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TEMA Determinación de pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina – O y su valor elevado en el diagnóstico de fiebre reumática en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias que acuden al Hospital Sagrado Corazón de Jesús de la ciudad de Quevedo durante el Segundo Semestre del 2009. PROBLEMA ¿En qué manera incide la determinación de pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina – O y su valor elevado en el diagnóstico de fiebre reumática en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias que acuden al Hospital Sagrado Corazón de

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Determinacin de pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O y su valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo durante el Segundo Semestre del 2009.

PROBLEMA

En qu manera incide la determinacin de pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O y su valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo durante el Segundo Semestre del 2009?

CAPITULO I

1.1 CAMPO CONTEXTUAL

1.1.1 CONTEXTO NACIONALLa fiebre reumtica contina siendo en el territorio ecuatoriano un problema de salud, que no respeta edades. Con frecuencia se consulta en los servicios de urgencia por un cuadro febril agudo con artritis concomitante. Es saber reconocer y tratar una fiebre reumtica en sus estados iniciales evitando las secuelas cardacas posteriores. Es una enfermedad inflamatoria sistmica del tejido conectivo, aguda o subaguda, que aparece como una secuela retardada de una infeccin farngea por estreptococos del grupo A en personas con predisposicin gentica a la enfermedad. Compromete principalmente el corazn, las articulaciones y el sistema nervioso central.

Hasta el momento la evidencia de la relacin entre la infeccin estreptocccica farngea y la fiebre reumtica es indirecta y proviene de tres fuentes:a. Clnica:la aparicin de la enfermedad despus de la faringitis estreptocccicab. Epidemiolgica:las epidemias de infeccin farngeas estreptocccica son seguidas de un aumento en la incidencia de la enfermedad.c. Inmunolgica:la aparicin de anticuerpos contra los estreptococos.

La frecuencia de la fiebre reumtica ha venido decreciendo en los pases desarrollados, especialmente en los Estados Unidos y en Europa. Este fenmeno comenz a producirse an antes del uso de la penicilina como profilctico y se ha atribuido a la mejora de las condiciones de vida, por ejemplo, la eliminacin del hacinamiento.

En Ecuador, las estadsticas son escasas y no se han hecho estudios de poblacin que den una idea exacta sobre la prevalencia y la incidencia y su evolucin natural de la fiebre reumtica a travs de los aos.

Esta enfermedad evoluciona en seis semanas en la mayora de los casos (75%) y en 12 semanas (90%) ha terminado la evolucin. La frecuencia de las recurrencias ha ido disminuyendo desde que se instituy la profilaxis secundaria. Por regla general en las recurrencias se repiten las caractersticas del ataque inicial.

Alrededor de 30% de los pacientes entre 15 y 45 aos de edad terminan con dao valvular permanente, es decir, con enfermedad cardaca reumtica crnica. Las lesiones en orden de frecuencia son: estenosis mitral, insuficiencia mitral, doble lesin artica y estenosis tricspide. La insuficiencia mitral inicial desaparece con frecuencia y la estenosis mitral se va desarrollando muy lentamente. La regurgitacin artica, una vez que se vuelve sintomtica, sigue un curso rpido progresivo.Se cree que algunos casos de prolapso de la vlvula mitral son secuelas de fiebre reumtica. La estenosis mitral es ms frecuente en las mujeres y la estenosis artica en los hombres; el pronstico ha mejorado notablemente desde cuando comenz el uso de la penicilina para tratamiento y profilaxis.

No hay en realidad una prueba de laboratorio diagnstica de fiebre reumtica. El ttulo elevado de antiestreptolisina O (mayor de 200-250 U Todd) hace el diagnstico de infeccin estreptocccica reciente, que es uno de los criterios modificados para el diagnstico de la enfermedad, pero por s solo no hace el diagnstico y viceversa, hasta 20% de los pacientes con fiebre reumtica no tienen ttulos anormales. El seguimiento del nivel del ttulo de positividad tiene valor diagnstico, pero no tiene valor pronstico ni tampoco utilidad en el manejo del tratamiento. Los indicadores de inflamacin aguda, eritrosedimentacin y protena C reactiva, miden la actividad y la evolucin de la enfermedad.

La estreptolisina O es un exoenzima inmunognico txico producido por estreptococos -hemolticos de los grupos A, C y G. Para esto, la cuantificacin de los anticuerpos ASO se utiliza para el diagnstico y tratamiento de enfermedades en los pacientes, como las fiebres reumticas, glomerulonefritis aguda, y otras infecciones estreptoccicas, por lo que se realizan continuamente las pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O para conocer su valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias

1.1.2 CONTEXTO REGIONALEn nuestro medio y con relacin al comportamiento epidemiolgico de la Fiebre Reumtica, podemos precisar los siguientes datos: Durante el semestre pasado se evaluaron 57 pacientes con el diagnstico de Fiebre Reumtica, se puede hacer una extrapoblacin con relacin a la poblacin de Quevedo, de una incidencia anual que vara entre 2/1.000 y hasta 7/ 1.000 en el ao 2009. En relacin con pacientes hospitalizados en servicios mdicos, la Fiebre Reumtica represent en el ao 2009 el 1.4% del total de egresos hospitalarios. La Fiebre Reumtica no presenta un predominio de ataque del sexo femenino sobre el masculino estadsticamente significativo pero de los pacientes afectados, solo el 15% eran varones.

Como hecho interesante con relacin a la edad, se tiene que el 9% de los pacientes con Fiebre Reumtica eran menores de cuatro aos de edad y los pacientes ms jvenes eran dos de dos aos de edad, un varn y una nia cuya evaluacin al egreso fue satisfactoria. Un solo paciente present su primer episodio a los 15 aos, por lo tanto, el 90% de los pacientes analizados en nuestra institucin, se encontraban entre los 4 a 14 aos, lo cual coincide con trabajos en otras latitudes.

De los datos obtenidos podemos deducir como el comportamiento de la Fiebre Reumtica en nuestro medio es similar a los pases con clima templado, llmense Europa o Norteamrica y por condiciones socio-econmicas anteriormente analizadas puede iniciarse en un perodo precoz de la vida. Esta sintomatologa se presenta en un 23% de los enfermos y el 85% de los afectados eran mujeres adquiriendo gran importancia este dato porque representa un 1/3 de las formas clnicas de presentacin de Fiebre Reumtica en el sexo femenino.A lo anterior hay que agregar la no existencia de mortalidad en el grupo estudiado. Con respecto a las secuelas no se puede precisar datos an por tratarse de un perodo de tiempo relativamente corto (4 1/2 aos de estudio), pero no se han detectado severas valvulopatas cicatrzales, como la estenosis mitral o algn tipo de limitacin a la actividad normal; las recurrencias de enfermedad activa no han tenido ninguna importancia en nuestros pacientes como para ameritarles la hospitalizacin. La profilaxis con penicilina benzatnica ha sido factor primordial para lograr reducir las recurrencias significativamente.

