LAPORAN PRAKTIKUM FITOKIMIA

KOLOM CEPAT

KELOMPOK 9:

Ratna Kusmawati 115070500111014

Riyandini Fairuz N. 115070500111016

Rizta Widya P. 115070500111024

Shella Febyuli Ulya 115070500111004

Asfarina Hapsari 115070513111001

Gracia Putra Secunda 105070501111006

Ikhsanti Tri Yunita 105070500111025

PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG

2013

Ditambahkan satu lapis fase diam serbuk silica secukupnya ke dalam kolom

Disiapkan serbuk silica sebanyak 10 gram, dimasukkan serbuk silica pada kolom, kemudian diratakan dengan cara ditekan-tekan

Disiapkan kolom yang dipasang dalam rangkaian alat pompa vakum dan dimasukkan vial di dalam labu sebagai wadah tetesan

Dimasukkan n-heksan sebanyak 10 ml ke dalam kolom

Ditimbang ekstrak 1 % dari jumlah serbuk silica yang digunakan, dilarutkan dalam methanol 1 ml, ditambahkan silica kristal secukupnya hingga kering, dimasukkan ke dalam kolom

Dinyalakan vakum dan ditampung tetesan hingga habis, diambil vial dan diganti vial lain

1. TUJUAN

Tujuan dari praktikum Kolom cepat ini adalah mahasiswa mampu

melakukan fraksinasi ekstrak dengan menggunakan kromatografi kolom cepat

dan mengidentifikasi komponen yang didapat melalui kromatografi lapis tipis.

2. ALAT DAN BAHAN

Alat-alat yang digunakan pada praktikum kolom cepat ini adalah

seperangkat alat vakum, kromatografi kolom cepat, timbangan analitik, vial,

gelas ukur, gelas beaker, cawan porselen, kertas saring, plat KLT,

spektrofotometri UV-VIS. Sedangkan bahan-bahan yang digunakan adalah

serbuk silika, n-heksan, etil asetat, metanol, silika kristal, ekstrak biji

makassar.

3. PROSEDUR KERJA

Ditambahkan n-heksan sebanyak 10 ml ke dalam kolom

Ditambahkan eluen:ke-2 n-heksan:etil asetat = 9:1ke-3 n-heksan:etil asetat = 8:2ke-4 n-heksan:etil asetat = 7:3ke-5 n-heksan:etil asetat = 6:4ke-6 n-heksan:etil asetat = 5:5ke-7 n-heksan:etil asetat = 4:6ke-8 n-heksan:etil asetat = 3:7ke-9 n-heksan:etil asetat = 2:8ke-10 n-heksan:etil asetat = 1:9ke-11 n-heksan:etil asetat = 0:10

Dinyalakan vakum dan ditampung tetesan hingga habis, diambil vial dan diganti vial lain

Hasil yang ditampung di vial dari tiap fraksi dilakukan KLT

4. PERHITUNGAN

Perbandingan Eluen:

