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UNIVERSIDADE DE SO PAULO FACULDADE DE CINCIAS FARMACUTICAS
Programa de Ps-Graduao em Frmaco e Medicamentos
rea de Produo e Controle Farmacuticos
Desenvolvimento e validao de metodologia para medicamentos
contendo dipirona sdica e cloridrato de papaverina isolados
e
em associao
Andria Peraro do Nascimento
Tese para obteno do grau de DOUTOR
Orientador: Profa. Titular Erika R. M. Kedor -Hackmann
So Paulo 2005
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DEDALUS - Acervo - CQ
1IIIII1111111130100011625
Ficha Catalogr ficaElaborada pela Diviso de Biblioteca e
Documentao do Conjunto das Qumicas da USP.
Nascimento, Andria Peraro doN244d Desenvolvimento e validao de
metodologia para medicamentos
contendo dipirona sdica e cloridrato de papaverina isolados eem
associao / Andria Peraro do Nascimento. -- So Paulo,2005.
141 p.
Tese (doutorado) - Faculdade de Cincias Farmacuticasda
Universidade de So Paulo. Departamento de Farmcia.
Orientador: Kedor-Hackmann, Erika Rosa Maria
l. Medicamento: Controle de qualidade 2. Cromatografia emlquido
de alta eficincia: Anlise qumica : Farmacologia3.
Espectrofotometria: Anlise de medicamentos I. T. II Kedor-Hackmann,
Erika Rosa Maria, orientador.
615.19015 CDD
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Andria Peraro do Nascimento
Desenvolvimento e validao de metodologia para medicamentos
contendo dipirona sdica e cloridrato de papaverina isolados
e
em associao
Comisso Julgadora
da Tese para obteno do grau de Doutor
Profa. Dra. Erika Rosa Maria Kedor-Hackmann
orientador/presidente
Profa. Dra. Magali Benjamim de Arajo 1o. examinador
Profa. Dra. Maria Palmira Daflon Gremio 2o. examinador
Profa. Dra. Veni Maria Andres Felli 3o. examinador
Profa. Dra. Maria Ins Rocha Miritello Santoro 4o. examinador
So Paulo, 31 de janeiro de 2006.
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A glria no consiste em jamais cair, mas sim de erguer-se
toda vez que for necessrio.
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Deus,
Os que confiam no Senhor sero como o monte de Sio, que
no se abala, mas permanece para sempre
Salmo 125:1
Aos meus pais Ademar Peraro e Durvalina Cricco Peraro pela
fora, amor e tanta compreenso, principalmente nos momentos
mais difceis.
Ao meu irmo Luciano Cricco Peraro e Maria Helena pelo
apoio, mesmo distncia.
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Ao meu marido Lafaiete Marcos pela sua
compreenso, apoio, amizade, encorajamento e amor.
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professora Erika Rosa Maria Kedor-Hackmann, pela
orientao, compreenso, sabedoria, apoio profissional e
pessoal durante a realizao deste trabalho.
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AGRADECIMENTOS
Coordenadoria do Programa de Ps-Graduao em Frmaco e Medicamentos
do
Departamento de Farmcia da Faculdade de Cincias Farmacuticas
da
Universidade de So Paulo.
profa Titular Maria Ins Rocha Miritello Santoro, pela amizade,
incentivo
colaborao.
Ao prof Dr Anil Kumar Singh, pela amizade, incentivo e
sugestes.
s amigas e colegas Rosa Fernanda Igncio, Elizngela Abreu Dutra,
Flvia Garcia
e Njla Mohamed Kassab, pelas sugestes, discusses, companheirismo
e convvio.
Ao amigo Marcello Garcia Trevisan do Instituto de Qumica da
Unicamp, pelos
clculos e interpretaes com a calibrao multivariada, pelas
correes e valiosas
sugestes.
Ao Prof. Dr Ronei Jesus Poppi do Instituto de Qumica da Unicamp,
pelo uso do
programa MATLABTM , pela ateno e pacincia.
Ao Prof Dr Martin Steppe, pelas amostras de Dipaverina.
Ao Coordenador do curso de Farmcia do Centro Universitrio de
Lavras-Unilavras
prof Disney Ribeiro Dias, pela ateno, compreenso e apoio.
Ao amigo Dr. Matheus Puggina de Freitas, pela preciosa
sugesto.
Ao amigo Diogo Teixeira Carvalho, pelas correes e incentivo.
Aos colegas do Laboratrio de Controle de Qualidade Fsico-Qumico
Tatiana de
Fzio, Pedro Garcia, Ricardo Leite, Renata pelo auxlio e
amizade.
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funcionria Iria Raimunda da Silva pelo carinho, compreenso e
colaborao.
Ktia Botelho, pela amizade e colaborao.
s profas Dra Valentina Porta e Dra Maria Palmira Gremio pelas
correes e
sugestes.
Eliane Silva de Sousa, bibliotecria do Centro Universitrio de
Lavras-Unilavras,
pelo auxlio bibliogrfico.
Ao prof Dr Jorge Seferin Martins pelo apoio.
s funcionrias Raquel e Regina Maura Rojas, pela colaborao.
Elizabete C. S. Paiva, secretria do Programa de Ps-Graduao em
Frmaco e
Medicamentos, pela ateno e colaborao.
Aos funcionrios da Secretaria de Ps-Graduao da Faculdade de
Cincias
Farmacuticas da Universidade de So Paulo Elaine M. Ychico, Jorge
de Lima e
Maj pela ateno e colaborao.
Aos tios do Lafaiete, Antnio Batista da Matta e Odete Caputo da
Matta, pelo apoio e
incentivo.
Fundao de apoio para o remdio popular Furp, pelo fornecimento de
matrias-
primas.
Indstria Cristlia Produtos Qumicos e Farmacuticos pelo
fornecimento de
matrias-primas e solventes.
Ao CNPq pela concesso da bolsa, mesmo tendo sido utilizada por
alguns meses.
A todos que direta e indiretamente colaboraram pela realizao
deste trabalho.
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RESUMO
A dipirona sdica em associao com o cloridrato de papaverina
usada
como medicamento analgsico e antiespasmdico. O objetivo desta
pesquisa foi o
desenvolvimento e validao de mtodos analticos para a determinao
de dipirona
sdica e cloridrato de papaverina em preparaes farmacuticas. A
soluo oral
contendo dipirona sdica isolada e a soluo oral contendo a
associao de dipirona
sdica e cloridrato de papaverina foram determinadas por
cromatografia lquida de
alta eficincia, com as condies padronizadas: Coluna
cromatogrfica: Supelcosil
C18 - LCPH (250 mm X 4,6 mm, 5m) Supelco e pr coluna C -18 (20 X
4,6 mm,
5m) Supelco, fase mvel: gua: acetonitrila: metanol (70: 20: 10)
trietilamina 0,3% e
pH: 3,0 ajustado com cido ortofosfrico, vazo de 0,7 mL/min e
deteco no UV a
254 nm.
Para a soluo injetvel contendo cloridrato de papaverina foi
padronizado e
validado o mtodo por cromatografia lquida de alta eficincia,
empregando coluna
cromatogrfica Merck LiChrospher 100 RP - 18 (125 X 4,6 mm, 5m),
fase mvel:
gua : acetonitrila : metanol ( 70 : 20 : 10 ) trietilamina 0,3%
e pH: 3,0 ajustado com
cido ortofosfrico, vazo: 1,0 mL/min e deteco no UV a 254 nm.
Para a determinao simultnea de dipirona sdica e cloridrato de
papaverina
em soluo oral, foi desenvolvida uma nova metodologia
utilizando
espectrofotometria na regio do ultravioleta (UV) e calibrao
multivariada. Neste
sistema, utilizou-se a faixa de leitura: 210 a 300 nm (passo 0,5
nm) e metanol como
solvente. A calibrao foi feita com 25 solues nas concentraes de
15,0 a 35,0
g/mL para a dipirona sdica e de 0,5 a 1,5 g/mL para o cloridrato
de papaverina.
As curvas de calibrao foram lineares. Os excipientes das
amostras no
interferiram nas metodologias. Foram apresentados adequados
resultados de desvio
padro e mdia de recuperao. Os mtodos propostos mostraram
especificidade,
preciso e exatido para a determinao de dipirona sdica e
cloridrato de
papaverina em formulaes farmacuticas.
-
ABSTRACT
Dipyrone sodium and papaverine hydrochloride are used as an
analgesic and
antispasmodic drugs. The objective of this study was to develop
and validate
analytical methods for determination of dipyrone sodium and
papaverine
hydrochloride in pharmaceutical preparations.
The commercial formulations with dipyrone hydrochloride alone
and its
combination with papaverine hydrochloride were analysed by
liquid chromatography.
A Supelcosil C18 - LCPH column (250 X 4.6 mm, 5m) Supelco and a
mobile phase
constituted by water: acetonitrile: methanol (70:20:10), with
0.3% of triethylamine and
pH adjusted to 3.0 with phosphoric acid were used. The flow rate
was 0.7 mL/min
and UV detection at 254 nm.
The injection formulation with papaverine hydrochloride was
analysed by a
high performance liquid chromatographic method. The method was
standardized and
validated using a Merck LiChrospher 100 RP 18 column (125 X 4.6
mm, 5m) and
a mobile phase constituted of water: acetonitrile: methanol
(70:20:10), with 0.3% of
triethylamine and pH adjusted to 3.0 with phosphoric acid. The
flow rate was 1.0
mL/min and UV detection at 254 nm.
The same oral solution with the combination of dipyrone sodium
and
papaverine hydrochloride was also quantified by UV
spectrophotometry using
multivariate calibration, in the range of 210 to 300 nm. The
calibration set was
constructed with twenty-five solutions in the concentration
ranges from 15.0 to 35.0
g mL-1 for dipyrone sodium and 0.5 to 1.5 g mL-1 for papaverine
hydrochloride in
methanol.
The results show that the methods presented good relative
standard deviation
and good recovery values. The obtained data indicates
specificity, precision and
accuracy of the proposed methods for the simultaneous
determination of dipyrone
sodium and papaverine hydrochloride in pharmaceutical
formulations.
-
SUMRIO
1 INTRODUO 01
2 REVISO DE LITERATURA 05
2.1 Dor 05 2.1.1 Classificao da dor 06 2.1.2 Tratamentos da dor
07 2.2 Analgsicos, antipirticos e antiinflamatrios 08 2.2.1
Dipirona sdica 11 2.2.1.1.Metabolismo 12 2.2.1.2.Mecanismo de ao da
dipirona 13 2.2.1.3 Usos clnicos da dipirona 14 2.2.1.4 Polmica
sobre o uso da dipirona 15 2.2.2 Metodologias para a anlise de
dipirona sdica 19 2.2.2.1 Espectrofotometria Ultravioleta/Visvel
(UV/VIS) 19 2.2.2.2 Cromatografia lquida de alta eficincia CLAE 22
2.2.2.3 Outras metodologias analticas para a determinao de dipirona
sdica 23 2.3 Cloridrato de papaverina 24 2.3.1 Farmacocintica 25
2.3.2 Farmacodinmica 25 2.3.3 Usos clnicos 25 2.3.1Metodologias
analticas para determinao de cloridrato de papaverina 26 2.3.1.1.
