PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI - core.ac.uk · E. Metode Uji Hepatotoksisitas ... Gambar 1. Struktur mikroskopik hati ... hati yang dapat disebabkan oleh virus hepatitis,

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PENDEK INFUSA DAUNMacaranga tanarius L. PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR

TERINDUKSI PARASETAMOL

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh :

Ari Widya Nugraha

NIM : 078114061

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2011

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PENDEK INFUSA DAUNMacaranga tanarius L. PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR

TERINDUKSI PARASETAMOL

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh :

Ari Widya Nugraha

NIM : 078114061

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2011


ii


iii


iv

”Iman membuka pintu kepada prestasi

yang paling tinggi”

Kupersembahkan skripsi ini untuk

Tuhan Yesus Kristus,

karena Engkau adalah sumber kekuatanku

Papa dan Mama, serta keluarga tercinta atas kasih

sayang, dukungan, doa dan semangat

Priskila Lisa atas cinta, kesabaran, dukungan, dan doa

Sahabatku semua

Almamaterku


v


vi


vii

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas

berkat dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan

judul “Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Infusa Daun M. tanarius pada

Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Parasetamol” ini dengan baik. Skripsi

ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana

Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

Penyelesaian skripsi ini tentunya tidak lepas dari bantuan dari berbagai

pihak, baik secara langsung maupun secara tidak langsung. Oleh karena itu

penulis hendak mengucapkan terima kasih kepada :

1. Tuhan Yesus Kristus yang telah memberikan hikmat, kekuatan, tuntunan, dan

pertolongan kepada penulis sehingga skripsi ini dapat terselesaikan sesuai

dengan rencana-Nya.

2. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

3. Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dosen Pembimbing skripsi ini atas

segala kesabaran untuk selalu membimbing, memberi motivasi, dan memberi

masukan kepada penulis dalam menyusun skripsi ini.

4. Yosef Wijoyo, M.Si., Apt., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan

masukkan kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.

5. Dr. CJ Soegihardjo, Apt., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan

masukkan, kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.


viii

6. Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Pembimbing Akademik penulis

atas bantuan, masukkan, pendampingan dan dukungan kepada penulis demi

kemajuan skripsi ini.

7. Rini Dwiastuti, M.Si., Apt., selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium

Fakultas Farmasi yang telah memberi izin dalam penggunaan fasilitas

laboratorium Farmakologi-Toksikologi dan Farmakognosi-Fitokimia demi

terselesaikannya skripsi ini.

8. Mas Parjiman dan Mas Heru selaku laboran Laboratorium Farmakologi, Mas

Kayat dan Mas Ratijo selaku laboran Laboratorium Hayati, Mas Wagiran,

selaku laboran Farmakognosi-Fitokimia, serta mas Andri selaku laboran di

kebun obat, atas segala bantuan dan kerjasama selama di laboratorium.

9. Rekan-rekan penelitian tim macaranga, Ariyanti Prima Andini, Elisa Eka,

Dina Wulandari, Andreas Arry Mahendra, dan Aloysia Yossi Kurniawati atas

bantuan, kerjasama, perjuangan dan suka duka yang telah kita alami bersama

selama penelitian.

10. Teman-teman seperjuangan, Cosmaz Mora, Aloysius Bimo Tiar, Hendrika Toi

Doja, Agustina Nila, dan Maria Ratri Damarini atas persahabatan, suka duka

dan kebersamaan kita.

11. Teman-teman FKK A, FKK B, dan FST angkatan 2007 atas kebersamaan kita.

12. Teman-teman UKF Basket Farmasi atas dukungan dan kebersamaan selama

ini.

13. Pihak-Pihak lain yang turut membantu penulis namun tidak dapat disebutkan

satu persatu.


ix

Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh

karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik, saran dan masukan demi

kemajuan di masa yang akan datang. Semoga tulisan ini dapat memiliki manfaat

sekecil apapun bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang

kefarmasian, serta semua pihak, baik mahasiswa, lingkungan akademis, maupun

masyarakat.

Yogyakarta, 2 Januari 2010

Penulis


x

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL……………………………………………………….......... i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING……………………………........ ii

HALAMAN PENGESAHAN……………………………………………............ iii

HALAMAN PERSEMBAHAN……………………………………………........ iv

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH v

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA………………………………................. vi

PRAKATA..............................................…............................................................. vii

DAFTAR ISI……………………………………………………………….......... x

DAFTAR TABEL………………………………………………………….......... xiv

DAFTAR GAMBAR............................................................................................. xv

DAFTAR LAMPIRAN…………………………………………………….......... xvi

INTISARI…………………………………………………………………........... xii

ABSTRACT………………………………………………………………............. xiii

BAB I. PENGANTAR……………………………………………........................ 1

A. Latar Belakang…………………………………………..……………….......... 1

1. Permasalahan.......…………………………………......……….................... 3

2. Keaslian penelitian…………………………………………….......……...... 4

3. Manfaat penelitian…………………………………………………..…........ 5

B. Tujuan Penelitian................................................................................................. 5

BAB II. PENELAHAAN PUSTAKA...................................................................... 6

A. Anatomi dan Fisiologi Hati ................................................................................. 6


xi

B. Kerusakan Hati.................................................................................................... 9

C. Hepatotoksin....................................................................................................... 10

D. Parasetamol......................................................................................................... 10

E. Metode Uji Hepatotoksisitas............................................................................... 13

F. Macaranga tanarius L......................................................................................... 14

1. Sinonim………………………………………………………...................... 14

2. Nama daerah………………………………………………………….......... 14

3. Taksonomi dari daun Macaranga tanarius L. ........……………………........ 15

4. Morfologi………………………………………………………………....... 15

5. Kandungan tanaman...................................................................................... 15

J. Landasan Teori..................................................................................................... 18

K. Hipotesis ............................................................................................................ 19

BAB III. METODE PENELITIAN......................................................................... 20

A. Jenis dan Rancangan Penelitian.......................................................................... 20

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ..................................................... 20

1. Variabel penenlitian...................................................................................... 20

2. Definisi operasional...................................................................................... 21

C. Bahan Penelitian.................................................................................................. 21

1. Bahan utama................................................................................................. 21

2. Bahan kimia.................................................................................................. 21

D. Alat Penelitian……............................................................................................. 22

1. Alat pembuatan infusa daun M. tanarius...................................................... 22

2. Alat uji hepatoprotektif................................................................................ 22


xii

E. Tata Cara Penelitian ............................................................................................ 23

1. Determinasi daun M. tanarius...................................................................... 23

2. Pengumpulan bahan uji................................................................................. 23

3. Pembuatan serbuk daun M. tanarius............................................................ 23

4. Pembuatan infusa daun M. tanarius............................................................. 24

5. Pembuatan CMC-Na 1%.............................................................................. 24

6. Pembuatan suspensi parasetamol.................................................................. 24

7. Uji pendahuluan........................................................................................... 25

8. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji.................................................... 25

9. Pembuatan serum......................................................................................... 26

10. Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST................................................ 26

F. Tata Cara Analisis Hasil……………………………………...................…........ 27

BAB IV . HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................... 28

A. Hasil Determinasi Tanaman……….................................................................... 28

B. Orientasi Waktu Pencuplikan Darah Hewan Uji................................................. 28

C. Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Infusa Daun M. tanarius terhadap Ti-

kus Jantan Terinduksi Parasetamol..................................................................... 32

1. Kontrol negatif aquadest 5 g/kgBB…………………………....................... 36

2. Kontrol parasetamol 2,5 g/kgBB……………………………....................... .37

3. Kontrol perlakuan infusa daun M. tanarius 5 g/kgBB................................... 38

4. Perlakuan infusa daun M. tanarius dosis 5 g/kgBB pada tikus jantan terinduksi

parasetamol 2,5 g/kgBB………..................................................................... 38

D. Rangkuman Pembahasan..................................................................................... 42


xiii

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN................................................................ 45

A. Kesimpulan.......................................................................................................... 45

B. Saran..................................................................................................................... 45

DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................. 46

LAMPIRAN............................................................................................................. 49

BIOGRAFI PENULIS............................................................................................ .... 85


xiv

DAFTAR TABEL

Tabel I. Aktivitas serum ALT dan Perbandingan Antar Waktu Pencuplikan Darah

pada Parasetamol Dosis 2,5 g/kgBB........................................................... 29

Tabel II. Aktivitas serum AST dan Perbandingan Antar Waktu Pencuplikan Darah

pada Parasetamol Dosis 2,5 g/kgBB........................................................... 30

Tabel III. Pengaruh perlakuan jangka pendek infusa daun M. tanarius 5g/kg BB di

lihat dari aktivitas serum ALT pada berbagai variasi waktu terhadap hepa

toksisitas parasetamol.................................................................................. 33

Tabel IV. Pengaruh perlakuan jangka pendek infusa daun M. tanarius 5g/kg BB di

lihat dari aktivitas serum AST pada berbagai variasi waktu terhadap hepa

toksisitas parasetamol.................................................................................. 34


xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur mikroskopik hati.................................................. .............. 6

Gambar 2. Struktur parasetamol.......................................................................... 10

Gambar 3. Metabolisme parasetamol dan pembentukan metabolit NAPQI

serta mekanismenya pada terjadinya kematian sel

.................................................................................................................. 12

Gambar 4. Struktur senyawa dalam tanaman M. tanarius.................................. 17

Gambar 5. Diagram batang aktivitas ALT tikus setelah induksi parasetamol 2,5

g/kg BB pada pencuplikan darah 24 jam, 48 jam, dan 72 jam.......... 30

Gambar 6. Diagram batang aktivitas AST tikus setelah induksi parasetamol 2,5

g/kg BB pada pencuplikan darah 24 jam, 48 jam, dan 72 jam.......... 31

Gambar 7. Diagram batang pengaruh praperlakuan IDM dosis 5 g/kg BB pada

aktivitas ALT tikus........................................................................... 35

Gambar 8. Diagram batang pengaruh praperlakuan IDM dosis 5 g/kg BB pada

aktivitas AST tikus........................................................................... 35


xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto daun M. tanarius...................................................................... 49

Lampiran 2. Foto infusa daun M. tanarius……................................................... 49

Lampiran 3. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius........................ 50

Lampiran 4. Hasil Analisis Kolmogorov-Smirnov dilanjutkan Anova One-Way

data ALT pada orientasi waktu pengambilan cuplikan darah sete-

lah pemberian parasetamol dosis toksik (2,5 g/kgBB).................... 51

Lampiran 5. Hasil Analisis Kolmogorov-Smirnov dilanjutkan Anova One-Way

data AST pada orientasi waktu pengambilan cuplikan darah sete-

lah pemberian parasetamol dosis toksik (2,5 g/kgBB)................... 54

Lampiran 6. Hasil analisis statistik data ALT perlakuan infusa daum M. tanarius

(5 g/kgBB) pada tikus jantan terinduksi parasetamol dosis toksik

(2,5g/kgBB)..................................................................................... 57

Lampiran 7. Hasil analisis statistik data AST perlakuan infusa daum M. tanarius

(5 g/kgBB) pada tikus jantan terinduksi parasetamol dosis toksik

(2,5g/kgBB)..................................................................................... 77

Lampiran 8. Perhitungan Efek Hepatoprotektif Data ALT.................................. 83

Lampiran 9. Perhitungan Efek Hepatoprotektif Data AST................................. 84


xvii

INTISARI

Telah dilakukan penelitian tentang efek hepatoprotektif jangka pendekinfusa daun Macaranga tanarius L. pada tikus jantan terinduksi parasetamol.Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh informasi apakah pemberian jangkapendek infusa daun M. tanarius dapat memberikan efek hepatoprotektif, danseberapa lama waktu efektif yang diperlukan untuk berefek hepatoprotektif.

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni denganrancangan penelitian acak lengkap pola searah. Metode yang digunakan dalampenelitian ini adalah metode pengukuran aktivitas serum Alanin Aminotransferase(ALT) and serum Aspartat Aminotransferase (AST). Sebanyak 40 tikus jantangalur Wistar dibagi menjadi 8 kelompok, yaitu kelompok kontrol positif(parasetamol dosis 2,5 g/kg BB), kelompok kontrol negatif (hanya diberikanaquadest 5 g/kg BB), kelompok kontrol infusa daun M. tanarius dosis 5 g/kg BB,dan 5 kelompok perlakuan yang diberi dosis infusa M. tanarius 5 g/kg BBberturut-turut selama ½, 1, 2, 4, dan 6 jam, kemudian diberi parasetamol. Pada 48jam setelah pemberian parasetamol, diambil cuplikan darah melalui sinus orbitalismata. Darah yang diambil ditetapkan aktivitas serum ALT dan AST-nya.

Praperlakuan jangka pendek infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB mampumenghasilkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi parasetamol 2,5g/kg BB dengan waktu ½, 1, 2, 4, dan 6 jam. Waktu paling efektif dalammenghasilkan efek hepatoprotektif yaitu pada waktu 1 jam.