La prueba de la Antiestreptolisina O(antistreptolysin-O test) es una prueba de anticuerpos estreptoccicos para descubrir y medir los anticuerpos sricos a la estreptolisina O, una exotoxina producida por la mayora de los estreptococos del grupo A y algunos de los grupos C y G. La prueba se utiliza a menudo como ayuda diagnstica de la fiebre reumtica. En muchas personas hay un ttulo bajo de anticuerpo Antiestreptolisina O, ya que la infeccin estreptoccica es frecuente. Los ttulos elevados o en aumento indican una infeccin reciente.

1.1.3 CONTEXTO INSTITUCIONAL

El 28 de abril de 1971 se inaugur el hospital Sagrado Corazn de Jess de Quevedo, luego de un intenso trajinar de un grupo de importantes y valientes mujeres de la localidad que conformaron la Junta de Beneficencia de Quevedo, con la nica finalidad de tener una Casa de Salud, que atienda a tanta gente enferma, sobre todo con tuberculosis que en esos tiempos azotaba a vendedores ambulantes de frutas y comidas preparadas.El hospital comenz a funcionar como un subcentro de salud, hasta 1977, que entr a funcionar con primeros servicios hospitalarios siendo precisamente ministro de Salud en ese tiempo, el doctor Asdrbal de la Torre.

El hospital trabaja con 17 unidades operativas que estn ubicadas en las diferentes parroquias de la ciudad y poco a poco ha ido incrementando sus reas de atencin y hoy cuenta con las reas de consulta externa, pediatra, ginecologa, ciruga, medicina interna y traumatologa; adems con 17 mdicos en todas las especialidades. Actualmente cuenta con 71 camas de las cuales 20 son solo para maternidad, que siempre se encuentra llena y muchas veces, dos mujeres en una misma cama.

En 2009 se atendieron 1.934 partos, lo que da un promedio de 5 partos diarios, en mujeres que van desde los 12 a 45 y 5O aos. Se dieron de alta 4.343 pacientes; esto quiere decir, que hubo un promedio de 350 pacientes hospitalizados al mes.

Pediatra con un 76 por ciento de atencin, sobre todo a los nios de neonato.

Ciruga con un 76 por ciento de atencin. Consulta Externa con 19.607 consultas con un promedio de 82 consultas diarias. En emergencia 14.281 pacientes, en 2009.

Ante esto es necesario, que el Estado facilite la desconcentracin y descentralizacin de los poderes locales y organizaciones no gubernamentales, as como sistemas de cogestin y autogestin que comprometan responsablemente a la comunidad en la contribucin y coadministracin de los servicios.

1.2 . Situacin actual del Objeto de Investigacin

Antes de tomar la historia a los pacientes reumticos que llegan al Hospital Sagrado Corazn de Jess, se observa, que tienen dolor, rigidez y limitacin del movimiento y desde el punto de vista psicolgico usualmente se encuentran angustiados por la posibilidad de tener una enfermedad crnica, incapacitante y potencialmente invalidante.

Es posible que ya hayan tenido otras consultas o que se hayan tomado sin suerte algunos medicamentos recomendados por un familiar, amigo, el farmaceuta etc. Los pacientes tambin suelen tener mltiples quejas y es prudente concentrarse en la principal molestia que tiene el paciente, que le ocasiona mayor temor o que le gustara que le resolvieran. Si es un nio debe interrogarse este y su madre, si es un anciano, es mejor que siempre este acompaado por un adulto porque es posible que no recuerde bien los medicamentos ni otros aspectos importantes de la consulta.

Es importante que los encargados aparte de tomar la historia apropiada de los medicamentos que se previamente se han utilizado, tambin realicen pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O y su valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica, ya que esto ayudar en los resultados y que faciliten las cosas a la hora de la prescripcin. Debe recordarse que la mayora de las consultas en la prctica ambulatoria son de padecimientos localizados los cuales son diagnosticables y tratables con altas tasas de mejora que solo requieren la toma de una apropiada historia clnica.

La consulta reumatolgica requiere de tiempo y paciencia. A pesar de los avances en todas las ramas biomdicas no se puede decir con certeza ni seguridad cul o cules mecanismos patognicos intervienen en esta enfermedad, sin son factores inherentes el estreptococo, si es la capacidad inmunitaria del husped, si es una predisposicin gentica a la enfermedad, o si son todos ellos los causantes de los signos y sntomas de la Fiebre Reumtica, en resumen es un enigma la patogenia de la enfermedad.Uno de los problemas ms serios afrontados por los investigadores es la imposibilidad de encontrar un modelo animal en el cual se pudieran estudiar todos los mecanismos patognicos propuestos y el nico modelo existente es el enfermo de Fiebre Reumtica, en el cual por razones ticas y humanas no se puede realizar todas las experiencias necesarias para solucionar este problema.

La medicina no es una ciencia exacta, la toma de la historia clnica representa la informacin fundamental con la cual vamos a alimentar nuestro intelecto o cualquier sistema computarizado de informacin. Recabar la informacin constituye un verdadero arte al cual se le agregan factores como comunicacin con el paciente, sus familiares, trasmisin de la informacin bsica, complejidad de los diagnsticos, acervo cultural y creencias previas tanto de los pacientes como de sus mdicos. Una historia clnica realizada en condiciones ambientales no adecuadas, sin la privacidad necesaria, sin un contacto medico-paciente ms estrecho y sin haberlo realizado minuciosamente no va a permitirnos siempre cumplir con nuestra misin.

1.3. Formulacin del Problema

1.3.1 Problema generalEn qu manera incide la determinacin de pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O y su valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias?

1.3.2 Problemas especficos

La enfermedad que presentan los pacientes con dolores reumticos es aguda o crnica?, Es sistmica o localizada? Es articular o peri o para articular? Los sntomas que presentan los pacientes con dolores reumticos, es inflamatoria o no inflamatoria? y finalmente Es articular; es mono, o ligo o poliarticular?

