Upload
della-yulantika-buana
View
244
Download
12
Embed Size (px)
Citation preview
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
1/76
UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR
JAMUR TIRAM PUTIH ( Pleur otus ostr eatus (Jacq.) P. Kumm) PADA HAMSTERSYRIAN HIPERKOLESTEROLEMIA DAN HIPERGLIKEMIA BERDASARKAN
PENURUNAN KADAR KOLESTEROL TOTAL DAN LDL
SkripsiUntuk melengkapi syarat-syarat guna memperoleh gelar
Sarjana Farmasi
Disusun Oleh:Della Yulantika
1104015053
PROGRAM STUDI FARMASIFAKULTAS FARMASI DAN SAINS
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PROF. DR. HAMKA
JAKARTA2015
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
2/76
iii
Abstrak
UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β -GLUKANLARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH ( Pleur otus ostr eatus (Jacq.) P. Kumm)
PADA HAMSTER SYRIAN HIPERKOLESTEROLEMIA DANHIPERGLIKEMIA BERDASARKAN PENURUNAN KADAR KOLESTEROL
TOTAL DAN LDL
Della Yulantika1104015053
Jamur tiram putih mengandung s enyawa β -glukan yang dilaporkan memiliki aktivitasantihiperkolesterol. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui aktivitasantihiperkolestrol ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih pada hamsterhiperkolesterolemia dan hiperglikemia. Individu hiperglikemia pada umumnyamengalami gangguan metabolisme lemak dan peningkatan kadar kolesterol. Hewanuji hamster syrian jantan dibagi 6 kelompok perlakuan, masing-masing terdiri dari 4ekor hamster. Kelompok I (kontrol normal), kelompok II (kontrol positif) diberikolestiramin, kelompok III (kontrol negatif), kelompok IV, V, dan VI diberi ekstrakβ-glukan larut air jamur tiram putih dosis 120 mg/kg BB, 240 mg/kg BB, dan 480mg/kg BB secara peroral. Pemeriksaan kadar kolesterol total dan LDL menggunakanalat fotometer klinikal. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak uji dapatmenurunkan kadar kolesterol total dan LDL. Sebagai simpulan adalah dosis ekstrakβ-glukan larut air jamur tiram putih yang terbaik menurunkan kadar kolesterol totalyaitu 240 mg/kg BB dan LDL yaitu 480 mg/kg BB.
Kata Kunci : Jamur Tiram Putih , β-glukan, Hiperkolesterolemia-Hiperglikemia
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
3/76
iv
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahim,
Alhamdulillahirabbil’alamin, segala puji bagi Allah SWT., semesta alam YangMaha Pemurah lagi Maha Penyayang, karena atas karunia dan izin-Nya penulis dapatmenyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi ini. Shalawat serta salam senantiasatercurah kepada junjungan kita Nabi Muhammad SAW.
Skripsi dengan judul “ UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROLEKSTRAK β -GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH ( Pleurotusostreatus (Jacq.) P. Kumm) PADA HAMSTER SYRIANHIPERKOLESTEROLEMIA DAN HIPERGLIKEMIA BERDASARKANPENURUNAN KADAR KOLESTEROL TOTAL DAN LDL ” disusun untukmemenuhi tugas akhir sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Farmasi pada Fakultas Farmasi dan Sains Universitas Muhammadiyah Prof. DR.Hamka Jakarta. Penulis menyadari bahwa terselesaikannya skripsi ini tidak lepas dari bantuan,
bimbingan serta arahan yang sangat berharga dari berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan kali ini penulis ingin menyampaikan rasa terimakasih dan yangsebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Drs. H. Budi Arman, M.Kes., Apt. selaku Dekan FFS UHAMKA.2. Bapak Dr. Hadi Sunaryo, M.Si., Apt. selaku Wakil Dekan I FFS UHAMKA.3. Ibu Dra. Sri Nevi Gantini, M.Si., M.Farm., selaku Wakil Dekan II FFS
UHAMKA4. Ibu Ari Widayanti, S.Si., Apt., M.Farm., selaku Wakil Dekan III FFS UHAMKA5. Ibu Kori Yati, M. Farm., Apt. selaku Ketua Jurusan FFS UHAMKA yang telah
memberikan kemudahan dalam proses penyelesaian skripsi ini.6. Bapak Dr. H. Priyo Wahyudi, M.Si., selaku Pembimbing I yang senantiasa
membantu dalam memberikan bimbingan, waktu, arahan serta berbagaidukungan yang sangat berarti selama pengerjaan penelitian dan penyusunanskripsi ini. Terimakasih atas kesabarannya dalam membantu penulis selama ini
7. Ibu Siska, M.Farm., Apt. selaku Pembimbing II yang telah membantu dalammemberikan bimbingan dan arahan dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini.
8. Bapak Dr. H. Priyanto, M.Biomed., Apt., selaku Penguji I serta dosenPembimbing Akademik.
9. Bapak Kriyana Efendi, M. Farm., Apt., selaku Penguji II.10. Bapak dan Ibu dosen Farmasi UHAMKA yang tidak bisa disebutkan satu persatu
yang telah memberikan berbagai ilmu yang bermanfaat sehingga mendukungterselesaikannya skripsi ini.
11. Ayahanda Adi Buana dan Ibunda Atikah tercinta, kakak-adik tersayang RindyAntika, Heri Supangat, Innaka Salwa dan keponakan Fathan Rizki Hertama sertaseluruh keluarga besar penulis, terimakasih untuk semangat, do’a dan cinta yangtak pernah putus.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
4/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
5/76
vi
DAFTAR ISI
HalamanHALAMAN JUDUL ...................................................................................... I
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... IiABSTRAK ...................................................................................................... IiiKATA PENGANTAR ................................................................................... IvDAFTAR ISI .................................................................................................. ViDAFTAR TABEL .......................................................................................... viiiDAFTAR GAMBAR ..................................................................................... ixDAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xBAB I PENDAHULUAN .............................................................................. 1
A. Latar Belakang................................................................................ 1B. Permasalahan Penelitian................................................................. 3C. Tujuan Penelitian............................................................................ 3D. Manfaat Penelitian.......................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 4A. Landasan Teori............................................................................... 4
1. Deskripsi Jamur Tiram Putih.................................................. 42. Aktivitas β-Glukan.................................................................. 53. Ekstraksi β-Glukan.................................................................. 64. Kolesterol................................................................................ 65. Lipoprotein.............................................................................. 76. Diabetes Melitus...................................................................... 97. Fruktosa................................................................................... 108. Kolestiramin............................................................................ 109. Hamster................................................................................... 1110. Prinsip Pengukuran Kadar Kolesterol dan LDL..................... 12
B. Hipotesis......................................................................................... 12BAB III METODOLOGI PENELITIAN ................................................... 13
A. Tempat dan Waktu Penelitian......................................................... 131. Tempat Penelitian.................................................................... 132. Waktu Penelitian..................................................................... 13
B. Alat dan Bahan Penelitian.............................................................. 131. Alat yang digunakan............................................................... 132. Bahan Penelitian...................................................................... 13
C. Prosedur Penelitian......................................................................... 141. Determinasi Simplisia Jamur.................................................. 142. Penyiapan dan Pengumpulan Simplisia Jamur........................ 143. Ekstraksi β-glukan Larut Air Jamur Tiram Putih.................... 144. Pemeriksaan Mutu Ekstrak...................................................... 145. Uji Kualitatif β -Glukan........................................................... 156. Rancangan Penelitian.............................................................. 167. Persiapan Hewan Uji............................................................... 17
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
6/76
vii
8. Perhitungan Dosis................................................................... 179. Pembuatan Larutan Sediaan Uji............................................. 1910. Pembuatan Sediaan Suspensi Na-CMC.................................. 2011. Perlakuan Hewan Uji.............................................................. 20
12. Prosedur Pengambilan Serum Darah ..................................... 2113. Pengukuran Kadar Kolesterol Total danLDL......................../
22
D. Analisis Data.................................................................................. 22BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 23
A. Hasil Determinasi Simplisia Jamur................................................ 23B. Hasil Ekstraksi................................................................................ 23C. Hasil Pemeriksaan Mutu Ekstrak β -Glukan Larut Air Jamur
Tiram Putih .................................................................................... 23D. Hasil Uji Kualitatif β-Glukan......................................................... 24E. Penyiapan Hewan Uji .................................................................... 25F. Hasil Uji Aktivitas Ekstrak β -Glukan Larut Air Jamur Tiram
Putih ( Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm) TerhadapPenurunan Kadar Kolesterol Total Hamster Hiperkolesterolemiadan Hiperglikemia.......................................................................... 26
G. Hasil Uji Aktivitas Ekstrak β -Glukan Larut Air Jamur TiramPutih ( Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm) TerhadapPenurunan Kadar LDL Hamster Hiperkolesterolemia danHiperglikemia................................................................................. 29
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 35A. Simpulan ........................................................................................ 35B. Saran .............................................................................................. 35
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 36LAMPIRAN ............................................. ..................................................... 40
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
7/76
viii
DAFTAR TABEL
HalamanTabel 1. Parameter Biologi Dasar Hamster ................................................. 11
Tabel 2. Hasil Ekstraksi β -Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih ............... 23
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
8/76
ix
DAFTAR GAMBAR
HalamanGambar 1.
Gambar 2.
Struktur β-glukan pada Dinding Sel Jamur ....................................
Rumus Bangun Fruktosa.................................................................
