Embed Size (px)
Citation preview
PERBANDINGAN KADAR GLUKOSA DARAH ANTARA
METODA POCT DAN METODA GOD-PAP DENGAN
METODA HEKSOKINASE
TUGAS AKHIR
Oleh :
Deka Wulansari Herviyani
NIM : 09160538N
PROGRAM STUDI D-IV ANALIS KESEHATAN
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2017
i
PERBANDINGAN KADAR GLUKOSA DARAH ANTARA
METODA POCT DAN METODA GOD-PAP DENGAN
METODA HEKSOKINASE
TUGAS AKHIR
Untuk memenuhi sebagian persyaratan sebagai
Sarjana Sains Terapan
Oleh :
Deka Wulansari Herviyani
NIM : 09160538N
PROGRAM STUDI D-IV ANALIS KESEHATAN
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2017
ii
iii
iv
MOTTO
“Siapa Yang Bersungguh-Sungguh Pasti Akan Berhasil”
“Pantang Menyerah Adalah Kunci Meraih Sukses”
“Selalu Berdoa dan Berusaha Untuk Mencapai Tujuan Yang
Ingin Diraih”
v
PERSEMBAHAN
Skripsi ini penulis persembahkan untuk :
1. Allah SWT sebagai penuntun langkah hidupku
menuju jannahnya.
2. Suami dan anakku yang selalu memberi doa,
dukungan, motivasi untuk keberhasilan setiap
langkahku
3. Bapak, Ibu dan Adik-adikku yang selalu
memberikan doa dan semangat
4. Teman-teman seangkatan D-IV Analis Kesehatan
5. Teman-teman laboratorium RSJD Surakarta yang
selalu memberikan semangat dan motivasi
6. Serta semua pihak yang telah membantu dalam
penyusunan Tugas Akhir ini.
vi
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena atas berkat,
rahmat dan hidayahNya penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan judul
“ PERBANDINGAN KADAR GLUKOSA DARAH ANTARA METODA POCT
DAN METODA GOD-PAP DENGAN METODA HEKSOKINASE”.
Tugas akhir ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam
menyelesaikan studi di jurusan D-IV Analis Kesehatan, Fakultas Ilmu Kesehatan.
Penulisan tugas akhir ini disusun berdasarkan studi pustaka dan penelitian
di laboratorium untuk memenuhi syarat guna memperoleh gelar Sarjana Sains
Terapan (S.Si.T) pada program Diploma IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu
Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta.
Terlaksananya penyusunan skripsi ini adalah berkat bimbingan, petunjuk,
bantuan dan dukungan dari berbagai pihak, maka dalam kesempatan ini penulis
mengucapkan terimakasih kepada yang terhormat :
1. Dr. Ir. Djoni Tarigan, MBA., selaku Rektor Universitas Setia Budi Surakarta.
2. Prof. Dr. Marsetyawan HNE Soesatyo, M.Sc., Ph.D., selaku Dekan Fakultas
Ilmu Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta.
3. Tri Mulyowati, SKM., M.Sc., selaku Ketua Program Studi D-IV Analis
Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta.
4. dr. Amiroh Kurniati, Sp.PK., M.Kes., selaku pembimbing utama yang telah
memberikan bimbingin, arahan dan motivasi yang sangat membantu
kelancaran dalam pembuatan dan penyusunan tugas akhir
viii
5. dr. Ratna Herawati selaku pembimbing pendamping yang telah banyak
memberikan bimbingan, masukan dan saran dalam penyusunan tugas akhir
6. Suami dan anakku yang selalu memberikan doa, semangat, dorongan,
motivasi dalam setiap langkah dan usahaku dalam menyelesaikan penyusunan
tugas akhir
7. Bapak, Ibu dan adik-adik yang selalu memberikan doa, semangat, dan
motivasi
8. Teman-teman seangkatan D-IV analis Kesehatan Universitas Setia Budi
Surakarta yang banyak memberikan bantuan dan masukan dalam penyusunan
tugas akhir
9. Teman-Teman Laboratorium RSJD Surakarta yang selalu memberikan
semangat, dorongan dan motivasi.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan Tugas Akhir ini masih jauh dari
sempurna karena keterbatasan pengetahuan dan pengalaman penulis. Maka untuk
itu dengan segala kerendahan hati penulis meminta maaf atas segala kesalahan
baik dalam penulisan maupun penyajian. Saran dan kritik yang bersifat
membangun sangat penulis harapkan. Akhir kata penulis berharap semoga karya
tulis ini dapat bermanfaat bagi penulis, pembaca, dan masyarakat pada umumnya.
Surakarta, Agustus 2017
Penulis
ix
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL DEPAN
HALAMAN JUDUL .................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ...................................................... iii
HALAMAN MOTTO ................................................................... iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................... v
HALAMAN PERNYATAAN ...................................................... vi
KATA PENGANTAR .................................................................. vii
DAFTAR ISI ................................................................................. ix
DAFTAR GAMBAR .................................................................... xii
DAFTAR TABEL ......................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................. xiv
DAFTAR SINGKATAN .............................................................. xv
INTISARI...................................................................................... xvii
ABSTRACT .................................................................................... xviii
BAB 1 PENDAHULUAN................................................. 1
A. Latar Belakang ......................................................... 1
B. Rumusan Masalah .................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ..................................................... 4
D. Manfaat Penelitian ................................................... 4
1. Bagi Institusi ....................................................... 4
2. Bagi Peneliti ........................................................ 4
3. Bagi Masyarakat ................................................. 4
x
BAB II TINJAUAN PUSTAKA........................................ 5
A. Karbohidrat .............................................................. 5
1. Pengertian Karbohidrat ....................................... 5
2. Fungsi Karbohidrat ............................................. 6
3. Metabolisme Karbohidrat ................................... 6
4. Penggolongan Karbohidrat ................................. 7
B. Glukosa Darah ......................................................... 8
1. Definisi Glukosa Darah ....................................... 8
2. Metabolisme Glukosa ......................................... 9
3. Sumber Glukosa .................................................. 9
4. Pengaturan Metabolisme Glukosa
Oleh Hormon ...................................................... 10
5. Macam-macam Pemeriksaan Glukosa ................ 11
6. Nilai Rujukan Glukosa ........................................ 13
7. Sampel Pemeriksaan Glukosa ............................. 13
8. Faktor-faktor yang Dapat
Mempengaruhi Hasil Glukosa Darah .................. 16
9. Metode Pemeriksaan Glukosa ............................. 16
10. Kelebihan dan Kekurangan
Masing-masing Metoda...................................... 19
C. Kerangka Teori ........................................................ 21
D. Hipotesis .................................................................. 22
BAB III METODE PENELITIAN........................................ 23
A. Tempat dan Waktu Penelitian .................................. 23
1. Tempat Penelitian ............................................... 23
2. Waktu Penelitian ................................................. 23
B. Populasi dan Sampel ................................................ 23
1. Populasi ............................................................... 23
2. Sampel ................................................................. 24
C. Jenis Penelitian ........................................................ 26
D. Variabel Penelitian ................................................... 26
1. Variabel Bebas .................................................... 26
2. Variabel Terikat .................................................. 26
3. Definisi Operasional ........................................... 26
E. Bahan dan Alat ........................................................ 28
1. Bahan Penelitian ................................................. 28
2. Alat Penelitian ..................................................... 28
3. Reagen Penelitian ................................................ 28
4. Cara Kerja ........................................................... 30
F. Analisis Data ............................................................ 37
G. Kerangka Alur Penelitian ........................................ 38
xi
BAB IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .......... 39
A. Karakteristik Hasil Penelitian ................................ 39
B. Pembahasan ........................................................... 42
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN.................................... 45
A. KESIMPULAN ..................................................... 45
B. SARAN ................................................................. 45
DAFTAR PUSTAKA ................................................................... 46
LAMPIRAN .................................................................................. 48
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Kerangka Teori ...................................................................... 22
Gambar 2. Kerangka Alur Penelitian ...................................................... 40
xiii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa sebagai
patokan penyaring dan diagnosa DM (mg/dl) ................ 13
Tabel 2. Data karakteristik dasar subyek penelitian ..................... 39
Tabel 3. Hasil Transformasi Data ................................................. 40
Tabel 4. Uji beda 3 kelompok metoda .......................................... 41
Tabel 5. Uji beda 2 kelompok metoda .......................................... 42
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Data Subyek............................................................. 48
Lampiran 2. Data Penelitian Kadar Glukosa ............................... 50
Lampiran 3. Data Uji Statistik ..................................................... 52
Lampiran 4. Formulir Persetujuan Mengikuti Penelitian ............. 56
Lampiran 5. Surat Ijin Penelitian ................................................. 57
Lampiran 6. Surat Pernyataan Selesai Penelitian ......................... 58
Lampiran 7. Hasil QC Bulan Maret ............................................. 59
Lampiran 8. Hasil QC Bulan April .............................................. 60
Lampiran 9. Hasil QC Bulan April .............................................. 61
Lampiran 10. Foto Alat dan Bahan Penelitian .............................. 62
xv
DAFTAR SINGKATAN
ADP Adenosine Diphosphat
ATP Adenosin Trifosfat
C Karbon
(CH2O)2 Karbohidrat
(CH2O)n Rumus Karbohidrat (sakarida)
CO2 Karbondioksida
Depkes Departemen Kesehatan
dl desi liter
dll dan lain-lain
DNA Dioksiribonukleat
FAD Flavin Adenine Dinucleotide
G-6-P Glukosa-6-Fosfat
G-6-PDH Glukosa-6-Fosfat dehydrogenase
GDH Glukose Dehidrogenase
GDH FAD Glukose Dehydrogenase Flavin Adenine Dinucleotide
GDH Mut. Glukose Dehydogenase varian Mutant
GDH NAD Glukose Dehydrogenase Nicotinamide Adenine Dinucleotide
GDH PQQ Glukose Dehydrogenase Pyrroloquinoline Quinone
GOD Glukosa Oksidase
GOD-PAP Glukosa Oksidase-Phenol Amino Peroksidase
gr gram
H Hidrogen
H20 Hydrate
H2O2 Peroksida
IFCC International Federation Clinical Chemistry
Kemenkes Kementerian Kesehatan
mg miligram
Mut Mutan
NAD Nicotinamide Adenine Dinucleotide
NADPH Nicotinamid Adenine Dinucleotide Phosphate Hidrogen
xvi
NADP Nicotinamid Adenine Dinucleotide Phosphate
O Oksigen
O2 Oksigen
-OH gugus hidroksil
PAP Phenol aminophenazone
PC Personil computer
PERKENI Perkumpulan Endokrinologi Indonesia
PNPME-K Pemantapan Mutu Eksternal
POCT Point of Care Testing
POD Peroxidase
PQQ Pyrroloquino Line Quinone
QC Quality Control
RNA Ribonukleat
rpm Rotasi per menit
RSDM Rumah Sakit dr. Moewardi
RSJD Rumah Sakit Jiwa Daerah Surakarta
RTT Round trip time
SD Standar deviasi
SPSS Statistical Package for the Social Science
TAT Turn Arround Time
TTGO Tes Toleransi Glukosa Oral
WHO World Health Organization
xvii
INTISARI
Deka Wulansari Herviyani. 2017. Perbandingan Kadar Glukosa Darah antara Metoda
POCT dan Metoda GOD-PAP dengan Metoda Heksokinase. Program Studi D-IV Analis
Kesehatan, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi.
