65) (95% CI = 87–99%)

95% (210/221) (95% CI = 91–97%)

97% (61/63) (95% CI = 89–100%)

94% (444/470) (95% CI = 92–96%)

99% (68/69) (95% CI = 91–100%)

95% (544/570) (95% CI = 93–97%)

6- kuni 21-aastased

87% (46/53) (95% CI = 75–94%)

95% (193/204) (95% CI = 91–97%)

97% (35/36) (95% CI = 85–100%)

94% (136/144) (95% CI = 89–97%) N/A (0/0) 100% (10/10)

(95% CI = 68–100%)

22- kuni 59-

aastased

78% (14/18) (95% CI = 54–92%)

96% (82/85) (95% CI = 90–99%)

100% (4/4) (95% CI = 45–100%)

100% (15/15) (95% CI = 76–100%) N/A (0/0) N/A (0/0)

60-aastased ja vanemad

100% (2/2) (95% CI = 29–100%)

88% (15/17) (95% CI = 64–98%) N/A (0/0) 100% (1/1)

(95% CI = 17–100%) N/A (0/0) N/A (0/0)

Tabel 6

Testi toimivuse võrdlus rakukultuuriga B-gripiviiruse tuvastamisel kõigist proovitüüpidest vanuserühmade kaupa

Ninakaaped Ninaneelu kaaped Ninaneelu aspiraat/loputis Tundlikkus Spetsiifilisus Tundlikkus Spetsiifilisus Tundlikkus Spetsiifilisus

Kõik vanuse-rühmad

89% (100/112) (95% CI = 82–94%)

96% (530/553) (95% CI = 94%–97%)

90% (101/112) (95% CI = 83–95%)

97% (602/621) (95% CI = 95–98%)

88% (46/52) (95% CI = 77–95%)

96% (575/597) (95% CI = 94–98%)

< 6-aastased

90% (35/39) (95% CI = 76–97%)

96% (238/247) (95% CI = 93–98%)

87% (54/62) (95% CI = 76–94%)

97% (455/471) (95% CI = 95–98%)

87% (39/45) (95% CI = 73–94%)

96% (572/594) (95% CI = 94–98%)

6- kuni 21-aastased

92% (56/61) (95% CI = 82–97%)

95% (187/196) (95% CI = 91–98%)

94% (45/48) (95% CI = 83–98%)

98% (130/132) (95% CI = 94–100%)

100% (7/7) (95% CI = 60–100%)

100% (3/3) (95% CI = 38–100%)

22- kuni 59-aastased

73% (8/11) (95% CI = 43–91%)

97% (89/92) (95% CI = 90–99%)

100% (2/2) (95% CI = 29–100%)

94% (16/17) (95% CI = 71–100%) N/A (0/0) N/A (0/0)

60-aastased ja vanemad

100% (1/1) (95% CI = 17–

100%)

89% (16/18) (95% CI = 66–98%) N/A (0/0) 100% (1/1)

(95% CI = 17–100%) N/A (0/0) N/A (0/0)


Sofia Influenza A+B FIA testi toimivus võrreldes rakukultuuriga, kui testitavad proovid olid viiruste transpordisöötmes Sofia Influenza A+B FIA testi toimivust viiruste transpordisöötmes olevate proovidega võrreldi viiruste rakukultuuris kasvatamise meetodiga sama mitmekeskuselise kliinilise uuringu, mis toimus USA-s 2011. a veebruarist märtsini, raames. Uuringu selle osa tegi kolme (3) erineva USA-s paikneva võrdluslabori personal. Uuringus analüüsiti ninakaapeid, ninaneelu kaapeid või ninaneelu aspiraate/loputisi. Kõiki kolme proovitüüpi testiti pärast proovi suspendeerimist viiruste transpordisöötmes ja transportimist vastavasse võrdluslaborisse. Osa igast viiruste transpordisöötmes olevast proovist kasutati analüüsiks Sofia Influenza A+B FIA testiga ning rakukultuuri jaoks kasutati sama proovi ülejäänud osa. Ninakaabe võeti kuuesaja kuuekümne viielt (665) patsiendilt, ninaneelu kaabe kuuesaja üheksakümnelt (690) patsiendilt ja ninaneelu aspiraat/loputis kuuesaja kuuekümne neljalt (664) patsiendilt. Kõik kliinilised proovid koguti sümptomitega patsientidelt, kellest 71% olid < 6-aastased, 22% 6- kuni 21-aastased, 6% 22- kuni 59-aastased ning 1% ≥ 60-aastased. Kokku analüüsiti tuhat üheksasada üheksakümmend üks (1991) proovi. Teatud ravialustega saadud tulemused jäeti välja. Tulemused on esitatud tabelites 7-9. Vigaste tulemuste osakaal oli 1,4% (28/2019), 95% CI 1,0% kuni 2,0%. Vigased tulemused jäeti tabelitest 7–9 välja, sest uusi proove kordustestimiseks ei võetud.

