Taller de Parasito (Autoguardado)

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    1. Complete el cuadro con las caractersticas solicitadas para las siguientes Enfermedades Parasitarias:

    Leishmaniasis

    DESCRIPCI CLIIC!: Es una zoonosis que afectan la piel, las mucosas o las vsceras, resultantes del parasitismo de los macrfagos porun protozoario agelado del gnero Leishmania, que se introduce en el organismo por la picadura de un insecto que pertenece al gneroLutzomyia.

    SE"I#L#$%!:Leishmaniasis cut&nea Las lesiones se inician como ppulas que se convierten gradualmente en pequeos ndulos rmesque se van ulcerando gradualmente. Las manifestaciones clnicas varan de acuerdo con la respuesta inmune del ospedero, la especie delparsito ! el tiempo de evolucin de la infeccin. Las "lceras tpicas son redondeadas, con un fondo limpio de aspecto granular ! #ordeselevados ! eritematosos, que usualmente son indoloras. $tros pacientes %ams se ulceran ! presentan lesiones nodulares o en forma de placa,en algunos casos vegetantes. Las "lceras de%an una cicatriz caracterstica, atrca en su centro, de #orde iperpigmentado, con estriacionesestrelladas del centro a la periferia. La forma linfangtica se presenta cuando la "lcera se acompaa de ndulos que siguen el tra!ecto de losvasos linfticos que drenan la lesin inicial. La leismaniasis cutnea difusa se presenta en pacientes que tienen un defecto especco de lainmunidad celular ! es causada por Leishmania amazonesis ! Leishmania mexicana& se presenta con ppulas, placas ! ndulos generalizados.

    Leishmaniasis mucosa 'resenta lesiones en mucosa nasal, faringe, laringe, paladar o la#io. (l e)amen fsico se puede encontrar eritema !

    edema ! en estados ms avanzados, ulceracin, perforacin ! destruccin de ta#ique ! mutilaciones. Los sntomas especcos son congestin,o#struccin nasal, prurito ! epista)is. La metstasis de las mucosas ocurre despus de la diseminacin ematgena o linftica, aunque puedetam#in ocurrir por e)tensin directa desde la piel a la mucosa vecina. *sualmente se encuentran comprometidas las mucosas del tractorespiratorio superior, en particular el septum nasal ! consiste en edema, iperemia, ulceracin ! necrosis. Los sntomas principales sonsensacin de congestin ! o#struccin nasal, prurito nasal, rinorrea seroemtica o purulenta ! epista)is. +am#in se pueden ver afectadas lafaringe, la laringe, el paladar ! el la#io, puede a#er disfagia ! cam#ios en el tono de voz. La infeccin #acteriana so#re agregada, que esfrecuente ! grave, puede llevar a la muerte por compromiso del tracto respiratorio superior.

    Leishmaniasis 'isceral: Los sntomas pueden aparecer de una forma mu! gradual o a#ruptamente. (l picar el e#tomo el parsito invadelas clulas del sistema retculo istiocitario, se reproduce ! se disemina por va linftica o sangunea asta los macrfagos de mdula sea,gado ! #azo. La leismaniasis visceral es cada vez ms frecuente como infeccin oportunista en pacientes infectados por el -/

    "#D# DE (R!S"ISI:

    +odas las leismaniasis comienzan con la picadura de un e#otomneo vector 0Lutzom!ia1 infectado con la forma de promastigote delparsito& estas picaduras ocurren en sitios e)puestos ! de%an pequeas ppulas ro%as.

    PERI#D# DE IC)*!CI:Leismaniasis cutnea2 uct"a entre 3 semanas ! 4 meses.

    Leismaniasis mucosa2 las lesiones mucosas pueden presentarse simultneamente con la lesin primaria en piel 0leismaniasismucocutnea1 o aparecer meses o aos despus de que una lesin cutnea a cicatrizado espontneamente o en respuesta al

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    tratamiento especco.

    Leismaniasis visceral2 el perodo de incu#acin es varia#le de 3 a 5 meses.

    PERI#D# DE (R!S"ISI*ILID!D: El om#re es infectante mientras a!a parsitos en las lesiones de la piel o en la sangrecirculante. En casos no tratados de leismaniasis cutnea, los parsitos pueden perdurar de pocos meses a 6 aos ! mucos de lospacientes tienden a curar espontneamente. En la leismaniasis visceral, los parsitos persisten inclusive despus del resta#lecimiento

    clnico de los pacientes. 7espus que Lutzom!ia se a infectado, los promastigotes se desarrollan ! multiplican en el intestino ! en unplazo de 5 a 68 das surgen los parsitos infectantes que son introducidos por la picadura.

    +EC(#R:

    +EC(#RRESER+#RI#: Los reservorios incriminados en la transmisin de la leismaniasis cutnea son mamferos silvestres2 perezosos de 6 ! 9uas, el oso ormiguero, cucas o zarig:e!as, la rata silvestre ! el puerco espn& en la leismaniasis cutnea, el perro puede actuar comoospedero reservorio accidental ! fuente de infeccin para los vectores peri o intradomiciliarios. En la leismaniasis visceral, el perro es elprincipal reservorio domstico, el perro sufre la enfermedad ! muere por invasin de sus vsceras

    Enfermedad de Chaga

    DESCRIPCI CLIIC!: En la evolucin natural de la enfermedad de ;agas se distinguen dos fases con presentaciones clnicas, criteriosdiagnsticos ! teraputicos diferentes. La enfermedad se inicia con una fase aguda caracterizada por sndrome fe#ril infeccioso ! parasitemia.En los casos agudos no tratados, la enfermedad progresa acia la fase crnica, donde un porcenta%e grande de personas permanecenasintomticas 0apro)imadamente indeterminada?1, pero un grupo desarrolla, despus de unperiodo que puede ir de @8 A 38 aos, lesiones irreversi#les, especialmente cardiacas.

    ,!SE !$)D!: En la fase aguda 0inicial1 predomina el parasito circulante en la corriente sangunea en cantidades e)presivas. Lasmanifestaciones de enfermedad fe#ril pueden persistir por asta @6 semanas. En este periodo los signos ! sntomas pueden desaparecerespontneamente de forma que la enfermedad evolucionar acia la fase crnica o puede progresar para formas agudas graves con riesgo dellevar a la muerte.

    ,!SE CRIC!:La fase crnica de la enfermedad de ;agas se inicia desde el momento en que persiste la infeccin por el +. cruzi ! elepisodio agudo se resuelve clnicamente. Bi el parsito no es eliminado mediante tratamiento etiolgico durante el episodio agudo o, conmenos posi#ilidad de )ito, en etapas posteriores, en general se considera que la persona va a permanecer infectada por el resto de la vida.En el torrente sanguneo el parsito persistir en mu! #a%as cantidades, lo que ace los mtodos parasitolgicos 0especialmente los directos1sean casi siempre negativos.

    Be an descrito alrededor de @3C especies vlidas del gnero Lutzom!ia ! algunas de las que an sidoincriminadas como vectores son2 Lu. trapidoi con Leismania panamensis& Lu. um#ratilis con Leismania.gu!anensis& Lu. spinicrasa con Leismania #raziliensis& Lu. evansi con Leismania infantun& Lu. aviscuetelacon Leismania amazonensis Lu. armanni con Leismania colom#iensis ! Lu. longiocosa con L.panamensis. El principal vector de Leismania cagasi es Lu. longipalpis.

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    La ma!ora de las casos 0apro)imadamente Dorma;ardiaca?.

    ,#R"! IDE(ER"I!D! # DE P#R(!D#R: Be trata de personas aparentemente sanas, en las que la inoculacin del parsito ! lossntomas de las formas agudas o crnicas no son reconocidos por el portador del parsito. La situacin del portador se evidencia,generalmente, cuando la persona desea donar sangre ! el tamiza%e demuestra serologa positiva para +r!panosoma cruzi. *n portador puede

    ser asintomtico toda la vida o presentar manifestaciones clnicas aun despus de mucos aos de a#erse infectado. En esta forma, son mu!escasos los tr!pomastigotes en sangre ! amastigotes en te%idos

    ,#R"! C#$-I(!:;orresponde a nios que nacen infectados por pasa%e del parsito a travs de la placenta de la madre. Be trata denios prematuros que presentan generalmente epatoesplenomegalia con gran cantidad de tr!pomastigotes en sangre ! amastigotes ente%idos.