1.4. Delimitacin de la Investigacin1.4.1 CategorasLaboratorio clnico

1.4.2 PoblacinPacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias con diagnstico preventivo de fiebre reumtica que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo

1.4.3 LugarHospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo

1.4.4 Universo de muestras150 pacientes

1.4.5. TemporalidadSegundo Semestre del 2009

1.5. Justificacin

Si seguimos el patrn incidencial en aquellos con la responsabilidad clnica y teraputica de los pacientes con Fiebre Reumtica encontraremos con relativa frecuencia, el antecedente de Fiebre y proceso inflamatorio faringoamigdaliano, este hecho viene a ser confirmado por evidencias provenientes de trabajos retrospectivos y prospectivos de los cuales se deduce que aproximadamente estos pacientes pueden presentar los sntomas de Fiebre Reumtica en un perodo de tiempo aproximado de tres a cuatro semanas despus de un proceso inflamatorio faringoamigdaliano severo.

Estos conocimientos nos confirman totalmente que pacientes quienes padecieron de Fiebre Reumtica, no podran presentar sntomas de enfermedad como factor previo en el desencadenamiento de su Fiebre Reumtica, otros s presentan estossntomas,pero si no consultaron mdico o por razones de error diagnstico o teraputico o retardo en la consulta desarrollan la Fiebre Reumtica.

En este trabajo de investigacin, demostramos prospectivamente, que quienes son pacientes con Fiebre y exudado farngeo, un grupo podra desarrollar Fiebre Reumtica, si no se trata con antibiticos, al realizar las pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O desarrollar un valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica presentndose diversas reacciones inflamatorias. Por esta razn se analizarn una serie de factores inflamatorios, etiolgicos, serolgicos, de duracinde sntomas y signos, para detectar pacientes que presenten exudado y estreptococo grupo A, a nivel farngeo que resulte en Fiebre Reumtica.

Con los anteriores argumentos clnicos evidenciaremos que el estreptococo necesita para realizar su proceso patolgico reumtico de un husped con ciertas caractersticas, la presencia del germen por un perodo de tiempo prolongado y en un sitio del husped muy bien definido, la regin farngea. A esto se aade una muy buena respuesta inmunitaria especfica como lo es la determinada a travs de los anticuerpos Antiestreptolisina O, as como la presencia de clulas polimorfonucleares y mononuclear, que producen un aspecto clnico e histopatolgico de inflamacin y exudado.

Otro argumento es la presencia de anticuerpos, contra los factores txicos producidos por el estreptococo, estos anticuerpos no son detectados en todos los pacientes sino en aproximadamente el 80% de los afectados de Fiebre Reumtica, pero con la deteccin de otros factores producidos por el estreptococo se pueden llegar casi a encontrar en el 100% de los enfermos, la presencia de anticuerpos, no solamente Antiestreptolisina, O, sino de otros importantes (anti-DNA asas A, B, C, D, anti DPNasa y antiestrepto-quinasa), al parecer el ttulo de anticuerpos que persiste elevado ms tiempo es Anti-DNAsa B, el cual junto con otros (Asto y el Antihialuronidasa) son los que epidemiolgica y clnicamente se utilizan con mayor frecuencia. Los pacientes con Fiebre Reumtica, presentarn un ttulo de Antiestreptolisina mayor de 200 unidades y es estadsticamente significativa la diferencia con pacientes sin infeccin por estreptococo. Relacionndolo con los anticuerpos contra los productos extracelulares del estreptococo se compara muy favorablemente.

La evidencia ms clara y definida proviene de los tratamientos profilcticos para prevenir las recurrencias en aquellos pacientes que sufren Fiebre Reumtica y en los cuales se puede encontrar con una adecuada profilaxis con una recurrencia en el 0.4% de los pacientes, mientras en pacientes sin profilaxis, la recurrencia vara dependiendo si hubo compromiso cardaco previo o no, entre el 65 y el 36% respectivamente.

Con los argumentos anteriores y evidencias clnicas y paraclnicas, demostramos como el agente inicial del proceso patolgico que finalizar en Fiebre Reumtica es el estreptococo del Grupo A.

1.6. Objetivos

1.6.1 Objetivo General

Determinar cualitativamente y cuantitativamente la Antiestreptolisina O en pacientes adultos con diversas reacciones inflamatorias en el diagnstico de fiebre reumtica, que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo durante el Segundo Semestre del 2009.

1.6.2 Objetivos Especficos

Identificar las diversas reacciones inflamatorias de pacientes adultos con diagnstico preventivo de fiebre reumtica que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo

Analizar las diversas patologas que produce la fiebre reumtica de pacientes que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo.

Realizar el anlisis prueba ASO a los pacientes con cuadro cnico preventivo de fiebre reumtica que acuden al Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo.

CAPITULO II

2.1 MARCO TEORICO

2.1.1 Alternativas tericas asumidasA pesar que en la segunda mitad del siglo 20, los pases desarrollados mostraron una disminucin de la incidencia de casos de Fiebre Reumtica Aguda, sta permanece como un problema de salud pblica en regiones tropicales. De acuerdo a la OMS. (Quinn R. 2009, pp. 62-63). Cerca de 15.6 millones de personas tienen cardiopata reumtica, 300000 de 500000 que adquieren la fiebre reumtica aguda cada ao desarrollan CR, y 233.000 mueren anualmente secundario a causa de ella.

Cuando se considera el diagnstico de secuelas no supurativas postestreptococcicas como la Fiebre Reumtica tanto en el episodio agudo como en la recurrencia, no siempre es posible obtener la seguridad diagnstica adecuada. En tales casos la OMS recomienda la medicin de anticuerpos a antgenos especficos del estreptococo del grupo A (GAS) para confirmar el diagnstico de infeccin previa por estreptococo.(Organizacin Mundial de la Salud.2004.pp.1-57)

Para el clnico es necesario identificar las indicaciones de la solicitud de los anticuerpos anti-estreptococo, el fundamento fisiopatolgico de la prueba diagnstica as como la interpretacin de sus resultados y la correlacin clnica tanto en el episodio agudo como en la recurrencia.

2.1.1.1. La fiebre reumtica

La Fiebre Reumtica, cuyo agente etiolgico es el estreptococo, el cual a travs de una serie de mecanismos inmunolgicos, algunos ya definidos, otros an no bien aclarados, desencadena un ataque a rganos tan variados y diversos como el corazn, articulaciones y piel entre otros produciendo un cuadro clnico patolgico/ampliamente estudiado, cuyas consecuencias y secuelas son bastante incapacitantes, y en ocasiones desencadena la muerte del paciente.

A pesar de ser una enfermedad conocida hace bastantes siglos, en la ltima dcada se han encontrado una serie de hechos relacionados con el estreptococo, el husped, el medio ambiente y sus relaciones entre s, los cuales requieren ser analizados para tratar de resolver los interrogantes planteados por esta enfermedad.