Tabel 7 Sofia Influenza A+B FIA testiga saadud viiruste transpordisöötmes olevate ninakaabete tulemused võrreldes

rakukultuuriga (kõik vanuserühmad)

A-GRIPIVIIRUS B-GRIPIVIIRUS



Tabel 8 Sofia Influenza A+B FIA testiga saadud viiruste transpordisöötmes olevate ninaneelu kaabete tulemused

võrreldes rakukultuuriga (kõik vanuserühmad)



Sofia pos 94 12 Spets. = 573/585 = 98% Sofia pos 88 6 Spets. = 575/581 = 99%

Sofia neg 9 573 (95% CI 96–99%) Sofia neg 19 575 (95% CI 98% kuni > 99%)


Tabel 9 Sofia Influenza A+B FIA testiga saadud viiruste transpordisöötmes olevate ninaneelu aspiraatide/loputiste

tulemused võrreldes rakukultuuriga (kõik vanuserühmad)


Rakukultuur Tundl. = 66/68 = 97% Rakukultuur Tundl. = 43/51 = 84%

Pos Neg (95% CI 89% kuni > 99%) Pos Neg (95% CI 72–92%)

Sofia pos 66 17 Spets. = 553/570 = 97% Sofia pos 43 20 Spets. = 567/587 = 97%

Sofia neg 2 553 (95% CI 95–98%) Sofia neg 8 567 (95% CI 95–98%)

Korratavuse uuringud Sofia Influenza A+B testi tulemuste korratavust mõõdeti kolmes erinevas laborist, millest üks oli Quidel. Iga labori kaks erinevat töötajat testisid kodeeritud, kunstlike, negatiivsesse kliinilisse maatriksisse valmistatud proovide seeriat, mis olid A- ja B-gripiviiruse suhtes negatiivsed kuni mõõdukalt positiivsed. Testimine toimus 5 erineval päeval, mis hajutati umbes kahe nädala pikkuse perioodi peale. Laboritevaheline andmete kokkulangevus (tabel 10) negatiivsete proovide puhul oli 94–100% ja positiivsete proovide puhul 98–100%. Laborisisene andmete kokkulangevus (tabel 11) oli kõigi proovide puhul 98–99%.

Tabel 10 Laboritevaheline kokkulangevus Sofia Influenza A+B FIA testi tulemuste korratavuse uuringus

Labor Neg

(viirus puudub)

Väikese A-gripiviiruse sisaldusega neg proov

(C5)

Väikese A-gripiviiruse sisaldusega pos proov

(C95)

Mõõduka A-gripiviiruse sisaldusega pos proov

(C3×)

Väikese B-gripiviiruse sisaldusega neg proov

(C5)

Väikese B-gripiviiruse sisaldusega pos proov

(C95)

Mõõduka B-

gripiviiruse sisaldusega pos proov

(C3×)

1 30/30 29/30 30/30 30/30 28/30 29/30 30/30

2 30/30 29/30 30/30 30/30 30/30 29/30 30/30

3 30/30 30/30 30/30 30/30 27/30 30/30 30/30

Kokku 90/90 88/90 90/90 90/90 85/90 88/90 90/90

Üldine kokkulangevus

oodatavate tulemustega

(%)* (95% CI)

100% (95–100%)

98% (92–100%)

100% (95–100%)

100% (95–100%)

94% (87–98%)

98% (92–100%)

100% (95–100%)


Tabel 11 Laboritesisene kokkulangevus Sofia Influenza A+B FIA testi tulemuste korratavuse uuringus

Labor Neg

(viirus puudub)

Väikese A-gripiviiruse

sisaldu-sega neg

proov (C5)

Väikese A-gripiviiruse sisaldusega pos proov

(C95)

Mõõduka A-


(C3×)

