Univerzitet u BeograduFarmaceutski fakultet

Ivana N. Stojanović

Završni rad

Sinteza i strukturna karakterizacija2-[2-(Trifluorometil)fenil]-2H-1-benzopiran-4(3H)-ona

1

Beograd, 2012.

2

Univerzitet u BeograduFarmaceutski fakultet

Ivana N. Stojanović

ZAVRŠNI RAD

Sinteza i strukturna karakterizacija

2-[2-(Trifluorometil)fenil]-2H-1-benzopiran-4(3H)-ona

Beograd, 2012.

3

Završni rad je urađen na Katedri za Farmaceutsku hemiju Univerziteta u Beogradu – Farmaceutskog fakulteta. (Deo rada je urađen na Departmantu za fiziku pri Prirodno-matematickom fakultetu u Novom Sadu i Hemijskom fakultetu u Beogradu.)

Mentor

__________________________________Prof. doc Olivera Čudina

Članovi komisije

1. __________________________________

2. __________________________________

Ocena završnog rada ________________________________

Datum odbrane završnog rada ________________________

4

Sažetak

Flavanoni su klasa jedinjenja koja je u biljnom svetu manje zastupljena u odnosu na ostale grupe flavonoida i to skoro isključivo u Citrus vrstama. Citrus flavonoidi imaju antimikrobno, antiviralno, antialergetsko, antiinflamatorno i antioksidantno dejstvo. Strukturnim modifikacijama ovih molekula moguće je dobiti značajne razlike u biološkom dejstvu. Flavanon je sintetisan ciklizacijom odgovarajućeg halkona u baznoj sredini i na povišenoj temperaturi. Tok reakcije praćen je TLC i UV-vis metodama, a čistoća jedinjenja potvrđena HPLC metodom. Sintetisano jedinjenje je strukurno okarakterisano korišćenjem IR, NMR, XRA, MS.

Ovo je prvo sintetisano jedinjenje sa ovom strukturom zabeleženo u kristalografskoj bazi podataka, što je od izuzetne važnosti za dalja proučavanja strukture flavonoida.

Ključne reči: flavanon, Citrus flavonoidi

5

Abstract

Flavanones are group of compounds found only in some Citrus species. Citrus flavonoids were reported as having antimicrobial, antiviral, anti-alergenic, anti-inlammatory and antioxidant properties. Stuctural modification can enxence biological activity.

Flavanone is synthesized by cyclization of chalcone in the middle of the base at elevated temperature. Course of reaction was monitored by TLC and UV-vis spectrofotometry and purity of compounds was confirmed by HPL method. Structural characterization was done by IR, NMR, XRA, MS.

This is the first known example of molecule with this structure. It is very important that this structure is in cristallografic base, which can improve further investigation of flavanoids structure.

Key words: flavanone, Citrus flavanoids

6

SADRŽAJ1. Uvod……………………………………………………………………..……71.1. Opšte odlike flavanona i rasprostranjenost u prirodi.......................................71.2. Predstavnici flavanona i farmakološka aktivnost............................................71.3. Hemijske osobine............................................................................................10

2. Sinteza flavanona……………………………………………122.1. Eksperimentalni deo……………………………..............................................13

3. Rezultati i diskusija………………………………………..……...........133.1.Tankoslojna hromatografija ……………….……………………….…………133.2. UV-vis spektorfotometrija……………………………………………………143.3. Nuklearna magnetna rezonanca……………………………………………...143.4. Infracrvena spektrofotometrija……………………………………………….173.5. Kristalografija………………………………………………………………..20

4. Zaključak......................................................................................................

5. Literatura......................................................................................................

7

1. Uvod

1.1. Opšte odlike flavanona, rasprostranjenost u prirodi

Flavonoidi su velika grupa sekundarnih metabolita u biljakama čija je osnovna uloga da obezbede zaštitu od različitih patogena. Put sinteze flavonoida u biljkama je veoma kompleksan i nepoznat u potpunosti, ali se zna da su intermedijeri halkoni i flavanoni. U procesu sinteze flavonoida u prorodi, flavanoni nastaju od halkona pod uticajem enzima izomeraze. Pored toga što je biljka zaštićena od patogena, flavonoidi doprinose i njenoj lekovitosti. Biljke koje sadrže flavonoide tradicionalno se koriste zbog svojih antiinflamatornih svojstava, a naročito pažnju odnose Citrus vrste.(1)

Flavonoidi su podeljeni u šest podklasa prema strukturi: flavonoli, flavoni, flavanoni, antocijani, flavanoli (katehini i procijanidini) i izoflavoni.(2) Osnovna struktura flavonoida sastoji se iz dva prstena benzena A i B koji su povezani piranonskim prstenom C (slika1). Klasifikacija je izvršena prema pozicijama A, B i C prstena.

