26
BK-CHE.KIT: Phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu Khởi tạo bởi : tinkhoahoc | Đăng bởi : tinkinhte | Cập nhật: 05/11/2008 22:43 E-mail | Bản in | Lưu xem sau Để phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat trong nông sản, thực phẩm và các mẫu môi trường, các nhà khoa học thuộc Phòng Nghiên cứu Hoá sinh và Sinh học Phân tử, Viện Công nghệ Sinh học và Thực phẩm (Trường Đại học Bách khoa Hà Nội) đã nghiên cứu và chế tạo thành công bộ thử KIT Enzim phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu (BK- CHE.KIT). Nguyên lý thử như sau: Enzym acetylcholinesterase (AChE) xúc tác thuỷ phân cơ chất acetylcholin thành cholin và axetic. Axit acetic sẽ phản ứng với chỉ thị màu tạo màu vàng. Nếu mẫu phân tích có thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat sẽ kìm hãm hoạt động của AChE, hàm lượng axit acetic giảm, màu sẽ thay đổi. Dựa vào sự thay đổi màu so với mẫu đối chứng (không có thuốc trừ sâu) hoặc dựa vào thang màu chuẩn có thể định tính hoặc bán định lượng thuốc trừ sâu trong mẫu phân tích.

thử nhanh thuốc bvtv

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: thử nhanh thuốc bvtv

BK-CHE.KIT: Phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâuKhởi tạo bởi : tinkhoahoc |  Đăng bởi : tinkinhte  | Cập nhật: 05/11/2008 22:43 E-mail | Bản in | Lưu xem sau

Để phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat trong nông sản, thực phẩm và các mẫu môi trường, các nhà khoa học thuộc Phòng Nghiên cứu Hoá sinh và Sinh học Phân tử, Viện Công nghệ Sinh học và Thực phẩm (Trường Đại học Bách khoa Hà Nội) đã nghiên cứu và chế tạo thành công bộ thử KIT Enzim phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu (BK-CHE.KIT).

Nguyên lý thử như sau: Enzym acetylcholinesterase (AChE) xúc tác thuỷ phân cơ chất acetylcholin thành cholin và axetic. Axit acetic sẽ phản ứng với chỉ thị màu tạo màu vàng. Nếu mẫu phân tích có thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat sẽ kìm hãm hoạt động của AChE, hàm lượng axit acetic giảm, màu sẽ thay đổi. Dựa vào sự thay đổi màu so với mẫu đối chứng (không có thuốc trừ sâu) hoặc dựa vào thang màu chuẩn có thể định tính hoặc bán định lượng thuốc trừ sâu trong mẫu phân tích.

Bộ BK-CHE.KIT bao gồm 10 kit thử, 10 lọ dung dịch chiết, 2 lọ đựng dung dịch đối chứng. Thời gian phân tích 5-10 phút; giới hạn phát hiện dư lượng thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat trong khoảng 0,1-0,01 ppm. Quy trình thử đơn giản, dễ dàng, bao gồm các bước sau:

1-       Chiết mẫu: Cắt 6 khoanh lá có diện tích 1 cm2 từ các vị trí khác nhau, cho vào lọ dịch chiết, lắc trộn đúng 1 phút.

Page 2: thử nhanh thuốc bvtv

2-       Phân tích: Cắt lọ đựng dịch chiết mẫu (lọ thí  nghiệm), sau đó, nhỏ đồng thời 2 lọ dung dịch đối chứng và thí nghiệm lên 2 ô của KIT thử; dùng các ngón trỏ đẩy nhẹ từ mặt sau KIT thử để thấm đều dung dịch trong các ô.

3-       Quan sát, kết luận: Sau 5-10 phút, nếu mẫu rau có thuốc trừ sâu thì ô thí nghiệm sẽ có màu xanh, ô đối chứng (không có thuốc trừ sâu) sẽ có màu vàng.

Mọi thông tin chi tiết, xin liên hệ theo địa chỉ: Phòng Nghiên cứu Hoá sinh và Sinh học Phân tử, Viện Công nghệ Sinh học và Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội - Số 1 Đại Cồ Việt, Hai Bà Trưng, Hà Nội; Tel: (04) 8682452; Email: [email protected].

(Theo Tạp chí Hoạt động Khoa Học)

Phương pháp xác định nhanh thuốc trừ sâu trong rau

Enzym axetylcholinester- aza (AChE) bị ức chế rất mạnh bởi các chất độc cơ photpho. Thông qua việc xác định hoạt độ AChE còn lại sau khi bị ức chế, người ta có thể xác định hàm lượng các chất độc cơ photpho với độ nhạy rất cao. Vì vậy enzym AChE đã được nhiều cơ sở khoa học sử dụng để phân tích các loại thuốc bảo vệ thực vật cơ photpho có trong thực phẩm, môi trường; tìm kiếm các loại thuốc điều trị bệnh teo cơ, liệt rung cũng như phát hiện nhanh các chất độc thần kinh chiến tranh cơ photpho như tabun, xarin. Tuy nhiên, các nghiên cứu về AChE ở nước ta còn chưa nhiều, do đó các nhà khoa học Việt Nam đã tiến hành nghiên cứu chiết xuất AChE từ mộtsố nguồn nguyên liệu dễ kiếm trong đó có đầu ruồi nhà để áp dụng cho các phép xác định nhanh dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong nông sản, thực phẩm.