    SE"I#L#$%!:

    "#D# DE (R!S"ISI:+ectorial:7urante la picadura, el insecto, defeca en la piel del ospedero, eliminando las formas infectantes que penetran por rascado, por eloricio de la picadura o por soluciones de continuidad e)istentes en la piel, por frotamiento so#re las mucosas 0con%untival, nasal1 del mismo

    ospedero o por ingestin

    Por hemotransfusin / trasplante de rganos:Es la segunda fuente de transmisin de +. cruzi, todos los componentes de la sangre soninfectantes. La reactivacin postrasplante, puede darse desde el rgano donante en receptor sano al contrario, rgano sano ! receptorinfectado, pues es dependiente de la inmunosupresin a la que es sometido el paciente trasplantado. Este tipo de infeccin genera cuadrosclnicos atpicos pero generalmente se puede identicar el parsito por mtodos directos

    Por 'a transplacentaria:El principal mecanismo de transmisin vertical es el transplacentario ! puede ocurrir en cualquier fase de laenfermedad materna2 aguda o crnica 0

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    Por Reacti'acin de la infeccin2 'aciente con el antecedente conrmado de infeccin con tripanosoma cruzi ! con inmunodepresin 0poralguna de las siguientes situaciones2 postranplante, infeccin -/, terapia inmunosupresora por cualquier causa1, que presenta clnica deagudizacin de la enfermedad de ;agas ! evidencia de la presencia de +. cruzi demostrada por e)amen parasitolgico positivo.

    PERI#D# DE IC)*!CI: Los perodos de incu#acin son varia#les, dependiendo de la va de transmisin, de las formas infectantes delparsito, de la cepa, del inculo ! de la condicin inmune del paciente2

    +a oral:3 a 66 das

    +a 'ectorial:9 a @C das.+a transfusional sangunea:38 a 98 das o ms.+a accidental:apro)imadamente 68 das.

    Periodo Extrnseco de Incubacin: El triatomino se contamina cuando pica a un om#re o a un reservorio infectado con +. cruzi. El periodo quetranscurre entre la ingestin de sangre contaminada con el parsito ! la e)crecin de formas infectantes en eces oscila entre @8 a 68 das .

    PERI#D# DE (R!S"ISI*ILID!D:

    +EC(#R: Los vectores de +. cruzi, conocidos en ;olom#ia con el nom#re popular de >pitos?, son insectos ematfagos de la familiaFeduviidae, su#familia triatominae, los gneros ms importantes son2 Fodnius, +riatoma ! 'anstrong!lus.

    +odos los estadios tanto em#ras como macos son ematfagos estrictos ! por tanto son suscepti#les de infectarse con +. cruzi . En;olom#ia la especie ms ampliamente encontrada en el domicilio es el Fodnius proli)us& otras especies encontradas son +riatoma dimidiata,+riatoma maculata,+riatoma venosa ! 'anstrong!lus geniculatus.

    El 7idelp!s marsupialis, un mamfero silvestre que suele a#itar las areas ur#anas ! periur#anas, se comporta como un vector por laeliminacin de formas metaciclicas del parsito en la orina ! la posi#le contaminacin de alimentos.

    +EC(#R RESER+#RI#: (dems del om#re, otros mamferos, como animales domsticos peridomiciliarios 0perros ! gatos1 pueden sere)celentes reservorios del +. cruzi. (nimales domsticos no connados pueden actuar como esla#ones entre los ciclos de transmisin silvestre! domiciliar. Las aves ! los verte#rados de sangre fra son refractarias al parasito, mamferos terrestres silvestres como zarigue!as, micosmacacos ! armadillos

    "alaria

    DESCRIPCI CLIIC!: Be trata de una enfermedad infecciosa, producida por un protozoo intracelular del gnero Plasmodium, Los sntomas inicialesson inespeccos, como cefalea, nuseas, vmitos ! mialgias. El cuadro puede desencadeAnarse con un proceso infeccioso viral o #acteriano asociado, comopuede ser una infeccin respiratoria aguda, mu! frecuente en los niGnos. 'osteriormente, aparece la crisis pal"dica con e#re elevada 0H 3I J;1, escalofros,cefalea o sntomas digestivos o respiratorios. Es imprescindi#le sosApecar una malaria en un niGno que procede de un pas endmico con e#re, sea cual seasu edad ! su sintomaAtologa acompaGnante, si #ien en los niGnos semiinmunes, procedentes de un rea endmica de malaria, la e#re no siempre est

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    ( veces est asociada a faringitis de tipo granulomatosa. En general, la evolucin es #enigna ! despus de varias semanas o meses desaparece el cuadrocaracterstico, aunque persiste por muco tiempo la astenia ! las adenopatas. E)cepcionalmente e)isten complicaciones graves. La to)oplasmosis ganglionarpuede confundirse con mononucleosis infecciosa, por este motivo se le llama tam#in pseudomononuclesica. Meneralmente esta forma es transitoria ! enmucos casos pasa inadvertida para el paciente.

    (ooplasmosis ocular:En los o%os, los inltrados de monocitos, linfocitos ! clulas plasmticas pueden producir lesiones unifocales multifocales. 'uedenser o#servadas lesiones granulomatosas ! retinocoroiditis en la cmara posterior, seguidas por retinitis aguda necrosante.

    $tras complicaciones de infeccin oculares inclu!en iridociclitis, cataratas ! glaucoma.

    (ooplasmosis cong2nita:;uando la madre se infecta por primera vez durante el em#arazo, e)iste el riesgo de transmisin congnita en el 4C= de losfetos cu!as madres tuvieron la infeccin en el "ltimo trimestre& esta cifra disminu!e asta el 38A C9= cuando la infeccin fue adquirida en el segundo ! a @8A@C= si lo fue en el primer trimestre. La infeccin en la madre es generalmente #enigna o transcurre asintomtica. Bi la infeccin fue adquirida antes de lagestacin 0seis meses o ms antes de la concepcin1, el nio no desarrolla infeccin congnita. +am#in se plantea que una madre que pari un nio conto)oplasmosis no vuelve a tener otro con la enfermedad. Be an descrito casos de a#ortos o mortinatos en infecciones recientes, pero no a! evidenciadenitiva de a#ortosa repeticin asociados a la to)oplasmosis.

    SE"I#L#$%!:

    "#D# DE (R!S"ISI:La to)oplasmosis es una zoonosis parasitaria producida por un protozoo intracelular de los (picomple)a denominado +o)oplasma gondii. Be trata de unparasito mu! u#icuo que se e)tiende por todo el mundo ! que afecta a la especie umana ! a la ma!oria de las especies animales omeotermas.

    N ngestin de carne poco cocida. Be cree que la forma ms frecuente de contraer la infestacin es mediante la ingestin de carne cruda como el caso del>#istec trtaro? o de las am#urguesas poco ecas. 7e esta manera los umanos se infestan por +o)oplasmosis al comer la carne de un uspedintermediario que contiene quistes intratisulares.N ngestin de oocistos. 'ro#a#lemente se trata de una va meno frecuente aunque es la forma principal de la infestacin de los uspedes intermediariosanimales. Los umanos pueden contaminarse las manos accidentalmente al limpiar los recipientes donde defecan sus gatos, ! despus transferir los oocistosa la comida. Los nios pequeos tam#in pueden infestarse al comer tierra que contenga occistos. El oocisto puede llegar a los alimentos a travs de vectorescomo las moscas.N -a +ransplacentaria. Bi una mu%er em#arazada sufre una +o)oplasmosis aguda, los parsitos 0taquizotos1 pueden atravesar la placenta para infestar al feto.

    PERI#D# DE IC)*!CI

    o se conoce e)actamente el tiempo de incu#acin de la enfermedad, que se supone de varias semanas o meses. El parsito se multiplica en las clulasepiteliales del intestino, se disemina por va ematgena ! puede localizarse en cualquier rgano de la economa, con especial preferencia por el te%ido

    muscular esqueltico, cardiaco, sistema nervioso central ! retina. La evolucin de la infeccin depende del estado inmune umoral ! celular ! puesto que setrata de un agente de vida intracelular, el segundo mecanismo defensivo es el ms importante.