Slika 1. Osnovni skelet flavonoida (flavanon)

Zbog raznovrsne strukture flavonoidi pokazuju širok spektar bioloških aktivnosti kao što su antiviralna, antiinflamatorna, antioksidantna, antialergijska, antineoplastična aktivnost.(3, 4, 5) Potvrđena je i antimalarijska aktivnost.( 6,7) Koriste se u farmakologiji i medicini zbog svoje bakteriostatske aktivnosti.(8)

Iako su rasprostranjeni samo u Citrus vrstama, koje se gaje svuda u svetu, flavanoni se mogu naći, mada u veoma malom procentu, i u paradajzu i nani, a u novije vreme potvrđeno je njihovo prisustvo u retkim biljkama.(2) Više od jedne četvrtine izolovanih flavanona su glikozidi, ostatak su pretežno ili izoprenilovani (Euphorbiaceae) ili polimetoksi aglikoni. U prirodi se nalaze i flavanoni supstituisani metil, furano i metilen grupama.(9) U Citrus vrstama flavanoni zauzimaju 95% ukupnih flavonoida (10, 11) te je unos flavanona tokom dana adekvatan, zbog velike konzumacije Citrus voća. Procenat

8

flavanona u Citrus vrsti takođe zavisi i od dela ploda. Kora i albedo (sunđerasti, beli deo kore) kao i membrana koja odvaja pulpu su najbogatiji flavanonima. Time se objašnjava manji sadržaj flavanona u soku, nego u celom voću.(12)

1.2. Predstavnici flavanona i farmakološka aktivnost

U Citrus voću flavanoni su prisutni u obliku svojih glikozida (naringin, neohesperidin, hesperidin), disaharida na poziciji 7. Disaharidi su: neohesperidoza, od koje potiče gorak ukus grejpfruta i rutinoza vezana za hesperitin. Glavni aglikoni su naringenin (5, 7, 4'-trihidroksiflavanon) u grejpfrutu, hesperitin (4'-metoksi-3', 5, 7-trihidroksiflavanon) u pomorandži i madarini i eriodiktol (5, 7, 3', 4'- tetrahidroksiflavanon) u limunu. Najznačajniji predstavnici flavanona, hesperidin i naringin, su polifenolna jedinjenja nađena u Citrus vrstama (Tabela 1).

Tab.1 Predstavnici flavanona

Polifenolna jedinjenja, kao sekundarni metaboliti biljaka, preporučuju se da bi smanjili rizik od kardiovaskularnih događaja koji su vodeći uzrok smrti.(2) Bioaktivnost flavanona je najznačajnija u kardiovaskularnom sistemu, gde se ostvaruje uticajem na mikrovaskulane endotelne ćelije. Zato je antiinflamatorno dejstvo najznačajnije dejstvo flavanona(1) Epidemiološke studije pokazuju smanjenjen rizik od kardiovaskularnih bolesti usled konzumiranja Citus vrsta. Eksperimenti i klinički podaci su potvrdili antihipertenzivnu, antioksidativnu, antiinflamatornu aktivnost flavanona, zatim efekat na snižavanje masti i efekat kojim se povećava osetljivost receptora na insulin, kao i antiaterogensku aktivnost na animalnim modelima.(2) Hesperitin je poznat kao prirodni proizvod koji poboljšava permeabilnost i integritet kapilarnog zida,(13) takođe ima izražen antiinflamatorni sistemski efekat na inflamaciju pluća izazvanu lipopolisaharidom i infekciju izazvanu endotoksinom (14) kao i na reumatoidni arthritis (15) potvrđeno je na modelu miša. Naringin pokazuje isti efekat, ali u manjem procentu. Sa naučne strane, posebno je značajno antiinflamatorno dejsto na intestinum. Pokazano je da hespretin može

