Preparaciones para Examen con el Microscopio de Campo Luminoso, Campo Oscuro y Contraste

de Fases.

La obtención de preparaciones adecuadas para el examen microscópico puede conseguirse mediante dos técnicas generales, en las que los microorganismos pueden ser examinados en estado viviente y sin teñir ó después de la aplicación de colorantes para que resalten con más claridad:

 a) Observación Vital: hace posible la observación de los

organismos vivos suspendidos en un líquido b)  La Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos

de la muestra.

 

Observacion Vital a)  Observación Vital: hace posible la observación de los

organismos vivos suspendidos en un líquido        Preparaciones Húmedas

       Preparaciones de Gota pendiente   

       Tinciones Vitales

-La morfología de las espiroquetas se altera mucho cuando se desecan y tiñen.

-Para determinar la movilidad de las baterias.

-Para determinar cambios citológicos durante la división celular.

-Ofrecen ventajas para la observación con microscopía de Campo Oscuro y Contraste de Fases.

Anillo de Vaselina

Zona excavada

Asa de Inoculación

Gota de Cultivo bacteriano

Cubreobjetos

Cubreobjetos Gota de Cultivo

Vaselina

Preparación de Gota pendiente

Preparación del Frotis: Películas

a)  Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la muestra.Los pasos a seguir son:

 

       Confección del frotis ó película            Secado

     Fijación 

        Coloración

  

 

- Producto líquido

- Cultivo en medio sólido

- Sangre

-Por calor

-Con alcohol metílico, formol u otros fijadores

Forma de Realizar una Extensión de Sangre

Coloración

       Coloración: es el proceso de teñir artificialmente los microorganismos con colorantes ó reactivos para facilitar su estudio microscópico.

  Colorante

Grupo Cromóforo-   

     Grupo Auxócromo

     Mordiente-   

Soluciones acuosas ó diluídas en alcohol.

Tipos de ColorantesLos Colorantes pueden ser:

Colorantes Naturales.  Colorantes Artificiales.Según el tipo de grupo auxócromo, los colorantes artificiales se dividen en:

A)   Acidos . Grupo auxócromo: COOH, SO3H .

B )  Basicos . Grupo auxócromo: NH2 ó N(CH3 )2

C)   Neutros

D) Indiferentes

Métodos de Coloración

Los métodos de Coloración son:   a) Coloraciones Simples: fucsina fenicada diluída, azul de metileno, cristal

violeta y safranina.  b)  Coloraciones Selectivas ó Estructurales: para cápsulas, gránulos

metacromáticos, esporas, flagelos, etc. en bacterias.    c) Coloraciones diferenciales : Tinción de Gram, Tinción de Ziehl

Neelsen   d) Coloraciones Panópticas : Tinción de Giemsa, Tinción de Mae-

Grenwald-Giemsa Tinción de Wright.

FIJACIÓN

CRISTAL VIOLETA

TRATAMIENTO CON IODO

DECOLORACIÓN

CONTRACOLORACIÓN: SAFRANINA