5
10Gambar 3. Rerata Kadar Kolesterol Total Awal dan Akhir HamsterHiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang Diberi BahanUji................................................................................................... 27
Gambar 4. Persentase Penurunan Kadar Kolesterol HamsterHiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang Diberi BahanUji................................................................................................... 28
Gambar 5. Rerata Kadar LDL Awal dan Akhir Hamster Hiperkolesterolemiadan Hiperglikemia yang Diberi Bahan Uji..................................... 30
Gambar 6. Persentase Penurunan Kadar LDL Hamster Hiperkolesterolemiadan Hiperglikemia yang Diberi Bahan Uji..................................... 31
Gambar 7. Mekanisme Kolestiramin Dalam Menurunkan Kolesterol Totaldan LDL......................................................................................... 32
Gambar 8. Mekanisme β-Glukan Dalam Menurunkan Kolesterol Total danLDL................................................................................................ 33
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
9/76
x
DAFTAR LAMPIRAN
HalamanLampiran 1. Skema Prosedur Penelitian...................................................... 40
Lampiran 2. Skema Ekstraksi β-Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih....... 41Lampiran 3. Skema Pembagian Kelompok Hewan Uji Hamster Syrian...... 42Lampiran 4. Pembuatan Larutan Uji............................................................ 43Lampiran 5. Skema Pengambilan Serum Darah Hamster............................ 45Lampiran 6. Prosedur Pengukuran Kadar Kolesterol Total......................... 46Lampiran 7. Prosedur Pengukuran Kadar LDL........................................... 47Lampiran 8.Lampiran 9.
Surat Determinasi Jamur Tiram Putih.....................................Surat Keterangan Hamster Syrian...........................................
4849
Lampiran 10. Perhitungan Susut Pengeringan, Kadar Air, Kadar Abu, danRendemen Ekstrak β-Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih.... 50
Lampiran 11. Spektrum β -Glukan dengan Metode KCKT............................ 52
Lampiran 12. Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total dan LDLAwal dan Akhir yang Diberi Bahan Uji.................................. 54
Lampiran 13. Uji Statistik Data Penurunan Kadar Kolesterol Total danLDL.......................................................................................... 55
Lampiran 14. Data Persentase Penurunan Kadar Kolesterol Total dan LDLHamster Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yangDiberi Bahan Uji...................................................................... 58
Lampiran 15. Konversi Dosis Manusia untuk Dosis Hewan BerdasarkanLuas Permukaan Tubuh........................................................... 59
Lampiran 16. Perlakuan Hewan Uji Hamster Syrian..................................... 60Lampiran 17. Ekstraksi β-Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih................... 61
Lampiran 18. Pemberian Induksi Fruktosa Cair dan PakanHiperkolesterol........................................................................ 62Lampiran 19.Lampiran 20.
Pengambilan Darah Hamster Melalui Sinus Orbitalis.............Pemberian Ekstrak Uji pada Hamster......................................
6364
Lampiran 21. Pemisahan Serum Darah.......................................................... 65Lampiran 22. Pengukuran Kadar Kolesterol Total dan LDL........................ 66Lampiran 23. Pemeriksaan Mutu Ekstrak...................................................... 67
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
10/76
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Kolesterol adalah salah satu jenis sterol yang paling dikenal oleh
masyarakat. Kolesterol merupakan komponen esensial membran struktural semua
sel dan merupakan komponen utama sel otak dan saraf. Kolesterol merupakan
bahan antara pembentukan sejumlah steroid penting seperti asam empedu, asam
folat, hormon-hormon adrenal korteks, esterogen, androgen, dan progesteron.
Kadar kolesterol normal adalah kurang dari 200 mg/dl, sedangkan keadaandengan kadar kolesterol lebih dari normal di dalam darah dikatakan sebagai
hiperkolesterolemia. Kadar kolesterol yang meningkat berpengaruh buruk
terhadap jantung dan pembuluh darah (Almatsier 2003). Hiperkolesterolemia
merupakan faktor resiko utama terjadinya penyakit jantung koroner (PJK) dan
stroke (Hartono 2006).
Berdasarkan data organisasi kesehatan dunia WHO, penyakit PJK
merupakan penyebab kematian nomor satu di dunia. Diperkirakan sedikitnya 17,5
juta atau setara dengan 30% kematian di seluruh dunia disebabkan oleh penyakit
ini (WHO 2012). Faktor risiko yang merupakan predisposisi untuk timbulnya PJK
adalah hiperkolesterolemia, atherosklerosis, hipertensi, diabetes melitus, dan
stress (Suyatna 2007). Tingginya kadar kolesterol darah, penyakit diabetes
melitus, obesitas, dan hipertensi dapat saja terjadi secara bersamaan pada
seseorang (Giri 2008). Pada penderita diabetes, sel-sel lemak mengalami resisten
insulin, sehingga uptake asam lemak bebas yang dimediasi oleh insulin pada sel-
sel otot menjadi tidak seimbang. Kondisi tersebut dapat menginduksi
hiperkolesterolemia (Chen dan Raymond 2008).
Kondisi resistensi insulin pada penderita diabetes melitus mengakibatkan
kelebihan kadar glukosa dalam darah. Hal tersebut juga memengaruhi
metabolisme lemak di dalam tubuh. Akibat berkurangnya hormon insulin maka
akan terjadi peningkatan mobilisasi lemak dari daerah penyimpanan lemak. Hal
tersebut menyebabkan terjadinya peningkatan katabolisme lemak yang disertai
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
11/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
12/76
3
yang dilakukan Huang et al . (2014) pemberian polisakarida ekstraselular
Pleurotus tuber-regium mampu menjaga komposisi asam lemak agar tetap stabil
serta menurunkan kadar glukosa darah pada tikus dengan komplikasi diabetes-
obesitas (Huang et al . 2014).
Berdasarkan penelitian sebelumnya, maka dilakukan penelitian aktivitas
antihiperkoleste rol ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih ( Pleurotus
ostreatus (Jacq.) P.Kumm) terhadap hamster hiperkolesterolemia dan
hiperglikemia yang diinduksi pakan hiperkolesterol dan fruktosa. Pengujian
dilakukan terhadap aktivitas penurunan kolesterol total dan kolesterol LDL.
B. Permasalahan Penelitian
Berdasarkan uraian di atas, dapat dirumuskan masalah apakah pemberian
ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih ( Pleurotus ostreatus (Jacq.) P.Kumm)
dapat menurunkan kadar kolesterol total dan LDL darah hamster
hiperkolesterolemia dan hiperglikemia?
C. Tujuan Penelitian
Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak β -glukan larut air jamur tiram
putih ( Pleurotus ostreatus (Jacq.) P.Kumm) dalam menurunkan kadar kolesterol
total dan LDL darah hamster hiperkolesterolemia dan hiperglikemia.D. Manfaat Penelitian
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan pengetahuan
kepada masyarakat mengenai manfaat ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih
( Pleurotus ostreatus (Jacq.) P.Kumm) yang dapat menurunkan kadar LDL dan
kolesterol total, serta diharapkan dapat dijadikan landasan pengetahuan untuk
penelitian lebih lanjut.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
13/76
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Landasan Teori
1. Deskripsi Jamur Tiram Putih ( Pleur otus ostr eatus (Jacq.) P.Kumm)
a. Taksonomi
Kingdom : Myceteae (fungi)
Divisio : Amastigomycota
Sub Divisio : Basidiomycotae
Kelas : Bisidiomycetes
Ordo : Agaricales
Familia : Pleurotaceae
Genus : Pleurotus
Spesies : Pleurotus ostreatus (Wiardani 2010).
b. Morfologi
Jamur tiram adalah jamur dengan tudung mirip cangkang tiram dengan
bagian tengah agak cekung dan berwarna putih hingga krem. Permukaan tudung
licin, berminyak saat lembap, dan tepiannya bergelombang. Memiliki diameter 3-20 cm (Wiardani 2010).
c. Lingkungan Tumbuh
Jamur tiram dapat tumbuh di sebagian besar wilayah Indonesia pada
ketinggian antara 550-800 meter di atas permukaan laut dengan kadar air sekitar
60% dan pH 6-7. Jika kadar air di lokasi terlalu tinggi maka jamur akan terserang
penyakit (Wiardani 2010).
d. Kandungan Kimia dan KhasiatJamur tiram putih mengandung protein sebanyak 19-35% dari berat kering
jamur, karbohidrat sebanyak 50-60%, serat 1,56%, lemak 0,17%, Selain itu jamur
tiram mengandung vitamin B1, vitamin B2, niasin, biotin serta beberapa garam
mineral dari unsur-unsur Ca, P, Fe, Na, dan Zn dalam komposisi yang seimbang.
Macam asam amino yang terkandung dalam jamur tiram adalah sistein, metionin,
isoleusin, leusin, lisin, fenilalanin, treonin, tirosin, dan valin. Khasiat jamur tiram
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
14/76
5
untuk kesehatan antara lain berpotensi sebagai agen pencegah dan penyembuhan
penyakit kardiovaskuler terutama kolesterol dan juga dalam aspek kesehatan lain
yakni kanker, infeksi, bakteri dan virus (Winarti 2010). Jamur tiram mengandung
senyawa penting yang disebut pleuran yaitu polisakarida yang tersusun dalam
bentuk β-1,3 glukan dengan cabang β-1,3 glukopyranosida (Widyastuti dan
Koesnandar 2008).
2. Aktivitas β-Glukan
Senyawa β-glukan merupakan polisakarida yang terdapat dalam sumber
makanan seperti gandum, jamur, dan ragi. Semua β-glukan adalah polimer
glukosa yang bergabung melalui ikatan rantai β-1,3-glikosidik dan masing-masing
dibedakan dari cabang serta panjangnya struktur, bentuk cabang β-glukan pada
fungi yaitu β-1,6-glikosidik (Chan et al. 2009). Istilah glukan menunjukan suatu
polisakarida yang tersusun atas unit-unit molekul glukosa, sedangkan istilah beta
(β) adalah sebutan untuk posisi sterik dari gugus hidroksi glukosa yang tersusun
dalam formasi rantai tersebut (Rop et al. 2009).
