Pre ANTIGENOS FEBRILES PRELABORATORIO1) Qu y cules son los antgenos febriles?

Los Antgenos Febriles o Reacciones Febriles son pruebas indirectas utilizadas como auxiliares en el diagnstico de enfermedades bacterianas (salmonelosis, fiebre tifoidea y paratifoidea, brucelosis) o rickettsiales (tifo)

ANTIGENOS FEBRILESAntgeno Paratfico "A"

Nombre genrico:Antgeno Febril Paratfico A Cepa:Salmonella paratyphi A 2,12:a:-. Presentacin:Fco. Gotero con 5,0mL No. Catlogo:13-SA01

Antgeno Tfico"O"

Nombre genrico:Antgeno Febril Tfico O Cepa:Salmonella typhi 9,12 Presentacin:Fco. Gotero con 5,0mL No. Catlogo:15-SO01

Antgeno Proteusvulgaris Ox-19

Nombre genrico:Proteus vulgaris Ox-19Cepa:Proteus vulgaris Ox 19 Presentacin:Fco. Gotero con 5,0mL No. Catlogo:17-PV01

Control Positivo Febriles

Anticuerpos de conejo reactivos a estos antgenos.No. Catlogo:18-PF01

Antgc eno Paratfico "B"

Nombre genrico:Antgeno Febril Paratfico B Cepa:Salmonella paratyphi B 1,4,5,12:b:1,2. Presentacin:Fco. Gotero con 5,0mL No. Catlogo:14-SB01

Antgeno Tfico"H"

Nombre genrico:Antgeno Febril Tfico H Cepa:Salmonella typhi 9,12 (vi):d:-. Presentacin:Fco. Gotero con 5,0mL No. Catlogo:16-SD01

Antgeno Brucella abortus

Nombre genrico:Brucella abortus Cepa:Brucella abortus 99s Presentacin:Fco. Gotero con 5,0mL No. Catlogo:15-SO01

Control Negativo Febriles

Anticuerpos de conejo no reactivos a estos antgenos.No. Catlogo:19-NF01

2) Que otro nombre recibe la prueba para determinacin de antgenos febriles?Reacciones febriles.

3) Que entiende usted por titulo de anticuerpo?Titulo de anticuerpo: Es un examen de laboratorio que mide el niveldeanticuerposen una muestra de sangre4) Que ttulos de ac tienen importancia clnica en cada uno de los casos de ag febriles?

Pos laboratorio inmunologa gua 41. Qu importancia tiene un resultado negativo en la prueba de Ag febriles?Una reaccin negativa no excluye el diagnstico de fiebre tifoidea en el contexto de un cuadro clnico compatible. Y no descarta la enfermedad.Se debe buscar otras entidades nosolgicas que causes fiebre.

2. Los resultados positivos en la prueba de Ag febriles son diagnsticos? Justifique.Considerando solo el resultado de positivo o negativo de cada antgeno (aun sin considerar cuantificacin en tubo), de acuerdo con los resultados obtenidos, la utilidad clnica de los antgenos febriles tfico O y Brucella son totalmente cuestionables para descartar o confirmar diagnsticos de infeccin por sus respectivos patgenos, ya que un paciente con manifestaciones clnicas de infeccin gastrointestinal tiene las mismas probabilidades de resultar positivo para estos antgenos, con respecto un sujeto sano (p > 0.05)3. Por qu en zonas geogrficas con elevada prevalencia de enfermedades febriles se recomiendan diluir antes de iniciar el ensayo en porta?No se soy turista. 4. Caso clnico: paciente, 22 aos, varn, soldado, procede de zona rural del municipio de tierralta, que ingresa a la emergencia del hospital, con una enfermedad de 10 das de evolucin, inicio brusco y curso progresivo, caracterizada por: fiebre alta (39.6C), escalofros, malestar general, cefalea, diaforesis, anorexia (excesivo sudor), nauseas, vmitos y deposicin liquida en regular cantidad sin moco ni sangre, con pujo y tenesmo, 3 a 4 veces por da. En los antecedentes personales el paciente manifiesta probable paludismo en septiembre de 2008, recibi tratamiento por dos semanas con cloroquina y primaquina. Niega antecedentes de fiebre tifoidea, alergias medicamentosas o haber recibido transfusiones sanguneas.En la orden emitida por el mdico se pide realizar pruebas de antgeno febriles para los cuales se obtuvieron los siguientes resultados: Tfico O: 1/320 Tfico H: 1/40 Paratfico A: negativo Paratfico B: negativo Proteus OX-19: negativo Brucella abortus: negativoSegn los anteriores datos responda:a) Con que enfermedad hara usted un diagnostico diferencial, teniendo en cuenta los signos y sntomas que presenta el paciente.El resultado de Tfico O y H (salmonella Typhi) puede decirnos si se tiene o no fiebre tifoidea El resultado de Tfico O de 1:320, puede decirnos que usted tiene fiebre tifoidea.b) Con que pruebas realizara este diagnostico diferencial.Unconteo sanguneo completo(CSC) mostrar un alto nmero de glbulos blancos en la sangre.Unhemocultivodurante la primera semana de la fiebre puede mostrar la bacteriaSalmonella typhi.Otros exmenes que pueden ayudar a diagnosticar esta afeccin son: Examen de orinaELISApara buscar la bacteria que causa la fiebre tifoidea. Estudio deanticuerposfluorescentes para buscar sustancias especficas para la bacteria de la fiebre tifoidea. Conteo de plaquetas(ser bajo). Coprocultivo.