2.1.1.2 Aspectos histricosHipcrates (380-460 A.C.), fue la primera persona quien relat la Fiebre Reumtica, la denomin Artritis y analizaba su ataque en adolescentes, de quienes deca, era patrimonio. Luego Galeno (130-200 A.C.), relaciona Artritis y Podagra encontrando factores comunes entre ellas.Dioscrides (40-90 A.C.), ya en la segunda mitad de! siglo I A.C. utiliza el apelativo de reumatismo.ThmsSydenham(1624-1689), en el siglo XVI, analiza la Fiebre Reumtica y su etiopatogenia, posteriormente relaciona la corea que lleva su nombre con la enfermedad reumtica. David Pitcairn en 1788 acua el trmino de reumatismo cardiaco al notar que algunos pacientes afectados de enfermedad reumtica articular tenan con frecuencia lesiones cardiacas.

Durante el inicio del siglo XIX Jhon Haygarth, report el mayor nmero de pacientes reumticos descritos hasta esa poca, 470 y los denomin afectos de fiebre reumtica, adems de analizarlas caractersticas clnicas de la enfermedad. En el perodo de finales del siglo XVIII Perry, correlaciona el Reumatismo Poliarticular agudo con la insuficiencia cardiaca y Jean Bouillaud describe las lesiones anatomopatolgicas de la Fiebre Reumtica.

Los Ndulos Reumticos son reportados en 1810 por W.C. Wells. El tratamiento de la Fiebre Reumtica era emprico hasta que en 1876 Germain See, report a la academia de Medicina de Pars la eficacia del salicilato de sodio en el tratamiento de la enfermedad.

El perodo de latencia entre la enfermedad farngea y la aparicin de sntomas reumticos fue descrito en 1886 por Haig-Brown. El granuloma reumatismal proliferativo es individualizado por Aschoff en 1904. La Doctora Rebeca Lancefield en 1940 identifica al diplococo reumtico de F.J Ponyton y A. Poune como un estreptococo B. hemoltico del grupo A.

Duckett Jones reporta en 1944 los criterios necesarios para hacer el diagnstico de Fiebre Reumtica.

Kaplan y Zabriskie en el final de los setenta, encuentran antgenos con reaccin cruzada entre el sarcolema cardiaco y la membrana del estreptococo. En 1979 Patarroyo reporta el hallazgo de una protena que se encuentra en la membrana de las clulas mononucleares linfoides de 75% de los pacientes afectos de carditis reumtica y en slo el 16% de la poblacin normal, considerndose dicha protena el marcador de susceptibilidad gentica a la enfermedad.

2.1.2 Anlisis del agente causal de la fiebre reumtica

El estreptococo es un germen de morfologa redondeada, de all su nombre de coco, crece formando cadenas. Su estructura est basada en una cpsula externa rodeando varias capas que conforman la pared celular y estas a su vez recubren la membrana celular. El diagrama que acompaa esta descripcin trata de reunir en una sola figura el aspecto morfolgico del estreptococo (TARANTA A. 2004).La cpsula est rodeando aparentemente la totalidad del germen y est compuesta de cido hialurnico. La pared celular tiene una serie de capas las cuales no rodean la totalidad de la superficie del estreptococo, dejando espacios y estructuras como tneles u orificios entre una y otra que permiten a las ms profundas estar casi en contacto directo con la superficie externa del germen. La ms externa de las capas de la pared celular es la compuesta de protenas y el cido glicerolteicoico, estos complejos proteicos estnformandoestructuras como vellosidades, la matriz de las cuales proviene de las capas ms internas del estreptococo.Las protenas que conforman esta capa son de varios tipos y presenta diferentes funciones: son la M, T, R. y M. A. P. La M considerada la protena que le confiere al germen la capacidad de resistir la fagocitosis, al parecer corresponde a un complejo de varias polipptidos cuya funcin y composicin son an desconocidos.

Anticuerpos producidos contra estas protenas del grupo denominado M. han permitido clasificar en aproximadamente 70 tipos serolgicos distintos a los estreptococos. Algunas de estas cepas tienen la propiedad de encontrarse asociadas a Fiebre Reumtica y otras a glomerulonefritis, de donde naci la idea de capas reumatognicas y nefritognicas de estreptococo.

A los anteriores hallazgos se adicionan un grupo de protenas no especficas del tipo de estreptococo y que se han denominado MAP ya que se encuentran muy relacionadas al complejo proteico M, han sido divididos en MAP I y II. Un hecho interesante es el encontrar anticuerpos en los sueros humanos, entre los cuales haba algunos con buena produccin de anticuerpos contra M pero pocos anticuerpos contra el grupo MAP y otros cuyos ttulos de anticuerpos eran elevados contra estos dos diferentes antgenos, adems se detect una relacin directa entre el tenor de anticuerpos contra MAP I y la Fiebre Reumtica y que la produccin de este tipo de anticuerpos tena una muy restringida heterogeneidad, hechos muy interesantes que aportan inquietudes con relacin a la patognesis de la enfermedad, la respuesta inmunitaria y los genes reguladores de ella.

Con relacin a las protenas T y R es poco la informacin que se tiene y su utilidad est restringida a estudios epidemiolgicos y de gentica bacteriana. El otro componente de esta capa es el cido glicerolteicoico que ha sido implicado en la funcin de adherencia a las clulas del husped (TODD. E.W.2004).

Debajo de esta capa lipoproteica se encuentran los carbohidratos que permiten determinar el grupo especfico del estreptococo y es as como el del grupo A tiene un peso molecular de 10.000 D. y est compuesto de Ramanosa, 38 moles y N acetilglucosamina 17 moles siendo sus determinantes antignicas los residuos terminales B. N acetilglucosamidinicos. Estas caractersticas inmunoqumicas han permitido estudiar la morfologa del sitio de unin antignica en los anticuerpos; as como la gentica responsable de la produccin de los mismos, a lo anterior se adiciona que el carbohidrato produce una respuesta de anticuerpos los cuales llevan una regin variable pesada que coincide con la expresada en el receptor antignico de las clulas timo dependientes, entonces se presenta una interesante relacin entre la clula B encargada de la produccin de anticuerpos y la clula T reguladora.