Väikese B-gripiviiruse

sisaldu-sega neg

proov (C5)

Väikese B-gripiviiruse sisaldusega pos proov

(C95)

Mõõduka B-


(C3×)

Üldine kokkulangevus

oodatavate tulemustega

(%)* (95% CI)

1 30/30 29/30 30/30 30/30 28/30 29/30 30/30 98%

(206/210) (95–99%)

2 30/30 29/30 30/30 30/30 30/30 29/30 30/30 99%

(208/210) (96–100%)

3 30/30 30/30 30/30 30/30 27/30 30/30 30/30 99%

(207/210) (96–100%)

Tuvastuspiir Sofia Influenza A+B FIA testi tuvastuspiiri (LOD, ingl limit of detection) määramiseks kasutati kokku seitset (7) inimese gripiviiruse tüve – kaht (2) A-gripiviiruse ja kaht (2) B-gripiviiruse tüve söötmeta proovideks ning kaht (2) A-gripiviiruse ning kaht (2) B-gripiviiruse tüve viiruste transpordisöötmes elueeritud proovideks (tabel 12).

Tabel 12

Tuvastuspiir inimese A- ja B-gripiviiruse isolaatidega

Viiruse tüvi Viiruse

tüüp Alamtüüp Madalaim tuvastatav tase (TCID50/ml)

A/California/07/2009 A 2009 H1N1 202

A / Hong Kong / 8 / 68 A H3N2 105

B/Allen/45 B 40

B/Malaysia/2506/04 B 24

Transpordisöötmes olevad proovid


tüüp Alamtüüp Madalaim tuvastatav tase

(TCID50/ml)

A / New Jersey / 8 / 76 A H1N1 M5 2460

UTM 1645

A / Port Chalmers / 1 / 73 A H3N2

M5 1482

UTM 1446

B/Allen/45 B M5 5

UTM 4,6

B/Florida/07/2004 B M5 40

UTM 35

TCID50 määrati Reedi-Muenchi meetodiga või Rowe ELISA-ga.


Analüütiline reaktiivsus Analüütilise reaktiivsuse demonstreerimiseks kasutati kokku 30 inimese gripiviiruse tüve, mille hulka kuulus 21 A-gripiviiruse ning 9 B-gripiviiruse tüve (tabel 13).

Tabel 13 Analüütiline reaktiivsus inimese A- ja B-gripiviiruse isolaatidega


tüüp Alamtüüp

Madalaim tuvastatav

tase (TCID50/ml) Viiruse tüvi

Viiruse tüüp Alamtüüp

Madalaim tuvastatav

tase (TCID50/ml)

A / Fort Monmouth / 1 / 47 A H1N1 50 A/Wisconsin/67/05 A H3N2 20 A / New Caledonia / 20 / 1999 A H1N1 200 A2/Aichi/2/68 A H3N2 1,25 A / New Jersey / 8 / 76 A H1N1 500 A/Anhui/01/2005 A H5N1 5 A/NWS/33 A H1N1 0,63 A/GWT/LA/169GW/88 A H10N7 20 A / Puerto Rico / 8 / 34 A H1N1 100 A/Shearwater/

Australia/2576/79 A H15N9 10

A / Solomon Islands / 3 / 06 A H1N1 0,31 A/Taiwan/42/06 A H1N1 200 B/Brisbane/60/2008 B 10 A/WI/629-9/2008 A H1N1 200 B/Florida/04/2006 B 250 A1/Denver/1/57 A H1N1 20 B/Florida/07/2004 B 500 Influenza/Mexico/4108/2009 A 2009 H1N1 200 B/GL/1739/54 B 2000 A/WI/629(D02312)/2009 A 2009 H1N1 50 B / Hong Kong / 5 / 72 B 20 A/WI/629(D02473)/2009 A 2009 H1N1 25 B/Lee/40 B 5 A / Port Chalmers / 1 / 73 A H3N2 1000 B/Maryland/1/59 B 50 A/Victoria/3/75 A H3N2 200 B/Ohio/1/2005 B 50 A/WI/629-2/2008 A H3N2 20 B/Taiwan/2/62 B 50


tüüp Alamtüüp

Madalaim tuvastatav

tase (EID50/ml)

A/Anhui/1/2013* A H7N9 3,95 × 106

TCID50/ml – 50% koekultuuri nakatav annus. EID50/ml – 50% muna nakatav annus. TCID50 ja EID50 määrati Reedi-Muenchi meetodiga. *Kuigi on näidatud, et testiga võib tuvastada inimese positiivsest respiratoorsest proovist kasvatatud H7N9-viiruse, ei ole seadme toimivusnäitajaid H7N9 suhtes positiivsete kliiniliste proovidega kindlaks tehtud. Sofia Influenza A+B FIA testiga saab A- ja B-gripiviirust eri s tada, kuid gripiviiruse a lamtüüpe mitte.