Kata kunci : jangka pendek, hepatoprotektif, parasetamol, infusa daun M. tanarius


xviii

ABSTRACT

An investigation of hepatoprotective effects of short-term leaves ofMacaranga tanarius L. aqueous extract paracetamol induced in male rats. Thisstudy aimed to obtain information on whether the provision of short term leavesof M. tanarius infusa can provide hepatoprotective effects, and how many timemost effective to produce the hepatoprotective effects.

This research is a pure experimental design with randomized completeunidirectional pattern. The method used in this research is a method of measuringthe activity of serum Alanine Aminotransferase (ALT) and serum AspartateAminotransferase (AST). A total of 40 male Wistar rats were divided into 8groups: positive control (paracetamol dose of 2,5 g / kg BB), negative controlgroup (given only distilled water 5 g / kg BB), control group leaves aqueousextract M. tanarius dose of 5 g / kg BB, and 5 treatment groups were given dosesof aqueous extract M. tanarius 5 g / kg BB consecutively for ½, 1, 2, 4, and 6hours, then given paracetamol. At 48 hours after administration of paracetamol,blood samples were taken through the eye orbital sinus. Blood serum takenspecified activity ALT and AST it.

Leaves short-term pre-treatment aqueous extract M. tanarius 5 g / kg BBis able to produce hepatoprotective effects in male rats induced paracetamol 2,5 g/ kg BB with a time of ½, 1, 2, 4, and 6 hours. The most effective time in thehepatoprotective effect at the time of 1 hour.

Key words : short-term, hepatoprotective, paracetamol, leaf aqueous extract M.tanarius


1

BAB I

PENGANTAR

A. Latar Belakang

Hati berperan utama dalam metabolisme dari lemak, karbohidrat, dan protein

serta dalam detoksifikasi. Aktivitas hati tersebut didukung dengan memiliki kapasitas

cadangan yang besar pula serta hanya memerlukan 10%-20% fungsi jaringan untuk

mempertahankan kerjanya (Price and Wilson, 1984). Adanya kapasitas cadangan hati,

menyebabkan kerusakan hati tampak ketika hati telah dirusak lebih dari 80%.

Kerusakan sel hati dapat dibagi menjadi dua, yaitu kerusakan sel hati akut dan

kerusakan sel hati kronis. Kerusakan sel hati akut umumnya diakibatkan nekrosis sel

hati yang dapat disebabkan oleh virus hepatitis, obat dan bahan kimia yang toksik.

Kerusakan sel hati kronis biasanya diakibatkan oleh sirosis (Chandrasoma and Taylor,

1995).

Menurut WHO (2009) pada tahun 2004 kanker hati menyumbangkan

610.000 kematian. Kanker ini dapat diakibatkan senyawa kimia karsinogen ataupun

karsinogen biologi seperti infeksi virus, bakteri, maupun parasit. Pada tahun 2008

(WHO, 2008a; 2008b) dilaporkan kejadian hepatitis akibat virus seperti VHA terjadi

1,4 juta kasus dan 2 milyar orang terinfeksi VHB dengan 350 juta orang mengalami

hepatitis kronis.


2

Pada pengobatan penyakit hati dapat dilakukan antara lain dengan terapi

suportif seperti diet, pengeluaran racun (akibat overdosis obat, parasetamol, atau

alkohol) kemudian dilakukan terapi aktif. Penggunaan obat tradisional dari bahan

tumbuhan baik di Barat maupun Cina membuktikan secara farmakologi dan klinis

memberikan efek menguntungkan pada perbaikan hati (Williamson, David, dan Fred,

1996).

Saat ini penggunaan parasetamol dalam masyarakat sendiri sudah sangat luas.

Pada umumnya parasetamol aman jika diberikan pada dosis terapetik, yaitu 1 – 4

gram per hari (Forrest, 2006). Dosis parasetamol yang dapat menyebabkan toksik

pada manusia normal adalah 15 g (Madan, 1977). Penggunaan overdosis dapat

menginduksi terjadinya kerusakan pada hati pada pasien akibat salah satu

metabolismenya, yaitu NAPQI (N-asetil-p-benzoquinoneimine) yang sangat reaktif

dan menimbulkan hepatotoksisitas (Forrest, 2006). Oleh sebab itu, parasetamol dapat

digunakan sebagai salah satu senyawa model dalam penelitian, seperti pada penelitian

James, Philip, dan Jack (2003) tentang analisis terhadap dosis hepatotoksik dari

asetaminofen (parasetamol).

Spesies Macaranga merupakan salah satu tanaman yang tersebar di daerah

Asia Tenggara, Afrika, Madagaskar, Australia dan daerah sekitar Pasifik. Salah

satunya yaitu Macaranga tanarius L. yang di daerah Malaysia akar tanaman dibuat

dekok sebagai antitusif dan antipiretik, sedangkan pada daerah Taiwan dan China

daun yang dikeringkan digunakan sebagai teh herbal (Lim, Lim, dan Yule, 2008). Di


3

Indonesia sendiri pemanfaatan tanaman ini sangat sedikit, sehingga tanaman ini

sangat menarik dieksplorasi lebih lanjut.

Phommart, Pakawadee, Nitirat, Somsak, dan Somyote (2005) melaporkan

salah satu konstituen dari ekstrak n-heksan dan kloroform dari daun M. tanarius

berupa flavonoid mempunyai aktivitas antioksidan terhadap DPPH dan nymphaeols

B sebagai agen antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2. Matsunami, dkk (2006) dan

Matsunami, dkk (2009) melaporkan adanya senyawa glikosida, yaitu macarangioside

A-C dan mallophenol B yang diisolasi dari ekstrak metanol M. tanarius menunjukkan

aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH.

Dari uraian di atas, maka penelitian ini dilakukan untuk menguji efek

hepatoprotektif dari daun M. tanarius ini secara jangka pendek. Penelitian efek

hepatoprotektif M. tanarius jangka pendek ini dilakukan untuk membandingkan

dengan penelitian efek hepatoprotektif jangka panjang (Mahendra, 2011) yang juga

dilaksanakan secara bersama. Eksplorasi tanaman tersebut yang dimungkinkan

memiliki manfaat di Indonesia, sangat bagus untuk dikembangkan dan dilakukan.

1. Permasalahan

Berdasarkan uraian-uraian di atas, maka dapat dirumuskan permasalahan

sebagai berikut.

a. Apakah praperlakuan jangka pendek dapat memberi efek hepatoprotektif

pada tikus jantan terinduksi parasetamol?

b. Berapakah waktu paling efektif infusa daun M. tanarius untuk memberikan

efek hepatoprotektif pada tikus jantan yang terinduksi parasetamol?


4

2. Keaslian penelitian

Sejauh pengamatan penulis, telah dilakukan penelitian oleh Phommart, dkk

(2005) melaporkan kandungan senyawa baru, yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C,

dan tanariflavanon D bersama dengan tujuh kandungan yang telah diketahui, yaitu

nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon B, blumenol A

(vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol), dan annuionone yang antara lain

dapat digunakan sebagai antiinflamasi, antioksidan dan antitumor yang diperoleh

dari ekstraksi menggunakan pelarut n-heksan dan kloroform dari daun M. tanarius.

Matsunami, dkk (2006; 2009) melakukan penelitian dan diketahui bahwa

kandungan glikosida, yaitu macarangioside A-C dan mallophenol B pada daun M.

tanarius yang diisolasi dari esktrak metanol mempunyai aktivitas penangkapan

radikal terhadap DPPH.

Selain itu, oleh James, dkk (2003), pada penelitian ini dilakukan analisis

terhadap dosis hepatotoksik dari asetaminofen (parasetamol) dengan subyek uji

mencit. Pada saat yang bersamaan dengan penelitian ini, juga dilakukan penelitian

efek analgesik ekstrak metanol-air daun M. tanarius (Andini, 2010) dan infusa daun

M. tanarius (Wulandari, 2010). Selain itu, juga dilakukan penelitian mengenai efek

antiinflamasi ekstrak metanol-air daun M. tanarius (Kurniawati, 2010). Pada ketiga

penelitian tersebut diduga kandungan glikosida yaitu macarangioside A-C dan

mallophenol B memiliki efek analgesik dan antiinflamasi pada mencit betina. Sejauh

pengetahuan penulis, penelitian mengenai efek hepatorotektif jangka pendek daun M.


5

tanarius dengan tikus jantan terinduksi parasetamol belum pernah dilakukan

sebelumnya.

3. Manfaat penelitian

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu

pengetahuan khususnya ilmu kefarmasian mengenai infusa daun M. tanarius yang

memiliki efek hepatoprotektif jangka pendek.

b. Manfaat praktis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat

akan manfaat daun M. tanarius yang memiliki efek hepatoprotektif jangka pendek.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya efek hepatoprotektif

pada tikus jantan terinduksi parasetamol dengan praperlakuan jangka pendek dari

infusa daun M. tanarius.

2. Tujuan khusus

Penellitian ini secara khusus bertujuan untuk mengetahui waktu paling

efektif yang dapat memberikan efek hepatoprotektif dari infusa daun M. tanarius.


6

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Anatomi dan Fisiologi Hati

Hati adalah kelenjar terbesar yang memiliki berat rata-rata 1500 g

atau 25% dari berat tubuh. Hati merupakan organ plastis lunak yang dicetak oleh

struktur sekitarnya. Permukaan superior adalah cembung dan terletak di bawah

kanan diafragma dan sebagian kubah-kubah kiri. Bagian bawah hati adalah

cekung dan merupakan atap dari ginjal kanan, lambung, pankreas, dan usus (Price

and Wilson, 1984).

Terdapat dua lobus utama yang menyusun hati yaitu lobus kanan dan

lobus kiri. Lobus kanan dibagi lagi menjadi segmen anterior dan posterior,

sedangkan lobus kiri dibagi menjadi segmen medial dan lateral oleh ligamentum

farsiforme. Ligamentum farsiforme ini berjalan dari hati ke diafragma dan dinding

depan abdomen (Price and Wilson, 1984).

Liver cell plates

Sinusoid drainingto central vein

Bile ductule

Kupffer cell

Branch of hepaticartery

Bile canaliculus

Branch of portalvein

Central vein

Bile canaliculus

Space od Disse(lymphatic drainage)


7

Hepatosit (sel parenkim hati) merupakan sebagian besar dari organ hati.

Hepatosit bertanggung jawab terhadap peran sentral hati dalam metabolisme. Sel-

sel ini terletak di anatara sinusoid yang terisi darah dan saluran empedu seperti

tampak pada gambar 1. Sel Kupffer melapisi sinusoid hati dan merupakan bagian

penting dari sistem retikuloendotelial tubuh (Lu, 1995). Sel Kupffer ini memiliki

fungsi utama menelan bakteri dan benda asing lain dalam darah. Oleh sebab itu,

hati merupakan salah satu organ utama sebagai pertahanan terhadap invasi bakteri

dan agen toksik (Price and Wilson, 1984).

Selain cabang-cabang vena porta dan arteria hepatika yang melingkari

bagian perifer lobulus hati, juga terdapat saluran empedu seperti ditunjukkan pada

gambar 1. Saluran emepedu interlobular membentuk kapiler empedu yang sangat

kecil dinamakan kanalikuli, yang berjalan ditengah-tengah lempengan sel hati

(Price and Wilson, 1984).

Hati memiliki kapasitas fungsi cadangan. Pada hati normal 80% dari

bagian hati tersebut bekerja tanpa batas. Hati memiliki fungsi dalam sintesis,

ekskretori dan metabolisme. Fungsi pensintesis disini sebagai sumber plasma

albumin, plasma globulin, termasuk α1-antitripsin (α- antiprotease) dan banyak

protein sebagai koagulan. Fungsi menekskresi atau ekskretori, yaitu ekskresi

substansi-substansi dalam empedu. Komponen utama dalam empedu tersebut

adalah bilirubin. Selain itu kolesterol, urobilinogen, dan asam empedu juga

terdapat pada empedu (Chandrasoma and Taylor, 1995).

Hati berperan utama dalam metabolisme dari lemak, karbohidrat, dan

protein serta dalam detoksifikasi. Pada metabolisme lemak, asam lemak bebas


8

dari jaringan adiposa dan rangkaian medium atau pendek asam lemak yang

diabsorbsi oleh usus dibawa menuju hati. Trigliserid, kolesterol, dan fosfolipid

disintesis dalam hati dari asam lemak dan kompleksnya dengan protein aseptor

lipid spesifik untuk membentuk lipoprotein dengan densitas sangat rendah yang

masuk ke dalam plasma. Hati juga memetabolisme lipoprotein dengan densitas

intermediet dan rendah (Chandrasoma and Taylor, 1995).

Pada metabolisme karbohidrat, hati merupakan sumber utama glukosa

plasma. Setelah makan, glukosa berasal dari absorbsi oleh usus. Pada saat

berpuasa, glukosa dihasilkan dari glikogenolisis dan glukonogenesis dalam hati.