    +EC(#R

    Los gatos domesticos ! los felidos salva%es son los unicos ospedadores denitivos de +. gondii

    +EC(#R RESER+#RI#: el om#re ! otros animales de sangre caliente.

    C#CCID##SIS

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    DESCRIPCI CLIIC!

    enfermedades producidas por diversos coccidios2 criptosporidiosis,ciclosporosis,sarcocistosisEl sntoma primario es la diarrea, que pueden llegar a ser sangrienta en los casos severos. La ma!ora de los animales infectados por coccidios sonasintomticos& sin em#argo, los %venes o inmunodecientes pueden sufrir sntomas severos, inclu!endo muerte. (unque los coccidios pueden infectar a unaamplia variedad de animales, inclu!endo seres umanos ! ganado, son generalmente parsitos especcos

    La destruccin del epitelio intestinal, ! tam#in del te%ido conectivo de la mucosa produce emorragia, inamacin, secrecin ! diarrea. 7e#ido a esto, lo quese produce es diarrea con sangre ! te%idos, tenesmo ! desidratacin. Las protenas ! electrolitos del suero se alteran, produciendo ipoproteinemia !trastorno idroelectroltico, especialmente iponatremia

    SE"I#L#$%!

    "#D# DE (R!S"ISILa enfermedad se transmite por el contacto con eceso por ingestin de te%idos infectados

    PERI#D# DE IC)*!CI

    +EC(#R

    RESER+#RI#

    La ;occidiosis es una enfermedad intestinal que puede afectar tanto al om#re como a los animales, producida por coccidiosdel gneroEimeriao sospora.Menera efectos econmicos en la industria ganaderaal afectar al ganado vacuno, al ganado ovino, al ganado caprino, al ganado porcino, lasaves de corral!tam#in a los cone%os. Los ca#allos, perros ! gatos tam#in pueden enfermarse de coccidiosis aunque es mu! poco diagnosticada

    3. DESCRI*! EL PR#(#C#L# 4)E DE*E SE$)IRSE 5ICL)6ED# (#"! DE ")ES(R!7 DISE8#7 C#L#R!CI7LEC()R! E I,#R"E DEL ,R#(IS9 P!R! L! RE!LI!CI DEL DI!$S(IC# P!R!SI(#L$IC# "EDI!(E"ICR#SC#P%! 5E;!"E DE $#(! $R)ES! 6 ESP9 E "!L!RI!. IDI4)E (!"*I- L#S CRI(ERI#S P!R! DE,IICI

    DE

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    ES+E77$ 7E B(MFE 'EFDEF;( ;on el #orde de un cu#reo#%etos se e)tiende la gota de sangre con movimientos en , para formar un cuadrado de @ ) @cm. 7e%ar secar a temp am#iente. ;oloracin

    Fecuento parsitario en e)tendido de sangre periferica. sangre Q de parasitos ) Q de eritrocitosPuL de R @8888 eritrocitos Q de parsitos )ematocrito ) @88888 R @8888 eritrocitos Q de parasitosPul de sangre Q de parasitosPul de sangre

    9@. ;lculo de la parasitemia en porcenta%e @8888 gl#ulos ro%os 68 trofozoitos @88 gl#ulos ro%os S Fecuento semicuantitativo nformar especie deplasmodium que ocasiona la infeccin. nformar el numero apro). de formas parasitarias encontrados en la gota gruesa. Fango de parsitosencontrados Equivalencia en cruces @ @8 en @88 campos microscpicos .....................................T @@ @88 en @88 camposmicroscpicos..................................TT @ @8 por campo microscpico...............................................TTT H @8 por campomicroscpico................................................TTTT

    El diagnstico parasitolgico puede realizarse mediante microscopa, con el e)men de gota gruesa o de e)tendido de sangre perifrica o mediante tcnicasinmunocromatogrcas. El e)men de gota gruesa es el mtodo diagnstico ms ampliamente difundido para el diagnstico de la malaria ! el recomendadocomo primera opcin en el proceso diagnstico. La gota gruesa consiste en el e)men al microscopio de una gota de sangre o#tenida mediante puncindigital de un dedo de la mano o del pie so#re una lmina portao#%etos.

    El diagnstico de malaria se conrma con la identicacin de la especie de 'lasmodium presente en la sangre mediante e)amen microscpico de gota gruesapara acer el recuento parasitario en la totalidad de las muestras positivas por '. falciparum e infecciones mi)tas ! en los casos de malaria complicada por '.

    viva).La toma de la muestra se de#e realizar en el menor tiempo posi#le ! en cualquier momento del da una vez el paciente inicia la presentacin de sntomas0e#re, escalofro ! sudoracin1. 'ara la toma de muestra, despus de consignar la informacin clnicoAepidemiolgica del paciente, se marcan tres lminas,dos para gota gruesa ! una para el e)tendido de sangre perifrica. Be procede a tomar la muestra de sangre del dedo ndice o dedo medio del paciente. Belimpia con alcool ! algodn, despus se seca la zona con una torunda de algodn seco, se punciona con una lanceta estril deseca#le en el #orde lateral deldedo entre la !ema ! la ua, se limpia la primera gota de sangre con algodn seco, se presiona el dedo ! se coloca la siguiente gota a @ cm. de laidenticacin de la lmina. Luego se realiza la gota gruesa utilizando el #orde de otro portao#%eto 0lmina e)tensora1 ! se e)tiende la sangre realizando elmenor n"mero de movimientos so#re la muestras para evitar daar la morfologa del parsito formando un cuadrado omogneo ! de grosor adecuado.

    *na vez la muestra de sangre est completamente seca, se realiza el proceso de precoloracin con azul de metileno fosfatado, se en%uaga la muestra consolucin amortiguadora ! luego se realiza la coloracin con alguno de los colorantes derivados de FomanosK! 0Urigt, Miemsa o FomanosK! modicado1,! se prepara la solucin de tra#a%o as2 por cada lmina a colorear medir 3 ml. de solucin amortiguadora, @ gota de solucin ( ! @ gota de solucin V, mezclar! colorear en lmina cncava en posicin invertida por un tiempo de @6 a @C minutos seg"n estandarizacin. ;uando la muestra se seque completamente seprocede a su o#servacin en @88S #uscando un campo ideal 0@8A68 leucocitos1, luego se comienza a e)aminar la muestra en zigAzag teniendo en cuenta norepetir alg"n campo. Bi la muestra es positiva, se de#e o#servar el suciente n"mero de campos para diagnosticar la especie o especies presentes en lamuestra ! luego realizar el recuento parasitario en trminos de n"mero de parsitosPul de sangre. 'ara diagnosticar una muestra como negativa, se de#eno#servar como mnimo 688 campos microscpicos.

    En los casos de malaria clnicamente complicada 0pacientes con alteraciones de conciencia, convulsiones, sndrome de dicultad respiratoria, ipoglicemia,vmito incontrola#le, anemia, trom#ocitopenia, etc.1 o con parasitemias ase)uales superiores a C8.888 parsitosPmm e imperativo realizar e)menes dela#oratorio complementarios para evaluar la gravedad del caso2 cuadro emtico, glicemia, prue#as de funcin renal 0urea ! creatinina1 ! eptica0#ilirru#inas, fosfatasa alcalina ! aminotransferasas1. Los resultados de estos e)menes fundamentan el diagnstico, el mane%o clnico ! el seguimiento.

    (ctualmente, e)isten prue#as rpidas para el diagnstico de malaria& sin em#argo, se de#en tener en cuenta algunas consideraciones con respecto a ellas,producto de o#servaciones realizadas en estudios de campo, como su inesta#ilidad en condiciones de alta temperatura ! umedad, la imposi#ilidad deidenticacin de infecciones mi)tas de algunas prue#as ! disminucin de la sensi#ilidad en parasitemias #a%as. Las prue#as rpidas son una #uena alternativa

    para o#tener diagnsticos oportunos en reas rurales de po#lacin dispersa, de difcil acceso geogrco ! que no cuentan con atencin mdica oportuna ocon infraestructura para el diagnstico microscpico.