9

da smanji kolitis kod miševa izazvan trinitrobenzensulfonskom kiselonom tako šro inhibira enzim mijeloperoksidazu.(16)Različito supstituisani flavanoni ispitivani su i na meticilin rezistentnim stafilokokama, gde su pokazali značajno dejstvo, najpotentniji je bio flavanon naringenin.(17)Pored značajnog dejstva na bakterije i gljive, hesperitin, pokazuje zaštitni efekat na gubitak kostiju. Nivo hesperitina u urinu i plazmi značajno se menja hemijskom modifikacijom do 7-glikozida te je i zaštitni efekat na kostima jači. Zato je za dalji razvoj i poboljšavanje dejstva važno vršiti modifikaciju prirodnih proizvoda.(18)

Nedavno je iz biljke Broussoneta papyrifera izolovan prenilovani flavanon abizon, odgovoran za njeno dejstvo na estrogen zavisni tumor dojke. Ovaj flavanon inhibira aromatazu. Sintetskom modifikacijom korišćenjem Claisen-Schmith kondenzacije, dobijeno je jedinjenje sa dvadeset puta jačim dejstvom.(19)

Eksperimenti na kulturi ćelija izolovanim iz kolona, dojke, jetre, pankreasna i drugih stomačnih kancera pokazuju inhibitorni efekat naringenina na rast tumora.(20) Hesperitin inhibira proliferaciju ćelija pankreasa. Nakon sprovedene studije potvrđeno je da hesperitin indukuje Notch1 u ćeliji karcinoma, što vodi supresiji tumorske proliferacije i hormonske produkcije.(21) Značajni su i efekti Citrus flavanona u borbi protiv oksidativnog stresa. Smatra se da je oksidativni stres vodeći uzrok povrede ćelije i različitim abnormalnostima. Jedan od mogućih načina da se zaustavi jeste smanjenje reaktivnih slobodnih radikala, što se može postići povećanjem endogenog kapaciteta antioksidanasa. Citrus flavonoidi naringin i nobiletin pokazuju zaštitnu aktivnost prema citotoksičnom oštećenju izazvanom vodonik-peroksidom. Inhibiraju smanjenje vitalnosti ćeljie i sprečavaju oštećenje membrane. Pored toga, smanjuje se ćelijska apoptoza, jer povećavaju aktivnost superoskid-dismutaze i glutationa, a smanjuju malondialdehid. Ovi rezultati potvrđuju njihovu neurozaštitnu ulogu čak i u fiziološkim koncentracijama. Svi navedeni rezultati ukazuju da su dijetetski antioksidansi potencijalni kandidati za neurodegenerativne bolesti.(22)

1.3. Hemijske osobine flavanona

Sa hemijske strane gledano, flavanoni su slabe kiseline i mogu lako da pređu u svoj izomerni oblik, halkon, u alkalnoj ili kiseloj sredini.(23) Korišćenje baza dovodi do izomerizacije flavanona do halkona, kao i upotreba organskih rastvarača poput dimetilsulfoksida, dimetilformamida, ili istih u mešavini sa metanolom, etanolom i acetonom.(24) Zato je teško ekstrahovati ove prirodne proizvode. Favanoni, manje rastvorljivi od halkona, imaju težnju da se prvi odvoje frakcionom kristalizacijom i lako talože pri nižim pH vrednostima, naročito kada se rastvor ohladi.(25)

Flavanoni postoje kao dijastereoizomeri zbog prisustva hiralnih centara u aglikonu (C-2) i optički aktivnog šećernog ostatka. (Slika 2). Nađeni u prirodi obično imaju 2S konfiguraciju, ali može doći do racemizacije u toku ekstrakcije.(26)

10

Slika 2. Osnovna struktura predstavnika flavanona

Dosadašnje poznavanje čitavog spektra aktivnosti jedinjenja izolovanih iz Citrus vrste proisteklo je iz narodne primene ekstrakata Citrusa za raznolike bolesti, potom su ova jedinjenja strukturno identifikovana i izolovana, a dalji napredak vodi njihovoj strukturnoj modifikaciji u cilju potentnijeg i selektivnijeg dejstva. Sintetisano jedinjenje u ovom radu svrstava se u grupu flavanona i pokazuje strukturnu sličnosti sa retkim jedinjenjima nađenim u Citrus vrstama. Citrus flavonoidi imaju antimikrobno, antimikotično, antiviralno, antialergensko, antiinflamatorno, (27) antioksidantno dejstvo. (28) Studije slučaj kontrola potvrdile su i da flavanoni mogu smanjiti rizik od kardiovaskularnih bolesti i šloga.

