KIMIA BAHAN HAYATI LAUTANALISIS ISU JURNAL AKTIVITAS EKSTRAK METANOL RUMPUT LAUT SARGASSUM CRASSIFOLIUM SEBAGAI IMUNOMODULATOR PADA UDANG WINDU (PENAEUS MONODON)

APA ITU IMUNOMODULATOR ?IMUNOMODULATOR ADALAH SENYAWA TERTENTU YANG DAPAT MENINGKATKAN MEKANISME PERTAHANAN TUBUH, YAITU DENGAN CARA MEMPERBAIKI FUNGSI SISTEM IMUN TUBUH DENGAN MENGGUNAKAN BAHAN YANG MERANGSANG ATAU MENINGKATKAN KERJA SISTEM TERSEBUT.

JENIS IMUNOMODULATORTERDAPAT 2 JENIS IMUNOMODULATOR YAITU IMUNOMODULATOR SINTESIS DAN IMUNOMODULATOR ALAMI. A. IMUNOMODULATOR SINTESIS SEPERTI ISOPRINOSIN, LEVAMISOL, VAKSIN BCG . PENGGUNAAN IMUNOMODULATOR SINTETIK INI MEMPUNYAI BEBERAPA KEKURANGAN SEPERTI MENGAKIBATKAN REAKSI ALERGI DAN HIPERSENSITIVITAS. B. IMUNOMODULATOR ALAMI LEBIH AMAN DIGUNAKAN KARENA EFEK SAMPING DARINYA JUGA LEBIH RINGAN DIBANDING DENGAN IMUNOMODULATOR SINTETIK.

PERSYARATAN IMUNOMODULATORMENURUT WHO, IMUNOMODULATOR HARUSLAH MEMENUHI PERSYARATAN BERIKUT:1. SECARA KIMIAWI MURNI ATAU DAPAT DIDEFINISIKAN SECARA KIMIA.2. SECARA BIOLOGIK DAPAT DIURAIKAN DENGAN CEPAT.3. TIDAK BERSIFAT KANSEROGENIK ATAU KO-KANSEROGENIK.4. BAIK SECARA AKUT MAUPUN KRONIS TIDAK TOKSIK DAN TIDAK MEMPUNYAI EFEK SAMPING FARMAKOLOGIK YANG MERUGIKAN.5. TIDAK MENYEBABKAN STIMULASI YANG TERLALU KECIL ATAUPUN TERLALU BESAR.

PENYAKIT YANG DAPAT MENYERANG UDANG WINDU ?VIBRIOSIS MERUPAKAN SUATU PENYAKIT PADA ORGANISME AIR YANG DISEBABKAN OLEH KELOMPOK BAKTERI VIBRIO SP. YANG BANYAK TERDISTRIBUSI DI AIR BERSIH, AIR TERPOLUSI, AIR LAUT KECUALI YANG SALINITASNYA TINGGI, MIKROFLORA DALAM USUS, GINJAL DAN DARAH IKAN. GENUS VIBRIO MERUPAKAN AGEN PENYEBAB PENYAKIT VIBRIOSIS YANG MENYERANG HEWAN LAUT SEPERTI IKAN, UDANG, DAN KERANG-KERANGAN. SPESIES VIBRIO YANG BERPENDAR UMUMNYA MENYERANG LARVA UDANG DAN PENYAKITNYA DISEBUT PENYAKIT UDANG BERPENDAR.

VIBRIO SP.MERUPAKAN BAKTERI GRAM NEGATIF BERBENTUK BATANG PANJANG ATAU LENGKUNG, BERUKURAN 0,5-2,0 MIKRO METER, DAPAT BERGERAK KARENA MEMPUNYAI 2-3 FLAGELA POLAR PADA SPESIES TERTENTU. STRAIN VIRULEN BIASANYA MENYEBABKAN WABAH PENYAKIT YANG BERHUBUNGAN DENGAN PERUBAHAN LINGKUNGAN, STRES, PERUBAHAN SUHU YANG MENDADAK, PENANGANAN YANG KASAR, PENURUNAN OKSIGEN, UMUR ORGANISME, SUHU TINGGI, KANDUNGAN OKSIGEN YANG RENDAH DAN KEPADATAN POPULASI (ALBERT ET AL. 1993).