c) Teniendo en cuenta el titulo de anticuerpos obtenidos usted pensara que esta frente a una infeccin aguda o pasada? Sustente su respuesta.Tfico O: 1/320: esto podra ser una infeccin aguda, ya que la concentracin del suero es bajo, es decir, la concentracin de anticuerpos tambin debera bajar y aun asi este aglutina con el antgeno, lo que significa que los anticuerpos estn en una gran concentracin Tfico H: 1/40: Cuando los resultados del examen de reacciones febriles los ttulos son de 1:80 o menores, indican memoria inmunolgica, o sea, que en algn momento previo de su vida estuvo en contacto con bacterias que provocan enfermedades febriles (fiebre tifoidea, salmonelosis, brucelosis, entre otras) y su cuerpo desarroll defensas contra ellas.

5. Por que se utiliza Proteus para el diagnostico de Ac contra Riketsia?1. Grupo Tifus: tifo epidmico, por Rickettsia prowazekii, transmitido por piojos (Poulex ivitans), y tifo clsico endmico, por Rickettsia typha por la pulga. 2. Grupo de Fiebre manchada: Rickettsia rickettsii, que implica ms de 30 especies, transmitido principalmente por caros y pulgas (Fiebre manchada de las montaas rocallosas).3. Tifus Scrub: Orientia tsutsugamushi, tambin llamado tifo de los matorrales, transmitido por caros.El Grupo del Tifus reacciona conProteusOx19, el grupo de la fiebre manchada reacciona conProteusOx2 y Ox19 y el Tifus Scrub conProteusOxK

AGLUTINACION PASIVAPre-laboratorio N 5Pre-laboratorio N 51. Qu factores pueden alterar la prueba ASTO?2. Qu ttulos de ASTO tienen significado clnico?3. En qu entidades se puede encontrar resultados positivos de PCR?4. Cules son los valores normales de PCR?5. Guarda alguna relacin el resultado de PCR con el de ASTO o antgenos febriles?6. Qu valores de FR tienen importancia clnica?7. Qu muestra se podra utilizar adems de suero para detectar el FR, como alternativa diagnostica en la artritis inicial?8. Utilizando la simbologa describa en la tabla y teniendo en cuanta el fundamento inmunolgico de cada prueba, complete el esquema de cmo es una reaccin positiva y negativa para cada una de las pruebas aqu sealadas: ASTO, PCR y RA.

