Lampiran 1. EKSPERIMENTAL TIME LINE Minggu ke- 1 2 3 ...etheses.uin-malang.ac.id/504/11/09620017 Lampiran.pdf95 Lampiran 1. EKSPERIMENTAL TIME LINE Perlakuan Minggu ke- 1 2 3 4 5 6

95 Lampiran 1.

EKSPERIMENTAL TIME LINE

Perlakuan

Minggu ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

1.

2.

3.

4.

Keterangan :

1. Aklimatisasi

2. Pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.)

3. Diinduksi 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA)

4. Pengamatan

96

Lampiran 2:

Menghitung Konsentrasi Sediaan Larutan Na CMC 0,5% dan Larutan Ekstrak

Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.)

Konsentrasi I = 100 mg/kg BB = 100 mg × 18 g (BB mencit)/1000 g

= 1,8 mg/ekor = 3,6 mg/ml = 54 mg/15ml

Konsentrasi II = 150 mg/kg BB = 150 mg × 18 g (BB mencit)/1000 g

= 2,7 mg/ekor = 5,4 mg/ml = 81 mg/15ml

Konsentrasi III = 200 mg/kg BB = 200 mg × 18 g (BB mencit)/1000 g

= 3,6 mg/ekor = 7,2 mg/ml = 108 mg/15ml

Konsentrasi IV = 250 mg/kg BB = 250 mg × 18 g (BB mencit)/1000 g

= 4,5 mg/ekor = 9 mg/ml = 135 mg/15ml

a. Dosis IV

Menghitung Konsentrasi total :

54 mg + 81 mg + 108 mg + 135 mg = 378 mg

Larutan Na CMC 0,5% yang dibutuhkan untuk melarutkan 378 mg ekstrak etanol daun

sirsak untuk mendapatkan dosis IV adalah:

378 mg × 1 ml = 9 x

42 ml = x

Jadi, 378 mg ekstrak etanol daun sirsak dilarutkan dengan Na CMC 0,5% sampai

volumenya menjadi 42 ml. Diambil 15 ml untuk perlakuan dosis IV, sehingga sisa

larutan ekstrak menjadi 27 ml.

97

b. Dosis III

Konsentrasi IV × 27ml = konsentrasi III × V3

9 x 27 = 7,2V3

33,75 ml = V3

Sisa larutan ekstrak etanol daun sirsak pada dosis IV sebanyak 27 ml diencerkan hingga

volumenya menjadi 33,75 ml. Diambil 15 ml untuk perlakuan dengan dosis III, sehingga

sisa larutan ekstrak menjadi 18,75 ml.

c. Dosis II

Konsentrasi III × 18,75 ml = konsentrasi II × V2

7,2 x 18,75 = 5,4V2

25 ml = V2

Sisa larutan ekstrak etanol daun sirsak pada dosis III sebanyak 18,75 ml diencerkan

hingga volumenya menjadi 25 ml. Diambil 15 ml untuk perlakuan dengan dosis II,

sehingga sisa larutan ekstrak menjadi 10 ml.

d. Dosis I

Konsentrasi II× 10 ml = konsentrasi I × V1

5,4 x 10 = 3,6 V1

15 ml = V1

Sisa larutan ekstrak etanol daun sirsak pada dosis II sebanyak 10 ml diencerkan hingga

volumenya menjadi 15 ml. Dan larutan ekstrak etanol daun sirsak sebanyak 15 ml ini

diberikan untuk perlakuan mencit kelompok III. Pemberian ekstrak ini dilakukan setiap

hari dimulai minggu ke-3 sampai minggu ke-10 pada setiap mencit kecuali kontrol

negatif dan kontrol negatif. Sejak tanggal 5 Februari 2013 sampai tanggal 2 April 2013,

pada siang hari jam 10.00-11.00 WIB.

98

Lampiran 3.