Glukosa yang merupakan hasil metabolisme karbohidrat di dalam darah adalah
sumber energi bagi sebagian besar sel tubuh. Untuk mengetahui kadar glukosa dalam
darah perlu dilakukan pemeriksaan glukosa darah. Pemeriksaan kadar glukosa dapat
dilakukan dengan berbagai metoda enzimatik antara lain metoda POCT dan GOD-PAP
yang menggunakan enzim glukosa oksidase, dan metoda heksokinase yang menggunakan
enzim heksokinase. Dari masing-masing metoda tersebut terdapat kelebihan dan
kekurangan, dimana metoda heksokinase merupakan metoda standar dalam pemeriksaan
glukosa. Tujuan dari penelitian ini adalah membandingkan hasil pemeriksaan kadar
glukosa darah antara metoda POCT dan metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase.
Penelitian ini dilakukan terhadap 66 subyek penelitian pada pasien rawat inap
Rumah Sakit Jiwa Daerah Surakarta. Penelitian ini menggunakan desain penelitian Cross
sectional. Data dalam penelitian ini diolah dengan menggunakan Uji One Sample
Kolmogorov Smirnov, Uji Wilcoxon dan Uji Friedman.
Terdapat perbedaan yang bermakna antara kadar glukosa menggunakan metoda
POCT, GOD-PAP dan Heksokinase dengan nilai signifikansi sebesar 0.000. Hal ini dapat
disebabkan karena adanya berbagai faktor yang mempengaruhinya. Pemeriksaan kadar
glukosa darah menggunakan metoda POCT dan GOD-PAP diperoleh nilai signifikansi
0.00, pada metoda POCT dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi 0.076, sedangkan
pada metoda GOD-PAP dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi 0.00.
Kata kunci: Glukosa Darah, GOD-PAP, Heksokinase, POCT.
xviii
ABSTRACT
Deka Wulansari Herviyani. 2017. The Comparison of Blood Sugar Levels Examined
using POCT, GOD-PAP, and Hexokinase Method. D-IV Health Analyst Study Program,
Health Science Faculty, Setia Budi University.
Glucose resulted from carbodydrate metabolism in the blood is the source of
energy for most of cells in the body. To measure blood glucose level, examination has to
be carried out. The examination of blood glucose level can be done with various
enzymatic methods, such as POCT and GOD-PAP methods using glucose oxidase
enzyme and hexokinase method using hexokinase enzyme. Each method has their
strengths and drawbacks and hexokinase method is standard method for examining
glucose level. This study aims at comparing the results of blood glucose level
examination using POCT, GOD-PAP, and hexokinase method.
This study was carried out to 66 research subjects of inpatients of Regional
Mental Health Hospital (RSJD) Surakarta. This study applied cross-sectional design.
Data were processed using Kolmogorov Smirnov test, Wilcoxon test and Friedman test.
There are significant differences of blood glucose levels examined using POCT,
GOD-PAP and Hexokinase methods with significance value 0.000. This is so due to
various contributing factors. The significance level of blood glucose level measured with
POCT and GOD-PAP methods is 0.00, that measure with POCT and Hexokinase method
is 0.076, and that measured with GOD-PAP and Hexokinase method is 0.00.
Keywords: Blood glucose, GOD-PAP, Hexokinase, POCT.
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Glukosa merupakan bahan bakar untuk kebanyakan fungsi sel dan
jaringan, proses penyediaan glukosa menjadi prioritas utama dari
homeostasis. Sel-sel memperoleh sebagian kecil kebutuhan energi oleh
pembakaran asam lemak, tetapi energi ini kurang efisien dibandingkan
dengan pembakaran glukosa, proses ini menyusun asam-asam lemak yang
dapat merugikan tubuh bila sampai terjadi penimbunan. Berbagai macam
hormon ikut serta dalam regulasi kadar glukosa dalam darah. Dengan
mengukur kadar glukosa dalam darah dapat diketahui apakah regulasi
berhasil atau tidak. Jika kadar itu jelas menyimpang dari nilai normal, baik
terlalu tinggi atau terlalu rendah, hal itu menandakan bahwa homeostasis
terganggu dan hasil pengukuran kadar glukosa seharusnya menjadi dorongan
untuk memeriksa etiologi penyimpangan ini (Widmann, 1999).
Terdapat dua metoda utama untuk mengukur glukosa. Metoda yang
pertama adalah metoda kimiawi yang memanfaatkan sifat mereduksi dari
glukosa, dengan bahan indikator yang akan berubah warna apabila tereduksi.
Metoda ini tidak spesifik karena senyawa-senyawa lain yang ada dalam darah
juga dapat mereduksi misalnya urea yang dapat meningkat cukup bermakna
pada uremia (Sacher, 2004). Sebagian besar pengukuran dengan metoda
kimia yang didasarkan atas kemampuan reduksi sudah jarang dipakai karena
spesifitas pemeriksaan kurang tinggi (Depkes RI, 2005).
2
Metoda yang kedua adalah enzimatik yang umumnya menggunakan
enzim glukosa oksidase (GOD) atau heksokinase, yang bekerja pada glukosa
tetapi tidak pada gula lain dan tidak pada bahan pereduksi lain (Sacher,
2004). Pemeriksaan kadar glukosa sekarang sudah diisyaratkan dengan cara
enzimatik, tidak lagi dengan prinsip reduksi untuk menghindari ikut
terukurnya zat-zat lain yang akan memberikan hasil tinggi palsu. Cara
enzimatik dapat dilakukan dengan cara otomatis seperti dengan GOD-PAP,
heksokinase dan cara Strip (Suryaatmadja, 2003).
Metoda GOD-PAP adalah metoda enzimatik yang paling banyak
digunakan di laboratorium yang ada di Indonesia. Metoda heksokinase
merupakan metoda enzimatik untuk mengukur kadar glukosa darah yang
dianjurkan oleh WHO dan IFCC (Depkes RI, 2005). Metoda Heksokinase
merupakan metoda referen karena enzim yang digunakan spesifik untuk
glukosa (PERKENI, 2011).
Alat pengukur glukosa darah strip biasanya menggunakan metoda dari
alat POCT (point of care testing), pertama kali diperkenalkan di rumah sakit
pada tahun 1986. Penggunaan POCT glukosa mempunyai keunggulan yaitu
mempercepat TAT (turn arround time) dan memperbaiki pelayanan pasien.
Salah satu metoda dari alat POCT adalah GOD (Aulia, 2016). Diluar
laboratorium klinik, saat ini tersedia beberapa merk monitor glukosa pribadi
yang dapat digunakan pasien diabetes untuk mengukur kadar gula darah
mereka dalam setetes darah dari tusukan diujung jari. Alat pengukur gula
darah ini sangat bermanfaat untuk memberikan umpan-balik yang cepat dan
3
terus menerus bagi pasien sehingga mereka dapat melakukan penyesuaian
dalam pengobatan maupun terapi (Sacher, 2004).
Penelitian yang dilakukan oleh Hilda et al. (2011) tentang
pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda
GOD-PAP didapatkan hasil adanya perbedaan kadar glukosa darah yang
diperiksa menggunakan metoda POCT dan metoda GOD-PAP. Menurut
penelitian yang dilakukan oleh Indah (2016) pemeriksaan kadar glukosa
darah menggunakan metoda GOD-PAP dan metoda heksokinase didapatkan
hasil tidak adanya perbedaan kadar glukosa darah yang diperiksa
menggunakan metoda GOD-PAP dan metoda heksokinase. Menurut
Baharuddin et al. (2012) pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan
metoda POCT dan metoda heksokinase didapatkan hasil yaitu tidak ada
perbedaan glukosa darah yang diperiksa menggunakan metoda POCT dan
metoda heksokinase. Berdasarkan penelitian di atas peneliti ingin
membandingkan kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT dan
metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase yang merupakan metoda
standar untuk pemeriksaan glukosa darah.
B. RUMUSAN MASALAH
Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan masalah sebagai
berikut : “Bagaimanakah perbandingan hasil pemeriksaan glukosa darah
antara metoda POCT dan metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase ?”
4
C. TUJUAN PENELITIAN
1. Membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah antara metoda
POCT dengan metoda heksokinase.
2. Membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah antara metoda
GOD-PAP dengan metoda heksokinase.
3. Membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah antara metoda
POCT dan metoda GOD-PAP dengan metode heksokinase.
D. MANFAAT PENELITIAN
1. Bagi Institusi
Penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai referensi dan
dapat menerapkan ilmu di bidang kimia klinik pada institusi kesehatan.
2. Bagi Peneliti
Peneliti dapat membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa
darah menggunakan tiga metoda pemeriksaan yang berbeda, dimana
metoda heksokinase merupakan metoda standar dari pemeriksaan glukosa.
3. Bagi Masyarakat
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada
masyarakat dalam hal pemeriksaan glukosa darah, sehingga masyarakat
dapat mengetahui metoda apa yang paling baik digunakan untuk
pemeriksaan glukosa darah.
5
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Karbohidrat
1. Pengertian Karbohidrat
Karbohidrat merupakan molekul organik terdiri dari karbon (C) dan air
atau hydrate (H2O). Secara sederhana karbohidrat didefinisikan sebagai
polimer sakarida (polimer gula) yang paling banyak ditemukan di alam dalam
bahan nabati berupa gula sederhana. Karbohidrat adalah senyawa C yang
mengandung sejumlah besar gugus hidroksil (-OH). Karbohidrat paling
sederhana bisa berupa aldehid (disebut polihidroksi aldehid atau aldosa) atau
berupa keton (disebut polihidroksi keton atau ketosa). Berdasarkan pengertian
di atas berarti diketahui bahwa karbohidrat terdiri atas atom C, H, dan O.
Rumus umum dari karbohidrat adalah (CH2O)2 disebut juga sakarida (Harti,
2014).
Karbohidrat adalah suatu senyawa yang terdiri dari atom-atom C, H,
dan oksigen. Karbohidrat memiliki rumus (CH2O)n. Sebagai contoh molekul
glukosa mempunyai rumus kimia C6H12O6. Karbohidrat yang berasal dari
makanan, dalam tubuh mengalami perubahan atau metabolisme. Hasil
metabolisme karbohidrat antara lain glukosa yang terdapat dalam darah,
sedangkan glikogen adalah karbohidrat yang disintesis dalam hati dan
digunakan oleh sel-sel pada jaringan otot sebagai sumber energi (Poedjiadi,
2007).
