Upload
chicucbvtvsonla75
View
751
Download
4
Embed Size (px)
Citation preview
BK-CHE.KIT: Phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâuKhởi tạo bởi : tinkhoahoc | Đăng bởi : tinkinhte | Cập nhật: 05/11/2008 22:43 E-mail | Bản in | Lưu xem sau
Để phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat trong nông sản, thực phẩm và các mẫu môi trường, các nhà khoa học thuộc Phòng Nghiên cứu Hoá sinh và Sinh học Phân tử, Viện Công nghệ Sinh học và Thực phẩm (Trường Đại học Bách khoa Hà Nội) đã nghiên cứu và chế tạo thành công bộ thử KIT Enzim phát hiện nhanh dư lượng thuốc trừ sâu (BK-CHE.KIT).
Nguyên lý thử như sau: Enzym acetylcholinesterase (AChE) xúc tác thuỷ phân cơ chất acetylcholin thành cholin và axetic. Axit acetic sẽ phản ứng với chỉ thị màu tạo màu vàng. Nếu mẫu phân tích có thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat sẽ kìm hãm hoạt động của AChE, hàm lượng axit acetic giảm, màu sẽ thay đổi. Dựa vào sự thay đổi màu so với mẫu đối chứng (không có thuốc trừ sâu) hoặc dựa vào thang màu chuẩn có thể định tính hoặc bán định lượng thuốc trừ sâu trong mẫu phân tích.
Bộ BK-CHE.KIT bao gồm 10 kit thử, 10 lọ dung dịch chiết, 2 lọ đựng dung dịch đối chứng. Thời gian phân tích 5-10 phút; giới hạn phát hiện dư lượng thuốc trừ sâu lân hữu cơ, cacbamat trong khoảng 0,1-0,01 ppm. Quy trình thử đơn giản, dễ dàng, bao gồm các bước sau:
1- Chiết mẫu: Cắt 6 khoanh lá có diện tích 1 cm2 từ các vị trí khác nhau, cho vào lọ dịch chiết, lắc trộn đúng 1 phút.
2- Phân tích: Cắt lọ đựng dịch chiết mẫu (lọ thí nghiệm), sau đó, nhỏ đồng thời 2 lọ dung dịch đối chứng và thí nghiệm lên 2 ô của KIT thử; dùng các ngón trỏ đẩy nhẹ từ mặt sau KIT thử để thấm đều dung dịch trong các ô.
3- Quan sát, kết luận: Sau 5-10 phút, nếu mẫu rau có thuốc trừ sâu thì ô thí nghiệm sẽ có màu xanh, ô đối chứng (không có thuốc trừ sâu) sẽ có màu vàng.
Mọi thông tin chi tiết, xin liên hệ theo địa chỉ: Phòng Nghiên cứu Hoá sinh và Sinh học Phân tử, Viện Công nghệ Sinh học và Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội - Số 1 Đại Cồ Việt, Hai Bà Trưng, Hà Nội; Tel: (04) 8682452; Email: [email protected].
(Theo Tạp chí Hoạt động Khoa Học)
Phương pháp xác định nhanh thuốc trừ sâu trong rau
Enzym axetylcholinester- aza (AChE) bị ức chế rất mạnh bởi các chất độc cơ photpho. Thông qua việc xác định hoạt độ AChE còn lại sau khi bị ức chế, người ta có thể xác định hàm lượng các chất độc cơ photpho với độ nhạy rất cao. Vì vậy enzym AChE đã được nhiều cơ sở khoa học sử dụng để phân tích các loại thuốc bảo vệ thực vật cơ photpho có trong thực phẩm, môi trường; tìm kiếm các loại thuốc điều trị bệnh teo cơ, liệt rung cũng như phát hiện nhanh các chất độc thần kinh chiến tranh cơ photpho như tabun, xarin. Tuy nhiên, các nghiên cứu về AChE ở nước ta còn chưa nhiều, do đó các nhà khoa học Việt Nam đã tiến hành nghiên cứu chiết xuất AChE từ mộtsố nguồn nguyên liệu dễ kiếm trong đó có đầu ruồi nhà để áp dụng cho các phép xác định nhanh dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong nông sản, thực phẩm.
Loại enzym này có trong lươn cá, ruồi, nhặng... nhưng theo kết quả khảo sát, ruồi nhà chủng Musca domestica bắt ở vùng Tây Tựu (Hà Tây cũ) có hoạt độ AChE cao nhất.
AChE có hoạt tính cao nhất ở 30oC và pH 7,5. Một số chất như EDTA, 2-β-mercaptoetanol có khả năng tăng hoạt tính của AChE.
