PREINFORME DE PRAacuteCTICAS DE LABORATORIOBIOQUIMICA METABOLICA

PresentadoYesid Gerardo Corredor Amaya

PRESENTADO AJAIRO GRANADOS MORENOMARIA GABRIELA ROMERO

TUTOR

TEMA Ndeg1 ACTIVIDAD UREAacuteSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLOacuteGICO

INTRODUCCIOacuteN

La ureasa se encuentra presente en varios tejidos pertenecientes a los vegetales por lo tanto es faacutecil su determinacioacuten de urea existente en diferentes materias primas vegetales por el meacutetodo la ureasa es raacutepida y sencilla razones por las que su uso se ha generalizado Los resultados se expresan en unidades de pH pudiendo variar desde 00 hasta un maacuteximo de 20 a 25 unidades grano crudo

de Kjeldhal o por titulacioacuten del amonio liberado titulando hidroacutexido de aluminio que es producido por la hidrolisis utilizando el meacutetodo estequiometrico ya que se producen producen 2 moles de NH4OH por cada mol de urea desdoblada

1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2 MATERIALES Y METODOS 21Materiales y equipos requeridos

Materiales EquiposTubos de ensayo con gradilla

Balanza analiacutetica

Erlenmeyer de125mL

Agitadores magneacuteticos

Pipetas de 5 y 10mL Cronometromatraz aforado de 100mL Caacutemara fotograacuteficaBantildeo termostatadoBeaker de400mLBureta de 25mLSoporte universalPinzas para buretaProbeta

22 Reactivo requeridos

Reactivo Foacutermula Conc

Ureasa 01

Urea CO(NH2)2 025M

Cloruro de mercurio HgCl2 1

Aacutecido clorhiacutedrico HCl 01N

Buffer fosfato pH 70

Indicador de Tashiro

2 3 Procedimiento

231 En campo en la toma de muestra se quiere saber cuaacutel es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos la sangre orina o tejidos vegetales se realizar toma de muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos

232 En el laboratorio

Peso muestras Wm Extraccioacuten con NaCl 1 Centrifugacioacuten Filtracioacuten medida sobrenadante Vs Titulacioacuten con HCl Registro de mL gastados VHCl Tabla de datos

3 DIAGRAMA DE FLUJO

Indicadores

Muestras analzadasForraje Concen

tradoSuelo Origen

Wm (g)

Vf (mL)

V HCl (mL)

Agregar 10 g de muestra

En tubo centrifuga

Agregar 1o ml de Na Cl al 1

Agitar Centrifugar a 3500 rpn

Medir descartar

Filtrar mediren probeta

Pasar a tubo de ensayo Rotular

Obtener extracto

4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo

5 GLOSARIO

TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido

Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra

ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco

Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria

REFERENCIAS

httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico

httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n

Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

wwwjuntadeandaluciaesaverroes06apuntes_formulacionpdf

wwwhorturbacomcastellanocultivarficha_manejophpID=19

TEMA Ndeg1 ACTIVIDAD UREAacuteSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLOacuteGICO

INTRODUCCIOacuteN

La ureasa se encuentra presente en varios tejidos pertenecientes a los vegetales por lo tanto es faacutecil su determinacioacuten de urea existente en diferentes materias primas vegetales por el meacutetodo la ureasa es raacutepida y sencilla razones por las que su uso se ha generalizado Los resultados se expresan en unidades de pH pudiendo variar desde 00 hasta un maacuteximo de 20 a 25 unidades grano crudo

de Kjeldhal o por titulacioacuten del amonio liberado titulando hidroacutexido de aluminio que es producido por la hidrolisis utilizando el meacutetodo estequiometrico ya que se producen producen 2 moles de NH4OH por cada mol de urea desdoblada

1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2 MATERIALES Y METODOS 21Materiales y equipos requeridos

Materiales EquiposTubos de ensayo con gradilla

Balanza analiacutetica

Erlenmeyer de125mL

Agitadores magneacuteticos

Pipetas de 5 y 10mL Cronometromatraz aforado de 100mL Caacutemara fotograacuteficaBantildeo termostatadoBeaker de400mLBureta de 25mLSoporte universalPinzas para buretaProbeta