Loại enzym này có trong lươn cá, ruồi, nhặng... nhưng theo kết quả khảo sát, ruồi nhà chủng Musca domestica bắt ở vùng Tây Tựu (Hà Tây cũ) có hoạt độ AChE cao nhất.

AChE có hoạt tính cao nhất ở 30oC và pH 7,5.  Một số chất như EDTA, 2-β-mercaptoetanol có khả năng tăng hoạt tính của AChE.

Các nghiên cứu cho thấy, AChE trong đầu ruồi nhà có khả năng phát hiện các loại thuốc bảo vệ thực vật gốc cơ photpho (như Dipterex, Ofatox, Bini 58, Monster, Bas sa, Suprathion) ở nồng độ thấp từ 10-11 đến 10-4 g/ml tùy theo độ tinh khiết của enzym và độ độc của thuốc. Thuốc càng độc, khả năng bị phát hiện càng cao, càng nhạy (Dipterex có thể bị phát hiện ngay cả khi ở nồng độ 10-11 g/ml).

Page 3: thử nhanh thuốc bvtv

Quá trình phân tích phát hiện dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong rau quả khá đơn giản, dùng rau sạch làm đối chứng.

Cách làm như sau:

Lấy các mẫu rau tươi (mỗi mẫu gồm 7 khoanh lá, mỗi khoanh có diện tích 2 cm2) cho vào lọ thủy tinh sạch, sau đó rót vào 1ml metanol, lắc nhẹ trong một phút và chuyển sang lọ mới rồi đậy kín. Dịch chiết từ rau sạch được dùng làm đối chứng. Các mẫu kiểm tra là dịch chiết rau sạch được bổ xung các lượng thuốc Dipterex biết trước. Tiếp đó lấy hai ống nghiệm gịống nhau, một ống cho mẫu nghiên cứu (để xét nghiệm rau thường), một ống cho mẫu đối chứng rồi nhỏ thuốc thử vào để thực hiện phản ứng sinh hóa. Ống đối chứng được rót dung dịch chiết rau sạch còn ống kia rót dung dịch nghiên cứu. Sau đó rót cùng một lượng dung dịch enzym AChE xác định vào cả hai ống trên, lắc đều rồi để yên 30 phút. Tiếp đó lại cho thêm vào cả hai ống dung dịch axetylcholin clorua và bromthymol xanh. Khi quan sát, người ta sẽ thấy ống chứa chất độc có thể có màu từ xanh vàng đến xanh, ống không chứa chất độc chỉ có màu vàng. Muốn biết chính xác hơn về nồng độ dư lượng thuốc bảo vệ thực vật ở rau thường thì lặp lại thí nghiệm trên đối với các mẫu nghiên cứu và mẫu kiểm tra. Phương pháp kiểm tra nói trên khá đơn giản, có thể áp dụng được rộng rãi ở những nơi xa các trung tâm khoa học.

VT

Theo Báo cáo khoa học

Trưòng Đại học Bách khoa-

HàNội, 10/2001

Products Overview 

Products Overview 

Personal Assessment Questionnaire 

Personal Assessment Questionnaire 

Product List 

Product List 

Monthly Specials 

Monthly Specials 

Everyday Savings 

Everyday Savings 

Page 4: thử nhanh thuốc bvtv

Product Consultations 

Product Consultations 

Ordering Info 

Ordering Info 

Shipping Info 

Shipping Info 

Digital Catalog 

Digital Catalog 

Conversion Chart 

Conversion Chart 

 

About VRP

 

About VRP

 

Commitment to Quality

 

Commitment to Quality

 

Contact Us

 

Contact Us

 

Privacy Policy

 

Privacy Policy

Page 5: thử nhanh thuốc bvtv

 

Health Freedom

 

Health Freedom

 

Affiliates

 

Affiliates

 

Employment

 

Employment

 

Site Map

 

Site Map

 

 

Research Center Articles

 

Research Center Articles

 

Educational Webinars

 

Educational Webinars

 

Dear Doctor

 

Dear Doctor

 

Breaking News

 

Breaking News

 

Special Reports

 

Page 6: thử nhanh thuốc bvtv

Special Reports

 

Newsletter

 

Newsletter

 

Subscribe to Newsletter

 

Subscribe to Newsletter

 

 

Manage Your Account

 

Manage Your Account

 

Create New Account

 

Create New Account

 

 

  •  

Galantamine

A Unique Nutrient for Preserving Memory and Cognitive Function

By Jim English

Page 7: thử nhanh thuốc bvtv

One of the prospects facing otherwise healthy adults is the inexorable loss of memories and

cognitive performance with advancing age. Aging baby boomers are becoming aware of age-

related cognitive dysfunction, memory impairment and dementia. This growing problem is

matched with an equally alarming increase in the number of adults being diagnosed with

Alzheimers disease and Parkinsons. A number of drugs and nutritional supplements have been

proven to help slow the loss of cognitive functions in aging individuals. A growing body of

research indicates that galantamine—a powerful new cognitive enhancing phytonutrient—is

among the safest and most effective neuro-protective substances available today.

