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faviogutierrez
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micrbiologia
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PRACTICA 1: OBSERVACION EN FRESCO Y COLORACION
OBSERVACION DE CULTIVO EN FRESCO OBJETIVOS:
Poder reconocer y observar estructuras microbianas con el uso del microscopio.con diferentes tipos de preparaciones como en fresco, y apreciar el uso de la microbiología con diferentes microorganismos
METODOLOGIA:1) Se esteriliza el porta objeto con el mechero2) Se agrega dos gotas de melaza en el porta objeto3) Se esparce en la superficie de la lamina 4) Se agrega el cultivo a la muestra5) Se coloca el cubre objeto6) Se observa en el microscopio
RESULTADOS
Fig. numero 01: vista microscópica del preparado en fresco de la bacteria “BACILLUS NICHELIFORMIS”
Material biológico: Bacillus licheniformisTipo de preparado: En frecoObservaciones: BacillusObjetivo: 40xAumento: 400 aumento
OBSERVACION DE CULTIVO EN SECO OBJETIVOS:
Poder observar en la muestra, su forma , color, tamaño por medio del microscopio.
METODOLOGIA: Se esteriliza el porta objeto con el mechero Se agrega dos gotas de melaza en el porta objeto Se agrega el cultivo a la muestra Se pasó por el mechero para secar la muestra
RESULTADOS:
Muestra : Cultivo
Preparacion: En seco
Aumento : 400x
COLORACION GRAM O COMPUESTA OBJETIVOS:
Aprender a identificar la morfología bacteriana y tipo de tinción gran positivao gran negativas
METODOLOGIA:1) Esterilizar el portaobjeto2) Esterilizar el gancho 3) Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto4) Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo 5) Secamos la muestra6) Colocar dos gotas de violeta de cristal en la muestra dejándolo colorear por
dos minutos , quitar el exceso7) Colocar el lugol dejándolo reposar 2 minutos, quitar el exceso8) Lavar las láminas con alcohol de acetona hasta llegar a decolorar9) Por último echar zafranina dejándolo colorear 2 minutos10) Finalmente lavar con agua y dejar secar11) Llevar al microscopio
RESULTADOS:
g
Figura 02: Observacion de la bacteria BACILLUS LICHENIFORMIS en coloración compuesta
Muestra: Cultivo o suspensión bacterianaPreparación: En frescoAumento: 400x
COLORACION SIMPLE OBJETIVOS:
Aprender la técnica de preparación , y de coloración en el estudio microscópico de cultivos bacterianos
METODOLOGIA:1) Esterilizar el portaobjeto2) Esterilizar el gancho 3) Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto
4) Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo
5) Secamos la muestra6) Colocar dos gotas de azul de
metileno dejándolo colorear por un minuto
7) Se lava con agua 8) Se lleva al microscopio
RESULTADOS:
Figura 03: Observación microscópica de la bacteria BACILLUS LICHENIFOMIS en coloración simple
Muestra: Cultivo o suspensión bacterianaPreparacion : En frescoAumento: 400x
PRACTICA 2: MEDIOS DE CULTIVO
DILUSIONES
OBJETIVOS:
Es generar colonias aisladas mediante una dilución, en un medio de cultivo
METODOLOGIA:1) Preparar 250 ml de solución salina fisiológica al 0,85%2) Agregar 4,5 ml de solución salina fisiológica a cada frasco: 10−1, 10−2 y 10−3.3) Agregar una muestra de microbio utilizando el asa bactereológica añadiendo
dicha muestra al frasco de 10−1 solución salina fisiológica.
4) Transportar una parte de la muestra (0,5ml) de la dilusión del frasco de 10−1 a otro
frasco ( 10−2) realizando éste mismo proceso para el frasco de 10−3.