6
2. Fungsi karbohidrat
Fungsi dari karbohidrat antara lain adalah sebagai energi tersimpan
dalam bentuk tepung (fotosintesis dalam tumbuhan) atau glikogen (hewan dan
manusia), sebagai sumber energi melalui jalur dan siklus metabolisme, supply
karbon untuk sintesis komponen lain, membentuk komponen struktural dalam
sel dan jaringan, komunikasi interseluler, kerangka struktural RNA dan DNA
yaitu gula ribose dan deoksiribosa (Harti, 2014).
3. Metabolisme Karbohidrat
Karbohidrat sebagian besar adalah polimer heksosa, diantaranya yang
paling penting adalah glukosa, galaktosa, dan fruktosa. Kebanyakan
monosakarida yang terdapat di dalam tubuh adalah isomer D. Produk utama
pencernaan karbohidrat dan gula adalah glukosa. Begitu masuk ke dalam sel,
glukosa secara normal difosforilasi untuk membentuk glukosa-6-fosfat. Enzim
yang mengkatalisis reaksi ini adalah heksokinase. Di dalam hati, disamping
enzim tersebut terdapat enzim yang disebut glukokinase. Glukokinase
mempunyai spesifitas lebih tinggi untuk glukosa, tidak seperti heksokinase
kadarnya meningkat oleh insulin dan menurun pada keadaan kelaparan dan
diabetes. Glukosa-6-fosfat kemudian dipolimerisasi menjadi glikogen atau
dikatabolisme, sebagai bentuk glukosa yang dapat disimpan, terdapat disemua
jaringan tubuh, tetapi terutama dalam hati dan otot rangka (Ganong, 2002).
Metabolisme oksidatif glukosa menghasilkan sebagian besar energi
yang digunakan dalam tubuh. Glukosa dalam makanan sebagian besar terdapat
dalam bentuk disakarida. Dalam mukosa usus halus, disakarida diuraikan
7
menjadi konstituen-konstituen monosakarida oleh enzim yang disebut
disakaridae. Enzim-enzim ini (laktose, sukrose, dan maltose) bersifat spesifik
untuk satu jenis disakarida. Gula diserap oleh usus dalam bentuk monosakarida
(Sacher, 2004).
4. Penggolongan Karbohidrat
Berdasarkan kelompoknya karbohidrat dibedakan menjadi empat
golongan yaitu : monosakarida, disakarida, oligosakarida, dan polisakarida.
a. Monosakarida
Monosakarida adalah karbohidrat paling sederhana karena
molekulnya hanya terdiri atas beberapa atom C, tidak dapat diuraikan
dengan cara hidrolisis menjadi karbohidrat lain. Monosakarida dibedakan
menjadi aldose dan ketosa. Contoh dari aldose yaitu glukosa dan galaktosa.
Contoh dari ketosa yaitu fruktosa terdiri atas 3 - 6 atom C dan zat ini tidak
lagi dihidrolisis oleh larutan asam dalam air menjadi karbohidrat yang lebih
sederhana. Monosakarida yang terpenting adalah glukosa, galaktosa, dan
fruktosa (Harti, 2014).
b. Disakarida
Disakarida adalah produk kondensasi dua unit monosakarida,
contohnya laktosa, maltosa,dan sukrosa (Murray, 2014).
c. Oligosakarida
Oligosakarida merupakan polimer dengan derajat polimerisasi 2
sampai 10 dan biasanya bersifat larut dalam air dan dapat diperoleh dari
hidrolisis polisakarida dengan asam atau enzim tertentu. Oligosakarida yang
8
terdiri dari 2 molekul disebut disakarida bila 3 molekul disebut triosa.
Oligosakarida yang paling sederhana adalah disakarida (Harti, 2014).
d. Polisakarida
Polisakarida adalah produk kondensasi lebih dari sepuluh unit
monosakarida, contohnya pati dan dekstrin yang mungkin merupakan
polimer linier atau bercabang. Polisakarida kadang-kadang diklasifikasikan
sebagai heksosan atau pentosan, tergantung pada identitas monosakarida
pembentuknya (masing-masing heksosa dan pentosa) (Murray, 2014).
B. Glukosa Darah
1. Definisi Glukosa Darah
Glukosa merupakan gula sederhana berisi enam atom C terdapat dalam
makanan sebagai sakarosa, laktosa, maltosa. Glukosa menjadi penyusun utama
dari polisakarida majemuk yang dikenal dengan nama zat pati atau amilum
dalam makanan. Enzim-enzim melepaskan glukosa dari senyawa-senyawa
majemuk dan glukosa itu dapat langsung dimetabolisme atau dapat juga diubah
bentuknya untuk disimpan (Widmann, 1999).
Glukosa terbentuk dari karbohidrat dalam makanan dan disimpan
sebagai glikogen di hati dan otot rangka. Insulin dan glukagon, dua hormon
yang berasal dari pankreas, dapat mempengaruhi kadar glukosa darah. Insulin
diperlukan untuk permeabilitas membran sel terhadap glukosa dan untuk
transportasi glukosa ke dalam sel. Glukagon menstimulasi glikogenesis
(pengubahan glikogen cadangan menjadi glukosa) dalam darah ( Kee, 2007).
9
Glukosa digunakan oleh sebagian besar sel tubuh sebagai sumber
energi. Beberapa sel (misalnya sel otak) hanya dapat menggunakan glukosa
sebagai sumber energi. Sedangkan sel lemak dan otot membutuhkan suatu
pembawa yang difasilitasi oleh insulin untuk mentranspor glukosa melewati
membran sel (Price, 2005).
2. Metabolisme Glukosa
Metabolisme glukosa menghasilkan asam piruvat, asam laktat, dan
asetil koenzim A (asetil-KoA) sebagai senyawa-senyawa antara. Oksidasi
lengkap glukosa menghasilkan karbohidrat, air, dan energi yang disimpan
sebagai senyawa fosfat berenergi tinggi (Sacher, 2004).
Glukosa tak bisa dimetabolisme lebih lanjut sampai glukosa
dikonversikan menjadi glukosa 6 fosfat oleh reaksi adenosin trifosfat. Reaksi
ini dikatalisis oleh enzim heksokinase yang tak spesifik dan juga oleh
glukokinase yang spesifik di dalam hati. Reaksi ini dalam arah sebaliknya,
hidrolisis sederhana glukosa 6 fosfat ke glukosa, dikatalisis oleh glukosa 6
fosfatase. Ketika glukosa menjadi glukosa 6 fosfat, dapat dipolimerisasi
menjadi glikogen untuk disimpan dan tidak dapat berdifusi keluar dari sel ini
(Baron, 1990).
Apabila tidak segera dimetabolisme untuk menghasilkan energi,
glukosa dapat disimpan di hati atau otot sebagai glikogen, suatu polimer yang
terdiri dari banyak residu glukosa dalam bentuk yang dapat dibebaskan dan
dimetabolisme sebagai glukosa (Sacher, 2004).
10
3. Sumber Glukosa
a. Makanan
Sebagian besar karbohidrat dalam makanan membentuk glukosa,
galaktosa, atau fruktosa pada pencernaan, diangkut ke hati melalui vena
porta. Galaktosa dan fruktosa mudah dikonversi menjadi glukosa dalam
darah (Ganong, 2002).
b. Senyawa Glukogenik yang Mengalami Glukogenesis
Senyawa ini masuk ke dalam dua kategori senyawa yang
memerlukan konversi bersih yang langsung menjadi glukosa tanpa
pengolahan (recycling) yang bermakna seperti asam amino dan propionat,
dan senyawa yang merupakan produk metabolisme parsial glukosa dalam
jaringan tertentu dan diangkut ke hati dan ginjal, dimana ini disintesis
kembali menjadi glukosa. Ikatan yang terbentuk dengan oksidasi glukosa
dalam otot rangka dan oleh eritrosit, diangkut ke hati dan ginjal dimana ia
membentuk kembali glukosa (Ganong, 2002).
c. Glikogenolisis
Glikogenolisis adalah reaksi pemecahan glikogen menjadi glukosa
(Harti, 2014). Konsentrasi glukosa dalam darah merupakan faktor penting
yang mengendalikan kecepatan pengambilan glukosa dalam hati maupun
jaringan ekstrahepatik 5% dari glukosa yang dikonsumsi langsung
dikonversi menjadi glikogen di dalam hati, dan 30-40% dikonversi menjadi
lemak. Sisanya dimetabolisme dalam otot dan jaringan-jaringan lain. Pada
saat tubuh mendadak membutuhkan glukosa misalnya pada saat puasa,
11
glikogen hati dipecah dan hati menambahkan glukosa ke dalam aliran darah
(Ganong, 2002).
4. Pengaturan metabolisme glukosa oleh hormon
a. Insulin
Insulin, suatu polipeptida yang disekresi oleh sel-sel pulau
Langerhans, disintesis sebagai proinsulin, mengandung dua rantai insulin
yang dihubungkan oleh peptida C, serta merupakan hormon utama yang
mengatur metabolisme karbohidrat serta interaksinya dengan metabolisme
protein dan lipid. Apapun mekanisme tepatnya yang mungkin bertanggung
jawab, efek total insulin adalah mempermudah metabolisme glukosa
selanjutnya untuk penyimpanan dan untuk oksidase (Baron, 1990).
b. Glukokortikoid
Glukokortikoid disekresikan oleh korteks adrenal dan sangat penting
dalam metabolisme karbohidrat. Dalam melaksanakan semua kegiatan,
glukokortikoid bekerja secara antagonistik terhadap insulin (Murray, 2014).
c. Tiroksin
Tiroksin meningkatkan pembebasan glukosa dari glikogen, juga
meningkatkan penyerapan glukosa dari usus (Sacher, 2004).
d. Epinefrin
Epinefrin disekresikan oleh medula adrenal sebagai akibat dari
rangsangan yang menimbulkan stres (ketakutan, kegembiraan, pendarahan,
hipoksia, hipoglikemia, dll) dan menimbulkan glikogenesis didalam hepar
serta otot karena stimulasi enzim fosforilase (Murray, 2014).