Dementia and the Aging Brain

All adults experience occasional lapses of memory, from misplacing car keys to temporarily

forgetting a name. Dementia, by contrast, is a permanent and progressive disorder marked by

profound memory impairment and loss of complex cognitive functions, including problem-solving,

decision-making, spatial orientation, and communication.

Dementia can be caused by the ravages of advanced age, as well as neurological disorders

(Alzheimer’s disease and Parkinson’s), vascular disorders (multi-infarct disease), inherited

disorders (Huntington’s disease), and infections (viruses such as HIV). A common factor shared

by all of these disorders is a reduction of blood and oxygen levels in the brain, which starves

brain cells of fuel while damaging cell membranes and accelerating brain cell death.

Over time dementia can lead to depression, incontinence, disorientation, speech disturbances,

tremors, muscle weakness, tinnitus, and loss of visual acuity and coordination. In time dementia

victims are rendered incapable of functioning and require round-the-clock care. Currently

dementia affects an estimated 8 percent of all adults over the age of 65, and up to an astounding

50 percent of people over the age of 80.

Alzheimer’s Disease

Alzheimer’s disease (AD), the most common form of dementia, usually surfaces after about 50

years of age. Symptoms of Alzheimer’s include the progressive erosion of memories,

accompanied by the deterioration of mental performance, communication skills, abstract thinking

and personality. Alzheimer’s afflicts approximately 40 percent of all individuals over the age of 85,

accounting for some 4 million people in the US. Life expectancy following diagnosis of

Alzheimer’s is only about 8 years.

Page 8: thử nhanh thuốc bvtv

Vascular Dementia

Vascular dementia (VaD), the second leading form of dementia, is caused when cerebrovascular

disease impairs blood flow to the brain and starves cells of oxygen and vital nutrients. Common

cerebrovascular events that precede vascular dementia include strokes, carotid stenosis and

aneurysms. More than 700,000 Americans experience a major cerebrovascular event each year,

usually in the form of a stroke. Additional subsets of vascular dementia caused by

cerebrovascular disease include hereditary vascular dementia, multi-infarct dementia, post-stroke

dementia, subcortical ischemic vascular disease and dementia, mild cognitive impairment, and

degenerative dementias (including Alzheimers disease, frontotemporal dementia, and dementia

with Lewy bodies). Vascular dementia is also often found present, to some degree, in cases of

Alzheimer’s disease (mixed dementia).

The Aging Cholinergic System

Central nervous system functions are controlled by the cholinergic system, a system of cells that

produce and/or are stimulated by the neurotransmitter , acetylcholine. Two types of receptors—

muscarinic and nicotinic—respond to acetylcholine to facilitate intracellular communication,

memory processing and higher cognitive functions. The process begins when acetylcholine is

released to travel across the synaptic cleft (Fig. 1) where it binds to a receptor on the other side

of the synapse (post-synaptic terminal). Once the signal is triggered acetylcholine is rapidly

broken down by an enzyme, acetylcholinesterase (AchE), and made available to be recycled.

Page 9: thử nhanh thuốc bvtv

Diminished cholinergic functioning, a biomarker of normal aging, is especially severe in cases

involving dementia. In Alzheimer’s for example, amyloid plaque deposits in key components of

the cholinergic system cause a drastic decline in acetylcholine levels. To make matters worse,

already reduced acetylcholine levels continue to be degraded by AchE, further impairing memory

and eroding cognitive ability.1

Reversing Cholinergic Decline

Conventional medical treatment for dementia involves drugs, called acetylcholinesterase

inhibitors that suppress AChE to prevent it from degrading acetylcholine. This elevates

acetylcholine levels and allows the neurotransmitter to persist in the synaptic cleft for a longer

period of time. The two acetylcholinesterase inhibiting drugs currently approved for Alzheimers—

Tacrine™ and Aricept™—are only moderately effective and suffer drawbacks. Both are

expensive, costing between $100 and $240 per month, and present serious side effects, including

liver toxicity (Tacrine) to nausea and diarrhea (Aricept).2

Galantamine: Dual-Action Cholinesterase Inhibitor

Page 10: thử nhanh thuốc bvtv

Galantamine is a natural compound derived from the common snowdrop (Galanthus nivalis), a

plant closely related to the daffodil. Galantamine first attracted attention when it was found to be

an effective acetylcholinesterase inhibitor. Later it was discovered that galantamine amplifies the

effects of acetylcholine by directly stimulating nicotinic receptors (nAChR).3

As stated earlier, nicotinic receptors are one of two types of receptors that are stimulated by

acetylcholine. Nicotinic receptors are especially important for learning and short-term memory

processes. Additionally, nicotinic receptors are damaged in Alzheimer’s disease, likely as a result

of the build up of plaque on receptor sites. Obviously any compound that could stimulate these