Gambar 1. Struktur β -glukan pada Dinding Sel Jamur (Chan et.al. 2009)
Senyawa β -glukan dari jamur tiram terdiri atas: β -glukan larut air dan β -
glukan larut alkali. Senyawa β-glukan mempunyai aktivitas sebagai
antihiperkolesterol dengan mekanisme kerjanya mengikat asam empedu dan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
15/76
6
menghambat sirkulasi enterohepatik, sehingga menyebabkan peningkatan
produksi asam empedu yang berasal dari kolesterol (Mursito et al 2011).
3. Ekstraksi β-Glukan
Senyawa β-glukan dapat diperoleh dari proses ekstraksi tubuh buah,
miselium atau dari medium cair dalam proses fermentasi bawah permukaan.
Metabolit primer seperti β-glukan, dapat diperoleh dari ekstraksi biomassa,
terutama tubuh buah dengan menggunakan pelarut etanol atau air yang
selanjutnya dimurnikan untuk mendapatkan ekstrak yang relatif murni sebagai
bahan neutraceutical (Widyastuti 2011). Salah satu metode untuk memproduksi
senyawa aktif β-glukan dari jamur adalah dengan cara ekstraksi dilanjutkan
dengan pemurnian β-glukan (Aryantha 2005). Terdapat prosedur yang lebih
efisien untuk mengekstraksi β-glukan, yakni β-glukan diisolasi melalui presipitasi
etanol dan freeze drying dalam nitrogen cair. Uji kemurnian menggunakan kolom
analisis karbohidrat dengan hasil 87,5% (Ng & Yap 2002).
Dalam me modifikasi desain produksi β -glukan dari jamur tiram harus
memerhatikan sifat kelarutan senyawa aktif dalam solven pengekstrak. Ekstrak
senyawa aktif polisakarida β-glukan memiliki sifat larut dalam air dan alkali
Modifikasi yang dilakukan adalah dengan memecah proses ekstraksi menjadi duatahap, yakni ekstraksi dengan solven air dilanjutkan alkali. Pada metode
sebelumnya hanya satu kali tahap ekstraksi, yaitu air saja atau alkali saja secara
terpisah. Variabel-variabel yang berpengaruh terhadap proses ekstraksi
berlandaskan hasil optimasi dengan menggunakan metode penelitian sebelumnya
(Widyastuti 2011).
4. Kolesterol
Kolesterol merupakan sterol utama dalam tubuh manusia dan komponenstruktural membran sel dan lipoprotein plasma. Kolesterol juga merupakan
prekursor hormon steroid dan asam empedu (Botham dan Mayes 2009).
Kolesterol dalam diet kebanyakan terkandung dalam kuning telur dan lemak
hewani dan sebagian lagi disintesis di dalam tubuh terutama di hati. Kolesterol
juga dapat membahayakan tubuh apabila terdapat dalam jumlah terlalu banyak di
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
16/76
7
dalam darah dapat membentuk endapan pada dinding pembuluh darah, sehingga
menyebabkan penyempitan yang dinamakan arterosklerosis (Almatsier 2003).
Kolesterol sangat larut dalam lemak tetapi hanya sedikit larut dalam air, dan
mampu membentuk ester dengan asam lemak (ester kolesterol). Kolesterol yang
diabsorbsi dari usus disebut sebagai kolesterol eksogen, sedangkan sejumlah besar
yang dibentuk di hepatosit dan enterosit disebut kolesterol endogen. Kolesterol
yang diabsorbsi usus kemudian dimasukkan ke dalam kilomikron yang dibentuk
di dalam mukosa usus (Ganong 2008). Kolesterol endogen disintesis dari asetil-
KoA, sedangkan kolesterol eksogen berasal dari makanan. Secara garis besar
biosintesis kolesterol dibagi menjadi tiga tahap: (1) pembentukan HMG-KoA dari
kondensasi molekul asetil KoA, (2) perubahan HMG-KoA menjadi skualen,
melalui reduksi menjadi asam mevalonat oleh enzim HMG-KoA reduktase, (3)
pembentukan kolesterol dari skualen (Muchtadi dkk. 1993).
5. Lipoprotein
Lipoprotein merupakan gabungan molekul lipid dan protein yang disintesis
di dalam hati. Seperempat sampai sepertiga bagian dari lipoprotein adalah protein
dan selebihnya lipid. Lipoprotein memiliki fungsi mengangkut lipid di dalam
plasma ke jaringan-jaringan yang membutuhkannya sebagai sumber energi,sebagai komponen membran sel atau sebagai prekursor metabolit aktif (Almatsier
2003). Lipoprotein mengangkut lipid dari usus sebagai kilomikron dan dari hati
sebagai lipoprotein berdensitas sangat rendah ( very low density lipoprotein,
VLDL ) (Botham dan Mayes 2009). Partikel lipoprotein terdiri dari bagian inti
yang mengandung trigliserida dan ester kolesterol serta dikelilingi oleh fosfolipid,
kolesterol bebas, dan apolipoprotein (Suyatna 2007).
Lipoprotein dibedakan menjadi 5 golongan besar, yaitu:a. Kilomikron
Kilomikron merupakan lipoprotein dengan berat molekul terbesar, dibentuk
di dalam usus halus, mengandung lebih dari 80% trigliserida dan kurang dari 5%
kolesterol ester. Kilomikron membawa trigliserida dari makanan ke jaringan
lemak dan otot rangka, juga membawa kolesterol dari makanan ke hati.
Trigliserida dari kilomikron akan mengalami hidrolisis oleh lipoprotein lipase
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
17/76
8
(LPL) membentuk asam lemak bebas, yang akan digunakan oleh jaringan. Hasil
hidrolisis tersebut adalah kilomikron remnan. Kilomikron remnan adalah
kilomikron yang telah dihilangkan sebagian besar trigliseridanya (Suyatna 2007).
b. Lipoprotein Densitas Sangat Rendah ( Very Low Density Lipoprotein, VLDL)
VLDL merupakan lipoprotein yang terdiri dari 60% trigliserida dan 10-15%
kolesterol. VLDL disekresi oleh hati untuk mengangkut trigliserida yang
disintesis oleh hati ke jaringan perifer. Setelah meninggalkan hati, trigliserida
yang terdapat dalam VLDL dihidrolisis oleh lipoprotein lipase sehingga
membentuk asam lemak bebas dan VLDL remnan. Asam lemak bebas disimpan
dalam jaringan lemak dan digunakan oleh jaringan seperti jantung dan ototrangka, sedangkan VLDL remnan akan diubah menjadi LDL. Karena asam lemak
bebas dan gliserol dapat disintesis dari karbohidrat maka makanan tinggi
karbohidrat dapat meningkatkan kadar VLDL (Suyatna 2007).
c. Lipoprotein Densitas Sedang ( I ntermediate Densi ty Li poprotein, IDL)
IDL merupakan zat perantara yang terjadi sewaktu VLDL dikatabolisme
menjadi LDL. IDL mengandung trigliserida (30%), serta mengandung kolesterol
(20%) dan relatif lebih banyak mengandung apoprotein B dan E. IDL jumlahnya
sedikit di dalam plasma, akan terjadi peningkatan ketika terjadi proses
penghambatan VLDL menjadi IDL (Suyatna 2007).
d. Lipoprotein Densitas Rendah ( L ow Density L ipoprotein , LDL)
LDL merupakan lipoprotein pengangkut kolesterol terbesar pada manusia,
sebesar 70% (Suyatna 2007). Sisa VLDL atau IDL akan membentuk LDL dan
satu partikel LDL berasal dari satu partikel VLDL. Sebagian dari kolesterol di
IDL akan dibawa ke hati dan beberapa jaringan yang mempunyai reseptor LDL
yaitu Apo B-100 E. Sebagian lagi dari kolesterol LDL akan mengalami oksidasi
dan ditangkap oleh reseptor scavenger-A (SR-A) di makrofag dan akan menjadi
sel busa (Botham dan Mayes 2011).
e. Lipoprotein Densitas Tinggi ( H igh D ensity L ipoprotein, HDL)
HDL disintesis di hati dan disekresikan ke dalam usus (Murray et al. 2006).
HDL yang dilepaskan sebagai partikel kecil yang miskin akan kolesterol dan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
18/76
9
mengandung Apo A, C, dan E, disebut dengan HDL nascent yang menerima
kolesterol bebas, HDL nascent berubah menjadi HDL yang berbentuk bulat.
Kolesterol bebas akan terakumulasi pada HDL tersebut dan mengalami
esterifikasi oleh enzim lecithin cholesterol acyltransferase (LCAT) menjadi
kolesterol ester. HDL akan membawa sebagian kolesterol ester ke hati dan
ditangkap oleh scavenger receptor kelas B tipe 1 (SR-B1). Sebagian lagi akan
dipertukarkan dengan trigliserida dari VLDL dan IDL dengan bantuan cholesteryl
ester tranfer protein (CETP) (Adam 2006).
6. Diabetes Melitus
Diabetes melitus adalah sekumpulan dari gangguan metabolik yang ditandai
oleh hiperglikemia dan abnormalitas metabolisme dari karbohidrat, lemak, dan
protein yang merupakan hasil dari defect sekresi insulin baik mutlak atau relatif,
dan berkurangnya sensitivitas jaringan terhadap insulin atau keduanya (Priyanto
2008). Simptom yang menyertai DM adalah poliuria, polidipsi, penurunan berat
badan walaupun ada polifagia (peningkatan nafsu makan), hiperglikemia, ketosis,
asidosis (Ganong 2008). Dalam mendiagnosis DM harus didasarkan pada
pemeriksaan kadar glukosa darah, memperhatikan asal bahan darah yang diambil
dan cara pemeriksaan yang digunakan. Kadar glukosa darah yang dijadikan patokan sebagai diagnosis DM yaitu, kadar glukosa darah sewaktu yang dikatakan
DM adalah ≥ 200 mg/dl, kadar glukosa darah puasa yang dikatakan DM adalah ≥
126 mg/dl (Gustaviani 2006).