12
5. Macam-macam pemeriksaan glukosa
a. Glukosa darah sewaktu
Pemeriksaan gula darah yang dilakukan setiap waktu sepanjang hari
tanpa memperhatikan makanan terakhir yang dimakan dan kondisi tubuh
orang tersebut (Depkes RI, 2005).
b. Glukosa darah puasa
Kadar glukosa darah puasa memberikan petunjuk terbaik mengenai
homeostasis glukosa keseluruhan, dan sebagian besar pengukuran rutin
harus dilakukan pada sampel puasa selama 10-12 jam (Sacher, 2004).
c. Glukosa darah postprandial
Pemeriksaan gula darah 2 jam postprandial biasanya dilakukan
untuk mengukur respon klien terhadap asupan tinggi karbohidrat 2 jam
setelah makan (sarapan pagi atau makan siang). Pemeriksaan ini dilakukan
untuk diagnosis diabetes, normalnya dianjurkan jika kadar gula puasa
normal tinggi atau sedikit meningkat. Glukosa serum > 140 mg/dl atau
kadar glukosa darah lebih besar dari 120 mg/dl merupakan kadar yang
abnormal, bila demikian, diperlukan pemeriksaan lebih lanjut (Kee, 2007).
d. Tes Toleransi Glukosa Oral
Pemeriksaan tradisional yang digunakan untuk menilai buangan
glukosa adalah tes toleransi glukosa oral (TTGO). Pada TTGO kadar
glukosa serum diukur sebelum dan sesudah mengkonsumsi 75 gram
glukosa. Kadar glukosa diukur setiap ½ jam selama 2 jam setelah pemberian
glukosa. Pada keadaan sehat, kadar glukosa puasa individu yang dirawat
13
jalan dengan toleransi glukosa normal adalah 70 hingga 110 mg/dl. Setelah
pemberian glukosa, kadar glukosa akan meningkat pada awalnya namun
akan kembali ke keadaan semula dalam waktu 2 jam.
Kadar glukosa serum yang kurang dari 200 mg/dl setelah ½, 1, dan 1
½ jam pemberian glukosa dan kurang dari 140 mg/dl setelah 2 jam
ditetapkan sebagai nilai TTGO normal (National Diabetes Data Group
eriteria) (Price, 2005).
6. Nilai rujukan Glukosa
Menurut PERKENI (2015) nilai rujukan glukosa darah sewaktu dan
puasa dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa sebagai patokan penyaring dan
diagnosa DM (mg/dl)
Bukan DM Belum Pasti DM DM
Kadar Plasma Vena < 100 100-199 ≥ 200
Glukosa
Darah Darah Kapiler < 90 90-199 ≥ 200
Sewaktu
(mg/dl)
Kadar Plasma Vena < 100 100-125 ≥ 126
Glukosa
Darah Darah Kapiler < 90 90-99 ≥ 100
Puasa
(mg/dl)
Sumber: (PERKENI, 2015).
7. Sampel Pemeriksaan Glukosa
Dahulu pengukuran glukosa darah lebih sering dilakukan terhadap
darah lengkap, tetapi sekarang sebagian besar laboratorium melakukan
pengukuran kadar glukosa dalam serum atau plasma (Sacher, 2004).
14
Serum merupakan hasil pemisahan antara komponen cair dan seluler
dari darah (whole blood). Proses pemisahan komponen darah untuk
mendapatkan serum dapat dilakukan dengan menggunakan dua cara. Cara
pertama dengan mendiamkan darah selama 1-2 jam sehingga terjadi
pemisahan dengan sendirinya (pemisahan spontan), namun dengan
membiarkan darah terlalu lama memungkinkan terjadinya metabolisme
glukosa dalam sampel oleh sel-sel darah. Kadar glukosa dalam tabung akan
menurun setelah 10 menit pengambilan darah, karena proses glikolisis
dengan kecepatan kurang lebih 7 mg/dl per jam (Sadikin, 2002).
Cara kedua yaitu dengan mendiamkan darah hingga membeku
kemudian dilanjutkan dengan sentrifugasi hingga terjadi pemisahan secara
total kemudian dipisahkan dari sel-sel darah untuk mencegah terjadinya
proses metabolisme sel hidup yang dapat mengakibatkan penurunan kadar
glukosa darah. Serum harus segera dipisahkan dari bahan bekuan darah
dalam sampel paling lambat 2 jam setelah pengambilan darah untuk
menghindari perubahan-perubahan dari zat-zat yang terlarut di dalamnya
oleh pengaruh glikolisis darah (Hardjoeno, 2003).
Plasma darah merupakan bagian cair darah yang sebagian besar
terdiri atas 90% air, elektrolit, dan protein darah. Plasma darah juga
mengangkut zat-zat terlarut seperti zat-zat makanan, oksigen dalam sirkulasi
darah. Berfungsi mengangkut protein yang diperlukan untuk pembentukan
jaringan, menyebarkan cairan nutrisi ke seluruh tubuh serta mengatur
keseimbangan asam basa (Sadikin, 2002).
15
Plasma memisahkan sel darah dalam bentuk endapan sel utuh, yang
dapat disuspensi kembali dan digunakan untuk berbagai tujuan. Sel-sel
tersebut dapat dipelajari secara mikroskopis, dapat digunakan untuk analisis
biokimia sel yang rinci, untuk tujuan penyelidikan imunologi sel darah dan
sebagainya. Dalam skala besar sel-sel darah yang diendapkan dalam
pembuatan plasma dapat dipakai kembali untuk tujuan transfusi dan sel-sel
darah yang dipisahkan dari plasma tersebut dinamakan packed cell.
Sebaliknya sel-sel yang terjebak dalam anyaman serat-serat fibrin ketika
pembuatan serum dimanpatkan dan diperas oleh retraksi serat-serat fibrin
ketika serat-serat ini membentuk ikatan lintas serat dalam rangka menyusun
anyaman fibrin. Jelas bahwa sel-sel darah yang menggumpal dalam
pembentukan serum tidak dapat digunakan lagi untuk berbagai tujuan
pemeriksaa (Sadikin, 2002).
Pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan sampel darah
kapiler biasanya diambil dari ujung jari atau anak daun telinga (Depkes RI,
1995).
Pengumpulan darah dalam tabung bekuan (bertutup merah) untuk
analisis kimiawi serum memungkinkan terjadinya metabolisme glukosa
dalam sampel oleh sel-sel darah sampai terjadi pemisahan melalui
pemusingan. Pada suhu lemari pendingin, glukosa tetap stabil selama
beberapa jam di dalam serum. Pada suhu kamar, diperkirakan terjadi
penurunan 7 mg/dl. Penurunan ini tidak bermakna untuk laboratorium
rumah sakit yang melakukan pemrosesan sampel darah segera setelah
16
diterima. Namun, apabila sampel darah dikirim ke laboratorium rujukan
yang terletak jauh, dapat terjadi penurunan glukosa yang substansial akibat
glikolisis oleh sel-sel darah. Masalah ini dapat diatasi dengan menggunakan
tabung yang ditambah dengan antikoagulan natrium fluorida (bertutup abu-
abu) yang menghambat glikolisis sehingga kadar glukosa dapat
dipertahankan bahkan dalam suhu kamar (Sacher, 2004).
8. Faktor-faktor yang Dapat Mempengaruhi Hasil Glukosa Darah
a. Adanya bilirubin atau galaktosa dalam darah dapat menyebabkan kadar
glukosa lebih rendah.
b. Merokok dapat meningkatkan kadar glukosa darah
c. Obat kortison, tiazin dan diuretik dapat menyebabkan peningkatan kadar
glukosa darah
d. Stres emosional, demam, infeksi, trauma, dan obesitas dapat
meningkatkan kadar glukosa darah
e. Aktivitas berlebihan dapat menurunkan kadar gula darah (Kee, 2007).
9. Metoda Pemeriksaan Glukosa
a. Metoda Kimia
Metoda kimia yang masih digunakan adalah metoda toluidin.
Sebagian besar pengukuran dengan metoda kimia didasarkan atas
kemampuan reduksi sudah jarang dipakai karena spesifitas pemeriksaan
kurang tinggi, memerlukan langkah pemeriksaan yang panjang dengan
pemanasan memungkinkan terjadinya kesalahan besar bila dibandingkan
dengan metoda enzimatik (Depkes RI, 2005).
17
b. Metoda Enzimatik
1) Metoda GOD-PAP
Prinsip: Glukosa dioksidasi secara enzimatik menggunakan
enzim GOD, membentuk asam glukonik dan H2O2 kemudian
bereaksi dengan fenol dan 4-aminoantipirin dengan enzim
peroksidase (POD) sebagai katalisator membentuk quinomine.
Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi
glukosa dalam specimen dan diukur secara fotometri pada panjang
gelombang 546 nm
Glukosa + O2 + H2O GOD gluconic acid + H2O2
2H2O2 + 4-aminophenazone + phenol POD quinomine + 4H2O
(Kemenkes RI, 2010).
2) Metoda Heksokinase
Metoda heksokinase merupakan metode pengukuran kadar
glukosa darah yang dianjurkan oleh WHO dan IFCC (International
Federation Clinical Chemistry). Baru sekitar 10% laboratorium yang
ikut dalam Pemantapan Mutu Eksternal (PNPME-K) menggunakan
metoda ini untuk pemeriksaan glukosa darah (Depkes RI, 2005).
Prinsip : Enzimatik
Glukosa (sampel) + ATP (RI) HLK(R2) G-6-P + ADP
Heksokinase mengkatalisis reaksi phosphorilasi dari glukosa
dalam sampel membentuk glukosa-6-phosphat dengan bantuan
ATP.
18
G-6-P + NADP G6PHD Glukonat-6-P + NADPH + H
Glukosa-6-phosphat dehydrogenase mengoksidasi G-6-p
dengan adanya NADP (nicotinamid adenine dinucleotide phosphate)
membentuk glukonat-6-phosphat. Tidak ada karbohidrat lain yang
teroksidasi. Kecepatan pembentukan NADPH (nicotinamid adenine
dinucleotide phosphate hidrogen) selama reaksi berbanding lurus
dengan konsentrasi glukosa dan dapat diukur secara fotometrik
(Permenkes RI, 2013).
3) Metoda POCT
Merupakan alat pemeriksaan laboratorium sederhana yang
dirancang hanya untuk penggunaan sampel darah kapiler dan whole
blood. Strip katalisator spesifik untuk pengukuran glukosa dalam
darah kapiler (Suryaatmadja, 2003).
Prinsip pemeriksaan metoda ini adalah strip tes diletakkan pada alat,
ketika darah diteteskan pada zona reaksi tes strip. Katalisator
glukosa akan mereduksi glukosa dalam darah. Intensitas dari
elektron yang terbentuk dalam alat strip setara dengan konsentrasi
glukosa dalam darah (Suryaatmadja, 2003).
Gagasan yang melatarbelakangi adanya POCT adalah untuk
mempermudah dan mempercepat pemeriksaan laboratorium pasien
sehingga hasil yang didapat akan memberikan pengambilan
keputusan klinis secara cepat oleh dokter.
