Lab Oratorio de Inmunologia Discus. 1

8/8/2019 Lab Oratorio de Inmunologia Discus. 1

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LABORATORIO DEINMUNOLOGIA

M.C. Juana Ramírez Aguilera



ANTIGENO

Se denomina antígeno a cualquiersustancia extraña que, introducida en elinterior de un organismo, provoque unarespuesta inmunitaria, estimulando la

producción de anticuerpos.



ANTICUERPO

Los anticuerpos son proteínaspertenecientes al grupo de lasgamma-globulinas oinmunoglobulinas, constituidaspor la asociación de cuatrocadenas polipeptídicas unidasentre si mediante puentesdisulfuro, dos cadenas sedenominan pesadas y las otrasdos ligeras.

A su vez, cada una de lascadenas ligeras y pesadas,incluye una región variable,cuya secuencia de aminoácidoses peculiar de cada anticuerpo,y una región constante, con lamisma secuencia en todos losanticuerpos.



AGLUTINACION

Es una reacción serológicaclásica, que comprende laaglomeración de unasuspensión celular medianteun anticuerpo específico.

Durante la aglutinación , elantígeno forma parte de unapartícula insoluble grande,como un glóbulo rojo o unbacteria y se requiererelativamente pocasmoléculas para unaagregación visible.

las reacciones deaglutinación puedenclasificarse en directas eindirectas o pasivas.



NEUTRALIZACION(ANTIESTREPTOLISINAS)

Si el antígeno esuna sustanciatóxica, la unión conel anticuerpoprovoca suneutralización, de

modo que no puedeejercer su efectotóxico.



Determinación de grupossanguineos del sistema ABO

Los grupos y tipos sanguíneos secaracterizan por la presencia sobre loseritrocitos de antígenos conocidos comoaloantígenos ( antígenos encontradosen ciertos individuos pero no en otros);cuando estos antígenos encuentran

anticuerpos homólogos, ya sea in vivo oin vitro , las células de las cuales formanparte pueden ser aglutinadas







Determinación grupo inverso

Eritrocitos A Eritrocitos B GRUPO

- + A

+ - B

+ + 0- - AB

AGLUTINACION CON:



Determinación del factor Rh

La composición antigénica de loseritrocitos de un individuo es

determinada por pruebas deaglutinación con antisueros apropiados.Las pruebas para el Rh, consisten endeterminar si los eritrocitos de unindividuo contienen el factor clásico yclínicamente más importante el Rh







Los factores Rh se determinangenéticamente.

Si una persona tiene los genes + +, elfactor Rh en la sangre será positivo.

Si una persona tiene los genes + -, elfactor Rh en la sangre será positivo.

Si una persona tiene los genes - -, elfactor Rh en la sangre será negativo.




Si los genes del factor Rh delpadre son + + y los de lamadre son + +, el bebé tendráun gen + del padre y un gen +de la madre. El bebé será Rhpositivo + +.

Si los genes del factor Rh delpadre son + + y los de lamadre son - -, el bebé tendráun gen + del padre y un gen -de la madre. El bebé será Rh




Si los genes del padre son Rhpositivo + - y los de la madretambién, el bebé puede ser:Rh positivo + +Rh positivo + -Rh negativo - -

Si los genes del padre son - - y losde la madre son + -, el bebé puede

ser:Rh ne ativo + -




Si los genes del padre son- - y los de la madre son - -,el bebé puede ser:Rh negativo - -



Incompatibilidad RH

Definición:La incompatibilidad

Rh es una condiciónque se desarrollacuando existe unadiferencia en el tipode sangre Rh de lamujer embarazada(Rh negativo) y eldel feto (Rhpositivo).



Incompatibilidad RH

Eritroblastosis fetalAnemia hemolítica del feto, odel recién nacido, que es elresultado de la acción de

hemolisinas maternas que hanatravesado la placenta

Los anticuerpos provenientes

de una madre Rh negativapueden ingresar al torrentesanguíneo del feto Rh positivoy dañar sus glóbulos rojos(GR).



Incompatibilidad RH

Bebé ictéricoLa ictericia del recién nacido(coloración amarilla de la piel) puedeoriginarse por muchas causas, pero lamayoría de los bebés que la sufrentienen una condición llamada ictericiafisiológica, un fenómeno común en elneonato que se presenta comoconsecuencia de la inmadurez delhígado. Este tipo de ictericia es decorta duración, pues dura sólo pocosdías. La ictericia que persiste por másde tres o cuatro días, o que empeoracon rapidez, debe ser evaluada por unmédico hasta que los niveles de

bilirrubina en sangre disminuyan o senormalicen.