Finalmente la capa ms interna de la pared celular el mucopptido o pptido glicano, compuesta de N acetilglicosamina, cido N. acetil murmico, cido glutmico, lisina y glicina entre otras sustancias. Las funciones biolgicas de esta capa eran totalmente desconocidas hasta hace 10 aos cuando se empez a trabajar con bacterifagos y se demostr que el pptido glicano es el receptor para los bacterifagos. A lo anterior se adiciona su comportamiento como un potente adyuvante con variadas actividades biolgicas incluyendo la de causar necrosis tumoral. Debajo de la pared celular y sus varias capas se encuentra la membrana celular que corresponde a la estructura de una doble capa lipdica con protenas flotando dentro de ella o sea el modelo del mosaico fluido de Singer y Nicolson.

Hasta el momento actual aproximadamente 60 polipptidos han sido aislados de la membrana celular con pesos moleculares que varan entre 10.000 y 80.000 daltons, coincidiendo estas protenas entre las diferentes cepas en aproximadamente 90-95% o sea con muy poca variacin en la cantidad y la calidad de las protenas que constituyen la membrana celular.

En los 60, Kaplan y Zabrskie demostraron cmo la membrana celular del estreptococo se relaciona antignicamente con el sarcolema cardiaco, recientemente se comprob la existencia de cuatro polipptidos con reacciones cruzados entre el estreptococo y el sarcolema cardiaco , otra reaccin cruzada ha sido detectada entre el estreptococo y la membrana basal glomerular y la ms reciente observada es entre las neuronas de los ncleos caudado y subtalmico y la membrana del estreptococo (KAPLAN E.L. 2000).

A lo anterior es necesario agregar como las protenas con reaccin cruzada, solo representan el 1% de las protenas de membrana del estreptococo y los mtodos de deteccin de determinantes antignicas son an primitivos, abrindose la posibilidad de nuevas y muy interesantes relaciones entre los tejidos humanos y protenas de membrana del estreptococo. El estreptococo no solo es un ente anatmico relacionable con el ser humano a travs de sus componentes estructurales, sino que produce en vivo e invitro substancias capaces de modificar el comportamiento y la fisiologa del husped y una respuesta inmunitaria. Algunas de estas substancias son: la estreptolisina O y S, especialmente citotxicas para el miocardio y clulas ricas en colesterol a nivel de la piel.

Otras substancias son las toxinas pirognicas o eritrognicas se han descrito tres, cada una de ellas inmunolgicamente diferente; se encuentran conformadas por una porcin que desencadena toxicidad primaria como fiebre, shock, citotoxicidad, supresin de las funciones del sistema reticuloendotelial y del sistema inmune, otra porcin de la molcula, lleva la funcin de toxicidad secundaria, incrementa y mantiene la accin nociva inicial, adems de desencadenar hipersensibilidad cutnea.

Estas determinantes toxignicas se comportan como un heptano y el transportador es el cido hialurnico producindose una adecuada respuesta de anticuerpos neutralizantes. Finalmente un factor blastognico para los linfocitos, pero cuya accin est restringida por el complejo mayor de histocompatibilidad, permiten vislumbrar nuevas relaciones entre el estreptococo, sus productos y la respuesta inmune.

La descripcin del estreptococo y sus productos permiten analizar con mayor detalle, todos los fenmenos desencadenados por este germen y sus patolgicas relaciones con el husped y el sistema inmunitario defensivo del organismo afecto (CHURCHITI LIVINGSTONE. 2004).

2,1,2,1 EpidemiologiaLa Fiebre Reumtica es una Entidad que presenta un comportamiento epidemiolgico multifactorial, en el cual se analizan parmetros tan diversos como la edad, latitud, altitud, estado socioeconmico y raza.

2.1.2.2 EdadLa Fiebre Reumtica tiene un pico de incidencia en los escolares con una edad comprendida entre los cinco y los 14 aos, encontrndose muy ocasionalmente en lactantes y en personas con edades superiores a los 40 aos, este comportamiento con relacin a la edad forma paralelo con la poca de mayor incidencia de faringoamigdalitis y de iniciacin de la actividad escolar, implicndose directamente al estreptococo productor de faringoamigdalitis como el agente de la Fiebre Reumtica. 2.1.2.3 SexoNo se ha demostrado una predileccin especial por algunos de los sexos, pero se nota como la corea es ms frecuente en nias en edad puberal y la estenosis mitral es la secuela ms frecuente detectada en adolescentes del sexo femenino.

2.1.2.4 pocaEl comportamiento de la Fiebre Reumtica ha variado a travs de los aos y es as como en Dinamarca haba una incidencia de 29.5 x 100.000 habitantes, en 1952, para en 1970 ser de 10.7; en Inglaterra se present una disminucin de los casos desde 15.8 hasta 4.7 en 1964, igual fenmeno se ha observado en los Estados Unidos lo cual ha hecho pensar que a partir de la era antibitica, las mejores condiciones sanitarias y socio-econmicas se ha logrado una declinacin en la incidencia de esta entidad, aunque como se observa an son altas estas cifras. En los lugares con estaciones, o sea en los pases de clima templado hay una predileccin por los meses invernales y fros, coincidiendo con la poca de mayor infeccin faringoamigdaliana. 2.1.2.5 LatitudLa incidencia de Fiebre Reumtica en los pases no tropicales era considerada muy alta relacionndolo con los pases tropicales, pero esto no result ser cierto en la medida como los pases tropicales mejoraran sus sistemas de investigacin epidemiolgica y estadstica y es as como hay regiones localizadas en el Ecuador como Egipto, Trinidad e India con una incidencia igual o en algunos casos mayor a la de los pases no trpica les, tal es el caso de Egipto, en el cual se estima que la incidencia sea de 300 100.000 nios en edad escolar. 2.1.2.6 RazaNo parece haber una clara relacin entre la incidencia de Fiebre Reumtica y las razas. Parece relacionarse ntimamente el estado socio-econmico y la raza. Por ejemplo en los Estados Unidos la incidencia de Fiebre Reumtica es el doble en los negros a la de los caucsicos con mejores condiciones habitacionales y socio-econmicas.

En poblaciones indgenas de Nueva Zelandia se presenta una incidencia de 535/100.000, pero este ltimo dato parece obedecer a factores genticos ms que raciales. En general las razas no tienen ninguna caracterstica especial indicativa de susceptibilidad a la Fiebre Reumtica.

2.1.2.7 El estado socio-econmicoParece ser, segn casi todos los estudios publicados, un factor importantsimo en la incidencia de la Fiebre Reumtica y es as como en los pases en vas de desarrollo en los cuales se mezclan factores como el hacinamiento, la desnutricin, la falta de atencin mdica, la ignorancia y la falta de infraestructura sanitaria, para determinar las ms altas tazas de enfermedad, muy superiores a las presentadas por los pases desarrollados en los aos 50.