Diabetes melitus (DM) dapat dibedakan menjadi DM tipe I dan DM tipe II.
Diabetes Melitus tipe I merupakan gangguan produksi insulin akibat penyakit
autoimun atau idiopatik, tipe ini sering disebut insulin dependent diabetes mellitus
atau IDDM karena pasien mutlak membutuhkan insulin. Diabetes melitus tipe IImerupakan akibat resistensi insulin atau gangguan sekresi insulin. Pada DM tipe
II ini tidak selalu dibutuhkan insulin, terkadang cukup dengan diet dan
antidiabetik oral. Tipe ini sering disebut noninsulin dependent diabetes mellitus
atau NIDDM. Hiperglikemia timbul akibat berkurangnya insulin sehingga glukosa
darah tidak dapat masuk ke sel-sel otot, jaringan adiposa, dan metabolisme akan
terganggu (Suherman 2007).
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
19/76
10
7. Fruktosa
Fruktosa adalah gula sederhana yang memberikan rasa manis. Terdapat
pada makanan alami seperti buah-buahan, madu, sayuran, dan biji-bijian. Sumber
utama fruktosa adalah sukrosa, yang merupakan derivat gula tebu dan gula bit.
Fruktosa merupakan suatu monosakarida yang dapat menyebabkan gangguan
metabolisme. Berbagai penelitian menunjukkan bahwa seiring dengan
peningkatan konsumsi makanan ataupun minuman yang mengandung fruktosa,
terjadi peningkatan prevalensi berbagai gejala sindrom metabolik. Obesitas,
dislipidemia, hipertensi, diabetes melitus merupakan sindrom metabolik yang
sering terjadi (Prahastuti 2011).
Gambar 2. Rumus Bangun Fruktosa
Fruktosa terdiri atas 6 atom karbon (heksosa) yang merupakan isomer
glukosa (C 6H12O6) dan mengandung gugus karbonil sebagai keton. Fruktosa
dikonsumsi dalam bentuk sukrosa dan jarang dalam bentuk bebas. Dalam usus,
sukrosa dihidrolisis oleh enzim sukrase menjadi fruktosa dan glukosa. Setelah
diabsorpsi oleh usus, fruktosa diangkut melalui vena porta menuju hati untuk
dimetabolisme menjadi lipid. Nama lain dari fruktosa yaitu D-Fructose,
Fructosum, Fruit Sugar, Fruktoosi, Fruktos, Fruktoz, Fruktoza, Fruktoze,
Laevulose, Laevusolum, dan Levulose. Fruktosa sangat efisien menginduksi de
novo lipogenesis (DNL) dengan menyediakan atom karbon untuk membentuk
trigliserida dan VLDL serta meningkatkan penimbunan lemak dalam hepar yang
menyebabkan resistensi insulin (Prahastuti 2011).
8. Kolestiramin
Kolestiramin merupakan obat hipolipidemik golongan resin penukar ion.
Derivat resin merupakan obat yang relatif aman bila digunakan oleh anak-anak.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
20/76
11
Kolestiramin adalah garam klorida dari basic anion exchange resin yang bersifat
hidrofilik. Kolestiramin adalah obat yang memiliki mekanisme aksi serupa dengan
β-glukan dalam menurunkan kadar kolesterol. Bekerja dengan cara mengikat
asam empedu di usus halus dan mengeluarkannya melalui feses (Suyatna 2007).
Penurunan kadar asam empedu ini oleh pemberian kolestiramin akan
menyebabkan meningkatnya produksi asam empedu yang disintesis dari
kolesterol. Karena sirkulasi enterohepatik dihambat oleh kolestiramin maka
kolesterol yang diabsorpsi lewat saluran cerna akan terhambat dan keluar bersama
feses (Suyatna 2007). Dosis kolestiramin awal ialah 4 g satu kali sehari, dapat
ditingkatkan 12-16 g perhari terbagi 2-4 bagian. Pada keadaan
hiperkilomikronemia kolestiramin kurang efektif, sedangkan pada keadaan
hiperlipoproteinemia kolestiramin perlu di kombinasi dengan asam nikotinat atau
ezetimibe untuk mendapatkan efek yang maksimal. Penggunaan kolestiramin
jangka panjang telah terbukti dapat menurunkan hiperkolesterol dan persentase
serangan jantung fatal sekitar 20% (Marks et al. 2000).
9. Hamster
Hamster syrian ( Mesocricetus auratus ) termasuk famili Cricetidae dan
tergolong kelompok hewan pengerat (rodentia), seperti tikus dan kelinci (Sadgara2010). Hamster merupakan hewan yang aktif dimalam hari. Hamster memiliki
perilaku yang tidak terlalu agresif, tetapi jika mereka terkejut atau tiba-tiba
terbangun mereka akan menjadi sangat agresif. Hamster merupakan hewan yang
banyak digunakan untuk mempelajari efek obat dan diet pada metabolisme
lipoprotein dan aterosklerosis. Hal ini dikarenakan hamster memiliki metabolisme
lipoprotein yang hampir mirip dengan manusia (Dillard et al 2010).
Tabel 1. Parameter Biologi Dasar HamsterParameter Hamster
Rentang hidup (tahun) 1-3Berat lahir (g) 1-2
Berat badan dewasa (g) Jantan : 85-100 ; Betina : 95-150Asupan makanan (g/hari) 10-14
Asupan air (ml/hari) 7-10Volume urin (ml/hari) 6
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
21/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
22/76
13
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Tempat dan Waktu Penelitian
1. Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di laboratorium Agromikrobiologi BPPT PUSPITEK
Serpong, Laboratorium Afiliasi Kimia UI Depok, Laboratorium Kimia Terpadu,
Laboratorium Farmakologi, dan Laboratorium Patologi Klinik, Fakultas Farmasi
dan Sains, Universitas Muhammadiyah Prof. Dr. Hamka, Jakarta Timur.
2. Waktu penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan April - Juli 2015.
B. Alat dan Bahan Penelitian
1. Alat penelitian
Peralatan yang dibutuhkan antara lain adalah spuit, kandang hewan coba
yang dilengkapi tempat pakan dan minum, timbangan hewan, neraca analitik,
microcentrifuge (Eppendrof MiniSpin ®), centrifuge , peralatan gelas, oven, mikro
pipet, micro tube , vorteks, dan fotometer klinikal (VARTA 506).
2. Bahan penelitian Bahan penelitian yang digunakan meliputi:
a. Bahan Uji
Jamur tiram putih diperoleh dari PT. IP FARMS Lembang, Bandung.
b. Bahan Kimia
Bahan kimia yang diperlukan meliputi etanol 80%, isofluran yang diperoleh
dari PT. Dexa Medica, reagen kit kolesterol total, reagen LDL Presipitan (Heparin
dan natrium sitrat) merk Diasys dari PT. Centra Alkes, dan akuades.c. Bahan Pembanding
Obat pembanding yang digunakan adalah kolestiramin 4 g dari PT. Novell
Pharmaceutical.
d. Bahan Induksi Hiperkolesterol
Bahan penginduksi hiperkolesterol adalah campuran kuning telur puyuh
50% dan pakan standar sampai 100%.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
23/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
24/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
25/76
16
b. Pembuatan Standar Pembanding Curdlan (β -1,3;1,6-glukan)
Curdlan sebanyak 50 mg dilarutkan dengan sedikit NaOH 0,5 N, kemudian
ditambahkan aquabidest sampai 100 ml dalam labu ukur dan akan didapatkan
larutan standar 500 ppm. Larutan standar 500 ppm diencerkan dengan aquabidest
menjadi konsentrasi 300, 200, 100, dan 50 ppm. Sebanyak 20 µl larutan standar
dari masing-masing konsentrasi disuntikkan ke dalam kolom KCKT
menggunakan aquabidest sebagai fase gerak dan dialirkan dengan kecepatan 1
ml/menit pada suhu 80 C, setelah larutan standar sampai di detektor indeks bias,
larutan standar dibiaskan dan kromatogram ditampilkan di monitor komputer.
c. Pembuatan Larutan Sampel dari Ekstrak β -glukan Larut Air
Ekstrak β-glukan larut air ditimbang sebanyak 0,0103 gram dilarutkan
dengan sedikit NaOH 0,5N, kemudian ditambahkan aquabidest 2 ml, ditambahkan
resin penukar ion, kemudian dikocok sampai homogen. Sebanyak 20 µl
disuntikkan ke dalam kolom KCKT menggunakan aquabidest sebagai fase gerak
dan dialirkan dengan kecepatan 1 ml/menit pada suhu 80˚C, setelah sampel
sampai pada detektor indeks bias (RID), sampel dibiaskan dan kromatogram
ditampilkan di monitor komputer (Andayani 2009).
6. Rancangan PenelitianRancangan penelitian menggunakan rancangan acak lengkap dengan 6
kelompok perlakuan, sehingga penentuan jumlah hamster tiap kelompok (n=4)
dihitung berdasarkan rumus Federer (Hanafiah 1993).
(t-1) (n-1) ≥ 15
(6-1) (n-1) ≥ 15
(5n – 5) ≥ 15
5n ≥ 20n ≥ 4........................................................(5)
Keterangan:
t = jumlah kelompok perlakuan
n= jumlah ulangan tiap kelompok
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
26/76
17
7. Persiapan Hewan Uji
Hewan uji diaklimatisasi selama 2 minggu. Pada tahap ini hewan diberikan
minum dan pakan standar, lalu dikelompokkan sesuai dengan berat badannya,
agar mempermudah dalam pengelompokan perlakuan. Skema pembagian
kelompok dapat dilihat pada lampiran 3.