Cromatografia lquida de alta eficincia CLAE 26 2.3.1.2 Outras
metodologias utilizadas para a determinao analtica de cloridrato de
papaverina
29
2.4 Espectrofotometria no Ultravioleta e Visvel (UV/VIS) 30 2.5
Cromatografia lquida de alta eficincia CLAE 34 2.5.1 Instrumentao
para a CLAE 35 2.5.2 Modos de separao por CLAE 37 2.5.2.1
Cromatografia em fase normal 38 2.5.2.2 Cromatografia em fase
reversa 39 2.5.2.3 Cromatografia de compostos inicos 39 2.5.2.4
Cromatografia de troca inica 40 2.5.2.5 Cromatografia de excluso 41
2.6 Mtodos de calibrao multivariada 41 2.7 Quimiometria 44 2.8
Validao de mtodos analticos 45 3 OBJETIVOS 51
4 MATERIAL E MTODOS 52
4.1 Material 52 4.1.1 Reagentes e solventes 52 4.2 Substncias
qumicas de referncia 53 4.1.3 Equipamentos e acessrios 53 4.1.4
Amostras 54
-
4.2 Mtodos 56 4.2.1 Testes preliminares 56 4.2.2 Ensaios
cromatogrficos preliminares para a anlise de dipirona sdica e
cloridrato de papaverina
57
4.2.3 Validao da metodologia analtica para a cromatografia
lquida de alta eficincia
60
4.2.3.1 Padronizao do mtodo cromatogrfico para a associao de
dipirona sdica e cloridrato de papaverina
60
4.2.3.1.1 Construo da curva analtica 61 4.2.3.1.2 Pesquisa de
interferentes a partir de excipientes para a Amostra 1 63 4.2.3.1.3
Aplicao do mtodo padronizado Amostra 1 64 4.2.3.1.4 Pesquisa de
interferentes a partir de excipientes para a Amostra 2 65 4.2.3.1.5
Aplicao do mtodo padronizado Amostra 2 67 4.2.3.2 Padronizao do
mtodo cromatogrfico para o cloridrato de papaverina isolado
69
4.2.3.2.1 Construo da curva analtica 70 4.2.3.2.2 Pesquisa de
interferentes a partir de excipientes 70 4.2.3.2.3 Aplicao do mtodo
padronizado Amostra 3 72 4.3 Ensaios preliminares utilizando a
espectrofotometria no UV com aplicao do PLS (Partial Least Squares)
para a anlise de dipirona sdica e cloridrato de papaverina
74
4.3.1 Modelo de calibrao para a espectrofotometria no UV com
aplicao do PLS
75
4.3.1.1 Pesquisa de interferentes a partir de excipientes 77
4.3.1.2 Aplicao do mtodo padronizado Amostra 1 78 5 RESULTADOS
81
5.1 Testes preliminares com as substncias de referncia 81 5.1.1
Testes descritos pela Farmacopia Britnica 81 5.1.2 Teste de
identificao por espectrofotometria no UV 83 5.2 Ensaios
cromatogrficos preliminares para a anlise de dipirona sdica e
cloridrato de papaverina
84
5.2.1 Testes preliminares com a coluna cromatogrfica Merck
LiChrospher 100RP- 8 (125 X 4,6 mm , 5m)
84
5.2.2 Testes preliminares com a coluna cromatogrfica Merck
LiChrospher 100 RP -18 (125 X 4,6 mm, 5m)
86
5.2.3 Testes preliminares com a coluna cromatogrfica Nova Pack
C18 (300 x 3,9mm)
88
5.2.4 Seleo de melhor comprimento de onda atravs de espectros de
absorbncia
88
5.3 Padronizao do mtodo cromatogrfico para a associao de
dipirona sdica e cloridrato de papaverina
90
5.3.1 Construo da curva analtica 90 5.3.2 Pesquisa de
interferentes a partir de excipientes para a Amostra 1 -
Especificidade
93
5.3.3 Aplicao do mtodo padronizado Amostra 1 95
-
5.3.4 Pesquisa de interferentes a partir de excipientes para a
Amostra 2 Especificidade
97
5.3.5 Aplicao do mtodo padronizado Amostra 2 99 5.4 Padronizao
do mtodo cromatogrfico para o cloridrato de papaverina em amostra
isolada
100
5.4.1 Construo da curva analtica 1005.4.2 Pesquisa de
interferentes a partir de excipientes 1035.4.3 Aplicao do mtodo
padronizado Amostra 3 1045.5 Ensaios preliminares utilizando a
espectrofotometria no UV com aplicao do PLS para a anlise de
dipirona sdica e cloridrato de papaverina
106
5.5.1 Pesquisa de interferentes a partir de excipientes -
Especificidade 1095.6 Comparao estatstica dos mtodos de
cromatografia lquida (CLAE) e espectrofotometria na regio do
ultravioleta (UV) com aplicao do PLS
113
6 DISCUSSO 116
7 CONCLUSES 124
8 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 126
-
1
1. INTRODUO
A dor , em geral, um grande aliado do ser humano, um indicador
de que
alguma coisa vai mal no organismo. ela que aponta para a
existncia de uma
doena ou avisa que o corpo pode ter chegado ao limite em razo de
um esforo
fsico ou mesmo do stress. Em muitos casos a dor a prpria doena,
no
consegue-se a cura (BUCHALLA, A. P.; POLES, C., 2002). De acordo
com a
Associao Internacional do Estudo da Dor, a dor uma experincia
sensitiva e
emocional desagradvel associada ou relacionada leso real ou
potencial dos
tecidos, e cada indivduo aprende a utilizar esse termo atravs
das suas prprias
experincias anteriores. Da que comum se ouvir que cada pessoa
entende da sua
dor, o quanto di, onde di, como di, e o que reduz ou piora a
sensao dolorosa
(International Association for the Study of Pain, IASP)
(TEIXEIRA, M. J, 2005).
De acordo com dados aceitos e divulgados por diversas entidades
mdicas
internacionais, pelo menos 30% dos indivduos sentem dor durante
algum momento
da sua vida e, em mais de um tero dos casos, a dor tem durao
superior a um dia.
A dor a causa principal de sofrimento, incapacitao para o
trabalho e ocasiona
graves conseqncias psicossociais e econmicas. No existem dados
estatsticos
oficiais sobre a dor no Brasil, mas a sua ocorrncia tem
aumentado
substancialmente nos ltimos anos (SOCIEDADE, 2005).
Os dados referentes incidncia da dor crnica, aquela cuja durao
igual ou
superior a seis meses, mostram que entre 7 a 40% da populao
mundial tm este
tipo de dor e, desse contingente de pessoas, cerca de 60% ficam
parcial ou
totalmente incapacitados, de maneira transitria ou permanente,
comprometendo de
modo significativo a sua qualidade de vida (SOCIEDADE,
2005).
O aumento dos casos de dor registrados em todo o mundo,
especialmente os de
dor crnica, vem crescendo talvez em decorrncia de novos hbitos
de vida, maior
-
2
longevidade dos indivduos, prolongamento da sobrevida de pessoas
com males
naturalmente fatais, modificaes do ambiente em que se vive e,
provavelmente, do
reconhecimento de novos quadros dolorosos e da aplicao de novos
conceitos que
expliquem ou justifiquem as to diversas sensaes dolorosas.
As dores que mais atingem a populao so a cefalia, quase 30 %
dos
brasileiros sofrem de dores de cabea crnicas, as mais comuns so
a enxaqueca e
a cefalia tensional. A cefalia de cunho crnico ocupa o primeiro
lugar no apenas
entre os adultos, mas tambm entre as crianas.
A lombalgia, tradicional dor nas costas, vitima cerca de 20 % da
populao.
Outros tipos de dores musculares que surgem em qualquer parte do
corpo, esto
associadas a movimentos repetitivos, m postura, stress,
traumatismos ou
sobrecarga muscular (VAN TULDER M, KOES B, 2001). O tratamento,
na maioria
das vezes, consiste de analgsicos, antidepressivos e sesses de
alongamento.
Outras causas de dor crnica so a artrose (desgaste da cartilagem
de uma
articulao) e artrite reumatide (inflamao na articulao), nesses
casos
inevitvel o uso contnuo de analgsicos e antiinflamatrios
(BUCHALLA, A. P.;
POLES, C., 2002)
Dentre os 5 frmacos mais vendidos em todo o mundo, 4 so
analgsicos: a dor
movimenta uma indstria de bilhes de dlares anualmente. Hoje,
graas ao de
frmacos cada vez mais eficazes, somos capazes de lutar e vencer
a dor (QUIMICA
VS DOR, 2005).
A produo de analgsicos e antiinflamatrios o ramo que mais cresce
em toda
a indstria farmacutica mundial. O Brasil o segundo maior mercado
consumidor
de analgsicos do mundo, com cerca de 500 milhes de dlares
movimentados
anualmente. A lista dos dez medicamentos mais procurados nas
farmcias
brasileiras inclui quatro medicamentos para combater a dor,
dentre eles a dipirona
sdica um dos medicamentos mais consumidos (BUCHALLA, A. P.;
POLES, C.,
2002).
-
3
A dipirona , em verdade, o principal analgsico da teraputica
brasileira, com
31,8 % do mercado, sendo o paracetamol com 29,7 % em segundo e o
cido acetil
saliclico, com 27,1 %, em terceiro (GAZETA MERCANTIL, 2003).
Existem no pas
125 produtos a base de dipirona, sendo 71 em associao a outras
substncias
(ANDRADE, M. P. 2005). Dentre estas h medicamentos com associao
de
dipirona sdica, que age como analgsico e antipirtico e
cloridrato de papaverina,
que possui ao antiespasmdica. No mercado brasileiro
comercializam-se os
seguintes medicamentos contendo essa associao: Atroveran
(Laboratrio DM);
Melpaz (Laboratrio Profarb); Sedalene (Cristlia Produtos Qumicos
e
Farmacuticos), entre outros (DEF, 2004; DEF, 2005).
H tambm outras associaes entre analgsicos, por exemplo: dipirona
sdica e
paracetamol; paracetamol e ibuprofeno; dipirona, citrato de
orfenadrina e cafena;
dipirona e butil brometo de escopolamina; dipirona, cloridrato
de prometazina e
cloridrato de adifenina, entre outros (DEF, 2005).
Nos compndios oficiais no constam monografias de medicamentos
analgsicos
em associao, a maioria analisada individualmente.
A cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE) um dos mtodos
analticos
mais utilizados para a determinao de compostos em misturas, como
por exemplo,
a associao de frmacos (ALTUN, M.L., 2001). Um dos grandes
problemas dessa
metodologia o alto custo dos equipamentos e sua manuteno, alm do
uso de
solventes altamente puros.
Alguns laboratrios de pesquisas tm procurado tcnicas
alternativas quando no
h possibilidade de se usar a CLAE. Os pesquisadores tm buscado
melhorar as
metodologias j existentes.
Um grande avano nas tcnicas instrumentais analticas foi
impulsionado pela
presena de microprocessadores e microcomputadores nos
laboratrios qumicos,
no incio dos anos setenta. Foi necessrio criar tcnicas de
tratamento de dados
-
4
mais complexas do ponto de vista matemtico e estatstico,
surgindo uma nova
disciplina chamada quimiometria (SENA, M.M.; POPPI, R.J.,
2004).
A quimiometria (do ingls chemometrics) descreve as tcnicas e
operaes
associadas com o tratamento matemtico e a interpretao de dados
qumicos. Com
o avano da instrumentao e automao dentro dos laboratrios de
anlise, uma
enorme quantidade de dados, tabelas e grficos comearam a ser
gerados muito
rapidamente. A identificao, classificao e interpretao desses
dados podem ser
fatores limitantes na eficincia e na operao efetiva das anlises,
principalmente
sem a utilizao de um tratamento de dados adequado.
A espectroscopia molecular tem sido a rea da qumica analtica,
onde mais a
quimiometria tem contribudo. So numerosas as metodologias
quantitativas
desenvolvidas nas ltimas dcadas baseadas na combinao de
calibrao
multivariada (BRERETON, R.G., 2000) com tcnicas de
espectroscopia molecular
tais como, absoro no ultravioleta (UV) (DIN, E.; BALEANU, D.;
ONUR, F.,2001),
e/ou no visvel, no infravermelho (IV) mdio ou prximo, Raman e
fluorescncia
molecular (BRAGA, J. W. B.; POPPI, R.J. 2004).
Para a determinao direta de frmacos tem sido aplicada a combinao
de
quimiometria e espectroscopia molecular. A calibrao multivariada
e a
espectroscopia molecular uma alternativa rpida, simples e
relativamente barata
para a determinao direta de frmacos (SENA, M.M.; POPPI, R. J,
2004).