MEKANISME PEMBENTUKAN VIBRIOSISBAKTERI VIBRIO MENYERANG LARVA UDANG SECARA SEKUNDER YAITU PADA SAAT DALAM KEADAAN STRESS DAN LEMAH (OPPORTUNISTIC PATHOGEN). PEMBERIAN PAKAN YANG TIDAK TERKONTROL MENGAKIBATKAN AKUMULASI LIMBAH ORGANIK DI DASAR TAMBAK SEHINGGA MENYEBABKAN TERBENTUKNYA LAPISAN ANAEROB YANG MENGHASILKAN H2S. AKIBAT AKUMULASI H 2S TERSEBUT MAKA BAKTERI PATOGEN OPORTUNISTIK, JAMUR, PARASIT, DAN VIRUS MUDAH BERKEMBANG DAN MEMUNGKINKAN TIMBULNYA PENYAKIT PADA UDANG. CIRI-CIRI UDANG YANG TERSERANG VIBRIOSIS ANTARA LAIN KONDISI TUBUH LEMAH, BERENANG LAMBAT, NAFSU MAKAN HILANG, BADAN MEMPUNYAI BERCAK MERAH-MERAH, PADA PLEOPOD DAN ABDOMINAL SERTA PADA MALAM HARI TERLIHAT MENYALA. UDANG YANG TERKENA VIBRIOSIS AKAN MENUNJUKKAN GEJALA NEKROSIS (ROZI 2008).

Sistem Imunitas UdangUdang memiliki suatu respon imunitas yang merupakan upaya proteksi terhadap infeksi penyakit. Sistem imunitas udang dapat bekerja baik spesifik maupun nonspesifik (Alifuddin 2002). Udang mempunyai daya tahan alami yang bersifat non spesifik terhadap organisme patogen berupa pertahanan fisik (mekanik), kimia, seluler dan humoral. Daya tahan alami ini dipengaruhi oleh faktor genetik dan lingkungan, sehingga terdapat tingkatan yang berbeda-beda tergantung strain, lingkungan pemeliharaan, spesies maupun famili (Bellanti, 1989).

SISTEM IMUN PADA FASE MYSIS MENUJU POST LARVAPada fase Mysis dan post larva system imunitas udang sudah mulai berkembang yang akan menghasilkan hemosit yang memiliki peranan penting dalam system pertahanan udang. Hemosit bekerja aktif mengeluarkan partikel asing dalam hemocoel melalui fagositosis (Rodriguez dan Lee Moullac 2000 dalam Rohman 2013). Untuk itu pemberian ekstak pada pakan dilakukan pada fase Mysis menuju post larva untuk memacu hemosit sebagai system imunitas pada udang.

UJI FITOKIMIAMENURUT ROBINSON (1991) ALASAN LAIN MELAKUKAN FITOKIMIA ADALAH UNTUK MENENTUKAN CIRI SENYAWA AKTIF PENYEBAB EFEK RACUN ATAU EFEK YANG BERMANFAAT, YANG DITUNJUKAN OLEH EKSTRAK TUMBUHAN KASAR BILA DIUJI DENGAN SISTEM BIOLOGIS. UJI FITOKIMIA PADA SARGASSUM CRASSIFOLIUM KERING SEBANYAK MASING-MASING 0,5 GRAM, MELIPUTI UJI ALKALOID, FLAVONOID, STEROID/TRITERPENOID, SAPONIN DAN TANNIN, DENGAN METODE UJI BERDASARKAN HARBORNE (1987)

UJI FITOKIMIA SARGASSUM CRASSIFOLIUM UJI ALKALOIDUJI FLAVONOIDUJI SAPONINUJI TANNINUJI SEROID/ TRITERPENOID

Pereaksi MeyerH2SO4, NAOH HCL+MgHCLFeCl3Asam Sulfat

+ Endapan Putih- Tidak Ada Endapan+ Perubahan Warna- Tidak Berubah+ Membentuk Buih- Tidak Membentuk Buih+ Endapan Kecoklatan- Tidak Ada Endapan+ Perubahan Warna Biru- Tidak BerubahUJIPEREAKSIHASIL