Lisaks hinnati analüütilist reaktiivsust kokku 12 lindudelt isoleeritud A-gripiviiruse abil. Sofia Influenza A+B FIA testiga tuvastati kõik uuritud tüved (tabel 14).


Tabel 14 Analüütiline reaktiivsus lindude A-gripiviiruse erinevate isolaatidega

Viiruse tüvi* Viiruse tüüp Alamtüüp

Madalaim tuvastatav

tase (TCID50/ml)

A/Mallard/NY6750/78 A H2N2 100 A/Mallard/OH/338/86 A H4N8 50 A/Mallard/WI/34/75 A H5N2 100 A/Chicken/CA/431/00 A H6N2 50 A/Chicken/NJ/15086-3/94 A H7N3 5 A / Blue Winged Teal / LA / B174 / 86 A H8N4 10 A/Chicken/NJ/122210/97 A H9N2 10 A/Chicken/NJ/15906-9/96 A H11N9 50 A/Duck/LA/188D/87 A H12N5 50 A/Gull/MD/704/77 A H13N6 0,625 A/Mallard/GurjevRussia/262/82 A H14N5 20 A/Shorebird/DE/172/2006 A H16N3 2

*Inimpatogeenidena es inevate A-gripiviiruse a lamtüüpide suhtes pole toimivusnäitajad kindlaks tehtud.

Analüütiline spetsiifilisus Ristreaktiivsus Sofia Influenza A+B FIA testi hinnati 18 bakteri- ja seenetüve ning 16 mitte-gripiviiruse isolaadi abil. Bakteri- ja seeneisolaatide kontsentratsioon oli 2 × 106 PMÜ/ml. Viirusisolaatide kontsentratsioon oli 2 × 105 TCID50/ml. Ühegi tabelis 15 loetletud organismi ega mitte-gripiviirusega ristreaktiivsust ei ilmnenud. Samuti ei ilmnenud mõju proovi voolamisele ega kontrolljoone tekkimisele.


Tabel 15 Analüütiline spetsiifilisus ja ristreaktiivsus

Organism / gripist erinev viirus Kontsentratsioon* A-gripiviiruse

tulemus B-gripiviiruse

tulemus Bordetella pertussis 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Candida albicans 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Chlamydia trachomatis 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Corynebacterium diphtheriae 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Escherichia coli 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Haemophilus influenzae 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Lactobacillus plantarum 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Legionella pneumophila 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Moraxella catarrhalis 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Mycobacterium tuberculosis (avirulentne) 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Mycoplasma pneumoniae 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Neisseria meningitidis 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Neisseria subflava 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Pseudomonas aeruginosa 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Staphylococcus epidermidis 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Streptococcus pneumoniae 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Streptococcus pyogenes 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Streptococcus salivarius 2 × 106 PMÜ/ml Negatiivne Negatiivne

Adenoviirus, tüüp 1 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Adenoviirus, tüüp 7 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Inimese koronaviirus (OC43) 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Inimese koronaviirus (229E) 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Inimese Coxsackie-viirus 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Tsütomegaloviirus 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Epsteini-Barri vi irus 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Inimese paragripiviirus, tüüp 1 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne



Leetriviirus 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Inimese metapneumoviirus 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Mumpsiviirus 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Respiratoor-süntsütiaalne viirus, tüüp A 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Respiratoor-süntsütiaalne viirus, tüüp B 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

Rinoviirus, tüüp 1B 2 × 105 TCID50/ml Negatiivne Negatiivne

*Bakterite arvukuse määramiseks kasutati piirlahjenduste, bakterikultuuri ja kolooniate loendamise meetodit, et saada arvukus ühikutes PMÜ/ml. Viiruste kontsentratsioonid määrati Reedi-Muenchi s trandardse vi roloogiameetodiga.


