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La diagnostica di laboratorio La diagnostica di laboratorio
nella patologia infettivanella patologia infettiva D.ssa Marina Musumeci
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Malattia Malattia infettivainfettiva
Ogni condizione morbosa che riconosce come causa necessaria della sua insorgenza l’azione di un’agente patogeno appartenente ad uno dei seguenti gruppi:
Virus Batteri Miceti Parassiti
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Infezioni sintomatiche
Infezioni asintomatiche
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DiagnDiagnosiosi
Definizione dell’eziologia e della patogenesi di un processo morboso.
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Ipotesi Ipotesi diagnosticadiagnostica
Utili per confermare o smentire l’ipotesi diagnostica.
Raccolta dei dati anamnestici e clinici con conseguente formulazione di un sospetto o di un orientamento diagnostico.
Indagini di Laboratorio o Indagini di Laboratorio o strumentalistrumentali
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Indagini con metodo Indagini con metodo diretto diretto
Esame microscopicoIsolamento in coltura ed
identificazioneBiologia molecolare
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Indagini con metodo Indagini con metodo indirettoindiretto
Indicatori di flogosi (Emocromo, Ves, PCR, Proteine specifiche)Anticorpi specifici
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AnticorAnticorpipi
Immunoglobuline leganti l’antigene: solubili o di membrana
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IGIGMM
Compaiono più tardivamente, raggiungono il picco 4-6 settimane dopo l’infezione e, spesso, persistono per tempi prolungati
IGIGGG
Normalmente sono transitorie e indicative di infezione acuta in atto.
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Qual’è il principio Qual’è il principio analitico?analitico?
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MetoMetodidi
Agglutinazione
(emoagglutinazione, sieroagglutinazione)RIAELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)CLIA IFI
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Malattia acuta o subacuta a prognosi favorevole
Segni clinici: febbre irregolare, angina, linfoadenopatia latero-cervicale
Agente eziologico: virus di Epstein-Barr Diffusione per via inalatoria o per contatto orale
da portatore sano a persona non infetta
MononucleosiMononucleosi
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Cellule del rinofaringe
Linfociti B Anticorpi eterofili
Attivazione dei linfociti T CD8
MononucleosiMononucleosi
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Periodo di incubazione: da 35 a 45 giorniSuperata la fase acuta, il virus continua ad
essere dismesso dalle cellule orofaringee.Riattivazione di malattia spesso in modo atipico
o asintomatico
MononucleMononucleosiosi
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Esami di Laboratorio
EmocromoAnticorpi eterofiliAnticorpi specifici diretti contro:
Antigeni del capside (VCA IgM e IgG) Antigene precoce (EA) Antigeni nucleari (EBNA IgG)
MononucleoMononucleosisi
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VCA IgM: compaiono precocemente e scompaiono entro 4-6 settimane
VCA IgG: raggiungono il picco a 2 settimane dall’inizio della malattia
EA IgG: sono presenti nella fase acuta, persistono per 3/6 mesi; possono permanere per molti anni; positivi nelle riattivazioni.
EBNA IgG: assenti nella fase acuta, si rilevano 2/4 mesi dopo l’inizio e permangono perennemente.
MononucleMononucleosiosi
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Infezione primaria acuta: VCA IgM, VCA IgG, EA IgGConvalescenza (o riattivazione): VCA IgM, VCA IgG, EBNA IgG, (EA IgG)Infezione pregressa: VCA IgG, EBNA IgG
MononucleoMononucleosisi
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ToxoplasmToxoplasmosiosi
Ciclo vitale: OocistiSporozoitiTachizoitiBradizoiti
Antropozoonosi ubiquitaria da Toxoplasma Gondii
L’infezione viene contratta mediante l’ingestione di carni crude o poco cotte e mediante l’ingestione di verdure crude
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In gravidanza:Il rischio di trasmissione aumenta con lo
sviluppo del circolo placentare.Il rischio di indurre gravi danni al feto è
maggiore se l’infezione congenita è contratta precocemente.
Infezioni congenite contratte durante il terzo trimestre di gravidanza sono generalmente asintomatiche.
ToxoplasmoToxoplasmosisi
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Infezione da Infezione da CitomegalovirusCitomegalovirus
Famiglia hepesviridaeSpettro d’ospite ristrettoIn vivo ciclo replicativo lento, induce
inclusioni intranucleari, intracitoplasmatiche e latenza nelle cellule mononucleate del sangue e nei progenitori midollari
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Trasmissione: per contatto interumano. Nella popolazione adulta il contatto molto stretto e quotidiano con i bambini gioca un ruolo importante per la diffusione dell’infezione.
Fonti d’infezione: secrezioni oro-fringee, urina, latte materno, sperma, secrezioni vaginali, feci, sangue.
Eliminazione: con le urine protratta nel tempo.
Infezione da Infezione da CitomegalovirusCitomegalovirus
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In gravidanza: Un’infezione primaria contratta nel primo
trimestre di gravidanza aumenta il rischio di prognosi feto-neonatale più grave.
Danni da infezione congenita: severe compromissioni cerebrali con difetti dello sviluppo psicomotorio e ipoacusia neurosensoriale.