2. Sinteza flavanona U protekloj dekadi korišćeni su i brojni čvrsti katalizatori za sintezu, kao što su

MgO,(29) aluminijum,(30) barijum-hidroksid (31) hidrotalcit (32) i prirodni fosfati modifikovani NaNO3 ili KF.(33) Pored čvrstih katalizatora, korišćen je L-prolin, efikasan

organski katalizator u sintezi supstituisanih flavanona i halkona u dobrom prinosu.(34) Ipak, najveći deo njih zahtevao je upotrebu skupih toksičnih rastvarača kako bi reakcija tekla.(29) Noviji radovi za sintezu koriste amino funkcionalnu siliku SBA-15 pomoću Claisen-Schmidt kondenzacije. Prednost ovakvih sistema je što je moguće dobiti željeni izomer, halkon ili flavanon, pored toga upotreba rastvarača smanjuje katalitičku moć i selektivnost za nastanak flavanona.(35)

Iako su različite procedure korišćene za sintezu flavonoida najrasprostranjenija je Claisen-Schmidt kondenzacija i intramolekularna Michael adicija između supstituisanih benzaldehida i supstituisanih 2'-hidroksiacetofenona u kiseloj ili baznoj sredini pod homogenim uslovima (Shema 1). Sinteisani halkon u određenim uslovima izomerizuje do flavanona i obratno (Shema2).(35)

11

Shema 1. Claisen-Shmidth kondenzacija1-supstituisani 2'-hidroksiacetofenon; 2-supstituisani benzaldehid; 3-halkon

Shema 2. Izomerizacija halkona

2.1. Eksperimentalni deo

Flavanon je sintetisan u procesu Claisen-Shmidt aldolne kondenzacije, ciklizacijom

halkona (Slika3). Halkon je odmeren u količini od 1g, kao rastvarač je korišćena mešavina

vode i etanola u odnosu 1:1, pH vrednost je podešena na 9 korišćenjem 0,1 M sveže

pripremljenog rastvora NaOH. Ova smeša je stavljena da refluktuje, a reakcija je praćena

TLC i UV-vis spektrofotometrijom. Reakcija je završena nakon dva sata, a reakciona smeša

je ostavljena da se ohladi na sobnoj tempreraturi. Nakon hlađena primećen je pad beličastih

kristala. Reakciona smeša je profiltrirana i kristali isprani i dalje ispitivani.

Slika 3. Sinteza 2-[2-(Trifluorometil)fenil]-2H-1-benzopiran-4(3H)-on

12

3. Rezultati i diskusija

3.1. Tankoslojna hromatografija (TLC)

Ranih šezdesetih metoda tankoslojne hromatografije koriščena je za analizu

flavonoida. Höerhmmer i Wagner (36) su razdvojili i prečistili Citrus flavonoide

(hesperitin, hesperidin, naringin i naringenin). Danas ova unapoređena metoda može

poslužiti za separaciju flavanona, flavanola i flavanala.(37)

U ovom radu korišćena je tehnika tankoslojne hromatografije radi praćenja reakcije.

Nakon par minuta primećeno uspešan tok reakcije koji se ogledao u ciklizaciji do

flavanona. Flavanon pod UV lampom pokazuje plavu fluorescenciju.

3.2. UV-vis spektrofotometrija

Spektofotometrijska metoda u kontekstu flavonoida se koristi već decenijama. Daws metoda je brza semikvantitativna spektrofotometrija za merenje ukupnih flavanona. Rowell je razvio kvantitatativnu spektrofotometriju za određivanje flavanona, a koja se zasniva na nagrađenoj crvenoj boji pri redukciji flavanona. Kasnije su nastale i ostale metode za određivanje flavanona, zahvaljujući njihovoj sposobnosti da grade komplekse sa metalima kao što su bakar II, uranijum, cirkonijum IV u sredini metanol/voda.(38)

Danas, spektofotometrija se koristi u komercijalne svrhe za ukupni fenolni sadržaj limunovog ekstrakta Folin-Ciocalteau’s reagensom.(39)

U ovom radu spektrofotometrija je poslužila za praćenje toka reakcije. Nakon par minuta od početka reakcije uočena je razlika u spektrima polaznog halkona i nastalog flavanona. ( Slika 4)

.