Incompatibilidad RH

AnticuerposLos antígenos son moléculasgrandes, generalmenteproteínas, localizadas en lasuperficie de las células, virus,hongos, bacterias y algunassustancias muertas como

toxinas, sustancias químicas,medicamentos y partículasextrañas. El sistemainmunológico detecta los

antígenos y produceanticuer os ue destru en las



Incompatibilidad RH

ExanguinotransfusiónLa ictericia neonatal es un problemacomún que afecta a los niños al nacer.Se produce porque el hígado delneonato no puede eliminar labilirrubina, un producto de ladegradación de las célulassanguíneas. La ictericia neonatal por logeneral es un trastorno leve y auto-limitante. El tratamiento más común esla exposición a la luz ultravioleta,colocando al niño bajo una lámparaultravioleta durante unas horas cadadía. La luz ultravioleta descompone labilirrubina de manera que el hígado del

bebé la pueda procesar y excretar.





• Las pruebas cruzadas y la búsqueda deanticuerpos son de suma importancia, ya que

permiten que los antígenos y anticuerpos puedanser detectados y estudiados en el laboratorio;

• Nos ayudan a prevenir la transfusión de sangreincompatible, y proveen al paciente de máximaseguridad y beneficio.

Pruebas cruzadas



Pruebas cruzadasP.C. MAYOR P.C. MENOR CONTROLES

Tubo No. 1 2 3 4 5 6

Suero delreceptor

2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas

Suero deldonador

2 gotas 2 gotas

Susp.Eritrocitosdel donador

I gota I gota

Susp.Eritrocitosdel receptor

I gota I gota I gota I gota

Albúmina al

22%

2 gotas 2 gotas 2 gotas



1. Prueba mayor (D) o delDONADOR :

a) Sirve para confirmar si existe compatibilidadABO entre el receptor y el donador.

b) Detecta anticuerpos en el suero del pacienteque no se hayan demostrado en la pruebade tamizaje (porque el antígenocorrespondiente no estaba presente en lascélulas detectoras o eritrocitos de fenotipo

conocido, PANEL).Se utilizan 2 gotas de suero del receptor más1 gota de eritrocitos lavados del donador.



2. Prueba menor (R) o delRECEPTOR:

a) Detecta anticuerpos irregulares en el suerodel donador y ratifica algún error de

clasificaciónABO/Rh.

Se realiza con 2 gotas de suero o plasma

del donador más 1 gota de eritrocitos delreceptor.



a) Permite detectar una prueba deantiglobulina directa positiva, así

como la presencia de rouleaux yotras anormalidades autoinmunes(AHAI ).

Se realiza con 1 gota de eritrocitos delreceptor más 2 gotas de suero delreceptor.

3. Prueba autotestigo (AT):



Detección de anticuerpos libresen suero:

Se realizaenfrentando elsuero delpaciente oreceptor coneritrocitos defenotipo conocido(PANEL).

La investigación de anticuerposirregulares libres en suero sedebe realizar por lo menos

con dos técnicas: la primerasiempre será la salina llevadahasta la fase de Coombs, yaque en la mayoría de los casospermite diferenciar la IgM ensu fase rápida a 22 y 37 °C dela IgG en la fase de Coombs; yla segunda puede ser un mediohiperproteico como albúmina,









COMPATIBILIDADES SANGUÍNEAS

POSIBLE NO POSIBLE

0 0, A, B, AB AB A, B, 0A A, AB A B, 0

B B, AB B A, 0

AB AB

Esquematización de los grupos sanguíneos yposibilidades de transfusiones entre ellos.



COMPATIBILIDADESSANGUÍNEAS

POSIBLE NO POSIBLE

Rh (-) Rh (+) Rh (+) Rh (-)

Rh (-) Rh (-)

Rh (+) Rh (+)



<> PUEDE DAR APUEDE RECIBIR

DE

A (+) A (+) / AB (+)0 (+) / 0 (-) / A (+) / A

(-)

A (-)A (+) / A (-) / AB (+) / AB

(-)0 (-) / A (-)

B (+) B (+) / AB (+) 0 (+) / 0 (-) / B (+) / B (-)

B (-)B (+) / B (-) / AB (+) / AB

(-)0 (-) / B (-)

AB (+) AB (+) Todos

AB (-) AB (+) / AB (-) AB (-) / 0 (-) / A (-) / B (-)

0 (+)A (+) / B (+) / 0 (+) / AB

(+)0 (+) / 0 (-)

0 (-) Todos 0 (-)



PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

Se usa para demostrarla presencia de losanticuerpos que han

fijado en las células delpaciente in vivo, porejemplo en laenfermedad hemolíticadel recién nacido, en laanemia hemolíticaadquirida.



PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

OBJETIVODetectar inmunoglobulinas unidas a lasuperficie de los glóbulos rojos mediantela prueba de Coombs directa.

Detectan el Ac (prueba de antiglobulina) yel complemento ( prueba de la anti-no

globulina g ) sobre los hematiesrespectivamente.

+ = adherencia a la membrana de losG.R. de gammaglobulina, componentesdel C, transferrina, un complejo de ciertosmedicam., y gammaglobulina u otrasglobulinas.

Eritroblastosis fetal.

+ debil : (sin hemólisis clinica)Artritis reumatoide, colitis ulcerativa y

leucemia.

La aglutinación de los eritrocitosdel paciente, por el anti-humano,

indica que estos se encontrabansensibilizados por anticuerpos.



PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA

La prueba indirecta deCoombs es utilizada parademostrar la presenciade los anticuerposcirculantes que cubren,pero que no aglutinan, alas células suspendidasen salina. Se efectúaesta prueba combinando“ invitro ” a un anticuerpocon antígeno específico.Ejemplo, cuando se haceuna prueba anti-D en un

suero materno, lascélulas de la pruebadeberán contener elantígeno D.

Esquema de la Reacción indirecta deantiglobulina (Coombs)



PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA

Objetivo: detectarlos ACS circulantescontra los antígenosde los hematíes,mediante la pruebade Coombs indirecta(C.I.)

La prueba de C.I. esuna reacción en 2etapas, el suero enel que se buscan losacs se incubanprimero con los G.R.de prueba y luegolos G.R. recubiertospor el supuesto Acson aglutinados porun sueroantiglobulínico deCoombs.

Esquema de la Reacción indirecta deantiglobulina (Coombs)

Incuban



Prueba para el diagnostico serológico de lasífilis (Reacción de V.D.R.L)

Objetivo: Conocer un método paradiagnosticar sífilis, mediante la presenciade la reacción de aglutinación.

.Microscopía de campo oscuro, donde seobserva el movimiento característico delos treponemas

Inmunofluorescencia directa, ahora esmás específica debido a que se utilizaanticuerpos monoclonales

Las pruebas no treponémicas sonaquellas pruebas en las cuales elindividuo incita anticuerpos notreponémicos sino anticuerpos contra lacardiolipina. Eso lo tienen pero tambiéntienen reacción sobre ciertoscomponentes de nuestros tejidos,sobretodo con las mitocondrias. Estos,como no son anticuerpos especificos, seles conoce como reaginas. Lasprincipales pruebas no treponemicas son:VDRL ("Venereal Disease ResearchLaboratories test") y el RPR ("Rapid

Plasma Reagin test"); la utilidad puedeser diagnosticar curación y nos sirvecomo re istro de casos

http://www.monografias.com/trabajos7/regi/regi.shtml

http://www.monografias.com/trabajos7/regi/regi.shtml



Prueba para el diagnostico serológico de lasífilis (Reacción de V.D.R.L)

La prueba de V.D.R.L. parael diagnóstico de la sífilis , sebasa en la reacción que seproduce entre losanticuerpos presentes en el

suero de los enfermossifilíticos denominadosreaginas y el antígenoespecífico, el cual consisteen cardiolipina , lecitinapurificada, colesterol yalcohol en un adecuadoequilibrio, donde el colesterolproporciona los centros deabsorción, de forma que laspartículas aglutinadaspuedan visualizarse

+

-

+



Prueba de inhibición de la hemaglutinaciónpara la investigación de la HCG humana

Objetivo: Determinar lapresencia de HCG humana enla orina del paciente, mediantela prueba de inhibición de lahemaglutinación

El diagnostico del embarazo ode alguna alteración conproducción de GCH, sedetermina mezclando la orinadel paciente con Acs anti-GCH;se agrega luego a la mezclaeritrocitos de oveja tratados conacido tánico, formalizados,sensibilizados con GCH.Si la orina contiene GCHneutraliza los ACS anti-GCH,por lo que no ocurre laaglutinación de los eritrocitos.

Antisueros + Orina

(Anti-GCH ) (Antigeno-GCH :

ausente en A ;

presente en B)

Hematies

Cubiertoscon GCH

AB



INTERPRETACION

(+), Cuando los G.R.presentes en el tubo dereacción no aglutinen,sedimentan en tubos deensayo, formando un anillode precipitación, que seobserva en el fondo del tubo.

(-), cuando la hormona querecubre los G.R. contenidosen el tubo, reacciona con elsuero anti-GCH, formandouna malla difusa de colorrojizo en el fondo del tubo.



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