-
5
2. REVISO DE LITERATURA
2.1 Dor
A dor continua sendo uma das grandes preocupaes da Humanidade.
Desde
os primrdios do ser humano, conforme sugerem alguns registros
grficos da pr-
histria e os vrios documentos escritos ulteriormente, o homem
sempre procurou
esclarecer as razes que justificassem a ocorrncia de dor e os
procedimentos
destinados a seu controle. A expresso da dor varia no somente de
um indivduo
para outro, mas tambm de acordo com as diferentes culturas. A
ocorrncia de dor,
especialmente crnica, crescente, talvez em decorrncia de novos
hbitos de vida;
maior longevidade do indivduo; prolongamento de sobrevida dos
doentes com
afeces clnicas naturalmente fatais; modificaes do ambiente em
que vivemos; e
provavelmente do reconhecimento de novos quadros dolorosos e da
aplicao de
novos conceitos que traduzam seu significado. Alm de gerar
estresses fsicos e
emocionais para os doentes e para os seus cuidadores, a dor razo
de fardo
econmico e social para a sociedade (TEIXEIRA, M. J, 2005).
Nos Estados Unidos, dor uma prioridade para a sade pblica, sendo
a
partir de 2000, escolhida como a dcada da dor, e um dos quatro
aspectos
analisados no credenciamento e pontuao dos hospitais. Os
hospitais tambm
devem ter o 5 sinal vital (dor) registrado obrigatoriamente, alm
de temperatura,
presso arterial, pulso e respirao nas papeletas hospitalares
(MARQUEZ, J. O.,
2005).
Atualmente o tratamento da dor tem recebido ateno especial de
mdicos de
todo o mundo, com um crescente nmero de profissionais que
estudam e se
dedicam ao aperfeioamento dos cuidados clnicos e teraputicos da
dor. H
tambm todo um movimento para incluir a dor como 5 sinal vital
(SOCIEDADE,
2005), como j ocorre nos Estados Unidos.
-
6
2.1.1 Classificao da dor
A dor pode ser considerada como um sintoma ou manifestao de
uma
doena ou afeco orgnica, mas tambm pode vir a constituir um
quadro clnico
mais complexo. Existem muitas maneiras de se classificar a dor.
Considerando a
durao da sua manifestao, ela pode ser de trs tipos: - DOR AGUDA
- Aquela
que se manifesta transitoriamente durante um perodo
relativamente curto, de
minutos a algumas semanas, associada leses em tecidos ou rgos,
ocasionadas
por inflamao, infeco, traumatismo ou outras causas. Normalmente
desaparece
quando a causa corretamente diagnosticada e quando o tratamento
recomendado
pelo especialista seguido corretamente pelo paciente. A dor
constitui-se em
importante sintoma que primariamente alerta o indivduo para a
necessidade de
assistncia mdica, por exemplo: a dor ps-operatria (que ocorre
aps uma
cirurgia); a dor que ocorre aps um traumatismo; a dor durante o
trabalho de parto; a
dor de dente; as clicas em geral, como nas situaes normais
(fisiolgicas) do
organismo que podem provocar dores agudas, como o processo da
ovulao e da
menstruao na mulher (SOCIEDADE, 2005).
DOR CRNICA - Tem durao prolongada, que pode se estender de
vrios
meses a vrios anos e que est quase sempre associada a um
processo de doena
crnica. A dor crnica tambm pode ser conseqncia de uma leso j
previamente
tratada. Exemplos: Dor ocasionada pela artrite reumatide
(inflamao das
articulaes), dor do paciente com cncer, dor relacionada a
esforos repetitivos
durante o trabalho, dor nas costas e outras (SOCIEDADE,
2005).
DOR RECORRENTE - Apresenta perodos de curta durao que, no
entanto,
se repetem com freqncia, podendo ocorrer durante toda a vida do
indivduo,
mesmo sem estar associada a um processo especfico. Um exemplo
clssico deste
tipo de dor a enxaqueca (SOCIEDADE, 2005).
-
7
2.1.2 Tratamentos da dor
O tratamento adequado dos processos dolorosos tem como pilar
fundamental
o diagnstico das causas que provocaram o seu aparecimento, com
base no exame
clnico e nos exames complementares. Nos casos de dor aguda, a
remoo da
causa da dor (por exemplo, a extrao de um dente cariado), o uso
de
medicamentos adequados e em determinados casos procedimentos de
fisioterapia e
/ ou psicologia so suficientes para a melhora da dor e
restabelecimento do individuo
em suas atividades normais. Os casos de dor crnica demandam um
tratamento
mais complexo e prolongado, por serem resultantes de mecanismos
multifatoriais
que conduziram o organismo afetado a esse ponto de cronicidade
e, em geral,
demandam avaliao por especialistas de vrias reas para se obter
um melhor
alvio da dor. Os mtodos para o tratamento da dor so utilizados
de maneira
associada (conjunta), conforme a necessidade de cada paciente e
so descritos a
seguir:
- TRATAMENTO MEDICAMENTOSO: A medicao deve ser utilizada de
acordo com a orientao mdica e no somente quando o paciente
considere
necessrio. Consiste na administrao por via oral, injetvel ou uma
outra mais
apropriada, de produtos como os analgsicos e anti-Inflamatrios,
que combatem a
dor e as inflamaes nos tecidos ou rgos e de produtos adjuvantes,
que so
auxiliares dos analgsicos, aumentando a sua eficincia no alvio
da dor e, ao
mesmo tempo, melhorando o apetite, o humor e a parte emocional.
So eles:
antidepressivos, que tem efeito analgsico e que, alm disso,
melhoram o humor, o
sono e o apetite; neurolpticos, que em geral diminuem a
ansiedade gerada pela dor
e que tambm colaboram no seu alvio; corticosterides, que em
geral reduzem o
inchao e a inflamao local, aumentam o apetite e o nimo. Em
situaes especiais
tambm so utilizados os anticonvulsivantes, miorrelaxantes e
outros tranqilizantes.
- TRATAMENTOS AUXILIARES: Alm dos medicamentos, a utilizao
de
recursos como a fisioterapia, a acupuntura e a psicologia
auxiliam num melhor
controle do processo da dor. Esses recursos, alm de aliviarem a
dor, tm a
-
8
vantagem de apresentarem pouco ou nenhum efeito colateral e de
diminuir a
necessidade de analgsicos (TEIXEIRA, M. J, 2005).
2.2 Analgsicos, antipirticos e antiinflamatrios
A dor e a febre, associadas ou no a processos inflamatrios,
tm
preocupado a humanidade h muitos sculos. A utilizao de infuses
de plantas,
notadamente de Salix alba vulgaris ( casca do salgueiro) , como
antipirtico remonta
ao sculo XVIII. Da casca do salgueiro Leroux isolou, em 1827, a
salicina, que, por
hidrlise, libera glicose e lcool saliclico (saligenina). Mais
tarde, em 1838, Piria
isolou um cido da salicina, que denominou de cido saliclico. Em
1844, o cido
saliclico foi isolado por Cahours do leo de gaultria
(wintergreen), e finalmente, em
1860, Kolbe e Lautemann conseguiram obt-lo atravs de sntese. Em
1899, Dreser
introduziu no uso clnico o cido acetilsaliclico. Tais
descobertas foram seguidas
pela introduo de novos produtos, dando incio teraputica de
importantes
compostos de ao analgsica, antipirtica e antiinflamatria, que
ainda hoje
continuam em franco desenvolvimento (SILVA, P. 2002)
Analgsicos so depressores seletivos do sistema nervoso
central
empregados para aliviar a dor sem causar a perda de conscincia.
Agem por elevar
o limiar da percepo da dor. O termo analgesia vem da palavra
grega que significa
sem dor.
A associao Mdica Norte-Americana dividiu os analgsicos em
duas
classes: analgsicos fortes ou hipnoanalgsicos e os analgsicos
suaves.
Os analgsicos suaves, isto , os que eliminam dores moderadas,
tais como
cefalia, mialgia, artralgia e outras, podem apresentar tambm aes
antitrmica,
antiinflamatria e antigotosa, alm de outras. Distinguem-se,
portanto, os
antipirticos, os anti-reumticos e os uricosricos.
-
9
Antipirticos ou antitrmicos so frmacos que eliminam ou aliviam
os
estados febris. No baixam a temperatura normal, mas apenas
quando ela est
elevada.
A temperatura corporal controlada por um mecanismo regulador
situado no
hipotlamo, que controla a produo e a perda de calor. O hipotlamo
, por assim
dizer, o termostato do organismo. Ao sobrevir febre, eleva-se o
nvel do
termostato, embora persista o equilbrio entre a produo e perda
de calor. Entre as
causas da febre sobressaem as seguintes: inflamao, neoplasias,
leses do
sistema nervoso central, desidratao (sobretudo em crianas),
certos frmacos,
molstias infecciosas (KOROLKOVAS, A. BURCKHALTER, J. H.,
1988).
O desequilbrio entre a produo e a perda de calor desencadeado
pelos
neurnios do hipotlamo em resposta a um estmulo provocado por
piretognios
endgenos leucocitrios, que so protenas especficas veiculadas
pelo plasma.
Estes piretognios so sintetizados por certos tipos de leuccitos
quando os
piretognios exgenos (tais como bactrias) invadem o organismo. Os
antipirticos
produzem abaixamento da temperatura corporal elevada em
conseqncia do
aumento da perda de calor (KOROLKOVAS, A. BURCKHALTER, J. H.,
1988).
Os analgsicos antipirticos e antiinflamatrios constituem um
grupo de
compostos muito heterogneos com vrias estruturas qumicas,
podendo ser
distribudos nas seguintes classes, de acordo com o grupo qumico
a que pertencem
(KOROLKOVAS, FRANA, F.F.A.C., 2002):
- salicilatos: salicilato de sdio, cido acetilsaliclico,
salicilamida, diflunisal;
- derivados da pirazolona: fenazona; metamizol;propifenazona
- derivados do para-aminofenol: paracetamol (acetaminofeno);
- derivados de cidos arilpropinicos: ibuprofeno, naproxeno,
fenoprofeno;
-
10
Alm dos analgsicos que tambm so usados como antipirticos, h
aqueles
que se utilizam exclusivamente como analgsicos, embora possam
exercer
igualmente outras aes. Esses frmacos so divididos em: frmacos
usados no
tratamento de neuralgias; fenamatos; frmacos antienxaqueca e
diversos
(KOROLKOVAS, FRANA, F.F.A.C., 2002) :
- frmacos usados no tratamento de neuralgias: neuralgia do
trigmeo
carbamazepina (anticonvulsivante); baclofeno (miorrelaxante) e
fenitona
(anticonvulsivante); neuralgia glossofarngea carbamazepina;
neuralgia ps-
herptica amitriptilina (antidepressivo); neuralgia diabtica
carbamazepina,
fenitona ou antidepressivos tricclicos;
-fenamatos e issteros: cido mefenmico; clonixinato de lisina;
floctafenina;
- frmacos antienxaqueca: diidroergotamina; ergotamina;
metisergida;
naratriptana; pizotifeno; rizatriptana; sumatriptana;
zolmitriptana; betabloqueadores;
bloqueadores do canal de clcio; antidepressivos e compostos de
ltio;
- diversos: flupirtina, levomepromazina e viminol.
No comrcio so encontradas especialidades farmacuticas que contm
um
produto isoladamente ou associao de princpios ativos
pertencentes ao mesmo ou
a diferentes grupos (SILVA, P. 2002).
-
11
2.2.1 Dipirona sdica
Figura 1 - Estrutura qumica da dipirona
A dipirona tambm chamada de Noramidopiriniometanossulfonato
sdico,
analgina, metamizol, metampirona, noramidopirona, sulpirina e
por outros nomes,
um dos derivados do pirazol.