ALAT DAN BAHAN

1. Alat

Rotary Shaker

Erlenmeyer Vacum, Corong Buchner

Lemari Asam

Kertas Saring

Rotary Evaporator

Timbangan Analitik

99

UV. Illuminator

Spektrofotometer

2. Bahan

Etanol 70%

Rendaman serbuk daun sirsak

Penyaringan di lemari asam

Perlakuan berbeda ekstrak etanol daun

sirsak

100

3. Perlakuan

Pemberian ekstrak etanol daun sirsak

P 1, U 4 DMBA ke-2

P 1, U 4 DMBA ke-3

P1, U 2 DMBA ke-4

P 1, U 2 DMBA ke-5

Bulu rambut bagian mulut rontok

P 1, U 2 DMBA ke-6

Bulu rambut bagian kepala rontok

101

4. Pembedahan

Mammae mencit betina

5. Mencit Mati Sebelum Pembedahan

No. Tanggal Mencit mati Keterangan

1. 20 Maret

2013

K+,

Ulangan 1

Morfologi : Rambut sekitar mulut rontok

Anatomi : paru-paru berwarna pucat kebiruan, perut

kembung berisi cairan paru-paru, aktivitas lemah dan

tidak ditemukan kelenjar mammae.

2. 30 Maret

2013

Dosis IV,

Ulangan 2

Tidak bisa dideteksi kematiannya karena tubuh telah

dimakan mencit lainnya dan yang tersisa hanya

tulang belulang.

3. 1 April

2013

Dosis IV,

Ulangan 1

Morfologi: Disekitar mulut dan leher bulunya rontok.

Anatomi: Paru-paru hancur, tidak ditemukan kelenjar

mammae, hepar rusak dengan warna hitam, dan

organ pencernaan rusak.

4. 3 April

2013

Semua dosis

dan ulangan

Dibedah untuk diteliti kadar SOD dan MDA

102

Lampiran 4:

KADAR SOD

Pengamatan Organ Mammae Mencit Betina

SOD (U/ml)

Sampel Abs SOD (U/ml)

Standar SOD (U/ml)

K- 1 0.587 122

Kons Abs

K- 2 0.598 124.2

0 0

K- 3 0.604 125.4

10 0.006

K- 4 0.574 119.4

20 0.072

K+ 1 0.102 25

30 0.143

K+ 2 0.097 24

40 0.185

K+ 3 0.094 23.4

50 0.236

K+ 4 0.113 27.2

60 0.275

D1 1 0.254 55.4

70 0.306

D1 2 0.287 62

80 0.385

D1 3 0.307 66

90 0.466

D1 4 0.309 66.4

Y=-0,023 + 0,005 (X)

D2 1 0.438 92.2

D2 2 0.456 95.8

D2 3 0.462 97

D2 4 0.442 93

D3 1 0.544 113.4

D3 2 0.565 117.6

D3 3 0.523 109.2

D3 4 0.546 113.8

103

Case Processing Summary

Cases

Valid Missing Total

N Percent N Percent N Percent

data 16 100.0% 0 .0% 16 100.0%

perlakuan 16 100.0% 0 .0% 16 100.0%

Descriptives

Statistic Std. Error

data Mean 73.8375 8.71679

95% Confidence Interval for

Mean

Lower Bound 55.2581

Upper Bound 92.4169

5% Trimmed Mean 74.2083

Median 79.3000

Variance 1.216E3

Std. Deviation 3.48672E1

Minimum 23.40

Maximum 117.60

Range 94.20

Interquartile Range 71.90

104

Skewness -.339 .564

Kurtosis -1.403 1.091

perlakuan Mean 2.5000 .28868


Mean

Lower Bound 1.8847

Upper Bound 3.1153

5% Trimmed Mean 2.5000

Median 2.5000

Variance 1.333

Std. Deviation 1.15470

Minimum 1.00

Maximum 4.00

Range 3.00

Interquartile Range 2.50

Skewness .000 .564

Kurtosis -1.411 1.091

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

data .201 16 .084 .883 16 .043

perlakuan .167 16 .200* .868 16 .025

105

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

data .201 16 .084 .883 16 .043

perlakuan .167 16 .200* .868 16 .025

a. Lilliefors Significance Correction

*. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variances

data

Levene Statistic df1 df2 Sig.

