ANALISIS LIPID

Kelompok 1Florensia Indan Stepani (0806321575 )Nurhafizah Putri (0806460540) Pauline Leon Artha(0806460553)Prima Anggreni(0806460566)

Pokok PembahasanLipidJenis Uji pada LipidAnalisis KualitatifAnalisis Kuantitatif

Apa itu Lipid?Lipid merupakan senyawa organik berminyak atau berlemak yang tidak larut dalam air, yang dapat diekstrak dari sel dan jaringan oleh pelarut nonpolar, seperti kloroform, benzol atau eter.Lipid disimpan didalam tubuh dalam bentuk trigliserida

Struktur molekulnya kaya akan rantai unsur karbon(-CH2-CH2-CH2-)sehingga lemak mempunyai sifat hydrophob.

Fungsi LipidPenyimpan energiTransportasi metabolik sumber energiSumber zat untuk sintese bagi hormon, kelenjar empedu serta menunjang proses pemberian signal signal transducingStruktur dasar atau komponen utama membran semua jenis sel.Pelindung organ tubuh dan Alat angkut vitamin larut lemakPembentukan sel dan Sumber asam lemak esensial

Klasifikasi Lipid berdasarkan kelas dari lemak

Lipid berdasarkan StrukturLipiddengan rantai hidrokarbon terbuka.asam lemak, TAG, spingolipid, fosfoasilgliserol, glikolipidLipiddengan rantai hidorkarbon siklissteroid (kolesterol)

MenurutBloor, lipid dapat diklasifikasikan sebagai berikut :Lipid sederhana :lemak netral (monogliserida, digliserida, trigliserida),ester asam lemak dengan alkohol berberat molekul tinggiLipid majemuk (kompleks)Fosfolipid : Fosfolipid + H2Omenghasilkanasam lemak + alkohol + asam fosfat + senyawa nitrogen.Glikolipid : Glikolipid + H2Omenghasilkanasam lemak + karbohidrat + sfingosin.

Lipid turunan: senyawa-senyawa yang dihasilkan bila lipid sederhana dan lipid kompleks mengalami hidrolisis. asam lemak, sterol (kolesterol, ergosterol,dsb), alkohol padat, aldehid, keton bodies.

ASAM LEMAKAsam lemak merupakan penyusun utama minyak nabati atau lemak dan merupakan bahan baku untuk semua lipida pada makhluk hidup.

Asam lemak tidak lain adalahasam alkanoatatauasam karboksilatberderajat tinggi (rantai C lebih dari 6).

Asam lemak merupakan penyusun utama lipid (dalam 100 gram lipid terdapat 95% asam lemak)Struktur umum asam lemak: Kepala : hidrofobik Ekor : hidrofilikSehingga asam lemak dikatakan mempunyai sifat amfipatik

TRIGLISERIDA (Lemak Netral) Trigliserida merupakan suatu ester gliserol yang terbentuk dari 3 asam lemak dan gliserol (R, R', R"). Apabila terdapat satu asam lemak dalam ikatan dengan gliserol maka dinamakan monogliserida Fungsi utama Trigliserida adalah sebagai zat energi. Lemak disimpan di dalam tubuh dalam bentuk trigliserida.

.

Apabila sel membutuhkan energi, enzim lipase dalam sel lemak akan memecah trigliserida menjadi gliserol dan asam lemak serta melepasnya ke dalam pembuluh darah. Oleh sel-sel yang membutuhkan komponen-komponen tersebut kemudian dibakar dan menghasilkan energi, karbondioksida (CO2), dan air (H2O).

Lanjutan TrigliseridaLemak disimpan di dalam tubuh dalam bentuk trigliserida. Apabila sel membutuhkan energi, enzim lipase dalam sel lemak akan memecah trigliserida menjadi gliserol dan asam lemak serta melepasnya ke dalam pembuluh darah. Oleh sel-sel yang membutuhkan komponen-komponen tersebut kemudian dibakar dan menghasilkan energi, karbondioksida (CO2), dan air (H2O).

FOSFOLIPIDFosfolipidmerupakan golongan senyawalipid dan merupakan bagian dari membran sel makhluk hidup bersama denganprotein, glikolipid, dan gliserol.Fosfolipid terdiri atas empat komponen:Asam lemakGugusfosfatAlkohol yang mengandung nitrogen, danSuatu kerangka ( gliserol dan 2 gugus asil)

Fungsi Fosfolipid yaitu bahan penyusunmembran sel , sebagaisurfaktan paru-paru yang mencegah perlekatan dindingalveoliparu-paru sewaktuekspirasi

Kelompok molekul polar, di perlihatkan dengan warna merah. Udindikasi mengandung bagian molekulhidrofobik, di perlihatkan dengan warna biru.