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    En todo caso, estas prue#as requieren de un cuidadoso entrenamiento para su monta%e ! la realizacin de control de calidad de las mismas. +odo paciente queresulte positivo por prue#a rpida de#e ser conrmado mediante gota gruesa. >La prue#a rpida no remplaza la gota gruesa?.

    La infecciones mi)tas 0coinfeccin de '. falciparum con '. viva)1 pueden ser ms frecuentes que lo que la prctica de rutina de la microscopa registra. En;olom#ia, la proporcin de casos de malaria mi)ta registrados anualmente es de apro)imadamente@= del total de los casos. 7ada la diseminacin de las dosespecies en todas las reas endmicas ! los movimentos de po#lacin entre las regiones, la frecuencia de este tipo de infecciones en el pas de#e serconsidera#lemente ma!or.

    3. Descri0a los m2todos de diagnstico directo e indirecto para la Enfermedad de Chagas. 5Inclu/a en particularpara los m2todos microscpicos: lectura e informe del eamen directo9.

    La enfermedad de cagas 0E;a1, es el resultado de la infeccin por el +r!panosoma cruzi, un protozoario que tiene como reservorio diversos animalessalva%es en zonas rurales de varios pases de Buramrica ! (mrica ;entral ! que es transmitido al om#re por insectos ematfagos.

    Wtodos parasitolgicos directosLos e)menes parasitolgicos son aquellos en los que la presencia del parsito es detectada mediante o#servacin directa. Estn particularmente indicadosen el diagnstico de la fase aguda e inclu!e los siguientes mtodos2

    7eteccin de los tr!panosomas en fresco2 es la primera alternativa de diagnstico directo por ser rpida, simple, costo efectiva ! ms sensi#le que ele)tendido. El parsito puede ser detectado por su motilidad. Lo ideal es que el paciente est fe#ril en el momento de la toma de la muestra. La sangre de#eser colocada entre lmina ! laminilla ! de#e e)aminarse un mnimo de 688 campos en 988S. Bi es negativo de#e repetirse diariamente, e)aminndose varias

    preparaciones. 'uede ser necesario incluso al realizacin de C o ms preparaciones diarias.

    Wtodos de concentracin2 estos e)menes presentan ma!or sensi#ilidad ! estn recomendados cuando el e)amen directo en fresco sea negativo. En la faseaguda 0que es cuando est indicado el diagnstico parasitolgico1 ante la presencia de sntomas por ms de 38 das estos de#ern ser los mtodosseleccionados. Los mtodos son Btrout, microematrocrito ! creme leucocitrio..En el mtodo de Btrout se usa sangre venosa, en tu#o seco, sin anticoagulante, de%ando que coagule ! centrifugando a #a%a rotacin durante @ A6 minutospara separar el cogulo. El suero, conteniendo leucocitos, plaquetas ! algunos gl#ulos ro%os es entonces centrifugado a ma!or rotacin 0488g1 por C minutos,para concentrar los parsitos en el sedimento. El sedimento es o#servado entre lmina ! laminilla en #usca del +. cruzi.En el mtodo del microematrocrito se cargan con sangre varios capilares eparinizados ! se llevan a centrifugacin por algunos minutos en #a%as rotaciones.Los capilares se cortan en la interfase gl#ulosAplasma para e)amen entre lmina ! laminilla al microscopio. 0el corte de los capilares implica riesgo decontaminacin en el procedimiento1.El mtodo del creme leucocitario consiste en la centrifugacin de la sangre con anticoagulante ! la #"squeda de los parsitos en el creme formado en lainterface del sedimento de los eritrocitos ! el plasma

    Mota gruesa o e)tendido2 aunque tiene una sensi#ilidad inferior con relacin a los mtodos !a descritos, las preparaciones con colorantes son importantespara la de caractersticas morfolgicas del parsito, especialmente en reas donde la infeccin por +. rangeli tam#in est presente. La gota gruesa esadems "til en regiones donde se sospeca que pueda a#er al mismo tiempo transmisin de malaria ! transmisin de la enfermedad de ;agas. Larealizacin de la gota gruesa como rutina en estas regiones para el diagnstico de malaria en fe#riles puede detectar casos agudos de enfermedad de ;agas

    [email protected] Wtodos parasitolgicos indirectosLos mtodos parasitolgicos indirectos son el )enodiagnstico ! el emocultivo. En la fase aguda de la enfermedad, cuando la parasitemia es importante, lasensi#ilidad de estos mtodos es seme%ante a la de los mtodos directos. En la fase crnica, cuando es difcil la o#servacin de los parsitos en la sangre,estos mtodos son ms sensi#les que los mtodos directos, sin em#argo, dada la escasez de parsitos en sangre su positividad es nota#lemente inferior a loo#servado en la fase aguda. El principio en los dos casos es me%orar la sensi#ilidad mediante la multiplicacin de los parsitos en el vector 0)enodiagnstico1 oen un medio de cultivo apropiado 0emocultivo1. ;ualquiera de los dos procedimientos sin em#argo est limitado a la#oratorios especializados ! tienen pocautilidad en la prctica, de#ido a que la serologa positiva es suciente criterio para la conrmacin diagnstica en la fase crnica. (lgunas situaciones en que

    estos mtodos, o la Feaccin en ;adena de la 'olimerasa 0';F1 tendran indicacin son2

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    A ecesidad de conrmacin de casos agudos negativos en los mtodos parasitolgicos directos 0repetidos1 ! no conclusivos desde el punto de vistaserolgico, siempre que la conrmacin tenga implicaciones clnicas ! epidemiolgicas importantes.A 'acientes crnicos inmunosuprimidos en riesgo, o con sospeca de reactivacin de la infeccin ! por lo tanto en quienes la conrmacin de la infeccin va adenir conductas clnicas 09.61. En estos pacientes las prue#as serolgicas pueden ser no conclusivas de#ido a la inmunosupresin.A ;asos crnicos mu! e)cepcionales, con serologas discordantes o no conclusivos, en los que a!a relevancia clnica o epidemiolgica en la conrmacinA Fecin nacidos de madre cagsica seropositiva, con cuadro clnico compati#le ! prue#as directas negativas, en quienes es necesario lograr una denicindiagnstica antes de los 4 meses en que puede acerse la conrmacin serolgica 0en estos casos la "nica alternativa entre estas tcnicas es el ';F, nosiendo posi#le la realizacin de )enodiagnstico ! emocultivo, de#ido a las cantidades de sangre requeridas1.A Bituaciones e)cepcionales en las que tenga relevancia clnica la conrmacin de fracaso teraputico.

    Senodiagnstico2 *sa el triatomino como medio de reproduccin de los parsitos presentes en la sangre. Los insectos criados en la#oratorios son colocados enca%as en el ante#razo del paciente, de%ndolos durante 38 minutos para que se o#tengan la sangre. 7espus de 38 48 das se e)amina el contenidointestinal de los triatominos en #"squeda de los parsitos en formas epimastigotas !tripomastigotas metacclicas. Este mtodo no se recomienda para los servicios de salud ! su realizacin es solo posi#le en algunos centros de investigacin.(lternativamente puede realizarse el llamado )enodiagnstico articial, que consiste en que la sangre del paciente es e)trada por venopuncin, eparinizada! colocada en recipientes mantenidos a la temperatura corporal ! con mem#ranas nas de late), a travs de las cuales los insectos se alimentan. Lasensi#ilidad vara muco ! depende especialmente de la fase de la enfermedad ! del tiempo de infeccin. En la fase aguda la sensi#ilidad de#e ser de @88=,mientras en fase crnica en general se acepta que no es ma!or del C8 =.

