PENGANTAR UMUMKROMATOGRAFI

DWIARSO R.

DEFINISI KROMATOGRAFI

Pemisahan campuran senyawa dalam suatu sampel berdasarkan perbedaan

interaksi sampel dengan fasa diam dan fasa gerak.

Fasa diam dapat berupa padatan atau cairan yang diletakkan pada permukaan fasa pendukung

Fasa gerak dapat berupa gas atau cairan

UMUM

Kegunaan : memisahkan dan mengidentifikasi senyawa dalam campuran.

Jenis-jenisnya: paper, thin layer, gas-liquid.

Semua teknik kromatografi mendasarkan pada prinsip partisi/afinitas/interaksi dua fasa untuk memisahkan campuran zat.

Fasa : Stationary phase & mobile phase.Senyawa dengan afinitas terkuat pada mobile phase akan bergerak lebih cepat atau lebih jauh.

Komponen penting dalam teknik kromatografi:

Fasa diam : support + stationary phase material

Fas gerak : solvent (or carrier gas)Jenis kromatografi

Fasa diam Fasa gerak

Paper Paper Organic or aqueous solvent.

Column preparative

Silica gel, alumina

Organic or aqueous solvent.

Thin layer Silica gel supported on plastic film

Organic or aqueous solvent.

G.L.C. High boiling point liquid on inert solid support.

Inert gas e.g. nitrogen.

KROMATOGRAFI KOLOM

KOLOM PREPARATIF

Sebuah perangkat untuk memisahkan campuan senyawa menggunakan kolom ukuran makro.

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

Thin Layer Chromatography - t.l.c.

Terbentuk sederet spot /noda.

Senyawa berwarna dan tak berwarna

Kualitatif : membandingkan sampel dengan standar/referensi.

Mengukur nilai Rf.

Pemisahan dan identifikasi KLT

KROMATOGRAFI GAS

Gas - Liquid Chromatography (GLC)Sample dimasukkan dgn

syringe.

Column memisahkan komponen.(dipanaskan dlm oven)

Detector memonitor senyawa yang keluar dari kolom.

Recorder memplotkan signal dan membentuk

kromatogram

GLC..................................cont’dApa yang terjadi di dalamnya?

Senyawa yang memiliki high affinity terhadapa fasa gerak akan keluar lebih dulu (most volatile).

Kromatogram mencatat respon detektor yg diplot terhadap waktu.

Puncak-2 yang terpisah menunjukkan komponen individu.

Retention time – merupakan karakteristik senyawa pada kondisi yang berlaku.

GLC.................cont’d Faktor-faktor yang menentukan waktu retensi:Panjang kolom

Material fasa diam

Jenis fasa gerak

Laju alir fasa gerak

Suhu kolom

KROMATOGRAM

Interpretasi

Info penting :

Dapat dipakai untuk kalibrasi

– senyawa standar ditambahkan dan kondisi operasional dijaga konstan, maka waktu retensi/posisi senyawa standar dapat diketahui.

Menunjukkan

jumlah senyawa

– area di bawah

puncak.

Proporsi relatif

- sebagai bentuk

analisis kuantitatif.