Các nghiên cứu cho thấy, AChE trong đầu ruồi nhà có khả năng phát hiện các loại thuốc bảo vệ thực vật gốc cơ photpho (như Dipterex, Ofatox, Bini 58, Monster, Bas sa, Suprathion) ở nồng độ thấp từ 10-11 đến 10-4 g/ml tùy theo độ tinh khiết của enzym và độ độc của thuốc. Thuốc càng độc, khả năng bị phát hiện càng cao, càng nhạy (Dipterex có thể bị phát hiện ngay cả khi ở nồng độ 10-11 g/ml).
Quá trình phân tích phát hiện dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong rau quả khá đơn giản, dùng rau sạch làm đối chứng.
Cách làm như sau:
Lấy các mẫu rau tươi (mỗi mẫu gồm 7 khoanh lá, mỗi khoanh có diện tích 2 cm2) cho vào lọ thủy tinh sạch, sau đó rót vào 1ml metanol, lắc nhẹ trong một phút và chuyển sang lọ mới rồi đậy kín. Dịch chiết từ rau sạch được dùng làm đối chứng. Các mẫu kiểm tra là dịch chiết rau sạch được bổ xung các lượng thuốc Dipterex biết trước. Tiếp đó lấy hai ống nghiệm gịống nhau, một ống cho mẫu nghiên cứu (để xét nghiệm rau thường), một ống cho mẫu đối chứng rồi nhỏ thuốc thử vào để thực hiện phản ứng sinh hóa. Ống đối chứng được rót dung dịch chiết rau sạch còn ống kia rót dung dịch nghiên cứu. Sau đó rót cùng một lượng dung dịch enzym AChE xác định vào cả hai ống trên, lắc đều rồi để yên 30 phút. Tiếp đó lại cho thêm vào cả hai ống dung dịch axetylcholin clorua và bromthymol xanh. Khi quan sát, người ta sẽ thấy ống chứa chất độc có thể có màu từ xanh vàng đến xanh, ống không chứa chất độc chỉ có màu vàng. Muốn biết chính xác hơn về nồng độ dư lượng thuốc bảo vệ thực vật ở rau thường thì lặp lại thí nghiệm trên đối với các mẫu nghiên cứu và mẫu kiểm tra. Phương pháp kiểm tra nói trên khá đơn giản, có thể áp dụng được rộng rãi ở những nơi xa các trung tâm khoa học.
VT
Theo Báo cáo khoa học
Trưòng Đại học Bách khoa-
HàNội, 10/2001
Products Overview
Products Overview
Personal Assessment Questionnaire
Personal Assessment Questionnaire
Product List
Product List
Monthly Specials
Monthly Specials
Everyday Savings
Everyday Savings
Product Consultations
Product Consultations
Ordering Info
Ordering Info
Shipping Info
Shipping Info
Digital Catalog
Digital Catalog
Conversion Chart
Conversion Chart
About VRP
About VRP
Commitment to Quality
Commitment to Quality
Contact Us
Contact Us
Privacy Policy
Privacy Policy
Health Freedom
Health Freedom
Affiliates
Affiliates
Employment
Employment
Site Map
Site Map
Research Center Articles
Research Center Articles
Educational Webinars
Educational Webinars
Dear Doctor
Dear Doctor
Breaking News
Breaking News
Special Reports
Special Reports
Newsletter
Newsletter
Subscribe to Newsletter
Subscribe to Newsletter
Manage Your Account
Manage Your Account
Create New Account
Create New Account
•
Galantamine
A Unique Nutrient for Preserving Memory and Cognitive Function
By Jim English
One of the prospects facing otherwise healthy adults is the inexorable loss of memories and
cognitive performance with advancing age. Aging baby boomers are becoming aware of age-
related cognitive dysfunction, memory impairment and dementia. This growing problem is
matched with an equally alarming increase in the number of adults being diagnosed with
Alzheimers disease and Parkinsons. A number of drugs and nutritional supplements have been
proven to help slow the loss of cognitive functions in aging individuals. A growing body of
research indicates that galantamine—a powerful new cognitive enhancing phytonutrient—is
among the safest and most effective neuro-protective substances available today.
Dementia and the Aging Brain
All adults experience occasional lapses of memory, from misplacing car keys to temporarily
forgetting a name. Dementia, by contrast, is a permanent and progressive disorder marked by
profound memory impairment and loss of complex cognitive functions, including problem-solving,
decision-making, spatial orientation, and communication.
Dementia can be caused by the ravages of advanced age, as well as neurological disorders
(Alzheimer’s disease and Parkinson’s), vascular disorders (multi-infarct disease), inherited
disorders (Huntington’s disease), and infections (viruses such as HIV). A common factor shared
by all of these disorders is a reduction of blood and oxygen levels in the brain, which starves
brain cells of fuel while damaging cell membranes and accelerating brain cell death.