13

Slika 4. UV-vis spektar halkona i flavanona

3.3. Nuklearna magnetna rezonanca (NMR)

Proton i C-13 ugljenik su jezgra koja imaju najširu primenu u NMR-spektroskopiji. Fizičku osnovu NMR-a predstavlja spin aktivno jezgro i njegova mogućnost absorpcije radijacije radiofrekventnih talasa. Kada se ovakva jezgra stave u jako magnetno polje ona podležu rezonanciji na određenoj frekvenciji koja se naziva nuklearna magnetna rezonanca (NMR) spektrometra. Dok nisu izložena dejstvu spoljašnjeg magnetnog polja spin-aktivna jezgra su nasumično orjentisana ali kada se postave u jako magnetno polje ona se orjentišu u pravcu magntnog polja sa smerom suprotnim ili u smeru datog magnetnog polja. Princip rada je sledeći prvo se pripremi uzorak koji se stavi u ćeliju koja se nalazi između magneta koji obezbeđuje jako magnetno polje. Podesi se jačina magnetnog polja, zatim se menja frekvencija radio odašiljača koji se nalazi oko uzorka i kad dođe do rezonance to se detektuje na radio prijemniku koji beleži emitovane radio-talase koji potiču od rezonirajućeg jezgra i tako se dobijaju NMR-spektri.(40)

Sintetisano jedinjenja je okarakterisano 13C NMR ( Slika 5) i 1H NMR (Slika 6).

14

Slika 5. 13C NMR sintetisanog flavanona

13C NMR data (δ, ppm): 191.14;161.48, 137.73, 136.30, 132.61, 128.75, 127.96,

127.19, 126.76, 125.94, 125.83, 121.97, 120.81, 118.09, 45.43

15

Slika 6. 1H NMR spektar sintetisanog flavanona

1H NMR data (δ, ppm): 7.99 (d, 1H, J=8.00, Ar-C5), 7.74-7.66 (m, 2H, ArH, C7,

C3'), 7.58-7.47 (m, 3H, Ar C6', C4', C5'), 7.13-7.03 (m, 2H, ArH, C6, C8), 5.92 (d, 1H,

J=11.80, C2 ), 2.99 (d, 2H, J=12.40, C);

16

3.4. Infracrvena spektrofotometrija (IR)

Infracrvena spektroskopija predstavlja tehniku koja daje informacije o hemijskim vezama ili molekulskoj strukturi materijala i jedna je od metoda koja se koristi za praćenje promena vibracionih energetskih nivoa. Tehnika se zasniva na činjenici da molekul koji je izložen infracrvenom zračenju apsorbuje zračenje na frekvenciji karakterističnoj za svaki molekul, koja se zove rezonantna frekvencija (rezonantna frekvencija predstavlja frekvenciju pri kojoj dolazi do vibracije veze ili grupe veza). Infracrveni spektar se dobija kada se promena intenziteta propuštenog IR svetla predstavi u zavisnosti od frekvencije i/ili talasne dužine a meri se pomoću IR spektrofotometra.(41)

Sintetisan flavanon analiziran je ovom metodom ( Slika 7)

Slika 7. IR spektar sintetisanog flavanona

17

3.5. Masena spektrofotometrija (MS)

Masena spektrometrija (MS) je analitička metoda za razdvajanje jonizivanih molekula na osnovu razlike u odnosu mase i naelektrisanja (m/z). Najveću primenu ova metoda nalazi u bio-medicinskim istraživanjima. Molekuli uzorka se najpre jonizuju, zatim u električnom polju ubrzavaju i uvode u odabirač brzine koji se sastoji od električnog polja i na njega normalno postavljenog magnetnog polja U drugom delu MS menja se jačina napona (i/ili magnetnog polja) tako da joni različitih masa imaju jednaku putanju (fiksni položaj detektora) pa se iz odnosa veličina napona pri kojima dolaze do detektora izračunava odnos njihovih masa.(42)

18

Slika 8. Maseni spektar sintetisanog flavanona

LC-MS: m/z = 293.0 (M++1

3.6. Kristalografija

U Kembričkoj bazi strukturnih podataka (CSD) nalazi se mali broj struktura flavonoida. Nedostatak rešenih struktura posledica je problema rasta kristala.(43) Sintetisano