P cristalino branco ou quase branco, inodoro, solvel em gua.
reconhecidamente analgsico e antipirtico eficiente. Por ser
hidrossolvel, pode ser
administrado parenteralmente em grandes doses, o que constitui
vantagem e,
provavelmente, contribui para o abuso deste frmaco, que o
analgsico e
antipirtico mais vendido no Brasil sob dezenas de nomes
comerciais,
principalmente como constituinte de associaes medicamentosas
(KOROLKOVAS,
A. BURCKHALTER, J. H., 1988).
-
12
A dipirona sdica um derivado pirazolnico introduzido na prtica
clnica em
1922, na Alemanha. A histria de sua sntese remonta a 1883,
quando a nica forma
conhecida de combate febre, na Europa, era o consumo de um
produto feito
base de casca de cinchona, rvore natural de Java, da famlia das
rubiceas. Este
produto, alm de ter eficincia relativa, tinha custo
excessivamente alto, em razo de
sua escassez e difcil obteno. Assim, a produo industrial da
antipirina (ou
fenazona), que um derivado pirazolnico sintetizado a partir da
anilina (um
corante), por um laboratrio farmacutico alemo, medida que
permitiu a produo
sinttica de um medicamento que s podia ser obtido da Natureza,
tornou o combate
febre mais eficaz e menos oneroso. Tal fato era essencial para o
combate a
diversas doenas que grassavam na poca, notadamente tuberculose,
malria e
demais epidemias. Somente alguns anos aps sua introduo
constataram-se as
propriedades analgsicas do composto. Tal fato ocorreu em 1889,
durante um surto
da gripe influenza que assolou a Europa, onde este medicamento
foi utilizado
amplamente para o tratamento. Estas propriedades analgsicas
foram reforadas
pela sntese e introduo no mercado alemo de um novo composto em
1921, a
primeira pirazolona de uso clnico nomeada dipirona (em verdade,
composta por
50% melubrina e 50% aminopirina). No Brasil, a dipirona foi
introduzida em 1922
pela Hoechst AG, com o nome de Novalgina (ANDRADE, M. P.,
2005).
2.2.1.1.Metabolismo
A dipirona apresenta, de acordo com estudos realizados em
voluntrios
humanos, quatro metablitos conhecidos: 4-metil-amino-antipirina
(MAA), 4-amino-
antipirina (AA), 4-acetil-amino-antipirina (AAA) e
4-formil-amino-antipirina (FAA)
(LEVY, M.; FLUSSER, D.; ZYLBER-KATZ , E; GRANIT, L, 1984).
Aps
administrao por via oral, a dipirona passa por rpida hidrlise
no-enzimtica,
determinando a formao do metablito MAA, que a seguir
metabolizado no fgado
por demetilao a AA, e por oxidao a FAA (ERGN, H.; FRATTARELLI,
D.A.C.;
ARANDA, J. V., 2004). Nenhum desses metablitos liga-se
extensivamente s
protenas plasmticas, (ROHDEWALD, P; DREHSEN, G; MILSMANN, E;
DERENDORF, H., 1983) sendo predominantemente excretados pelo
rim. Os efeitos
analgsicos correlacionam-se, de modo bem prximo, com as
concentraes dos
-
13
dois primeiros metablitos acima descritos (MAA e AA) (SCHUG,
S.A.; ZECH, D. ;
DRR, U., 1990). Alm da importante propriedade analgsica
destacada ao longo
do tempo, o frmaco ainda apresenta propriedades antiinflamatrias
que foram
identificadas em alguns modelos farmacolgicos, mas cuja
relevncia clnica , at o
presente momento, questionvel. Weithmann e Alpermann(WEITHMANN,
K.U.;
ALPERMANN, H.G, 1985) avaliaram os efeitos bioqumicos e
farmacolgicos da
dipirona e metablitos sobre a cascata do cido araquidnico e
verificaram que os
metablitos 4-MAA e 4-AA inibiram a sntese de prostaglandinas na
faixa de 103 a
104 mol/L, sendo, portanto, comparveis ao cido acetilsaliclico,
enquanto os
outros dois metablitos mostraram-se praticamente inativos. Os
dados do suporte
ao conceito de serem estes os metablitos responsveis pelos
efeitos analgsicos
clnicos da dipirona.
2.2.1.2.Mecanismo de ao da dipirona
A despeito de inmeros estudos comportamentais e
eletrofisiolgicos, o
mecanismo de ao pelo qual se evidencia o efeito analgsico da
dipirona ainda no
est claramente elucidado, parecendo concorrer mecanismos
perifricos e centrais.
Em nvel perifrico, alguns trabalhos experimentais iniciais
enfatizam a ao da
dipirona sobre a hiperalgesia decorrente da leso tecidual, tanto
por inibio da
ativao da adenilciclase por substncias hiperalgsicas como por
bloqueio direto do
influxo de clcio no nociceptor (LORENZETTI, B.B., FERREIRA,
S.H., 1985).
Lorenzetti e Ferreira descrevem a ativao de uma via
arginina-xido ntrico para
explicar a analgesia perifrica e espinhal da dipirona
(LORENZETTI, B.B.;
FERREIRA, S.H. 1996). Trabalhos experimentais mais recentes
sugerem que o
efeito antinociceptivo perifrico tambm decorre da ativao de
canais de potssio
sensveis ao ATP (ALVES, D.; DUARTE, I.,2002). Sachs, Cunha e
Ferreira, neste
sentido, situam a dipirona como fazendo parte de uma nova classe
de frmacos
analgsicos capazes de ativar a via arginina/ NO/ GMPc/protena
cinase G/canais de
K+ ATP sensveis ao ATP, constituindo-se numa categoria de
analgsicos
perifricos com mecanismo de ao diverso dos glicocorticides ou
inibidores de
cicloxigenases. Outros grupos procuraram investigar o mecanismo
de ao
analgsico da dipirona a partir da reconhecida propriedade
antipirtica, que decorre
-
14
da capacidade de inibio de prostaglandinas no sistema nervoso
central (SNC),
notadamente no hipotlamo. Para estes autores, a propriedade
analgsica da
dipirona dever-se-ia ao dos metablitos sobre a sntese de
prostaglandinas no
SNC. (SACHS, D; CUNHA, F.Q.; FERREIRA, S.H., 2004). Campos e
colaboradores
estudaram a ao da dipirona sobre a regulao da atividade das
cicloxigenases,
descrevendo-se, mais recentemente, que a dipirona seria capaz de
inibir uma
isoenzima da cicloxigenase (COX 3), mecanismo central pelo qual
o frmaco
exerceria as aes analgsicas e antipirticas. (ANDRADE, M.P.,
2005). Muitos
trabalhos tm respaldado, porm, que o mecanismo de ao analgsico
da dipirona
se efetive, de modo relevante, por sua ao espinhal. Neugebauer e
colaboradores
em estudos conduzidos em felinos e roedores, apresentam
evidncias
eletrofisiolgicas que respaldam um stio de ao antinociceptivo
espinhal, situando-
o no corno dorsal da medula espinhal (NEUGEBAUER, V.; SCHAIBLE,
H.G.; HE, X.;
LCKE, T.; GNDLING, P.; SCHMIDT, R.F., 1994). Este ltimo stio de
ao
reforado por estudos recentes (VAZQUEZ, E; HERNANDEZ, N;
ESCOBAR, W;
VANEGAS, H., 2005) que administrando a dipirona por via venosa
no rato (200
mg/kg) demonstraram a ativao de circuitos opioidrgicos endgenos
na substncia
periaquedutal cinzenta e no ncleo magno da rafe - ativao esta
reversvel pela
naloxona diretamente aplicada nestas reas, que compem o chamado
sistema
descendente inibitrio espinhal. Deste modo, parece que o
mecanismo de ao da
dipirona permanece no totalmente elucidado, possivelmente
decorrendo a ao
analgsica da atividade tanto central quanto perifrica, e em
diferentes nveis de
processamento da informao dolorosa.
2.2.1.3 Usos clnicos da dipirona
A dipirona um analgsico no-opiide empregado em mbito mundial
para
tratamento da dor, tanto aguda quanto crnica (EDWARDS, J. E.,
MCQUAY, H. J.,
2002). A eficcia clnica em diversos quadros lgicos tem sido
relatada, destacando-
se, entre outros, a utilidade no tratamento da dor ps-operatria
(STANKOW, G.;
SCHMIEDER, G.; LECHNER, F.J.; SCHINZEL, S., 1995), episdios de
clicas
nefrticas (GARCIA-ALONSO, F.; GONZALES DES SUSO, M.J.;
LOPEZ-ALVAREZ,
M.; PALOP, R.; LUCENA, M.I.; MARIN R., 1991) crises de enxaqueca
com e sem
-
15
aura (BIGAL, M.E.; BORDINI, C.A.; SPECIALI, J.G., 2002),
tratamento da dor
dentria ( ANDRADE, M.P., 2005) e dores do cncer (RODRIGUEZ, M.;
BARUTELL,
C.; RULL, M.; GALVEZ, R; PALLARES, J.; VIDAL, F.; ALIAGA, L.,
1994),
considerada um dos melhores antitrmicos para crianas (BERLIN,
C., 2001;
SPIGSET O, HAGG S, 2000). A dipirona sdica, disponvel em
formulaes para uso
por via oral, parenteral e retal, bastante utilizada como agente
nico ou
coadjuvante no tratamento da dor ps-operatria. Posso e outros
autores em
trabalho clnico, prospectivo e duplamente-encoberto com placebo
conduzido em
cirurgias abdominais, avaliaram a importncia da dose
administrada no perodo ps-
operatrio no que diz respeito analgesia conferida pela dipirona,
onde se
empregaram trs diferentes doses (500 mg, 1.000 mg e 2.000 mg).
Os autores
ressaltaram a analgesia dose-dependente da dipirona, descrevendo
que o aumento
da dose administrada acompanhou-se de reduo da intensidade de
dor referida
pelos pacientes (POSSO, I.; ABRAMOF, S.; CRISCUOLO, D., 1996).
Demais
autores comparam, no mbito da dor ps-operatria, a analgesia
provida por doses
maiores de dipirona (em torno de 30-35 mg/kg) com a
proporcionada pela
administrao de opiides de potncia intermediria, como tramadol
(SPACEK, A.;
GORAJ, E.; NEIGER, F. X.; JAROSZ, J.; KRESS, H. G. 2003). Em
outro trabalho foi
descrito um efeito poupador de opiides atribuvel dipirona quando
administrada
conjuntamente com a morfina, no perodo ps-operatrio, a pacientes
adultos
submetidos a procedimentos abdominais e urolgicos (TEMPEL, G.;
VON
HUNDELSHAUSEN, B.; REE-KER, W., 1996). No mbito da dor
ps-operatria, a
maioria dos trabalhos publicados tem avaliado as caractersticas
da analgesia
conferida pela dipirona quando administrada aps a inciso
cirrgica (ANDRADE,
M.P. 2005).
2.2.1.4 Polmica sobre o uso da dipirona
A dipirona sdica amplamente usada no s no Brasil, mas como em
outros
pases como a Frana, Alemanha, Hungria, Israel, Espanha, Sucia e
Tailndia.
Todavia, nos Estados Unidos o uso da dipirona foi proscrito h
mais de 20 anos, em
virtude do suposto papel em deprimir a medula ssea, causando
anemia aplstica e
agranulocitose (BENSEOR, I.M. 2001).