Segavad ained Katsete tulemusena selgus, et täisveri, mutsiin ja mitmed käsimüügitooted ning levinud kemikaalid ei sega katsetatud kontsentratsioonides (tabel 16) Sofia Influenza A+B FIA testi toimimist.

Tabel 16 Mittesegavad ained

Aine Kontsentratsioon Täisveri 4% Mutsiin 0,5% Ricola (mentool) 1,5 mg/ml Sucrets (dükloniin/mentool) 1,5 mg/ml Chloraseptic (mentool/bensokaiin) 1,5 mg/ml Naso GEL (NeilMed) 5 mahuprotsenti CVS-i ninatilgad (fenüülefriin) 15 mahuprotsenti Afrin (oksümetasoliin) 15 mahuprotsenti CVS-i ninapihus (kromolüün) 15 mahuprotsenti Ninageel (oksümetasoliin) 10 mahuprotsenti Zicam 5 mahuprotsenti Homöopaatikum (Alkalol) 1 : 10 lahjendus Fisherman’s Friend 1,5 mg/ml Fenoolpihus valusale kurgule 15 mahuprotsenti Tobramütsiin 4 μg/ml Mupirotsiin 10 mg/ml Flutikasoonpropionaat 5 mahuprotsenti Tamiflu (oseltamiviirfosfaat) 5 mg/ml

CLIA vabastuse uuringud Eespool jaotises „Toimivusnäitajad” kirjeldatud suurema prospektiivse uuringu raames võrreldi Sofia Influenza A+B FIA testi, kui seda kasutasid väljaõppeta kasutajad, täpsust viiruste kasvatamisega rakukultuuris. Uuring tehti üheteistkümnes (11) CLIA vabastusega laboris kolmekümne nelja (34) väljaõppeta kasutajaga, mis on CLIA vabastusega asutuse tavapärane näide. Uuring hõlmas 1973 ravialust: viiesaja kaheksakümne viielt (585) võeti ninakaabete paar, seitsmesaja kahekümne seitsmelt (727) ninaneelu kaabete paar ja kuuesaja kuuekümne ühelt (661) ninaneelu aspiraat/loputis. Seitseteist (17) ravialust jäeti uuringust välja, kuna Sofia Influenza A+B FIA testiga saadi vigane tulemus. Vigaste tulemuste osakaal oli 0,9% (17/1973), 95% CI 0,5% kuni 1,4%. Kokku 1956 kliinilist proovi andis Sofia Influenza A+B FIA testiga testimisel kehtiva tulemuse. Need on esitatud tabelites 17 ning 18. Sofia Influenza A+B FIA testi kliiniline tundlikkus ja spetsiifilisus võrrelduna viiruste kasvatamisega kultuuris (võrdlusmeetod) on näidatud allolevates tabelites 17 ning 18.


Tabel 17 Sofia Influenza A+B FIA test võrreldes rakukultuuriga (nina-/ninaneelukaaped)



Pos Neg (95% CI 89–96%) Pos Neg (95% CI 85–93%)


Tabel 18 Sofia Influenza A+B FIA test võrreldes rakukultuuriga (ninaneelu aspiraadid/loputised)



Pos Neg (95% CI 91–100%) Pos Neg (95% CI 77–95%)


Näitamaks, et väljaõppeta ettenähtud kasutajad suudavad nõrga reaktiivsusega proovi puhul testi järjepidevalt ja täpselt sooritada, tehti veel kaks uuringut. Kumbki uuring hõlmas kolme (3) erinevat CLIA vabastusega laborit, kus Sofia Influenza A+B FIA testi toimivust hinnati kodeeritud, juhuslikustatud kunstlike proovide paneeliga, millesse kuulus üks (1) A- ja B-gripiviiruse suhtes nõrgalt positiivne proov (C95 – analüüsimeetodi läviväärtusel olev analüüdi kontsentratsioon) ning üks (1) nõrgalt negatiivne proov (C5 – analüüsimeetodi läviväärtusest pisut allpool olev analüüdi kontsentratsioon). Igas laboris testisid kaks (2) või enam töötajat (kokku 15 töötajat) paneeli kümnel (10) erineval päeval, mis hajutati umbes kahe (2) nädala peale. Uuringus A analüüsiti kaapeproove, testi toimivuse andmed on toodud tabelis 19. Uuringus B analüüsiti vedelaid proove. Uuringus B anti väljaõppeta kasutajatele kunstlikud proovid, mis hõlmasid nii vedelaid kui kaapeproove. Uuringu B eesmärk oli näidata, et kasutaja suudab proovi tüübi jaoks õige protseduuri valida. Tabelis 20 on näidatud uuringus B vedelate proovidega saadud andmed.