a) N-heksana : Etil Asetat = 9 : 1

N-heksana = 9

10 x 10 mL = 9 mL

Etil Asetat = 1

10 x 10 mL = 1 mL

b) N-heksana : Etil Asetat = 8 : 2

N-heksana = 8

10 x 10 mL = 8 mL

Etil Asetat = 2

10 x 10 mL = 2 mL

c) N-heksana : Etil Asetat = 7 : 3

N-heksana = 7

10 x 10 mL = 7 mL

Etil Asetat = 3

10 x 10 mL = 3 mL

d) N-heksana : Etil Asetat = 6 : 4

N-heksana = 6

10 x 10 mL = 6 mL

Etil Asetat = 4

10 x 10 mL = 4 mL

e) N-heksana : Etil Asetat = 5 : 5

N-heksana = 5

10 x 10 mL = 5 mL

Etil Asetat = 5

10 x 10 mL = 5 mL

f) N-heksana : Etil Asetat = 4 : 6

N-heksana = 4

10 x 10 mL = 4 mL

Etil Asetat = 6

10 x 10 mL = 6 mL

g) N-heksana : Etil Asetat = 3 : 7

N-heksana = 3

10 x 10 mL = 3 mL

Etil Asetat = 7

10 x 10 mL = 7 mL

h) N-heksana : Etil Asetat = 2 : 8

N-heksana = 2

10 x 10 mL = 2 mL

Etil Asetat = 8

10 x 10 mL = 8 mL

i) N-heksana : Etil Asetat = 1 : 9

N-heksana = 1

10 x 10 mL = 1 mL

Etil Asetat = 9

10 x 10 mL = 9 mL

j) N-heksana : Etil Asetat = 0 : 10

N-heksana = 0

10 x 10 mL = 0 mL

Etil Asetat = 1010

x 10 mL = 10 mL

Data Penimbangan :

Berat cawan kosong = 74,5996 gram

Berat silica serbuk = 10 gram

Berat cawan+silica awal = 84,5996 gram

Berat cawan+ silica akhir = 76,1249 gram

Berat silica yang digunakan = Berat awal – Berat akhir

= 84,5996 gram - 76,1249 gram

= 8,4747 gram

Ekstrak yang digunakan = 1% X Berat silica yang digunakan

= 1

100 X 8,4747 gram

= 0,084747 gram

= 0,085 gram

5. DATA PENGAMATAN

NO PERLAKUAN PENGAMATAN

1 Ditimbang serbuk silica sebanyak

10 gram

Didapat serbuk silica 10 gram

berwarna putih

2 Diratakan serbuk silica pada

kolom dengan cara ditekan-tekan

Serbuk silica berada di dalam kolom

sebanyak 8,4747 gram

3 Dimasukkan n-heksan 10 ml,

dinyalakan vakum, ditampung

tetesan

Serbuk silica terbasahi oleh n-heksan,

tetesan n-heksan tertampung di vial

4 Ditimbang ekstrak 1% dari

jumlah serbuk silica yang

digunakan

Didapat ekstrak sebesar 0,085 gram

5 Diambil metanol 1 ml, ditimbang

silica kristal sebanyak 2 gram

Didapat 1 ml metanol dan 2 gram dan 2

gram silica kristal

6 Dilarutkan ekstrak dalam metanol Ekstrak larut dalam metanol

7 Dikeringkan (6) dengan silica

kristal

(6) menjadi kering

8 (7) dimasukkan kolom (7) berada di dalam kolom

9 Ditambahkan 1 lapis fase dalam

qs dan ditekan-tekan

Fase diam diatas (7) di dalam kolom

10 Dimasukkan n-heksan 10 ml,

dinyalakan vakum, ditampung

tetesan sampai habis

Vial 1 terisi tetesan dari kolom

11 Dilakukan prosedur yang sama

untuk eluen selanjutnya :

a. n-heksan : etil asetat = 9 :

1

b. n-heksan : etil asetat = 8 :

2

c. n-heksan : etil asetat = 7 :

3

d. n-heksan : etil asetat = 6 :

4

e. n-heksan : etil asetat = 5 :

5

f. n-heksan : etil asetat = 4 :

6

g. n-heksan : etil asetat = 3 :

7

h. n-heksan : etil asetat = 2 :

8

i. n-heksan : etil asetat = 1 :

9

j. etil asetat 10 ml

Vial 2 terisi tetesan dari kolom

Vial 3 terisi tetesan dari kolom

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

(belum dilaksanakan)

12 Dilihat KLT untuk masing-

masing fraksi

a. n-heksan : etil asetat = 9 :

1

b. n-heksan : etil asetat = 8 :

2

c. n-heksan : etil asetat = 7 :

3

d. n-heksan : etil asetat = 6 :

4

e. n-heksan : etil asetat = 5 :

5

f. n-heksan : etil asetat = 4 :

6

g. n-heksan : etil asetat = 3 :

7

h. n-heksan : etil asetat = 2 :

8

i. n-heksan : etil asetat = 1 :

9

j. etil asetat 10 ml

(belum dilaksanakan)