Upload
likoh-timothy
View
72
Download
1
Embed Size (px)
DESCRIPTION
oqkdaokaosa
Citation preview
PEMERIKSAAN BAKTERI DENGAN PEWARNAAN
ADI HARTONO
10/6/2008 1
Pewarnaan
• Suatu teknik untuk mempelajari morfologi bakteri dengan cara pemberian zat warna kepada sel bakteri.
• Bagian-bagian sel dapat diamati, karena dapat menyerap zat warna yang berbeda oleh masing-masing bagian sel.
10/6/2008 2
Kenapa perlu diwarna ?
• Bakteri ukurannya sangat kecil 05-1 u x 10 u• Dibawah mikroskop tidak jelass bagian-
bagian nya.• Untuk melihat dengan jelas perlu diberi zat
warna.
10/6/2008 3
Umumnya ada 2 macam zat warna
• Zat warna bersifat asam Komponen warnanya adalah anion Dalam bentuk garam natrium
• Zat warna bersifat basa Komponen warna kation. Dalam bentuk klorida
10/6/2008 4
Macam-Macam Zat Warna Bakteri
No Nama Zat Pewarnaan Warna Bakteri
1 Sapranin Merah2 Gentian violet Ungu3 Methylen blue Biru4 Malachit green Hijau5 Karbol fuchsin Merah
10/6/2008 5
Struktur Sel
Sel terdiri dari :• Dinding sel , terdiri dari :
- lapisan peptidoglikan- asam teikoat
• Membran plasma, terdiri dari :- membran protein- lapisan fosfolipid
10/6/2008 6
Macam-Macam Pewarnaan
1. Pewarnaan Sederhana- Menggunakan 1 macam zat warna.- Warna bakteri hanya 1- Tidak dapat membedakan sifatnya.- Untuk melihat ukuran dan bentuknya.
10/6/2008 7
2. Pewarnaan Differensial
- Menggunakan lebih dari 1 zat warna- Membedakan sifat bakteri.- Melihat bagian-bagian bakteri.- Dapat digunakan untuk identifikasi bakteri tahap awal.
10/6/2008 8
Macam-Macam Pewarnaan Differensial
1. Pewarnaan Gram2. Pewarnaan BTA
3. Pewarnaan Spora4. Pewarnaan Granul
10/6/2008 9
Fiksasi
• Proses melengketkan sediaan pada kaca obyek.
• Bakteri mati, tetpai tidak lisis.• Secara Kimia : metanol• Secara Fisika : pemanasan diatas nyala api.
10/6/2008 10
Pewarnaan Gram
• Ditemukan Christian Gram (1884).• Pewarnaan dasar dan rutin dalam
identifikasi bakteri lebih lanjut.• Kuman dibagi dua :
- Gram positif berwarna ungu- Gram negatif berwarna merah.
10/6/2008 11
Tahap pewarnaan Gram
Perlakuan WaktuWarna Bakteri
Gram + Gram -Pembuatan preparatFiksasiGentian violet 30 detik ungu unguCuci dengan airLarutan iodium
30 detik - -
Cuci dengan air dan keringkanDekolorisasi dengan alkohol 20 detikCuci dengan air dan keringkanSapranin 30 detik ungu merah10/6/2008 12
Pewarnaan BTA
• Untuk mengidentifikasi kuman M. tbc dan M. leprae
• Kuman M.tbc dan M. leprae mempunyai dinding sel yang banyak mengandung lipid.
• Sukar ditembusi zat warna biasa.• Perlu pemanasan.• Bakteri M tbc dan M leprae berwarna merah.
10/6/2008 13
Tahap Pewarnaan BTABuat preparat.
FiksasiZat Warna Karbol Fuchsin sambil dipanaskan (tidak
mendidih) 3 menit.Cuci dengan air
Pelunturan dengan asam alkohol hingga bersih.Methylen blue 1 menit.
10/6/2008 14
Zat Warna Pewarnaan BTA
• Karbol fuchsin = merah.• Methylen blue = biru.• Asam alkohol sebagai peluntur.• Kuman BTA positif : batang berwarna merah.• Kuman BTA negatif : batang berwarna biru.• Sensitifitas : 5000 BTA / ml sputum.
10/6/2008 15
Metoda Pewarnaan BTA
1. Ziehl Nellson2. Kinyoun Gabbet3. Tan Tiam Hook.
10/6/2008 16
10/6/2008 17