receptors would be of benefit in treating Alzheimer’s and other forms of dementia. Unfortunately

drugs that act on nicotinic receptors tend to quickly desensitize the receptors, leading to tolerance

and producing only short-term symptomatic improvement.4

As previously stated, in addition to acting as an acetylcholinesterase inhibitor, galantamine has

also been shown to be a nicotinic agonist—an agent that mimics the effects of acetylcholine by

directly stimulating nicotinic receptors. More importantly, galantamine was shown to be an

allosteric modulator—a compound that interacts with receptors by binding to sites distinctly

different from those used by acetylcholine or nicotine. Because allosteric modulators are not

directly involved in the neurotransmission processes they affect, they do not induce

compensatory processes that other compounds induce. Thus, problems such as receptor

desensitization and down-regulation of expression are avoided.5

Unique Effects of Galantamine

Galantamine’s attributes result in a number of benefits not seen with other acetylcholinesterase

inhibitors. First, acting as an allosteric modulator, galantamine stimulates nicotinic receptors and

improves their functions without inducing tolerance and losing effectiveness. Second,

galantamine amplifies the actions of acetylcholine to improve symptoms. Third, galantamine

actually increases the release of acetylcholine, while modulating levels of other neurotransmitters

involved in dementia, such as glutamate, serotonin and GABA.6

Human Studies

Numerous human studies support the use of galantamine to support cognitive function and

memory. In one multicenter, double-blind, placebo controlled trial conducted in Europe and

Canada, 653 patients with mild to moderate Alzheimer’s disease were treated with either

galantamine or a placebo. After three weeks of therapy randomly assigned doses of galantamine

were increased to maintenance levels of 24 or 32 mg per day. After six months, patients receiving

Page 11: thử nhanh thuốc bvtv

galantamine showed significantly improved scores on an 11 item Alzheimer’s assessment scale

compared to placebo. Patients on the higher doses also had significantly better scores on the

dementia scale than the placebo group. Study authors concluded that galantamine slowed

declines in functional ability and cognition, and was well tolerated by patients.7

In a second recent study, 285 patients diagnosed with Alzheimer’s disease and cerebral vascular

disease participated in a multicenter double-blind study in England. Patients received either 24

mg per day of galantamine or a placebo for six months. Following the double-blinded phase, 238

patients continued the study, receiving 24 mg per day for the next six months. At the end of the

one-year trial patients treated with galantamine showed clinically significant improvements in

cognitive functions after six months and maintained their cognitive functions for the entire 12-

month study. In contrast, cognitive functions deteriorated among those in the placebo group.

When the placebo-treated patients began to take galantamine during the open-label phase of the

trial they did show improvements in cognitive function, but they never attained the same cognitive

level as patients who had been treated with galantamine for the entire 12 months.8

Conclusion

Aging adults face the loss of cognitive powers and impaired mental functions. Research supports

the role of galantamine in slowing brain aging and preserving cognitive functions. Research also

indicates that maximum protective benefits are observed when treatment begins before signs of

irreversible declines in mental abilities.

References

1. Watkins PB, Zimmerman HJ, Knapp MJ. Hepatotoxic effects of tacrine administration in

patients with Alzheimers disease. JAMA 1994 Apr 6; 271:992-8.

2. Watkins PB, Zimmerman HJ, Knapp MJ. Hepatotoxic effects of tacrine administration in

patients with Alzheimer’s disease. JAMA 1994 Apr 6; 271:992-8

3. Doggrell SA, Evans S. Treatment of dementia with neurotransmission modulation. Expert Opin

Investig Drugs. 2003 Oct;12(10):1633-54.

4. Maelicke A. Allosteric modulation of nicotinic receptors as a treatment strategy for Alzheimers

disease. Dement Geriatr Cogn Disord 2000 Sep;11 Suppl 1:11-8.

5. Maelicke A, Samochocki M, Jostock R, Fehrenbacher A, Ludwig J, Albuquerque EX, Zerlin M.

Page 12: thử nhanh thuốc bvtv

Allosteric sensitization of nicotinic receptors by galantamine, a new treatment strategy for

Alzheimers disease. Biol Psychiatry 2001;49:279-88.

6. Samochocki M, Hoffle A, Fehrenbacher A, et al. Galantamine is an allosterically potentiating

ligand of neuronal nicotinic but not of muscarinic acetylcholine receptors. J Pharmacol Exp Ther.

2003 Jun;305(3):1024-36. Epub 2003 Mar 20.

7. Efficacy and safety of galantamine in patients with mild to moderate Alzheimers disease:

multicentre randomised controlled trial. Galantamine International-1 Study Group. BMJ 2000 Dec

9;321(7274):1445-9.

8. Bullock R, Erkinjuntti T, Lilienfeld S, GAL-INT-6 Study Group G. Management of Patients with

Alzheimers Disease plus Cerebrovascular Disease: 12-Month Treatment with Galantamine.

Dement Geriatr Cogn Disord. 2004 [Epub ahead of print]. Epub 2003 Oct 13.

