Reunión técnica nacional de los servicios de epidemiología sobre estrategias de contención ante la

pandemia A H1N1

Secretaría de Estado de Salud Pública y Asistencia Social

Dirección General de Epidemiología

06 de mayo del 2009

Diagnostico de Influenza basado en laboratorio

Diagnósticos de Laboratorio,Toma y transporte de Muestras

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Objetivos de aprendizaje

• Preparar y mantener los equipos para la toma de muestras

• Recolectar y transportar las muestras correctamente y de manera segura

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Diagnósticos de laboratorio de influenza A H1N1

Análisis de muestras respiratorias:

• Aislamiento del virus• Técnicas basadas en RCP• Inmunofluorescencia

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Inmunofluorescencia

• Funciona mejor en muestras clínicas que se hayan tomado inmediatamente después del inicio de los síntomas

• Los resultados evidenciarán si algún virus de influenza está presente en la muestra

• Sensibilidad y especificidad no establecidas

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Tinción por Inmunofluoresencia Indirecta de células de aspirado traqueal

Tomado de: World Bank Training by Alexander Klimov, CDC

Anti-H5

Anti-A/NP

Anti-H3

Anti-B

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El equipo para la tomade muestras

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El equipo para la toma de muestras

• Viales de recolección con MTV

• Aplicadores con punta de fibra de poliéster

• Solución salina estéril (0,85% NaCl)

• Depresores de lengua• Envases para

recolección de muestras (Neveritas)

• Contenedor secundario• Pilas (ice paks)• Equipo de Protección

Personal• Ficha de investigación

de ETI o IRAG• Un lapicero o marcador

para rotular las muestras• Fundas para los

desechos.

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¿Qué es el Medio de Transporte Viral (MTV)?

• Se utiliza en la recolección de muestras para aislamiento viral y análisis

• Previene que las muestras se sequen

• Previene el crecimiento de bacterias y hongos

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Almacenamiento de los MTV

• Viales estériles de recolección con 2-3 mL de MTV

• Los viales se pueden almacenar en el congelador a -20° C hasta que se usen

• Los viales se pueden almacenar por cortos períodos de tiempo a una temperatura de 4-6° C

No utilizar los viales si el líquido se vuelve turbio

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Aplicadores con punta de fibra de Poliéster

• Deberán ser hisopos de rayón o de fibra de poliéster

• No se debe utilizar hisopos de alginato de calcio ni de algodón ni aquellos con palillos de madera, ya que inhiben la PCR

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Depresores de lengua

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Equipo de Protección Personal estandar

• Mascarillas quirúrgica o (N-95)

• Guantes

• Protección para los ojos (gafas)

• Ropa protectora (bata)

¿Por qué las prácticas de bioseguridad?

Para proteger a:

• Los trabajadores

• Los productos

• Compañeros de trabajo

• Entorno medioambiental

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¿Cómo tomar muestras correctamente

y de manera segura?

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La responsabilidad en la toma de muestras clínicas

• Normalmente es una función desempeñada por el personal del hospital

• Sin embargo, si el personal del hospital no está disponible, la puede desempeñar un miembro del Equipo de Respuesta Rápida (ERR)

• Designar al menos un miembro del EER capacitado para tomar muestras

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Fuentes de muestras clínicas

Hay que prepararse para la toma de muestras antes de salir al campo

• Casos sospechosos– Síntomas compatibles con influenza– Con menos de tres días (72 horas)

de inicio de síntomas

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¿Qué muestras tomar?

• De preferencia tomar muestras de:

• Hisopados nasales• Hisopados de garganta

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¿Cuándo tomar muestras respiratorias?

• Tan pronto como se inicien los síntomas

• Antes de administrar los medicamentos antivirales

• Tomar varias muestras en diferentes días

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¿Cómo tomar las muestras?

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Formulario para recolección de datos en campo

• Nombre del paciente

• Número único de identificación

• Información demográfica del paciente

• Estado de salud del paciente

• Utilice una ficha para cada paciente y el VEF-

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Demostración de la toma de muestras naso faríngeas y

de faringe posterior

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Hisopados nasofaríngeos

1. Introduzca un hisopo seco en la fosa nasal y llévelo hacia atrás, a la nasofaringe

2. Deténgase allí por unos segundos

3. Despacio, retire el hisopo mientras lo hace girar ligeramente

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Hisopados nasofaríngeos(continuación)

4. Utilice un hisopo diferente para la otra fosa nasal

5. Coloque la punta del hisopo en el vial que contenga MTV, rompiendo el palillo aplicador

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Hisopados para faringe posterior

• Pídale a la persona que abra la boca

• Baje la lengua con el depresor

• Con un hisopo, tome una muestra de la faringe posterior

• Evite el contacto con las amígdalas

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¿Cómo rotular las muestras?

Rotule cada muestra con

los siguientes datos:

– Nombre del paciente

– Número único de

identificación del

paciente

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¿Cómo almacenar, manejar y transportar las muestras al

Laboratorio?

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¿Cómo almacenar las muestras?

Muestras en MTV:

• Transportar al laboratorio lo antes posible

• Almacenar las muestras a una temperatura de 4° C antes y

durante el traslado al laboratorio si esto dura 48 horas

• Guardar las muestras a - 70° C en períodos mayores a 48 horas

• No se deben guardar en un congelador tradicional

• Evitar ciclos de congelamiento y descongelamiento

– Es preferible mantener las muestras en refrigeración, a

someterlas a ciclos repetidos de congelamiento y

descongelamiento

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El empacado de las muestras para el transporte

• Mantener las muestras a una temperatura de 4° C– Llene una hielera con pilas o refrigerantes

• Incluir una lista detallada de las muestras con números de identificación e instrucciones para el laboratorio (VEF-4)

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Trabajo de grupoEjercicio de toma de muestra