8. Perhitungan Dosis
a. Dosis Ekstrak Jamur Tiram Putih
Dosis penelitian sebelumnya terhadap aktivitas penurunan kadar kolesterol
pada hamster dari ekstrak jamur Pleurotus ostreatus menunjukkan hasil yang
kurang konsisten, sehingga dosis yang digunakan adalah dosis ekstrak jamur tiram
putih yang berefek sebagai antihiperglikemia pada tikus dalam penelitian Ghaly et
al. (2001), dengan perhitungan sebagai berikut:
Dosis = Dosis yang diketahui x ℎ
.............................................(6)
Dosis efektif untuk tikus 200 mg/kg BB = 200 mg/kg BB
Dosis untuk hamster menurut FDA = 200 mg/kg BB x6
5
= 240 mg/kg BB
Untuk mengetahui dosis ekstrak yang efektif dalam menurunkan kadar
kolesterol dan LDL darah hamster maka pada percobaan ini digunakan 3 variasi
dosis, yaitu :
Dosis I : ½ x 240 mg/kg BB = 120 mg/kg BB = 18 mg/ 150 g BB
Dosis II : 1 x 240 mg/kg BB = 240 mg/kg BB = 36 mg/ 150 g BB
Dosis III : 2 x 240 mg/kg BB = 480 mg/kg BB = 72 mg/ 150 g BB
b. Dosis Kolestiramin
Dosis kolestiramin untuk manusia (60 kg) adalah 4 g. Dosis dikonversi ke
hamster sehingga menjadi:
Dosis manusia (60 kg) = 4 g
= 4000 mg/ 60 kg BB
= 66,67 mg/ kg BB
Dosis = Dosis yang diketahui x ℎ
.....................................(7)
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
27/76
18
Dosis untuk hamster menurut FDA = 66,67 mg/kg BB x 375
= 493,33 mg/kg BB
= 74 mg/150 g BB
c. Dosis Fruktosa
Dosis pemberian fruktosa secara oral pada tikus yang biasanya digunakan
adalah 180 mg/100 g BB tikus selama 55 hari (Adriawan et al . 2014).
Dosis tikus (100 g) = 180 mg/100 g BB tikus
= 1.800 mg/kg BB
Dosis = Dosis yang diketahui x ℎ
........(8)
Dosis hamster = 1.800 mg/kg BB x6
5
= 2.160 mg/kg BB
Komposisi fruktosa = Fruktosa 55% volume 500 ml
Fruktosa dalam sediaan = 55100
x 500 ml = 275 g
Konsentrasi fruktosa 55% = 55 g dalam 100 ml
Fruktosa dalam 1 ml =55
100 x 1 ml = 0,55 g = 550 mg
Rata-rata BB hamster pada saat mulai induksi = 68,447 g ~ 68 g
Dosis fruktosa pada 68 g BB hamster = 2.160 mg x68
1000
= 146,88 mg
Bila 550 mg = 1 ml berdasar pada 1 ml kapasitas lambung hamster
Volume dosis 146,88 mg = 1 ml x146,88
550
= 0,267 ml
Untuk mempersingkat waktu induksi, dilakukan peningkatan 3 x volume
fruktosa yaitu 0,9 ml.
d. Dosis Pakan Hiperkolesterol
Pakan tinggi kolesterol dibuat dengan komposisi kuning telur puyuh 50%
dan pakan standar (pelet hamster) sampai 100% (Dewi dan Probosari 2012).
Untuk pembuatan pakan kolesterol, kuning telur mentah yang dicampur dengan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
28/76
19
pakan standar diaduk homogen hingga terbentuk adonan, lalu adonan dibentuk
menjadi pelet (Asmariani dan Probosari 2012).
Pakan tinggi kolesterol yaitu pakan yang terdiri dari pakan standar (pelet
hamster) ditambahkan kuning telur puyuh 50%. Kuning telur puyuh dipilih karena
mengandung kolesterol yang tinggi dibanding telur lain yaitu 2139,17 mg dalam
100 g (Dwiloka 2003).
Perhitungan 1 kg pakan kolesterol:
Kuning telur puyuh = 50% x 1000 g = 500 g
Pakan standar = 50% x 1000 g = 500 g
9. Pembuatan Larutan Sediaan Uji
a. Pembuatan Larutan Sediaan Ekstrak UjiEkstrak uji disiapkan dengan membuat larutan induk pada masing masing
dosis yang digunakan pada penelitian. Ekstrak uji dibuat setiap hari untuk
menjamin larutan ekstrak dalam keadaan baik. Pembuatan larutan ekstrak β -
glukan jamur tiram putih dapat dilihat pada lampiran 4.
1) Untuk membuat larutan induk dengan dosis terendah yaitu dosis 1 (120
mg/kgBB = 18 mg/150 g BB) ekstrak ditimbang 200 mg dan dilarutkan
dengan suspensi Na CMC hingga 10 ml, sehingga diperoleh konsentrasi 20mg/ml larutan. Banyaknya larutan ekstrak yang diberikan dari larutan
induk pada hamster per 150 g BB:
Volume (ml) = ℎ ( )
150 x
( ) …………..(9 )
2) Untuk membuat larutan induk dosis 2 (240 mg/kgBB = 36 mg/150 g BB)
ekstrak ditimbang 400 mg dan dilarutkan dengan suspensi Na CMC hingga
10 ml, sehingga diperoleh konsentrasi 40 mg/ml larutan. Banyaknya
larutan ekstrak yang diberikan dari larutan induk pada hamster per 150 g
BB:
Volume (ml) = ℎ ( )
150 x
( ) ………..(10 )
3) Untuk membuat larutan induk dosis tertinggi yaitu dosis 3 (480 mg/kgBB
= 72 mg/150 g BB) ekstrak ditimbang 800 mg dan dilarutkan dengan
suspensi Na CMC hingga 10 ml, sehingga diperoleh konsentrasi 80 mg/ml
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
29/76
20
larutan. Banyaknya larutan ekstrak yang diberikan dari larutan induk pada
hamster per 150 g BB:
Volume (ml) = ℎ ( )
150
x ( )
…………(11 )
b. Pembuatan Larutan Obat Pembanding
Dosis kolestiramin yang digunakan pada manusia (60 kg) adalah 4 g
(Sukandar dkk 2008). Dosis terlebih dahulu dikonversikan ke hamster, dari hasil
perhitungan didapat dosis kolestiramin 493,33 mg/kgBB atau 74 mg/150 g BB
hamster. Untuk membuat larutan induk dosis kolestiramin ditimbang sebanyak
1000 mg dan dilarutkan dengan suspensi Na CMC hingga 10 ml, sehingga
diperoleh konsentrasi 100 mg/ml. Pembuatan larutan obat pembanding dapatdilihat pada lampiran 4.
Volume (ml) = ℎ ( )
150 x
( ) ..……..…(12 )
10. Pembuatan Sediaan Suspensi Na-CMC
Pembuatan larutan Na-CMC 0,5% ditimbang 500 mg kemudian ditaburkan
di atas air panas 100 ml, setelah 15 menit diaduk kuat-kuat dalam lumpang sampai
terbentuk massa suspensi yang homogen, hingga didapatkan konsentrasi suspensi
Na CMC 0,5%.
11. Perlakuan Hewan Uji
Percobaan terdiri atas tahap adaptasi/aklimatisasi dan tahap perlakuan.
Adaptasi dilakukan selama 14 hari, hamster diberi makanan standar secukupnya
dan air minum ad libitum . Pakan standar diberikan secukupnya agar diketahui
konsumsi makanan harian sebagai acuan pemberian pakan pada masa perlakuan.
Penelitian dilakukan dalam beberapa tahap, yaitu :
a. Aklimatisasi hamster selama 14 hari, pengukuran kadar kolesterol total dan
LDL darah, sebelumnya hamster dipuasakan selama 12 jam. Pengambilan
darah dilakukan pada bagian mata.
b. Dilakukan orientasi pakan hiperkolesterol yaitu satu hamster diberi pakan
hiperkolesterol sebagai orientasi. Setelah itu pada hari ke-1 dihitung setelah
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
30/76
21
aklimatisasi semua hamster diberi pakan induksi hiperkolesterol dan
fruktosa, kecuali kelompok kontrol normal selama 28 hari.
c. Pada hari ke-29, dilakukan pengukuran kadar kolesterol total dan LDL.
d. Kemudian dilakukan pembagian kelompok hewan uji. Dibagi menjadi 6
kelompok dengan masing-masing kelompok terdiri dari 4 hewan uji.
Perlakuan dilakukan pada hari ke-29 selama 14 hari.
Kelompok I : Diberi pakan standar (kelompok kontrol normal).
Kelompok II : Diberi pakan hiperkolesterol, fruktosa dan
kolestiramin (kelompok kontrol positif).
Kelompok III : Diberi pakan hiperkolesterol dan fruktosa (kelompok
kontrol negatif).
Kelompok IV : Diberi pakan hiperkolesterol, fruktosa dan ekstrak β -
glukan larut air jamur tiram putih dosis I (120 mg/ kg
BB hamster).
Kelompok V : Diberi pakan hiperkolesterol, fruktosa dan ekstrak β -
glukan larut air jamur tiram putih dosis II (240 mg/kg
BB hamster).
Kelompok VI : Diberi pakan hiperkolesterol, fruktosa dan ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih dosis III
(480 mg/kg BB hamster).
e. Pada hari ke-44 dilakukan pengukuran kadar kolesterol total dan LDL.
f. Selesai perlakuan, semua hamster diistirahatkan ke dalam kandangnya
masing-masing dan diberi makan dan minuman ad libitum .
g. Semua data kadar kolesterol total dan LDL sebelum dan sesudah perlakuan
yang diperoleh, ditabulasi, dibuat rata-rata, dan dianalisis.12. Prosedur Pengambilan Serum Darah
Pengambilan darah diambil sebanyak 3 kali yaitu pada hari ke-0 setelah
aklimatisasi, ke-29 dan ke-44. Darah hamster diambil melalui sinus orbitalis
dengan cara sebagai berikut: hamster dibius dengan isofluran hingga tidak
sadarkan diri, pada bagian sudut mata hamster ditusuk dengan pipa kapiler,
kemudian pipa kapiler diputar hingga darah mengalir melalui pipa kapiler
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
31/76
22
tersebut. Darah ditampung pada mikrotube. Darah diambil kira-kira 1,0 ml
kemudian disentrifugasi pada kecepatan 4000 rpm selama 15 menit agar diperoleh
serum. Skema pengambilan serum darah terdapat pada lampiran 5.