Over time dementia can lead to depression, incontinence, disorientation, speech disturbances,
tremors, muscle weakness, tinnitus, and loss of visual acuity and coordination. In time dementia
victims are rendered incapable of functioning and require round-the-clock care. Currently
dementia affects an estimated 8 percent of all adults over the age of 65, and up to an astounding
50 percent of people over the age of 80.
Alzheimer’s Disease
Alzheimer’s disease (AD), the most common form of dementia, usually surfaces after about 50
years of age. Symptoms of Alzheimer’s include the progressive erosion of memories,
accompanied by the deterioration of mental performance, communication skills, abstract thinking
and personality. Alzheimer’s afflicts approximately 40 percent of all individuals over the age of 85,
accounting for some 4 million people in the US. Life expectancy following diagnosis of
Alzheimer’s is only about 8 years.
Vascular Dementia
Vascular dementia (VaD), the second leading form of dementia, is caused when cerebrovascular
disease impairs blood flow to the brain and starves cells of oxygen and vital nutrients. Common
cerebrovascular events that precede vascular dementia include strokes, carotid stenosis and
aneurysms. More than 700,000 Americans experience a major cerebrovascular event each year,
usually in the form of a stroke. Additional subsets of vascular dementia caused by
cerebrovascular disease include hereditary vascular dementia, multi-infarct dementia, post-stroke
dementia, subcortical ischemic vascular disease and dementia, mild cognitive impairment, and
degenerative dementias (including Alzheimers disease, frontotemporal dementia, and dementia
with Lewy bodies). Vascular dementia is also often found present, to some degree, in cases of
Alzheimer’s disease (mixed dementia).
The Aging Cholinergic System
Central nervous system functions are controlled by the cholinergic system, a system of cells that
produce and/or are stimulated by the neurotransmitter , acetylcholine. Two types of receptors—
muscarinic and nicotinic—respond to acetylcholine to facilitate intracellular communication,
memory processing and higher cognitive functions. The process begins when acetylcholine is
released to travel across the synaptic cleft (Fig. 1) where it binds to a receptor on the other side
of the synapse (post-synaptic terminal). Once the signal is triggered acetylcholine is rapidly
broken down by an enzyme, acetylcholinesterase (AchE), and made available to be recycled.
Diminished cholinergic functioning, a biomarker of normal aging, is especially severe in cases
involving dementia. In Alzheimer’s for example, amyloid plaque deposits in key components of
the cholinergic system cause a drastic decline in acetylcholine levels. To make matters worse,
already reduced acetylcholine levels continue to be degraded by AchE, further impairing memory
and eroding cognitive ability.1
Reversing Cholinergic Decline
Conventional medical treatment for dementia involves drugs, called acetylcholinesterase
inhibitors that suppress AChE to prevent it from degrading acetylcholine. This elevates
acetylcholine levels and allows the neurotransmitter to persist in the synaptic cleft for a longer
period of time. The two acetylcholinesterase inhibiting drugs currently approved for Alzheimers—
Tacrine™ and Aricept™—are only moderately effective and suffer drawbacks. Both are
expensive, costing between $100 and $240 per month, and present serious side effects, including
liver toxicity (Tacrine) to nausea and diarrhea (Aricept).2
Galantamine: Dual-Action Cholinesterase Inhibitor
Galantamine is a natural compound derived from the common snowdrop (Galanthus nivalis), a
plant closely related to the daffodil. Galantamine first attracted attention when it was found to be
an effective acetylcholinesterase inhibitor. Later it was discovered that galantamine amplifies the
effects of acetylcholine by directly stimulating nicotinic receptors (nAChR).3
As stated earlier, nicotinic receptors are one of two types of receptors that are stimulated by
acetylcholine. Nicotinic receptors are especially important for learning and short-term memory
processes. Additionally, nicotinic receptors are damaged in Alzheimer’s disease, likely as a result
of the build up of plaque on receptor sites. Obviously any compound that could stimulate these
receptors would be of benefit in treating Alzheimer’s and other forms of dementia. Unfortunately
drugs that act on nicotinic receptors tend to quickly desensitize the receptors, leading to tolerance
and producing only short-term symptomatic improvement.4
As previously stated, in addition to acting as an acetylcholinesterase inhibitor, galantamine has
also been shown to be a nicotinic agonist—an agent that mimics the effects of acetylcholine by
directly stimulating nicotinic receptors. More importantly, galantamine was shown to be an
allosteric modulator—a compound that interacts with receptors by binding to sites distinctly