      Free shipping for orders over $150

Details »

(your cart is empty)

Related Products

Extension IQ - 120 capsules

Price: $23.95

NEWSLETTER ARCHIVE

Learn about the role of vitamins and nutritional supplements in your health by reading past

newsletter articles.

BE INFORMED

Page 13: thử nhanh thuốc bvtv

Every month, Vitamin Research News brings you the latest happenings from the world of

nutritional science. Don't miss out, subscribe now.

Products Overview | Product List (A-Z and by Product Code) | Digital Catalog | Newsletter |

Research | Webinars | My Account

Home | About Us | Contact Us | Affiliates | Privacy Policy | Site Map

© Copyright 2009 Vitamin Research Products

CTY CP BAÛO VEÄ THÖÏC SAIGON PLANT PROTECTION JOINT VAÄT SAIGON JIONT STOCK COMPANY

Khu phoá 1, Taân Thuaän Ñoâng, Q. 7 – TP.HCM ÑT: ÑT: 8730789 ––8733295 - FAX: 84.8.8733003 08.38730789 38733295 - FAX: 84.08.38733003

Hướng dẫn – Trình baøy : Nguyeãn Tieán Duõng ( [email protected] ) Nguyeãn Truùc Linh ( [email protected] ) Phoøng R&D

“GT” PESTICIDE TEST KITPHƯƠNG PHAÙP KIỂM TRA NHANH DƯ LƯỢNG THUỐC BVTV TREÂN RAU QUAÛ, TRAÙI CAÂYÖÙNG DUÏNG COÂNG NGHEÄ CUÛA BOÄ Y TEÁ THAÙI LAN

ÖÙNG DUÏNG & PHAÙT TRIEÅN

COÂNG TY CP BAÛO VEÄ THÖÏC VAÄT SAIGON

Chuyên dùng để phát hiện thuốc trừ sâu nhóm lân hữu cơ, Carbamate, và một số chất độc khác ức chế men Cholinesterase

Nghiên cứu và phát minh bởi Dr. Gobthong Thoophom

Page 14: thử nhanh thuốc bvtv

So sánh khả năng phát hiệnPhương pháp chuẩn:4 phương pháp

GT – Test Kit:1 phương pháp

1. Thuốc BVTV

1. Clo hữu cơ (OC) 2. Lân hữu cơ (OP) 3. Carbamate 4. Pyrethroid

Lân hữu cơ (OP) và Carbamate

2. Các dẫn xuất, chất chuyển hóa 3. Những chất độc khác

Một số Không

một số Vài chất ức chế cholinesterase

So sánh tính chất của hai phương phápPhương pháp chuẩnĐòi hỏi trình độ chuyên môn. Tối thiểu phải nắm vững 4 phương pháp. Chi phí cao (máy GC, HPLC). Thời gian phân tích lâu. Xác định từng hoạt chất

GT – Test KitKhông cần chuyên môn 1 phương pháp

Chi phí rất thấp (bộ dụng cụ) Thời gian kiểm tra nhanh (8 mẫu /60 phút) Xác định tổng các hoạt chất

Đánh giá kết quả dựa trên Codex Căn cứ trên mức ức chế 50% hoặc MRL (Maximum Residue Limited) ít hơn

Bộ dụng cụ và thuốc thử

Thuoác thöû “GT”

CÔ CHEÁ TAÙC ÑOÄNG CUÛA THUOÁC BVTV LEÂN CÔ THEÅ Khi daãn truyeàn kích thích thaàn kinh : ôû ñaàu muùt daây thaàn kinh saûn sinh ra chaát Acetin Cholin ñeå daãn truyeàn kích thích. Acetin cholin (Ach): laø moät neurotransmitter, chaát hoùa hoïc ñeå lieân laïc giöõa caùc thaàn kinh vôùi nhau. Acetin cholin sterase (AchE): laø men trong cô theå duøng phaân huûy Ach dö thöøa naèm chaën giöõa 2 teá baøo thaàn kinh, giuùp caùc thaàn kinh lieân laïc lieân tuïc khoâng bò giaùn ñoaïn Men AchE laïi deã bò öùc cheá bôûi thuoác BVTV nhoùm laân höõu cô vaø carbamate.

Page 15: thử nhanh thuốc bvtv

Quá trình acetylcholine truyền tin giữa các tế bào thần kinh bị phá vỡ bởi các loại thuốc trừ sâu ức chế với cholinesterase.

