Upload
agam-budi-satria
View
21
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Dosen Pendamping:Dr. Riris Istighfari Jenie, M.Si., Apt.
Potensi Optimistik Ekstrak Etanolik Kayu Secang
(Caesalpinia sappan L.) sebagai Penghambat
Angiogenesis Jalur VEGF pada Sel EndotelPrisnu Tirtanirmala
10/301868/FA/08604Agam Budi Satria11/316600/FA/08862Rahmawaty Rachmady11/313038/FA/08686Denny Willianto12/333213/FA/09275
LATAR BELAKANGKANKER
LATAR BELAKANGANGIOGENESIS
VEGF
LATAR BELAKANGSECANG
BRAZILIN
BRAZILEIN
Flavonoid dapat berperan sebagai agen kemopreventive dan dapat menghambat VEGF/bFGF yang dapat menginduksi angiogenesis serta menghambat poliferasi sel tumor dan sel endotelial in vitro (Kim, 2003).
TUJUANTujuan Umum
• Mengetahui potensi ekstrak kayu secang sebagai agen kemoprevensi
Tujuan Khusus• Mengetahui penghambatan proliferasi sel endotel oleh
pemberian ekstrak kayu secang• Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak secang pada
penghambatan jalur VEGF dan menanisme molekulernya
TARGET LUARAN1. Mendapatkan koleksi bahan serbuk kayu secang
sebanyak 500 gram2. Ekstraksi serbuk kayu secang dengan etanol 70%
sebanyak 50 gram3. Mendapatkan data identifikasi senyawa flavonoid pada
ekstrak etanolik kulit kayu secang melalui uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
4. Mendapatkan data score VEGF-R terhadap VEGF, brazilin dan brazilein melalui docking senyawa
5. Mendapatkan sel endotel yang telah dipreparasi6. Mendapatkan data uji sitotoksisitas (IC50) ekstrak
etanolik kayu secang terhadap sel endotel7. Mendapatkan data pengamatan ekspresi protein VEGF
melalui metode Immunositokimia 8. Mempublikasikan hasil penelitian ke jurnal internasional
seperti: PubMed, ScienceDirect,
1. Mendapatkan koleksi bahan serbuk kayu secang sebanyak 500 gram
Mendapatkan serbuk kayu secang sebanyak 500 gram dari BP2TOOT Tawangmangu, Jawa Tengah
2. Ekstraksi serbuk kayu secang dengan etanol 70% sebanyak 50 gram
Mendapatkan ekstrak kental kayu secang
sebanyak 80,18 gram
3. Mendapatkan data identifikasi senyawa flavonoid pada ekstrak etanolik kulit kayu secang melalui uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
UV 254 nm UV 366 nmSinar tampak
4. Mendapatkan data score brazilin dan brazilein terhadap VEGF, melalui docking senyawa
Ligand Binding Energy (kkal/mol)
Protein: VEGF
5. Mendapatkan sel endotel yang telah dipreparasi
Sel endotel dapat diambil dari aorta mencit atau umbilical core manusiaKendala:
1. Waktu yang terbatas 2. Aorta mencit terlalu kecil susah mengisolasi
3. Reagen yang dibutuhkan belum tersedia4. Umbilical core sulit didapatkan
Solusi:Sel endotel diganti dengan WiDr colon cancer cell line
Mengapa WiDr?
(Riyad et al., 2008)
6. Mendapatkan data uji sitotoksisitas (IC50) ekstrak etanolik kayu secang
Pembuatan Media Kultur
Pemanenan sel
Penanaman Sel
Penghitungan sel
Inkubasi
Sel dalam 96 well plate diambil
Pemberian Reagen MTT
Treatment EtOH Secang
Penambahan Reagen Stopper
MTT Assay
Cell Viability (%)
IC50 ELISA Reader
N N
NH
N
S
N
CH3
CH3N N
NN
S
N
CH3
CH3
NADH + H
NAD + HBr
MTT (Yellow) Formazan (Purple)
Br
MTT Assay
0 20 40 60 80 100 1200.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
80.00EtOH Secang-WiDr-22.05.13 (48h)
Konsentrasi (ug/ml)
Viab
ilita
s se
l (%
)
IC50 = 14 ug/mL
Target Luaran yang Belum Terlaksana ICC akan dilaksanakan bulan Juni Mempublikasikan hasil penelitian ke jurnal
internasional
LATAR BELAKANG Kanker secara keseluruhan Ciri-ciri kanker mengarah ke metastasis Penyebab metastasis: angiogenesis Kekurangan obat2 chemoterapi yg udah ada (efek
samping) Perlu bahan alam untuk kombinasi treatment Tentang secang (kandungan zat aktif) Penelitian yg udah ada ttg secang Mekanisme penghambatan vegf oleh secang
-TERIMA KASIH-