Processamento de RNA (Euc.):

Tipos:

- Modificação da extremidade (mRNA de eucariontes)

- Remoção e íntrons (splicing)

- Clivagem de pré-RNA

- Modificação química de bases

Processamento de mRNA:

Clivagem e poliadenilação:

Modificação de rRNA e tRNA

ocorre tanto em procariotos

quanto eucariotos. Porém, a

modificação de mRNA SÓ ocorre

em eucariotos

- mRNA sofre capping 5’, clivagem/poliadenilação 3’ e RNA splicing

- A CAP protege contra à degradação e é importante para o reconhecimento do

complexo de síntese de proteínas. Além disso, contribui para a modificação da

extremidade 3’ pela PAP

- Em eucariotos, a maioria dos mRNA tem uma cauda 3’ Poli A, que é clivada pela

PAP

- A PAP faz uma ligação fosfodiéster e é quem dá o sinal para a RNA Pol. parar a

transcrição. A PAP tembém add. cauda Poli A

Spliceossomo:

- É um complexo formado por snRNPs

- Forma uma ligação fosfodiéster com a extremidade 5’ do intron onde corta éxon-intron

- Os íntrons são “cortados” por reações de transesterificação e liberados na forma de laço

- Spliceossomo se desliga e intron é degradado por enzimas

Edição de RNA:

- Muito comum em protozoários e plantas. Em eucariotos superiores é raro.

- Uma sequência de nucleotídeos do pré-RNA é alterado no núcleo

- Em vertebrados, implica a desaminação de uma única base no mRNA, resultando em uma

mudança no amino ácido especificado pelo códon correspondente e a produção de uma

proteína funcional diferente

Processamento de rRNA:

- rRNAs 28S e 5.8S estão associados na subunidade

maior. 18S na menor (os 3 rRNA = maduros)

- A síntese e o processamento do pré-rRNA ocorre

no nucléolo

- O rRNA é um organizador nucleolar

- Após a síntese no nucléolo, o pr-e-rRNA é logo

ligado a proteínas, formando as pré-rRNPs

Self-splicing:

- O RNA pode funcionar sozinho, tem habilidade de se ligar nas posições

corretas sem a necessidade de enzimas adicionais

- RNA com atividade catalítica

- A sequência de self-splicing já foi encontrada em pré-rRNAs, pré-mRNAs

e tRNAs

- Mecanismos de splicing entre os introns dos grupos I e II são muito

parecidos com os do spliceossomos

Processamento de tRNA:

- Sofrem clivagem (5’, 3’ e interna), modificação de base e splicing (nem todos)

- pré-tRNA é produzido pela Pol III no nucleoplasma

- A sequência 5’ é ausente no tRNA maduro, mas não no pré-tRNA

- Esses nucleotídeos 5’ extra são removidos pela RNase P

- Há 3 classes de modificação de bases que pode ocorrer no pré-tRNA:

Substituição de resíduos U 3’ por CCA (que é encontrada em todas extremiades 3’

do tRNA)

Metilação

Conversão de uridinas em dihidrouridinas e pseudouridinas

- O mecanismo de splicing do tRNA difere dos self-splicing (I e

II) e spliceossomo: é catalisado por proteínas e não por RNAs ;

os introns são retirados em em uma única etapa que envolve

a clivagem simultânea em ambas as extremidades. Há

também a hidrólise do GTP e ATP, que é necessário para

aderir as duas metades geradas do tRNA

- Após pré-tRNAs serem processados no nucleoplasma, os

tRNAs maduros são transportados para o citoplasma através

de poros nucleares complexos

- Os tRNAs são geralmente associados a proteínas e ficam pouco tempo livre na célula, como é

também o caso de mRNAs e rRNAs.

- A clivagem das extremidades 3’ e 5’ em procariotos é feita por diferentes

subunidades do complexo de endonuclease (Fig. à esquerda), que possui 4

proteínas