RECTIa de Aglutinare

7/23/2019 RECTIa de Aglutinare

http://slidepdf.com/reader/full/rectia-de-aglutinare 1/24

Aviditatea-Aviditatea- unui Ac pentru un Ag specificunui Ac pentru un Ag specific

reprezinta rapiditatea aparitiei reactiei Ag-reprezinta rapiditatea aparitiei reactiei Ag-

Ac(precipitare,aglutinare etc.) Ac(precipitare,aglutinare etc.)Factorii aparitiei aviditatii:Factorii aparitiei aviditatii:

valenta Acvalenta Ac

nr. de epitopinr. de epitopi

temperaturatemperatura

pHpH

forta ionica a mediuluiforta ionica a mediului

Daca este cunoscut unul din elementeleDaca este cunoscut unul din elementele

reactiei Ag sau AC poate fi identificat celalaltreactiei Ag sau AC poate fi identificat celalalt



AfinitateaAfinitatea unui Ac pentru un Ag specificunui Ac pentru un Ag specific

caracterizeaza intensitatea fortelor de legatura acaracterizeaza intensitatea fortelor de legatura a

complexului Ag-Accomplexului Ag-Ac



Reactiile Ag-Ac au doua directii de aplicareReactiile Ag-Ac au doua directii de aplicare

practica:practica:

I.Seroidentificare:I.Seroidentificare: Detectarea si dozarea

Ag(necunoscut) cu autorul Ac specifici

cunoscuti.Utilizate ! surse de Ac: Ac monoclonali omogeni

dar recunosc doar un singur tip de epitop si Ac

policlonali,ce se contin in serurileimune(antiseruri) care dau legaturi de aviditate

inalta cu Ag.



Serurile imune- inectarea la un animal de

la"orator a Ag cunoscute.Dupa o perioadaserul va contine Ac contra Ag inectate-natura

exacta acestor Ac nu o cunoastem ( Ac

policlonali )

I.Serodiagnostic:I.Serodiagnostic: Detectarea si titrarea Ac din

serul "olnavilor (necunoscut) fata de un Agspecific cunoscut

Unele reactii Ag-Ac se manifesta direct si pot fi

o"servate direct :precipitarea,aglutinarea etc.



R#AC$%A D# A&'$%AR#R#AC$%A D# A&'$%AR#din latina- agglutinatio-incleieredin latina- agglutinatio-incleiere

%n reactia de aglutinare Ag sunt de natura%n reactia de aglutinare Ag sunt de natura

corpusculara(aglutinogene) reprezentate decorpusculara(aglutinogene) reprezentate de

elemente figurate,iar Ac sunt completi celelemente figurate,iar Ac sunt completi cel

putin "ivalentiputin "ivalenti

Aglutinarea este determinata de formarea Aglutinarea este determinata de formarea

unei retele intre Ag si Ac,ce permiteunei retele intre Ag si Ac,ce permite

apropierea unui numar suficient deapropierea unui numar suficient departicule figurate pentru a constituiparticule figurate pentru a constitui

aglutinate vizi"ile cu oc*iul li"er aglutinate vizi"ile cu oc*iul li"er





C'A+%%CAR#A R#AC$%%'RC'A+%%CAR#A R#AC$%%'R

D# A&'$%AR#D# A&'$%AR# Aglutinare”activa”sau”directa” : Aglutinare”activa”sau”directa” :

in care particula figurata(Ag corpuscular)in care particula figurata(Ag corpuscular)este el insusi purtator de determinanteeste el insusi purtator de determinante

antigenice specifice (*ematii, leucocite,antigenice specifice (*ematii, leucocite,

trom"ocite, spermatozoizi, "acterii)trom"ocite, spermatozoizi, "acterii)



Aglutinarea”pasiva”sau”indirecta”: Aglutinarea”pasiva”sau”indirecta”: in care particula servestein care particula serveste doar dedoar de

suport pentru un determinant antigenicsuport pentru un determinant antigenic

solu"il fixat artificial pe suprfafata sasolu"il fixat artificial pe suprfafata sa recvent sunt utilizate ca suport *ematiirecvent sunt utilizate ca suport *ematii

formolate,particule de latex sauformolate,particule de latex sau

microcristale de colesterolmicrocristale de colesterol



Reactii de aglutinare active(directa)Reactii de aglutinare active(directa)

Aspect calitativ Aspect calitativ

Reactia poate fi efectuata pe lama deReactia poate fi efectuata pe lama de

sticla sau in tu"uristicla sau in tu"uri

R#AC$%A # 'A/AR#AC$%A # 'A/A

+e amesteca o picatura de ser cu o+e amesteca o picatura de ser cu o

picatura de suspensie "acteriana(Ag).picatura de suspensie "acteriana(Ag). Citirea se face la microscop sau cu oc*iulCitirea se face la microscop sau cu oc*iul

li"er.li"er.