    /emocultivo2 'ara el emocultivo se emplean medios lquidos tales como L+ 0triptosa de infusin de gado1 o V/ 0infusin cere#roAcorazn1. La sensi#ilidades seme%ante a la del )enodignstico, pero en nuestro medio en general seW considera que no es superior a 98= en la fase crnica 0@88= en la fase aguda1.La realizacin de emocultivos de forma seriada aumenta la positividad de la +cnica, sin em#argo la varia#ilidad en positividad es importante entre regiones,lo que pro#a#lemente ree%a la diferente constitucin gentica de las cepas de +. cruzi 0@91 El tiempo en que normalmente el emocultivo se positiviza es de38 48 das.La Feacin en ;adena de la 'olimerasa 0';F12 Esta tcnica se #asa en la amplicacin de fragmentos de minicrculos de (7 del cinetoplasto, de otroscidos nucleicos del parsito. La positividad del ';F en la fase crnica es seme%ante a la del )enodiagnstico ! el emocultivo, sin em#argo, en e)perienciasen las que el ';F se a realizado de forma simultnea con los otros dos mtodos, a demostrado tener una sensi#ilidad superior 0@91. (l igual que lo queocurre con los otros mtodos la negatividad en la fase crnica no es en si de#ida a una #a%a sensi#ilidad de la tcnica para la deteccin de los parsitos ensangre, sino un resultado dependiente de la presencia intermitente del parsito en sangre que dependen del ciclo #iolgico ! de los cam#ios en la relacinparsito ospedero en el tiempo 0@91.

    [email protected] 7iagnstico serolgico

    Los mtodos serolgicos son la esencia del diagnstico de la infeccin en la fasecrnica. En una etapa inicial de la infeccin, los anticuerpos contra el +. cruzison de la clase gW, siendo reemplazados gradualmente por gM..7eteccin de anticuerpos gM2 El diagnstico de la Enfermedad de ;agas en fase crnica se ace a travs de la presencia de anticuerpos gM anti +. cruzi,

    detectados al menos por dos tcnicas serolgicas de principios diferentes de preferencia con titulacin. 'ueden ser empleadas dos de las siguientes trestcnicas

    @. Ensa!o inmunoenzimtico 0ELB(12 +tulos positivos ma!or o igual a dos veces el valor del punto de corte de la densidad ptica. En general el fa#ricante delos estuces diagnsticos indica cmo denir la zona lmite o zona gris donde se u#ican las muestras indeterminadas. ;uando no e)iste tal orientacin serecomienda considerar como indeterminadas las muestras con valores de densidad ptica en el intervado entre @8 ! 68= por de#a%o ! por encima del puntode corte 0641 Las muestras indeterminadas de#en ser remitidas a la#oratorios de referencia para ser procesadas por otras tcnicas 0641.6. nmunouorescencia indirecta 0D12 ttulos positivos ma!or o igual a @236.3. /emoaglutinacin indirecta 0/(12 dependiendo del punto de corte sealado por la informacin tcnica del Kit correspondiente7e#en tenerse en cuenta los siguientes aspectos2A Biempre el diagnstico de#e realizarse con dos de estas tcnicasA Bi a! disparidad entre am#as prue#as es necesario realizar una tercera reaccin para denir el estado de infeccin.A Be considera que la prue#a de ELB( tiene una alta sensi#ilidad ! por lo tanto se recomienda como la primera prue#a a realizar en el proceso de

    conrmacin diagnstica. Dalsos negativos pueden ocurrir con la tcnica de

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    ELB( ! por lo tanto se recomienda que ante un paciente con importantes elementos clnicos ! epidemiolgicos para sospecar enfermedad de ;agas sede#e continuar con el estudio serolgico con la segunda prue#aA En la fase aguda, el uso de la gM para diagnstico requiere de dos muestras de sangre que permitan comparar la seroconversin 0pasar de negatividad apositividad1 o la variacin en tres ttulos serolgico 0D1 con intervalo de mnimo 6@ das entre una muestra ! la otra.7eteccin de anticuerpos gW2 Be trata de una tcnica comple%a que todava no est disponi#le en ;olom#ia. La deteccin de anticuerpos gW es de utilidadpara diagnstico de la fase aguda.

    Mtodos Parasitolgicos Directos.Son aquellos en los que se busca detectar la presencia del parsito mediante observacin directa del tripomastigote metacclico en sangre y estn indicados en el

    diagnstico de la fase aguda de la enfermedad, principalmente cuando el paciente esta febril y laparasitemia es elevada. Incluye los siguientes mtodos:Examen directo de sangre fresca: Se toma una gota de sangre por puncin digital, se coloca entre lmina y laminilla y se observa al microscopio de luz conobetivo de!"# y$"#. Se buscan tripanosomas movindose vigorosamente. %s un mtodo muy sencillo que puede realizarse en un laboratorio con recursos mnimos.Frotis o Extendido de sangre perifrica: &espus de obtener una muestra de sangre por puncin capilar, se e'tiende una gota sobre una lmina coloreada con(omano)s*i modificado, +iemsa o rig-t. Se buscan los tripomastigotes metacclicos fiados, con sus estructuras caractersticas: forma alargada en o en S,con n/cleo, cinetoplasto, flagelo y membrana ondulante. %s una prueba que permite identificar la morfologa del parasito pero presenta baa sensibilidad.Gota Gruesa: %s una tcnica que utiliza mtodos de coloracin como los anteriormente mencionados para visualizar el parasito pero con la ventaa que permiteconcentrar varias capas de sangre, 0" a 1" en relacin con el e'tendido de sangre. 2or el proceso al que es sometida la sangre, la morfologa del parasito puedeverse un poco modificada. 3a sensibilidad de esta prueba es intermedia entre los anteriores mtodos y los de concentracin como el micro-ematocrito y el Strout.%sta prueba presenta ventaas si se utiliza en zonas donde coe'iste transmisin de malaria y de -agas por la e'periencia en su uso. 3a realizacin de la gota

    gruesa como rutina en estas regiones para el diagnstico de malaria en febriles puede detectar casos agudos de enfermedad de -agas 4!56.Microematocrito o microstrout: Se obtiene una muestra de sangre en un tubo capilar o micro-ematocrito -eparinizado, centrifugarlo a 7."""8!0.""" rpm yobservar al microscopio la interfase entre el plasma y los glbulos roos 4la capa leucocitaria6 o pegando el capilar con una cinta a una lamina y dndole giros paraobservarlo, en ambos casos con obetivo $"# buscando la presencia de tripomastigotes en movimiento. 9tra alternativa cuando el anterior procedimiento danegativo es romperlo con muc-a precaucin al nivel de la interface y observar entre lmina y laminilla o realizar un e'tendido para tincin con coloracin con(omanos*y. %ste mtodo tambin se puede desarrollar en un laboratorio de cualquier nivel. 3a tcnica es una de las ms sensibles, siendo ampliamente utilizadapara diagnosticar casos de -agas congnito 40"6.!cnica de concentracin de "trout: Se obtiene una muestra de sangre 48!" ml6 sin anticoagulante, se dea que se forme el coagulo y se retraiga. %l sueroobtenido se doble centrifuga, primero a baa velocidad 4!."" (2;6 para eliminar los glbulos roos restantes y luego a mayor velocidad 41."" a$""" (2;6 paraconcentrar los parsitos en el sedimento 456.

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    1> o >, libres de infeccin y criadas en el laboratorio. )l !enodia$nostico es natural cuando los triatomino se alimentan directamente del paciente dendolosdurante 1"minutos para que obtengan la sangre, utilizando $" ninfas distribuyndolas de !" porcada recipiente de madera o de plstico, protegidos con tela defiltro y colocados sobre lapiel del paciente durante 1" minutos, se recomienda repetir este procedimiento una o dos veces ms, con intervalo de un mes. )l