Solucin:1/ Para esta prueba, es importante el momento en el que se realice. Usted puede obtener un resultado negativo falso si est infectado por la bacteria estreptococo, pero no se ha acumulado la cantidad suficiente de anticuerpos en su sangre. La cantidad de anticuerpos tarda de cuatro a cinco semanas en alcanzar el valor mximo.S el reactivo no est en condiciones adecuadas el resultado ser errneo.2/ Los resultados son normales cuando son negativos, lo que significa que no tiene anticuerpos contra la bacteria estreptococo en su sangre. Dado que la cantidad de anticuerpos tarda en aumentar en su sangre despus de que usted se infecta, es posible que necesite repetir la prueba de ttulos de ASO dos semanas despus de su primera muestra de sangre.Un resultado positivo significa que se han encontrado anticuerpos y que usted puede tener o haber tenido una infeccin reciente por estreptococos. Sin embargo, en un caso de cada cinco, esta prueba no mostrar un aumento en los anticuerpos si tiene una enfermedad como la fiebre reumtica. Su mdico puede pedir otra prueba de anticuerpos o cultivos de su sangre y tejidos para confirmar si tiene usted una infeccin activa.3/ Se eleva muy rpido en procesos inflamatorios e infecciosos siendo una medicin directa de stos; tambin puede elevarse en procesos de necrosis tisular, neoplasias y reacciones de hipersensibilidad, tambin en enfermedades reumticas. 4/ Los valores normales de la protena C reactiva se encuentran entre 0,6 y 6 mg/lLos resultados generalmente se reportan en una de dos formas:Menos de 40-60 u/mlTtulo menor de 1:805/ su relacin se basa en que todas estas pruebas se fundamentan en la capacidad de determinar un anticuerpo especifico producido por el cuerpo en respuesta a la exposicin a un antgeno y as confirmar la presencia de ese antgeno en el organismo.6/ Los valores de la protena C reactiva normales van aumentando con el estmulo inflamatorio hasta alcanzar un pico mximo en 24-72 horas, regresando generalmente a la normalidad a los 7-10 das; puede ser normal hasta 10 mg/l por lo que valores superiores se asocian a infecciones bacterianas agudas, enfermedades inflamatorias como la artritis reumatoide o las vasculitis.Un resultado de ms de 40 UI PUDIERA considerarse anormal, los resultados pueden llegar hasta las 2000 UI o ms, o pueden expresarse con un nmero menor indicando la dilucin de la sangre a la cual se midi el FR (titulacin).7/ Las muestras de lquidos corporales se deben obtener siguiendo los mismos procedimientos que para cualquier otro anlisis de laboratorio. Son preferibles las muestras de suero o plasma recin obtenidas. No se recomienda el uso de muestras de sangre entera u orina. El volumen ptimo, para una copa de 0.5 ml, es de 0.3 ml de muestra.8/ AntgenoAnticuerpo PCR:

Ltex-anti-PCRltex suero: PCR

ASTO:-estreptolicina O suero: anti-esterptolicina O

Pos- laboratorio1. Caso clnico.Paciente de 25 aos de edad de sexo masculino llega al hospital San Jernimo de Montera refiriendo dolor de garganta, fiebre, malestar general, dolores musculares, molestias al tragar y presencia de ganglios del cuello inflamados. El mdico tratante solicita una prueba de ASTO, al realizar la prueba el resultado fue: Aglutinacin hasta la dilucin 1/ 16.a. Cul es la concentracin aproximada de ASTO en la muestra?3200 Ul/ml

b. Cmo interpretara usted este resultado, Explique?La presencia de ttulos altos de antiestreptolisinas O, indican una infeccin por la bacteria Estreptococo beta-hemolticos del tipo A. Los ttulos muy altos estn asociados al estado de portador crnico farngeo. Tambin en el 80-85% de los pacientes con fiebre reumtica aguda (dentro de los dos primeros meses) y en el 95% de glomerulonefritis aguda

c. De acuerdo a la inmunologa de la infeccin que resultado esperara usted encontrar en un cuadro hemtico de este paciente?

Hemoglobina:Hematocritos: Eritrocitos: Leucocitos:

GUIA 6Prelaboratorio1. QUE SON AC NO TREPONEMICOS Y TREPONEMICOS?

en las pruebas serolgicas pueden distinguirse dos tipos de pruebas:pruebas no treponmicas(que detectan el efecto que produce el treponema pallidum en el organismo, comoVDRLoRPR)opruebas treponmicas(que detectan los anticuerpos que genera el organismo contra el treponema, como son las pruebasFTA-ABS,EIA,TPHAyMH-TPA).Laspruebas no treponmicasse utilizan sobre todo paradeterminar el estadio de evolucinde la enfermedad o para ver si un tratamiento ha dado resultado. Estas pruebas se realizan haciendo distintas diluciones del suero del paciente y observando la cantidad ms alta en la que sale positivo. Por eso los resultados son del tipo 1:2, 1:4 con los que muchos de vosotros os encontris en vuestros diagnsticos.Laspruebas treponmicasdetectan anticuerpos contra el treponema, pero su interpretacin puede ser subjetiva y muchas veces depende de la experiencia del observador, y no permiten conocer si la enfermedad est en activo, puesto que estas pruebas suelendar siempre positivo(de por vida) cuando una persona ha tenido la sfilis aunque ya se haya curado (por ejemplo, en las pruebas FTA-ABS la deteccin IgG siempre ser positiva en un paciente que haya padecido sfilis, y la IgM es positiva en una infeccin reciente pero luego se vuelve negativa).