Infezione da Infezione da CitomegalovirusCitomegalovirus
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RosoliRosoliaa
Agente eziologico: RNA virus Il virus penetra nel tratto respiratorio dove
avviene la prima fase di replicazione cui fa seguito una seconda nei linfonodi cervicali.
Incubazione : da due a tre settimane La fase viremica dura per i sette giorni
precedenti la comparsa dell’esantema insieme con l’escrezione virale dal rinofaringe e persiste da sette a dodici giorni dopo il rash.
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Le IgM compaiono prestissimo, raggiungono il picco dopo 7-10 giorni persistono fino a 60 giorni dalla comparsa dell’esantema
Le IgG compaiono dopo 2-5 giorni dalla comparsa delle IgM e persistono indefinitamente conferendo l’immunità
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U.O.C. Patologia Clinica O.V.E. - FerrarottoDirettore Dr. F. Di VincenzoRosoliRosoli
aa
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In gravidanza: Se contratta entro le prime 16-18
settimane, l’infezione può determinare aborto o gravi alterazioni transitorie e/o permanenti definite come “Sindrome della Rosolia Congenita” (SRC)
RosoliaRosolia
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Quadri sierologici Quadri sierologici possibilipossibili
Assenza di immunità: IgG –/IgM -Immunità da infezione pregressa: IgG+
/IgM-Stato immunitario non definibile: IgG indeterminate e IgM negativeSe IgG -/IgM+: infezione in fase iniziale o
risultato falso positivo (da reazione crociata)
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IgG+/IgM+: effettuare una seconda determinazione utilizzando metodo analitico alternativo, ma con la medesima sensibilità.
Test di avidità
Quadri sierologici Quadri sierologici possibilipossibili
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Infezione da Infezione da HIVHIV
HIV: retrovirusCellule bersaglio: linfociti T CD4HIV1 e HIV2
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Infezione primariaFase di latenza clinicaFase clinicamente manifesta
Infezione da Infezione da HIV HIV
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Trasmissione:Per via sessualePer via ematicaPer via materno-fetale
Infezione da Infezione da HIVHIV
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Test di screeningIII generazioneIV generazione
Test di conferma: positivo indeterminato negativo
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Infezione da Infezione da HIVHIV
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Stadiazione e monitoraggio della risposta alla terapia:Linfociti T CD4 Carica virale (HIV RNA)
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Infezione da Infezione da HIVHIV
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EpatiteEpatite
Processo infiammatorio a carico del fegato istologicamente caratterizzato da necrosi parenchimale e infiltrazione flogistica.
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HAVHBVHCVHDVHEV
Epatiti viraliEpatiti virali
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Danno improvviso con aumento significativo delle transaminasi (dieci volte il limite superiore).
Epatite acutaEpatite acuta
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persistenza di ALT elevate per oltre sei mesi dopo l’episodio acuto;
Riscontro di ALT elevate in più di un’occasione per un periodo di oltre sei mesi.
Epatite cronicaEpatite cronica
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Si trasmette per via oro-fecale; ha un periodo di incubazione di 15-50 giorni; può dare epatite acuta, ma non cronica. IgM: indicano la fase acuta della malattiaIgG: persistono per tutta la vita e sono protettive.
Epatite virale da virus AEpatite virale da virus A
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Sospetto di infezione acuta: anamnesi positiva per trasmissione oro-fecale ALT >10x limite di valore superiore confermata da almeno due controlli
IgM anti-HAV
Epatite virale da virus AEpatite virale da virus A
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Si trasmette per via parenterale, sessuale, perinatale;
ha un periodo di incubazione compreso tra 45 e 160 giorni; dà infezioni in forma acuta e cronica; può evolvere in epatocarcinoma.
Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B
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HBsAg: primo marcatore a comparireHBeAg: indice di attiva replicazione viraleAnti-HBcIgM: presenti a titolo elevato nella
fase acutaAnti-HBcIgG: già presenti nella fase acuta,
persistono per tutta la vita.Anti-HBs: sieroconversione
Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B
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Sospetto di infezione acuta: anamnesi positiva per trasmissione parenterale e/o sessuale ALT >10x limite di valore superiore confermata da almeno due controlli
HBsAg IgM anti-HBc
Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B
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Quadro sierologico dell’epatite cronica:HBsAgAnti-HBcIgGAnti-HBe
Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B
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Immunità naturale: Anti-HBs e Anti-HBcIgG Immunità da vaccino: Anti-HBs
Epatite virale da virus BEpatite virale da virus B
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Si trasmette per via parenterale, sessuale, perinatale, ha un periodo di incubazione di 14-180 giorni; può dare infezioni acute; può evolvere in cirrosi ed epatocarcinoma.
Epatite virale da virus CEpatite virale da virus C
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Anticorpi anti HCV: rilevabili mediamente dopo circa tre mesi dall’infezione.
Risultato negativo: esclude con elevato grado di probabilità la malattia.
Risultato positivo: infezione in corso o pregressa.
Epatite virale da virus CEpatite virale da virus C
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11/04/23 D.ssa M. Musumeci 50
Test di conferma: se valore index/cut-off <8.0
HCV RNA
Epatite virale da virus CEpatite virale da virus C
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