19
Ada beberapa metoda yang digunakan untuk POCT, yaitu:
1) Glukosa Oxidase
2) Glukose dehidrogenase (GDH), empat jenis GDH adalah
a. Glukose Dehydrogenase nicotinamide adenine dinucleotide
(GDH NAD)
b. Glukose dehydrogenase flavin adenine dinucleotide (GDH
FAD)
c. Glukose dehydrogenase pyrroloquinoline quinone (GDH
PQQ)
d. Glucose dehydrogenase varian mutant (Mut Q-GDH/GDH
Mut.)
10. Kelebihan dan Kekurangan Masing-masing Metoda
a. Metoda POCT
1) Kelebihan
- Hasil pemeriksaan dapat segera diketahui
- Hanya butuh sampel sedikit
- Tidak membutuhkan reagen khusus
- Praktis dan dapat digunakan jadi dapat dilakukan oleh siapa saja
tanpa butuh keahlian khusus
2) Kekurangan
- Akurasi belum diketahui
- Memiliki keterbatasan yang dipengaruhi oleh kadar hematokrit,
interfensi zat lain (vitamin C, bilirubin, dan hemoglobin)
20
- Strip bukan untuk menegakkan diagnosis klinis melainkan hanya
untuk pemantauan kadar glukosa (Suryaatmadja, 2003).
b. Metoda GOD-PAP
1) Kelebihan
- Akurasi tinggi
- Presisi tinggi
- Spesifik
- Relatif bebas dari gangguan (kadar hematokrit, vitamin C, lipid,
volume sampel dan suhu)
2) Kekurangan
- Memiliki ketergantungan pada reagen
- Memerlukan sampel darah yang banyak
- Pemeliharaan alat dan reagen memerlukan tempat yang khusus
- Membutuhkan biaya yang cukup mahal (Suryaatmadja, 2003).
c. Metoda Heksokinase
1) Kelebihan
- Akurasi sangat baik
- Presisi sangat baik
- Merupakan metoda referensi karena enzim yang digunakan
spesifik untuk glukosa (PERKENI, 2011).
2) Kekurangan
- Biaya relatif mahal
21
C. Kerangka Teori
Gambar 1. Kerangka Teori
Ket.
Lingkup penelitian
Bukan lingkup penelitian
Pemeriksaan
Glukosa Darah
Metoda pemeriksaan
Faktor yang
mempengaruhi kadar
glukosa darah:
1. Bilirubin dalam
darah
2. Galaktosa dalam
darah
3. Merokok
4. Obat kortison, tiosin,
deuretik
5. Stres emosional,
demam, infeksi,
trauma, dan obesitas
6. Aktivitas berlebihan
7.
- Sampel
Serum/Plasma
- Metode enzimatik
- Enzim heksokinase
- Sampel Serum/
plasma
- Metode enzimatik
- Enzim Glukosa
oksidase
- Sampel darah
kapiler/whole
blood
- Metode enzimatik
- Enzim glukosa
oksidase
GOD-PAP Heksokinase
POCT
22
D. Hipotesis
1. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara hasil pemeriksaan glukosa
darah menggunakan metoda POCT dan heksokinase
2. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara hasil pemeriksaan kadar
glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP dan metoda heksokinase
3. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara hasil pemeriksaan kadar
glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda GOD-PAP dengan
metoda heksokinase
23
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Tempat dan Waktu Penelitian
1. Tempat penelitian
a) Pengambilan sampel darah vena dilakukan di RSJD Surakarta dan
penelitian kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda
GOD-PAP dilakukan di Laboratorium RSJD Surakarta.
b) Penelitian kadar glukosa darah menggunakan metoda heksokinase
dilakukan di Laboratorium RSDM Surakarta.
2. Waktu penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan April 2017
B. Populasi dan Sampel
1. Populasi
Populasi adalah semua objek yang menjadi sasaran penelitian.
Populasi dibagi menjadi dua yaitu populasi target yang ditentukan oleh
karakteristik klinis dan demografis, dan populasi terjangkau yang merupakan
bagian populasi target yang dibatasi tempat dan waktu.
Populasi dalam penelitian ini adalah pasien rawat inap RSJD
Surakarta. Populasi target dalam penelitian ini adalah semua pasien rawat
inap yang melakukan pemeriksaan laboratorium, sedangkan populasi
terjangkau dalam penelitian ini adalah semua pasien rawat inap yang
24
melakukan pemeriksaan laboratorium glukosa darah. Subjek penelitian ini
adalah kadar glukosa darah pasien rawat inap RSJD Surakarta. Populasi
diambil dari pasien bangsal Puntadewa, bangsal Sumbadra dan bangsal
Wisanggeni RSJD Surakarta.
2. Sampel
Sampel adalah sebagian dari populasi yang ciri-cirinya diteliti atau
diukur, dipilih dengan menggunakan prosedur tertentu dan keberadaanya
diharapkan mampu mewakili populasi yang sebenarnya (Sabri et al.,2014)
Sampel dalam penelitian ini adalah pasien rawat inap RSJD Surakarta
yang melakukan pemeriksaan glukosa darah.
Pengambilan sampel dengan teknik simple random sampling yaitu
teknik pengambilan secara acak sederhana tanpa memperhatikan strata yang
ada dalam populasi sehingga setiap anggota populasi memiliki kesempatan
yang sama untuk dipilih sebagai sampel (Prasetyo, 2013).
Perhitungan jumlah sampel ditetapkan dengan rumus :
λ2. N. P. Q
S =
d2. (N-1) + λ
2. N. P. Q
Keterangan :
S = Ukuran sampel
N = Ukuran populasi
λ2 = harga table chi kuadrat dengan dK = 1, taraf kesalahan 5% = 3,481
P = Proporsi dalam populasi
25
Q = 0,5
d2
= Ketelitian (error) 0,05
Berdasarkan rumus di atas, maka besarnya sampel minimal yang
digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:
3,481 x 75 x 0,5 x 0,5
S =
0,052 x (60-1) + 3,481 x 0,5 x 0,5
52,215
S =
1,01775
= 61,85 62 (batas minimal)
Jumlah sampel yang diambil adalah 66, sehingga sudah memenuhi batas
minimal sampel yang akan digunakan dalam penelitian ini dengan
mempertimbangkan faktor-faktor berikut:
a. Kriteria Inklusi :
Sampel pemeriksaan laboratorium glukosa darah
b. Kriteria Eksklusi :
1) Sampel plasma ikterik
2) Sampel plasma hemolisis
3) Sampel plasma lipemik
4) Hasil melebihi atau kurang dari pembacaan alat
26
C. Jenis Penelitian
Penelitian ini menggunakan desain penelitian cross sectional yang
membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda
POCT dan metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase.
D. Variabel Penelitian
Variabel didefinisikan sebagai karakteristik subjek penelitian yang
berubah dari satu subjek ke subjek lain. Adapun variabel penelitian ini adalah:
1. Variabel Bebas (Independent)
Variabel bebas adalah variabel yang bila berubah akan mengakibatkan
perubahan variabel lain (Prasetyo, 2013).
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah metoda POCT, metoda GOD-
PAP, dan metoda heksokinase.
2. Variabel Terikat (dependent)
Variabel terikat adalah variabel yang diakibatkan atau dipengaruhi
oleh variabel bebas (Prasetyo, 2013).
Variabel terikat dalam penelitian ini adalah kadar glukosa darah.
3. Definisi Operasional
Kadar glukosa darah adalah istilah yang mengacu kepada tingkat
glukosa didalam darah. Konsentrasi gula darah diatur dengan ketat didalam
tubuh. Glukosa yang dialirkan melalui darah sumber utama energi untuk sel-
sel tubuh.
27
Kadar glukosa darah diperiksa dengan menggunakan metoda POCT,
metoda GOD-PAP dan metoda Heksokinase.
a. Metoda POCT
Metoda POCT adalah metoda pemeriksaan kadar glukosa darah
menggunakan alat digital atau POCT dengan reagen kering (Strip). Kadar
glukosa darah diperiksa menggunakan metoda GOD dengan
menggunakan alat GES GD-013. Sampel yang digunakan adalah whole
blood, diukur dalam skala rasio dengan satuan miligram per desi liter
(mg/dL) atau mili mol per liter (mmol/L). Rentang pengukuran alat antara
20 s/d 600 mg/dl, jika hasil pemeriksaan glukosa melebihi 600 mg/dL
maka pada layar akan muncul “HI” jika hasil pemeriksaan glukosa kurang
dari 20 mg/dl pada layar akan muncul “Lo”.
b. Metoda GOD-PAP
Metoda GOD-PAP adalah metode pengukuran kadar glukosa darah
menggunakan alat StarDust MC15. Sampel yang digunakan adalah
plasma NaF, diukur dalam skala rasio dengan satuan mg/dl atau mmol/L.
Rentang pengukuran alat antara 1 s/d 400 mg/dL.
c. Metoda Heksokinase
Metoda heksokinase adalah metode pemeriksaan glukosa
menggunakan alat automatic analyzer ILab 650 clinical chemistry system.
Sampel yang digunakan adalah plasma NaF, diukur dalam skala rasio
dengan mg/dL atau mmol/L. Rentang pengukuran alat antara 2 s/d 600
mg/dL.
28
E. Bahan dan Alat
1. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan untuk pemeriksaan kadar glukosa darah
adalah plasma dan whole blood
2. Alat Penelitian
- Vacutainer
- Spuit 5cc
- Lancet
- Alkohol swab
- Plester
- Kapas
- Torniquet
- Tabung NaF
- Clinipet 1000 μl
- Clinipet 10 μl
- Yellow Tip
- Blue Tip
- GES GD-013
- Stardust MC15
- ILab 650 clinical chemistry system
29
3. Reagen Glukosa
a. Metoda POCT
Reagen yang digunakan untuk pemeriksaan glukosa dengan metoda POCT
adalah strip glukosa
b. Metoda GOD-PAP
Reagen yang digunakan untuk pemeriksaan glukosa dengan metoda GOD-
PAP adalah Reagen kit Glukose GOD FS*
Komponen dan konsentrasi :
Phosphate buffer pH 7.5 250 mmol/L, Phenol 5 mmol/L, 4-
Aminoantipyrine 0,5 mmol/L, GOD ≥ 10 kU/L, dan Peroxidase (POD) ≥ 1
kU/L
Standard : 100 mg/dL (5.55 mmol/L)
c. Metoda Heksokinase
Reagen yang digunakan untuk pemeriksaan glukosa dengan metoda
heksokinase adalah reagen kit GLUH 3
1) R1 : ATP 4 mmol/L, NAD 3,21 mmol/L, sodium azide 0,05% dan
buffer
2) R2 : ATP 4 mmol/L, NAD 3,21 mmol/L, hexokinase (mokrobial
source) > 6,25 U/ml, G6PD (mokrobial source ) > 11,25 U/ml, sodium
azide 0,05% dan buffer
Persiapan reagen : reagen dan larutan standar siap pakai tanpa dilakukan
pengenceran
30
Stabilitas reagen : reagen stabil sampai masa kadaluarsa bila disimpan
pada suhu 2-8°C. Setelah dibuka untuk analisis reagen stabil 60 hari di
dalam lemari es.