    procedimiento es arti"icial cuando la sangre del paciente es e'trada por venopuncin, -eparinizada y colocada en recipientes mantenidos a la temperaturacorporal y con membranas finas de late', a travs de las cuales los insectos se alimentan. 2or razones ticas el uso del mtodo natural es restringido y seprefiere el artificial, necesitndose una infraestructura de laboratorio de referencia .%ste mtodo no se recomienda para los servicios de salud y su realizacin es solo posible en algunos centros de investigacin.? los 1" y @" das despus de seralimentados los triatominos, se e'aminan sus -eces e intestinos bao el microscopio para detectar tripomastigotes o epimastigotes del cru.i. Ao debeconfundirse con 1lastochritidiatriatoma que es un tripanosomtido morfolgicamente similar al epimastigote de cru.iIgualmente, la presencia de ran$eli, que tambin parasita al -ombre aunque no es patgeno, puede ser una fuente de error en la lectura. %n este caso, ademsde las -eces deben e'aminarse tambin la -emolinfa y las glndulas salivales del insecto para detectar ran$eli- al igual que el cru.i es un tripanosoma estercorceo, es decir, que se desarrolla en el intestino del insecto vector pero ms tarde migra a lasglndulas salivales va -emolinfa..(emoculti)o: 2ara la realizacin de este mtodo se colectarn 1 ml de sangre con anticoagulante citrato de sodio, de los pacientes probablemente infectadoscon cru.i y deber ser transporta a temperatura ambiente -asta llegar al 3aboratorio. 3uego se siembra en 0 tubos de medio de Bobie, bao condiciones deesterilidad, para comenzar el seguimiento y observacin semanal, bao microscopio invertido durante seis meses -asta lograr el aislamiento del parsito yposterior sostenimiento en medios de cultivo de la cepa obtenida. 2ara realizar el cultivo se utilizan los medios lquidos tales como 3IB 4triptosa de infusin de-gado6 o CDI 4infusin cerebro8corazn6. 3a sensibilidad es semeante a la del'enodignstico, pero en nuestro medio en general se considera que no es superior al $"= en la fase crnica 4!""= en la fase aguda6 .%s de gran utilidad en casode -agas congnito y en formas agudas de la enfermedadE adems es utilizado con frecuencia para incrementar la concentracin de los parsitos y obtencinde antgeno para el diagnstico serolgico y molecular de la enfermedad de -agas.Inoculacin en animales: Ao es un mtodo utilizado como diagnstico de rutina, especialmente por limitantes como la necesidad de un bioterio con animalesisognicos susceptibles a cru.i, tales como los ratones Calb o ?FSn, sin embargo es de gran utilidad en laboratorios de investigacin con inters en el estudioe'perimental de cepas.

    #.#.$.%.$. Mtodos moleculares:*mplificacin de +cidos nuclicos del par+sito ,P-/: %sta tcnica se basa en la amplificacin de fragmentos de minicrculos de ?&A del cinetoplasto, deotros cidosnuclicos del parsito. %ste procedimiento para detectar cru.i puede ser aplicado en muestras de sangre, -eces de triatominos de otros materiales biolgicosy permiten obtener una sensibilidad bastante alta.

    #.#.$.%.0. Mtodos "erolgicos

    onsisten en la deteccin de anticuerpos 4de la clase Ig;, Ig+6 en el suero de los pacientes infectados con cru.i- generados en el curso de la infeccin. 3osmtodos usados son:%nsayo inmunoenzimtico 4%3IS?6: 2ermite observar la presencia de anticuerpos antiinmunoglobulinas ligados a una enzima que en presencia de su sustratoforma un producto colorido. 2or ser una prueba colorimtrica el resultado es definido por la lectura de la absorbancia o densidad ptica y usualmente cadaestuc-e comercial tiene su forma de calcular el punto de corte, por encima o por debao del cual las muestras se consideran reactivas o no. 3os resultadosalrededor de los puntos de corte se clasifican como indeterminadas y en ese caso la muestra deben ser remitida a los laboratorios de referencia para serprocesadas por otras tcnicasInmunofluorescencia indirecta 4I

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    Demoaglutinacin indirecta 4D?I6: la superficie de los Demates son sensibilizados con antgenos de cru.i adsorbidos y en presencia de los anticuerpos contrael parasito presentes en el suero del paciente se produce una reaccin antgeno G anticuerpo que genera aglutinacin de los eritrocitos, la cual puede servisualizada.%l informe del resultado depende del punto de corte seHalado por la informacin tcnica del *it correspondiente.

    >. Si a un paciente se le reali?an en paralelo los m2todos parasitolgico directos / serolgicos@ pero en el momentode reali?ar el m2todo directo no se encuentra ninguna forma parasitaria / el paciente presenta cuadro clnico /escenario epidemiolgico compati0le con Enfermedad de Chagas. A4u2 decisiones se toman a ni'el del

    la0oratorioB7 ASe repite la toma / procesamiento de muestras / por cu&nto tiempoB7 ACmo se comporta la cin2ticade la Ig" e Ig$ en un caso pro0a0le agudo para Enfermedad de ChagasB

    Be de#e realizar en paralelo los mtodos parasitolgicos directos ! los mtodos serolgicos. Bi por mtodos parasitolgicos directos se encuentra el parasito,se conrma la infeccin& pero si no se encuentra, se de#en repetir las prue#as parasitolgico diariamente durante almenos 3 das o asta que el caso sedescarte. Bi los mtodos en fresco no arro%an resultados se de#en realizar los mtodos de concentracin.

    E ,!SE !$)D! Si se tiene la posi#ilidad de realizar D para detectar gW ! la prue#a es reactiva, la interpretacin de la prue#a se de#e acompaar de uncuadro clnico ! un escenario epidemiolgico pro#a#le para conrmar el caso agudo. Fecordar que la cintica de gW en fase aguda permite o#servar supresencia en ttulos #a%os a partir de los @C o 68 das d iniciado los sntomas, aumentando los mismos entre los 38 ! 48 das para declinar posteriormente.+am#in se puede determinar la presencia de gM para diagnosticar el caso como agudo as2 si se conrma la infeccin por +. cruzi por la presencia deanticuerpos gM por dos mtodos de principio diferente 0primero se toma ELB( ! luego se conrma el resultado con D1 ! si a los 6@ das de a#erse realizadola prue#a D, los ttulos se elevan en 3 o ms diluciones o si e)iste seroconversin frente a otra prue#a de D de control, se dice que el caso conrmado de

    ;agas es agudo.Bi no es posi#le conrmar el caso, pero tiene serologa positiva para anticuerpos gM contra +. cruzi por dos prue#as con metodologas diferentes, conevidencias clnicas !Po epidemiolgicas indicativas de enfermedad de;agas aguda, se conrma el caso agudo.$ tam#in en caso de seguir la sospeca ! se o#tienen prue#as parasitolgico indirectas o moleculares positivas el caso se conrma como agudo.. AEs posi0le o0ser'ar en un LCR7 tripomastigotes de (r/panosoma cru?iB@ si su respuesta es SI7 descri0a en Au2casos pudiera ocurrir este halla?goB

    Los casos de pacientes en fase crnica que cursan con situaciones de inmunodepresin por enfermedades coe)istentes, son suscepti#les a presentar unareactivacin de la infeccin. En estos casos el diagnstico es posi#le mediante la o#servacin directa del parsito en sangre perifrica, en lquidocefalorraqudeo o en otros uidos. El diagnstico entonces se #asa en los mtodos directos.

    (nte la negatividad de los e)menes directos ! la necesidad de conrmar el diagnstico, puede recurrirse incluso a la realizacin de ';F en el uido corporalcorrespondiente, por e%emplo en lquido cefalorraqudeo 0la meningoencefalitis cagsica aguda es el cuadro descrito con ma!or frecuenciaen los casos dereactivacin1. La serologa de#er siempre realizarse, pero puede no ser positiva en estos casos.

    . Descri0a los m2todos de diagnstico directo e indirecto para (ooplasmosis. 5Inclu/a en particular para losm2todos microscpicos: lectura e informe del eamen directo9

    F.Descri0a el protocolo ue de0e seguirse 5inclu/endo toma de muestra7 diseGo7 coloracin7 lectura e informe delfrotis9 para la reali?acin del diagnstico parasitolgico mediante microscopa en Leishmaniasis.

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    Las acciones de la#oratorio estn encaminadas a esta#lecer la presencia del parsito de forma directa o indirecta en cada una de las trespresentaciones clnicas de la enfermedad.

    Leishmaniasis cut&nea:

    Eamen directo2 es un mtodo rpido, econmico ! de fcil realizacin. La sensi#ilidad vara con el tiempo de evolucin de la lesin 0amenor tiempo de evolucin ma!or sensi#ilidad1, la toma de la muestra, proceso de coloracin ! capacitacin del personal para realizar lalectura de las lminas. La sensi#ilidad del e)amen directo es de 5C a I8= en pacientes cu!a evolucin no supera los cuatro meses. El e)amen

    directo puede realizarse de dos maneras2 aciendo un raspado del #orde interno de la "lcera o aciendo una incisin ! raspando el #ordeactivo de la lesin. Bi e)isten dos o ms lesiones, de#e escogerse para el e)amen directo la que tenga un menor tiempo de evolucin.