22 Reactivo requeridos

Reactivo Foacutermula Conc

Ureasa 01

Urea CO(NH2)2 025M

Cloruro de mercurio HgCl2 1

Aacutecido clorhiacutedrico HCl 01N

Buffer fosfato pH 70

Indicador de Tashiro

2 3 Procedimiento

231 En campo en la toma de muestra se quiere saber cuaacutel es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos la sangre orina o tejidos vegetales se realizar toma de muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos

232 En el laboratorio

Peso muestras Wm Extraccioacuten con NaCl 1 Centrifugacioacuten Filtracioacuten medida sobrenadante Vs Titulacioacuten con HCl Registro de mL gastados VHCl Tabla de datos

3 DIAGRAMA DE FLUJO

Indicadores

Muestras analzadasForraje Concen

tradoSuelo Origen

Wm (g)

Vf (mL)

V HCl (mL)

Agregar 10 g de muestra

En tubo centrifuga

Agregar 1o ml de Na Cl al 1

Agitar Centrifugar a 3500 rpn

Medir descartar

Filtrar mediren probeta

Pasar a tubo de ensayo Rotular

Obtener extracto

4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo

5 GLOSARIO

TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido

Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra

ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco

Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria

REFERENCIAS

httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico

httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n

Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

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22 Reactivo requeridos

Reactivo Foacutermula Conc

Ureasa 01

Urea CO(NH2)2 025M

Cloruro de mercurio HgCl2 1

Aacutecido clorhiacutedrico HCl 01N

Buffer fosfato pH 70

Indicador de Tashiro

2 3 Procedimiento

231 En campo en la toma de muestra se quiere saber cuaacutel es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos la sangre orina o tejidos vegetales se realizar toma de muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos

232 En el laboratorio

Peso muestras Wm Extraccioacuten con NaCl 1 Centrifugacioacuten Filtracioacuten medida sobrenadante Vs Titulacioacuten con HCl Registro de mL gastados VHCl Tabla de datos

3 DIAGRAMA DE FLUJO

Indicadores

Muestras analzadasForraje Concen

tradoSuelo Origen

Wm (g)

Vf (mL)

V HCl (mL)

Agregar 10 g de muestra

En tubo centrifuga

Agregar 1o ml de Na Cl al 1

Agitar Centrifugar a 3500 rpn

Medir descartar

Filtrar mediren probeta

Pasar a tubo de ensayo Rotular

Obtener extracto

4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo

5 GLOSARIO

TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido

Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra

ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco

Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria

REFERENCIAS

httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico

httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n

Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

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4 RESULTADOS ESPERADOSAl aparecer un color rosado-violaacuteceo en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentes-gramo del hidroacutexido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del aacutecido clorhiacutedricoRealizar el procedimiento con los demaacutes tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo

5 GLOSARIO

TITULACIOacuteN es un meacutetodo de anaacutelisis quiacutemico cuantitativo en el laboratorio que se utiliza para determinar la concentracioacuten desconocida de un reactivo conocido

Sustrato El teacutermino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que en cierto modo es el sustituto de la tierra

ureasa es una enzima que cataliza la hidroacutelisis de urea a dioacutexido de carbono y amoniacuteaco

Centrifugacioacuten Es un meacutetodo por el cual se pueden separar soacutelidos de liacutequidos de diferente densidad por medio de una fuerza giratoria

REFERENCIAS

httpseswikipediaorgwikiAnC3A1lisis_volumC3A9trico

httpseswikipediaorgwikiCentrifugaciC3B3n

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TEMA Ndeg2 CARBONO ORGAacuteNICO MATERIA ORGAacuteNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA (szlig) DE SUELOS

INTRODUCCIOacuteN

las reacciones enzimaacuteticas las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases con las cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben tener un pH adecuado de tal manera que se podraacute obtener un oacuteptimo rendimiento y desarrollo de los organismos en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta con un pH optimo seraacute muy difiacutecil lograr que las plantas asimilen los nutrientes causando que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta

Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora o potencial quiacutemico que tienen los sistemas edaacuteficos para regular y controlar su pH cuando son sometidos a procesos de acidificacioacuten o alcalinizacioacuten

MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

1 MATERIALES Y METODOS

21 Materiales y equipos

MaterialEquipo CaracteriacutesticasPotencioacutemetroPipetas graduadas 10 mLEquipo de titulacioacuten Pyrex medianosBureta graduada 25mLErlenmeyer De 125mLBeaker 250 mlSoporte universal Metaacutelico con pinza para

buretaMuestras Concentrado orina sangre y

forrajeEspaacutetula metaacutelicaAgitador De vidrioProbeta graduada 100mlBalanza digital

22 Reactivos requeridos

Dicromato de potasio

H2SO4

concentradoK2Cr2O7 1N

Difenilamina

SUELO

MATERIA ORGANICA

HUMOS HUMINAS ACIDO

ORANICO

MICROORGANISMOS

REACCIONES BIOQUIMICA

S ENZIMATICAS

RESULTADO DE PROCESOS

BIOQUIIMICOS

HUMNEDAD

BALANCE ELECRROLITICO

Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio

NaOH 01N

Aacutecido Clorhidrico

HCl 01N

Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2

Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato

HPO4H3PO4

23 Procedimiento

231 En el campo Realizar toma de muestra

232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico

2 DIAGRAMA DE FLUJO

3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico

Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2

ConcentradoHarinaForraje

Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos

MuestrasSuelo 1

Peso (Wm)

Vol (mL)

pH1 pH2

Suelo 2Agua destilada

Solucioacuten Buffer

ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE

SUELO Y 40 ML DE AGUA

DESTILADA

AGITAR EN AGITADOR

MAGNEacuteTICO POR 5MIN

ESPERAR 60 SEGUNDOS Y

OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO

AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO

POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2

TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR

20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH

70

ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR

EL PH

AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR

MEDIR PH

REGISTRAR TODOS LOS

VALORES

Variable(indicador) evaluada(o)

Teacutecnica analiacutetica utilizada

pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten

volumeacutetrica

TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas

Muestras β (mEq HCl

ΔpH)

β(mEqNaOHΔpH)

P (β) HCl

P (β) NaOH

ConcentradoHarinaForraje

3 RESULTADOS ESPERADOS

Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total

4 GLOSARIO

ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra

CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado

MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten

5 REFERNCIAS

httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro

httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html

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Sulfato de hierro FeSO4 1NHidroacutexido de sodio

NaOH 01N

Aacutecido Clorhidrico

HCl 01N

Fenolftaleiacutena C20H14O4 oacuteC6H4COOC(C6H4--HOH)2

Agua destiladaSolucioacuten buffer fosfato

HPO4H3PO4

23 Procedimiento

231 En el campo Realizar toma de muestra

232 En el laboratorio Para Carbono Orgaacutenico (CO) aplicar el Meacutetodo de titulacioacuten volumeacutetrica Para Carbono Orgaacutenico (CO) Meacutetodo Espectrofotomeacutetrico para La Capacidad amortiguadora el Meacutetodo Potenciomeacutetrico

2 DIAGRAMA DE FLUJO

3 TABLA DE DATOSCarbono orgaacutenico meacutetodos volumeacutetricos y para capacidad amortiguadora de muestras bioloacutegicas espectrofotomeacutetrico

Muestras Valores EvaluadosWm (g) Vm (ml) pH 1 pH 2

ConcentradoHarinaForraje

Datos potenciomeacutetricos para capacidad amortiguadora de Suelos

MuestrasSuelo 1

Peso (Wm)

Vol (mL)

pH1 pH2

Suelo 2Agua destilada

Solucioacuten Buffer

ADICIONAR +- 20 GRAMOS DE

SUELO Y 40 ML DE AGUA

DESTILADA

AGITAR EN AGITADOR

MAGNEacuteTICO POR 5MIN

ESPERAR 60 SEGUNDOS Y

OBSERVAR EL PH CON EL ELECTRODO DEL POTECIOMETRO

AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR DE NUEVO

POR UN MINUTO Y MEDIR EL PH2

TERCER Y CUARTO BEAKERS ADICIONAR

20ML DE AGUA DESTILADA Y 20 ML DE SOLUCIOacuteN BUFFER PH

70

ESPERAR 60 SEGUNDOS TOMAR

EL PH

AGREGAR 5 ML DE NAOH 01N AGITAR

MEDIR PH

REGISTRAR TODOS LOS

VALORES

Variable(indicador) evaluada(o)