Tabel 19 Sofia Influenza A+B FIA testi toimivus läviväärtuse lähedal – uuring A

Analüüdi sisaldus proovis

Väljaõppeta ettenähtud kasutajad

Kokkulangevusprotsent oodatavate

tulemustega* 95% usaldusvahemik

Väikese A-gripiviiruse sisaldusega

negatiivne proov (C5)

87% (52/60) 76–93%


positiivne proov (C95)

92% (55/60) 82–97%


Väikese B-gripiviiruse sisaldusega


87% (52/60) 76–93%



92% (55/60) 82–97%

*Nõrgalt positiivse proovi oodatav tulemus on „positiivne”, nõrgalt negatiivse proovi oodatav tulemus on „negatiivne”.

Tabel 20

Sofia Influenza A+B FIA testi toimivus läviväärtuse lähedal – uuring B

Analüüdi sisaldus proovis

Väljaõppeta ettenähtud kasutajad

Kokkulangevusprotsent oodatavate

tulemustega* 95% usaldusvahemik



95% (57/60) 86–99%



97% (58/60) 88 kuni > 99%



80% (48/60) 68–88%



97% (58/60) 88 kuni > 99%

*Nõrgalt positiivse proovi oodatav tulemus on „positiivne”, nõrgalt negatiivse proovi oodatav tulemus on „negatiivne”.

CLIA vabastuse toetamiseks tehti sõltumatus laboris veel üks uuring, et demonstreerida Sofia Influenza A+B FIA testi reaktiivsust suure hulga A- ja B-gripiviiruste kaasaegsete tüvedega. Kõigi nõuetekohases kontsentratsioonis paneeli kaasatud A-gripiviiruste (18) ning B-gripiviiruste (7) puhul saadi Sofia Influenza A+B testiga positiivne tulemus. Riskianalüüsi eeskujul tehti ka analüütilise paindlikkuse uuring. Uuringutest ilmnes, et test ei ole tundlik ebasoodsatele keskkonnatingimustele ega kasutaja võimalikele vigadele.


KLIENDITUGI Kui teil on küsimusi toote kasutamise kohta või tahate teada anda testisüsteemiga seotud probleemist, võtke ühendust Quideli tehnilise toega numbril 800 874 1517 (USA-s) või 858 552 1100, E–R, 7.00–17.00 Vaikse ookeani aja järgi. Väljaspool USA-d võtke ühendust edasimüüjaga või kirjutage e-posti aadressil [email protected]. Testisüsteemiga seotud probleemidest võib teada anda ka FDA-le meditsiinitoodete teavitusprogrammi MedWatch raames (tel: 800.FDA.1088; faks: 800.FDA.0178; http://www.fda.gov/medwatch). VIITED 1. Murphy B.R. and Webster R.G., 1996, Orthomyxoviruses, pp. 1397-1445. In: Fields Virology, 3rd edition,

B.N. Fields, D.M. Knipe, P.M. Howley, et al. (eds.), Lippincott-Raven, Philadelphia. 2. CDC, Key Facts About Seasonal Influenza. www.cdc.gov/flu/keyfacts.htm accessed 7/2011. 3. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, 5th Edition. U.S. Department of Health and

Human Services, CDC, NIH, Washington, DC (2007). 4. Bartlett J. Management of Respiratory Tract Infections. 2nd Ed, 1999: 149-169.

20218 – Sofia Influenza A+B FIA – 25 Test 20254 – Sofia Influenza A+B FIA – 25 Test

Quidel Corporation 10165 McKellar Court San Diego, CA 92121 USA quidel.com

MDSS GmBH Schiffgraben 41 30175 Hannover, Saksamaa

Tampoon

MDD 93/42/EEC

Puritan Medical Products Company LLC 31 School Street Guilford, Maine 04443-0149

Emergo Europe Haag Holland

1219186EE00 (06/16)


Documents

KASUTAMISEKS AINULT KOOS ANALÜSAATORIGA SOFIA puhul ... · voolamine testis toimus õigesti ning säilis testkasseti funktsionaalne terviklikkus. Analüsaator Sofia tõlgendab protseduuri