19

jedinjenje zauzima konformaciju tipičnu za flavanone, sa γ-piranonskim prstenom u konformaciji koverte. U ovoj koformaciji atomi ugljenika na pozicijama C1, C6, C7, C8 i atom kiseonika O1 su skoro koplanarni sa srednjom kvadratnom devijacijom od glavne ravni od 0,035 Å, dok je C9 atom izvan područja ravni, sa atom-ravan rastojanjem od 0,652 (6) Å. Svi uglovi i sve veze sintetisanog flavanona pokazuju uobičajene vrednosti za ovaj tip jedinjenja.(44) U kristalnom pakovanju ovog jedinjenja javljaju se četiri intramolekulske, dve intermolekulske (C-H···O i C-H···F) i jedna π-π interakcija. Svi atomi fluora učestvuju u građenju slabih intramolekulskih C-H···F interakcija (Slika 9), sa H···F rastojanjima jednakim ili kraćim od 2,50 Å, što je kraće od zbira njihovih Van der Waalsovih radijusa (45). Dva atoma fluora interaguju sa atomom vodonika koji je vezan za hiralni atom ugljenika C9, dok treći atom fluora interaguje sa jednim atomom vodonika iz fenil-grupe (Tabela 2). Diedarski ugao između Cg1 i Cg2 prstenova u prethodno objavljenim strukturama flavanona (44) je u opsegu od 55° do 75°, dok u sintetisanom flavanonu diedarski ugao iznosi 66,06 (15)°.Molekuli flavanona su povezani u redove preko C3-H3···O2 intermolekulskih interakcija, formirajući lance oko kristalografske a-ose (Slika 10). Druga intermolekulska interakcija, C5-H5···F3, povezuje molekule u drugi lanac u pravcu zavrtanjske ose duž kristalografske c-ose, tako formirajući dvodimenzionalnu mrežu molekula (Slika 11). Lanci molekula duž kristalografske c-ose su dalje povezani π-π interakcijama (Slika 12). Vertikalno rastojanje od centroida Cg1 prstena, molekula duž (x, y, z), do ravni drugog Cg1 prstena, molekul duž (1 - x, 2 - y, 1/2 + z), i obrnuto su 3,70 i 3,62 Å, dok je rastojanje između centroida prstenova 4,101(3) Å. Ravni Cg1 prstenova molekula duž (x, y, z) i (1 - x, 2 - y, 1/2 + z) su skoro paralelni, sa diedarskim uglom od 5,59 (3)°.

Računarski podaci

Prikupljanje podataka: CrysAlis PRO (Oxford Diffraction, 2010); utačnjavanje ćelije: CrysAlis PRO (Oxford Diffraction, 2010); redukcija podataka: CrysAlis PRO (Oxford Diffraction, 2010); program korišćeni za rešavanje strukture: SHELXS97 (Sheldrick, 2008); program korišćeni za utačnjavanje strukture: SHELXL97 (Sheldrick, 2008); prikazivanje molekula: ORTEP-3 (Farrugia, 1997); softver korišćen za pripremu materijala za objavljivanje: WinGX (Farrugia, 1999), PLATON (Spek, 2009) i PARST (Nardelli,1995).

20

gsgs

Slika 9. Struktura molekula sa oznakama atoma i termalnim elipsama sa 30% verovatnoće za atome različite od vodonika. H-atomi su predstavljeni kao male sfere sa arbitrarnim radijusima. Intramolekulske interakcije su prikazane kao isprekidane linije

Slika 10. Pakovanje molekula sintetisanog flavanona i intermolekulske interakcije duž kristalografske a-ose.

21

Slika 11. Molekulsko pakovanje sintetisanog jedinjenja i intermolekuske interakcije duž

kristalografske c-ose.

Slika 12. π–πinterakcije između dva susedna Cg1 prstena. Simetrijski kod: (i) 1 - x, 2 - y,

1/2 + z.