-
16
Em 1932, Madison e Squier estabeleceram, pela primeira vez, a
relao entre
o uso da aminopirina e agranulocitose. Entre 1934 e 1937 ocorreu
principalmente
nos EUA, uma crescente ateno para a possibilidade de tal efeito
adverso. Em
1937, a antipirina foi retirada do mercado americano pela Food
and Drug
Administration (FDA). A aminopirina, por sua vez, dado o seu
parentesco com a
antipirina, foi colocada no Schedule IV do Pharmacy and Poisons
Act, de 1938,
restringindo o seu uso sob prescrio mdica. Desta forma, a
dipirona passou a ser
olhada com desconfiana. Em 1952, Discombe realizou um estudo
retrospectivo
agregando dados de trs outros trabalhos retrospectivos e de uma
comunicao
pessoal, pretendendo estudar a relao entre a aminopirina (e no a
dipirona) e a
incidncia de agranulocitose na populao geral. Trata-se de um
levantamento com
erros metodolgicos graves, que incluiu casos expostos a outros
fatores por si s
capazes de ocasionar agranulocitose, como a fenilbutazona,
acarretando uma
incidncia inaceitavelmente alta (morbidade de 1 caso/115
exposies e mortalidade
de 1 caso/159 exposies). Seguiram-se outros levantamentos,
incluindo o de
Huguley, em 1964, que simplesmente recompilou o trabalho de
Discombe,
acrescentando os resultados de mais trs pesquisadores, sem que
entre os casos
arrolados se acrescentasse mais um caso de agranulocitose e
originando, assim,
nmeros discretamente diferentes dos citados por Discombe. No
entanto, as reaes
do FDA, do Reino Unido e da Sucia que se seguiram foram baseadas
neste
trabalho. Desta forma, a Austrlia retirou a dipirona de seu
mercado em 1965.
(BRASIL, 2005).
Em 1986 publicaram-se os dados de um vultoso estudo
epidemiolgico que
buscou analisar esta questo, o estudo de Boston; The
International
Agranulocytosis and Aplastic Anemia Study, que por sua perfeio
metodolgica
veio a colocar um ponto final nas especulaes existentes. Este
estudo foi
conduzido em sete pases (Alemanha, Itlia, Espanha, Hungria,
Israel, Bulgria e
Sucia) de 1980 a 1984, incluindo 300 hospitais e 22,2 milhes de
pessoas e
concluiu que: - o risco estimado para agranulocitose entre os
usurios de dipirona
era bastante baixo, no se verificando correlao entre uso de
dipirona e incidncia
de agranulocitose; - a agranulocitose e a anemia aplstica podem
ser causadas por
muitos medicamentos, assim como agentes qumicos e pesticidas; -
a agranulocitose
ocorre raramente em crianas, aumentando a sua incidncia com a
faixa etria; - a
-
17
agranulocitose , basicamente, uma reao alrgica, iniciando-se os
sintomas entre
2-3 dias aps a exposio ao agente qumico ou medicamento; - o
excesso de risco
de agranulocitose atribuvel dipirona , quando muito, de 1,1 caso
por milho de
pessoas expostas que tenham tomado o frmaco por 7 dias antes do
incio da
doena; - a dipirona no est associada anemia aplstica (THE,
1986).
Alguns pesquisadores afirmam que o risco de agranulocitose
atravs do uso
de dipirona mnimo e a mortalidade praticamente a mesma
relacionada ao uso
de paracetamol (CAMU, F.; VANLERSBERGHE, C., 2002).
Em julho de 2001, a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
(Anvisa)
conduziu o Painel Internacional de Avaliao da Segurana da
Dipirona (BRASIL,
2005), contando com a participao de autoridades nacionais e
estrangeiras, com o
objetivo de promover esclarecimento sobre os aspectos da
segurana do uso clnico
da dipirona. Os seguintes pareceres foram emitidos:
- h consenso de que a eficcia da dipirona como analgsico e
antitrmico
seja inquestionvel;
- h consenso de que os riscos atribudos sua utilizao em
nossa
populao at a presente data sejam baixos, e de que os dados
cientficos
disponveis apontando a ocorrncia destes riscos no sejam
suficientes para se
indicar uma alterao do status regulatrio (venda sem
prescrio);
- os dados apresentados durante o painel permitiram aos
participantes
concluir que os riscos da dipirona so similares, ou menores, que
os de outros
analgsicos/antitrmicos disponveis no mercado;
- a mudana da regulamentao atual da dipirona incorreria em
aspectos
negativos para a populao, aumentando os riscos de utilizao de
outros frmacos
indicados para a mesma finalidade teraputica.
-
18
Um estudo recente sobre o risco de agranulocitose atribuvel
dipirona com
base em banco de dados de laboratrios de hematologia e registro
de discrasias
sangneas associadas ao uso concomitante do frmaco tambm concluiu
pela
baixa incidncia deste evento adverso (IBANEZ, L.; VIDAL, X.;
BALLARIN, E.;
LAPORTE, J.R. 2005).
Em dezembro de 2004, os consumidores do analgsico e antitrmico
mais
usado no Brasil foram surpreendidos pela notcia de que, a partir
de 14 de janeiro do
ano seguinte, a Anvisa deveria restringir alguns dos
medicamentos comercializados
contendo a dipirona como princpio ativo, que s poderiam ser
vendidos com
apresentao de receita mdica e deveriam portar tarja vermelha. O
Ministrio
Pblico Federal apresentou denncia da Sociedade Brasileira de
Vigilncia de
Medicamentos (Sobrevime) sobre os riscos que esta substncia
poderia trazer
sade, alegando que a dipirona uma substncia que provoca
funestas
conseqncias decorrentes de sua alta toxicidade, como anemia,
nuseas, reaes
alrgicas e que pode levar morte. O Ministrio Pblico se baseava
no fato de
vrios pases j proibirem a livre comercializao da dipirona,
citando, tambm,
estudos realizados pela Organizao Mundial da Sade, pelo Conselho
Federal de
Farmcia, pela Universidade de Braslia e pela Sociedade
Brasileira de Vigilncia de
Medicamentos para restringir o uso da dipirona atravs da
exigncia da receita
mdica (ANDRADE, M.P.)
Por deciso judicial, estes medicamentos deveriam entrar para a
categoria
dos frmacos que demandam prescrio mdica. Logo aps esta deciso,
porm,
um recurso impetrado por um dos laboratrios fabricantes derrubou
a liminar.
Chamada a opinar na ao, a Anvisa alegou que a dipirona est no
mercado
mundial h 80 anos, sendo o analgsico e antitrmico mais usado no
Pas. Disse
ainda, segundo a Justia Federal, que os riscos atribudos
substncia at o
presente so baixos. A diretoria da Anvisa, na ocasio, citou
ainda o painel
organizado pela agncia, que concluiu que a dipirona um
medicamento seguro e
eficaz. Desta forma, a dipirona sdica permanece em nosso pas
sob
comercializao livre de prescrio mdica (ANDRADE, M.P., 2005).
-
19
2.2.2 Metodologias para a anlise de dipirona sdica
2.2.2.1 Espectrofotometria Ultravioleta/Visvel (UV/VIS)
Amostras de comprimidos contendo dipirona sdica foram analisadas
por
espectrofotometria visvel atravs de reao com iodato de potssio
0,1 M,
produzindo um composto de cor amarelo avermelhada por cinco
minutos, com
(comprimento de onda) mximo em 460 nm. Essa metodologia seguiu a
lei de Beer no intervalo de concentrao de 1 a 10 mg para dipirona
sdica (QUERSHI, S.Z.;
SAEED, A,; HASAN, T.,1989).
Foram testados vrios solventes para o doseamento de dipirona
por
espectroscopia no ultravioleta (UV). Foram realizados espectros
na regio de 225 a
300nm com solues preparadas com cido clordrico 0,1 M, hidrxido
de sdio 0,1
M, gua deionizada e lcool etlico. Atravs da anlise de regresso
linear, o cido
clordrico apresentou melhores resultados, sendo o solvente mais
indicado para este
tipo de anlise (CARDOSO, T.F.M.; KANIS, L.A.; SILVA, W.B.;
GALATO, D.,2003).
SAKIARA, K. A. et al. determinaram a dipirona sdica nas
formulaes
farmacuticas comprimidos e soluo oral atravs da
espectrofotometria. O mtodo
foi baseado na seleo oxidativa da dipirona, em presena de cido
sulfrico,
formaldedo reagindo com um cido cromforo, produzindo um composto
de cor
violeta-avermelhado ( max = 575 nm). O mtodo mostrou ser
simples, exato, seletivo e apresentou linearidade (SAKIARA, K.A.;
PEZZA, L.; MELIOS, C.B.;
PEZZA, H.R.; MORAES, M., 1999).
LIMA, J.L.F.C. et al., desenvolveram um mtodo de determinao de
dipirona
atravs de sistema de injeo de fluxo em espectrofotometria. Foi
utilizado um
sistema de micro-bombas e as amostras foram monitoradas por
espectrofotometria a
430 nm. O mtodo mostrou muita versatilidade, exatido, preciso e
limite de
deteco de 1mg/L de dipirona (LIMA, J.L.F.C.; S, S.M.O.; SANTOS,
J.L.M.;
ZAGATTO, E.A.G., 2003).
-
20
ERK, N. e ONUR, F. analisou comprimidos contendo dipirona sdica
e
paracetamol em associao. Determinaram os dois compostos
simultaneamente
atravs da espectrofotometria derivada de primeira ordem,
utilizando metanol como
solvente. A dipirona foi medida em 249,2 nm e o paracetamol em
264,8 nm (ERK,
N.; ONUR, F., 1997).
DOGAN, H.N. fez a determinao simultnea de dipirona sdica,
paracetamol
e cafena atravs da espectrofotometria, devido as solues padro
terem o ponto
isoabsortivo em 265,4 nm, utilizando-se etanol como solvente.
Aplicou-se o mtodo
dos mnimos quadrados e determinou-se a concentrao de cada
componente. Os
excipientes do comprimido no interferiram na anlise. Os
resultados mostraram um
mtodo simples, sensvel e exato (DOGAN, H.N., 1996).
Pesquisadores fizeram a determinao simultnea de dipirona sdica,
paracetamol e cafena atravs da espectrofotometria derivada pelo
mtodo de zero-
crossing, utilizando HCl 0,1 M, como solvente. As concentraes
dos trs compostos
na mistura foram determinadas pelo uso de grficos de calibrao de
cada
componente obtidos pela medida da amplitude dos comprimentos de
onda mximo e
mnimo selecionados. Foram feitos clculos matemticos atravs dos
valores obtidos
de absortividade de cada composto. Essa nova metodologia
possibilitou um melhor
uso da espectrofotometria para a anlise de mistura de
componentes (DIN, E.;
ONUR, F., 1998)
Para a anlise simultnea da mesma mistura ternria, contendo
dipirona
sdica, paracetamol e cafena em comprimidos foram pesquisadas
duas tcnicas de
calibrao multivariada, tambm chamada quimiometria. Foram
aplicadas as
tcnicas de mtodo dos mnimos quadrados inverso (ILS) e anlise do
componente
principal (PCA) sobre a anlise espectrofotomtrica desses
multicomponentes.
Foram medidas as absorbncias dos trs componentes em soluo de HCl
0,1 M, na
faixa espectral de 225 a 285 nm (passo = 5 nm). Os 13
comprimentos de onda
utilizados para a realizao do modelo de calibrao da mistura
ternria foram
tratados pelo software MAPLE V. Atravs de clculos matemticos
foram obtidos os
valores de desvio padro relativo para o ILS e PCA para os trs
princpios ativos e
-
21
as respectivas mdias de recuperao. Os resultados obtidos foram
comparados
com os resultados de CLAE, nas seguintes condies cromatogrficas:
coluna
Nucleosil C18(250 x 4,6 mm); fase mvel: gua: metanol 18:82 v/v;
vazo de
1mL/min e deteco a 254 nm. As duas tcnicas aplicadas sobre a
espectrofotometria possibilitaram bons resultados de eficincia,
preciso, exatido e
linearidade (DIN, E.; BALEANU, D. e ONUR, F., 2001).