Hati merupakan tempat penyimpanan utama glikogen tubuh. Ketika terjadi

kekurangan glukosa, asam lemak dimetabolisme hati menjadi bentuk keton yang

berperan sebagai sumber energi alternatif dari banyak jaringan (Chandrasoma and

Taylor, 1995).

Selain itu, hati merupakan organ utama dalam katabolisme dan sintesis

urea. Urea akan disekresikan oleh hati ke dalam plasma, yang kemudian akan

diekskresi dalam ginjal. Pada detoksifikasi, hati berperan vital dalam detoksifikasi

komponen racun nitrogen yang dihasilkan dari usus selain itu banyak obat serta

bahan kimia lainnya (Chandrasoma and Taylor, 1995).

Aktivitas hati tersebut didukung dengan memiliki kapasitas cadangan

yang besar pula serta hanya memerlukan 10%-20% fungsi jaringan untuk

mempertahankan kerjanya (Price and Wilson, 1984).


9

B. Kerusakan Hati

Adanya kapasitas cadangan hati, menyebabkan kerusakan hati tampak

ketika hati telah dirusak lebih dari 80%. Kerusakan sel hati dapat dibagi menjadi

dua yaitu kerusakan sel hati akut dan kerusakan sel hati kronis (Chandrasoma and

Taylor, 1995).

Kerusakan sel hati akut umumnya diakibatkan nekrosis sel hati yang luas

dan akut yang dapat disebabkan oleh virus hepatitis, obat dan bahan kimia yang

toksik. Kerusakan hati akut dapat digolongkan menjai jaundice (kuning),

hipoglikemia, kecenderungan untuk perdarahan yang disebabkan kegagalan

sintesis faktor pembeku darah dalam hati, gangguan elektrolit dan asam basa,

hepatik ensefalopati, sindrom hepatorenal, dan kenaikkan serum enzim yang

berhubungan dengan kasus nekrosis sel hati. Kerusakan sel hati akut memiliki

angka kematian yang tinggi (Chandrasoma and Taylor, 1995).

Kerusakan sel hati kronis biasanya diakibatkan oleh sirosis, yang

berkaitan dengan nekrosis sel hati, fibrosis, dan regenerasi nodular. Efek dari

kerusakan hati kronis, yaitu penurunan sintesis albumin, menyebabkan rendahnya

serum albumin, edema, dan ascites, penurunan protrombin dan faktor VII, IX, dan

X yang menimbulkan perdarahan. Hipertensi portal, hepatik ensefalopati, sindrom

hepatorenal, dan perubahan endokrin yang disebabkan kesalahan metabolisme

hormon, dan hepatikus fetor (Chandrasoma and Taylor, 1995).


10

C. Hepatotoksin

Banyak obat dan senyawa kimia dapat menyebabkan kerusakan hati

dengan mekanisme yang bervariasi. Obat dan senyawa kimia yang menyebakan

kerusakan hati dapat dibagi menjadi 2, yaitu toksisitas yang dapat diprediksi

(tergantung dosis) dan toksisitas yang tidak dapat diprediksi (idiosinratik)

(Chandrasoma and Taylor, 1995).

Menurut Forrest, 2006 obat yang dapat mengakibatkan kerusakan pada

hati diklasifikasikan menjadi 2 tipe, yaitu tipe yang dapat diprediksi (tipe A) dan

tidak dapat diprediksi (tipe B). Reaksi hepatik yang dapat diprediksi akibat obat

(tipe A) bergantung kepada dosis obat dan bila diberikan dapat mempengaruhi

sebagian besar orang yang menelan obat tersebut dalam jumlah yang cukup dalam

menimbulkan efek toksik. Contoh dari obat tersebut seperti parasetamol, salisilat,

tetarsiklin, dan metotrexat.

Idiosinkratik atau reaksi hepatik tidak dapat diprediksi (tipe B) terjadi

dengan frekuensi rendah (1 : 1000). Tipe ini tidak bergantung pada osis dan

terjadi pada beberapa orang karena adanya reaksi imun atau hipersensitivitas.

Contoh obat pada tipe ini seperti klorpromazine, halotan, dan isoniazid (INH).

D. Parasetamol

Gambar 2. Struktur Parasetamol (Anonim, 1995)


11

Parasetamol atau N-asetil-p-aminofenol dengan struktur senyawa seperti

tampak pada gambar 2, memiliki rumus molekul C8H9 NO2 dan bobot molekul

151,16. Senyawa ini memiliki bentuk berupa serbuk hablur, putih, tidak berbau,

dan rasa sedikit pahit. Parasetamol dapat larut dalam air mendidih, natrium

hidroksida 1N, dan mudah larut dalam etanol (Anonim, 1995).

Obat ini merupakan analgesik dan antipiretik yang efektif, akan tetapi

tidak memiliki efek antiinflamasi seperti aspirin. Parasetamol berguna untuk nyeri

ringan sampai sedang seperti nyeri kepala, mialgia, nyeri pasca kelahiran, dan

keadaan lain. Dosis nyeri akut dan demam dapat dapat ditatalaksana dengan 325-

500 mg 4 kali sehari dan untuk anak-anak dalam dosisnya sebanding yang lebih

kecil (Katzung, 1989).

Pada pemakaian dosis terapi, kadang-kadang timbul peningkatan ringan

dalam enzim hati tanpa ikterus, keadaan ini reversibel bila obat dihentikan.

Pemakaian 15 g parasetamol bisa menyebabkan kematian disebabkan

hepatotoksisitas yang parah dengan nekrosis lobulus sentral, kadang-kadang

disertai nekrosis tubulus ginjal akut (Katzung, 1989).

Pada gambar 3 digambarkan bahwa dosis terapetik parasetamol

dimetabolisme dengan konjugasi glukoronida dan komponen sulfat, kemudian

diekskresikan melalui urine. Pada proporsi kecil (5-15%) dioksidasi dengan enzim

oksidase menjadi bentuk yang reaktif, yaitu N-asetil-p-benzoquinoneimine

(NAPQI). Ketika terjadi overdosis, jalur konjugasi menjadi jenuh dan semakin

banyak parasetamol yang dioksidasi. Hal ini mengakibatkan cadangan glutation

hati menjadi habis dan hati tidak memiliki kemampuan terhadap deaktivasi


12

metabolit NAPQI. Komponen tersebut akan mengikat secara langsung pada sel

hati, sehingga dapat menyebabkan nekrosis (Forrest, 2006).

UDP-glucoronosyl-transferase

RENAL EXCRETION RENAL EXCRETION

Phenolsulfotransferase

Glucoronide

Acetaminophen

Acetaminophen

CytochromeP-450

CytochromeP-450

Glutathione

Glutathione-S-transferase

N-acetyl-p-benzoquinoneimine(NAPQI)

APAP-mercaptate

APAP-mercaptate

If GlutathioneNormal

Cell Death

Covalent binding of amino acids inproteins and enzymes

Gambar 3. Metabolisme parasetamol dan pembentukan metabolit NAPQI sertamekanismenya pada terjadinya kematian sel

(Kavalci, Kavalci, dan Sezenler, 2009)


13

E. Metode Uji Hepatotoksisitas

Zimmerman (1978) mengemukakan beberapa parameter yang dapat

digunakan untuk mengevaluasi kerusakan hati antara lain : (1) uji enzim serum ;

(2) pemeriksaan asam amino dan protein; (3) perubahan penyusun kimia dalam

hati; (4) uji ekskretori hati; dan (5) analisis histologi.

1) Uji enzim serum

Pengukuran enzim serum (atau plasma) dilakukan untuk mendeteksi

ketoksikan pada hati yang kemudian didukung dengan analisis histologi. Apabila

terjadi kerusakan hati, enzim akan dilepaskan ke dalam darah dari sitosol dan

organela subsel, seperti mitokondria, lisosom, dan nukleus (Zimmerman, 1978).

Enzim-enzim transaminase adalah contoh yang paling utama kelompok enzim hati

yang level serumnya berubah selama gangguan hepatoseluler. Transaminase

terdiri atas alanin aminotransferase (ALT) dan aspartat aminotransaminase (AST).

Sebagian besar AST terdapat di hati dan otot rangka, serta tersebar ke seluruh

jaringan. Meskipun enzim ALT terdapat pula pada beberapa bagian jaringan,

konsentrasi terbesarnya pada semua spesies adalah di hati sehingga ALT

merupakan petunjuk yang lebih spesifik terhadap nekrosis hati daripada AST.

Pada keadaan nekrosis, sel hati akan dipecah sehingga enzim ALT yang terdapat

di dalam sel hati keluar dan masuk ke dalam aliran darah. Peningkatannya bisa

mencapai 10-100 kali lipat dari harga normal (Zimmerman,1978).


14

2) Pemeriksaan asam amino dan protein

Pemeriksaan asam amino dan protein penting dilakukan karena

metabolisme asam amino di hati membentuk ammonia dan ureum terjadi secara

lebih lambat dan meningkatkan kadar globulin (Zimmerman, 1978).

3) Perubahan penyusun kimia dalam hati

Perubahan penyusun kimia dalam hati menjelaskan mekanisme kerusakan

hati. Pengukuran jumlah lemak di dalam hati mempunyai hubungan yang dekat

dengan terjadinya steatosis (Zimmerman, 1978).

4) Uji ekskretori hati

Kemampuan hati untuk mensintesis urea, kolesterol, plasma protein, dan

mempertahankan kadar glukosa darah serta asam amino merupakan sebagian

contoh fungsi hati. Adanya ketidaknormalan dari beberapa fungsi hati tersebut

dapat menunjukkan terjadinya kerusakan hati. Perubahan kecepatan metabolisme

obat yang terjadi di hati dapat dijadikan parameter hepatotoksisitas (Zimmerman,

1978).

F. Macaranga tanarius L.

1. Sinonim

Ricinus tanarius L., Macaranga molliuscula, Macaranga tomentosa,

Mappa tanarius (Starr, Kim, and Lloyd, 2003).

2. Nama daerah

Di Indonesia tanaman ini dikenal dengan nama tutup ancur (Jawa), mapu

(Batak), mara (Sunda) (Anonim, 2010).


15

3. Taksonomi dari daun Macaranga tanarius L.

Kingdom : Plantae

Sub-kingdom : Tracheobionta

Divisio : Spermatophyta

Sub-divisio : Magnoliophyta

Classis : Magnoliopsida

Sub-classis : Rosidae

Ordo : Euphorbiales

Familia : Euphorbiaceae

Genus : Macaranga

Spesies : Macaranga tanarius L. (Anonim, 2008).

4. Morfologi

M. tanarius pohon kecil sampai sedang, dengan dahan agak besar. Daun

berseling, agak membundar, dengan stipula besar yang luruh. Perbungaan

bermalai di ketiak, bunga ditutupi oleh daun gagang. Buah kapsul berkokus 2, ada

kelenjar kekuningan di luarnya. Biji membulat, menggelembur. Jenis ini juga

mengandung tanin yang cukup untuk menyamak jala dan kulit (Anonim, 2010).

5. Kandungan tanaman

Dilaporkan empat kandungan baru dari daun M. tanarius MÜLL.-ARG.

(Euphorbiaceae) megastigmate glukosida (Matsunami, dkk, 2009). Matsunami,

dkk (2006) dan Matsunami, dkk (2009) melaporkan adanya senyawa glikosida

yaitu macarangioside A-C dan mallophenol B yang diisolasi dari ekstrak metanol

M. tanarius menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH. Uji


16

kimia dari tanin dalam daun M. tanarius MUELL., et ARG. (Euphorbiaceae)

melaporkan tujuh hydrolyzable tannin yang baru (22-28), bersama dengan dua

puluh satu tanin yang telah diketahui sebelumnya (Lin, Gen-ichiro dan Itsuo,

1990). Selain itu, juga ditemukan ditemukan tiga kandungan baru yaitu

tanarifuranonol, tanariflavanon C, dan tanariflavanon D bersama dengan tujuh

kandungan yang telah diketahui yaitu nimfaeol A, nimfaeol B, nimfaeol C,

tanariflavanon B, blumenol A (vomifoliol), blumenol B (7,8 dihidrovomifoliol,

dan annuionone). Salah satu konstituen dari ekstrak n-heksan dan kloroform dari

daun M. tanarius berupa flavonoid mempunyai aktivitas antioksidan terhadap

DPPH dan nymphaeols B sebagai agen antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2.

Adanya kandungan macaranga sebagai senyawa antioksidan dari M. tanarius yang

berpeluang sebagai agen antiinflamasi, dapat mencegah terjadinya oksidasi

parasetamol menjadi metabolit NAPQI (Phommart dkk, 2005).