Teacutecnica analiacutetica utilizada

pH Meacutetodo potenciomeacutetricoCapacidad Amortiguadora Meacutetodo titulacioacuten

volumeacutetrica

TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas

Muestras β (mEq HCl

ΔpH)

β(mEqNaOHΔpH)

P (β) HCl

P (β) NaOH

ConcentradoHarinaForraje

3 RESULTADOS ESPERADOS

Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total

4 GLOSARIO

ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra

CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado

MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten

5 REFERNCIAS

httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro

httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html

Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

TABLA 3 Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas

Muestras β (mEq HCl

ΔpH)

β(mEqNaOHΔpH)

P (β) HCl

P (β) NaOH

ConcentradoHarinaForraje

3 RESULTADOS ESPERADOS

Al Colocar el Erlenmeyer oacute beaker que contiene la solucioacuten diluida de suelo debajo de la bureta y Titular lentamente adicionando el sulfato sobre la solucioacuten hasta debe aparecer y permanecer un color verde esmeralda brillanteCarbono orgaacutenicoMateria OrgaacutenicaNitroacutegeno total

4 GLOSARIO

ESPECTROFOTOacuteMETRO es un instrumento usado en el anaacutelisis quiacutemico que sirve para medir en funcioacuten de la longitud de onda la relacioacuten entre valores de una misma magnitud fotomeacutetrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracioacuten o reacciones quiacutemicas que se miden en una muestra

CAPACIDAD AMORTIGUADORA La capacidad amortiguadora de un tampoacuten es la cantidad de aacutecido o de base que se puede agregar antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable y estaacute determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par aacutecidobase conjugado

MEacuteTODO POTENCIOMEacuteTRICO Sirve para medir el Ph de una solucioacuten

5 REFERNCIAS

httpseswikipediaorgwikiEspectrofotC3B3metro

httpdocenciaudeaeducocenQuimicaAnaliticaIIpot1html

Jairo Enrique Granados Moreno MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

TEMA Ndeg3 DETERMINACIOacuteN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE) EN FORRAJES POR EL MEacuteTODO DE NELSON-SOMOGYI

INTRODUCCIOacuteN

por el meacutetodo de fenol-aacutecido sulfuacuterico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos liacutequidos extractos liacutequidos materiales de celulosa entre otros esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio ya que los azucares simples oligosacaacuteridos polisacaacuteridos y sus derivados dan una coloracioacuten al entrar en contacto con fenol aacutecido sulfuacuterico

Las plantas vegetales estaacuten compuestos por carbohidratos estructurales y no estructurales los no estructurales se almacenan en oacuterganos vegetativos como raiacuteces rizomas estolones coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos de especies forrajeras son monosacaacuteridos como glucosa y fructosa disacaacuteridos como sucrosa y maltosa y polisacaacuteridos como almidones y fructosanos

1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2 MATERIALES Y METODOS

Materiales y equipos

Materiales EquiposVidrieriacutea Tubos de ensayo

Gradillapinzas para bureta

Filtradopara carbohidratos no estructurales

erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal

Reactivos requeridos

Reactivo Foacutermula Concentracioacuten

Fenol C6H5OH 5

Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N

Hidroacutexido de sodio NaOH O6N

Agua destilada H2O 20 mL

Glucosa C6H12O6 1

Procedimiento

En el campo Realizar toma de muestras

En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos

Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min

Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro

Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales

Lectura espectrofometrica

Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)

Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos

3 DIAGRAMA DE FLUJO

Filtradopara carbohidratos no estructurales

erlenmeyer de 125mLpipetas de 5 y 10mLmatraz aforado de 100mLbantildeo termostatadoBeaker de 400mLbureta de 25mLsoporte universal

Reactivos requeridos

Reactivo Foacutermula Concentracioacuten

Fenol C6H5OH 5

Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 1N

Hidroacutexido de sodio NaOH O6N

Agua destilada H2O 20 mL

Glucosa C6H12O6 1

Procedimiento

En el campo Realizar toma de muestras

En el laboratorio Pesar +- 20g de muestra en balanza analiacutetica y registrar como (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucioacuten de HCl 06N Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos

Llevar el beaker con la solucioacuten al bantildeo termostatado y calentar a 90degCdurante 20 min

Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro

Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo adicionar a eacuteste 5mL de NaOH 06N agitar por 15 segundos tapar y rotular asiacute FFCNE Filtrado de forraje para carbohidratos no estructurales

Lectura espectrofometrica

Alistar el espectrofotoacutemetro a una calibrar el aparato con el tubo blanco ajustando a 100 de Transmitancia (T) y 0000 de Absorbancia (A)

Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m registrar en su tabla de datos

3 DIAGRAMA DE FLUJO

4 TABLA DE DATOSDatos para la cuantificacioacuten de CNE

Indicadores Descripcioacuten Valor

wm Peso de la muestra

V FVolumen del filtrado

A st Absorbancia del estaacutendar

Am Absorbancia del tubo que conteniacutea el FFCNE

5 RESULTADOS ESPERADOS

La determinacioacuten cantidad de carbohidratos totales No estructurales basaacutendose en su contenido de almidones hidrolizables y azuacutecares solubles

6 GLOSARIO

ALMIDONES HIDROLIZABLES Son los que producen azuacutecares (principalmente glucosa) para el metabolismo Este grupo incluye azuacutecares simples sacarosa y algunos almidones que son faacutecilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones en la glucosa en sangre despueacutes de ingerirlos

ESPECTROFOTOMEacuteTRICA Es la medicioacuten de la cantidad de energiacutea radiante que absorbe o transmite un sistema quiacutemico en funcioacuten de la longitud de onda es el meacutetodo de anaacutelisis oacuteptico maacutes usado en las investigaciones quiacutemicas y bioquiacutemicas

El espectrofotoacutemetro es un instrumento que permite comparar la radiacioacuten absorbida o transmitida por una solucioacuten que contiene una cantidad desconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia

PESAR +- 20G DE MUESTRA Y REGISTRAR

AGREGAR 50 ML DE SOLUCIOacuteN DE HCL

06N

AGITAR DURANTE 3 MINUTOS

LLEVAR EL BEAKER CON LA SOLUCIOacuteN

AL BANtildeO TERMOSTATADO

CALENTAR A 90degCDURANTE 20

MIN

DEJAR ENFRIAR POR 5 MIN Y FILTRAR

SOBRE PAPEL FILTRO

MEDIR EL VOLUMEN DEL FILTRADO(VF) Y

PASAR 5ML A UN TUBO DE ENSAYO

ADICIONAR A EacuteSTE 5ML DE NAOH 06N

AGITAR POR 15 SEGUNDOS

TAPAR Y ROTULAR

httpwwwhorse1esesinicio39-publicacionescientificos117-los-carbohidratos

httpseswikipediaorgwikiEspectrofotometrC3ADa

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TEMA IV ACTIVIDAD CATALIacuteTICA DE LA CATALASA

INTRODUCCIOacuteN

La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcioacuten es convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxiacutegeno

El uso de esta enzima permite alargar la vida uacutetil de zumos de ciacutetricos cerveza y vino ya que al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua y oxiacutegeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios

1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2 MATERIALES Y METODOS21 Materiales y equipos

Soporte Universal Pipeta graduada

MEacuteTODO PERMANGANOMEacute

TRICOCATALASA

SE OBTIENE A PARTIR DE

MICROORGANISMOS

ENZIMA QUE PERMITE

PERDURAN LA VIDA DE

ALGUNOS ALIMENTOS

INHIBE LAS REACCIONES OXIDATIVAS

GENERA POR LA OXIDACIOacuteN DE

AacuteCIDOS GRASOS(AG) EN

LOS PEROXISOMAS

Bureta Probeta graduadaPinzas beaker de 400mLElenmeyer Tubo de ensayoMontaje de Titulacioacuten