    'ara la limpieza de la lesin no se de#e utilizar solucin !odada, !a que puede interferir en la lectura del e)amen. ;on el n de evitar laformacin de precipitados se de#e utilizar una lmina cncava que contenga el colorante ! realizar la coloracin por inmersin& se de#entomar tres muestras de la misma forma para realizar tres lminas por paciente.

    Interpretacin:

    Incisin / raspado del 0orde acti'o de la lesin: este mtodo se recomienda para lesiones cerradas, no ulceradas. El material aso#tenido se e)tiende en forma suave so#re una lmina portao#%etos nueva, previamente limpia, desengrasada ! de#idamente rotulada. Bede#en tomar tres muestras de la misma forma para realizar tres lminas por paciente.

    !spirado de las lesiones: en las lesiones cerradas tam#in se puede tomar aspirado para realizar e)tendidos a los que se les realizar lacoloracin para visualizar el parsito.

    Reaccin de "ontenegro2 es una prue#a de ipersensi#ilidad tarda, es decir, slo indica contacto previo con el parsito, pero no laenfermedad activa, por lo tanto no es diagnstica por s sola. Meneralmente empieza a acerse positiva acia la cuarta semana despus de la

    e)posicin al parasito. La lectura se realiza a las 95A

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    leismaniasis muestran un patrn general que permite sospecarla ! ree%an la relacin entre la multiplicacin del parsito ! la respuestainmune del paciente.

    %l resultado puede:

    &emostrar los amastigotes, lo cual establece el diagnstico definitivoE

    (evelar uno o varios de los patrones -istopatolgicos de las leis-maniasis sin demostracin de los parsitosE

    &emostrar una entidad diferente como /lceras pigenas, esporotricosis, etc.E con frecuencia se usa la e'presin biopsia de piel compatibleJ con

    leis-maniasis, lo que indica duda o probabilidad. Ao debe tomarse como un diagnstico concluyente.

    1eismaniasis mucosa

    %l diagnstico de la leis-maniasis mucocutnea debe basarse en el cuadro clnico, los antecedentes clnicos y los criterios epidemiolgicos

    (eaccin de ;ontenegro: su utilidad se fundamenta en que indica e'posicin previa al parsito, pero A9 la enfermedad activa.

    Ciopsia de mucosa nasal: el cuadro -istolgico es semeante al de las /lceras cutneas, o sea, dermatitis difusa rica en plasmocitos con granulomas maldefinidos. 3a -iperplasia epitelial es leve o est ausente. %n los estudios realizados en el IAS se -an encontrado amastigotes en el != de los casos. %lprocedimiento debe ser realizado por el mdico y se realiza de igual forma que para la leis-maniasis cutnea.

    InmunoHuorescencia indirecta2 esta prue#a serolgica que detecta anticuerpos circulantes es mu! "til en el diagnstico de leismaniasismucosa. La muestra para este procedimiento es suero que se coloca en un tu#o de#idamente marcado ! rotulado con los datos del paciente.'ara remisin, las muestras de suero de#en rotularse de#idamente, empacarse, refrigerarse a 9X ; ! enviarse al la#oratorio de referenciarespectivo %unto con un resumen de la istoria clnica en el que se inclu!an los principales datos clnicos, paraclnicos ! epidemiolgicos delpaciente.

    Lectura e interpretacin2 la reaccin se lee al microscopio de uorescencia ! se determina el ttulo en la "ltima dilucin del suero en la cualse ve uorescencia en toda la periferia del promastigote. 'ara leismaniasis mucosa se considera P#SI(I+! con ttulos ma!ores o iguales a@P@4.

    Leishmaniasis 'isceral

    Eamen parasitolgico directo mediante aspirado de m2dula sea: este procedimiento de#e ser realizado "nicamente por personalmdico de#idamente entrenado ! en un medio ospitalario #a%o condiciones de rigurosa asepsia. nterpretacin2

    Be considera que una muestra es P#SI(I+!cuando se o#servan uno o ms amastigotes de Leishmania intra o e)tra celulares. Las muestrasson E$!(I+!Ssi despus de revisar (#D# el e)tendido no se o#servan amastigotes.

    Eamen parasitolgico directo de aspirado de 0a?o2 este procedimiento de#e ser realizado "nicamente por personal mdicode#idamente entrenado ! en un medio ospitalario #a%o condiciones de rigurosa asepsia.

    Interpretacin:se considera una muestra como '$B+-( cuando se o#servan uno o ms amastigotes de Leishmania intra o e)tra celulares.Las muestras son EM(+-(B si despus de revisar +$7$ el e)tendido no se o#servan amastigotes

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    InmunoHuorescencia indirecta2 esta prue#a serolgica que detecta anticuerpos circulantes es mu! "til en el diagnstico de leismaniasisvisceral. Be realiza el mismo procedimiento descrito para leismaniasis mucosa. Lectura e interpretacin2 la reaccin se lee al microscopio deuorescencia ! se determina el ttulo en la "ltima dilucin del suero en la cual se ve uorescencia en toda la periferia del promastigote. Enleismaniasis visceral se considera '$B+-( con ttulos ma!ores o iguales a @P36.

    Reaccin de "ontenegro2 esta prue#a es negativa durante la fase activa de la enfermedad ! se torna positiva entre 3 ! 4 meses despusde terminado el tratamiento.

    Entre los e)menes complementarios estn el cuadro emtico con alteraciones ematolgicas como anemia, leucopenia ! trom#ocitopenia,e inversin de la relacin al#"mina P glo#ulina.

    Coloracin de los frotis:"etodologa: Los frotis secos de#en ser remitidos al la#oratorio de referencia a ms tardar en @ semana, para sercoloreados con la coloracin de Miemsa. Be colocan las lminas con los frotis so#re un soporte ! se cu#ren con metanol durante C a @8minutos para su %acin, posteriormente se derrama el resto de metanol que se encuentra so#re las lminas ! se cu#ren los portao#%etos consolucin de Miemsa diluida, preparada en el momento para la coloracin. 'ara cu#rir cada lmina, la dilucin del colorante de Miemsa seconfecciona agregando 6 a 9 gotas de colorante puro a 6 ml de agua destilada 0o agua corriente1, se adicionan una gotas de la solucintampn 'VB p/ R

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    #olAgrafo desde la periferia asta el centro de la in!eccin& el punto donde se detiene el #olgrafo corresponde al #orde de la induracin.Fealizar este procedimiento en 6 direcciones perpendiculares, medir los dos dimetros de la induracin con una regla milimetrada ! realizar elpromedio de los mismos.Interpretacin:La prue#a se considera positiva cuando el dimetro de la induracin es igual o ma!or a C mm. o se de#e tener en cuenta eltamao del eritema 0enro%ecimiento de la piel1. *n resultado positivo sin clnica acompaante, signica que el paciente a estado en contactocon parsitos del gnero Leismania. La 7FW puede permanecer positiva, en la ma!ora de los casos, por toda la vida, por este motivo no

    de#e realizarse la 7FW como mtodo diagnstico . El resultado positivo de la 7FW, en un paciente sospecoso no es una prue#a conArmatoria que asegure que la lesin se trate de una leismaniosis, sino que se trata de un caso pro#a#le, la conrmacin de un caso slo es

    posi#le con un resultaAdo positivo de una prue#a directa 0o#servacin del parsito1.

    La prue0a de Sa0inJ,ieldman2 es una prue#a serolgicapara diagnosticar la to)oplasmosis. La prue#a est #asada en la presencia deciertos anticuerposque previenen al azul de metilenoentrar al citoplasmade los organismos de to)oplasma.El suero del paciente se trata controfozoitos de +o)oplasma ! complementa como activador, ! luego se incu#a. 7espus de la incu#acin, se aade azul de metileno. Bi losanticuerpos antiA+o)o estn presentes en el suero, de#ido a que estos anticuerpos se activan por complemento, estos lisan la mem#rana delparsito ! los trofozotos no estaran mancados 0resultado positivo1, ! si no a! anticuerpos, trofozotos con mem#rana intacta estnmancadas ! aparecen de color azul #a%o microscopio 0resultado negativo1

    K. Liste los m2todos utili?ados para la determinacin de suscepti0ilidad de par&sitos causantes de "alaria7Enfermedad de Chagas / Leishmaniasis a f&rmacos antiparasitarios

    1. Maga una 0re'e descripcin clnica inclu/endo agente etiolgicoNmodo de trasmisinNmuestrasNformaparasitaria ue se reporta en el eamen directo7 de las siguientes infecciones por coccidias: "icrosporidiasis7Ciclosporidiasis /

    Criptosporidiasis:Bon coccidios protozoarios con distri#ucin universal que pueden producir infeccin en animales ! umanos. Be producepor ingesta de oocitos procedentes de alimentos ! aguas contaminados 0piscinas comunitarias, parques acuticos, aguas de lagos !pantanosZ1 o por va fecalAoral 0frecuente en guarderas1. +ras la ingesta de oocitos en alimentos o aguas contaminados, se li#eranesporozotos con capacidad de unirse a los #ordes en cepillo de las clulas epiteliales intestinales, en donde pueden reproducirse ase)ual ose)ualmente 0esta "ltima mediante formacin de micro ! macroAgametos, su unin ! la formacin de nuevos oocitos1 para ser eliminadosposteriormente %unto a la materia fecal ! perpetuar la posi#ilidad de infeccin.

