Upload
drtonggo-gerdina-panjaitan
View
163
Download
20
Embed Size (px)
DESCRIPTION
tehnik pemeriksaan pada HIV
Citation preview
PEMERIKSAAN SEROLOGI ANTIGEN p24 PADA INFEKSI HIV
YANTIAGNES R INDRATI
SENIN 22 OKTOBER 2012
PENDAHULUAN
HIV• Ditemukan sjk 25 thn • Identifikasi & diagnosis
sgr → terapi yg tepat
WHO & UNAIDS (2009)
• 33,3 JT HIV → 2,6 JT (BR) → 1,8 JT (MENINGGAL)
• 2,5 JT ANAK → 370 RB (BR) → 260 RB (MENINGGAL)
Diagnosis HIV
Pndrt tdk menyadari sdh
terinfeksiPeriode jendela
Pada bayi berusia < 18
bln
• Pedoman terapi ART• Tdk dpt dgn pemeriksaan
AbDiagnosis dini
HIV pd bayi
• Pemeriksaan standar pd HIV
• Harganya mahalPCR DNA &
PCR RNA
• Terbentuk 11-13 hr• Tdk perlu wkt lamaAntigen p24
Definisi HIV
Epidemiologi HIV
Patogenesis & pemeriksaan Ag p24 pd HIV
Etilogi HIV
Tinjauan Pustaka
TINJAUAN PUSTAKA
AIDS → peny disebabakan inf virus HIV → merusak sel limfosit T
AIDS → kumpulan gjl penyakit krn me ↓ daya tahan tubuh akibat inf HIV
Pertama dikenal thn 1981
EPIDEMIOLOGI
Data WHO & UNAIDS 2009
33,3 jt HIV (+)
2,6 jt kasus
baru, 1,8 jt → +
WHO
2,5 jt psn anak
370 rb → kasus
baru, 260 rb → +
Data thn 20097 rb kasus
baru → tiap hr
(97% ngr bekemban
g50% (wnt), 40 (dws muda)
EPIDEMILOGI DI INDONESIA
KLASIFIKASI
Virus RNA
Fam: Retroviridae
Genus: lentivirus
Subfam: Lentiviridae
HIV
HIV 1
HIV 2
HIV
HIV 1
M (Major) tdd 11 subtipe
N (New/ nonM,no
no)O
(Outlier)
HIV 2 → subtipe A - F
HIV 2 kurang patogen dibanding HIV 1
HIV 1 → kasus terbanyak
KLASIFIKASI BERDASARKAN STAD KLINIK
Stadium
klinik (WHO)
Asimtomatik
Sakit ringan
Sakit sedang
Sakit berat (AIDS)
VIROLOGI
PATOGENESIS
RESPON IMUN TERHADAP HIV
Setelah terinfeksi HIV → tbh
membtk sist imun
Sel B m’hslkan Ab
spesifik
Ab netralisasi thd regio di gp 120 selubu
ng virus &
bag external gp41
Ig G (Ab utama)
Ig M
Deteksi Ab dlm
darah →
dasar pemeriksaan
HIV
Ig G tinggi selama infeksi
Ig M turun
Produksi Ig diatur CD4 (diaktifkan APC)
Menhasilkan sitokin (IL2) → merangsang sel B membelah & b’diferensiasi → sel plasma
Sel plasma → Ig spesifik Ag yg merangsang
Stimulasi NK (olh IL-12) → mengenali & menghancurkan sel yg terinfeksi virus → perforin
CD 8 (mengikat sel terinfeksi) → perforin → sel mati pd awal infeksi
CD 8 → menekan replikasi HIV di dlm CD 4 → aktifitasnya ↓ → berat penyakit
• IL 2• Interferon gamma
CD 4 (fgs regulator) dlm
sist imun
• Menarik makrofag• Mengintensifkan rx imun
thd Ag
CD 4 mengeluarkan
INF γ
• Produksi sel plasma• Pertumbuhan & aktifasi
antivirus sel CD 8IL 2 berperan
ptg
Profil serologi pd infeksi HIV
Diagnosis pada infeksi HIV
D/ HIV
Virologi
Materi
genetik
Komponen virus
Imunologi
Ab
Window
period (virem
ia)
RNA virus
Ag p24CD 4 dpt diukr
Ab HIV terbtk
Ag p24 ↓ →
kompleks Ab anti p24
↓
Fase AIDS → sist
imun ↓
Penapisan (sensitifitas ↑)
Konfirmasi (spesifitas ↑)
Lab pd HIV
Pemerikisaan kuantitatif (viral load) → PCR
DNA HIV → diagnosis infeksi HIV
RNA HIV → monitor terapi antiretroviral
PCR tdk pd
semua RS
Harganya mah
al
Tenaga
terlatih
Pem HIV dgn PCR →
kirim → hslnya lama
Diperlukan alat yg mudah, praktis (awal
infeksi)
Penderita HIV → terapi
antiretroviral