1.339 3 12 .308

ANOVA

data

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 18098.427 3 6032.809 527.075 .000

Within Groups 137.350 12 11.446

Total 18235.777 15

106

UJI DUNCAN

data

Duncan

perlaku

an N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

1 4 24.9000

2 4 62.4500

3 4 94.5000

4 4 1.1350E2

Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

107 1. Data dan Analisis Kadar Superoksida dismutase (SOD) Mammae Mencit (Mus

musculus) Betina Yang Diinduksi 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dengan

berbagai perlakuan dan ulangan yang berbeda:

Perlakuan

Ulangan

Total

Rerata 1 2 3 4

K- 122 124,2 125,4 119,4 491 122,75

K+ 25 24 23,4 27,2 99,6 24,9

P1 55,4 62 66 66,4 249,8 62,45

P2 92,2 95,8 97 93 378 94,5

P3 113,4 117,6 109,2 113,8 454 113,5

Total 286 299,4 295.6 300,4 1181,4 295,3

Keterangan:

K-: Pelarut ekstrak sirsak (minyak jagung) + Pelarut DMBA (Na CMC)

K+: Pelarut ekstrak sirsak (minyak jagung) + DMBA

P1: Ekstrak sirsak (100 mg/kg BB) + DMBA



X = 1672.4 = 83.63

20

FK = 1672,42 = 2796921,8 = 139846,09

20 20

JKtotal=1222 + 124,2

2 + 125

2 +119,4

2+...113,8

2 – FK

=165758,56 - 139846,09 = 25912,47

JKperlakuan=4912 + 99,6

2+ 249,8

2 + 378

2 + 454

2– FK

4

=662401,2-139846,09 = 25754,21

4

JKgalat= JK Total percobaan-JK Perlakuan

= 25912,47 - 25754,21

= 158,26

108 2. Ringkasan Hasil ANOVA Satu Arah Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak

(Annona muricata L.) Terhadap Kadar Superoksida dismutase (SOD) Mammae Mencit

(Mus musculus) Betina Yang Diinduksi 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA).

SK db JK KT Fhitung F1%

Perlakuan 4 25754.212 6438.553 610.3 4.89

Galat 15 158.260 10.551

Total 19 25912.472

Keterangan: SK = Sumber Keragaman

db = Derajat Bebas

JK = Jumlah Kuadrat

KT = Kuadrat Tengah

Uji Duncan 1 %

DUNCAN 1 % = Q0.01 (4,18) X KT Galat

Ulangan

= 5,09 x 10.551

4

= 5,09 x 1.624 = 8.267

3. Data Pengaruh PemberianEkstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap KadarSuperoksida dismutase (SOD) Mammae Mencit (Mus musculus) Betina Yang

Diinduksi7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) Secara In Vivo.

Perlakuan Total Rerata(U/ml) Notasi DUNCAN 1%

Kontrol - 491 122,75 ± 2,6 a

Kontrol + 99,6 24,9 ± 1.7 b

P1 (100 mg/kg BB) 249,8 62,45 ± 5.1 c

P2 (150 mg/kg BB) 378 94,5 ± 2.3 d

P3 (200 mg/kg BB) 454 113,5 ± 3.4 e

109 Lampiran 5:

MDA (nmol/ml)

Sampel Abs MDA (nmol/ml)

K- 1 0.077 5.071

K- 2 0.095 6.357

K- 3 0.104 7.000

K- 4 0.087 5.786

K+ 1 0.479 33.786

K+ 2 0.498 35.143

K+ 3 0.496 35.000

K+ 4 0.486 34.286

D1 1 0.377 26.500

D1 2 0.336 23.571

D1 3 0.351 24.643

D1 4 0.352 24.714

D2 1 0.167 11.500

D2 2 0.167 11.500

Standar MDA (nmol/ml)

D2 3 0.156 10.714

Kons Abs

D2 4 0.164 11.286

0 0

D3 1 0.149 10.214

0.5 0.035

D3 2 0.151 10.357

1 0.069

D3 3 0.161 11.071

2 0.121

D3 4 0.159 10.929

3 0.168

110

N0.