different from those used by acetylcholine or nicotine. Because allosteric modulators are not
directly involved in the neurotransmission processes they affect, they do not induce
compensatory processes that other compounds induce. Thus, problems such as receptor
desensitization and down-regulation of expression are avoided.5
Unique Effects of Galantamine
Galantamine’s attributes result in a number of benefits not seen with other acetylcholinesterase
inhibitors. First, acting as an allosteric modulator, galantamine stimulates nicotinic receptors and
improves their functions without inducing tolerance and losing effectiveness. Second,
galantamine amplifies the actions of acetylcholine to improve symptoms. Third, galantamine
actually increases the release of acetylcholine, while modulating levels of other neurotransmitters
involved in dementia, such as glutamate, serotonin and GABA.6
Human Studies
Numerous human studies support the use of galantamine to support cognitive function and
memory. In one multicenter, double-blind, placebo controlled trial conducted in Europe and
Canada, 653 patients with mild to moderate Alzheimer’s disease were treated with either
galantamine or a placebo. After three weeks of therapy randomly assigned doses of galantamine
were increased to maintenance levels of 24 or 32 mg per day. After six months, patients receiving
galantamine showed significantly improved scores on an 11 item Alzheimer’s assessment scale
compared to placebo. Patients on the higher doses also had significantly better scores on the
dementia scale than the placebo group. Study authors concluded that galantamine slowed
declines in functional ability and cognition, and was well tolerated by patients.7
In a second recent study, 285 patients diagnosed with Alzheimer’s disease and cerebral vascular
disease participated in a multicenter double-blind study in England. Patients received either 24
mg per day of galantamine or a placebo for six months. Following the double-blinded phase, 238
patients continued the study, receiving 24 mg per day for the next six months. At the end of the
one-year trial patients treated with galantamine showed clinically significant improvements in
cognitive functions after six months and maintained their cognitive functions for the entire 12-
month study. In contrast, cognitive functions deteriorated among those in the placebo group.
When the placebo-treated patients began to take galantamine during the open-label phase of the
trial they did show improvements in cognitive function, but they never attained the same cognitive
level as patients who had been treated with galantamine for the entire 12 months.8
Conclusion
Aging adults face the loss of cognitive powers and impaired mental functions. Research supports
the role of galantamine in slowing brain aging and preserving cognitive functions. Research also
indicates that maximum protective benefits are observed when treatment begins before signs of
irreversible declines in mental abilities.
References
1. Watkins PB, Zimmerman HJ, Knapp MJ. Hepatotoxic effects of tacrine administration in
patients with Alzheimers disease. JAMA 1994 Apr 6; 271:992-8.
2. Watkins PB, Zimmerman HJ, Knapp MJ. Hepatotoxic effects of tacrine administration in
patients with Alzheimer’s disease. JAMA 1994 Apr 6; 271:992-8
3. Doggrell SA, Evans S. Treatment of dementia with neurotransmission modulation. Expert Opin
Investig Drugs. 2003 Oct;12(10):1633-54.
4. Maelicke A. Allosteric modulation of nicotinic receptors as a treatment strategy for Alzheimers
disease. Dement Geriatr Cogn Disord 2000 Sep;11 Suppl 1:11-8.
5. Maelicke A, Samochocki M, Jostock R, Fehrenbacher A, Ludwig J, Albuquerque EX, Zerlin M.
Allosteric sensitization of nicotinic receptors by galantamine, a new treatment strategy for
Alzheimers disease. Biol Psychiatry 2001;49:279-88.
6. Samochocki M, Hoffle A, Fehrenbacher A, et al. Galantamine is an allosterically potentiating
ligand of neuronal nicotinic but not of muscarinic acetylcholine receptors. J Pharmacol Exp Ther.
2003 Jun;305(3):1024-36. Epub 2003 Mar 20.
7. Efficacy and safety of galantamine in patients with mild to moderate Alzheimers disease:
multicentre randomised controlled trial. Galantamine International-1 Study Group. BMJ 2000 Dec
9;321(7274):1445-9.
8. Bullock R, Erkinjuntti T, Lilienfeld S, GAL-INT-6 Study Group G. Management of Patients with
Alzheimers Disease plus Cerebrovascular Disease: 12-Month Treatment with Galantamine.
Dement Geriatr Cogn Disord. 2004 [Epub ahead of print]. Epub 2003 Oct 13.
Free shipping for orders over $150
Details »
(your cart is empty)
Related Products
Extension IQ - 120 capsules
Price: $23.95
NEWSLETTER ARCHIVE
Learn about the role of vitamins and nutritional supplements in your health by reading past
newsletter articles.
BE INFORMED
Every month, Vitamin Research News brings you the latest happenings from the world of
nutritional science. Don't miss out, subscribe now.