5) Del frasco de 10−1 extraer 0.1ml y colocar una gota en la muestra de agar MacK Conkey
6) Esterilizar el asa triangular, pasar por la superficie de la placa Petri para su enfriamiento
7) Esparcir la gota de la dilusión por todo el cultivo8) Esterilizar el asa triangular 9) Se realizó en mismo procedimiento con el frasco de 10−2
10) Para finalizar se cubrieron las placas. RESULTADOS:
Figua01: Diluciones con solución salinica
PRACTICA 3: OBSERVACION DE CULTIVOS
RESULTADOS:
PRACTICA 4: INHIBICION DE LAS BACTERIAS EFECTO DE LOS DESINFECTANTES Y ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO
BACTERIANO
OBJETIVOS:Saber si el microorganis puede ser resistente
RESULTADOS:p
BACTERIAS INIBICION POR DESINFECTANTES
RESISTENTES INTERMEDIOS SENSIBLE
BACILUS SP X
ECHARICHIA COLI X
ESPECIE BACTERIANA
CARACTERÍSTICAS
COLOR TAMAÑO BORDE ASPECTO ELEVACIÓN
E. COLI Mostaza Mediano Ondulado Cremoso Convexo
BACILUS SP Crema Grande Ondulado Cremoso Plano
BACILUS SP Crema Pequeño Ondulado Cremoso Plano
VIBRIO PARAEMOLITUCUS
Verde Pequeño Ondulado Brillante Convexo
VIDRIO PARAEMOLITUCOS
PRACTICA 5: METABOLISMO BACTERIANO
Prueba 01: Hidrolisis de almidón
OBJETIVOS:
Ver si las bacterias son capaces de llegar a utilizar el almidón como nutrienteSaber que bacterias producen amilasa
Metodologia:
Sembramos un cultivo en una placa Petri, en donde la especie bacteriana será BACILLUS, y lo sembramos en un medio de AGAR ALMIDÓN (AA).
Este medio de cultivo se colocó a una temperatura de 37°C por 24 horas. Luego añadimos una cantidad suficiente de solución yodada de lugol al medio de
cultivo sin tener contacto el BACILLUS directamente, es decir la solución debe ser añadida al contorno de la especie bacteriana.
Luego esperamos unos segundos para ver cómo actúa la solución yodada en este medio de cultivo.
Finalmente apuntamos lo observado.
RESULTADOS:
Figura 01: resultado de la prueba de hidrolisis de almidon
Identificación de gran (+) y gran (-) Muestra que hay almidón por la coloración azul alrededor de la placa petri
Prueba 02: Diferenciación de pseudomas
METODOLOGIA:
Tenemos 2 tubos de ensayo, en donde cada uno es una muestra diferente, las cuales, estuvieron en AGAR DESOXICOLATO.
Observamos cómo reaccionan cada una de ellas.
Finalmente apuntamos la reacción tanto del tubo de ensayo donde había presencia de SALMONELLA y en el otro tubo de ensayo donde había presencia de ESCHERICHIA COLI.
FIGURA 02 : Identificación de Pseudomonas en el tubo amarillento.
Prueba 03: SIEMBRA EN PUNTURA
METODOLOGIA:
Para esta prueba trabajamos con dos tipos de muestras diferentes. Una de ellas es
SALMONELLA y la otra es ESCHERICHIA COLI.
Estas muestras fueron colocadas en un medio de cultivo de AGAR TRIPLE AZUCAR
HIERRO (TSI).
Con un asa bacteriológica (en punta) coger una cantidad significativa del medio de
cultivo.
Introducir la punta hasta el fondo
del tubo.
Luego se retira el asa, se estría el
pico con un movimiento en forma
de zigzag, de un lado al otro
Incubar a una temperatura de 35-
37°C por 24 horas
Luego esperamos a ver los
cambios que ocurrieron en las dos
muestras
RESULTADOS:
FIGURA 03: Observacion de bacterias reductoras (E. coli)
PRUEBA Nº04: OBTENCIÓN DE DIÓXIDO DE CARBONO (CALDO GLUCOSADO)
Objetivos:
Determinar crecimiento de hongos y levaduras
METODOLOGIA:
Colocamos glucosa en un tubo de ensayo.
Luego colocamos la campana de Durham
dentro del tubo de ensayo para la obtención
del Dióxido De Carbono
Luego observar si hay presencia de Dióxido
De Carbono en el tubo de ensayo.
RESULTADOS:
FIGURA 04: Observacion de gas en los tubos
PRUEBA 05: CALDO PECTONADO
METODOLOGIA:
Poner en un tubo de ensayo el caldo de
peptona
Luego poner el papel acetato de plomo,
para incubar la muestra por 37
centígrados por 24 horas.
Luego revisar si se ha manchado el papel
de color negro.
RESULTADOS:
FIGURA 05: Turbidez en las soluciones del tubo