17

macarangioside A macarangioside B macarangioside C

tanariflavanon C tanariflavanon D nymphaeol A

nymphaeol B nymphaeol C mallophenol B

Gambar 4. Struktur senyawa dalam tanaman M. tanarius (Phommart dkk., 2005 danMatsunami dkk., 2006)

G. Infusa

1. Definisi

Infusa didefinisikan sebagai sediaan cair yang dibuat dengan

mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90°C selama 15 menit

(Anonim, 1995).

2. Pembuatan

Infusa dapat dibuat dengan cara mencampur simplisia dengan derajat

halus yang sesuai dalam panci dengan air secukupnya, panaskan di atas tangas air


18

selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90°C sambil berkali-kali diaduk.

(Anonim, 1995).

H. Landasan Teori

Kerusakan hati dapat menghasilkan nekrosis maupun sirosis pada sel-sel

hati. Pada kerusakan hati ini salah satunya dapat diketahui dari adanya

peningkatan aktivitas enzim tertentu yang dilepaskan ke dalam darah. Enzim

tersebut seperti alanin aminotransferase (ALT) dan aspartat aminotransaminase

(AST) yang menunjukkan adanya nekrosis pada sel hati. Peningkatan aktivitas

serum enzim tersebut dapat mencapai 10-100 kali dari normal (Zimmerman, 1978)

Parasetamol merupakan salah satu senyawa model hepatotoksik yang

dapat menginduksi terjadinya hepatotoksik, terutama bila dipakai pada dosis

berlebih yaitu 15 g pada individu normal. Hal ini disebabkan adanya pembentukan

metabolit NAPQI (N-asetil-p-benzoquinoeimine) melalui oksidasi yang sangat

reaktif dan dapat berikatan langsung dengan sel-sel hati (Forrest, 2006).

Matsunami, dkk (2006) melaporkan adanya senyawa glikosida, yaitu

macarangioside A-C dan mallophenol B yang diisolasi dari ekstrak metanol

M. tanarius dan menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH.

Adanya senyawa glikosida yang memiliki aktivitas penangkapan radikal terhadap

DPPH, maka dilakukan pendekatan dalam penelitian ini.

Glikosida merupakan senyawa yang kurang larut dalam pelarut organik

dan lebih mudah larut dalam air (Robinson, 1991). Pada penelitian ini diharapkan


19

dengan penggunaan air sebagai pelarut infusa, maka dapat diperoleh lebih banyak

senyawa yang memiliki aktivitas menangkap radikal bebas tersebut.

Adanya kandungan glikosida dalam M. tanarius sebagai senyawa

penangkap radikal bebas, dimungkinkan dapat menangkap radikal bebas seperti

NAPQI. Hal ini mencegah NAPQI merusak sel hati seperti terjadinya nekrosis sel.

Penangkapan radikal bebas oleh senyawa glikosida dalam M. tanarius seperti

macarangioside A-C dan mallophenol B dimungkinkan dilakukan dalam jangka

panjang (selama 6 hari) ataupun jangka pendek (kurang dari 6 jam).

I. Hipotesis

Infusa daun M. tanarius memiliki efek hepatoprotektif jangka pendek

pada tikus jantan terinduksi parasetamol. Hal ini dapat diketahui dari adanya

penurunan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan.


20

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dimana

dilakukan perlakuan terhadap sejumlah variabel penelitian. Rancangan penelitian ini

termasuk rancangan acak lengkap pola searah.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional

1. Variabel penelitian

a. Variabel bebas

Lama pemberian infusa daun M. tanarius, yaitu variasi jam pemberian infusa

daun M. tanarius dosis tertentu pada tikus jantan terinduksi parasetamol.

b. Variabel tergantung

Efek hepatoprotektif jangka pendek infusa daun M. tanarius. Terhadap sel

hati tikus yang terinduksi parasetamol, dengan tolok ukur kuantitatif berdasarkan

penurunan aktivitas serum ALT dan AST.

c. Variabel pengacau terkendali

Kondisi hewan uji yaitu subyek uji yang digunakan adalah tikus galur Wistar,

berjenis kelamin jantan, berat badan 150-250 gram, dan umur 2-3 bulan. Frekuensi

pemberian infusa daun M. tanarius dan cara pemberian infusa secara per oral.


21

Bahan daun M. tanarius yang dipanen dari Kebun Obat Fakultas Farmasi

Sanata Dharma Yogyakarta pada 10 Agustus 2010, cara penyimpanan serbuk daun M.

tanarius, rute pemberin infusa secara per oral.

d. Variabel pengacau tak terkendali

Kondisi patologis hewan uji

2. Definisi operasional

a. Infusa daun M. tanarius , merupakan serbuk kering daun M. tanarius. yang

direbus dengan air pada suhu 900 selama 15 menit dengan konsentrasi 100%

b. Efek hepatoprotektif infusa adalah kemampuan infusa daun M. tanarius. dosis

tertentu melindungi hati dari hepatotoksin

c. Jangka pendek, yaitu penelitian dilakukan dalam selang waktu ½ jam, 1 jam, 2

jam, 4 jam, dan 6 jam.

C. Bahan Penelitian

1. Bahan utama

a. Subyek uji yang digunakan dalam penelitian ini yaitu tikus jantan putih galur

Wistar (berat badan ± 150 – 250 gram, umur : 2 – 3 bulan) diperoleh dari

laboratorium Imono Fakultas Farmasi USD Yogyakarta.

b. Bahan uji yang digunakan adalah tanaman M. tanarius yang dipanen dari

Kebun Obat Fakultas Farmasi USD Yogyakarta pada 10 Agustus 2010.


22

2. Bahan kimia

a. Bahan hepatotoksin yang digunakan adalah parasetamol, yang diperoleh dari

PT. Konimex Solo

b. Kontrol negatif berupa aquadest yang diperoleh dari Laboratorium

Farmakologi-Toksikologi Fakultas Farmasi USD Yogyakarta.

c. Pelarut untuk infusa dengan aquadest yang diperoleh Laboratorium

Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi USD Yogyakarta.

d. Bahan untuk mengukur aktivitas serum ALT dan AST berupa reagen SGPT

dan SGOT dyasis yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-Toksikologi

Fakultas Farmasi USD Yogyakarta.

e. Aquabidest yang dipergunakan dalam uji serum darah diperoleh dari PT.

IKAPHARMINDO PUTRAMAS Jakarta-Indonesia.

D. Alat Penelitian

1. Alat pembuatan infusa daun M. tanarius

Seperangkat alat gelas, yaitu Bekker glass, gelas ukur, cawan porselen,

batang pengaduk, penangas air dengan stirer, mesin penyerbuk, dan timbangan

analitik.

2. Alat uji hepatoprotektif

Seperangkat alat gelas, yaitu Bekker glass, labu ukur, batang pengaduk,

gelas ukur, timbangan analitik (Mettler PM 4600 Delta Range dan Mettler AE 200) ,

spuit injeksi per oral, mikropipet, pipa kapiler, evendrof, vitalab mikro version 1,0


23

user manual (E.merck, Darmsadt, Germany), stopwatch, vortex (Genie, Wilten,

Holland), dan sentrifuse.

E. Tata Cara Penelitian

1. Determinasi daun M. tanarius

Determinasi daun M. tanarius dilakukan dengan mencocokkan ciri-ciri

tanaman M. tanarius pada buku acuan determinasi (Koorders dan Valeton, 1918) dan

disesuaikan dengan kunci determinasinya. Determinasi dilakukan oleh Bapak Ign. Y.

Kristio Budiasmoro, M.Si dosen Program studi Pendidikan Biologi Fakultas JP MIPA

USD Yogyakarta.

2. Pengumpulan bahan uji

Bahan uji yang digunakan adalah daun M. tanarius yang masih segar dan

berwarna hijau, dipanen dari Kebun Obat Fakultas Farmasi USD Yogyakarta pada 10

Agustus 2010.

3. Pembuatan serbuk daun M. tanarius

Daun M. tanarius dicuci dengan air mengalir hingga bersih dan diangin-

anginkan hingga kering. Pengoptimalan pengeringan dilakukan dengan oven pada

suhu 500 C selama 24 jam. Daun yang telah kering diserbuk dengan alat penyerbuk.

Setelah didapatkan serbuk kasar daun, kemudian dilakukan pengayakan dengan

ayakan no. 50 untuk mendapatkan serbuk daun M. tanarius yang lebih halus.

4. Pembuatan infusa daun M. tanarius

Serbuk kering daun M. tanarius ditimbang 25,0 g. Serbuk kering tersebut

dimasukkan dan dicampur ke dalam 75,0 mL pelarut aquadest pada suhu 900 dan


24

dijaga tetap dalam suhu tersebut selama 15 menit. Waktu 15 menit dihitung ketika

suhu pada campuran mencapai 90°C. Setelah 15 menit, campuran tersebut diambil

dan diperas untuk mendapatkan 25,0 mL infusa daun M. tanarius.

5. Pembuatan CMC-Na 1%

Suspending agent CMC-Na 1% dibuat dengan mendispersikan 1,0 gram

CMC-Na yang telah ditimbang seksama ke dalam air mendidih dengan volume 100,0

mL. Suspensi CMC-Na ini digunakan untuk membuat suspensi parasetamol.

6. Pembuatan suspensi parasetamol

Suspensi parasetamol dalam CMC-Na 1% dibuat dengan mensuspensikan

25,0 gram parasetamol yang telah ditimbang seksama ke dalam CMC-Na 1%.

Banyaknya parasetamol yang disuspensikan pada CMC-Na 1% disesuaikan pada

dosis yang akan diberikan.

7. Uji pendahuluan

a. Penetapan dosis hepatotoksik parasetamol

Penetapan dosis hepatotoksik ini dilakukan dengan melakukan studi literatur.

Pada penelitian ini ditetapkan dosis hepatotoksik parasetamol yaitu 2,5 g/kg BB .

(Yunita, Antonius, Erly, Imelda, dan Imono, 2006). Pemilihan dosis hepatotoksik ini

karena dosis tersebut menyebabkan kerusakan sel-sel hati pada tikus jantan tetapi

tidak menyebabkan kematian pada tikus jantan.

b. Penetapan waktu pencuplikan darah

Menurut Olson (2006), kenaikan serum ALT akan terjadi antara 24-48 jam

setelah ingesti parasetamol. Oleh karena itu akan dilakukan penetapan waktu


25

pencuplikan darah tikus jantan dengan cara membagi tikus jantan dikelompokan

dengan jumlah 5 ekor. Diambil darahnya pada jam ke 24, jam ke 48, dan jam ke 72.

Serum darah diambil untuk diukur aktivitas serum ALT dan AST.

8. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji

Hewan percobaan yang dibutuhkan sebanyak 40 ekor tikus jantan dibagi

secara acak dalam 8 kelompok sama banyak. Kelompok I merupakan kontrol

hepatotoksin parasetamol dengan dosis 2,5 g/kg BB secara per oral. Kelompok II

merupakan kontrol negatif yaitu pemberian aquadest dosis 5 g/kg BB secara per oral.

Kelompok III merupakan kontrol perlakuan yaitu pemberian infusa M. tanarius dosis

5 g/kg BB secara per oral. Kelompok IV-VIII diberikan infusa daun M. tanarius dosis

5 g/kg BB, kemudian secara berturut-turut pada ½, 1, 2, 4, dan 6 jam setelah

perlakuan diberikan dosis hepatotoksik parasetamol 2,5 g/kg BB. Pada jam ke-48

setelah diberi parasetamol, semua kelompok diambil darahnya pada daerah sinus

orbitalis mata untuk penetapan aktivitas serum ALT dan AST.

9. Pembuatan serum

Darah mencit diambil melalui sinus orbitalis mata dengan pipa kapiler dan

ditampung dalam evendrof, kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm

selama 15 menit dan diambil supernatannya (serum).

10. Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST

Alat yang digunakan pada pengukuran aktivitas serum ALT dan AST adalah

vitalab-mikro. Pada analisis fotometri ini dengan serum ALT dilakukan dengan

reagen, yaitu reagen I dan reagen II. Reagen I berisi TRIS (pH 7,65), L-Alanin, dan


26

LDH (laktat dehidrogenase). Reagen II berisi 2-oksoglutarat dan NADH. Analisis

dilakukan dengan reaksi sebagai beikut, serum atau plasma sebanyak 100µL

dicampur dengan reagen I sebanyak 800 µL, setelah itu dicampurkan 200 µL reagen

II, dan dibaca resapan setelah satu menit.

Pada analisis fotometri dengan serum AST dilakukan reaksi sebagai berikut,

yaitu reagen I dan reagen II. Reagen I berisi TRIS (pH 7,65), L-Aspartat, LDH (laktat

dehidrogenase), dan MDH (malat dehidrogenase). Reagen II berisi 2-oksoglutarat dan

NADH. Analisis dilakukan dengan reaksi sebagai berikut, serum atau plasma

sebanyak 100µL dicampur dengan reagen I sebanyak 800 µL. Setelah itu

dicampurkan 200 µL reagen II, dan dibaca resapan setelah satu menit.