Products Overview | Product List (A-Z and by Product Code) | Digital Catalog | Newsletter |
Research | Webinars | My Account
Home | About Us | Contact Us | Affiliates | Privacy Policy | Site Map
© Copyright 2009 Vitamin Research Products
CTY CP BAÛO VEÄ THÖÏC SAIGON PLANT PROTECTION JOINT VAÄT SAIGON JIONT STOCK COMPANY
Khu phoá 1, Taân Thuaän Ñoâng, Q. 7 – TP.HCM ÑT: ÑT: 8730789 ––8733295 - FAX: 84.8.8733003 08.38730789 38733295 - FAX: 84.08.38733003
Hướng dẫn – Trình baøy : Nguyeãn Tieán Duõng ( [email protected] ) Nguyeãn Truùc Linh ( [email protected] ) Phoøng R&D
“GT” PESTICIDE TEST KITPHƯƠNG PHAÙP KIỂM TRA NHANH DƯ LƯỢNG THUỐC BVTV TREÂN RAU QUAÛ, TRAÙI CAÂYÖÙNG DUÏNG COÂNG NGHEÄ CUÛA BOÄ Y TEÁ THAÙI LAN
ÖÙNG DUÏNG & PHAÙT TRIEÅN
COÂNG TY CP BAÛO VEÄ THÖÏC VAÄT SAIGON
Chuyên dùng để phát hiện thuốc trừ sâu nhóm lân hữu cơ, Carbamate, và một số chất độc khác ức chế men Cholinesterase
Nghiên cứu và phát minh bởi Dr. Gobthong Thoophom
So sánh khả năng phát hiệnPhương pháp chuẩn:4 phương pháp
GT – Test Kit:1 phương pháp
1. Thuốc BVTV
1. Clo hữu cơ (OC) 2. Lân hữu cơ (OP) 3. Carbamate 4. Pyrethroid
Lân hữu cơ (OP) và Carbamate
2. Các dẫn xuất, chất chuyển hóa 3. Những chất độc khác
Một số Không
một số Vài chất ức chế cholinesterase
So sánh tính chất của hai phương phápPhương pháp chuẩnĐòi hỏi trình độ chuyên môn. Tối thiểu phải nắm vững 4 phương pháp. Chi phí cao (máy GC, HPLC). Thời gian phân tích lâu. Xác định từng hoạt chất
GT – Test KitKhông cần chuyên môn 1 phương pháp
Chi phí rất thấp (bộ dụng cụ) Thời gian kiểm tra nhanh (8 mẫu /60 phút) Xác định tổng các hoạt chất
Đánh giá kết quả dựa trên Codex Căn cứ trên mức ức chế 50% hoặc MRL (Maximum Residue Limited) ít hơn
Bộ dụng cụ và thuốc thử
Thuoác thöû “GT”
CÔ CHEÁ TAÙC ÑOÄNG CUÛA THUOÁC BVTV LEÂN CÔ THEÅ Khi daãn truyeàn kích thích thaàn kinh : ôû ñaàu muùt daây thaàn kinh saûn sinh ra chaát Acetin Cholin ñeå daãn truyeàn kích thích. Acetin cholin (Ach): laø moät neurotransmitter, chaát hoùa hoïc ñeå lieân laïc giöõa caùc thaàn kinh vôùi nhau. Acetin cholin sterase (AchE): laø men trong cô theå duøng phaân huûy Ach dö thöøa naèm chaën giöõa 2 teá baøo thaàn kinh, giuùp caùc thaàn kinh lieân laïc lieân tuïc khoâng bò giaùn ñoaïn Men AchE laïi deã bò öùc cheá bôûi thuoác BVTV nhoùm laân höõu cô vaø carbamate.
Quá trình acetylcholine truyền tin giữa các tế bào thần kinh bị phá vỡ bởi các loại thuốc trừ sâu ức chế với cholinesterase.