13. Cara Pengukuran Kadar Kolesterol Total dan LDL
a. Kolesterol total
Serum darah sebanyak 10 µl, lalu dicampur reagen enzim (kit) sebanyak
1000 µl, kemudian dihomogenkan dan diinkubasi selama 10 menit pada suhu
37 C atau 20 menit pada suhu 20-25 C. Kemudian kadar dibaca dengan fotometer
klinikal (VARTA 506). Skema prosedur pengukuran kadar kolesterol total dapat
dilihat pada lampiran 6.
b. LDL
Serum diambil 100 µl kemudian dicampur dengan 1000 µl pereaksi
pengendap yang terdiri dari campuran larutan heparin dan natrium sitrat.
Campuran divorteks kemudian disentrifugasi pada kecepatan 4000 rpm selama 15
menit. Setelah itu didiamkan selama 1 jam supaya LDL mengendap, kemudian
supernatan diambil sebanyak 100 µl dimasukkan ke dalam tabung kemudian
dicampur dengan 1000 µl reagen enzim kit. Kemudian dibaca dengan fotometer
klinikal (VARTA 506).Kadar LDL = kadar kolesterol total - kolesterol di dalam supernatan........(13)
Skema prosedur pengukuran kadar LDL dapat dilihat pada lampiran 7 (Rifai2000).
D. Analisis Data
Data kadar kolesterol total dan LDL awal dan akhir kemudian dihitung nilai
persentase penurunannya, dan dianalisis dengan menggunakan program pengolah
statistik. Pada analisis data ini dilakukan terlebih dahulu uji homogenitas dannormalitas. Uji homogenitas dilakukan untuk menguji apakah beberapa kelompok
memiliki variansi yang sama. Sedangkan uji normalitas digunakan untuk
mengetahui apakah distribusi sebuah data mengikuti atau mendekati distribusi
normal (Santoso 2010). Selanjutnya dilakukan uji ANOVA satu arah dengan taraf
signifikansi 95%. Jika terdapat perbedaan yang bermakna maka dilanjutkan
dengan uji LSD (Pujiastuti dan Andayani 2001).
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
32/76
23
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Determinasi Simplisia Jamur
Hasil determinasi jamur dari Pusat Penelitian Biologi, LIPI Cibinong
menunjukkan bahwa simplisia tersebut adalah jamur tiram putih ( Pleurotus
ostreatus (Jacq.) P. Kumm), termasuk dalam suku Pleurotaceae . Hasil
determinasi dapat dilihat pada lampiran 8.
B. Hasil Ekstraksi
Simplisa kering jamur tiram putih ( Pleurotus ostreatus ) sebanyak 1,1 kg
dihaluskan menghasilkan 1 kg serbuk jamur tiram putih kering. Serbuk jamur
tiram putih kering diekstraksi dengan akuades sebanyak 3 kali volume serbuk
jamur (14,25 liter), yang dipanaskan pada 100 C selama 3 jam, kemudian
disaring. Sebanyak 7,5 liter filtrat yang diperoleh, dipresipitasi dengan etanol 80%
sebanyak 3 kali volume filtrat (22,5 liter) dan disimpan pada suhu 4 C selama 24
jam. Dilanjutkan sentrifugasi pada 4000 rpm selama 15 menit. Hasil ek straksi β -
glukan larut air serbuk jamur tiram putih diperoleh 298 g ekstrak basah, kemudian
dikeringkan dalam oven suhu 150 C selama 24 jam hingga diperoleh ekstrak
kering sebanyak 85,56 g (Tabel 2).
Tabel 2. Hasil Ekstraksi β-Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih
No Jenis Hasil1. Jamur tiram putih kering 1100 g2. Serbuk jamur tiram putih kering 1000 g3. Filtrat 7,5 L4. Ekstrak basah 298 g5. Ekstrak kering 85,56 g
C. Hasil Pemeriksaan Mutu Ekstrak β-Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih
1. Organoleptis
Ekstrak kering jamur tiram putih memiliki karakteristik bau khas, rasa agak
pahit, dan bentuk serbuk warna coklat.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
33/76
24
2. Kadar Air
Hasil pengujian kadar air ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih
dengan menggunakan moisture balance yaitu sebesar 5,053% (Lampiran 9). Nilai
tersebut menunjukkan persentase besarnya kandungan air yang masing
terkandung dalam ekstrak.
3. Kadar Abu
Hasil pengujian kadar abu ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih yaitu
sebesar 5,6733% (Lampiran 9). Nilai tersebut menunjukkan persentase besarnya
kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai
terbentuknya ekstrak. Mineral internal yang terkandung dalam jamur tiram putih
terdiri dari unsur Ca, P, Fe, Na, dan Zn (Winarti 2010). Mineral eksternal adalah
mineral dari luar jamur tiram putih yang diperoleh selama proses ekstraksi.
4. Susut Pengeringan
Hasil pengujian susut pengeringan ekstrak β -glukan larut air jamur tiram
putih yaitu sebesar 5,37% (Lampiran 9). Nilai tersebut menunjukkan persentase
besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan seperti senyawa-senyawa
yang menguap.
5. RendemenHasil rendemen ekstrak kering β -glukan larut air jamur tiram putih yaitu
sebesar 8,556% (Lampiran 9) . Nilai tersebut menunjukkan jumlah β -glukan yang
tersari dari simplisia.
D. Hasil Uji Kualitatif β -Glukan
Identifikasi β-glukan larut air pada ekstrak jamur tiram putih secara
kualitatif dilakukan dengan teknik Kromatografi Cair (KCKT). Hasil identifikasi
β-glukan standar curdlan menunjukkan bahwa β -glukan muncul pada waktu
retensi 3,504 menit dengan luas area 691646, sedangkan hasil uji kualitatif β -
glukan jamur tiram larut air muncul pada waktu retensi 3,612 menit dengan luas
area 197345. Identifikasi β-glukan dilakukan untuk memastikan bahwa ekstrak uji
adalah β-glukan dan siap diujikan ke hewan uji. Hasil uji kromatogram β -glukan
dapat dilihat pada lampiran 10.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
34/76
25
E. Penyiapan Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah hamster syrian jantan
Mesocricetus auratus usia 3 bulan dan bobot badan ±50 g. Hamster dipilih
sebagai hewan uji dengan beberapa pertimbangan, bahwa hamster merupakan
hewan mamalia dengan organ tubuh yang menyerupai manusia serta profil
lipoprotein hamster lebih menyerupai manusia dibandingkan tikus (Dilliard et al.
2010). Jenis kelamin hamster digunakan adalah jantan untuk menghindari
pengaruh hormonal yang biasa terjadi pada hamster betina yang dapat
memengaruhi hasil uji. Penelitian ini menggunakan 30 ekor hamster, terbagi
dalam 6 kelompok secara acak, sehingga penyebaran berat badannya merata untuk
setiap kelompok. Tiap kelompok terdiri dari 5 ekor berdasarkan rumus Federer (n
≥ 4), namun dilebihkan 1 ekor tiap kelompoknya, untuk mengantisipasi kematian
hewan uji selama perlakuan.
Penelitian menggunakan 3 kelompok kontrol yaitu kelompok kontrol
normal, kontrol positif, dan kontrol negatif. Kelompok normal berguna untuk
mengetahui kadar kolesterol total dan LDL hamster normal tanpa pemberian
pakan hiperkolesterol dan fruktosa selama penelitian. Kontrol negatif
dimaksudkan untuk mendapatkan gambaran kadar kolesterol total dan LDL hewanuji hiperkolesterolemia dan hiperglikemia yang tidak mendapatkan perlakuan
obat. Kontrol positif dimaksudkan untuk mengetahui kadar kolesterol total dan
LDL hewan uji hiperkolesterolemia dan hiperglikemia akibat pemberian
kolestiramin sebagai obat pembanding. Pemilihan kolestiramin sebagai obat
pembanding karena mempunyai keterkaitan dengan mekanisme kerja β-glukan
dalam menurunkan kadar kolesterol. Tiga kelompok dikategorikan sebagai
kelompok uji dengan diberikan ekstrak β -glukan larut air yang memiliki variasidosis yang berbeda yaitu dosis I 120 mg/kg BB, dosis II 240 mg/kg BB, dan dosis
III 480 mg/kg BB.
Sebelum menjalani tahap penelitian, hamster diaklimatisasikan selama 2
minggu agar mampu menyesuaikan keadaannya dari mulai lingkungan kandang,
makanan, dan minuman. Setelah tahap aklimatisasi, dilakukan pengukuran kadar
kolesterol total dan LDL sebagai kadar awal dihitung pada hari ke-0 .sebelum
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
35/76
26
tahap induksi. Sebelum memasuki tahap induksi, dilakukan orientasi pakan
hiperkolesterol pada seekor hamster, untuk mengetahui seberapa banyak pakan
hiperkolesterol yang akan diberikan pada hamster. Hasilnya hamster tersebut
menghabiskan 10 g pakan hiperkolesterol. Setiap 10 g pakan hiperkolesterol
mengandung kuning telur puyuh 50% dan pakan standar hingga 100% diberikan
sekali dalam sehari pada siang hari untuk menciptakan keadaaan
hiperkolesterolemik dan hiperglikemik pada hamster syrian jantan. Induksi pakan
hiperkolesterol dilakukan secara ad libitum sebanyak 10 g dan induksi fruktosa
cair sebanyak 0,9 ml secara per oral selama 28 hari untuk menciptakan hamster
hiperkolesterolemia dan hiperglikemia.