(nguồn http://www.vrp.com/articles.aspx?ProdID=art1131&zTYPE=2)

Các biểu hiện ngộ độc :A- TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG: 1.Hội chứng Muscarinic: • Co đồng tử • Tăng tiết nước mắt , nước bọt • Nhịp tim chậm • Hạ huyết áp • Nhìn mờ • Tiểu không tự chủ • Tăng nhu động dạ dày ruột 2.Hội chứng Nicotinic: • Run cơ, yếu cơ • Nhịp nhanh 3.Thần kinh trung ương: • Lo lắng, nói lấp, biến đổi tri giác và ức chế hô hấp B - CẬN LÂM SÀNG: • Men Cholinesterase máu giảm • Nitrophenol nước tiểu (+)

Acetylcholinesterase (AchE)

http://en.wikipedia.org/wiki/Protein_Data_Bank

Phản ứng thủy phân Acetincholin bởi AchE tạo acid acetic và cholin

NGUYEÂN LYÙ CUÛA PHÖÔNG PHAÙP(öùc cheá men acetylcholinesterase) Döïa vaøo ñaëc tính öùc cheá men acetin cholin sterase cuûa caùc loaïi thuoác Khi cho men acetintröø saâu thuoäc nhoùm phospho höõu cô vaø carbamate: cholin sterase (GT-1) vaøo trong dòch chieát maãu rau quaû coù chöùa dö löôïng thuoác tröø saâu nhoùm phospho höõu cô vaø carbamate thì 1 phaàn men naøy bò öùc Men acetin cholin esterase töï do (khoâng bòcheá chæ coøn laïi 1 phaàn thöøa. Döïaöùc cheá) thuyû phaân acetin cholin (GT-2) taïo acid acetic vaø cholin. vaøo phaûn öùng taïo maøu cuûa acetin cholin coøn thöøa vôùi thuoác thöû GT maø

Cơ chế tác động của phospho hữu cơAcetylcholinesterase (AchE) + H2O

Phospho höõu cô + AchETaïo phöùc hôïp beàn vöõng

1. Đối chứng / không có dư lượngGT-1 line ChoGT-2Mẫu đã chiết xuất GT-2 mất 30 phútAce acid tic

2. Mẫu phát hiện có dư lượng ở mức an toàn (< I

50%

GT-1

Page 16: thử nhanh thuốc bvtv

Choline

Ace a tic cid

GT-2Mẫu đã chiết xuất 30 phút

GT–2 vẫn còn

3. Mẫu phát hiện có dư lượng ở mức không an toàn (> I50%)

GT-1GT-2Mẫu đã chiết xuất

CholineAcetic acid

30 phút

GT-2 vẫn còn

Khả năng phát hiện của GT Test kit

* Nhóm lân hữu cơ* Nhóm Carbamate * Một vài chất độc khác ức chế cholin sterase

Cách lấy mẫu

Lấy mẫu nông sản tại chợ (kiểm tra chất lượng)1. Trường hợp biết trước trọng lượng lô hàng

Trọng lượng lô hàng (kg) Dưới 50 51 –500 501 – 2000 Trên 2000

Số mẫu lấy 3 5 10 15

Lấy mẫu nông sản tại chợ (kiểm tra chất lượng) 2. Trường hợp nông sản được đóng gói sẵnSố bao gói có trong lô 1 – 25 26 – 100 101 – 250 Trên 250 Số mẫu lấy 1 5 10 15

Trọng lượng cần cho một mẫuRau / trái Kích thước nhỏ trọng lượng < 25 g Kích thước trung bình trọng lượng 25 – 250 g Kích thước lớn tọng lượng khoảng 500 g Kích thước rất lớn trọng lượng khoảng 2 kg Ngủ cốc Cây hàng niên Cây gia vị Ví dụ Quít, đậu rau, taùo, caùc quaû coù chuøm Táo tây, cam, cà rốt, khoai tây, dưa leo Cải bắp, ổi, sà lách, khoai sọ, khoai tây Dưa hấu, bầu bí, khoai sọ đậu nành, gạo, đậu phụng Ngò Gia vị khô Trọng lượng / mẫu 1 kg 1 kg hoặc ít nhất 10 trái 2 kg hoặc ít nhất 5 trái Ít nhất 2 trái 1 kg 0.5 kg 0.1 kg

Page 17: thử nhanh thuốc bvtv

Chuẩn bị mẫu

Rau ăn laù(ví dụ cải beï, caûi rổ, caûi xanh, caûi ngoït) Loaïi boû reã vaø daát dính, caét caây caûi laøm 2 theo chieàu doïc, laáy 1 beân, troän ñeàu vaø laáy khoaûng

Rau, ñaäu thaân daøi (rau muoáng, ñaäu ñuõa…), cắt laøm 3 phần, trộn đều, lấy 200 g để băm nhỏ.

Caùc loaïi rau cuû (caø chua, cuû caûi, nho, taùo…), boû cuoáng caét laøm 4, laáy 2 phaàn ñoái dieän, caét nhoû troän ñeàu laáy khoaûng 200g

Cây chứa nhiều nước (cà chua): băm thành miếng hơi to Cây không chứa nhiều nước (cải): băm nhuyễn

Caùc böôùc tieán haønh thöû• Chieát maãu • Phaùt hieän • Ñaùnh giaù keát quaû

1. Chieát maãu

2 vaïch maøu cuûa nhieät keá

Böôùc 1.1 Ñaët khay nhoâm leân hoäp ñeøn, caém ñieän cho ñeøn saùng, ñoå nöôùc aám (35 ± 2oC, duøng nhieät keá ño sao cho nhieät ñoä naèm trong khoaûng 2 vaïch maøu cuûa nhieät keá) vaøo khoaûng ¾ khay nhoâm. Ñaët thuoác thöû GT-1