2.1.3 Existencia de enfermedad reumtica previaUn factor epidemiolgico de valor, se ha llegado a sealar como en un en un 50% de los afectos de Fiebre Reumtica previamente y con faringoamigdalitis pueden desarrollar un nuevo ataque de enfermedad en el primer ao despus del episodio inicial, luego este ndice de riesgo disminuye hasta 10% despus de 4-5 aos, pero permanece en ese valor hasta despus de los 40 aos de edad, poca en la cual el ndice de riesgo es similar en toda la poblacin.

Con los anlisis anteriores se puede precisar que la historia natural de la enfermedad ha cambiado en el ltimo cuarto de siglo y a pesar de las mltiples variables epidemiolgicas la incidencia de Fiebre Reumtica en pacientes afectos de faringoamigdalitis es del 3% sin importar si sonniosNorteamericanos, Egipcios o Latinoamericanos, aunque tiene gran influencia en esta cifra el estado socio-econmico de la poblacin estudiada (YOUNG D.S.2007).

2.1.4 La fiebre reumtica en el Ecuador

En Ecuador an no se haba detectado el problema epidemiolgicamente hablando, lastimosamente no haban estudios que mostraran la incidencia en nuestro pas, porque segn el Ministerio de Salud, no se hacan reportes epidemiolgicos de esta enfermedad y las brigadas de salud que atendan espordicamente en el pas ni el sector privado que llevaba a cabo investigaciones mdico-cientficas pudieron detectar este muy antiguo problema nacional.

Por lo que hay pocos registros que puedan consultarse hasta el da de hoy, tenemos que en 1996 se notificaron 2.035 casos de fiebre reumtica, 2,4 veces ms que en 1992. Diferentes encuestas de prevalencia de estreptococias en garganta en la poblacin escolar indicaron valores entre 7 y 19%. En 1995 la fiebre reumtica caus 66 defunciones, 37 en mujeres y 29 en hombres.

El Ministerio de Salud Pblica junto al Gobierno Nacional, ejecuta programas nacionales de prevencin, control o erradicacin de los principales problemas de salud. Las iniciativas abarcan tuberculosis, dermatologa sanitaria (que incluye lepra y leishmaniasis), enfermedades tropicales (malaria, enfermedad de Chagas, dengue y oncocercosis), rabia, sida y otras enfermedades de transmisin sexual, enfermedades crnicas no transmisibles (sobre todo el control del cncer), clera, y el Programa Nacional de Vacunacin. La estrategia de Atencin Integrada a las Enfermedades Prevalentes de la Infancia (AIEPI), iniciada en 1996, tiene como principales objetivos mejorar el tratamiento de los nios con infecciones respiratorias agudas y diarreas y disminuir la mortalidad en las zonas de mayor riesgo. El control de las enfermedades estreptoccicas y la prevencin de la fiebre reumtica, incluidos en los programas de epidemiologa y de control de enfermedades respiratorias en la poblacin infantil, se retiraron del paquete de atencin de AIEPI por la baja incidencia de la angina estreptoccica en los menores de 5 aos.

2.1.5. Aspectos epidemiolgicos de la fiebre reumtica en el Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de QuevedoEn nuestro Hospital Sagrado Corazn de Jess de la ciudad de Quevedo y con relacin al comportamiento epidemiolgico de la Fiebre Reumtica, podemos precisar los siguientes datos:

El problema de fiebre reumtica, sus secuelas y la prevencin de endocarditis bacteriana subaguda en pacientes que han de ser sometidos a tratamiento odontolgico, ha sido estudiado con profundo inters en este centro de salud. Al respecto, la Asociacin Quevedea de Mdicos ha hecho gran nfasis en la responsabilidad del odontlogo y en el papel que l juega como miembro de un equipo de salud en la prevencin de endocarditis infecciosa.

Por otra parte, los avances en ciruga cardiovascular y el implante de vlvulas, ha dado motivo a que los cuidados en dichos pacientes se lleven con el mximo de seguridad, aun cuando vayan a ser intervenidos con simples tcnicas de operatoria dental. Se ha comprobado que cualquier intervencin dental, por mnima que sea, en pacientes con fiebre reumtica y sin premeditacin, tiene como consecuencia frecuente una endocarditis. La profilaxis con penicilina benzatnica ha sido factor primordial para lograr reducir las recurrencias significativamente.

2.2. Categoras de Anlisis Terico Conceptual

2.2.1 La Antiestreptolisna-o

La mayora de los estreptococos del grupo Beta produce dos factores hemolticos. La estreptolisina O y S capaces de producir la ruptura de hemates y por lo tanto hemlisis.

En individuos infectados por estreptococos del grupo Beta, la estreptolisina O estimula la produccin de Antiestreptolisina, mientras la estreptolisina S no genera anticuerpos. La Antiestreptolisina O se encuentra de ordinario en el suero en escasa concentracin y su presencia se debe a la frecuencia de infecciones estreptoccicas. Cuando el ttulo de estreptolisina es elevado indica una infeccin reciente importante de investigar si se atiende a las probables secuelas (complicaciones) como la: glomrulo nefritis, fiebre reumtica o el eritema nudoso.

Se descubri que pacientes que padecan una infeccin aguda a estreptococo y un marcado aumento de estreptolisinas durante un periodo latente posterior a la enfermedad, desarrollaron fiebre reumtica, mientras aquellos pacientes en que su aumento de Antiestreptolisina fue ligero o moderado no desarrollaron fiebre reumtica. La determinacin del ttulo de estreptolisina es valiosa en el diagnstico diferencial de la fiebre reumtica inicial y la artritis reumtica donde el ttulo no resulta elevado.La Antiestreptolisina determina el contacto del individuo con el estreptococo en un perodo de seis meses, los ttulos mayores a 500 ut nos determina contacto reciente con la bacteria en un perodo de tres semanas aproximadamente.2.2.2. La fiebre reumtica y la Antiestreptolisina-O

El ndice de ataque de Fiebre Reumtica despus de una faringitis exudativa estreptoccica no tratada es aproximadamente 3%. Este ndice vara de acuerdo con la magnitud de la respuesta inmunolgica que puede demostrarse con el examen por Antiestreptolisina-O. Entre mayor el ttulo, mayor el ndice de ataque. No existe ninguna correlacin entre el ndice de ataque de Fiebre Reumtica y los niveles basales de Antiestreptolisina-O al momento de la infeccin (JONES D. 2004).

La frecuencia de las recadas de ataque reumtico despus de infecciones estreptoccicas tambin tiene una correlacin directa con el grado de respuesta inmunolgica a cada nuevo episodio de infeccin en el paciente reumtico. Los pacientes con carditis reumtica tienen ttulos mayores de Antiestreptolisina que los pacientes reumticos sin carditis.