SENYAWA METABOLIT SEKUNDERMENURUT JUDOAMDJOJO (1990), METABOLIK SEKUNDER ADALAH HASIL METABOLISME YANG DISINTESIS OLEH BEBERAPA ORGANISME TERTENTU YANG TIDAK MERUPAKAN KEBUTUHAN POKOK UNTUK HIDUP DAN TUMBUH. MESKIPUN DEMIKIAN, METABOLIK SEKUNDER DAPAT BERFUNGSI SEBAGAI NUTRIEN DARURAT UNTUK PERTAHANAN HIDUP. SEDANGKAN MENURUT HERBERT (1981), METABOLISME SEKUNDER MERUPAKAN SENYAWA YANG DIHASILKAN ORGANISME UNTUK AKTIVITAS TERTENTU DAN SIFATNYA TIDAK ESENSIAL UNTUK KEHIDUPANNYA.

SENYAWA METABOLIT SEKUNDER PADA RUMPUT LAUT SARGASSUM CRASSIFOLIUM1. FLAVONOIDFLAVONOID ADALAH SENYAWA YANG TERDIRI DARI DARI 15 ATOM. SENYAWA INI BERPERAN PENTING DALAM MENENTUKAN WARNA, RASA, BAU, SERTA KUALITAS NUTRISI MAKANAN. BAGI TUMBUHAN, SENYAWA FLAVONOID BERPERAN DALAM PERTAHANAN DIRI TERHADAP HAMA, PENYAKIT, HERBIVORI, KOMPETISI, INTERAKSI DENGAN MIKROBIA, DAN PELINDUNG TERHADAP RADIASI SINAR UV. FLAVONOID TERSUSUN DARI DUA CINCIN AROMATIS YANG TERDIRI DARI 15 ATOM KARBON, DIMANA DUA CINCIN BENZENE (C6) TERIKAT PADA SUATU RANTAI PROPANA (C3) SEHINGGA MEMBENTUK SUATU SUSUNAN C6-C3-C6.

2. SAPONINSAPONIN ADALAH SUATU GLIKOSIDA ALAMIAH YANG TERIKAT DENGAN STEROID ATAU TRITERPENA. SAPONIN MEMPUNYAI AKTIFITAS FARMAKOLOGI MELIPUTI: IMMUNOMODULATOR, ANTI TUMOR, ANTI INFLAMASI, DAN ANTIVIRUS. SAPONIN DIKLASIFIKASIKAN BERDASARKAN SIFAT KIMIA MENJADI DUA YAITU SAPONIN STEROID (MEMILIKI EFEK ANTI JAMUR) DAN SAPONIN TRITERPENOID. 3. TANINTANIN MERUPAKAN SALAH SATU JENIS SENYAWA YANG TERMASUK KE DALAM GOLONGAN POLIFENOL. TANIN MERUPAKAN METABOLIT SEKUNDER TANAMAN YANG BERSIFAT ASTRIGEN YAITU MEMPUNYAI KEMAMPUAN MENGERUTKAN JARINGAN SEHINGGA DAPAT MENGURANGI SEKRESI. TANIN DIGUNAKAN SEBAGAI ANTISEPTIK, SEBAGAI ANTIDOTUM (KERACUNAN ALKALOID), DAN SEBAGAI REAGEN PENDETEKSI GELATIN, ALKALOID, DAN PROTEIN.

