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Préparation de milieux gélosés
Boîte de pétriLa gélose tapisse le fond de la boîte sur une épaisseur d'environ 5 mm.
TubeLa gélose est refroidie en plaçant le tube en position inclinée pour développer une surface maximale.
3. Réalisation d’un antibiogramme
Réalisation d'un antibiogramme– Ensemencement de bactéries sur un boîte de Pétri– 2 souches bactériennes sont ensemencées :
Escherichia Coli et Bacillus megatherium
Pour l'ensemencement, on fabrique des râteaux en verre
Principe de l’antibiogramme
• Utilisation de disques de papier imprégnés d’antibiotiques
• L’antibiotique diffuse dans la gélose
Antibiogramme
• Les résultats sont lus après 16 à 18 heures d’incubation
• Le diamètre des zones d’inhibition révèle la sensibilité des micro-organismes
•http://perso.wanadoo.fr/sordalab/anticollege.htm
4. Diversité des métabolismes
Exemple de résultats
* A Colonies dans tout le tube : bactéries aéro-anaérobies
* B Colonies en haut du tube : bactéries aérobies strictes
* C Colonies en haut du tube, légèrement sous la surface : bactéries micro-aérophiles (supportent des pressions réduites en dioxygène.
* D Colonies en bas du tube : bactéries anaérobies strictes
a) Etude du développement des bactéries dans des milieux oxygénés ou non :
Film bactérien uniquement en surface du tube>bactérie aérobie stricte
Pseudomonas aeruginosa
Développement dans tout le tube>bactérie aérobie – anaérobie facultative
La bactérie libère du gaz qui repousse la gélose
Escherichia coli
Développement dans tout le tube sans faire de tapis en surface>bactérie anaérobie aérotolérante
Enterococcus faecium
Pas d’acidification dans tube fermé Acidification en surface dans tube ouvert>dégradation du glucose par voie oxydative
Acidification dans les deux tubes>dégradation du glucose par voie fermentative avec production de gaz CO2 et H2