Pengambilan darah dilakukan melalui sinus orbital pada mata hamster.
Hamster dibius dengan isofluran hingga tidak sadarkan diri, kemudian bagian
sudut mata ditusuk dengan pipa kapiler sampai darah mengalir. Darah kemudian
ditampung dalam mikrotube ± 1 ml dan didiamkan selama 15 menit, selanjutnya
disentrifugasi dengan kecepatan 4000 rpm selama 15 menit, sehingga terjadi
pemisahan antara serum dengan sel darah. Serum yang diperoleh dipisahkan ke
dalam mikrotube kemudian ditambah dengan reagen dan dilihat kadar kolesterol
total dan LDL dengan menggunakan alat fotometer klinikal .
F. Hasil Uji Aktivitas Ekstrak β -Glukan Larut Air Jamur Tiram Putih(Pl eur otus ostr eatus (Jacq.) P. Kumm) Terhadap Penurunan KadarKolesterol Total Hamster Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia
Data yang diperoleh terdiri dari kadar kolesterol total awal dan akhir. Kadar
kolesterol total awal diukur sesaat setelah induksi pemberian pakan
hiperkolesterol dan fruktosa selama 28 hari. Rerata kadar kolesterol total awal
hewan uji hiperkolesterolemia dan hiperglikemia adalah 395,41±26,36 mg/dl.
Sedangkan rerata kadar glukosa darah awal hewan uji hiperkolesterolemia dan
hiperglikemia adalah 181,55±8,71 mg/dl. Kadar kolesterol total akhir diukur
setelah perlakuan atau pemberian bahan uji selama 14 hari. Pengukuran kadar
kolesterol total dilakukan menggunakan fotometer klinikal dengan metode
enzimatis. E ster kolesterol diuraikan oleh kolesterol esterase menjadi kolesterol dan
asam lemak, kemudian oleh kolesterol oksidase, kolesterol diubah menjadi 4-
kolestenona dan hidrogenperoksida, selanjutnya oleh peroksidase terbentuk
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
36/76
27
quinonimine . Intensitas warna quinonimine menggambarkan kadar kolesterol dalam
sampel (N.S. Bio-Tec 2011). Hasil pengukuran kadar kolesterol total dapat dilihat
pada lampiran 11.
Gambar 3. Rerata Kadar (mg/dl) Kolesterol Total Awal ( ) dan Akhir ( )Hamster Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang DiberiBahan Uji
Data rerata kadar kolesterol total hewan uji pada kelompok normal, positif,
negatif, dosis I, dosis II, dan dosis III ditampilkan pada Gambar 3. Terlihat bahwa
pemberian bahan uji dapat menurunkan kadar kolesterol total hamster
hiperkolesterolemia dan hiperglikemia. Hal ini dapat dibuktikan pada dosis I dapat
menurunkan kadar kolesterol total dari 318,53 mg/dl menjadi 199,44 mg/dl. Dosis
II menurunkan kadar kolesterol total dari 351,17 mg/dl menjadi 154,53 mg/dl, dan
dosis III menurunkan kadar kolesterol total dari 381,10 mg/dl menjadi 141,77
mg/dl. Pemberian bahan uji ek strak β -glukan larut air jamur tiram putih dosis I, II,
dan III terbukti berhasil menurunkan kadar kolesterol total hamster
hiperkolesterolemia dan hiperglikemia. Data kadar kolesterol total yang diperoleh
kemudian dihitung nilai persentase penurunannya.
65,19
376,2 369,5
318,53
351,17381,1
65,94
185,81
322,81
199,44
154,54141,77
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS I DOSIS II DOSIS III
K a d a r
K o l e s
t e r o
l T o t a l
( m g /
d l )
Perlakuan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
37/76
28
Dari perhitungan nilai rata-rata persentase penurunan kelompok normal
menunjukkan hasil yang minus. Hal ini menunjukkan bahwa kelompok normal
mengalami kenaikan kadar kolesterol total. Dengan demikian kelompok normal
tidak dimasukkan dalam pengolahan data, karena dapat memengaruhi hasil uji
statistik terhadap data penurunan kadar kelompok lainnya. Rerata persentase
penurunan kadar kolesterol yaitu, kelompok normal sebesar – 27,91%, kelompok
positif 50,44%, kelompok negatif 12,34%, kelompok dosis I 36,67%, kelompok
dosis II 55,89%, dan kelompok dosis III 62,83% (Gambar 4).
Gambar 4. Persentase Penurunan Kadar Kolesterol Total (%) HamsterHiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang Diberi Bahan Uji
Berdasarkan Gambar 4, terlihat bahwa dosis III menunjukkan rerata persen
penurunan kolesterol total terbesar yaitu 62,83%. Data persen penurunankolesterol total selanjutnya diuji normalitas dan homogenitasnya, didapat hasil uji
normalitas (p= 0,200) dan uji distribusi homogenitas (p= 0,102). Hal ini
menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dan homogen (p > 0,05).
Selanjutnya diuji menggunakan ANOVA satu arah. Dari hasil ANOVA terhadap
persentase kadar kolesterol total diperoleh nilai sig. 0,000 < 0,05. Hal tersebut
menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna antar perlakuan, dan adanya
50,44
36,67
55,89
62,83
0
10
20
30
40
50
60
70
80
POSITIF DOSIS I DOSIS II DOSIS III
P e r s e n t a s e
P e n u r u n a n
K a d a r
K o l e s
t e r o
l T o t a l
( % )
Perlakuan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
38/76
29
pengaruh pemberian sediaan uji terhadap penurunan kadar kolesterol total darah
hamster hiperkolesterolemia dan hiperglikemia. Hasil uji statistik dapat dilihat
pada lampiran 12.
Hasil uji LSD terhadap persen penurunan kolesterol total terbukti bahwa
dosis I, II, dan III menunjukkan adanya perbedaan bermakna dengan kontrol
positif (p
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
39/76
30
Gambar 5. Rerata Kadar (mg/dl) LDL Awal ( ) dan Akhir ( )Hamster Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang DiberiBahan Uji
Data rerata kadar LDL hewan uji pada kelompok normal, positif, negatif,
dosis I, dosis II, dan dosis III ditampilkan pada Gambar 5. Terlihat bahwa
pemberian bahan uji dapat menurunkan kadar LDL. Hal ini dapat dibuktikan pada
dosis I dapat menurunkan kadar LDL dari 157,3 mg/dl menjadi 96,94 mg/dl, dosis
II menurunkan kadar LDL dari 158,42 mg/dl menjadi 93,38 mg/dl, dan dosis III
menurunkan kadar LDL dari 183,47 mg/dl menjadi 91,79 mg/dl. Pemberian bahan
uji ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih dosis I, II, dan III terbukti berhasil
menurunkan kadar LDL hamster hiperkolesterolemia dan hiperglikemia. Data
kadar LDL yang diperoleh kemudian dihitung nilai persentase penurunannya.Dari perhitungan nilai rerata persentase penurunan kelompok normal
menunjukkan hasil yang minus. Hal ini menunjukkan bahwa kelompok normal
mengalami kenaikan LDL. Dengan demikian kelompok normal tidak dimasukkan
dalam pengolahan data, karena dapat memengaruhi hasil uji statistik terhadap data
penurunan kadar kelompok lainnya. Rerata persentase kadar LDL yaitu, kelompok
normal sebesar – 24,37%, kelompok positif 49,11%, kelompok negatif -0,81%,
51,04
223,37
168,46157,3 158,42
183,47
53,56
114,08
169,14
96,94 93,38 91,79
0
50
100
150
200
250
300
NORMAL POSITIF NEGATIF DOSIS I DOSIS II DOSIS III
K a d a r
L D L ( m g /
d l )
Perlakuan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
40/76
31
kelompok dosis I 37,057%, kelompok dosis II 40,85%, kelompok dosis III
49,47% (Gambar 6).
Gambar 6. Persentase Penurunan Kadar LDL (%) HamsterHiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang Diberi Bahan Uji
Berdasarkan Gambar 6, terlihat bahwa dosis III menunjukkan rerata persen
penurunan LDL terbesar yaitu 49,47%. Data persen penurunan kadar LDL yang
diperoleh kemudian diuji normalitas dan homogenitasnya, didapat hasil uji
normalitas (p= 0,119) dan uji homogenitas (p= 0,308), sehingga menunjukkan
bahwa data terdistribusi normal dan homogen (p>0,05). Hasil ANOVA satu arah
terhadap persentase penurunan kadar LDL diperoleh nilai sig. 0,114 > 0,05. Hal
tersebut menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang bermakna antar perlakuan,
dan menjelaskan bahwa pemberian ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih
dosis I, dosis II, dosis III, dan kontrol positif memberikan efek penurunan kadar
LDL yang sebanding. Dari analisis persentase penurunan LDL dapat diperoleh
gambaran bahwa untuk mendapatkan efek yang lebih besar dibanding dengan
kontrol positif (kolestiramin) dapat dihasilkan dari pemberian ekstrak β -glukan
larut air jamur tiram putih dosis III (480 mg/kgBB). Hasil uji statistik dapat dilihat
pada lampiran 14.