ABURJAI et al, determinaram simultaneamente a dipirona sdica e a
vitamina
C em comprimido e soluo injetvel, atravs da espectrofotometria
derivada de
segunda ordem, utilizando-se o comprimento de onda de 280 nm
para a vitamina C
e 272 nm para a dipirona, usando metanol como solvente. Neste
mesmo trabalho,
utilizaram a cromatografia em camada delgada de alta eficincia
para essa mesma
determinao. As amostras foram dissolvidas em solues metanlicas e
aplicadas
em placa de slica gel para cromatografia em camada delgada e
examinadas a 260
nm. As duas metodologias mostraram bons resultados para a anlise
das amostras
(ABURJAI, T.; AMRO, B.I.; AIEDEH, K.; ABUIRJEIE, M.; AL-KHALIL,
S., 2000).
MORELLI, B. analisou a mistura binria de dipirona sdica e
cloridrato de
pitofenona, um frmaco antiespasmdico, por espectrofotometria
derivada.
O primeiro mtodo utilizado foi a aplicao da derivada de segunda
ordem
com calibrao linear a 266,5 e 302,5 nm (dipirona), 257 e 286 nm
(pitofenona) e
para a derivada de terceira ordem a 242 e 278,3 nm (dipirona) e
228,5 e 300 nm
(pitofenona). No segundo mtodo foram utilizadas as derivadas de
primeira ordem
com calibrao linear para os seguintes comprimentos de onda: 235
e 262 nm
(dipirona) e 229,5 e 288,5 nm (pitofenona), para a derivada de
segunda ordem 249,7
e 268 nm (dipirona) e 280,5 e 300 nm (pitofenona). Todas as
solues foram
preparadas em gua destilada. Os procedimentos foram simples,
rpidos e no
necessitaram de separao preliminar ou tratamento para as
amostras (MORELLI,
B., 2003).
-
22
2.2.2.2 Cromatografia lquida de alta eficincia - CLAE
ASMARDI, G. e JAMALI, F. fizeram a determinao de dipirona e de
seu
metablito ativo o 4-metil-amino-antipirina (MAA) atravs da
cromatografia lquida. A
dipirona foi determinada atravs da coluna de troca inica
Bondapak AX/Corasil
(Waters Assoc.) 61 cm X 2 mm (35-50 m), fase mvel: tampo fosfato
pH 5,6:
metanol (85:15), vazo de 0,5 mL/min, deteco no ultravioleta(UV)
a 254 nm. Para
a determinao do MAA utilizou-se uma coluna de fase reversa 30 cm
X 3,9 mm (10
m) (Bondapak C18 , Waters Assoc.). A fase mvel foi gua: metanol:
cido actico
(75:20:5), vazo de 1,0 mL/min e deteco no UV a 280 nm. As
amostras foram
analisadas dos fludos biolgicos urina e plasma (ASMARDI, G.;
JAMALI, F., 1983).
Atravs da CLAE pesquisadores separaram e determinaram
quantitativamente a dipirona e seus produtos de degradao, os
parmetros
seguidos foram: coluna cromatogrfica de fase reversa Merck RP 18
(25 cm X 4,6
mm, 10 m) e pr-coluna RP-18 de 5 cm, 10 m); fase mvel: metanol:
gua:
trietilamina (50:50:0,025), vazo de 0,3 mL/min. a dipirona foi
detectada no UV a 228
nm, e seus produtos de degradao a 244 nm
(EDDINE,N.H.;BRESSOLE,F.;MANDROU,B.; FABRE,H., 1982).
KATZ, E.Z. et al. fez a determinao simultnea de dipirona e
seus
metablitos em plasma utilizandose como metodologia a
cromatografia lquida, com
os seguintes parmetros: coluna cromatogrfica Bondapak C18(300 mm
X 30 cm,
10 m), fase mvel:8% de metanol em soluo de acetato de sdio 0,01
M , pH 3,0
ajustado com cido clordrico concentrado, vazo de 1,6 mL/min,
deteco no UV a
257 nm. Atravs desse mtodo foi possvel uma boa separao entre a
dipirona e
seus metablitos (KATZ, E.Z.; GRANT, L.; DRAYER, D.E.; LEVY, M.,
1984).
ABOUNASSIF, M.A.; GAD-KAREIM e WAHBI, A.M. determinaram
simultaneamente pela CLAE dipirona, fenobarbital e quelina em
comprimidos. Os
parmetros utilizados: coluna de fase reversa Pak Varian, fase
mvel:
metanol:gua(68:32) para a reteno de quelina e dipirona com
deteco UV a 254
nm; 94,5 mL de gua, 0,5 mL de amnia(para ajustar o pH a 10,5) e
5mL de metanol
-
23
para fenobarbital detectado em UV a 240 nm e vazo de 0,7 mL/min.
Essa
metodologia apresentou reprodutibilidade, especificidade e
exatido (ABOUNASSIF,
M.A.; GAD-KAREIM e WAHBI, A.M., 1990).
ALTUN, M.L. fez a determinao simultnea de dipirona, paracetamol
e
cafena pelo mtodo cromatogrfico com os parmetros: coluna
cromatogrfica -
Bondapak C8; fase mvel KH2PO4 0,01 Mmetanol-acetonitrila-lcool
isoproplico
(420:20: 30:30), vazo de 1mL/min, deteco espectrofotomtrica a
215 nm (ALTUN,
M.L., 2002).
SENYUVA, H.Z. et al. determinaram a dipirona em formulaes
lquidas e
slidas pela cromatografia lquida com deteco de arranjo de
diodos, utilizando a
uma coluna de fase reversa Zorbax SB C18(250 X 4,6 mm, 5 m),
fase mvel:
metanol/gua (80/20), deteco UV a 254 nm. Os resultados foram
comparados com
a espectroscopia de Ressonncia Magntica Nuclear (RMN) (SENYUVA,
H.Z.;
AKSAHIN, I.; OZCAN, S.; KABASAKAL, B.V., 2005).
2.2.2.3 Outras metodologias analticas para a determinao de
dipirona sdica
A amperometria foi utilizada como mtodo de determinao de
dipirona em
formulaes farmacuticas, utilizando-se eletrodo de ouro. Os
resultados foram
comparados com a titulao iodomtrica, que o mtodo oficial
preconizado pela
farmacopia britnica (MUOZ, R.A.A.; MATOS, R.C.; AGNES, L.,
2001).
A espectroscopia Raman com transformada de Fourier foi empregada
para a
determinao quantitativa de dipirona sdica (IZOLANI, A.O.;
MORAES, M.T.;
TLLEZ, C.A., 2003).
Atravs da cromatografia em camada delgada alguns
pesquisadores
separaram e quantificaram a dipirona e seus produtos de
degradao, os
parmetros foram os seguintes: placa cromatogrfica de slica gel
F254, espessura de
0,25 mm; fase mvel: etanol-clorofrmio-benzeno-soluo de amnia a
10%
(50:30:18:2). As manchas foram reveladas sobre luz UV a 254 nm e
quantificadas
-
24
por medidas espectrofotomtricas de reflectncia a 273 nm (FABRE,
H.; EDDINE,
N.H.; BRESSOLE, F.; MANDROU, B. 1982).
Pelos compndios oficiais a dipirona sdica determinada atravs
de
titulao iodomtrica (FARMACOPEIA, 1977; BRITISH, 2002).
2.3 Cloridrato de papaverina
O cloridrato de papaverina foi o primeiro agente miotrpico a ser
introduzido
na medicina, um dos alcalides extrados do pio, as cpsulas de
sementes
imaturas de papoula, Papaver somniferum, nas quais ocorre na
proporo de 1%. A
papaverina foi isolada por Merck, em 1848, e sintetizada em
1909, por Pictet e
Gams. Atualmente obtida por sntese total (KOROLKOVAS, A.;
BURCKHALTER,
J.H., 1988)
Figura 2 Estrutura qumica da papaverina
Faz parte do grupo da benzilisoquinolina, depressor da
musculatura lisa sem ao sobre o sistema nervoso central, no sendo
euforizante. Considerada como
prottipo dos frmacos vasodilatadores, costuma ser confrontada em
testes de
novas substncias para esse propsito (SILVA, P. 2002).
-
25
um dos frmacos mais importantes que atuam como relaxantes da
musculatura uterina, juntamente com a hioscina, fazem parte do
grupo de frmacos
anticolinrgicos. Sua ao espasmoltica, analgsica e sedativa. Suas
vias de
administrao so a oral, intramuscular e endovenosa (SILVA, P.
2002).
2.3.1 Farmacocintica
Quando a papaverina administrada por via oral, a meia-vida de
uma a
duas horas: entretanto, h uma grande variao interindividual.
Liga-se protenas
plasmticas em 90%, metabolizada no fgado e excretada na urina
quase
totalmente como metablitos fenlicos conjugados com glucorondios
(SILVA, P.
2002).
2.3.2 Farmacodinmica
Relaxa a musculatura lisa vascular por inibio inespecfica da
fosfodiesterase, promovendo aumento do AMP cclico (SILVA, P.
2002).
2.3.3 Usos clnicos
Tem ao espasmoltica, sendo til em processos caracterizados
por
espasmo vascular. Tem sido usada em pacientes com insuficincia
arterial perifrica
e cerebral. til para realizao do teste de ereo frmaco-induzida e
como
frmaco utilizado para auto-injeo em pacientes com impotncia
sexual orgnica
isoladamente ou associada a outros frmacos (SILVA, P. 2002).
Muito eficaz no tratamento de espasmo vasocerebral agudo por
diferentes
vias de administrao (LIU, H.M. TU, Y.K. 2002).
Est sendo amplamente utilizada em doenas arteriais, como o
embolismo
pulmonar e tambm no alvio de clicas renais e biliares (YAN, J.;
MI, J Q,; HE,J-
T.;GUO, Z-Q.; ZHAO,M-P.; CHANG, W-B.,2005)
-
26
2.3.1Metodologias analticas para determinao de cloridrato de
papaverina
2.3.1.1. Cromatografia lquida de alta eficincia CLAE
SINGH, D.V. et al. analisaram os principais alcalides contidos
na
Papaver somniferum, atravs da CLAE, utilizando uma coluna Merck
Durasil C18(250
x 4,6 mm) com fase mvel acetonitrila: tampo fosfato (20:80) e pH
3,8 ajustado com
acido actico glacial; vazo de 1 mL/min e deteco a 240 nm, com
arranjo de
fotodiodo. Foi possvel a quantificao de morfina, codena,
oripavina, codeinona,
reticulina, tebana, papaverina e narcotina (SINGH, D.V.;
PRAJAPATI, S.; BAJPAI,
S.; VERMA, R.K.; GUPTA, M.M.; KUMAR, S. 2000).
Para determinao de cloridrato de papaverina em xarope foi
utilizada a
CLAE seguindo os parmetros: coluna Ultrasphere 5m Spherical 80
(250 mm X 46 mm), fase mvel: gua: acetonitrila, etanol (38:60:2)
contendo cido perclrico 1
mM, vazo de 1mL/min e detector de condutividade (LAU,O-W;
MOK,C-S.; 1995).
Para a determinao simultnea de cloridrato de efedrina,
teofilina, cloridrato
de papaverina e cloridrato de hidroxizina foi usada a CLAE nas
seguintes condies:
fase mvel: acetonitrila: gua ( 5:95 v/v ), pH 2,4 0,1 ajustado
com cido orto - fosfrico, vazo de 1,5 mL/min, coluna Nucleosil C 18
(150 X 4,6 mm ,5 m), sistema
gradiente e deteco a 220 nm (BOBERIC, D.B.;RADULOVIC,D.;
IVANOVIC,D.;
RISTIC,P., 1999.)
Na determinao de alguns alcalides atravs de mistura de
solventes
orgnicos-aquosos analisados por CLAE foram seguidos os
parmetros: detector UV
a 254 nm, coluna Lichrosorb Si 60(100 X 4 mm,10 m), fase mvel:
mistura de tampo fosfato ( cido fosfrico com hidrxido de sdio 5 M,
com concentrao final
de 0,2 M ) (GOLKIEWICZ, W.; KUCZYNSKI, J.; MARKOWSKI, W.;
JUSIAK, L.,
1994).
