Recolección y aislamiento de cepas nativas en laboratorio de hongos

comestibles P. ostreatus y P. pulmonarios en la provincia de

Cartago • Giovanni Brenes Barquero

Núcleo de Formación y Servicios Tecnológicos Agropecuarios

Obtención de cepas silvestres

• _ La demanda de hongos comestibles

en el país ha crecido

• _ Esto ha generado una necesidad de

capacitación

• _ Para esto se hace necesario la

obtención de material de reproducción

Obtención de cepas silvestres

_ Se puede obtener cepas de origen silvestre

en el país

• _ El INA cuenta con la infraestructura

necesaria para producir cepas propias

• _ En el país se hace difícil obtener

semilla

• _ Importada sin garantía de suministro

Objetivo General

• Recolectar y aislar cepas nativas de Pleurotus sp, de la provincia de Cartago en los meses de marzo a octubre, para utilizarlas como fuente de semilla en el Centro nacional Especializado en Agricultura Orgánica (CNEAO).

Objetivos Específicos

• 1_ Recolectar cepas nativas de Pleurotus sp en la provincia de Cartago

• 2_ Aislar en laboratorio, cepas nativas de Pleurotus sp para su utilización como fuente de semilla en el CNEAO

• 3_ Preservar las cepas aisladas para pruebas de producción, a futuro, en el CNEAO

Muestreo y Metodología

• El muestreo se realizó esperando las

condiciones ideales para la salida de los

carpoforos

• La muestras se llevaron al Laboratorio de

Fitoprotección del CNEAO, La Chinchilla,

Cartago

• Para el cultivo se utilizó PDA al 1%, siguiendo

procedimientos ya establecidos para esta tarea

Muestreo y Metodología • Básicamente el procedimiento se realiza en cámara de

transferencia en donde se cultiva una sección del cuerpo

• Esta sección se deposita en placas petri conteniendo PDA como medio de cultivo (6 x M y 10 x M final)

• Previo a este paso, dependiendo del tamaño de la muestra, se desinfecta con lavados con Cloro, Alcohol y agua estéril.

• Si la muestra es suficientemente grande se usa el contexto sin lavados.

Muestreo y Metodología

• Las placas cultivadas se dejaron en

incubación, lo suficiente como para

establecer contaminación o crec. Puros

• Los cultivos puros, fueron guardados

en tubos de ensayo y en refrigeración

para su posterior utilización

Resultados

Localidad Muestra

Cervantes C4, C5 y C6

Bajo Pacuare C8-1, C8-2

Chinchilla C3 y C7

Ochomogo C9

Cartago Centro C1

San Marcos C2

Resultados

• De las 10 cepas obtenidas solo 4

pudieron aislarse en forma pura

• El resto tuvo problemas de

contaminación que no permitió

rescatarlas. ( Contaminación

ambiental)

• Las muestras variaron en tamaño

Resultados

Muestra Contaminado

Contaminado

Cepa pura

Resultados

Traslado a tubos Tubos para incubación

Crecimiento de cepa pura

Conclusiones

• 1_ La recolección de muestras silvestres de Pleurotas sp, es posible al menos en la Provincia de Cartago.

• 2_ La muestras obtenidas revelan que se pueden obtener de diferentes zonas altitudinales de la Provincia, ya que las mismas fueron encontradas en Bajo Pacuare , zona baja de Turrialba y Ochomogo, zona alta del Cantón Central de Cartago

Conclusiones • 3_ La contaminación de los cultivos de

micelio se debieron a microorganimos comunes a los habitad de ambientes en descomposición natural , en el cual se encuentran bacterias, levaduras, hongos etc. y entre estos últimos el Pleurotus sp también un descomponedor de lignina y celulosa.

• 4_ Se recolectaron 9 muestras de las cuales 4 se lograron aislar y almacenar para futuras pruebas de producción en el CNEAO.

Recomendaciones • 1_ Coordinar la Identificación de las

especies de Pleurotus sp recolectadas a través de un taxónomo, para su posterior utilización como cepas madre en el CNEAO.

• 2_ Recolectar muestras con cuerpos de Hongos más grandes para incrementar la posibilidad de éxito en el procedimiento de aislamiento, para nuevas cepas.

Recomendaciones • 3_ Utilizar al menos 10 platos por

aislamiento inicial para lograr obtener puntos de crecimiento micelial puros en algunos de los platos con medio de cultivo.

• 4_ Se recomienda realizar una segunda etapa de manejo de estas cepas, el cual consiste en la siembra de las mismas en sustratos comerciales o comúnmente utilizados en producciones comerciales de este hongo, en una planta acondicionada para tal fin.

Recomendaciones

• 5_ El procedimiento utilizado aquí

representa una experiencia para

incorporar, en un futuro, al Módulo

de producción de hongos o asesorias

que se soliciten, transmitiendo al

productor la manera de poder obtener

su semilla para su planta y así no

depender de un suministro externo que

en ocasiones le pueda fallar.