Los dos prrafos anteriores, demuestran la utilidad clnica de la determinacin de Antiestreptolisina en el diagnstico y evaluacin de los pacientes con Fiebre Reumtica. El ataque de Fiebre Reumtica se inicia generalmente cuando el nivel de Antiestreptolisina-O ha alcanzado un mes despus de la infeccin, la manifestacin ms frecuente es poliartritis. En pacientes con poliartritis, la ausencia de un incremento del ttulo de Antiestreptolisina O es un dato contra el diagnstico de artritis reumtica. Si se miden otros anticuerpos, aumenta la posibilidad de mostrar los casos agudos de Fiebre Reumtica. Desafortunadamente la presencia de ttulos altos de Antiestreptolisina O solamente apoya fuertemente el diagnstico pero no lo establece con seguridad. En relacin con la liebre reumtica, la especialidad de este examen es baja ya que otros pacientes con otros tipos de artritis y condiciones clnicas similares a la fiebre reumtica pueden sufrir de infecciones estreptoccicas agudas que aumentaran los niveles normales de Antiestreptolisina O.La carditis reumtica generalmente es asintomtica en sus etapas iniciales y su diagnstico puede atrasarse, en los casos en que los sntomas comienzan a aparecer, los niveles de Antiestreptolisina O ya han regresado a lo normal, solamente en aquellos casos en los que se presenta una insuficiencia cardaca de tipo agudo o cuando hay infecciones estreptoccicas recurrentes en el pacientes es que se puede demostrar la presencia de un ttulo alto de Antiestreptolisina O.

La corea de Sydenham es por lo general una manifestacin tarda de la fiebre reumtica y los ttulos de ASO no tienen valor en la evaluacin de estos pacientes (MENEGHELLO. FANTA E. 2007).

El ttulo de ASO tiene valor particularmente en la eliminacin de la posibilidad de recadas reumticas en pacientes con fiebre reumtica, especialmente en aquellos pacientes que son seguidos clnicamente durante un rgimen de tratamiento. En estos casos esta es la nica manera de detectar las infecciones que causan las recadas ya que la mayor parte de estas infecciones son asintomticas.

2.2.3 Determinacin de pruebas cualitativas y cuantitativas de la Antiestreptolisina O y su valor elevado en el diagnstico de fiebre reumtica.

2.3. Pruebas de Aglutinacin

a. OTROS NOMBRES Anlisis de Antiestreptolisina O, Pruebas reumticas ASLO, ASLO. b. DEFINICINEl ttulo de ASLO es la medicin de anticuerpos anti-Estreptococo betahemolticos del tipo A. Esta bacteria produce una enzima llamada estreptolisina O, que puede destruir los hemates y el cuerpo reacciona contra ella produciendo anticuerpos especficos Antiestreptolisina O.

La medicin de estos anticuerpos es lo que refleja el anlisis de Antiestreptolisina O ASLO.

c. PARA QU SE REALIZA?La presencia de ttulos altos de antiestreptolisinas O ASLO, indican una infeccin por la bacteria Estreptococo betahemolticos del tipo A, que puede producir una glomerulonefritis, una fiebre reumtica, una endocarditis bacteriana o una escarlatina.

La elevacin de ASLO aparece a la semana de la infeccin por el estreptococo, los valores ms elevados se dan en la tercera semana de la infeccin y es cuando pueden aparecer las enfermedades secundarias a esta infeccin (glomerulonefritis, una fiebre reumtica, una endocarditis bacteriana o una escarlatina) pero no son especficos de ninguna de ellas. Deben ser diagnosticadas cada una de ellas por la clnica o por otros estudios diagnsticos. El ASLO puede mantenerse elevado a los 6 meses en el 30% de los casos (CARCELLER BLANCHARD A. 2007).

d. PROCEDIMIENTO DE OBTENCINPara realizar este anlisis no se precisa estar en ayunas. Los niveles de ASLO pueden ser enmascarados por los antibiticos y por los corticoides. Tambin un aumento de la betalipoprotena puede inhibir la estreptolisina O y producir ttulos falsos de elevacin de ASLO.

Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en ocasiones se realiza en el propio domicilio del paciente. Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con una jeringa o tubo de extraccin).

Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre y aparezcan ms visibles y accesibles. Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor.Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin (mediante la jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco).Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodn o similar para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas.

La sangre extrada se traslada al laboratorio de anlisis en un tubo especial para bioqumica, que contiene un producto anticoagulante. En general no suelen ser necesarios ms de 10 mililitros de sangre para una batera estndar de parmetros bioqumicos.e. PROBLEMAS Y POSIBLES RIESGOS1. La obtencin mediante un pinchazo de la vena puede producir cierto dolor.

2. La posible dificultad en encontrar la vena apropiada puede dar lugar a varios pinchazos

3. Aparicin de un hematoma (moratn o cardenal) en la zona de extraccin, suele deberse a que la vena no se ha cerrado bien tras la presin posterior y ha seguido saliendo sangre produciendo este problema. Puede aplicarse una pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona.

4. Inflamacin de la vena (flebitis), a veces la vena se ve alterada, bien sea por una causa meramente fsica o porque se ha infectado. Se deber mantener la zona relajada unos das y se puede aplicar una pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona. Si el problema persiste o aparece fiebre deber consultarlo con su mdico.

f. VALORES NORMALES DE ASLONiveles normales de ASLO

en adultosMenores de 160 Unidades/ml

en nios menores de 2 aosMenores de 50 Unidades/ml

en nios entre 2 y 4 aosMenores de 160 Unidades/ml

en nios entre 4 y 12 aosEntre 160 y 300 Unidades/ml

Niveles normales de Saturacin de la transferrina

Hombresdel 20 al 50%

Mujeresdel 15 al 50%

En estos valores puede haber ciertas diferencias por la tcnica o por criterios de normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace referencia.

g. VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES

Los niveles aumentados de ASLO pueden indicar: Infeccin por Estreptococo betahemolticos del tipo A Glomerulonefritis Fiebre reumtica Endocarditis bacteriana Escarlatina Pioderma por Estreptococo betahemolticos del tipo A

h. TCNICA DE ASOASLO-LatexDeterminacin de anti-estreptolisina OPRUEBA EN PORTA

1. FUNDAMENTO

El ASLO-Latex Test es una prueba rpida de aglutinacin en porta para la deteccin directa y la semi-cuantificacin de niveles clnicamente significativos de anticuerpos anti-estreptolisina O (ASLO) en suero.