4. STEROIDSTEROID ADALAH SUATU GOLONGAN SENYAWA TRITERPENOID YANG MENGANDUNG INTI SIKLOPENTANA PERHIDROFENANTREN YAITU DARI TIGA CINCIN SIKLOHEKSANA DAN SEBUAH CINCIN SIKLOPENTANA. MENURUT ASALNYA SENYAWA STEROID DIBAGI ATAS: A. ZOOSTEROL, YAITU STEROID YANG BERASAL DARI HEWAN MISALNYA KOLESTEROL. B. FITOSTEROL, YAITU STEROID YANG BERASAL DARI TUMBUHAN MISALNYA SITOSTEROL DAN STIGMASTEROL C. MYCOSTEROL, YAITU STEROID YANG BERASAL DARI FUNGI MISALNYA ERGOSTEROL D. MARINESTEROL, YAITU STEROID YANG BERASAL DARI ORGANISME LAUT MISALNYA SPONGESTEROL. STEROID PADA TUMBUHAN DIANTARA LAIN BERGUNA UNTUK MENGHAMBAT PENUAAN DAUN, MENGAKIBATKAN LENGKUK PADA DAUN RUMPUT-RUMPUTAN, DAN MENINGKATKAN LAJU PERPANJANGAN SEL TUMBUHAN.

BAGAIMANA METODE EKSTRAKSI PENGAMBILAN METABOLIT SEKUNDER ?Metode ekstraksi umum digunakan dalam mengisolasi senyawa metabolit sekunder adalah maserasi (penggunaan pelarut organik). Maserasi merupakan proses perendaman sampel dengan pelarut organik dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan dalam temperatur ruangan. Proses ini sangat menguntungkan karena dengan perendaman sampel tanaman akan mengakibatkan pemecahan dinding sel dan membran sel akibat perbedaaan tekanan antara di dalam sel dan di luar sel sehingga metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organik dan ektraksi senyawa akan sempurna karena dapat diatur lama perendaman yang dilakukan.

METANOL SEBAGAI PELARUTPemilihan pelarut dalam proses maserasi akan memberikan efektifitas yang tinggi dalam memperhatikan kelarutan senyawa bahan alam dalam pelarut tersebut. Secara umum, pelarut metanol merupakan pelarut yang paling banyak digunakan dalam proses isolasi senyawa organik bahan alam karena dapat melarutkan golongan metabolit sekunder (Darwis, 2000; Anonim, 1993).

UJI LC50 Uji LC50 dapat diartikan dengan, suatu bahan kimia dinyatakan berkemampuan toksik akut bila aksi langsungnya mampu membunuh 50% atau lebih populasi uji dalam selang waktu yang pendek, misal 24 jam, 48 jam s/d 14 hari (Meyer et.al. 1982)

UJI LC50 PADA UDANG WINDUPada percobaan udang windu, diberikan bahan kimia berupa ekstrak rumput laut sargassum crassifolium untuk mengetahui ketahanan udang windu yang dapat menyebabkan kematian mencapai 50%. Kematian yang mencapai 50% tersebut dikarenakan jumlah konsentrasi yang tidak tepat atau berlebih sehingga bahan kimia tersebut menjadi toksik. Nilai LC50 dihitung dengan menggunakan program EPA Probbit.

UJI IN VIVO UDANG WINDUUji in vivo atau uji tantang yaitu penginfeksian terhadap serangan bakteri. Pada percobaan udang windu digunakan bakteri Vibrio harveyi dengan kepadatan sebesar 104 cfu/ml, dan didapat kelangusngan hidup didapat sampai 100% pada semua perlakuan (konsentrasi ekstrak dalam media pemeliharaan, yaitu 50, 100, 150 dan 200 ppm) kecuali perlakuan kontrol yaitu perlakuan pemberian pakan tanpa ekstrak, dengan kelangsungan hidup mencapai 93,3%.

PENGARUH MASA UJI IN VIVOPada masa uji in vivo udang windu memiliki perubahan gejala klinis yang meliputi perubahan respon terhadap pakan, perubahan fisik dan pergerakan udang windu. Kelangsungan hidup sampai 100% tersebut diduga karena kepadatan bakteri Vibrio harveyi sebesar 104 cfu/ml belum menjadi patogen, dan juga pemberian pakan dengan tambahan ekstrak, yang dimana ekstrak tersebut mengandung flavonoid yang berfungsi sebagai aktivasi imonumodulator pada udang windu, sehingga dengan pemberian ekstrak pada masa uji in vivo mendapat pengaruh yang baik dengan kelangsungan hidup 100% daripada yang tidak diberikan ekstrak yaitu hanya 93,3%

SEKIAN DAN TERIMAKASIH