Böôùc 1.2 Cho maãu (ñaõ ñöôïc caét nhuyeãn) vaøo chai ñöïng maãu, ñeán khoaûng thöù 2 cuûa chai (hay caân 5g maãu)

Ñ aäu ñuõ a

Caø chua

Rau caûi

Böôùc 1.3 Duøng pipette thuûy tinh theâmD ung moâi 1

dung moâi 1 (solvent-1) ngaäp xaâm xaáp maãu. Ñaäy chaët naép, laéc kyõ 1 phuùt vaø ñeå yeân 10 phuùt

Böôùc 1.4 Duøng pipette nhöïa cho 1ml nöôùc vaøo 1 oáng nghieäm môùi ñeå laøm möïc so saùnh cho böôùc tieáp

Böôùc 1.5 Duøng pipette thuûy tinh ruùt dung dòch chieát maãu trong chai nhöïa (ôû böôùc 1.3) vaøo oáng nghieäm môùi sao cho möïc dung dòch ngang baèng vôùi möïc nöôùc trong oáng nghieäm ôû böôùc 1.4 (töông

Page 18: thử nhanh thuốc bvtv

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

Hút 1 ml dịch chiết mẫu thử cho vào maãu Dòch chieát 1 ống nghiệm

Dung moâi 2 (solvent2)

Böôùc 1.6 Duøng pipette nhöïa ruùt 1ml dung moâi 2 (solvent-2) cho vaøo oáng nghieäm chöùa dung dòch chieát maãu (oáng nghieäm ôû böôùc 1.5)

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

Dung moâi 2

Luùc naøy dung dòch trong oáng nghieäm chia thaønh 2 phaàn: -Phaàn treân dung moâi 2 (solvent-2): khoâng maøu

Böôùc 1.7 Suïc khí cho ñeán khi phaàn dung moâi 1 ôû phía döôùi bay hôi hoaøn toaøn

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

Quaù trình suïc khí hoaøn taát, oáng nghieäm chæ coøn 1 lôùp dung dòch

2. Phát hiện

Böôùc 2.1 Söû duïng 3 oáng nghieäm môùi, duøng 3mieáng decal daùn leân moãi oáng vaø ghi nhö sau : -OÁNG 1 : I50 -OÁNG 2 : Ñoái chöùng

I5 0

Ñoái chöù ng

Ñ aäu ñuõ a

Page 19: thử nhanh thuốc bvtv

Caø chu a

Rau caûi

Duøng pipette nhöïa thöù 1 (coøn saïch, chöa söû duïng): Theâm 0,25ml dung moâi 2 vaøo oáng I50 vaø oáng ñoái chöùng Duøng pipette nhöïa thöù 2 (coøn saïch, chöa Theâm 0,25ml dòch chieát maãu (ôû böôùc 1.7) söû duïng): vaøo oáng maãu thöû

I50

Ñoái chöùn g

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caû i

GT-1

Duøng pipette nhöïa thöù 3 (coøn saïch, chöa Böôùc 2.2 söû duïng): Theâm 0, 5ml dung dòch GT-1 vaøo moãi oáng, laéc ñeàu, ñeå yeân 10 phuùt

Böôùc 2.3 Trong thôøi gian chôø

ñôïi Ñoå GT-2.1 vaøo loï GT-2 : goïi laø GT-2’

Duøng Ñoå GT-3.1GT-2 treân nhaõn thaønh GT-2’ vieát söûa vaøo loï GT-3 : goïi laø GT-3’ , söûa GT-3 thaønh GT-3’ vaø ghi ngaøy thöïc hieän treân nhaõn

I5 0

Ñoái chöùn g

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

phuùt: Duøng pipette nhöïa thöù 4 (coøn saïch, chöa söû duïng) theâm: 0,375ml GT-2’ vaøo oáng I50 0,25ml GT-2’ vaøo oáng ñoái chöùng vaø Laéc ñeàuoáng ñeå yeân caùc oáng nghieäm vaø maãu thöû treân khay nöôùc aám trong 30 phuùt

Böôùc 2.4Khi ñaõ ñuû thôøi gian 10

Page 20: thử nhanh thuốc bvtv

I5 0

Ñoái chöùn g

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

GT-3’

Böôùc 2.5 Khi ñaõ ñuû thôøi gian 30phuùt Duøng pipette nhöïa thöù 5 (coøn saïch, chöa söû duïng) theâm: 1ml hoãn hôïp GT-3’ vaøo moãi oáng nghieäm, laéc ñeàu

I5 0

Ñoái chöù ng

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

GT-4

Böôùc 2.6Duøng pipette nhöïa thöù 6 (coøn saïch, chöa söû duïng)thuoác thöû GT-4 vaøo moãi oáng 0,5ml theâm: nghieäm, laéc ñeàu

Ñoái chöù ng

I5 0

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

GT-5

Böôùc 2.7Duøng pipette nhöïa thöù 7 (coøn saïch, chöa söû duïng)thuoác thöû GT-5 vaøo moãi