La determinacin se efecta ensayando una suspensin de partculas de ltex recubiertos con estreptolisina frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinacin visible es indicativa de la presencia o ausencia de ASLO en las muestras nsayadas a niveles significativos

2. COMPOSICION DE LOS REACTIVOS

RAntgeno ASLO-Latex. Suspensin estabilizada y tamponada de partculas de ltex recubiertas con estreptolisina O. Contiene 0,95 g/L de azida sdica

CONTROL +Suero humano con una actividad ASLO superior a 200 UI/mL. Contiene 0,95 g/L de cida sdica

CONTROL -Suero animal con una actividad ASLO inferior a 100 UI/mL. Contiene 0,95 g/L de cida sdica.

Precauciones: En la preparacin de reactivos de origen humano, intervienen solamente materiales que, frente a tcnicas probadas, han mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos anti-HCV y HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente infecciosos.

Aviso: Los reactivos de este kit contienen acida sdica. Evitar el contacto con la piel y mucosas.

3. CONTENIDO DEL ENVASE2340005, kit 50 tests. 1 vial ASLO-Latex Antgeno, 1x1 mL Control positivo, 1x1 mL Control negativo, 3 Tarjetas visualizadoras y 1x50 palillos desechables.

REF

2340010, kit 100 tests. 2 viales ASLO-Latex Antgeno, 1x1 mL Control positivo, 1x1 mL Control negativo, 3 Tarjetas visualizadoras y 2x50 palillos desechables.

REF

4. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Conservar a 2-8C. No congelar los componentes del kit ya que podra verse afectada la funcionalidad del test. El Antgeno y los Controles son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.

5. PREPARACION DE LOS REACTIVOS

El Antgeno y los Controles estn listos para su uso.

6. MUESTRAS

Suero claro, reciente. Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8C durante una semana antes del ensayo, o por un perodo mayor a 20C.

7. EQUIPO ADICIONAL

1. Pipeta de volumen variable.2. Solucin salina (NaCl 0,9%, para tcnica semi cuantitativa)3. Agitador mecnico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m. 4. Cronmetro.

8. TECNICA

I. Prueba cualitativa

1. Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Nota 1).

2. Resuspender el antgeno con suavidad. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para asegurar su homogeneidad antes del ensayo.3. Depositar 1 gota (50 L) de suero problema en uno de los crculos de la tarjeta visualizadora. En crculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.

4. Aadir a cada crculo 1 gota de Antgeno ASLO-Latex, prxima a la muestra a analizar

5. Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable, extendindola de forma que cubra por completo la superficie interior de cada anillo. Emplear palillos distintos para cada mezcla.

6. Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos (Nota 2).

7. Observar de inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparicin de cualquier signo de aglutinacin

Lectura

Reaccin negativa: Suspensin uniforme sin cambio visible alguno, tal como se presenta en el control negativo.

Reaccin positiva: Aglutinacin dbil o intensa, fcilmente visible macroscpicamente.

II. Prueba semi-cuantitativa

1. Para cada muestra a analizar se utilizan 4 crculos de una tarjeta pipeteando 50 L de solucin salina (0,9%) en los tres primeros y 25 L en el cuarto.

2. Pipetear sobre el diluyente del primer crculo 50 L de muestra, y empleando la misma punta, mezclar mediante aspiraciones y expulsiones repetidas, transfiriendo 50 L de la mezcla resultante al tercer crculo. Mezclar de nuevo y desechar 50 L.

3. Pipetear sobre el segundo crculo 25 L de muestra y empleando la misma punta, mezclar con el diluyente en la forma indicada. Transferir 25 L de la mezcla sobre el diluyente del cuarto crculo y mezclar. Las diluciones finales obtenidas sern: 1:2, 1:3, 1:4, 1:6.

4. Ensayar cada una de las diluciones tal como se describe en los pasos 4-7 de la Prueba cualitativa.

Lectura

Como en la Prueba cualitativa. El ttulo de la muestra corresponde a la mxima dilucin que presenta reactividad. La dilucin siguiente debe ser negativa (Nota 3).

La tasa aproximada (UI/mL) de ASLO presente en la muestra puede obtenerse multiplicando la unidad mnima detectable (sensibilidad analtica) por el ttulo de la ltima dilucin positiva.

9. CONTROL DE CALIDAD

Incluir diariamente controles positivo y negativo para confirmar el correcto funcionamiento del reactivo, siguiendo los pasos descritos para la Prueba cualitativa.

El control positivo debe producir una clara aglutinacin. Si no se obtiene el resultado esperado, no utilice el kit.

10. VALORES ESPERADOS

Un noventa y cinco por ciento de la poblacin adulta sana posee ttulos de ASLO iguales o inferiores a 200 UI/mL, hallndose tasas de hasta 250 UI/mL en nios de edad escolar o adultos jvenes. Puesto que una determinacin aislada, a no ser que sea alta, no aporta informacin suficiente, se recomienda en los casos dudosos y con el fin de seguir la evolucin de la enfermedad, repetir la prueba a intervalos quincenales durante 4 6 semanas.

Los ttulos de ASLO resultantes de infecciones estreptoccicas ordinarias y fiebre reumtica aguda difieren en que en esta ltima condicin, el ttulo es muy superior y persiste durante un espacio de tiempo ms prolongado.

11. SIGNIFICADO CLINICO

Como respuesta a la infeccin por estreptococos hemolticos de los grupos A, C y G, productores de estreptolisina O (SLO), una protena extracelular de carcter enzimtico y con acusadas propiedades antignicas, se produce una elevacin de la tasa de anticuerpos anti-estreptolisina O (ASLO) que pueden ser determinados en el laboratorio. La investigacin inmunoqumica de estos anticuerpos especficos contra los productos metablicos de los estreptococos proporciona una informacin valiosa para el diagnstico de infecciones provocadas por estreptococos (fiebre reumtica, glomrulonefritis).

En el diagnstico clnico, los resultados de la determinacin de los anticuerpos anti-estreptolisina O deben ser considerados siempre en relacin a los hallazgos clnicos y otras pruebas de laboratorio.

12. CARACTERISTICAS FUNCIONALES

La unidad mnima detectable (sensibilidad analtica) es de aproximadamente 200 UI/mL ( 50 UI/mL), frente a un Calibrador Internacional de ASLO (OMS). La especificidad diagnstica es del 97%. Efecto prozona: No se observa hasta concentraciones de 1500 UI/mL.

Los resultados obtenidos con este reactivo no muestran diferencias significativas al ser comparados con un reactivo de referencia. Los datos analticos del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud.

Hemoglobina (