Aktivitas enzim dilihat pada panjang gelombang 340 nm, suhu 37o, dan

faktor koreksi 1745. Aktivitas serum ALT dan AST dinyatakan dalam U/L.

Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST dilakukan di Laboratorium Farmakologi-

Toksikologi Fakultas Farmasi USD Yogyakarta.

F. Tata Cara Analisis Hasil

Data aktivitas serum ALT dan AST dianalisis dengan metode Kolmogorov

Smirnov untuk melihat distribusi data tiap kelompok. Jika didapatkan distribusi data

yang normal maka dilanjutkan dengan analisis pola searah (One Way ANOVA)

dengan taraf kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan uji LSD untuk mengetahui

perbedaan masing-masing kelompok. Akan tetapi bila didapatkan distribusi tidak

normal, maka dilakukan analisis dengan uji Kruskal Wallis untuk mengetahui


27

perbedaan aktivitas serum ALT dan AST antar kelompok. Setelah itu, dilanjutkan uji

dengan Mann Whitney untuk melihat perbedaan tiap kelompok.


28

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Determinasi Tanaman

Pada penelitian ini penulis melakukan determinasi terhadap tanaman yang

akan digunakan, yaitu M. tanarius. Determinasi ini dilakukan untuk memastikan

bahwa tanaman dan yang digunakan adalah benar M. tanarius. Determinasi tanaman

dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma Yogyakarta. Determinasi dilakukan hingga tingkat spesies dengan

identifikasi bagian bunga, buah, batang, dan daun yang membuktikan bahwa benar

tanaman tersebut merupakan M. tanarius.

B. Orientasi Waktu Pencuplikan Darah Hewan Uji

Pada penelitian ini, penulis melakukan orientasi waktu pencuplikan darah

hewan uji untuk mendapatkan waktu optimal terjadinya peningkatan serum ALT dan

AST minimal sepuluh kali lipat dari kadar normal setelah induksi parasetamol pada

dosis 2,5 g/kg BB (Yunita, dkk, 2006) tanpa menyebabkan hewan uji mati. Menurut

Phillicos, kadar normal dari serum ALT dan AST secara berturut-turut adalah 19,3-

68,9 U/L dan 29,8-77,0 U/L (cit., Hastuti, 2008). Dalam penelitian ini penulis

menguji tiga waktu pencuplikan darah hewan uji yaitu pada 24 jam, 48 jam, dan 72

jam. Pemberian dosis parasetamol dilakukan secara per oral. Setelah itu, dilakukan

pengukuran terhadap aktivitas serum ALT dan AST. Pada penelitian ini diukur


29

aktivitas serum ALT yang terdapat secara spesifik dalam organ hati. Aktivitas serum

ALT terdapat pada hati, jantung, otot, serta jaringan lain. Adanya kombinasi

kenaikkan serum ALT dan AST pada hewan uji menunjukkan terjadinya kerusakan

hati, kombinasi kedua enzim ini lebih sensitif dibandingkan dengan enzim golongan

hidrogenase lain.

Berikut merupakan hasil orientasi waktu pencuplikan darah hewan uji yang

disajikan dalam bentuk tabel dan diagram batang :

Tabel I. Aktivitas serum ALT dan perbandingan antar waktu pencuplikan darah padaparasetamol dosis 2,5 g/kg BB

Waktu

Pencuplikan

(Jam)

Purata Aktivitas

serum ALT+ SE

Perbedaan Terhadap

24 jam 48 jam 72 jam

24 343,6 + 33,3 - (-)758,6 (b) (-)161,3

48 1102,3 + 66,4 (+)758,6 (b) - (+)597,3(b)

72 505,0 + 12,7 (+)161,3 (-)597,3 (b) -

Keterangan : (b) = berbeda bermakna (p<0,05); SE = Standar Error


30

Gambar 5. Diagram batang aktivitas serum ALT tikus setelah induksi parasetamol 2,5 g/kg BB padapencuplikan darah 24 jam, 48 jam, dan 72 jam

Tabel II. Aktivitas serum AST dan perbandingan antar waktu pencuplikan darah padaparasetamol dosis 2,5 g/kg BB

Waktu

Pencuplikan

(Jam)

Purata Aktivitas

serum AST +

SE

Perbedaan Terhadap

24 jam 48 jam 72 jam

24 370,3 + 35,9 - (-)434,3 (b) (+)43,6

48 804,6 + 137,4 (+)434,3 (b) - (+)478,0 (b)

72 326,6 + 27,7 (-)43,6 (-)478,0 (b) -

Keterangan : (b) = berbeda bermakna (p<0,05); SE = Standar Error


31

Gambar 6. Diagram batang aktivitas serum AST tikus setelah induksi parasetamol 2,5 g/kg BB padapencuplikan darah 24 jam, 48 jam, dan 72 jam

Dari tabel I dan gambar 5 terlihat bahwa aktivitas serum ALT pada

pencuplikan darah 48 jam dengan dosis parasetamol 2,5 g/kg BB lebih tinggi

dibandingkan dengan pencuplikan darah pada 24 jam dan 72 jam. Pada pencuplikan

darah 48 jam didapatkan peningkatan serum ALT 16 kali dari nilai normal (19,3-68,9

U/l). Pada pencuplikan darah 24 jam mengalami kenaikkan serum ALT 4,98 kali dari

nilaii normal, karena peningkatan aktivitas serum ALT belum memenuhi kriteria

terjadinya hepatotoksisitas, yaitu mengalami kenaikkan minimal 10 kali dari nilai

normal. Pada pencuplikan darah 72 jam kenaikkan aktivitas serum ALThanya 7,3 kali

dari nilai normal, sehingga kenaikkan akivitas serum ALT juga tidak memenuhi

kriteria hepatotoksisitas yang telah ditentukan.


32

Untuk data tabel II dan gambar 6 dari serum AST juga menunjukkan adanya

peningkatan pada pencuplikan darah 48 jam dibandingkan dengan pencuplikan darah

pada 24 jam dan 72 jam. Selain itu, dari kedua data serum ALT dan AST secara

statistik menunjukkan perbedaan yang bermakna pada pencuplikan darah 48 jam

(p<0,05) dibandingkan dengan pencuplikan darah 24 jam dan 72 jam. Oleh sebab itu,

penulis memilih pencuplikan darah hewan uji pada 48 jam setelah induksi

parasetamol dengan dosis 2,5 g/kg BB.

C. Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Infusa Daun M. tanarius TerhadapTikus Jantan Terinduksi Parasetamol

Penelitian ini dilakukan untuk membuktikan adanya efek hepatoprotektif

jangka pendek dari infusa M. tanarius. Pada penelitian ini dilakukan pembatasan

istilah jangka pendek. Jangka pendek pada penelitian ini, yaitu dimaksudkan dalam

selang waktu ½ jam, 1 jam, 2 jam, 4 jam, dan 6 jam. Untuk dosis M. tanarius yang

digunakan adalah 5 g/kg BB dan dosis toksik parasetamol yang digunakan adalah 2,5

g/kg BB. Pencuplikan darah dilakukan pada 48 jam setelah induksi parasetamol pada

hewan uji. Berikut ini merupakan hasil peneilitian yang disajikan dalam bentuk tabel

dan diagram batang:


33

Tabel III. Pengaruh perlakuan jangka pendek infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB dlihat dariaktivitas serum ALT pada berbagai variasi waktu terhadap hepatoksisitasparasetamol

Kel. Aktivitas serum ALT Efek

Hepatoprotektif

(%)

Purata + SE

(U/L)

% Perbedaan Terhadap

Kelompok I Kelompok II

I 79,2 + 5,2 - (-) 91,8(b) -

II 977,2 + 85,2 (+) 1133,8(b) - -

III 78,0 + 3,5 (-) 1,5(tb) (-) 92,0(b) -

IV 600,0 + 50,6 (+) 657,5(b) (-) 38,6(b) 38,6

V 94,2 + 6,5 (+) 18,9(tb) (-) 90,3(b) 90,3

VI 162,8 + 13,2 (+) 105,5(b) (-) 83,3(b) 83,3

VII 818,8 + 57,9 (+) 932,8(b) (-) 16,2(tb) 16,2

VIII 766,2 + 54,6 (+) 867,4(b) (-) 21,5(tb) 21,5

Keterangan : I : Kelompok kontrol negatif (Aquadest dosis 5 g/kg BB )II : Kelompok kontrol heptotoksin parasetamol dosis 2,5 g/kg BBIII : Kelompok kontrol perlakuan (Infusa daun M. tanarius dosis 5 g/kg BB)IV : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB ½ jam + parasetamol 2,5 g/kg BBV : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 1 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBVI : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 2 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBVII : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 4 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBVIII : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 6 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBIDM= Infusa Daun M.tanarius; SE= Standar Eror; b= berbeda bermakna (p<0,05); tb=

berbeda tidak bermakna (p>0,05)


34

Tabel IV. Pengaruh perlakuan jangka pendek infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB dilihat dariaktivitas serum AST pada berbagai variasi waktu terhadap hepatoksisitasparasetamol

Kel. Aktivitas serum AST Efek

Hepatoprotektif

(%)

Purata + SE (U/L) % Perbedaan Terhadap

Kelompok I Kelompok II

I 138,4 + 4,9 - (-) 79,4(b) -

II 673,2 + 110,3 (+) 386,4(b) - -

III 121,2 + 6,2 (-) 12,4(tb) (-) 81,9(b) -

IV 661,2 + 45,9 (+) 377,7(b) (-) 1,7(tb) 1,7

V 186,8 + 9,5 (+) 34,9(tb) (-) 72,2(b) 72,2

VI 283,2 + 23,7 (+) 104,6(tb) (-) 57,9(b) 57,9

VII 862,4 + 37,6 (+) 523,1(b) (+) 28,1(tb) 28,1

VIII 812,2 + 46,0 (+) 486,8(b) (+) 20,6(tb) 20,6

Keterangan : I : Kelompok kontrol negatif (Aquadest dosis 5 g/kg BB )II : Kelompok kontrol hepatotoksin parasetamol dosis 2,5 g/kg BBIII : Kelompok kontrol perlakuan (Infusa daun M. tanarius dosis 5 g/kg BB)IV : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB ½ jam + parasetamol 2,5 g/kg BBV : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 1 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBVI : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 2 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBVII : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 4 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBVIII : Kelompok praperlakuan IDM 5 g/kg BB 6 jam + parasetamol 2,5 g/kg BBIDM= Infusa Daun M.tanarius; SE= Standar Eror; b= berbeda bermakna (p<0,05); tb=

berbeda tidak bermakna (p>0,05)


35

Gambar 7. Diagram batang pengaruh praperlakuan IDM dosis 5 g/kg BB pada aktivitas serum ALTtikus

Gambar 8. Diagram batang pengaruh praperlakuan IDM dosis 5 g/kg BB pada aktivitas serum ASTtikus


36

1. Kontrol negatif (Aquadest 5 g/ kg BB)

Aktivitas serum ALT yang dihasilkan dari kelompok ini adalah 79,2 + 5,2

U/L (tersaji pada tabel III). Nilai serum ALT ini dijadikan patokan nilai normal serum

ALT dalam penelitian ini selanjutnya. Sebagai data pendukung dilakukan pengukuran

terhadap aktivitas dari serum AST yang menghasilkan data 138,4 + 4,9 U/L (tersaji

pada tabel IV), data ini juga digunakan sebagai patokan nilai normal dari penelitian

ini selanjutnya. Tujuan dari kontrol negatif ini adalah memastikan bahwa peningkatan

aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan adalah akibat pemberian

hapatotoksin parasetamol, bukan akibat dari aquadest dan memastikan bahwa efek

hepatoprotektif pada tikus jantan yang terinduksi parasetamol adalah akibat

praperlakuan infusa daun M. tanarius.

Pengukuran kedua enzim tersebut dalam serum darah tikus, karena kedua

enzim tersebut dapat mengalami peningkatan jika terjadi kerusakan pada hati

terutama pada aktivitas serum ALT, sedangkan pada serum AST lebih kepada faktor

penunjang yang menunjukkan adanya kerusakan hati karena serum AST tidak secara

spesifik terdapat di hati saja. Selain itu, kombinasi dari kedua enzim tersebut lebih

sensitif dibandingkan dengan enzim hidrogenase lainnya seperti laktat dehidrogenase,

glutamat dehidrogenase, isositrat dehidrogenase, dan malat dehidrogenase dalam

menunjukkan adanya kerusakan pada hati tikus jantan akibat induksi dari dosis

hepatotoksik parasetamol.


37

2. Kontrol hepatotoksin (parasetamol 2,5 g/kg BB)

Kontrol hepatotoksin ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh induksi

parasetamol 2,5 g/kg BB terhadap sel hati tikus, selain itu juga digunakan sebagai

patokan dalam menganalisa efek hepatoprotektif infusa daun M. tanarius. Aktivitas

serum ALT kontrol hepatotoksin parasetamol 2,5 g/kg BB adalah sebesar 977,2 +

85,2 (tersaji pada tabel III), sedangkan untuk aktivitas serum AST dihasilkan data

673,2 + 110,3 (tersaji pada tabel IV).