    ClnicaWu! variada. a1 (sintomtica& #1 forma intestinal2 cuadro de deposiciones diarreicas acuosas con dolor a#dominal, e#re, nuseas, vmitos !signos de desidratacin ! prdida de peso, autolimitado ! frecuente en nios en epidemias relacionadas con guarderas o piscinas.'uede ser ms prolongado en pacientes con inmunodepresin& c1 forma e)traintestinal2 en inmunodeprimidos 0B7(1 con afectacin desistema respiratorio, epatitis, artritis reactivas ! afectacin ocular.DiagnsticoWediante visualizacin de oocitos en materia fecal. +am#in se utiliza frecuentemente tcnicas de E( en muestra fecal con alta sensi#ilidad !especicidad.

    "ICR#SP#RIDI)"nfeccin protozoaria producida por diversos gneros de microsporidiosis.El 'ilum Wicrospora esta constituido por una gran variedad de

    gneros protozoos parsitos intracelulares o#ligados, ampliamente distri#uidos en ospederos verte#rados e inverte#rados. (ctualmente sedesconoce gran parte de la #iologa, epidemiologa, especicidad por ospederos ! mecanismos de transmisin. (taca preferentemente a

    http://es.wikipedia.org/wiki/Serolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Toxoplasmosishttp://es.wikipedia.org/wiki/Anticuerpohttp://es.wikipedia.org/wiki/Azul_de_metilenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Citoplasmahttp://es.wikipedia.org/wiki/Toxoplasma_gondiihttp://es.wikipedia.org/wiki/Toxoplasma_gondiihttp://es.wikipedia.org/wiki/Serolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Toxoplasmosishttp://es.wikipedia.org/wiki/Anticuerpohttp://es.wikipedia.org/wiki/Azul_de_metilenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Citoplasmahttp://es.wikipedia.org/wiki/Toxoplasma_gondii
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    individuos inmunocomprometidos, especialmente con B7(. E)isten ms de

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    +cnica de tincin #asada en cronotropos para la deteccion mediante microscopio ptico de las esporas E.bieneusi y E. intestinalesen la eces! aspirados duodenalis.Wicroscopa electrnica se considera el estndar para el diagnstico de conrmacin de la microsporidiosis 0sensi#ilidad desconocida1.El diagnstico de estos microsporidios, se ace con el allazgo de las esporas en materia fecal teida con coloraciones especiales como+ricrmica ! ]uicK /ot AMram;romotropo. La espora es una estructura ovalada, miden en promedio de 6 a < por @,C a 9Ym,est rodeada pordos capas, la e)ospora ! la endospora ! de#a%o de esta tiene una mem#rana plasmtica interna, . 'oseen tres estructuras relacionadas con lainfeccin2 vacuola posterior, disco de ancla%e ! aparato de Molgi atpico, denominado polaroplasto, localizado en su regin anterior ! unlamento o t"#ulo polar a travs del cual inocula el esporoplasma que contiene el n"cleo de la espora que sirve para infectar la clula #lanco.

    Be ven como estructuras ovaladas de @ a C Ym de dimetro, pared gruesa ! definida, color rosado o violeta ! en su interior se o#serva lavacuola posterior transparente ! un septo que se tie de color morado oscuro que corresponde al t"#ulo polar.;on las caractersticas descritas se informan como esporas de microsporidios. 'ara llegar al diagnostico de especie E. bieneusioE. intestinalisse requiere de mtodos moleculares o inmunolgicos con anticuerpos monoclonales.

    Ciclosporidiasis:

    Este protozoo es un parsito intracelular o#ligado. Bu ciclo de vida, seme%ante al de ;r!ptosporidium e sospora, se lleva a ca#o en el epitelio,con predileccin por !e!uno. La esporulacin ocurre fuera del ospedero.

    Las manifestaciones clnicas suelen ser muco ms severas en su%etos inmunocomprometidos 0-/T, entre otros1.!ransmisin.Wediante ingesta de ooquistes esporulados en alimentos, agua. El contacto con suelo contaminado con ooquistes es un factor importante aconsiderar.

    -uadro clnico.

    El cuadro clnico que produce es similar al causado por otros organismos, tales como ;r!ptosporidium spp., ;!stoisospora #elli,algunos microsporidios, Giardia duodenalis! tron!yloides stercoralis.

    El perodo de incu#acin oscila entre 6 A @@ das, con un promedio de una semana.

    La infeccin puede encontrarse en su%etos asintomticos, pacientes inmunocompetentes 0con ma!or frecuencia en los e)tremos de la edad1 einmunocomprometidos.

    En su%etos inmunocompetentes las manifestaciones clnicas pueden ser leves o prominentes2 diarrea acuosa, anore)ia, prdida de peso, dolor! distensin a#dominales, astenia, adinamia, cefalea, nusea, vmito, ocasionalmente mialgias ! mala#sorcin de 7A)ilosa ! grasas. Laduracin de la enfermedad sin tratamiento oscila entre 9 A @8 das.

    En pacientes inmunocomprometidos 0B7(, dia#etes, otros1 las manifestaciones pueden ser transitorias 0en los casos menos severos de

    inmunosupresin1, crnicas0con remisiones1 o fulminantes. Los cuadros en su%etos con B7( se vinculan con ma!or frecuencia a porcenta%es

    de linfocitos + ;79T menores que 688 clulasP^L.

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    Entre las complicaciones de la enfermedad se an mencionado el sndrome de MuillainAVarr, artritis reactiva ! colecistitis alitisica, prdidasde importancia de udos de#ido a la diarrea. . E)isten 6 reportes de allazgo de ooquistes en esputo. 'uede e)istir poliparasitismo.

    Diagnstico.

    3os ooquistes eliminados con la materia fecal presentan una pared doble, son esfricos, no esporulados y miden 7 8 !" Km. Lna vez que -an esporulado en el

    medio ambiente, al cabo de una semana, contienen 0 esporoquistes, cada uno de ellos con 0 esporozotos 8 la forma infectante.

    %quivalencia: un ooquiste de 2yclosporamide el doble en relacin a uno de 2ryptosporidium

    %'isten mtodos microscpicos y moleculares. %l e'amen directo se considera una alternativa en e'menes epidemiolgicos. on microscopa de fluorescencia

    4filtro dicromtico de $"8$M" nm6 los ooquistes presentan autofluorescencia y se observan en colores azul y verde menta 4tambin los de sospora- aunque las

    tonalidades varan6.

    3os e'menes coproparasitoscpicos de concentracin util izados son la tcnica de

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    Efectos secundarios: 2uede observarse -ipertermia 4m'ima temperatura R$! >6 que comienza pocos das despus de la vacunacin. 3a temperatura vuelve a valores

    normales durante los !" das siguientes a la vacunacin.

    7a de administracin:Intramuscular

    A4u2 m2todos inmunolgicos / micro0iolgicos se utili?an para la deteccin de CoccidiasB

    &iagnostico parasitolgico &emostracin de ooquistes en -eces Nisualizacin de ooquistesFotros estadios en secreciones y biopsia intestinal

    ;todos de concentracin. oloraciones 4Am, Safranina, quimioluminescentes

    Distologa C. &eteccin de ?ntgenos en Deces Oit comerciales 4I