Page 21: thử nhanh thuốc bvtv

oáng 0,5ml theâm: nghieäm, MAØU SAÉC ÔÛ MOÃI OÁNG NGHIEÄM, ÑAÙNH GIAÙ GHI NHAÄN laéc ñeàuKEÁT QUAÛ

3. Đánh giá kết quả1 Maøu saéc cuûa trong caùc dung dòch oáng nghieäm OÁng maãu thöû coù maøu hoaëc töông töï oáng ñoái nhaït hôn chöùng OÁng maãu thöû coù maøu nhaït I50 nhöng ñaäm oáng hôn hôn oáng ñoái chöùng Keát quaû Khoâng phaùt hieän dö löôïng thuoác BVTV Phaùt hieän dö thuoác löôïng BVTV trong möùc an toaøn Phaùt OÁng maãu thöû coù maøu ñaäm hieän dö thuoác löôïng BVTV hôn hoaëc töông töï oáng I50 vöôït möùc an toaøn

Ñoái chöù ng

I5 0

Ñ aäu ñuõ a

Caø chu a

Rau caûi

Đối chứng

Ức chế 50%

Không phát hiện dư lượng

Phát hiện an toàn

Phát hiện không an toàn

Các lỗi thao tácKhi tieán haønh thöû nghieäm, neáu thao taùc sai thì maøu saéc dung dòch cuûa oáng nghieäm seõ thay ñoåi theo maøu caùc oáng maãu nhö trong hình sau:

PHUÏ LUÏC1/ Nhöõng ñieàu caàn löu yù khi söû duïng thuoác thöû GT: Vieäc söû duïng dung moâi chieát xuaát laø ñeå hoaø tan chaát ñoäc coù trong maãu thöû, ñoàng thôøi phaân huyû enzyme thöï vaät trong rau quaû. Dung moâi 1 coù tính ñoäc haïi cao ñoái vôùi ngöôøi thöû nghieäm, neân traùnh tieáp xuùc baèng caùch ngöûi tröïc tieáp vaø ñòa ñieåm thöû nghieäm phaûi ôû nôi thoâng Dung moâi khi tieáp xuùc tröïc tieáp vaøo da, neân röûa ngay baèngthoaùng. nöôùc

2/ Caùch baûo quaûn dung moâi:

Page 22: thử nhanh thuốc bvtv

Thuoác thöû GT khi chöa söû duïng neân boû vaøo tuû laïnh ôû 4oC . Rieâng GT-1 boû vaøo ngaên ñaù Neáu tuû laïnh khoâng ñuû choã thì chæ caàn ñeå GT-1 ôû ngaên ñaù, GT-2 ñeå trong tuû laïnh, soá coøn laïi ñeå beân ngoaøi, khoâng ñeå nôi coù aùnh naéng tröïc tieáp. Ngoaøi ra caàn kieåm tra, vaën chaët naép ñaäy cuûa dung moâi 1 ñeå traùnh tình traïng bay hôi. Dung dòch thuoác thöû GT-2’ vaø GT-3’ phaûi ñöôïc baûo quaûn trong tuû laïnh:

Tröôùc khi thöû nghieäm chuaån bò3/ Caùch veä sinh duïng cuï thöû nghieäm: 1 thau nöôùc saïch, hoaø tan vaøo 1 ít xaø boâng. Trong quaù trình thöû nghieäm nhöõng duïng cuï naøo ñaõ söû duïng roài haõy röa qua 1 laàn nöôùc saïch sau ñoù ngaâm vaøo thau nöôùc xaø boâng ñeå sau khi hoaøn taát vieäc thöû nghieäm seõ ñoàng loaït röûa duïng cuï 1 laàn. Ñoái vôùi oáng nghieäm vaø pipette neáu thaáy chaát maøu xanh cuûa maãu thöû coøn baùm laïi thì laáy dung moâi 1 nhoû vaøo cho saïch maøu, sau ñoù ngaâm vaøo thau nöôùc xaø

Maãu thöû coøn dö ôû bình4/ Caùch xöû lyù maãu thöû dö sau thöû nghieäm coù pha dung moâi 1. Ñoå vaøo bao nylon coù mieäng roäng, ñem phôi naéng hoaëc ñeå nôi thoaùng khí cho ñeán khi dung moâi bay heát roài ñem boû vaøo thuøng raùc.

5/ Ñieåm maáu choát cuûa phöông phaùp:

Giai ñoaïn suïc khí laøm bay hôi dung moâi 1 ôû trong maãu thöû ñeå chuyeån qua dung moâi 2, phaûi ñaûm baûo raèng dung moâi 1 bay hôi heát hoaøn toaøn. Neáu khoâng coù theå daãn ñeán keát quaû sai vì dung moâi 1 taïo phaûn öùng phuï khi tieáp xuùc vôùi dung dòch GT-1 vaø keát quaû laø maãu thöû phaùt hieän coù ñoäc chaát.

CTY CP BAÛO VEÄ THÖÏC SAIGON PLANT PROTECTION JOINT STOCK COMPANY VAÄT SAIGONCám ơn

Hướng dẫn – Trình baøy : Nguyeãn Tieán Duõng ( [email protected] ) Nguyeãn Truùc Linh