Gradilla

22 Reactivos requeridos

Reactivo Foacutermula Concentracioacuten

Peroacutexido de Hidrogeno

H2O2

Aacutecido sulfuacuterico H2SO4 2N

Perganmanatode potasio

KMnO4 001M

Extracto de catalasa

(ECAT) 2 gr

23 Procedimiento

231 En el campo Recoger las muestras

232 En el laboratorio Pesar maacutes o menos 2g de muestra picada oacute pulverizada registrar el valor como Wm y colocarla en un tubo de centrifuga luego adicionar 10mL de solucioacuten friacutea de buffer fosfato 005M pH=68-70 agitar con agitador de vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm durante 5min Sacar el sobrenadante filtrar y medir su volumen registrarlo como Vf y tomar 5 mL de eacuteste para depositarlo en un tubo de ensayo taparlo rotularlo como EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) oacute EFCAT(extracto de fruta para catalasa) oacute ECCAT (extracto de concentrado para catalasa) oacute ESCAT colocarlos inmediatamente en bantildeo de hielo

3 DIAGRAMA DE FLUJO

4 TABLA DE DATOS

Muestras tubos

Indicadores

PESAR MAacuteS O MENOS 2G DE MUESTRA

PICADA Oacute PULVERIZADA

REGISTRAR EL VALOR COMO WM

COLOCARLA EN UN TUBO DE CENTRIFUGA

ADICIONAR 10ML DE SOLUCIOacuteN FRIacuteA DE BUFFER FOSFATO

005M PH=68-70 AGITAR

CENTRIFUGAR A 2500RPM DURANTE

5MIN

FILTRAR Y MEDIR SU VOLUMEN

REGISTRARLO COMO VF

TOMAR 5 ML DEPOSITARLO EN UN TUBO DE ENSAYO

TAPARLO ROTULARLO

COLOCARLOS EN BANtildeO DE HIELO

Wm (g) Vf (mL) VKMnO4

(mL)

SueloHarinaForrajeVerduraBlanco

Tipo de muestras analizadas

Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea

4 RESULTADOS ESPERADOS

Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal

5 GLOSARIO

CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O

REACCIONES OXIDATIVAS

Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten

6 REFERENCIAS

httpseswikipediaorgwikiCatalasa

Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf

Es propiedad

wwwprofesorenlineaCl

- Registro Ndeg 188540

Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

Wm (g) Vf (mL) VKMnO4

(mL)

SueloHarinaForrajeVerduraBlanco

Tipo de muestras analizadas

Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea

4 RESULTADOS ESPERADOS

Se determinoacute la actividad de la catalasa por meacutetodo permanganomeacutetrico y se cuantifico la actividad enzimaacutetica de la catalasa en muestras de origen vegetal

5 GLOSARIO

CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categoriacutea de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicioacuten delperoacutexido de hidroacutegeno (H202) en oxiacutegeno y H 2O

REACCIONES OXIDATIVAS

Es una reaccioacuten quiacutemica en la que uno o maacutes electrones se transfieren entre los reactivos provocando un cambio en sus estados de oxidacioacuten

6 REFERENCIAS

httpseswikipediaorgwikiCatalasa

Fuente Internet httpwww2bachilleratoesbiologiatema13tema13pdf

Es propiedad

wwwprofesorenlineaCl

- Registro Ndeg 188540

Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

TEMA V CUANTIFICACIOacuteN DE NITROacuteGENO NO PROTEIacuteCO EN SUELOS Y PASTOS MEacuteTODO ATA DE VAN SOEST

INTRODUCCIOacuteN

Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico que pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot 1979 el contenido total de este nitroacutegeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel digestivo ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible (Pichard y Van Soest 1977 Van Soest 1982) lo que puede reducir el aprovechamiento del nitroacutegeno ingerido En este laboratorio se pretende cuantificar por el meacutetodo de Van Soest el nitroacutegeno no proteico contenido en una muestra de forraje

1 MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2 MATERIALES Y METODOS

21 Materiales y equipos

Balanza Analiacutetica neveraVaso de precipitado

espectrofotoacutemetro

tubo de ensayo

22 2 Reactivos requeridos

Reactivo Foacutermula Concentracioacuten

Aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA

( Cl3-C-COOH )

Al 10

Agua destilada

23 procedimiento

En el campo Toma de muestras

En el laboratorio Extraccioacuten con aacutecido Tricloroaceacutetico (ATA) Pesar +- 20 g de muestra (Suelo forraje) (picada oacute pulverizada) en balanza

analiacutetica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado Adicionar 20 mL de agua destilada friacutea agitar por 1min Dejar reposar la mezcla por 15 min

(FRACCIOacuteN A DE VAN SOEST

)