N Mean Std. Deviation Std. Error


Mean

Minimum Maximum Lower Bound Upper Bound

1 4 6.0750 .81394 .40697 4.7798 7.3702 5.10 7.00

2 4 35.6000 1.43527 .71764 33.3162 37.8838 33.80 36.90

3 4 28.0250 3.86124 1.93062 21.8809 34.1691 25.80 33.80

4 4 11.2500 .23805 .11902 10.8712 11.6288 11.00 11.50

5 4 7.8000 .21602 .10801 7.4563 8.1437 7.50 8.00

Total 20 17.7500 12.26941 2.74352 12.0077 23.4923 5.10 36.90

data

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 2807.025 4 701.756 197.845 .000

Within Groups 53.205 15 3.547

Total 2860.230 19

111 1. Data dan AnalisisMalondialdehide (MDA)MammaeMencit (Mus musculus) Betina Yang

Diinduksi 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dengan berbagai perlakuan dan

ulangan yang berbeda:

Perlakuan

Ulangan

Total

Rerata 1 2 3 4

K- 5.1 6.4 7 5.8 24.3 6.07

K+ 33,8 35,1 36.6 36,9 138 35,6

P1 26,9 26,5 25,8 26 99,43 28,03

P2 11,5 11,4 11 11,1 43,29 11,25

P3 7,9 7,8 7.5 8 29,93 7,8

Total 79,22 76,99 76,92 77,5 334.95 79,66

Keterangan:

K-: Pelarut ekstrak sirsak (minyak jagung) + Pelarut DMBA (Na CMC)

K+: Pelarut ekstrak sirsak (minyak jagung) + DMBA




X = 334,95= 16,75

20

FK = 334,92= 112158,01 = 5607,90

2 20

JKtotal= 5,12 + 6,4

2 + 7

2 + 5,8

2 +...8

2 – FK

= 8079,42 - 5607,90 = 2471,5

JKperlakuan=23,9282+ 138

2 + 99.428

2 + 43.285

2 + 29.928

2– FK

4

=31747,06 - 5607,90 = 2328,9

4

JKgalat= JK Total percobaan-JK Perlakuan

=2471,5 - 2328,9

= 142,6

112 2. Ringkasan Hasil ANOVA Satu Arah Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak

(Annona muricata L.) Terhadap Kadar Malondialdehide (MDA) Mammae Mencit (Mus

musculus) Betina Yang Diinduksi 7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA)secara in vivo.

SK db JK KT Fhitung F1%

Perlakuan 4 2807.025 701.756 197.845 4.89

Galat 15 23.205 3.547

Total 19 2860.230

Keterangan: SK = Sumber Keragaman

db = Derajat Bebas

JK = Jumlah Kuadrat

KT = Kuadrat Tengah

Uji DUNCAN 1 %

DUNCAN 1 % = Q0.01 (4,18) x KT Galat

Ulangan

= 5,09 x 0.581

4

= 5,09 x 0.38 = 1.9342

3. Data Pengaruh PemberianEkstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Kadar Malondialdehide (MDA)Mammae Mencit (Mus musculus) Betina Yang Diinduksi

7,12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) Secara In Vivo.

Perlakuan Total Rerata (nmol/ml) Notasi DUNCAN 1%

Kontrol - 24.3 6.1 ± 0.8 a

Kontrol + 142.4 35.6 ± 1.4 b

P1 (100 mg/kg BB) 105.2 28.03 ± 0.5 c

P2 (150 mg/kg BB) 45 11.3 ± 0.24 d

P3 (200 mg/kg BB) 31.2 7.8 ± 0.22 e

Documents

Lampiran 1. EKSPERIMENTAL TIME LINE Minggu ke- 1 2 3 ...etheses.uin-malang.ac.id/504/11/09620017 Lampiran.pdf95 Lampiran 1. EKSPERIMENTAL TIME LINE Perlakuan Minggu ke- 1 2 3 4 5 6