4. Cara Kerja
a. Prosedur Pengambilan Darah Vena
Langkah - langkah pengambilan darah vena :
1) Menyiapkan tabung dan peralatan yang sesuai untuk prosedur flebotomi
2) Mencuci tangan dan memakai sarung tangan
3) Membersihkan tempat tusukan dengan alkohol 70% dan biarkan sampai
kering.
4) Jika memakai vena fossa cubiti, ikatan pembendung dipasang pada
lengan atas dan pasien diminta mengepal dan membuka tangannya
berkali-kali agar vena jelas terlihat.
5) Regangkanlah kulit di atas vena itu dengan jari-jari tangan kiri supaya
posisi vena stabil.
6) Menusuk kulit dengan jarum dan spuit dengan tangan kanan sampai
ujung jarum masuk ke dalam lumen vena.
7) Melepaskan atau merenggangkan pembendungan dan perlahan-lahan
menarik penghisap spuit sampai jumlah darah yang dikehendaki
didapat.
8) Melepas pembendungan jika masih terpasang.
9) Meletakkan kapas di atas jarum dan mencabut spuit dan jarum itu.
31
10) Meminta pasien supaya menekan vena bekas tusukan selama beberapa
menit dengan kapas kering.
11) Darah dialirkan ke dalam wadah atau tabung yang tersedia melalui
dinding tabung (Depkes RI, 1995).
b. Prosedur Pembuatan Plasma
1) Tabung NaF dibolak-balikkan dengan segera secara pelan-pelan.
2) Pemisahan plasma dapat langsung dilakukan dengan menggunakan
sentrifus kecepatan 3000 rpm selama 5-15 menit.
3) Plasma yang memenuhi syarat harus tidak kelihatan merah dan keruh
(lipemik) (Permenkes, 2013).
c. Prosedur penyimpanan Spesimen
Sampel yang sudah dipisahkan menjadi plasma sebagian diperiksa
kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP dan sisanya
disimpan untuk diperiksa menggunakan metoda heksokinase.
Sampel yang disimpan dibekukan dalam frezeer pada suhu -20°C
(jangan sampai terjadi beku ulang). Apabila sampel sudah terkumpul
segera dikirim ke Laboratorium Patologi Klinik RSDM untuk diperiksa
kadar glukosa darah menggunakan metoda heksokinase.
d. Prosedur Pemeriksaan
1. Metoda POCT
a) Prinsip pemeriksaan metoda ini adalah strip tes diletakkan pada alat,
darah diteteskan pada zona reaksi tes strip. Katalisator glukosa akan
mereduksi glukosa dalam darah. Intensitas dari elektron yang
32
terbentuk dalam alat strip setara dengan konsentrasi glukosa dalam
darah
b) Prosedur pemeriksaan kadar glukosa darah metoda POCT
1. Memasang strip tes ke dalam slot strip yang ada di alat.
2. Darah diteteskan langsung dari spuit ke strip tes.
3. Kemudian tetesan darah dibiarkan mengalir pada tes strip sampai
berbunyi beep dan darah akan mengisi sampai batas indikator.
4. Hasil tes akan muncul di layar dalam waktu 7 detik.
5. Mencatat hasil di buku catatan sementara.
6. Mencabut tes strip dari alat.
2. Metoda GOD-PAP
a) Prinsip: Glukosa dioksidasi secara enzimatik menggunakan enzim
glukosa oksidase (GOD), membentuk asam glukonik dan H2O2
kemudian bereaksi dengan fenol dan 4-aminoantipirin dengan
enzim peroksidase (POD) sebagai katalisator membentuk
quinomine. Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan
konsentrasi glukosa dalam specimen dan diukur secara fotometri
pada panjang gelombang 340 nm
Glukosa + O2 + H2O GOD Gluconic acid + H2O2
2H2O2 + 4-aminophenazane + phenol POD quinomine +
4H2O
33
b) Prosedur pemeriksaan kadar glukosa darah metoda GOD-PAP
Pengukuran kadar glukosa darah menggunakan alat Stardust
MC15.
Panjang Gelombang : 500 nm, Hg 546 nm
Temperatur : 20-25°C / 37°C
Parameter pemipetan : Reagen 1000 μL
Sampel 10 μL
Standart 10 μL
c) Prosedur pengoperasian alat
1. Hidupkan alat sampai muncul menu utama.
2. Dari menu utama tekan no.1 (Methods)
3. Masukkan nomor program dari parameter yang akan diukur
[CODE (...)]
4. Masukkan jumlah sampel yang akan diukur [N. SAMPLE (...)]
5. Masukkan posisi kuvet pertama yang akan diukur [INITIAL
POS (...)]
6. Masukkan nomor sampel / pasien [IDENT (...)]
7. Pipetkan reagensia posisi kuvet pertama yang akan diukur
8. Letakkan mikrokuvet ke inkubator 10 menit, untuk mencapai
temperatur 37°C
9. Pipetkan serum kontrol dan sampel ke dalam multikuvet
10. Letakkan multikuvet di mixer dan tekan MIX
11. Letakkan multikuvet di tempat pembacaan dan tekan READ
34
3. Metoda Heksokinase
a) Prinsip : Enzimatik
Glukosa (sampel) + ATP (RI) HLK(R2) G-6-P + ADP
Heksokinase mengkatalisis reaksi phosphorilasi dari glukosa dalam
sampel membentuk glukosa-6-phosphat dengan bantuan ATP.
G-6-P + NADP G6PHD Glukonat-6-P + NADPH + H + glukosa-
6-phosphat dehydrogenase mengoksidasi glukosa-6-phosphat
dengan adanya NADP membentuk glukonat-6-phosphat.
Tidak ada karbohidrat lain yang teroksidasi. Kecepatan
pembentukan NADPH selama reaksi berbanding lurus dengan
konsentrasi glukosa dan dapat diukur secara fotometrik
b) Prosedur pemeriksaan kadar glukosa metode heksokinase
Pengukuran kadar glukosa menggunakan alat otomatis ILab 650.
Panjang Gelombang : 340/410 nm
Tipe Reaksi : endpoint
Unit : mg/dl
Parameter pemipetan : R1 80 μL
R2 18 μL
Sampel 3,4 μL
c) Prosedur pengoperasian alat :
1. Hidupkan personal computer (PC) computer dan monitor
tunggu sampai masuk ke software ILab 650 Clinical Chemistry
System
35
2. Ketik user name : ILab, password : ILab
3. Pastikan sistem date sudah sesuai – New Start/Re-Start-Ok
4. Pada analyser panel set alat dari operate/Standby putar ke
operator (on). Maka indikator power menyala dan start, ready
akan kedip-kedip.
5. Pada saat indikator start dan ready sudah tidak menyala tunggu
sampai initilize aktif, klik initialize.
6. Lakukan Daily Maintenance :
- Cek secara visual larutan :
Cuvette wash, cuvette conditioner, 0,9% normal saline jika
diganti klik prime-prime 2-execute.
- Cek volume pada posisi 53 berisi Probe Wash 1 dan 56 berisi
DI (Dieionized) Water Round Trip Time (RTT 1 & RTT 2)
- Cek level Lamp Coolant.
- Cek Probe dan mixing rad bersihkan jika kotor dengan tissue
bebas serat.
- Cek WUD dan DWUD, probe wash station, jika kotor
bersihkan dengan tissue bebas serat.
- Cek posisi tutup reagen tertutup dengan rapat.
7. Menu Panel: Maint-System Monitor cek apakah kondisi alat
OK.
8. Menu panel: Reagent-Reagent Inventory cek jumlah test pada
RTT 1 & RTT 2 ganti jika sudah habis-Barcode Scan.
36
9. Lakukan Start-Up Wash (Wash 3).
Menu Panel: Wash-Wash 3-Execute
Wash 3 CTT RTT 1 RTT 2
Posisi 51 56 56
Material DI Water DI Water DI Water
10. Masukkan data pasien dan menjalankan pemeriksaan.
11. Menu Panel: Request-Order Entry-Routine-New
12. Pada Routine :
- Posis.No : masukkan posisi sampel Tray dan Cup...
- Samp.No : masukkan nomor sampel
- Pastikan : System Dilution Mode, Container, Samp.Type,
Dil.Faktor, Comment(Nama), Sex. Blood Collection Date.
13. Order Test :
- Test table : pilih test yang akan dijalankan-Enter-New-
Exit
37
F. Analisis Data
Data yang telah terkumpul dianalisis secara statistik menggunakan
Statistical Package for the Social Science (SPSS) untuk mendapatkan
rerata, standar deviasi (SD), nilai maksimum dan minimum. Kemudian
dilakukan uji normalitas untuk mengetahui distribusi data tersebut normal
atau tidak dengan menggunakan uji statistik Kolmogorov-Smirnov Test.
Jika data tidak terdistribusi normal maka dilakukan transformasi data. Dari
hasil transformasi data jika terdistribusi normal selanjutnya dilakukan uji
parametrik untuk menguji tiga sampel berpasangan menggunakan Uji
Repeated Anova, sedangkan jika data tidak terdistribusi normal
menggunakan Uji Friedman. Untuk menguji dua sampel berpasangan jika
data terdistribusi normal menggunakan uji Paired Sample T-Test untuk
membandingkan antara kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT
dan metoda GOD-PAP dengan metoda Heksokinase. Jika data tidak
terdistribusi normal dilakukan uji nonparametrik Wilcoxon.
38
G. Kerangka alur penelitian
Gambar 2. Kerangka Alur Penelitian
Populasi
Sampel
Darah vena dengan
NaF
Sentrifus 3000 rpm
15 menit
Metoda GOD-PAP Metoda POCT Metoda
Heksokinase
Analisis
Hasil
Plasma
Whole blood
39
BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. Karakteristik Hasil Penelitian
Penelitian kadar glukosa darah dilakukan di Laboratorium RSJD
Surakarta dan Laboratorium Patologi Klinik Rumah Sakit Umum Daerah Dr.
Moewardi, pada pasien rawat inap RSJD Surakarta. Subyek penelitian
berjumlah 66 yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Karakteristik
subyek penelitian dapat dilihat pada tabel dibawah ini:
Tabel 2. Data karakteristik dasar subyek penelitian
Variabel SB Rerata Min Max
Jumlah 66
Hasil Pemeriksaan
Glukosa
- Metoda Heksokinase 45.12 129.5 70 280
- Metoda GOD-PAP 42.03 114 65 260
- Metoda POCT 41.24 126 78 278
Ket: SB = Simpang Baku, Min = Nilai Terendah, Maks = Nilai Tertinggi
Karakteristik subyek penelitian didapatkan bahwa dari 66 subyek, kadar
glukosa darah menggunakan metoda Heksokinase memiliki rerata 129.5
mg/dL, simpang baku 45.12 mg/dL, nilai terendah 70 mg/dL, nilai tertinggi
280 mg/dL. Kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP diperoleh
rerata 114 mg/dL, simpang baku 42.03 mg/dL, nilai terendah 65 mg/dL, nilai
tertinggi 260 mg/dL. Kadar glukosa darah dengan metoda POCT didapatkan
rerata 126 mg/dL, simpang baku 41.24 mg/dL, dengan nilai terendah 78 mg/dL
dan nilai tertinggi 278 mg/dL.