Dibandingkan dengan aktivitas serum ALT kontrol negatif sebesar 79,2 +

5,2 U/L maka terlihat adanya kenaikan aktivitas serum ALT sekitar 12,3 kalinya,

sedangkan persentase perbedaan 1133,8% dibandingkan dengan kontrol negatif.

Kenaikan aktivitas serum ALT lebih dari 10 kali lipat ini dapat menunjukkan bahwa

kondisi sel hati tikus telah mengalami kerusakan.

Pada serum AST kontrol negatif sebesar 138,4 + 4,9; sehingga dapat dilihat

persentase perbedaan dengan kontrol negatif adalah 386,4%. Hasil analisis statistik

menunjukkan kontrol hepatotoksin parasetamol berbeda bermakna (p<0,05) dengan

kontrol negatif aquadest. Oleh karena itu, dengan kenaikan serum AST yang belum

signifikan, akan tetapi dapat dikatakan telah terjadi kerusakan pada hati dengan

adanya kenaikan tersebut. Kenaikkan dari serum ALT dan AST ini juga menegaskan

bahwa parasetamol dengan dosis 2,5 g/kg BB memberikan efek hepatotoksik pada

tikus jantan.


38

3. Kontrol perlakuan (Infusa Daun M. tanarius 5 g/kg BB)

Kelompok ini dilakukan perlakuan dengan pemberian dosis 5 g/kg BB infusa

daun M. tanarius pada tikus tanpa pemberian parasetamol. Aktivitas serum ALT yang

dihasilkan adalah 78,0 + 3,5 U/L (pada tabel III). Bila dibandingkan dengan kontrol

negatif menunjukkan perbedaan 1,5% dan secara statistik menunjukkan perbedaan

tersebut tidak bermakna (p>0,05). Hal ini berarti infusa daun M. tanarius tidak

menimbulkan efek yang berbeda dari kontrol negatif aquadest.

Pada aktivitas serum AST dari kelompok ini menurut hasil uji statistik (pada

tabel IV) adalah 121,2 + 6,2 U/L. Perbandingan dengan kontrol negatif menunjukkan

perbedaan 12,4% dan secara statistik perbedaan tersebut tidak bermakna (p>0,05).

Hasil ini menunjukkan bahwa infusa M. tanarius juga tidak menaikkan aktivitas

serum AST pada tikus jantan. Untuk itu dapat dikatakan bahwa infusa daun M.

tanarius ini tidak memiliki efek yang berpengaruh pada sel hati tikus jantan.

4. Perlakuan infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB pada tikus jantan terinduksiparasetamol 2,5 g/kg BB

Pada penelitian ini penulis membatasi waktu praperlakuan jangka pendek

infusa daun M. tanarius sebelum pemejanan parasetamol adalah ½ jam sampai 6 jam.

Dari rentang waktu tersebut, ditentukan waktu sebagai praperlakuan infusa daun M.

tanarius yaitu ½, 1, 2, 4, dan 6 jam.

Pada waktu praperlakuan ½ jam infusa daun M. tanarius 5g/kg BB

(kelompok IV) menunjukkan aktivitas serum ALT adalah 600,0 + 50,6 U/L. Hasil

analisis secara statistik dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin parasetamol


39

menunjukkan berbeda bermakna (p<0,05), sedangkan efek hepatoprotektif yang

dihasilkan adalah 38,6%. Hal ini menujukkan efek hepatoprotektif yang dihasilkan

belum terlalu besar, sehingga dosis infusa daun M. tanarius pada kelompok ini belum

dapat melindungi sel hati dari kerusakan yang terjadi secara optimal.

Data aktivitas serum ALT tersebut didukung dengan pengukuran aktivitas

serum AST yang secara statistik dihasilkan 661,2 + 45,9 U/L. Dibandingkan dengan

kontrol hepatotoksin parasetamol menunjukkan berbeda tidak bermakna (p>0,05) dan

memiliki efek hepatoprotektif 1,7%. Aktvitas serum AST belum menunjukkan

penurunan dengan efek hepatoprotektif yang sangat kecil tersebut. Hal ini

menguatkan data aktivitas serum AST dimana pada praperlakuan ½ jam tersebut

belum dapat melindungi hati dari hepatotoksik parasetamol.

Kelompok praperlakuan 1 jam infusa daun M. tanarius 5g/kg BB

(kelompok V) dari tabel III menunjukkan hasil aktivitas serum ALT 94,2 + 6,5 U/L.

Pada praperlakuan ini aktivitas serum ALT mengalami penurunan 10,3 kali

dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin parasetamol dan memiliki persentase

perbedaan dari kontrol hepatotoksin parasetamol 90,3%. Hasil ini menunjukkan

perbedaan yang bermakna (p<0,05) dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin

parasetamol . Dari efek hepatoprotektif pada serum ALT kelompok ini memiliki efek

paling tinggi, yaitu 90,3%.

Hasil tersebut juga ditegaskan pada tabel IV untuk aktivitas serum AST yang

dihasilkan adalah 186,8 + 9,5 U/L dengan persentase perbedaan dari kontrol

hepatotoksin parasetamol adalah 72,2%. Hasil statistik pada serum AST kelompok ini


40

menunjukkan perbedaan yang bermakna (p<0,05) dibandingkan dengan kontrol

hepatotoksin parasetamol, selain itu pada efek hepatoprotektif memiliki persentase

tertinggi yaitu 72,2%. Dari data yang dihasilkan tersebut dapat disimpulkan bahwa

kelompok praperlakuan 1 jam infusa daun M. tanarius mampu melindungi hati dari

kerusakan sel-sel hati akibat adanya hepatotoksin parasetamol pada tikus jantan.

Pada praperlakuan 2 jam infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB (kelompok V)

didapatkan hasil 162,8 + 13,2 U/L dengan persentase perbedaan dibandingkan dengan

kontrol positif adalah 83,3%. Dari data tersebut terjadi penurunan aktivitas serum

ALT 6 kali dan uji statistik menunjukkan hasil yang berbeda bermakna (p<0,05)

dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin parasetamol. Efek hepatoprotektif yang

dihasilkan juga tergolong tinggi yaitu 83,3%. Akan tetapi, hasil ini lebih rendah

dibandingkan dengan kelompok praperlakuan 1 jam.

Data aktivitas serum AST menunjukkan hasil 283,2 + 23,7 U/L dengan

persentase perbedaan 57,9%. Uji statistik menunjukkan perbedaan yang bermakna

(p<0,05) dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin parasetamol. Pada efek

hepatoprotektif yang dihasilkan adalah 57,9%, hasil aktivitas serum AST ini

menunjukkan efek hepatoprotektif yang tinggi pada sel hati tikus jantan. Akan tetapi,

bila dibandingkan dengan aktivitas serum AST pada kelompok praperlakuan 1 jam

masih lebih rendah. Oleh sebab itu, dapat dikatakan pada praperlakuan 2 jam infusa

daun M. tanarius memiliki efek melindungi sel hati dari kerusakan akibat

hepatotoksin parasetamol, tetapi memiliki efek yang lebih rendah dari kelompok

praperlakuan 1 jam.


41

Praperlakuan 4 jam infusa daun M. tanarius menunjukkan hasil aktivitas

serum ALT 818,8 + 57,9 U/L dengan persentase perbedaan dibandingkan dengan

kontrol hepatotoksin parasetamol adalah 16,2%. Secara statistik menunjukkan hasil

yang berbeda tidak bermakna (p>0,05) dibandingkan kontrol hepatotoksin

parasetamol. Untuk efek hepatoprotektif yang dihasilkan memiliki persentase terkecil

diantara semua kelompok praperlakuan, yaitu 16,2%. Untuk aktivitas serum AST

yang dihasilkan adalah 862,4 + 37,6 U/L lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol

hepatotoksin parasetamol. Persentase perbedaan dibandingkan kelompok kontrol

hepatotoksin parasetamol adalah 28,1% dan secara statistik berbeda tidak bermakna

(p>0,05). Pada efek hepatoprotektif yang dihasilkan adalah 28,1%. Dari data serum

ALT didukung data serum AST tersebut menunjukkan kemampuan infusa dalam

melindungi sel hati pada kelompok ini lebih kecil dan mengalami penurunan

dibandingkan kelompok praperlakuan 1 dan 2 jam.

Kelompok praperlakuan 6 jam infusa daun M. tanarius dari data dihasilkan

aktivitas serum ALT adalah 766,2 + 54,6 U/L dengan persentase perbedaan

dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin parasetamol adalah 21,5%. Secara statistik

memiliki perbedaan yang tidak bermakna (p>0,05) dibandingkan dengan kontrol

hepatotoksin parasetamol. Pada kelompok ini memiliki efek hepatoprotektif

walaupun kecil seperti pada kelompok ½ dan 4 jam, yaitu sebesar 21,5%. Pada

aktivitas serum AST menunjukkan hasil 812,2 + 46,0 U/L dengan persentase

perbedaan dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin parasetamol adalah

20,6%. Secara statistik menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna (p>0,05)


42

dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin parasetamol. Efek

hepatoprotektif pada aktivitas serum AST ini juga kecil dibandingkan kelompok 1

dan 2 jam, yaitu sebesar 20,6%. Dari hasil aktivitas serum ALT didukung data serum

AST menunjukkan bahwa pada klompok praperlakuan 6 jam memiliki kemampuan

yang rendah dalam melindungi sel-sel hati dari hepatotoksin parasetamol.

Adanya kandungan glikosida seperti macarangioside A-C dan mallophenol

B pada M. tanarius dimungkinkan dapat menangkap radikal bebas atau metabolit

aktif seperti NAPQI pada proses terjadinya toksisitas oleh parasetamol. Pada

pendekatan struktur kimia senyawa glikosida tersebut memiliki gugus karbonil (C=O)

dengan ikatan rangkap terkonjugasi, hal ini memungkinkan terjadinya penangkapan

metabolit aktif NAPQI sehingga ikatan kovalen antara NAPQI dengan protein sel

dapat diminimalkan.

D. Rangkuman Pembahasan

Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini adalah praperlakuan jangka penek

infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB mampu menghasilkan efek hepatoprotektif pada

waktu ½, 1, 2, 4, dan 6 jam secara berturut-turut untuk serum ALT adalah 38,6%;

90,3%; 83,3%; 16,2%; 21,5%. Sedangkan pada serum AST memiliki efek

hepatoprotektif pada ½, 1, 2, 4, dan 6 jam secara berturut-turut sebesar 1,7%; 72,2%;

57,9%; 28,1%; 20,6%. Hasil ini sesuai dengan hipotesis yaitu infusa daun M.

tanarius memiliki efek hepatoprotektif jangka pendek pada tikus jantan terinduksi

parasetamol.


43

Pada kelompok kontrol positif perlakuan M. tanarius menunjukkan hasil

yang berbeda tidak bermakna dibandingkan dengan kontrol negatif aquadest. Hal ini

menujukkan bahwa infusa daun M. tanarius tidak memiliki pengaruh terhadap sel-sel

hati tikus jantan, sehingga kenaikkan serum ALT dan AST pada penilitian ini

diakibatkan oleh induksi parasetamol pada tikus jantan.

Jangka waktu pemberian infusa M. tanarius yang paling baik sebagai

hepatoprotektor adalah pada praperlakuan 1 jam dan 2 jam. Akan tetapi, pada uji

statistik keduanya berbeda tidak bermakna dalam menurunkan aktivitas serum ALT

dan AST. Pada penelitian ini dipilih pada waktu praperlakuan infusa daun M.

tanarius 1 jam sebagai waktu paling efektif. Hal ini dikarenakan waktu yang

dibutuhkan lebih singkat, yaitu hanya 1 jam dalam memberikan efek hepatoprotektif

pada tikus jantan.

Efek hepatoprotektif yang terjadi dapat diakibatkan oleh beberapa

kemungkinan mekanisme kerja, terkait dengan hepatotoksisitas parasetamol.

Hepatotoksisitas parasetamol sendiri terjadi akibat inhibisi dan terjadinya oksidasi

parasetamol menjadi metabolit yang reaktif, yaitu NAPQI (N-asetil-p-

benzoquinoeimine). Kemungkinan mekanisme yang pertama adalah menurunkan

aktivitas enzim sitokrom P-450 dalam mengoksidasi parasetamol menjadi NAPQI,

sehingga kadar NAPQI dan toksisitasnya menurun pula. Kemungkinan yang kedua

adalah adanya stimulasi dari infusa daun M. tanarius pada sintesis glutation.