SFINGOLIPIDSfingolipiddapat ditemukan di hampir seluruh jaringan manusia. Konzentrasinya yang tertinggi walaupun demikian terdapat di jaringan sarafsistem saraf pusat, khususnya dizat putihdiotak. Fungsi Sfingolipid yaitu komponen utama dari [membran myelin] dari sel saraf

2. Jenis Uji pada LIPIDTujuan :Mengetahui sifat yang terdapat pada lipid ( kelarutan, kepolaran, kejenuhan lipid dan ketengikan lipid)

Analisis lipid mempunyai 2 metode, yaitu :Analisis KualitatifAnalisis Kuantitatif

Analisis KualitatifAnalisis kualitatif merupakan analisis kimia ada/tidaknya komponen radikal, ion kation/molekul Analisis kualitatif lipid, dilakukan dengan 4 cara, yaitu :Uji kelarutan lipidUji AkroleinUji ketidakjenuhan lipidUji ketengikan

Uji kelarutan LIPIDTujuan Pengujian kepolaran LIPID

Parameter Lipid bersifat polar ( larut dalam air dan alkohol )Lipid bersifat nonpolar ( larut dalam kloroform dan eter )

Uji Kelarutan LIPID

Hampir semua minyak dan lemak larut pada pelarut nonpolar ( kloroform dan eter )

Uji AkroleinTujuan : Menentukan keberadaan gliserin/lemakParameternya :Bau akrolein ( seperti abu alkohol )

Uji Akrolein

Uji Ketidakjenuhan LIPIDParameter pengujian Adanya reaksi positif ( berupa timbulnya warna merah saat ditetesi ion Hubs )Asam lemak tidak jenuh adanya timbul warna merah yang semakin lama pudar.Asam lemak jenuh timbul warna merah tetapi tidak pudar

Uji ketidakjenuhan LIPIDKeterangan :( - ) TIDAK JENUH( + ) JENUH

SAMPELHASILKETERANGANMinyak kelapa+Warna merahAsam oleat-Warna merah pudar Mentega +Warna merahAsam palmitat+Warna merahMargarin +Warna merahLemak hewan+Warna merahMinyak tengik +Warna merah

Rantai HidrokarbonAsam Lemak JenuhAsam Lemak Tidak Jenuh

Asam Oleat ( struktur kimia )

Uji Ketengikan LIPIDTujuan Mengetahui oksidasi lipid

Parameter Larutan putih = tidak tengikLarutan merah muda = tengik

Uji Ketengikan Lipid

Tengiknya suatu larutan karena golongan trigliserida banyak teroksidasi oleh oksigen dalam udara bebas.

KROMATOGRAFI LIPIDUntuk mengetahui fungsi lipid pd proses biologis diperlukan mengetahui lipid apa saja yang ada.Karena lipid tidak larut dalam air ekstraksi lipiddari jaringan menggunakan pelarut organikSecara umum, campuran komplek lipid dipisahkan berdasarkan perbedaan polaritas atau kelarutannya pada pelarut non polar

Lipid netral TAG, lilin, pigmen mudah diektraksi dari jaringan dengan : etil eter, kloroform, atau benzenaMembrane lipid lebih mudah diekstrak denganpelarut yang lebih polar etanol atau metanol

Tujuan: Mengurangi interaksi hidrofobik rantai hidrokarbonMelemahkan ikatan hidrogen dan interaksi elektrostatik yang mengikat lipid dengan protein membran

Campuran pelarut yang biasa digunakan :klorofom : metanol : air = 1:2:0.8menghasilkan single phaseUntuk mengekstrak semua lipid ditambahkan airMenghasilkan 2 fase : metanol/air dan kloroform

SKEMA ADSORPSI KROMATOGRAFI

Campuran lipid dapat difraksinasi lebih lanjut kromatografi berdasarkan perbedaan polaritassetiap kelas lipid Adsorbsi kromatografidigunakan material polartidak larut silika gel yang dipak pada kolomgelas yang panjang dan tipis campuran lipid dlmpelarut kloroform dituangkan dr ataslipid yang lebih polar akan terikat kuat padamaterial sedangkan lipid yang netral langsungkeluar. Lipid yang polar dikeluarkan dengan caramencuci material tsbt dgn solvent yang lebih polar. aseton metanol

Kromatografi Lapisan Tipis (TLC)Digunakan untuk memisahkan komponen-komponen atas dasar perbedaan perbedaan adsorpsi atau partisi oleh fase diam di bawah gerakan pelarut pengembang.

Aplikasi Kromatigrafi Lapisan TipisMonoacyglycerolsDiacyglycerolsTriacyglycerolsKolesterolAsam lemak bebasEster kolesterolFosfolipid

Kromatografi Eksklusi (SEC)Digunakan untuk memisahkan produk hidrolitik, oksidasi dan pemanasan lemak

Kromatografi Cairan (HPLC)HPLC digunakan untuk memisahkan lipida non-volatil yang memiliki berat molekul tinggi.

Adsorpsi KromatografiAdsorpsi kromatografi adalah teknik kromatografi tertua dioperasikan berdasarkan retensi terlarut pada permukaan adsorben. Adsorben-adsorben yang umum digunakan adalah silika gel dan alumina karena mereka dimiliki daerah yang besar permukaan dan banyak situs aktif. Zat terlarut dan pelarut dalam cairan cairan dapat bersaing satu sama lain untuk mendapatkan situs yang aktif.

Terima Kasih

Salam Hormat Florensia Indan Stepani Nurhafizah Putri Pauline Leon Artha Prima Anggraini

*************************************