2 que es la floculacin? DescribalaSegn la definicin de la IUPAC, floculacin es "un proceso de contacto y adhesin mediante el cual las partculas de una forma de dispersin grupos de mayor tamao." La floculacin es sinnimo de aglomeracin, agregacin, y coagulacin/coalescencia.Los floculos se agregan y sedimentan en rango estrecho de Ag/Ac

3.por que se dice que las pruebas de VDRL y RPR son pruebas presuntivas?

4.A QUE SE DEBE EL FENOMENO DE PROZONA Y PROSTZONA?fenmeno de Prozona, que consiste en serologa VDRL no reactiva, falsamente negativa, que debemostener en cuenta en estos pacientes para hacer estudios adicionales que nos encaminen a diagnstico y tratamiento acertado.Prozona se da en la zona donde existe exceso de Ac frente al Ag, donde no se produce precipitacin, originando falsos (-) por altas [ ] de Ac. Esta dificultad se elimina con diluciones seriadas estndar del suero.Postzona, se da en la zona de exceso de Ag, donde tampoco se da la precipitacin, dando tb falsos (-).5.QUE AFECCIONES PUEDEN PROVOCAR REACTIVIDAD DEL VDRL Y RPR?

6.EN EL CASO DE VDRLY RPR QUE TITULOS DE Ac TIENEN SIGNIFICADO CLINICO?VDRL

En la prueba de VDRL, el suero del paciente es inactivado a 56 C por 30 minutos, si se usa liquido cefalorraqudeo (LCR) slo se debe centrifugar Luego la muestra se mezcla con un antgeno, que es una solucin buffer salina de cardiolipina y lecitina adosadas a partculas de colesterol. Esta prueba se puede realizar en lmina y ser observada al microscopio como un precipitado de partculas finas (floculacin), o se puede realizar en un tubo de ensayo y ser leda macroscpicamente.RPR

El RPR es una prueba diseada para detectar reagina en el suero de manera rpida, no requiere inactivacin por calor La muestra se mezcla con una suspensin que posee cardiolipina, lecitina y colesterol en partculas de carbn. Si la muestra es positiva se observa pequeos grumos negros (floculacin). El resultado se reporta como reactivo o no reactivo; todos aquellos reactivos deben ser diluidos seriadamente para realizar la titulacin, y se reporta la dilucin ms alta que exhibe reaccin.TRUST Y USR

Estas pruebas son menos usadas que el VDRL y la RPR. El TRUST (Toulidine red unheated serum test) es una prueba desarrollada para el despistaje de la sfilis, el principio es similar al del VDRL, pero no es necesario inactivar el suero y el rojo de toluidina se encarga de dar color a la reaccin. La sensibilidad y especificidad son similares a la prueba de RPR.

La USR (Unheated serum reagin) tiene la ventaja que es poco costosa, tampoco requiere de inactivacin de suero por calor y, al igual que otras pruebas no treponmicas, tiene buena sens FTA-ABS

La FTA-ABS es un mtodo de observacin directo, que se utiliza como confirmacin cuando una de las pruebas no-treponmicas es positiva. Es el mtodo de eleccin para el diagnstico de la sfilis primaria a partir de las dos semanas despus del contagio.ibilidad y especificidad14-15.Hemaglutinacin

Este mtodo utiliza glbulos rojos de pollo o carnero como fase slida los cuales estn sensibilizados con Treponema pallidum, que se encuentran adheridos a la membrana del hemate.ELISA (Enzyme-Linked lmmunoabsorbent Assay)

Durante la infeccin por Treponema pallidum se producen anticuerpos inespecficos, contra antgenos comunes a todas las espiroquetas y anticuerpos especficos contra Treponema pallidum. En la enfermedad temprana los anticuerpos son IgM, luego rpidamente aparecen anticuerpos IgG que son los predominantes durante el tiempo.Western blot

El Western Blot, tambin denominado inmunoblot, es una tcnica que detecta anticuerpos para eptopes especficos en antgenos, previamente separados por electroforesis de alta resolucin. La electroforesis separa los componentes antignicos por sus diferentes pesos moleculares.Reaccin en Cadena a la Polimerasa (PCR)

La tcnica de reaccin en cadena a la polimerasa (PCR), amplifica o replica varias veces secuencias especficas de ADN de una muestra, Se utiliza dos porciones cortas de ADN denominados cebadores o iniciadores o "primers", estos son oligonucletidos sintticos de ADN o ARN cuya secuencia es conocida, que luego de fusionarse (hibridizarse) a un ADN complementario, actan como una plantilla para sintetizar nuevo ADN, esto es un proceso enzimtico repetido en varios ciclos trmicos.