Glutation ini berperan dalam mencegah terjadinya hepatotoksisitas parasetamol

dengan mencegah NAPQI berikatan kovalen dengan protein hati. Kemungkinan


44

ketiga adalah adanya penangkapan radikal bebas oleh senyawa yang terkandung

dalam M. tanarius yaitu macarangioside A-C dan mallophenol B. Senyawa tersebut

dapat menangkap radikal bebas NAPQI dan menjadikannya metabolit sekunder,

sehingga dapat dibuang melalui ekskresi ginjal tubuh.

Namun dari ketiga kemungkinan tersebut, kemungkinan yang paling

mungkin terjadi adalah kemungkinan pertama dan ketiga. Hal ini dikarenakan pada

kemungkinan kedua diduga membutuhkan waktu yang panjang (tidak dalam hitungan

jam). Akan tetapi, perlu dilakukan uji in vitro untuk lebih memastikannya.


45

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil data yang diperoleh dan analisis statistik yang telah

dilakukan, maka dapat disimpulkan :

1. Praperlakuan jangka pendek infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB mampu

menghasilkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi parasetamol 2,5

g/kg BB dengan waktu ½, 1, 2, 4, dan 6 jam secara berturut-turut untuk GPT-

serum adalah 38,6%; 90,3%; 83,3%; 16,2%; 21,5% dan GOT-serum pada ½, 1, 2,

4, dan 6 jam secara berturut-turut sebesar 1,7%; 72,2%; 57,9%; 28,1%; 20,6%.

2. Praperlakuan 1 jam infusa daun M. tanarius 5 g/kg BB merupakan waktu paling

efektif untuk menghasilkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan teriduksi

parasetamol 2,5 g/kg BB.

B. Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai :

1. Uji hepatoprotektif dengan infusa daun M. tanarius untuk induksi hepatotoksin

yang lain seperti karbon tetraklorida atau galaktosamin.

2. Uji kandungan senyawa antioksidan yang spesifik pada tanaman M. tanarius

dalam menimbulkan efek hepatoprotektif.

3. Uji in vitro penurunan aktivitas enzim sitokrom P-450 oleh antioksidan dan

penangkapan radikal bebas oleh antioksidan dalam infusa daun M. tanarius.


46

DAFTAR PUSTAKA

Andini, A.P., 2010, Efek Analgesik Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanariusL. Pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta

Anonim, 2008, Informasi Spesies- Mara Macaranga tanarius L. M.A.http://www.plantamor.com/index.php?plant=804, diakses tanggal 19 Maret2010

Anonim, 2010, Prosea-Macarangatanarius,http://www.proseanet.org/prohati4/browser.php?docsid=162, diakses tanggal 19Maret 2010

Chandrasoma, P., & Taylor, C.R., 1995, Concise Pathology, 2nd edition, 620-623, 626,641-642, FRC Path Prentice Hall International, USA

Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia,Edisi IV, 7, 649, Departemen Kesehatan Republik Inonesia, Jakarta

Forrest, E., 2006, Hepatic Disorders, in Anne, L., (Eds.), Adverse Drug Reaction, 2nd

ed, 193, 201, 202, Pharmaceutical Press, London

Hastuti, T., 2008, Aktivitas enzim Transaminase dan Gambaran Histopatologi Tikusyang Diberikan Kelapa Kopyor Pasca Induksi Parasetamol, Laporan Penelitian,Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institus Pertanian Bogor,Bogor

James, L.P., Philip, R.M., dan Jack, A.H., 2003, Acetaminophen-InducedHepatotoxicity, Am. Soc. Pharm. Expe. Therap., 31, 1499-1506.

Katzung, B.G., 1989, Farmakologi Dasar dan Klinik, Edisi 3, 488-489, PenerbitBuku Kedokteran EGC, Jakarta

Kavalci C., Kavalci G., dan Sezenler E., 2009, Acetaminophen poisoning: CaseReport, In. J. Tox., Volume 6 Number 2

Koorders, S.H dan Valeton Th., 1918, Atlas der Baumarten Von Java, Buch undSteindruckerei von Fa. P. W. M. TRAP, Leiden

Kurniawati, A.Y., 2010, Efek Antiinflamasi Ekstrak Metanol-Air Daun Macarangatanarius L. Pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi, Universitas SanataDharma, Yogyakarta


47

Lenny, S., 2006, Isolasi dan Uji Bioaktifitas Kandungan kimia Utama Puding Merahdengan Metode Uji Brine Shrimp, Laporan Penelitian, 5, Departemen KimiaFakultas MIPA USU, Medan

Lenny, S., 2006, Senyawa Flavonoida, Fenilpropanoida, dan Alkaloida, LaporanPenelitian, 14-16, Departemen Kimia Fakultas MIPA USU, Medan

Lim, T.Y., Lim Y.Y., Yule C.M., 2008, Evaluation of antioxidant, antibacterial andanti-tyrosinase activities of four Macaranga species, Elsevier, Vol 114, 594

Lin, J.H., Gen-ichiro N., dan Itsuo N., 1990, Tannins and Related Compounds.XCIV.1) Isolation and Characterization of Seven New Hydrolyzable Tanninsfrom the Leaves of Macarangan tanarius (L.) MUELL., et ARG., Chem. Pharm.Bull., 38 (5) 1218-1223

Lu, F.C., 1995, Basic Toxicology : Fundamentals, Target Organs, and Assesment,diterjemahkan oleh Edi Nugroho, Edisi 2, 206-220, Penerbit UniversitasIndonesia

Madan, L.P., 1977, Acetaminophen Toxicity, J. Clin. Pharm, 17, 557

Mahendra, A.A., 2011, Efek Hepatoprotektif Infusa Daun Macaranga tanarius L.Pada Tikus Jantan Terinduksi Parasetamol, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta

Matsunami K., Ichiko T., Takakazu S., Mitsunori A., Kazunari ., Hideaki O., dkk.,2006, Radical-Scavenging Activities of New Megastigmane Glucosides fromMacaranga tanarius L. MÜLL.-ARG., Chem. Pharm. Bull., 54(10) 1403—1407

Matsunami, K., Hideaki O., Kazunari K., Takakazu S., Masatoshi K., Kentaro Y.,

dkk., 2009, Absolute configuration of (+)-pinoresinol 4-O-[600-O-galloyl]-

b-D-glucopyranoside, macarangiosides E, and F isolated from the leaves of

Macaranga tanarius, Phytochemistry, 70 (2009) 1277–1285

Olson, K. R., 2006, Poisoning & Drug Overdose, Mc Graw Hill, San Fransisco.

Phommart, S., Pakawadee S., Nitirat C., Somsak., dan Somyote S., 2005,Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod., 68, 927-930.

Price, A.S and Wilson M.L., 1984, Patofisiologi : Konsep Klinik Proses-ProsesPenyakit, Edisi 2, diterjemahkan oleh Aji Dharma, 327-328, EGC, Jakarta


48

Robinson, T., 1991, The Organic Constituent of Higher Plants, diterjemahkan olehKosasih Padmawinata, Edisi ke-6, 191-193, ITB, Bandung

Starr, F., Kim, S., and Lloyd, L., 2003, Macaranga tanarius L., United StatesGeological Survey--Biological Resources Division Haleakala Field Station,Maui, Hawai'i

Widyaningrum, Y., 2004, efek Hepatoprotektif Kombinasi Jus Wortel (Daucuscarota, L.) dan Apel Hijau ( Pyrus malus, L.) Pada Mencit Jantan TerinduksiParasetamol, Skripsi, 24-25, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Williamson, E.M., David T.O., dan Fred J.E., 1996, Pharmacological Methods inPhytotherapy Research Volume 1: Selection, Preparation, and PharmacologicalEvaluation of Plant Material, 47, John Wileys & Sons, Cichester, England

World Health Organisation (WHO), 2008a, Hepatitis B,http://www.who.int/mediacentre/fact-sheets/fs204/en/, diakses tanggal 23desember 2010

World Health Organisation (WHO), 2008b, Hepatitis A,http://www.who.int/mediacentre/fact-sheets/fs328/en/, diakses tanggal 23desember 2010

World Health Organisation (WHO), 2009, Cancer,http://www.who.int/mediacentre/fact-sheets/fs297/en/, diakses tanggal 23desember 2010

Wulandari, D., 2010, Efek Analgesik Infusa Daun Macaranga tanarius L. PadaMencit Betina Galur Swiss, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Yunita, Antonius A., Erly S., Imelda W., dan Imono A. D., 2006, EfekHepatoprotektif Rebusan Herba Putri Malu (Mimosa pudica, L.) pada TikusTerangsang Parasetamol, Laporan Penelitian, Laboratorium Farmakologi danToksikologi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, LaboratoriumFarmakologi dan Toksikologi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah MadaYogyakarta

Zimmerman, H. J., 1978, Hepatotoxicity, 49, 93-99, 167-171, 178-79, 236-237, 259,Appleton Century Crofts, New York


LAMPIRAN


49

LAMPIRAN

Lampiran 1. Daun M. tanarius

Lampiran 2. Infusa daun M. tanarius


50

Lampiran 3. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius


51

Lampiran 4. Hasil Analisis Kolmogorov-Smirnov dilanjutkan Anova One-Waydata ALT pada orientasi waktu pengambilan cuplikan darahsetelah pemberian parasetamol dosis toksik (2,5 g/kgBB)

Descriptive Statistics

N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

ALT 9 650.3333 352.24033 304.00 1214.00

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

ALT

N 9

Normal Parametersa,,b

Mean 650.3333

Std. Deviation 352.24033

Most Extreme Differences Absolute .305

Positive .305

Negative -.163

Kolmogorov-Smirnov Z .914

Asymp. Sig. (2-tailed) .374

a. Test distribution is Normal.

b. Calculated from data.


52

Oneway

Descriptives

ALT

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for

Mean

Minimum MaximumLower Bound Upper Bound

24 jam 3 343.6667 57.81292 33.37830 200.0514 487.2819 304.00 410.00

48 jam 3 1102.3333 115.14484 66.47890 816.2977 1388.3690 984.00 1214.00

72 jam 3 505.0000 22.06808 12.74101 450.1799 559.8201 482.00 526.00

Total 9 650.3333 352.24033 117.41344 379.5774 921.0892 304.00 1214.00

ANOVA

ALT

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 958410.667 2 479205.333 84.132 .000

Within Groups 34175.333 6 5695.889

Total 992586.000 8

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

ALT

Scheffe

(I)

Orientasi

_waktu

(J)

Orientasi

_waktu

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound Upper Bound

24 jam 48 jam -758.66667*

61.62191 .000 -956.3040 -561.0293

72 jam -161.33333 61.62191 .102 -358.9707 36.3040

48 jam 24 jam 758.66667*

61.62191 .000 561.0293 956.3040

72 jam 597.33333*

61.62191 .000 399.6960 794.9707

72 jam 24 jam 161.33333 61.62191 .102 -36.3040 358.9707

48 jam -597.33333*

61.62191 .000 -794.9707 -399.6960

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Homogeneous Subsets


53

ALT

Scheffea

Orientasi

_waktu N

Subset for alpha = 0.05

1 2

24 jam 3 343.6667

72 jam 3 505.0000

48 jam 3 1102.3333

Sig. .102 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are

displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.


54

Lampiran 5. Hasil Analisis Kolmogorov-Smirnov dilanjutkan Anova One-Waydata AST pada orientasi waktu pengambilan cuplikan darahsetelah pemberian parasetamol dosis toksik (2,5 g/kgBB)



SGOT 9 500.5556 260.93922 273.00 1029.00


SGOT

N 9


Mean 500.5556



Positive .255

Negative -.192

Kolmogorov-Smirnov Z .766




Oneway


55

ANOVA

SGOT


Between Groups 419036.222 2 209518.111 10.003 .012

Within Groups 125678.000 6 20946.333

Total 544714.222 8

Post Hoc Tests

Descriptives

SGOT

N Mean

Std.



for Mean

Minimum

Maximu

m

Lower

Bound

Upper

Bound

24 jam 3 370.3333 62.22808 35.92740 215.7502 524.9164 330.00 442.00

48 jam 3 804.6667 238.01330 137.41705 213.4088 1395.9245 555.00 1029.00

72 jam 3 326.6667 48.12830 27.78689 207.1093 446.2240 273.00 366.00

Total 9 500.5556 260.93922 86.97974 299.9799 701.1312 273.00 1029.00


56


SGOT

Scheffe

(I)

Orientasi

_waktu_

SGOT

(J)

Orientasi

_waktu_

SGOT

Mean Difference




24 jam 48 jam -434.33333*

118.17031 .029 -813.3360 -55.3306

72 jam 43.66667 118.17031 .935 -335.3360 422.6694

48 jam 24 jam 434.33333*

118.17031 .029 55.3306 813.3360

72 jam 478.00000*

118.17031 .019 98.9973 857.0027

72 jam 24 jam -43.66667 118.17031 .935 -422.6694 335.3360

48 jam -478.00000*

118.17031 .019 -857.0027 -98.9973


Homogeneous Subsets

SGOT

Scheffea

Orientasi_

waktu_SG

OT N


1 2

72 jam 3 326.6667

24 jam 3 370.3333

48 jam 3 804.6667

Sig. .935 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are

displayed.