22

2-[2-(Trifluorometil)fenil]-2H-1-benzopiran-4(3H)-on

Podaci o kristalu

C16H11F3O2

Mr = 292.25

Ortorombičan, Pna21

Hall simbol: P 2c -2n

a = 8.2291 (9) Å

b = 22.020 (3) Å

c = 7.3355 (11) Å

V = 1329.2 (3) Å3

Z = 4

F(000) = 600

Dx = 1.460 Mg m−3

Mo Kα zračenje, λ = 0.71073 Å

Parametri ćelije na osnovu 966 refleksija

θ = 3.3–28.9°

μ = 0.12 mm−1

T = 293 K

Igličasti, bezbojni

0.18 × 0.02 × 0.02 mm

23

Literatura

(1) J.A. Gimenez Bastida, M.Martines-Florensa, Juan Carlos Espin, Francisco A. Tomas-Barberan, Maria Teresa Garsia-Conesa A Citrus Extract Containing Flavanones Represses Plasminogen Activator Inhibitor-1 (PAI-1) Expression and Regulates Multiple Inflamma-tory, Tissue Repair, and Fibrosis Genes in Human Colon Fibroblasts; J. Agric. Food Chem. 2009, 57, 9305–9315(2) A. Chanet, D. Milenkovic, C. Manach, A.Mazur, C. Morand Citrus Flavanones: What Is Their Role in Cardiovascular Protection? J. Agric. Food Chem. XXXX, XXX, XXX−XXX(3) J.A. Manthey, K. Grohmann, N. Guthrie, Curr. Med. Chem. 8 (2001) 135 prema Syn-thesis and characterization of novel flavonoid-substituted phthalocyanines using (±) narin-genin S. Zeki Yıldız, Mustafa Kucukislamog˘lu, Murat Tuna(4) P.C.H. Hollman, M.G.L. Hertog, M.B. Katan, Biochem. Soc. Trans. 24 (1996) 785 (5) C.A. Rice-Evans, N.J. Miller, Biochem. Soc. Trans. 24 (1996) 790 (6) A.W. Raut, A.G. Doshi, P.B. Raghuwanshi, Orient J. Chem. 14 (1998) 337. (7) R.K. Razdan, R.J. Bruni, A.C. Mehta, K.K. Weinhardt, Z.B. Papanastassiou, J. Med. Chem 21 (1978) 643(8) M. Iinuma, H. Tsuchiya, M. Sato, J. Yokoyama, M. Ohyama, Y. Ohkawa, S. Fujiwara, T. Fujii, J. Pharm. Pharmacol. 46 (1994) 892.(9) C.A. Williams, R. J. Grayer Anthocyanins and other flavonoids Nat. Prod. Rep. ,2004, 21, 539–573(10) Peterson, J. J.; Beecher, G. R.; Bhagwat, S. A.; Dwyer, J. T.;Gebhardt, S. E.; Hay-towitz, D. B.; Holden, J. M. Flavanones in grapefruit, lemons, and limes: a compilation and review of the data from the analytical literature. J. Food Compos. Anal. 2006, 19, S74−S80(11) Peterson, J. J.; Dwyer, J. T.; Beecher, G. R.; Bhagwat, S. A.;Gebhardt, S. E.; Hay-towitz, D. B.; Holden, J. M. Flavanones in oranges, tangerines (mandarins), tangors, and tangelos: a compilationand review of the data from the analytical literature. J. Food Com-pos. Anal. 2006, 19, S66−S73(12) Tomas-Barberan, F. A.; Clifford, M. N. Flavanones, chalcones and dihydrochalcones − nature, occurrence and dietary burden. J. Sci. Food Agric. 2000, 80, 1073−1080 (13) Garg, A.; Garg, S.; Zaneveld, L. J. D.; Singla, A. K. Chemistry and pharmacology of the citrus bioflavonoid hesperidin. Phytother. Res. 2001, 15, 655–669(14) Kawaguchi, K.; Kikuchi, S.; Hasunuma, R.; Maruyama, H.; Yoshikawa, T.; Ku-mazawa, Y. A citrus flavonoid hesperidin suppresses infection induced endotoxin shock in mice. Biol. Pharm. Bull. 2004, 27, 679–683(15) Li, R.; Li, J.; Cai, L; Hu, C. M.; Zhang, L. Suppression of adjuvant arthritis by hes-pedirin in rats and its mechanisms J. Pharm. Pharmacol. 2008, 60, 221–228(16) Crespo, M. E.; Galvez, J.; Cruz, T.; Ocete, M. A.; Zarzuelo, A. Antiinflammatory activity of diosmin and hesperidin in rat colitis induced by TNBS. Planta Med. 1999, 65, 651–653.(17) V. Habauzit, I. Nielsen, A. Gil-Izquierdo, A. Trzeciakiewicz, C. Morand, W. Chee, D. Barron, P. Lebecque M. Davicco, G. Williamson, E. Offord, V. Coxam Comparative study

24

on the antibacterial activity ofphytochemical flavanones against methicillin-resistant Staphylococcus aureus Journal of Ethnopharmacology 50 (1996) 27-34