Na Farmacopia Britnica 2002 consta como mtodo de anlise para
um
medicamento chamado Papaveretum injetvel, que contm uma mistura
de
-
27
papaverina, morfina e codena, a CLAE, usando-se coluna 10 cm X
4,6 mm, vazo
de 2 mL/min, fase mvel: acetato de sdio 0,01 M e sulfossuccinato
dioctilsdico
0,005 M em metanol 60%, ajustado ao pH 5,5 com cido actico
glacial ou NaOH 2
M, deteco UV a 285 nm (BRITSH, 2002).
Determinou-se a papaverina em plasma e urina por CLAE atravs
dos
parmetros: coluna fase-reversa C8 (25 cm X 4.6 mm, 10 m);
detector UV-Vis a 239
nm; fase mvel: metanol: borato de sdio 0,015 M pH 8,5 (58:42) ;
vazo: 2,7
mL/min e laudosina como padro interno (GAUTAM, S.R.; NAHUM, A.;
BAECHLER,
J. BOURNE, D.W.A., 1980).
A CLAE foi utilizada na determinao de papaverina em amostra de
sangue
total atravs de cromatgrafo (injetor com loop de 100 L ), coluna
Micropak CN
10 (30 mm X 4 mm, 10 m ) a 30 C , fase mvel: n- hexano
diclorometano acetonitrila propilamina( 50: 25 :25: 0,1 ) com
detector UV a 254 nm, vazo de 2
mL/min. A amostra foi submetida uma extrao por mistura de
clorofrmio e n-
hexano(2:3) (HOOGEWIJS,G.; MICHOTTE, Y.; LAMBRECHT, J.; MASSART,
D.L.,
1981).
AYYANGAR, N.R. e BHIDE, S.R. desenvolveram uma metodologia
de
separao de oito alcalides e do cido mecnico e quantificao de
cinco principais
alcalides, dentre eles a papaverina por CLAE, atravs de coluna
Bondapack Phenyl
(30 cm X 3.9 mm, 10 m), para as corridas preliminares e coluna
MN Nucleosil 7
C6H5 (25 cm X 4,0 mm,7 m) e pr-coluna Resolve CN(10 m) para a
quantificao,
fase mvel : metanol : gua (5:95), sistema gradiente; vazo: 1,5
mL/min e deteco
UV a 280 nm (AYYANGAR, N.R. ; BHIDE, S.R., 1988).
Para uma separao de morfina, codena, noscapina e papaverina foi
usada a
cromatografia de fase reversa com pareamento inico, com os
seguintes
parmetros: coluna Bondapack C18 ( 300 X 4 mm ); eluente ou fase
mvel: metanol:
gua (35: 65) com variao de proporo de tampo fosfato 0, 050 M e
cido
camsulfnico, variando-se o pH entre 2,3 e 4, vazo de 1,5 mL/min
e deteco a 254
nm (LINDBERG, W.; JOHANSSON, E.; JOHANSSON, K., 1981).
-
28
Para a otimizao e validao de metodologia analtica para a
determinao
de alcalides (sendo a papaverina, um deles) com a finalidade de
acrescentar a
metodologia em compndios de avaliao de qualidade, utilizou-se a
CLAE. Foram
preparadas solues de papaverina em etanol 96 %, como fase mvel
foi utilizada
tampo fosfato pH: 3/ metanol (65:35) + cido-pentanossulfnico de
sdio a 0,005
M, vazo: 1,5 mL/ min, deteco UV 254 nm e coluna C18 (250 X 4mm)
ao
inoxidvel (BUDVARI-BARANY, Z.; SZSZ, G.; GYIMESI-FORRS, K.,
1997).
MAURICH, V. e MONEGHINI, M. desenvolveram uma metodologia por
CLAE
para a separao de papaverina e seus produtos de degradao,
utilizando coluna
Lichrosorb RP 18, 10 m; fase mvel: acetonitrila: metanol: gua
(470:340:190),
cido actico 0,5 mL /L e dodecilsulfonato sdico puro, vazo de 2,5
mL/min e
deteco no UV a 238 nm (MAURICH, V. e MONEGHINI, M., 1983).
Atravs da CLAE fez-se a determinao simultnea de metilbrometo
de
homatropina e a mistura de cinco alcalides, dentre eles o
cloridrato de papaverina,
os parmetros seguidos foram: coluna Nucleosil C8 (120 X 4,65
mm); fase mvel:
tampo fosfato 0,01 M(pH 5,0):40% de acetonitrila, vazo de
1mL/min e deteco a
220 nm. A cromatografia gasosa tambm foi utilizada nesta
pesquisa (MAJLAT, P.;
HELBOE, P.; KRISTENSEN, A.K., 1981).
EL-GINDY, A. comparou duas metodologias para a determinao
simultnea
de cloridrato de papaverina, diprofilina e fenobarbital, a CLAE
e a espectrofotometria
UV com aplicao de calibrao multivariada. A CLAE foi padronizada
e validada
com os parmetros: coluna HALSIL 100 C- 18 (250 x 4,6 mm, 5 m);
fase mvel:
fosfato de potssio 0,02M, pH ajustado com cido fosfrico e
acetonitrila na
proporo 55:45 v/v; vazo de 1,5 mL/min e deteco UV a 210 nm. No
mtodo
espectrofotomtrico foram aplicados aos dados os mtodos PLS
(mnimos
quadrados parciais) e PCR (anlise do componente principal), a
faixa de leitura dos
espectros foi de 215 a 245 nm, com intervalo de 0,2 nm,
utilizando-se 23 solues
para a construo do modelo de calibrao. Os mtodos propostos
mostraram
concordncia quando comparados (EL-GINDY, A., 2005).
-
29
2.3.1.2 Outras metodologias utilizadas para a determinao
analtica de cloridrato de
papaverina
O cloridrato de papaverina foi analisado por espectrofotometria
juntamente
com o cloridrato de meclozina em formulaes farmacuticas.
Primeiramente fez a
extrao dos frmacos atravs de clorofrmio e diclorometano e reaes
com
produtos fenilazlicos, produzindo compostos coloridos.
Fizeram-se leituras de
absorbncia a 524 e 536 nm para meclozina e 528 e 540 nm para
papaverina.
(ABDEL-GHANI, N.T.; SHOUKRY, A.F.; ISSA, Y.M.; WAHDAN, O.A.,
2002).
A cromatografia em camada delgada foi usada para a determinao
e
separao da papaverina e seus produtos de oxidao, usando-se placa
com
espessura de 0,25 mm coberta por gel de slica fluorescente (20 X
20 X 0,3cm),
visualizao em UV 254 nm ou com spray de reagente Dragendorff. A
papaverina foi
dissolvida em 1 mL de cido actico glacial e 2mL de cido
clordrico. (HABASHY,
G.M.; FARID, N.A., 1973).
Pelo mtodo potenciomtrico pde-se determinar o cloridrato de
papaverina,
utilizando-se clula potenciomtrica, pH mantido a 5,3 com tampo
acetato 0,01 M.
Nesta pesquisa sugere-se a aplicao deste mtodo para a anlise de
papaverina
em presena de novacana, dipirona, cido acetil saliclico e outros
frmacos em
associao. (SHETEROVA, I.P.; KARIBYAN, E.E.; TURAEVA, S.S.;
PENZINA,
M.M., 1995).
Para a deteco de baixas concentraes de papaverina usou-se a
espectrometria de massa com ionizao de fisso de fragmentos, em
amostras de
fluidos biolgicos. (CHIVANOV, V.D.; EREMENKO, I.A.; AKSENOV,
S.A.;
GREBENIK, L.I. EREMENKO, V.I.; KALINICHENKO, T.G.; TATARINOVA,
V.I.;
ZDOIMA, N.G.; SKLYAROVA, Z.V., KURAEV, V.V.; KNYSH, A.N.;
MISHNEV, A.K.,
1997).
A eletroforese capilar foi utilizada para a anlise de uma
mistura de morfina,
codena, normorfina, tebana, noscapina e papaverina, nas
seguintes condies:
-
30
capilar 55,5 cm X 50m, deteco a 214 e 254 nm, tendo como meio
eletrofortico acetato de amnio 25 mM cido actico 1M em
acetonitrila, metanol, formamida
ou N-metilformamida. (BJORNSDOTTIR, I.; HANSEN, S.H., 1995).
Foram analisadas solues contendo papaverina para investigar
seus
produtos de degradao e oxidao atravs de degradao fotoqumica.
Tanto a
papaverina quanto seus produtos de degradao e oxidao foram
determinados
por espectroscopia Raman, Ressonncia Magntica Nuclear e os
resultados
comparados com a CLAE. (GIRRESER, U.; HERMANN, T.W.; PIOTROWSKA,
K.
2003).
Mirzeva et. al. determinaram a papaverina e dimedrol em
formulaes
farmacuticas foi utilizada uma extrao com um azo reagente, e em
seguida o
composto colorido formado pela papaverina e pelo sulfonazo foram
detectados por
fotometria a 580nm. (MIRZAEVA, K.A.; AKHMEDOVA, M.S.; RAMAZANOV,
A.S.;
AKHMEDOV, S.A., 2004).
A Farmacopia Brasileira preconiza a titulao em meio no aquoso,
como
mtodo de doseamento para o cloridrato de papaverina
(FARMACOPEIA, 1977) e a
Farmacopia Britnica tem a potenciometria como mtodo de
doseamento.
(BRITISH, 2002).
2.4 Espectrofotometria no Ultravioleta e Visvel (UV/VIS)
A Espectrofotometria, tambm pode ser chamada de
espectroscopia
eletrnica molecular ou espectrometria de absoro molecular
abrange a regio de
comprimento de onda de 160 a 780 nm. Medidas de absoro da
radiao
ultravioleta e visvel tm ampla aplicao na determinao
quantitativa de uma
grande variedade de espcies inorgnicas e orgnicas. (SKOOG, D.A.;
HOLLER,
F.J.; NIEMAN, T.A., 2002).
A variao da cor de um sistema com a mudana da concentrao de
um
componente a base da anlise colorimtrica. A cor , usualmente,
devido
-
31
formao de um composto colorido pela adio de um reagente
apropriado ou
inerente ao constituinte que se deseja analisar. A intensidade
da cor comparada
com a intensidade da cor que se obtm com o mesmo procedimento
pelo tratamento
de uma amostra cuja quantidade e concentrao so conhecidas. Na
anlise
espectrofotomtrica usa-se uma fonte de radiao que alcana a regio
ultravioleta
do espectro. Para isso, escolhe-se comprimentos de onda bem
definidos e com
largura de banda de menos de um nanmetro ( VOGEL, 2002).
Um espectrofotmetro ptico um instrumento que possui um sistema
ptico
que dispersa a radiao eletromagntica incidente e permite a
medida da
quantidade de radiao transmitida em determinados comprimentos de
onda
selecionados da faixa espectral. Um fotmetro um equipamento que
mede a
intensidade da radiao transmitida ou uma funo desta quantidade.
Quando
combinado em um espectrofotmetro, o espectrmetro e o fotmetro
produzem sinal
que corresponde diferena entre a radiao transmitida por um
material de
referncia e a radiao transmitida por uma amostra em comprimentos
de onda
selecionados. A vantagem principal dos mtodos colorimtrico e
espectrofotomtrico
que eles so uma maneira simples de determinar quantidades muito
pequenas de
substncias. A seletividade da tcnica espectrofotomtrica pode ser
aumentada com
a espectrofotometria derivada. ( VOGEL, 2002).