57

Lampiran 6. Hasil analisis statistik data ALT perlakuan infusa daum M.

tanarius (5 g/kgBB) pada tikus jantan terinduksi parasetamol

dosis toksik (2,5 g/kgBB)


ALT

N 40


Mean 447.0500



Positive .254

Negative -.151

Kolmogorov-Smirnov Z 1.604




Kruskal-Wallis Test

Ranks

Kontrol_perlakuan N Mean Rank

ALT Kelompok kontrol aquadest 5 7.10

Kelompok kontrol parasetamol 5 35.60

Kelompok kontrol Macaranga 5 6.00

Kelompok 1/2 jam 5 24.40

Kelompok 1 jam 5 10.90




Total 40


58

Test Statisticsa,b

ALT

Chi-Square 34.907

df 7

Asymp. Sig. .000

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable:

Kontrol_perlakuan

Mann-Whitney Test

Ranks

Kontrol_perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks

ALT Kelompok kontrol aquadest 5 3.00 15.00

Kelompok kontrol parasetamol 5 8.00 40.00

Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611


Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008a

a. Not corrected for ties.

b. Grouping Variable: Kontrol_perlakuan


59

Mann-Whitney Test

Ranks



Kelompok kontrol Macaranga 5 5.10 25.50

Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U 10.500

Wilcoxon W 25.500

Z -.419





Mann-Whitney Test

Ranks



Kelompok 1/2 jam 5 8.00 40.00

Total 10


60

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks



Kelompok 1 jam 5 6.80 34.00

Total 10

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 21.000

Z -1.358






61

Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10


62

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611






63

Mann-Whitney Test

Ranks


ALT Kelompok kontrol parasetamol 5 8.00 40.00

Kelompok kontrol Macaranga 5 3.00 15.00

Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks



Kelompok 1/2 jam 5 3.00 15.00

Total 10


64

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611






65

Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10


66

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 22.000

Z -1.149





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 20.000

Z -1.567






67

Mann-Whitney Test

Ranks


ALT Kelompok kontrol Macaranga 5 3.00 15.00

Kelompok 1/2 jam 5 8.00 40.00

Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10


68

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 19.500

Z -1.676





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10


69

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611






70

Mann-Whitney Test

Ranks


ALT Kelompok 1/2 jam 5 8.00 40.00


Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10


71

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 17.000

Z -2.193






72

Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 20.000

Z -1.567





Mann-Whitney Test

Ranks


ALT Kelompok 1 jam 5 3.00 15.00


Total 10


73

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611






74

Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10


75

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611





Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.611






76

Mann-Whitney Test

Ranks




Total 10

Test Statisticsb

ALT


Wilcoxon W 25.000

Z -.522






77

Lampiran 7. Hasil analisis statistik data AST perlakuan infusa daum M.

tanarius (5 g/kgBB) pada tikus jantan terinduksi parasetamol

dosis toksik (2,5 g/kgBB)



AST 40 467.3250 314.15172 110.00 1029.00


AST

N 40


Mean 467.3250



Positive .195

Negative -.130

Kolmogorov-Smirnov Z 1.230





78

ANOVA

AST


Between Groups 3477927.575 7 496846.796 42.851 .000

Within Groups 371033.200 32 11594.788

Total 3848960.775 39

Oneway

Descriptives

AST

N Mean

Std.


95% Confidence Interval for

Mean

Minimum MaximumLower Bound Upper Bound

Kelompok kontrol

aquadest

5 138.4000 11.12654 4.97594 124.5846 152.2154 121.00 151.00

Kelompok Kontrol

parasetamol

5 673.2000 246.84347 110.39176 366.7033 979.6967 456.00 1029.00

Kelompok kontrol

Macaranga

5 121.2000 14.02498 6.27216 103.7857 138.6143 110.00 143.00

Kelompok 1/2 jam 5 661.2000 102.69226 45.92537 533.6907 788.7093 539.00 778.00

Kelompok 1 jam 5 186.8000 21.32370 9.53625 160.3231 213.2769 164.00 209.00

Kelompok 2 jam 5 283.2000 53.03489 23.71793 217.3485 349.0515 203.00 336.00

Kelompok 4 jam 5 862.4000 84.29294 37.69695 757.7365 967.0635 781.00 990.00

Kelompok 6 jam 5 812.2000 102.89655 46.01674 684.4371 939.9629 710.00 928.00

Total 40 467.3250 314.15172 49.67175 366.8544 567.7956 110.00 1029.00


79

Post Hoc Tests


AST

Scheffe

(I) Kontrol_perlakuan_AST (J) Kontrol_perlakuan_AST

Mean Difference




Kelompok kontrol aquadest Kelompok Kontrol

parasetamol

-534.80000*

68.10224 .000 -808.8147 -260.7853

Kelompok kontrol

Macaranga

17.20000 68.10224 1.000 -256.8147 291.2147

Kelompok 1/2 jam -522.80000*

68.10224 .000 -796.8147 -248.7853

Kelompok 1 jam -48.40000 68.10224 .999 -322.4147 225.6147

Kelompok 2 jam -144.80000 68.10224 .715 -418.8147 129.2147

Kelompok 4 jam -724.00000*

68.10224 .000 -998.0147 -449.9853


68.10224 .000 -947.8147 -399.7853

Kelompok Kontrol

parasetamol

Kelompok kontrol aquadest 534.80000*

68.10224 .000 260.7853 808.8147

Kelompok kontrol

Macaranga

552.00000*

68.10224 .000 277.9853 826.0147

Kelompok 1/2 jam 12.00000 68.10224 1.000 -262.0147 286.0147

Kelompok 1 jam 486.40000*

68.10224 .000 212.3853 760.4147


68.10224 .001 115.9853 664.0147

Kelompok 4 jam -189.20000 68.10224 .385 -463.2147 84.8147

Kelompok 6 jam -139.00000 68.10224 .755 -413.0147 135.0147

Kelompok kontrol

Macaranga

Kelompok kontrol aquadest -17.20000 68.10224 1.000 -291.2147 256.8147

Kelompok Kontrol

parasetamol

-552.00000*

68.10224 .000 -826.0147 -277.9853

Kelompok 1/2 jam -540.00000*

68.10224 .000 -814.0147 -265.9853

Kelompok 1 jam -65.60000 68.10224 .995 -339.6147 208.4147

Kelompok 2 jam -162.00000 68.10224 .587 -436.0147 112.0147


80


68.10224 .000 -1015.2147 -467.1853


68.10224 .000 -965.0147 -416.9853

Kelompok 1/2 jam Kelompok kontrol aquadest 522.80000*

68.10224 .000 248.7853 796.8147

Kelompok Kontrol

parasetamol

-12.00000 68.10224 1.000 -286.0147 262.0147

Kelompok kontrol

Macaranga

540.00000*

68.10224 .000 265.9853 814.0147


68.10224 .000 200.3853 748.4147


68.10224 .002 103.9853 652.0147

Kelompok 4 jam -201.20000 68.10224 .307 -475.2147 72.8147

Kelompok 6 jam -151.00000 68.10224 .670 -425.0147 123.0147

Kelompok 1 jam Kelompok kontrol aquadest 48.40000 68.10224 .999 -225.6147 322.4147

Kelompok Kontrol

parasetamol

-486.40000*

68.10224 .000 -760.4147 -212.3853

Kelompok kontrol

Macaranga

65.60000 68.10224 .995 -208.4147 339.6147

Kelompok 1/2 jam -474.40000*

68.10224 .000 -748.4147 -200.3853

Kelompok 2 jam -96.40000 68.10224 .955 -370.4147 177.6147


68.10224 .000 -949.6147 -401.5853


68.10224 .000 -899.4147 -351.3853

Kelompok 2 jam Kelompok kontrol aquadest 144.80000 68.10224 .715 -129.2147 418.8147

Kelompok Kontrol

parasetamol

-390.00000*

68.10224 .001 -664.0147 -115.9853

Kelompok kontrol

Macaranga

162.00000 68.10224 .587 -112.0147 436.0147

Kelompok 1/2 jam -378.00000*

68.10224 .002 -652.0147 -103.9853

Kelompok 1 jam 96.40000 68.10224 .955 -177.6147 370.4147


81


68.10224 .000 -853.2147 -305.1853


68.10224 .000 -803.0147 -254.9853

Kelompok 4 jam Kelompok kontrol aquadest 724.00000*

68.10224 .000 449.9853 998.0147

Kelompok Kontrol

parasetamol

189.20000 68.10224 .385 -84.8147 463.2147

Kelompok kontrol

Macaranga

741.20000*

68.10224 .000 467.1853 1015.2147

Kelompok 1/2 jam 201.20000 68.10224 .307 -72.8147 475.2147


68.10224 .000 401.5853 949.6147


68.10224 .000 305.1853 853.2147

Kelompok 6 jam 50.20000 68.10224 .999 -223.8147 324.2147

Kelompok 6 jam Kelompok kontrol aquadest 673.80000*

68.10224 .000 399.7853 947.8147

Kelompok Kontrol

parasetamol

139.00000 68.10224 .755 -135.0147 413.0147

Kelompok kontrol

Macaranga

691.00000*

68.10224 .000 416.9853 965.0147

Kelompok 1/2 jam 151.00000 68.10224 .670 -123.0147 425.0147


68.10224 .000 351.3853 899.4147


68.10224 .000 254.9853 803.0147

Kelompok 4 jam -50.20000 68.10224 .999 -324.2147 223.8147



82

Homogeneous Subsets

AST

Scheffea

Kontrol_perlakuan_AST N


1 2

Kelompok kontrol Macaranga 5 121.2000

Kelompok kontrol aquadest 5 138.4000



Kelompok 1/2 jam 5 661.2000

Kelompok Kontrol parasetamol 5 673.2000



Sig. .587 .307

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.



83

Lampiran 8. Perhitungan Efek Hepatoprotektif Data ALT

Rumus perhitungan efek hepatoprotektif :

(purata ALT kontrol parasetamol) - (purata ALT perlakuan) x 100%purata ALT kontrol parasetamol

Dengan rumus tersebut maka perhitungan efek hepatoprotektif pada SGPT adalah

sebagai berikut :

Kelompok perlakuan ½ jam infusa daun M.tanarius dosis 5 g/kgBB +induksi parasetamol:

977,2 – 600,0 x 100% = 38,6%977,2

Kelompok perlakuan 1 jam infusa daun M.tanarius dosis 5 g/kgBB +induksi parasetamol:

977,2 – 94,2 x 100% = 90,3%977,2


977,2 – 162,8 x 100% = 83,3%977,2


977,2 – 818,8 x 100% = 16,2%977,2


977,2 – 766,2 x 100% = 21,5%977,2


84

Lampiran 9. Perhitungan Efek Hepatoprotektif Data AST

Rumus perhitungan efek hepatoprotektif :

(purata AST kontrol parasetamol) - (purata AST perlakuan) x 100%purata AST kontrol parasetamol

dengan rumus tersebut maka perhitungan efek hepatoprotektif pada SGOT adalah

sebagai berikut :

Kelompok perlakuan ½ jam infusa daun M.tanarius dosis 5 g/kgBB +induksi parasetamol:

673,2 – 661,2 x 100% = 1,7%673,2


673,2 – 186,8 x 100% = 72,2%673,2


673,2 – 283,2 x 100% = 57,9%673,2


673,2 – 862,4 x 100% = 28,1%673,2


673,2 – 812,2 x 100% = 20,6%673,2


85

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif

Jangka Pendek Infusa Daun Macaranga tanarius (L.)

pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi

Parasetamol” memiliki nama lengkap Ari Widya

Nugraha, merupakan anak ketiga dari empat bersaudara

pasangan Adi Nugroho dan Jong Giok Mei. Penulis

dilahirkan di Yogyakarta pada tanggal 2 Maret 1990.

Pendidikan formal yang telah ditempuh, yaitu TK Budya Wacana Yogyakarta

(1994-1995), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD

Budya Wacana (1995-2001). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh

oleh penulis di SMPN 6 Yogyakarta (2001-2004), kemudian melanjutkan

pendidikan tingkat menengah atas di SMA Kolese De Britto Sleman (2004-2007).

Penulis kemudian melanjutkan pendidikan sarjana di Universitas Sanata Dharma

Yogyakarta pada tahun 2007. Semasa menempuh kuliah, penulis aktif dalam

berbagai kepanitiaan baik dalam fakultas maupun di luar fakultas. Penulis pernah

menjadi Pemenang Program Kreativitas Mahasiswa Bidang Penelitian (2009).

Penulis juga pernah menjadi Asisten Praktikum Toksikologi Dasar (2010).


Documents

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI - core.ac.uk · E. Metode Uji Hepatotoksisitas ... Gambar 1. Struktur mikroskopik hati ... hati yang dapat disebabkan oleh virus hepatitis,