40
Analisis data meliputi uji normalitas data dengan menggunakan uji
Kolmogorov-Smirnov. Pada penelitian kadar glukosa darah menggunakan
metoda POCT, GOD-PAP dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi sebesar
0.00 (P<0.05) sehingga data pada penelitian ini tidak terdistribusi normal.
Karena data tidak terditribusi normal selanjutkan dilakukan
transformasi data untuk menormalkan data yang tidak terdistribusi normal.
Tabel 3. Hasil transformasi data
Metoda sig
Heksokinase 0.200
GOD-PAP 0.014
POCT 0.001
Dari transformasi data pada metoda Heksokinase diperoleh nilai
signifikansi 0.200, pada metoda GOD-PAP diperoleh nilai signifikansi 0.014
sedangkan pada metoda POCT diperoleh nilai signifikansi 0.001. Karena
terdapat dua hasil sig yang kurang dari 0.05 maka dapat disimpulkan bahwa
data tidak terdistribusi normal sehingga dilanjutkan dengan uji nonparametrik
Friedman dan Wilcoxon.
Hasil analisis data dengan uji beda Friedman pada perbandingan kadar
glukosa darah menggunakan metoda POCT, GOD-PAP dan Heksokinase
didapatkan nilai signifikansi sebesar 0.00 (p<0.05) berarti bahwa kadar glukosa
darah menggunakan metoda POCT, GOD-PAP dan Heksokinase terdapat
perbedaan yang bermakna.
41
Tabel 4. Uji Beda 3 Kelompok Metoda
Variabel Rerata Sign
Heksokinase 129.5
POCT 126 0,000*
GOD-PAP 114
Ket. p < 0.05 bermakna
Hasil uji wilcoxon pada pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan
metoda GOD-PAP dan POCT diperoleh nilai signifikansi 0.00 (p<0.05).
Karena nilai signifikansi kurang dari 0.05 berarti terdapat perbedaan yang
bermakna antara kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP dan
POCT.
Hasil uji wilcoxon pada pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan
metoda GOD-PAP dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi 0.00 (p<0.05).
Karena nilai signifikansi kurang dari 0.05 berarti terdapat perbedaan yang
bermakna antara pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda
GOD-PAP dan Heksokinase.
Hasil uji wilcoxon pada pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan
metoda POCT dan Hekokinase diperoleh nilai signifikansi 0.076 (p>0.05). Hal
ini menunjukkan bahwa nilai signifikansi lebih besar dari 0.05 berarti tidak ada
perbedaan yang bermakna antara pemeriksaan kadar glukosa darah
menggunakan metoda POCT dan Heksokinase.
42
Tabel 5. Uji beda 2 kelompok metoda
Heksokinase POCT
GOD p = 0.000* p = 0.000*
POCT p = 0.076*
Ket. P < 0.05 bermakna
B. Pembahasan
Berdasarkan hasil uji statistik menunjukkan bahwa penelitian yang
dilakukan terhadap 66 subyek sampel didapatkan perbedaan kadar glukosa
darah yang signifikan antara ketiga metoda pemeriksaan.
Hasil analisis data didapatkan kadar glukosa darah menggunakan
metoda Heksokinase, GOD-PAP dan POCT menunjukkan perbedaan yang
signifikan. Sedangkan pada penelitian yang dilakukan oleh Bahruddin et.al.
tahun 2012 menunjukkan hasil yang berbeda yaitu tidak didapatkan perbedaan
yang signifikan dari hasil kadar glukosa darah menggunakan tiga metoda. Hal
ini dapat disebabkan karena kondisi pada saat pemeriksaan, baik kondisi
laboratorium itu sendiri (suhu, kelembaban), pemantapan mutu internal
(kalibrasi, quality control), maintenance alat laboratorium.
Hasil analisis data didapatkan kadar glukosa darah menggunakan
metoda GOD-PAP dan POCT menunjukkan perbedaan yang signifikan. Hal ini
sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Hilda et.al. tahun 2011 diperoleh
hasil nilai signifikansi sebesar 0.000 ( p<0.05) yang berarti ada perbedaan yang
signifikan antara hasil pemeriksaan glukosa darah dengan metoda GOD-PAP
dan POCT. Alat yang digunakan dalam kedua metoda ini yaitu
spektrofotometer dan glukometer sama-sama menggunakan metoda enzimatik
43
dalam penggunaannya, akan tetapi masing-masing alat mempunyai perbedaan
bila ditinjau dari prinsip kerja dan sampel pemeriksaan. Pemantapan mutu
untuk alat POCT yaitu kalibrasi dan QC belum dilakukan dan dianalisis karena
masih mengikuti petunjuk QC dari reagen kit.
Hasil analisis data kadar glukosa darah menggunakan metoda
Heksokinase dan GOD-PAP menunjukkan perbedaan yang signifikan hal ini
dapat disebabkan karena pada metoda GOD-PAP enzim glukosa oksidase
dapat bereaksi dengan oksigen dalam darah, sehingga dapat menyebabkan
kesalahan pengukuran kadar glukosa darah/intervensi oksigen pada hasil
pengukuran kadar glukosa. Pada metoda GOD-PAP pemeriksaan telah
dilakukan sesuai dengan standar operasional, akan tetapi kontrol rutin dan
maintenance alat blm dilakukan dengan baik dan maksimal.
Hasil analisis data kadar glukosa darah menggunakan metoda
Heksokinase dan POCT menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan.
Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Bahruddin et.al. tahun
2012 didapatkan nilai signifikansi p>0.05 yang berarti tidak terdapat perbedaan
yang signifikan antara pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda
Heksokinase dan POCT. Pada metoda POCT terdapat kesesuaian dengan
metoda Heksokinase akan tetapi pemantauan terhadap pemantapan mutu harus
diperbaiki dan dilakukan secara berkala, karena tidak dilakukan dengan bahan
kontrol khusus yang spesifik untuk pemantauan quality control internal alat.
Metoda POCT hanya untuk screening dan pemantauan kadar glukosa darah,
bukan untuk menegakkan diagnosis klinis.
44
Faktor interferensi yang menyebabkan kesalahan pembacaan di
glukometer digolongkan menjadi dua kelompok, yaitu: gula dan zat yang dapat
mengganggu. Reaksi silang dapat terjadi antara enzim di uji strip dan zat dalam
darah yang mirip dengan glukosa seperti maltosa dan galaktosa. Faktor lain
yang berpengaruh pada pemeriksaan glukosa darah antara lain ialah pengaruh
oksigen, asetaminofen, asam askorbat dan urat, bilirubin, hematokrit serta
tekanan darah rendah (Astuti, 2012)
Dari masing-masing kelompok penelitian dengan alat dan metoda yang
berbeda ternyata didapatkan hasil yang berbeda hal ini dapat disebabkan karena
perbedaan metoda, perbedaan alat, kondisi yang menunjang ( seperti faktor
akomodasi laboratorium, suhu, kelembaban), pengaturan suhu penyimpanan
reagen, kurangnya maintenance alat laboratorium ( Harian, Bulanan,
Mingguan) serta kualitas kontrol yang kurang baik ( kalibrasi, quality control,
standar operasional pengerjaan meliputi manusia, alat)
Keterbatasan dari penelitian ini adalah tidak dilakukan penggolongan
pemeriksaan glukosa darah dari kadar rendah, normal, dan tinggi. Penelitian
dilakukan di dua laboratorium yang berbeda juga merupakan keterbatasan dari
penelitian ini.
45
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian pada uji beda tiga kelompok metoda
didapatkan kesimpulan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar
glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda GOD-PAP
dibandingkan dengan metoda Heksokinase sebagai metoda standar. Pada uji
beda dua kelompok metoda yaitu metoda Heksokinase dengan metoda GOD-
PAP terdapat perbedaan yang signifikan. Pada metoda Heksokinase dengan
metoda POCT tidak terdapat perbedaan yang signifikan. Sedangkan pada
metoda GOD-PAP dengan metoda POCT terdapat perbedaan yang signifikan.
B. SARAN
Berdasarkan penelitian ini maka:
- Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mungkin dengan jumlah sampel
yang lebih besar.
- Analisis dapat digolongkan dengan kadar yang bertingkat (kadar glukosa
rendah, normal, tinggi).
- Perlu dilakukan perbaikan kondisi laboratorium secara umum dan
peralatan yang ada didalamnya.
- Pemilihan metoda sebisa mungkin menggunakan metoda rujukan atau
paling tidak dilakukan uji kesesuaian dengan metoda standar/rujukan.
- Perlu dilakukan pemantapan mutu baik internal maupun eksternal.
- Perlu dilakukan maintenance dan kalibrasi alat secara rutin dan berkala.
46
DAFTAR PUSTAKA
Aulia, D. 2016. POCT (Point Of Care Testing) Pada Pemeriksaan Glukosa dan
Keton Darah. Departemen Patologi Klinik FKUI-RSCM.
Baron, D.N., 1990. Kapita Selekta Patologi Klinik. Jakarta: EGC.
Dahlan, M.S., 2014. Statistik Untuk Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta:
Epidemiologi Indonesia
Departemen Kesehatan RI. 2005. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium Untuk
Penyakit Diabetes Mellitus. Jakarta.
Ganong, W.F. 2010. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC.
Guyton and Hall. 2007. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC.
Hardjoeno. 2003. Interpretasi Hasil Tes Laboratorium Diagnostik. Jakarta: EGC.
Kee, J.L. 2007. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium dan Diagnostik. Jakarta:
EGC.
Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1792 Tahun 2010
Tentang Pedoman Pemeriksaan Kimia Klinik. Jakarta.
Murray, R.K. 2014. Biokimia Harper. Jakarta: EGC.
Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 43 Tahun 2013 Tentang
Cara Penyelenggaran Laboratorium Klinik yang Baik. Jakarta.
Poedjiadi, A. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: Penerbit Universitas
Indonesia.
Prasetyo, Lina Miftahul Jannah. 2013. Metode Penelitian Kuantitatif. Jakarta: PT.
RajaGrafindo Persada.
Price, S.A. 2005. Konsep Klinis Proses-proses Penyakit. Jakarta: EGC.
Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan
diabetes Mellitus tipe II di Indonesia. Jakarta: PB PERKENI; 2011.
Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan
diabetes Mellitus tipe II di Indonesia. Jakarta: PB PERKENI; 2015.
Robey, R.B.; Hay, N. 2006.“Mitokondria Hexokinase, mediator novel dengan efek
antiapoptotic faktor pertumbuhan dan Akt” Onkogen. Jakarta: 2006.
Sabri. et al. 2014. Statistik Kesehatan. Jakarta: Rajawali Pers.
47
Sacher, R.A. et al. 2004. Tinjauan Klinis Pemeriksaan Laboratorium. Jakarta:
EGC.
Sadikin, H.M. 2002. Biokimia Darah. Jakarta: Widya Medika.
Harti, A.S. 2014. Biokimia Kesehatan. Yogyakarta: Nuha Medika.
Suryaatmadja, M. 2003. Pendidikan Berkesinambungan Patologi Klinik. Jakarta:
Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.
Widmann, F.K. 1995. Tinjauan Klinis Atas Hasil Pemeriksaan Laboratorium.
Jakarta: ECG.
47
L
A
M
P
I
R
A
N
48
Lampiran 1. Data Subyek
DATA SUBYEK
NO
Kode Sampel
Hasil
GOD-PAP POCT Heksokinase
1 1 89 103 107
2 2 84 106 98
3 3 124 131 155
4 4 108 123 134
5 5 110 137 140
6 6 123 136 150
7 7 97 119 127
8 8 141 160 148
9 9 95 124 105
10 10 110 137 136
11 11 235 252 280
12 12 147 135 161
13 13 112 128 148
14 14 119 125 148
15 15 89 104 131
16 16 255 260 278
17 17 116 117 124
18 18 75 88 84
19 19 73 85 96
20 20 115 129 136
21 21 101 117 127
22 22 127 143 154
23 23 116 132 104
24 24 84 93 100
25 25 98 119 95
26 26 96 110 120
27 27 93 93 106
28 28 92 110 120
29 29 65 78 80
30 30 94 108 115
31 31 187 190 219
32 32 145 151 184
33 33 104 115 109
49
34 34 98 114 108
35 35 87 102 94
36 36 125 134 126
37 37 129 138 152
38 38 96 110 105
39 39 129 130 165
40 40 70 81 70
41 41 114 129 123
42 42 114 123 120
43 43 93 108 103
44 44 101 105 136
45 45 97 117 116
46 46 112 115 136
47 47 257 261 234
48 48 149 155 153
49 49 85 95 80
50 50 80 96 89
51 51 70 94 90
52 52 106 123 136
53 53 79 101 92
54 54 140 155 174
55 55 91 102 114
56 56 153 165 157
57 57 107 117 118
58 58 93 97 72
59 59 94 102 93
60 60 133 137 95
61 61 88 99 96
62 62 93 98 104
63 63 88 90 96
64 64 98 103 117
65 65 78 81 90
66 66 260 278 271
Jumlah 7526 8313 8544
Mean 114 126 129.5
SB 42.03 41.24 45.12
Min 65 78 70
Max 260 278 280
50
Lampiran 2. Data Penelitian Kadar Glukosa
Data penelitian pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP,
POCT, dan Heksokinase
No. GOD-PAP POCT Heksokinase Trans_MetGOD Trans_POCT Trans_MetHekso
1 89 103 107 1.95 2.01 2.03
2 84 106 98 1.92 2.03 1.99
3 124 131 155 2.09 2.12 2.19
4 108 123 134 2.03 2.09 2.13
5 110 137 140 2.04 2.14 2.15
6 123 136 150 2.09 2.13 2.18
7 97 119 127 1.99 2.08 2.10
8 141 160 148 2.15 2.20 2.17
9 95 124 105 1.98 2.09 2.02
10 110 137 136 2.04 2.14 2.13
11 235 252 280 2.37 2.40 2.45
12 147 135 161 2.17 2.13 2.21
13 112 128 148 2.05 2.11 2.17
14 119 125 148 2.08 2.10 2.17
15 89 104 131 1.95 2.02 2.12
16 255 260 278 2.41 2.41 2.44
17 116 117 124 2.06 2.07 2.09
18 75 88 84 1.88 1.94 1.92
19 73 85 96 1.86 1.93 1.98
20 115 129 136 2.06 2.11 2.13
21 101 117 127 2.00 2.07 2.10
22 127 143 154 2.10 2.16 2.19
23 116 132 104 2.06 2.12 2.02
24 84 93 100 1.92 1.97 2.00
25 98 119 95 1.99 2.08 1.98
26 96 110 120 1.98 2.04 2.08
27 93 93 106 1.97 1.97 2.03
28 92 110 120 1.96 2.04 2.08
29 65 78 80 1.81 1.89 1.90
30 94 108 115 1.97 2.03 2.06
31 187 190 219 2.27 2.28 2.34
32 145 151 184 2.16 2.18 2.26
33 104 115 109 2.02 2.06 2.04
34 98 114 108 1.99 2.06 2.03
51
35 87 102 94 1.94 2.01 1.97
36 125 134 126 2.10 2.13 2.10
37 129 138 152 2.11 2.14 2.18
38 96 110 105 1.98 2.04 2.02
39 129 130 165 2.11 2.11 2.22
40 70 81 70 1.85 1.91 1.85
41 114 129 123 2.06 2.11 2.09
42 114 123 120 2.06 2.09 2.08
43 93 108 103 1.97 2.03 2.01
44 101 105 136 2.00 2.02 2.13
45 97 117 116 1.99 2.07 2.06
46 112 115 136 2.05 2.06 2.13
47 257 261 234 2.41 2.42 2.37
48 149 155 153 2.17 2.19 2.18
49 85 95 80 1.93 1.98 1.90
50 80 96 89 1.90 1.98 1.95
51 70 94 90 1.85 1.97 1.95
52 106 123 136 2.03 2.09 2.13
53 79 101 92 1.90 2.00 1.96
54 140 155 174 2.15 2.19 2.24
55 91 102 114 1.96 2.01 2.06
56 153 165 157 2.18 2.22 2.20
57 107 117 118 2.03 2.07 2.07
58 93 97 72 1.97 1.99 1.86
59 94 102 93 1.97 2.01 1.97
60 133 137 95 2.12 2.14 1.98
61 88 99 96 1.94 2.00 1.98
62 93 98 104 1.97 1.99 2.02
63 88 90 96 1.94 1.95 1.98
64 98 103 117 1.99 2.01 2.07
65 78 81 90 1.89 1.91 1.95
66 260 278 271 2.41 2.44 2.43
52
Lampiran 3. Data Uji Statistik
Data Karakteristik Dasar Subyek Penelitian
Descriptives
Statistic
Std.
Error
MetGOD Mean 114.03 5.173
95%
Confidence
Interval for
Mean
Lower
Bound
103.70
Upper
Bound
124.36
5% Trimmed Mean 108.70
Median 101.00
Variance 1766.399
Std. Deviation 42.029
Minimum 65
Maximum 260
Range 195
Interquartile Range 34
Skewness 2.219 .295
Kurtosis 5.219 .582
POCT Mean 125.95 5.077
95%
Confidence
Interval for
Mean
Lower
Bound
115.82
Upper
Bound
136.09
5% Trimmed Mean 120.76
Median 117.00
Variance 1700.998
Std. Deviation 41.243
Minimum 78
Maximum 278
Range 200
Interquartile Range 33
Skewness 2.262 .295
Kurtosis 5.573 .582
MetHeksokinase Mean 129.45 5.554
95%
Confidence
Interval for
Mean
Lower
Bound
118.36
Upper
Bound
140.55
5% Trimmed Mean 124.56
Median 120.00
Variance 2035.913
Std. Deviation 45.121
Minimum 70
Maximum 280
Range 210
Interquartile Range 51
Skewness 1.789 .295
Kurtosis 3.644 .582
53
trans_GOD Mean 2.0353 .01601
95%
Confidence
Interval for
Mean
Lower
Bound
2.0034
Upper
Bound
2.0673
5% Trimmed Mean 2.0257
Median 2.0043
Variance .017
Std. Deviation .13003
Minimum 1.81
Maximum 2.41
Range .60
Interquartile Range .14
Skewness 1.243 .295
Kurtosis 1.925 .582
trans_POCT Mean 2.0828 .01436
95%
Confidence
Interval for
Mean
Lower
Bound
2.0541
Upper
Bound
2.1115
5% Trimmed Mean 2.0738
Median 2.0682
Variance .014
Std. Deviation .11669
Minimum 1.89
Maximum 2.44
Range .55
Interquartile Range .12
Skewness 1.314 .295
Kurtosis 2.308 .582
trans_Hexo Mean 2.0910 .01615
95%
Confidence
Interval for
Mean
Lower
Bound
2.0587
Upper
Bound
2.1232
5% Trimmed Mean 2.0841
Median 2.0792
Variance .017
Std. Deviation .13117
Minimum 1.85
Maximum 2.45
Range .60
Interquartile Range .18
Skewness .811 .295
Kurtosis .873 .582
54
Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
MetGOD .193 66 .000 .750 66 .000
POCT .218 66 .000 .751 66 .000
MetHeksokinase .154 66 .000 .828 66 .000
trans_GOD .123 66 .014 .901 66 .000
trans_POCT .146 66 .001 .894 66 .000
trans_Hexo .085 66 .200* .949 66 .008
Hasil Uji Friedman
Ranks
Mean Rank
trans_GOD 1.14
trans_POCT 2.42
trans_Hexo 2.45
Test Statisticsa
N 66
Chi-Square 74.435
Df 2
Asymp. Sig. .000
a. Friedman Test
55
Hasil Uji Wilcoxon
Test Statisticsb
trans_POCT -
trans_GOD
trans_Hexo -
trans_GOD
trans_Hexo -
trans_POCT
Z -6.845a -5.813
a -1.776
a
Asymp. Sig. (2-tailed) .000 .000 .076
a. Based on negative ranks.
b. Wilcoxon Signed Ranks Test
56
Lampiran 4.
FORMULIR PERSETUJUAN MENGIKUTI PENELITIAN
Yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama .............................................................
Umur .............................................................
Alamat ..........................................................
Telp ...............................................................
Pekerjaan ......................................................
Menerangkan bahwa setelah mendapatkan keterangan yang jelas dan lengkap
tentang tujuan penelitian, menyatakan bersedia mengikuti penelitian dan tidak
berkeberatan untuk dilakukan pemeriksaan fisik dan laboratorium.
Surakarta,
Pasien Peneliti
(............................) (Deka Wulansari Herviyani)
Saksi
(..............................)
57
Lampiran 5.
58
Lampiran 6.
59
60
Lampiran 8.
61
Lampiran 9.
62
Lampiran 10. Foto Alat dan Bahan Penelitian
A. Startdust MC15
63
B. Sentrifuge
64
C. Alat Sampling Darah
65
D. Bahan pemeriksaan glukosa darah