A espectroscopia de absoro molecular est baseada na medida
da
transmitncia T ou absorbncia A de solues contidas em clulas
transparentes
tendo um caminho ptico de b cm. De forma comum, a concentrao c
de um analito
absorvente est relacionada linearmente absorbncia, conforme
representado pela
equao:
A = -log T = PPolog = bc (1)
-
32
Sendo: - P, Po - potncia de radiao ou intensidade de radiao I,
Io;
- a absortividade = bcA ou coeficiente de extino, k; c pode ser
expresso em g/L
ou em outras unidades de concentrao; b pode ser expresso em cm
ou em outras
unidades de comprimento;
= absortividade molar = bcA ou coeficiente molar de extino, c
est expresso em
mol/L; b est expresso em cm.
A equao (1) uma representao matemtica da lei de Beer.
Normalmente,
a transmitncia e a absorbncia no podem ser medidas em laboratrio
porque a
soluo do analito precisa estar contida em um recipiente
transparente, ou clula
(tambm chamada de cubeta). Ocorre reflexo nas duas interfaces
parede/soluo.
A atenuao resultante do feixe de luz substancial, alm disso,
pode ocorrer
atenuao de um feixe de luz por espalhamento por molculas grandes
e, s vezes,
por absoro pelas paredes do recipiente. Para compensar esses
efeitos, a potncia
do feixe transmitido pela soluo do analito comparada com a
potncia do feixe
transmitido por uma clula idntica contendo apenas o solvente. A
transmitncia e a
absorbncia experimentais que se aproximam muito das verdadeiras
so obtidas
atravs das equaes (SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J.; NIEMAN, T.A.,
2002):
T = PoP
PsolventePsoluo = (2) A = log
PsoluoPsolvente =
PPolog (3)
-
33
- Desvios da Lei de Beer
A lei de Beer geralmente vlida em uma faixa de concentraes
razoavelmente elevada, se a estrutura do on colorido ou do
no-eletrlito colorido
em soluo no mudar com a concentrao. Pequenas quantidades de
eletrlitos
que no reagem quimicamente com os componentes coloridos
normalmente no
afetam a absoro da luz. Grandes quantidades de eletrlitos podem
deslocar a
posio do mximo de absoro e, tambm, mudar a absortividade
molar.
Encontram-se discrepncias, usualmente, quando o soluto colorido
se ioniza, se
dissocia ou se associa em soluo, porque, neste caso, a natureza
da espcie que
absorve varia com a concentrao. A lei de Beer no vlida quando o
soluto forma
complexos cuja composio depende da concentrao. Podem ocorrer
discrepncias quando a luz utilizada no monocromtica. sempre
possvel testar
o comportamento de uma substncia fazendo-se o grfico log(Po/Pt ,
sendo Pt
potncia da luz transmitida) ou log(Io/It sendo It intensidade de
luz transmitida),
contra a concentrao. Uma linha reta que passa pela origem indica
que a lei de
Beer est sendo obedecida( VOGEL, 2002).
Um dos principais usos da espectrofotometria no UV/VIS refere-se
a
medies quantitativas. Uma concentrao desconhecida de um
composto
conhecido, quando se adapta a lei de Beer, pode ser determinada.
As amostras para
a absoro UV podem ser examinadas na forma de vapor ou de uma
soluo.
Solventes apolares e polares podem ser empregados para preparar
uma amostra
analtica. Um diagrama simplificado de um espectrofotmetro UV/VIS
est
apresentado na Figura 3.
-
34
Figura 3 Espectrofotmetro clssico UV-VIS com seus respectivos
componentes.
Os avanos na tecnologia levaram ao desenvolvimento e a
implementao de
detectores de fotodiodo, os quais, quando colocados em grupos
lineares
intimamente espaados, oferecem a anlise rpida e exata do
espectro. A principal
vantagem dos detectores de feixe linear que eles permitem a
anlise simultnea
de todo um espectro no perodo de alguns segundos. Isso vantajoso
quando se
realizam estudos cinticos envolvendo elementos rapidamente
mutveis (ABDOU,
H.; HANNA, S.; MUHAMMAD, N. 2004).
2.5 Cromatografia lquida de alta eficincia - CLAE
A CLAE tambm conhecida por cromatografia lquida de alto
desempenho,
cromatografia lquida de alta performance, cromatografia lquida
de alta presso e
mais comumente HPLC de High Performance Liquid Chromatography
(CIOLA,
1998). A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao. Ela
est
fundamentada na migrao diferencial dos componentes de uma
mistura, que ocorre
devido a diferentes interaes entre duas fases imiscveis, a fase
mvel e a fase
estacionria. A grande variedade de combinaes entre as fases
mveis e
estacionrias torna-a uma tcnica extremamente verstil e de grande
aplicao.
A separao cromatogrfica baseia-se na migrao diferencial dos
componentes de uma mistura, que ocorre devido s diferentes
interaes entre duas
fases imiscveis, a fase mvel e a fase estacionria, e no
alargamento de bandas,
-
35
que dependente de processos fsicos e no da diferena de
equilbrio. A migrao
diferencial resulta da diferena de equilbrio dos analitos entre
as duas fases
imiscveis e determinada pelos fatores que afetam este equilbrio:
composio da
fase mvel, composio da fase estacionria e temperatura da
separao.
Mudanas em um ou mais destes parmetros levam a alteraes na
migrao
diferencial.
2.5.1 Instrumentao para a CLAE
A instrumentao necessria para a CLAE extremamente sofisticada,
muito
diferente das utilizadas pela Cromatografia Clssica. A Figura 4
mostra os
componentes fundamentais de um equipamento para CLAE.
Atualmente, existem equipamentos totalmente computadorizados.
So
divididos em mdulos, que podem ser controlados individualmente
ou por
computador. Os softwares disponveis so capazes de detectar
problemas de
funcionamento e tambm a necessidade de troca de alguma pea.
Figura 4 Esquema bsico de um equipamento para CLAE
-
36
O desenvolvimento de colunas com fases estacionrias preparadas
com
partculas de menor dimetro, as quais ofereciam maior resistncia
passagem de
fase mvel, tornou necessria a utilizao de sistemas de
bombeamento mais
eficientes.
Bombas - Uma bomba para CLAE precisa ser capaz de reproduzir
fluxo constante e reprodutvel, sem pulsos, nas altas presses
necessrias, e ser
resistente s fases mveis utilizadas.
Injetores Para a introduo da amostra eram utilizadas
microsseringas. Atualmente, so utilizados injetores de vlvula. A
ala de amostragem (loop)
de tais vlvulas pode ser externa ou interna. As alas externas
nada mais so
que tubulaes de volume preciso, as quais podem ser trocadas para
que se
permita a injeo de diferentes volumes de amostra. Estas vlvulas
possuem
duas posies. Na posio LOAD, a amostra injetada na ala de
amostragem com uma seringa de ponta rombuda, sendo o excesso
imediatamente descartado. A posio INJECT abre a vlvula para que
a fase
mvel empurre a amostra para a coluna.
Detectores a funo destes equipamentos a deteco dos compostos
vindos do eluente da coluna. So de vrios tipos:
a) UV-Visvel o detector mais usado em CLAE; seu princpio absoro
de
luz ultravioleta ou visvel, por parte da amostra, quando nela
passa radiao
eletromagntica;
b) Fluorescncia um detector para molculas que fluorescem;
c) ndice de refrao: mede a diferena no ndice de refrao da fase
mvel e do
eluente vindo da coluna; muito utilizado em anlises de amostras
que no
absorvem no UV e no fluorescem e em cromatografia
preparativa;
-
37
d) Infravermelho seu princpio a absoro de luz infravermelha por
parte da
amostra, quando nela passa radiao eletromagntica, deteco pouco
utilizada;
e) Polarmetro e dicrosmo circular: medem o efeito da luz plana
ou circularmente
polarizada sobre compostos oticamente ativos, so equipamentos
seletivos,
especficos para a deteco de compostos quirais;
f) Eletroqumicos: baseiam-se em interaes eletroqumicas teis
deteco do
analito por CLAE, so seletivos para solutos inicos, oxidveis ou
redutveis, e
apresentam alta sensibilidade e baixos limites de deteco; g)
Espalhamento de
luz: seu princpio envolve a nebulizao do eluente vindo da coluna
em um
aerossol, seguido de vaporizao do solvente para produzir
pequenas partculas
que sero detectadas em uma cela de espalhamento de luz, detector
no
seletivo e destrutivo;
h) Espectrometria de massas: um detector universal, embora
destrutivo, que
apresenta alta sensibilidade, fornece a massa molecular dos
solutos e permite a
elucidao estrutural destes;
i) Ressonncia magntica nuclear: combina o poder de separao da
CLAE s
informaes estruturais obtidas pela RMN, no de uso rotineiro,
devido
dificuldade encontrada e sua hifenao CLAE (CASS, Q.B.;
DEGANI,
A.L.G.,2001).
Colunas: a separao cromatogrfica efetuada dentro das colunas
cromatogrficas. Os tubos das colunas so cheios com a fase
estacionria
conveniente, geralmente slica ou seus derivados (CIOLA, R.,
1998).
2.5.2 Modos de separao por CLAE
A classificao da cromatografia lquida de acordo com a fase
estacionria
levou a uma grande variedade de tipos. A primeira grande diviso
feita foi:
-
38
cromatografia de adsoro e cromatografia de partio, referindo-se
s fases
estacionrias slida e lquida, respectivamente.
No caso das fases estacionrias serem lquidas, estas podem
estar
simplesmente adsorvidas sobre um suporte slido ou imobilizadas
sobre ele. No
primeiro caso, a cromatografia referida como cromatografia de
partio. A
cromatografia de partio perdeu espao para a cromatografia de
fases
quimicamente ligadas, devido maior estabilidade conferida por
estas quando
comparadas com as fases lquidas adsorvidas. Estas fases com
suportes
modificados so consideradas parte por diferirem dos outros modos
em seu
mecanismo de separao.
O grande desenvolvimento conseguido a partir das fases
lquidas
quimicamente ligadas fez com que estas sejam majoritariamente
usadas em CLAE
analtica.
A separao de uma mistura por CLAE se d por uma ou mais
interaes
entre o soluto, a fase estacionria e a fase mvel, as quais podem
ser pontes de
hidrognio, interaes eletrostticas e hidrofbicas ou foras de Van
der Waals,
entre outras. Os modos de separao podem ser classificados de
acordo com a
natureza destas interaes. So eles: cromatografia em fase
reversa, em fase
normal, por pareamento de ons ou por troca inica e por
excluso.
2.5.2.1 Cromatografia em fase normal
A fase estacionria mais polar que a fase mvel; o oposto ocorre
em
cromatografia no modo reverso. Os solventes usados so
normalmente uma mistura
de solventes orgnicos sem a adio de gua.
Os modelos de reteno interao-solvente e competio-solvente tm
sido
usados para descrever o efeito da fase mvel em cromatografia
lquida no modo
normal.
-
39
Embora molculas inicas ou ionizveis possam ser separadas por
cromatografia no modo normal, a aplicao majoritria tem sido para
molculas
neutras. As molculas hidrofbicas (menos polares) so eludas
primeiro, enquanto
as molculas hidroflicas (mais polares) so mais retidas.
2.5.2.2 Cromatografia em fase reversa
A fase mvel mais polar do que a fase estacionria. A
cromatografia em
fase reversa a mais utilizada em CLAE, pois permite a separao de
uma grande
quantidade de solutos e o uso de fases mveis aquosas. A fase
mvel mais
comumente utilizada uma mistura de acetonitrila/gua, sendo a
acetonitrila,
quando necessrio, substituda pelo metanol ou tetraidrofurano
(THF). O uso de
apenas esses trs solventes deve-se pequena quantidade de
solventes orgnicos
miscveis em gua.
A separao em fase reversa se deve principalmente a interaes
entre a
parte no-polar do soluto e a fase estacionria, isto , repulso
desta parte do
soluto pela fase mvel aquosa.
2.5.2.3 Cromatografia de compostos inicos
A separao de compostos ionizveis pode ser conseguida por
supresso da
ionizao ou, ento, por completa ionizao e separao por pareamento
de ons ou
por troca inica.
Em cromatografia de fase reversa, a reteno diminui p
