MIKROSKOP

Svjetlosna mikroskopija

• 1665. Robert Hook prvi je uveo naziv “stanica” promatrajući pluto jednostavnim mikroskopom.

• 1670. Leewenhoek – promatrao različite tipove stanica (spermije, eritrocite, bakterije) mikroskopom koji je povećavao 300 puta.

• 1838. Schleiden (biljne stanice) i Schwan (životinjske stanice) preložili su staničnu teoriju -svi su organizmi građeni od stanica – rođenje stanične biologije.

Svjetlosna mikroskopija

• Maksimalna moć razlučivanja svjetlosnog mikroskopa iznosi približno 0,2μm.

• Dva objekta koja se nalaze na manjoj udaljenosti od 0,2μm uočavaju se kao jedan objekt ili slika.

• Moć razlučivanja svjetlosnog mikroskopa određena je valnom duljinom (λ) vidljive svjetlosti i sposobnošću leće mikroskopa da sakuplja svjetlost (numerička apertura, NA)

Svjetlosna mikroskopija

Moć razlučivanja = 0,61 λ / NA

• Numerička apertura je stožasti snop svjetla koji nakon prolaska kroz biološki uzorak ulazi u leće mikroskopa.

NA = η sin alfa • η - indeks loma svjetlosti medija kroz koji

svjetlost prolazi. Za zrak iznosi 1 a upotrebom imerzionih sredstava može se povećati do 1,4.

MIKROSKOP

•Mikroskop je optički instrument kojim se postiže veliko povećanje slike bliskih predmeta i tako omogućuje promatranje vrlo sitnih objekata i detalja.

•Složeni mikroskop (kakav se u praksi najčešće susreće) sastoji se od dviju konvergentnih leća: objektiva (koji je relativno blizu predmeta) i okulara (kroz koji se gleda), te od pomoćnih dijelova: stolića, makrovijka, mikrovijka, izvora svjetla i kondenzora.

• Mali predmet (preparat koji se mikroskopira - crveno!) nalazi se ispred objektiva (jaka konvergentna leća), na udaljenosti tek malo većoj od žarišne daljine objektiva. Stoga objektiv daje realnu, uvećanu ali obrnutu sliku malog predmeta (plavo!). Možete ju vidjeti ako izvadite okular.

• Objektiv i okular su podešeni tako da ta slika padne u blizinu žarišta, no ipak unutar žarišne daljine okulara (konvergentne leće). Tada će se kroz okular (poput lupom) vidjeti uvećana, obrnuta i virtualna slika malog predmeta (zeleno!).

Kratak naputak o mikroskopiranju u šest koraka:

• 1.KORAK: Podešavanje izvora svjetla i kondenzora.•

2.KORAK: Pričvršćivanje predmeta.•

3.KORAK: Spuštanje tubusa.•

4.KORAK: Podizanje tubusa i pronalaženje slike.•

5.KORAK: Izoštravanje slike.•

6.KORAK: Manipulacija predmetom.

KORAK 1: Podešavanje izvora svjetla i kondenzora.

KORAK 2: Pričvršćivanje predmeta

KORAK 3: Spuštanje tubusa.

KORAK 4:Podizanje tubusa i pronalaženje slike.

KORAK 5:Izoštravanje slike.

KORAK 6:Manipulacija predmetom.