R(0) apar conglomerate iar lic*idul seR(0) apar conglomerate iar lic*idul seclarificaclarifica

R(-) lic*idul ramane tul"ureR(-) lic*idul ramane tul"ure





RReactia in tu"urieactia in tu"uri %n epru"eta se amesteca serul si Ag figurate%n epru"eta se amesteca serul si Ag figurate

(*ematii,"acterii).(*ematii,"acterii). R(0)- se manifesta prin formarea unui sediment cuR(0)- se manifesta prin formarea unui sediment cu

aspect de um"rela inversata la fundul tu"urilor siaspect de um"rela inversata la fundul tu"urilor si

clarificarea lic*iduluiclarificarea lic*idului

Aprecierea reactiei se face dupa !1-!2 de ore si Aprecierea reactiei se face dupa !1-!2 de ore si

dupa sistemul de 2 plus(0000)dupa sistemul de 2 plus(0000)

Celulele neaglutinate se sedimenteaza la fundulCelulele neaglutinate se sedimenteaza la fundul

tu"urilor su" forma de "uton sau inel(r-) Citirea setu"urilor su" forma de "uton sau inel(r-) Citirea seface cu oc*iul li"er face cu oc*iul li"er



Aspectul cantitativ Aspectul cantitativ /etoda dilutiilor succesive/etoda dilutiilor succesive

%nitial se efectueaza dilutii succesive ale serului%nitial se efectueaza dilutii succesive ale serului(3451,34311,34!11 etc), in care se introduc ulterior(3451,34311,34!11 etc), in care se introduc ulterior

cantitati egale de Ag.cantitati egale de Ag.

'a termostat ! ore apoi la temp camerei 36-!1 ore'a termostat ! ore apoi la temp camerei 36-!1 ore

%nterpretarea:cea mai mare dilutie a serului in care%nterpretarea:cea mai mare dilutie a serului in care

se manifesta aglutinarea de cel putin 7 0sese manifesta aglutinarea de cel putin 7 0se

numestenumeste titrul anticorpilor aglutinanti(titrul seruluititrul anticorpilor aglutinanti(titrul serului

aglutinant)aglutinant)



Aglutinarea directa este utilizata pentru Aglutinarea directa este utilizata pentru

determinarea grupelor sangvine sau indeterminarea grupelor sangvine sau in

diagnosticul unor maladiidiagnosticul unor maladii

infectioase(seroidentificarea Ag sauinfectioase(seroidentificarea Ag sau

depistrea si titrarea Ac din serul "olnavilor)depistrea si titrarea Ac din serul "olnavilor)



Reactiile de aglutinare pasiva(indirecta)Reactiile de aglutinare pasiva(indirecta)

Consta in fixarea unui Ag solu"il(sau al unui Ac)peConsta in fixarea unui Ag solu"il(sau al unui Ac)peun suport corpuscular inert, care nu intervine inun suport corpuscular inert, care nu intervine in

reactia Ag-Acreactia Ag-Ac

%n calitatea de suport inert pot servii *ematiile,%n calitatea de suport inert pot servii *ematiile,

particule de latex,cristale de colesterolparticule de latex,cristale de colesterol

+uspensia de particule sensi"ilizate cu Ag sau Ac+uspensia de particule sensi"ilizate cu Ag sau Ac

este pusa in contact cu serul imun(respectiv cueste pusa in contact cu serul imun(respectiv cu