(18) V. Habauzit, I. Nielsen, A. Gil-Izquierdo, A. Trzeciakiewicz, C. Morand, W. Chee, D. Barron, P. Lebecque M. Davicco, G. Williamson, E. Offord, V. Coxam Increased bioavailability of hesperetin-7-glucoside compared with hesperidin results in more efficient prevention of bone loss in adult ovariectomised rats British Journal of Nutrition, Volume 102, Issue 07, October 2009, pp 976-984(19) A. Maiti, M. Cuendet, L. Croy, C. Endringer, M. Pezzuto Synthesis and Biological Evaluation of (()-Abyssinone II and Its Analogues as Aromatase Inhibitors for Chemoprevention of Breast Cancer J. Med. Chem. 2007, 50, 2799-2806(20) S. Zeki Yıldız, M. Kucukislamoglu, M. Tuna Synthesis and characterization of novel flavonoid-substituted phthalocyanines using naringenin Journal of Organometallic Chem-istry 694 (2009) 4152–4161(21) B.Zarebczan MD, Scott N. Pinchot MD, Muthusamy Kunnimalaiyaan PhD, Herbert Chen M D Hesperitin, a Potential Therapy for Carcinoid Cancer pp 21(22) Lu YH, Su MY, Huang HY, Lin-Li, Protective effects of the citrus flavanones to PC12 cells against cytotoxicity induced by hydrogen peroxide Neurosci Lett. 2010 Oct 22; 484(1):6-11. Epub 2010 Aug 5.(23) E. G. Molina, R. Domínguez-Perles, D.A. Moreno, C. García-Viguera Natural bioactive compounds of Citrus limon for food and health Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 51 (2010) 327–345 (24) A. Gil-Izquierdo, M.T. Riquelme, I. Porras, F. Ferreres, J. Agric. Food Chem. 52 (2004) 324–331(25) F.A. Tomas-Barberan, M.N. Clifford, J. Sci. Food Agric. 80 (2000) 1073–1080.(26) Z. Aturki, V. Brandi, M. Sinibaldi, J. Agric. Food Chem. 52 (2004) 5303–5308.(27) Benavente-Garcıa, O. & Castillo, J. (2008) J. Agric. Food Chem. 56, 6185–6205.(28) Rodeiro, I., Cancino, L., Gonzalez, J. E., Morffi, J., Garrido, G., Gonzalez, R. M., Nunez, A.& Delgado, R. (2006). Food Chem. Toxicol. 44, 1707–1713(29) M.T. Drexler, M.D. Amiridis, J. Catal. 214 (2003) 136.(30) R.S. Varma, G.W. Kabalka, L.T. Evans, R.M. Pagni, Synth.Commun. 15 (1985) 279(31) A. Aguilera, A.R. Alcantara, J.M. Marinas, J.V. Sinisterra, Can. J. Chem. 65 (1987) 1165 (32) A. Guida, M.H. Lhouty, D. Tichit, F. Figueras, P. Geneste, Appl. Catal. A 164 (1997) 251.(33) S. Sebti, A. Solhy, R. Tahir, S. Abdelatif, S. Boulaajaj, J.A. Mayoral, J.I. Garcia, J.M. Fraile, A. Kossir, H. Oumimoun, J. Catal. 213 (2003) 1.(34) S. Chandrasekhar, K. Vijeender, K. Venkatram Reddy New synthesis of flavanones catalyzed by l-proline Tetrahedron Letters Volume 46, Issue 8, 21 February 2005, Pages 1369–1371(35) X. Wang, S. Cheng Solvent-free synthesis of flavanones over aminopropyl-functional-ized SBA-15 Catalysis Communications 7 (2006) 689–695(36) L. Höerhammer, Deut Apotheker Ztg 102 (1962) 759–765.(37) R. Baranowski, Chem. Anal. 50 (2005) 301–313.(38) E. G. Molina, R. Domínguez-Perles, D.A. Moreno, C. García-Viguera Natural

25

bioactive compounds of Citrus limon for food and health Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 51 (2010) 327–345(39) J.A.R.J.V.L. Singleton, Am. J. Enol. Vitic 16 (1965) 144–158.(40) NMR-Spektroskopija, Interni materijal katedre za organsku hemiju, dr ing. Milan Bastić(41) Infrared Spectroscopy: Fundamentals and Applications, Barbara Stuart(42) Sparkman, O. David (2000). Mass spectrometry desk reference. Pittsburgh: Global View Pub.(43) Flavonoids: chemistry, biochemistry, and applications edited by Øyvind M. Andersen and Kenneth R. Markham.(44) Wera, M., Chalyi, A. G., Roshal, A. D. & Błaz˙ejowski, J. (2012). Acta Cryst. E68, o253–o254(45) Bondi, A. (1964). J. Phys. Chem. 68, 441–451

26