Upload
adalgisa-balan
View
295
Download
1
Embed Size (px)
Citation preview
8/7/2019 patulina ppt2003
1/16
Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publicaFacultatea de Medicina Veterinara Bucuresti
DETERMINAREA PATULINEI DIN SUCUL DE MERE, PRINCROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALT PERFORMAN
MASTERAND: ANA-MARIA GOLOBORODCO
8/7/2019 patulina ppt2003
2/16
PATULINA, MICOTOXIN CU RISC PENTRU SNTATEA CONSUMATORILOR
Micotoxinele sunt produi metabolici ai fungilor, care sunt capabili s produc efecte
toxice acute sau cronice (cancerigene, mutagene, teratogene) asupra animalelor i asupra
oamenilor.Patulina este o micotoxin produs n special de mucegaiurile Penicillium patulum,
Penicillium expansum, Penicillium claviforme, Aspergillus clavatus,
cu efecte toxice asupra organismului uman i animal.
P
atulina este stabil, n special, n produsele procesate din mere: suc de mere, succoncentrat de mere, nectar de mere, nectar de fructe (care are ca ingredient i sucul de
mere), piure de mere, compot de mere etc.
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
3/16
Fermentaia alcoolic distruge patulina i, prin urmare, produsele fermentate,cum sunt cidrul de mere i cidrul de pere, nu conin patulin.
Patulina a fost descoperit n produsele fermentate crora li s-a adugat suc de
mere contaminat cu patulin, dup fermentare.
Patulina este relativ termostabil, n mod special, la pH acid. Tratamentele la
temperaturi nalte (150rC) duc la o reducere cu 20 % a concentraiei de patulin.
Procesarea termic nu este suficient pentru a asigura obinerea unui produs liber
de patulin.
Patulina apare n principal n fructele mucegite. n anumite situaii, dezoltarea n
interior a mucegaiurilor are drept cauze atacul insectelor sau altor invadri ale
esuturilor sntoase, determinnd apariia patulinei n fruct, care la exterior apare
ca fiind neafectat.
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
4/16
Din punct de vedere chimic, patulina este o furopiranon, cu masa molecular
154, stabil n mediu acid, dar instabil n mediu alcalin. Se prezint sub form de
cristale incolore, rombiforme sau prismatice, cu punct de topire de 110,5rC, cu
maxim de absorie la 276 nm, n soluie alcoolic
FORMULA STRUCTURAL A PATULINEI
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
5/16
Pentru evaluarea riscurilor pe care le prezint patulina asupra organismului, au
fost ntreprinse studii, pe o perioad de peste cincizeci de ani.
Simptomele acute determinate de consumul unor produse contaminate cu patulin,pot fi: agitaie, convulsii, dispnee, congestie pulmonar, edem, ulceraii, hemoragie
intestinal, degenerarea celulelor epiteliale, inflamaie gastrointestinal, stare devom.
Consumul frecvent al unor produse contaminate cu patulin, peste limitele maxim
admise, poate determina n timp, urmtoarele efecte asupra organismului uman:
efecte neurotoxice,
hepatotoxice,imunosupresive,
teratogene,
cancerigene.
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
8/7/2019 patulina ppt2003
6/16
Limitele maxim admise pentru coninutul n patulin al unor alimente(Ordin nr. 530/2007)
Nr.crt.
Produs Nivel maxim alpatulinei (ppb)
1. Suc de fructe i nectar de fructe, n special suc de mere i sucurilede fructe utilizate ca ingrediente pentru alte buturi 50
2. Suc de fructe concentrat dup reconstituire, conformspecificaiilor productorului
50
3. Buturi spirtoase, cidru i alte buturi fermentate derivate dinmere sau coninnd suc de mere
50
4. Produse solide din mere, inclusiv compot de mere i piure de mere,
destinate consumului direct
25
5. Suc de mere i produse solide din mere, inclusiv compot de mere ipiure de mere pentru sugari i copii de vrst mic
Alte alimente pentru copii altele dect cele pe baz de cerealeprocesate
10
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
7/16
Specialitii din cadrul Institutului de Bioresurse Alimentare, au elaborat i validato metod de determinare a patulinei din sucul de mere, prin lichid cromatografie de
nalt performan.
Principiul metodei: Extracia n acetonitril a patulinei din proba de analizat i
purificarea extractului obinut, utiliznd coloane C.U. Patulin (MycoSep228).Eluatul obinut este evaporat pn la sec i reconstituit. Patulina este separat pe
coloan cromatografic C18 - Hypersil Gold (cromatograf lichide de nalt
performan Thermo - Finnigan), eluat n faz mobil i detectat la o lungime de
und de 276 nm, utiliznd un detector UV-VIS cu ir de diode ,,DIODE ARRAY.
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
8/16
Pregtire eantionpentru analiz
Extracie patulin
Purificare extract
Evaporare extract
Redizolvare reziduu
Detecie HPLC apatulinei
Etapele metodei de determinare a patulinei din sucul de mere
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
9/16
Metoda de prelevare a probelor pentru controlul oficial al nivelurilor de patulin n
anumite alimente este prezentat n Anexa IV a Normei sanitare veterinare i pentru
sigurana alimentelor privind anumii contaminani din alimentele de origine animal i
nonanimal, aprobat prin Ordinul 530/2007.
Proba global trebuie s fie reprezentativ pentru lotul supus analizei i trebuie s
cntreasc cel puin 1 kg.
Probele elementare trebuie s aib mas similar. Masa unei probe elementare
trebuie s fie de cel puin 100 grame, rezultnd o prob global de cel puin 1 kg.Abaterea de la aceast regul trebuie s fie consemnat n procesul verbal de
prelevare.
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
10/16
MOD DE LUCRU
1. Extracia patulinei din sucul de mere, se realizeaz n acetonitril
Omogenizare suc de mere cu solventProbe de suc de mere
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
11/16
8/7/2019 patulina ppt2003
12/16
3. Evaporarea extractului de patulin purificat:
Se realizeaz cu ajutorul unui bloc de nclzire cu sistem de concentrare a probei natmosfer de azot.
Evaporarea extractului de patulin purificat
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
13/16
4. Detecia patulinei prin cromatografie de lichide de naltperforman
S-a utilizat un cromatograf Thermo Finnigan cu detector UV-VIS cu ir de diode,,DIODE ARRAY.
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
14/16
Spectru al patulinei
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
Curba de calibrare
8/7/2019 patulina ppt2003
15/16
n intervalul de concentraii 10 g/l 400 g/l, recuperarea medie este 89,64%.
n cazul metodei propuse pt. determinarea patulinei prin lichid cromatografie de naltperforman, limita de detecie (LOD) este 3,71 g/l, iar limita de cuantificare (LOQ)
este 7,42 g/l.
Metoda prezentat pt. determinarea patulinei din sucul de mere prin cromatografiede lichide de nalt performan este acreditat de RENAR.
DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN
Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica
8/7/2019 patulina ppt2003
16/16
V mulumesc pentru atenie !