Ag),ca si in cazul agl directe Ag),ca si in cazul agl directe Avantaele agl indirecte 8facilitatea citirii si Avantaele agl indirecte 8facilitatea citirii si

sensi"ilitate inaltasensi"ilitate inalta



Reactia de *emaglutinareReactia de *emaglutinare

pasiva(indirecta) RHA%pasiva(indirecta) RHA% nele Ag de origine poliza*aridica senele Ag de origine poliza*aridica se

fixeaza practic spontan dupa o scurtafixeaza practic spontan dupa o scurta

incu"atie,pe suprafata *ematiilor incu"atie,pe suprafata *ematiilor

RHA%-se efectueaza in godeurile uneiRHA%-se efectueaza in godeurile unei

placi din polistiren.R0 aglutinareaplaci din polistiren.R0 aglutinarea

eritrocitelor sensi"ilizate-sediment ineritrocitelor sensi"ilizate-sediment in

forma de um"rela la fundul godeurilor forma de um"rela la fundul godeurilor





Reactia de latex-aglutinareReactia de latex-aglutinare

Ac sau Ag sunt fixati pe particule de latex Ac sau Ag sunt fixati pe particule de latex

Reactia se efectueaza pe lame de sticlaReactia se efectueaza pe lame de sticla

olosita in identificarea factoruluiolosita in identificarea factoruluireumatoid la pacientii cu poliartritareumatoid la pacientii cu poliartrita

reumatoida ,identificarea tulpinilor izolatereumatoida ,identificarea tulpinilor izolate

si serodiagnosticul unor infectiisi serodiagnosticul unor infectii



Reactia de Co-aglutinareReactia de Co-aglutinare

'a "aza acestei reactii se afla proprietatea'a "aza acestei reactii se afla proprietateaunei "acteriiunei "acterii Staphilococcus aureusStaphilococcus aureus

(tulpina(tulpina CoCo9an)- ce are in componenta9an)- ce are in componenta

peretelui celular proteina A- sa fixeze %g &peretelui celular proteina A- sa fixeze %g &

prin intermediul fragmentului c.Astfel cuprin intermediul fragmentului c.Astfel cu

autorul Ac cunoscute se identifica Agautorul Ac cunoscute se identifica Ag

necunoscutenecunoscute

Reactia se efectueaza pe lamaReactia se efectueaza pe lama



Reactia Coom"sReactia Coom"s

nii Ac (monovalenti) nu pot fi aglutinanti innii Ac (monovalenti) nu pot fi aglutinanti in

conditii normale fiind monovalenti-exconditii normale fiind monovalenti-ex

anticorpii anti-RH responsa"ili deanticorpii anti-RH responsa"ili de

incompati"ilitatea materno-fetala inincompati"ilitatea materno-fetala in

sistemul R*,-#i pot depistati datoritasistemul R*,-#i pot depistati datoritatestelor Coom"stestelor Coom"s

+unt posi"ile ! teste in functie de prelevatul+unt posi"ile ! teste in functie de prelevatul

recoltat:sange de la nou-nascut,sau de larecoltat:sange de la nou-nascut,sau de lafemeia gravidafemeia gravida



$e*nica Coom"s directa$e*nica Coom"s directa

'a nou-nascut se cauta prezenta Ac'a nou-nascut se cauta prezenta Acmaterni anti R* fixati pe *ematii,dacamaterni anti R* fixati pe *ematii,daca

mama este R*- la aceste *ematiimama este R*- la aceste *ematii

suspecte se adauga un ser anti-%g umanasuspecte se adauga un ser anti-%g umana Acest ser nu aglutineaza *ematiile Acest ser nu aglutineaza *ematiile

normale ci acele *ematii pe care suntnormale ci acele *ematii pe care sunt

fixati Ac anti-R*fixati Ac anti-R*



$e*nica Coom"s indirecta$e*nica Coom"s indirecta

'a o femeie gravida R*-,anticorpi anti R*'a o femeie gravida R*-,anticorpi anti R*sunt prezenti in ser sunt prezenti in ser

%nitial la acest ser se adauga *ematii R*0%nitial la acest ser se adauga *ematii R*0

(pentru formarea complexelor Ag-Ac),apoi(pentru formarea complexelor Ag-Ac),apoise aplica serul anti-%gse aplica serul anti-%g



COOMBS I!"C#COOMBS I!"C# COOMBS I$I!"C#COOMBS I$I!"C#



Documents

RECTIa de Aglutinare