WHO Pocketbook of Hospital Care for Children merekomendasikan
Pemeriksaan Ab HIV
(ELISA/rapid) pd bayi < 18
bln
Konfirmasi bila hasil +
dgn pemeriksaan
virologi
Pemeriksaan Ab diulang
setelah 18 bln
Pemeriksaan
Ab HIV
ELISA/EIAWestern
Blot Rapid
Algoritme pemeriksaan HIV
Pemeriksaan HIV Ag p24
Diagnosis dini HIV ptg → berhub dgn mortalitas
Diagnosis pd bayi dr ibu HIV (+) → sulit (Ab ibu scr transplasenta)
Pemeriksaan Ab pd bayi < 18 bln → tdk dpt dilakukan
Ag p24 HIV → struktur tdd protein → membtk inti virus
Kadar Ag p24 ↑ pd serokonversi
Pemeriksaan p24 dpt dilakukan
Dr bbrp penelitian → sbg penapisan
Perkiraan perjalanan penyakit
Sensitivitas 10-95% dibanding PCR RNA → Diagnosis HIV
Monitor terapi antiretroviral
Ag p24 HIV
Pemeriksaan rapid Ag p24
• Me↑ efektifitas• Penapisan thd HIVRapid Ag p24
• Hasil (5-10 menit)• Me↓ kejadian HIV pd bayiRapid Ag p24
• RS & klinik tanpa tenaga ahli
• Hrgnya lbh murahRapid Ag p24
Pemeriksaan virologi HIV
PCR DNA (96%-99%)
Dpt dilakukan pd bayi
Sebgi alat diagnosis
TERIMA KASIH
Types ELISA non competititve
• Indirect ELISA• Direct ELISA• Sandwich ELISA
Sandwich ellisa
Western blot
• Western blot adalah suatu proses pemindahan protein dari gel elektroforesis ke membran nitroselulosa (deteksi protein spesifik)
• Protein yang terblot pada membran nitroselulosa dapat dideteksi dengan cara penambahan enzim.
Western blot
env gp160gp120gp 41
gag p55p18p24
pol p65p51p31
• Simple and rapid immunoassay• Lateral flow• Porous materials : nitrocellulose membrane or
glass fiber sheet• Capillary action analyte cen migrate from the
proximal end to the distal end• Absorbent pad set to maintain a constant
capillary flow rate• Label : colloidal gold or colored latex
Immunochromatography
• Tahap peleburan (melting) atau denaturasi. Pada tahap ini (berlangsung pada suhu tinggi, 94–96 °C) ikatan hidrogen DNA terputus (denaturasi) dan DNA menjadi berberkas tunggal. Biasanya pada tahap awal PCR tahap ini dilakukan agak lama (sampai 5 menit) untuk memastikan semua berkas DNA terpisah. Pemisahan ini menyebabkan DNA tidak stabil dan siap menjadi templat ("patokan") bagi primer. Durasi tahap ini 1–2 menit.
• Tahap penempelan atau annealing. Primer menempel pada bagian DNA templat yang komplementer urutan basanya. Ini dilakukan pada suhu antara 45–60 °C. Penempelan ini bersifat spesifik. Suhu yang tidak tepat menyebabkan tidak terjadinya penempelan atau primer menempel di sembarang tempat. Durasi tahap ini 1–2 menit.
• Tahap pemanjangan atau elongasi. Suhu untuk proses ini tergantung dari jenis DNA polimerase yang dipakai. Dengan Taq-polimerase, proses ini biasanya dilakukan pada suhu 76 °C. Durasi tahap ini biasanya 1 menit.
PCR
Mekanisme skematis dari amplifikasi NASBA
Acute Infection Shortly after exposure, many infected persons experience a flu-like illness that may resemble mononucleosis. Onset is typically abrupt. Common symptoms of acute infection include fever or sweats, myalgias or arthralgias, malaise and lethargy, lymphadenopathy, sore throat, anorexia, nausea and vomiting, headaches, photophobia, rash, and diarrhea. Symptoms usually resolve over two to three weeks.