(nguồn http://www.vrp.com/articles.aspx?ProdID=art1131&zTYPE=2)
Các biểu hiện ngộ độc :A- TRIỆU CHỨNG LÂM SÀNG: 1.Hội chứng Muscarinic: • Co đồng tử • Tăng tiết nước mắt , nước bọt • Nhịp tim chậm • Hạ huyết áp • Nhìn mờ • Tiểu không tự chủ • Tăng nhu động dạ dày ruột 2.Hội chứng Nicotinic: • Run cơ, yếu cơ • Nhịp nhanh 3.Thần kinh trung ương: • Lo lắng, nói lấp, biến đổi tri giác và ức chế hô hấp B - CẬN LÂM SÀNG: • Men Cholinesterase máu giảm • Nitrophenol nước tiểu (+)
Acetylcholinesterase (AchE)
http://en.wikipedia.org/wiki/Protein_Data_Bank
Phản ứng thủy phân Acetincholin bởi AchE tạo acid acetic và cholin
NGUYEÂN LYÙ CUÛA PHÖÔNG PHAÙP(öùc cheá men acetylcholinesterase) Döïa vaøo ñaëc tính öùc cheá men acetin cholin sterase cuûa caùc loaïi thuoác Khi cho men acetintröø saâu thuoäc nhoùm phospho höõu cô vaø carbamate: cholin sterase (GT-1) vaøo trong dòch chieát maãu rau quaû coù chöùa dö löôïng thuoác tröø saâu nhoùm phospho höõu cô vaø carbamate thì 1 phaàn men naøy bò öùc Men acetin cholin esterase töï do (khoâng bòcheá chæ coøn laïi 1 phaàn thöøa. Döïaöùc cheá) thuyû phaân acetin cholin (GT-2) taïo acid acetic vaø cholin. vaøo phaûn öùng taïo maøu cuûa acetin cholin coøn thöøa vôùi thuoác thöû GT maø
Cơ chế tác động của phospho hữu cơAcetylcholinesterase (AchE) + H2O
Phospho höõu cô + AchETaïo phöùc hôïp beàn vöõng
1. Đối chứng / không có dư lượngGT-1 line ChoGT-2Mẫu đã chiết xuất GT-2 mất 30 phútAce acid tic
2. Mẫu phát hiện có dư lượng ở mức an toàn (< I
50%
GT-1
Choline
Ace a tic cid
GT-2Mẫu đã chiết xuất 30 phút
GT–2 vẫn còn
3. Mẫu phát hiện có dư lượng ở mức không an toàn (> I50%)
GT-1GT-2Mẫu đã chiết xuất
CholineAcetic acid
30 phút
GT-2 vẫn còn
Khả năng phát hiện của GT Test kit
* Nhóm lân hữu cơ* Nhóm Carbamate * Một vài chất độc khác ức chế cholin sterase
Cách lấy mẫu
Lấy mẫu nông sản tại chợ (kiểm tra chất lượng)1. Trường hợp biết trước trọng lượng lô hàng
Trọng lượng lô hàng (kg) Dưới 50 51 –500 501 – 2000 Trên 2000
Số mẫu lấy 3 5 10 15
Lấy mẫu nông sản tại chợ (kiểm tra chất lượng) 2. Trường hợp nông sản được đóng gói sẵnSố bao gói có trong lô 1 – 25 26 – 100 101 – 250 Trên 250 Số mẫu lấy 1 5 10 15
Trọng lượng cần cho một mẫuRau / trái Kích thước nhỏ trọng lượng < 25 g Kích thước trung bình trọng lượng 25 – 250 g Kích thước lớn tọng lượng khoảng 500 g Kích thước rất lớn trọng lượng khoảng 2 kg Ngủ cốc Cây hàng niên Cây gia vị Ví dụ Quít, đậu rau, taùo, caùc quaû coù chuøm Táo tây, cam, cà rốt, khoai tây, dưa leo Cải bắp, ổi, sà lách, khoai sọ, khoai tây Dưa hấu, bầu bí, khoai sọ đậu nành, gạo, đậu phụng Ngò Gia vị khô Trọng lượng / mẫu 1 kg 1 kg hoặc ít nhất 10 trái 2 kg hoặc ít nhất 5 trái Ít nhất 2 trái 1 kg 0.5 kg 0.1 kg
Chuẩn bị mẫu
Rau ăn laù(ví dụ cải beï, caûi rổ, caûi xanh, caûi ngoït) Loaïi boû reã vaø daát dính, caét caây caûi laøm 2 theo chieàu doïc, laáy 1 beân, troän ñeàu vaø laáy khoaûng
Rau, ñaäu thaân daøi (rau muoáng, ñaäu ñuõa…), cắt laøm 3 phần, trộn đều, lấy 200 g để băm nhỏ.