CUANTIFICACIOacuteN DE NITROGENO NO

PROTEICO

REACTIVOS

ACIDO TRICLOROACEacuteTICO

(ATA) AL 10 ( CL3-C-COOH )

AGUA DESTILADA

FORRAJES Y SUELO

PUEDE SER ASIMILADO O NO

ASIMILADO POR EL ANIMAL

Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta

Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP

filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico

Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva

3 DIAGRAMA DE FLUJO

4 TABLA DE DATOS

Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)

Muestras tubos

Indicadores

Wm (g) Vf (mL)

Absorbancia (A)

Suelo

Forraje

Standar

Tipo de muestras analizadas

Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea

5 RESULTADOS ESPERADOS

Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados

GLOSARIO

ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten

NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o

PESAR +- 20 G DE MUESTRA

(SUELO FORRAJE)

REGISTRAR Y COLOCAR EN

VASO PRECIPITADO

ADICIONAR 20 ml DE AGUA

DESTILADA FRIA

DEJAR REPOSAR POR 15

MINUTOS

ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN

DE ATA Y AGITAR POR UN

MINUTO

REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR

MEDIR VOLUMEN FILTRADO

ROTULAR Y GUARDAR

REFRIGERADO

APLICAR SOLUCION INDICADA

OBTENER ABSORVANCIA

el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos

BIBLIOGRAFIA

httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm

Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

Adicionar 30 mL de sol Reposar a Temperatura ambiente por 20 min Filtrar sobre papel filtro en probeta

Medir el volumen del filtrado(Vf) Recolectar 5 mL del filtrado colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo FFNNP

filtrado de forraje para nitroacutegeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para nitroacutegeno no proteico

Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracioacuten hasta ser utilizados en la mezcla reactiva

3 DIAGRAMA DE FLUJO

4 TABLA DE DATOS

Datos para Nitroacutegeno no proteico (NNP)

Muestras tubos

Indicadores

Wm (g) Vf (mL)

Absorbancia (A)

Suelo

Forraje

Standar

Tipo de muestras analizadas

Origen ubicacioacuten geograacutefica regioacuten agroclimatologiacutea

5 RESULTADOS ESPERADOS

Cuantificar el nitroacutegeno no proteico (NNP)Determinacioacuten del contenido de NNP y Proteiacutena verdadera (PV) en forrajes y concentrados

GLOSARIO

ANAacuteLISIS KJELDAHL Las determinaciones de nitroacutegeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias El meacutetodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales digestioacuten destilacioacuten y valoracioacuten

NITROacuteGENO NO PROTEICO Se denomina Nitroacutegeno no proteico a los compuestos de nitroacutegeno que pueden ser convertidos en proteiacutenas por algunos organismos vivos Muchos organismos superiores no pueden obtener aminoaacutecidos de otras formas maacutes que absorbieacutendolos de la dieta Los cuales pueden ser convertir algunos aminoaacutecidos en otros diferentes Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amoniacuteaco nitritos y nitratos y otros como la urea el biuret o

PESAR +- 20 G DE MUESTRA

(SUELO FORRAJE)

REGISTRAR Y COLOCAR EN

VASO PRECIPITADO

ADICIONAR 20 ml DE AGUA

DESTILADA FRIA

DEJAR REPOSAR POR 15

MINUTOS

ADICIONAR 30 ml DE SOLUCIOacuteN

DE ATA Y AGITAR POR UN

MINUTO

REPOSAR OR 20 MINUTOS FILTRAR

MEDIR VOLUMEN FILTRADO

ROTULAR Y GUARDAR

REFRIGERADO

APLICAR SOLUCION INDICADA

OBTENER ABSORVANCIA

el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos

BIBLIOGRAFIA

httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm

Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf

el aacutecido uacuterico Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos las plantas y algas bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos

BIBLIOGRAFIA

httpsianiniagobverepositoriorevistas_tecceniaphoyarticulosn8artiobispo_nobispo_nhtm

Granados Moreno Jairo Enrique MSc Protocolo de praacutectica Bioquiacutemica Metaboacutelica Universidad Nacional Abierta y a Distancia UNAD 2014 httpdatatecaunadeducocontenidos352001GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_2015-_Contextualizacion_practica_-BM-2Xpdf