Upload
csilla
View
62
Download
3
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Kurveoppløsning av fluoressensdata ved bruk av treveisanalyse. Åsmund Rinnan [email protected] Kjemometrigruppen Levnedsmiddelteknologi Kongelig Veterin₣r- og Landbohøjskole. Bruksområder Genforskning ("tagging") Analyse av mat (vitaminer og proteiner) Målemetoder I løsning - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
Kurveoppløsning av fluoressensdata ved bruk av
treveisanalyse
Åsmund [email protected]
KjemometrigruppenLevnedsmiddelteknologi
Kongelig Veterin₣r- og Landbohøjskole
Hvorfor fluoressens?• Krever dobbeltbindinger,
eller nukleofile molekyler• Høy sensitivitet• Økt dimensjonalitet
-> Bedre separasjon
• Bruksområder• Genforskning ("tagging")• Analyse av mat (vitaminer
og proteiner)
Målemetoder• I løsning• Front-face (faste stoffer)
"Støy" i fluoressensRayleigh• 0-ordens:
Emisjon=Eksitasjon• 1-ordens:
Emisjon=2*Eksitasjon• Ingen kjemisk informasjon
under 0-ordens• Rayleigh er høyest i
intensitet
Raman• Spesifikk for
løsningsmiddelet• Konstans energidifferanse
fra 0-ordens Rayleigh• Ligger i et område med
kjemisk informasjon
Raman og Rayleigh er tilnærmet systematisk
Treveisanalyse• PARAFAC• Trilineær struktur• Ødelagt av støy• Måter å behandle dette på
a. Late som ingentingb. Trekke fra et spekter av
løsningsmiddeletc. Sette inn tomme verdierd. Vektinge. Modellering av støy
(ikke vist)
Minus vannstandard• Landskap av
løsningsmiddelet• Vanlig subtraksjon• Fjerner Raman• Minsker Rayleigh• Beregningstiden den
samme
Tomme verdier• Området over 1-ordens
inneholder samme informasjon som i mellom 0 og 1
• En rutine som automatisk setter inn tomme verdier
• Mister informasjon• PARAFAC håndterer
tomme verdier• Økt beregningstid
Vekting - MILES• Vekting av områder• Mere manuelt - vanskelig• Snitt av vannstandarder
som basis for "formen" til støyen
• Ekstra nedvekting av område under 0 og over 1
• PARAFAC kan godt regne med vekter
Vekting - Standard avvik• Alle prøvene er kjørt i
replikater (5)• Det er snittene som blir
brukt i analysen• Standardavvikene av
replikatene brukes som vekter
• Helautomatisk
Datasettet• Seks analytter
Emisjon
• 15 prøver
Eksitasjon
Sammenlikning• Problemer med Catehol og
Resorcinol• MILES best• - vann og std en hver
Resorcinol og Catechol• Catechol • Resorcinol
Er "støyen" borte?Tomme verdier og MILES fjerner Rayleigh
KonlusjonDenne analysen ble også kjørt på fire andre
datasett. Totalt sett ga det følgende ranking liste:
1. MILES2. Minus vann
3. Tomme verdier4. Std
5. Ingenting
Takk til: Rasmus Bro og Jordi Riu
Referanser: Rasmus Bro's avhandling www.models.kvl.dk/source Bro, R: PARAFAC. Tutorial and applications, Chemometrics and
Intelligent Laboratory systems, 1997 (38), 149-171 Bro, R, Sidiropoulos ND, og Smilde, AK: Maximum Likelihood Fitting
Using Simple Least Squares Algorithms, Journal of Chemometrics, Submitted
Wentzell, PD, Andrews, DT, Hamilton, DC, Faber, K, og Kowalski, BR: Maximum Likelihood Principal Component Analysis, Journal of Chemometrics, 1997 (Vol. 2), 339-366