Caùc loaïi rau cuû (caø chua, cuû caûi, nho, taùo…), boû cuoáng caét laøm 4, laáy 2 phaàn ñoái dieän, caét nhoû troän ñeàu laáy khoaûng 200g
Cây chứa nhiều nước (cà chua): băm thành miếng hơi to Cây không chứa nhiều nước (cải): băm nhuyễn
Caùc böôùc tieán haønh thöû• Chieát maãu • Phaùt hieän • Ñaùnh giaù keát quaû
1. Chieát maãu
2 vaïch maøu cuûa nhieät keá
Böôùc 1.1 Ñaët khay nhoâm leân hoäp ñeøn, caém ñieän cho ñeøn saùng, ñoå nöôùc aám (35 ± 2oC, duøng nhieät keá ño sao cho nhieät ñoä naèm trong khoaûng 2 vaïch maøu cuûa nhieät keá) vaøo khoaûng ¾ khay nhoâm. Ñaët thuoác thöû GT-1
Böôùc 1.2 Cho maãu (ñaõ ñöôïc caét nhuyeãn) vaøo chai ñöïng maãu, ñeán khoaûng thöù 2 cuûa chai (hay caân 5g maãu)
Ñ aäu ñuõ a
Caø chua
Rau caûi
Böôùc 1.3 Duøng pipette thuûy tinh theâmD ung moâi 1
dung moâi 1 (solvent-1) ngaäp xaâm xaáp maãu. Ñaäy chaët naép, laéc kyõ 1 phuùt vaø ñeå yeân 10 phuùt
Böôùc 1.4 Duøng pipette nhöïa cho 1ml nöôùc vaøo 1 oáng nghieäm môùi ñeå laøm möïc so saùnh cho böôùc tieáp
Böôùc 1.5 Duøng pipette thuûy tinh ruùt dung dòch chieát maãu trong chai nhöïa (ôû böôùc 1.3) vaøo oáng nghieäm môùi sao cho möïc dung dòch ngang baèng vôùi möïc nöôùc trong oáng nghieäm ôû böôùc 1.4 (töông
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
Hút 1 ml dịch chiết mẫu thử cho vào maãu Dòch chieát 1 ống nghiệm
Dung moâi 2 (solvent2)
Böôùc 1.6 Duøng pipette nhöïa ruùt 1ml dung moâi 2 (solvent-2) cho vaøo oáng nghieäm chöùa dung dòch chieát maãu (oáng nghieäm ôû böôùc 1.5)
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
Dung moâi 2
Luùc naøy dung dòch trong oáng nghieäm chia thaønh 2 phaàn: -Phaàn treân dung moâi 2 (solvent-2): khoâng maøu
Böôùc 1.7 Suïc khí cho ñeán khi phaàn dung moâi 1 ôû phía döôùi bay hôi hoaøn toaøn
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
Quaù trình suïc khí hoaøn taát, oáng nghieäm chæ coøn 1 lôùp dung dòch
2. Phát hiện
Böôùc 2.1 Söû duïng 3 oáng nghieäm môùi, duøng 3mieáng decal daùn leân moãi oáng vaø ghi nhö sau : -OÁNG 1 : I50 -OÁNG 2 : Ñoái chöùng
I5 0
Ñoái chöù ng
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
Duøng pipette nhöïa thöù 1 (coøn saïch, chöa söû duïng): Theâm 0,25ml dung moâi 2 vaøo oáng I50 vaø oáng ñoái chöùng Duøng pipette nhöïa thöù 2 (coøn saïch, chöa Theâm 0,25ml dòch chieát maãu (ôû böôùc 1.7) söû duïng): vaøo oáng maãu thöû
I50
Ñoái chöùn g
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caû i
GT-1
Duøng pipette nhöïa thöù 3 (coøn saïch, chöa Böôùc 2.2 söû duïng): Theâm 0, 5ml dung dòch GT-1 vaøo moãi oáng, laéc ñeàu, ñeå yeân 10 phuùt
Böôùc 2.3 Trong thôøi gian chôø
ñôïi Ñoå GT-2.1 vaøo loï GT-2 : goïi laø GT-2’
Duøng Ñoå GT-3.1GT-2 treân nhaõn thaønh GT-2’ vieát söûa vaøo loï GT-3 : goïi laø GT-3’ , söûa GT-3 thaønh GT-3’ vaø ghi ngaøy thöïc hieän treân nhaõn
I5 0
Ñoái chöùn g
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
phuùt: Duøng pipette nhöïa thöù 4 (coøn saïch, chöa söû duïng) theâm: 0,375ml GT-2’ vaøo oáng I50 0,25ml GT-2’ vaøo oáng ñoái chöùng vaø Laéc ñeàuoáng ñeå yeân caùc oáng nghieäm vaø maãu thöû treân khay nöôùc aám trong 30 phuùt
Böôùc 2.4Khi ñaõ ñuû thôøi gian 10
I5 0
Ñoái chöùn g
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
GT-3’
Böôùc 2.5 Khi ñaõ ñuû thôøi gian 30phuùt Duøng pipette nhöïa thöù 5 (coøn saïch, chöa söû duïng) theâm: 1ml hoãn hôïp GT-3’ vaøo moãi oáng nghieäm, laéc ñeàu
I5 0
Ñoái chöù ng
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
GT-4
Böôùc 2.6Duøng pipette nhöïa thöù 6 (coøn saïch, chöa söû duïng)thuoác thöû GT-4 vaøo moãi oáng 0,5ml theâm: nghieäm, laéc ñeàu
Ñoái chöù ng
I5 0
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
GT-5
Böôùc 2.7Duøng pipette nhöïa thöù 7 (coøn saïch, chöa söû duïng)thuoác thöû GT-5 vaøo moãi
oáng 0,5ml theâm: nghieäm, MAØU SAÉC ÔÛ MOÃI OÁNG NGHIEÄM, ÑAÙNH GIAÙ GHI NHAÄN laéc ñeàuKEÁT QUAÛ
3. Đánh giá kết quả1 Maøu saéc cuûa trong caùc dung dòch oáng nghieäm OÁng maãu thöû coù maøu hoaëc töông töï oáng ñoái nhaït hôn chöùng OÁng maãu thöû coù maøu nhaït I50 nhöng ñaäm oáng hôn hôn oáng ñoái chöùng Keát quaû Khoâng phaùt hieän dö löôïng thuoác BVTV Phaùt hieän dö thuoác löôïng BVTV trong möùc an toaøn Phaùt OÁng maãu thöû coù maøu ñaäm hieän dö thuoác löôïng BVTV hôn hoaëc töông töï oáng I50 vöôït möùc an toaøn
Ñoái chöù ng
I5 0
Ñ aäu ñuõ a
Caø chu a
Rau caûi
Đối chứng
Ức chế 50%
Không phát hiện dư lượng
Phát hiện an toàn
Phát hiện không an toàn
Các lỗi thao tácKhi tieán haønh thöû nghieäm, neáu thao taùc sai thì maøu saéc dung dòch cuûa oáng nghieäm seõ thay ñoåi theo maøu caùc oáng maãu nhö trong hình sau:
PHUÏ LUÏC1/ Nhöõng ñieàu caàn löu yù khi söû duïng thuoác thöû GT: Vieäc söû duïng dung moâi chieát xuaát laø ñeå hoaø tan chaát ñoäc coù trong maãu thöû, ñoàng thôøi phaân huyû enzyme thöï vaät trong rau quaû. Dung moâi 1 coù tính ñoäc haïi cao ñoái vôùi ngöôøi thöû nghieäm, neân traùnh tieáp xuùc baèng caùch ngöûi tröïc tieáp vaø ñòa ñieåm thöû nghieäm phaûi ôû nôi thoâng Dung moâi khi tieáp xuùc tröïc tieáp vaøo da, neân röûa ngay baèngthoaùng. nöôùc
2/ Caùch baûo quaûn dung moâi:
Thuoác thöû GT khi chöa söû duïng neân boû vaøo tuû laïnh ôû 4oC . Rieâng GT-1 boû vaøo ngaên ñaù Neáu tuû laïnh khoâng ñuû choã thì chæ caàn ñeå GT-1 ôû ngaên ñaù, GT-2 ñeå trong tuû laïnh, soá coøn laïi ñeå beân ngoaøi, khoâng ñeå nôi coù aùnh naéng tröïc tieáp. Ngoaøi ra caàn kieåm tra, vaën chaët naép ñaäy cuûa dung moâi 1 ñeå traùnh tình traïng bay hôi. Dung dòch thuoác thöû GT-2’ vaø GT-3’ phaûi ñöôïc baûo quaûn trong tuû laïnh:
Tröôùc khi thöû nghieäm chuaån bò3/ Caùch veä sinh duïng cuï thöû nghieäm: 1 thau nöôùc saïch, hoaø tan vaøo 1 ít xaø boâng. Trong quaù trình thöû nghieäm nhöõng duïng cuï naøo ñaõ söû duïng roài haõy röa qua 1 laàn nöôùc saïch sau ñoù ngaâm vaøo thau nöôùc xaø boâng ñeå sau khi hoaøn taát vieäc thöû nghieäm seõ ñoàng loaït röûa duïng cuï 1 laàn. Ñoái vôùi oáng nghieäm vaø pipette neáu thaáy chaát maøu xanh cuûa maãu thöû coøn baùm laïi thì laáy dung moâi 1 nhoû vaøo cho saïch maøu, sau ñoù ngaâm vaøo thau nöôùc xaø
Maãu thöû coøn dö ôû bình4/ Caùch xöû lyù maãu thöû dö sau thöû nghieäm coù pha dung moâi 1. Ñoå vaøo bao nylon coù mieäng roäng, ñem phôi naéng hoaëc ñeå nôi thoaùng khí cho ñeán khi dung moâi bay heát roài ñem boû vaøo thuøng raùc.
5/ Ñieåm maáu choát cuûa phöông phaùp:
Giai ñoaïn suïc khí laøm bay hôi dung moâi 1 ôû trong maãu thöû ñeå chuyeån qua dung moâi 2, phaûi ñaûm baûo raèng dung moâi 1 bay hôi heát hoaøn toaøn. Neáu khoâng coù theå daãn ñeán keát quaû sai vì dung moâi 1 taïo phaûn öùng phuï khi tieáp xuùc vôùi dung dòch GT-1 vaø keát quaû laø maãu thöû phaùt hieän coù ñoäc chaát.
CTY CP BAÛO VEÄ THÖÏC SAIGON PLANT PROTECTION JOINT STOCK COMPANY VAÄT SAIGONCám ơn
Hướng dẫn – Trình baøy : Nguyeãn Tieán Duõng ( [email protected] ) Nguyeãn Truùc Linh