49,11
37,05
40,85
49,47
0
10
20
30
40
50
60
POSITIF DOSIS I DOSIS II DOSIS III
P e r s e n
t a s e
P e n u r u n a n
K a d a r
L D L ( % )
Perlakuan
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
41/76
32
Gambar 7. Mekanisme Kolestiramin Dalam Menurunkan Kolesterol Totaldan LDL (Lullmann et al . 2000)
Kolesterol merupakan sterol utama dalam tubuh manusia dan komponen
struktural membran sel dan lipoprotein plasma. Kolesterol berasal dari dua
sumber, sumber eksogen dan endogen. Kolesterol eksogen merupakan kolesterol
yang berasal dari makanan dan diabsorbsi di usus. Sedangkan kolesterol endogen
merupakan kolesterol yang dibentuk di hati (Suyatna 2007). LDL merupakan
lipoprotein yang memiliki fungsi mengangkut kolesterol ke jaringan-jaringan
yang membutuhkannya sebagai sumber energi, sebagai komponen membran sel
atau sebagai prekursor metabolit aktif (Almatsier 2003). LDL pengangkut
kolesterol terbesar pada manusia, yaitu 70% (Suyatna 2007).
Kolestiramin sebagai kontrol positif menurunkan kolesterol melalui
mekanisme pengikatan asam empedu di intestinal dan mengekskresikannya
melalui feses. Hal ini meningkatkan pengiriman asam empedu dari hati sebagai
tempat sintesisnya ke intestinal (Malloy dan Kane 2012). Satu gram kolestiramin
dapat mengikat 100 mg asam empedu. Penggunaan kolestiramin jangka panjang
telah terbukti dapat menurunkan hiperkolesterol dan persentase serangan jantung
fatal sekitar 20% (Marks et al. 2000). Sementara ekstrak β -glukan larut air jamur
tiram putih menurunkan kolesterol dan LDL karena dimediasi oleh kemampuan β -
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
42/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
43/76
34
darah juga mengalami peningkatan kadar kolesterol total dan LDL (Chen dan
Raymond 2008).
Berdasarkan penelitian ini dapat diketahui bahwa ekstrak β-glukan larut air
jamur tiram putih pada dosis 120 mg/kgBB, 240 mg/kgBB, dan 480 mg/kgBB
terbukti memiliki aktivitas antihiperkolesterolemia dengan persentase penurunan
kadar kolesterol total masing-masing sebesar 36,67%, 55,89%, dan 62,83%.
Persentase penurunan kadar LDL masing-masing 37,057%, 40,85%, dan 49,47%.
Dosis II (240 mg/kgBB) merupakan dosis terbaik sebanding dengan kelompok
positif (kolestiramin) dalam menurunkan kadar kolesterol total dengan persentase
penurunan kadar kolesterol total sebesar 62,83%. Dosis III (480 mg/kgBB)
merupakan dosis terbaik sebanding dengan kelompok positif (kolestiramin) dalam
menurunkan kadar LDL dengan persentase penurunan kadar LDL sebesar
49,47%.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
44/76
35
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa,
pemberian ekstrak β-glukan larut air jamur tiram putih pada dosis I (120
mg/kgBB), II (240 mg/kgBB), dan III (480 mg/kg BB) terbukti mempunyai
aktivitas menurunkan kolesterol total dan LDL darah hewan uji. Dosis 240
mg/kgBB merupakan dosis terbaik sebanding dengan kelompok positif
(kolestiramin) dalam menurunkan kadar kolesterol total dengan persentase
penurunan kadar kolesterol total sebesar 62,83%. Dosis 480 mg/kgBB merupakandosis terbaik sebanding dengan kelompok positif (kolestiramin) dalam
menurunkan kadar LDL dengan persentase penurunan kadar LDL sebesar
49,47%.
B. Saran
Perlu dilanjutkan penelitian uji toksisitas akut ekstrak β -glukan larut air jamur
tiram putih.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
45/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
46/76
37
Departemen Kesehatan RI. 2000. Buku Panduan Teknologi Ekstrak . DirektoratJenderal Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta. Hlm.17, 22, 39.
Dewi CK, Probosari E. 2012. Pengaruh Pemberian Buah Pepaya ( Carica papaya
L.) Terhadap Kadar Kolesterol Total pada Tikus Sprague Dawley denganHiperkolesterolemia. Journal of Nutrition College 1 (1): 93-98.
Dillard A, Matthan NR, Lichtenstein AH. 2010. Use of Hamster as a Model toStudy Diet-Induced Atherosclerosis. Nutrition & Metabolism 7(89): 1-12.
Dwiloka B. 2003. Efek Kolesterolemik Berbagai Telur. Media Gizi dan Keluarga.27(2): 58-65.
Ganong WF. 2008. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 22. Buku KedokteranEGC. Jakarta. Hlm. 317-320.
Ghaly IS, Ahmed ES, Booles HF, Farag IM, Nada SA. 2001. Evaluation ofAntihyperglycemic Action of Oyster Mushroom ( Pleurotus ostreatus ) andIts Effect on DNA Damage, Chromosome Aberrations and SpermAbnormalities in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. Journal GlobalVeterinaria 7 (6): 532-544.
Giri NL. 2008. Potensi Antioksidasi Daun Salam: Kajian in vivo pada TikusHiperkolesterolemia dan Hiperglikemia. Skripsi. Fakultas MIPA InstitutPertanian Bogor. Bogor. Hlm. 11.
Gustaviani R. 2006. Diagnosis dan Klasifikasi Diabetes. Dalam: Sudoyono WA,Setiyohadi B, Alwi I, Simadibrata M, Setiati S. Buku Ajar Ilmu Penyakit
Dalam . Jilid II . Pusat Penerbitan Departemen Ilmu Penyakit Dalam FKUI.Jakarta. Hlm.1857.
Hanafiah KA. 1993. Rancangan Percobaan Teori dan Aplikasi . Edisi 2 . Citra Niaga Rajawali. Jakarta. Hlm. 6-7.
Hartono A. 2006. Terapi Gizi dan Diet Rumah Sakit . Edisi II . EGC. Jakarta. Hlm.147-148.
Hendritomo HI. 2010. Jamur Konsumsi Berkhasiat Obat . Lily Publisher.Yogyakarta. Hlm. 42.
Hidayati F. 2013. Uji Aktivitas Antihiperkolesterol Ekstrak Air β -glukan JamurTiram Putih ( Pleurotus ostreatus (Jacq.) P.Kumm) pada HamsterHiperkolesterolemia. Skripsi . Fakultas MIPA UHAMKA. Jakarta. Hlm.26.
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
47/76
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
48/76
39
Rifai N, Warnick GR, Donniniezak HM. 2000. Handbook of Lipoprotein Testing .American Association for Clinical Chemistry. USA.
Rop O, Mleck J, Jurikov T. 2009. Beta-glucan in Higher Fungi and Their HealthEffect. Nutrition Reviews. 67(11):626-627.
Sadgara Y. 2010. Merawat Hamster Si Imut yang Menggemaskan . PT. AgroMedia. Jakarta. Hlm. 5.
Santoso S. 2010. Statistik Parametrik . Elek Media Komputindo. Jakarta. Hlm.104.
Suherman SK. 2007. Insulin dan Antidiabetik Oral. Dalam: Gunawan SG,Setiabudy R, Nafrialdi, Elysabeth. Farmakologi dan Terapi. Edisi V .
Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran UniversitasIndonesia. Jakarta. Hlm. 481-495.
Sukandar EY, Retnosari A, Joseph S. 2008. ISO Farmakoterapi . ISFI. Jakarta.Hlm. 113.
Suyatna FD. 2007. Hipolipidemik. Dalam: Gunawan SG, Setiabudy R, Nafrialdi,Elysabeth. Farmakologi dan Terapi. Edisi V . Departemen Farmakologidan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Hlm.373-378.
Wiardani I. 2010. Budidaya Jamur Konsumsi . Lily Publisher. Yogyakarta. Hlm 5-7.
Widyastuti N, Koesnandar. 2008. Shiitake & Jamur Tiram: Penghambat Tumor & Penurun Kolesterol. Agromedia Pustaka. Jakarta. Hlm. 31.
Widyastuti N, Baruji T, Giarni R, Isnawan H, Wahyudi P, Donowati. 2011.Analisa Kandungan Beta-Glukan Larut Air dan Larut Alkali dari TubuhBuah Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus) dan Shiitake (Lentinus edodes).
Jurnal Sains dan Teknologi Indonesia . 13: 182-191.
Winarti S. 2010. Makanan Fungsional . Graha Ilmu. Surabaya. Hlm. 184-186.
World Health Organization. 2012. World Health Statistics. Diakses tanggal 20Februari 2014, 18.33 WIB.http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs317/en/
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs317/en/http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs317/en/http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs317/en/
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
49/76
40
Lampiran 1. Skema Prosedur Penelitian
Rancangan penelitian
Determinasi simplisia
Penyiapan bahan
Ekstraksi β -glukan larutair
Uji antihiperkolesterol
Analisa data
Pengumpulan dan penyediaansimplisiaPenyiapan reagen
Pemeriksaan organoleptisUji kadar air dan kadar abuPerhitungan RendemenIdentifikasi β -glukan
Aklimatisasi hewan cobaPembagian kelompok hewan ujiPenetapan dosisPemberian pakan hiperkolesterolPemberian induksi fruktosa cairPenyiapan bahan ujiPerlakuan terhadap tiap kelompokhewan ujiPengambilan darahPenentuan kadar kolesterol total danLDL
Simplisia jamur tiram putih
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
50/76
41
Lampiran 2. Skema Ekstraksi β-glukan Larut Air Jamur Tiram Putih
Jamur tiram putih kering
Serbuk jamur tiram putih
Ditambahkan akuades 3x volume,dipanaskan pada suhu 100 0C selama
3 jam, saring
Ampas Filtrat
Ditambahkan etanol 80 % 3xvolume, diamkan suhu 4 OC, 24 jam
Supernatan Residu filtrat
Sentrifus(4000 rpm, 15 menit)
EndapanSupernatan
Oven
Ekstrak kering
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
51/76
42
Lampiran 3. Skema Pembagian Kelompok Hewan Uji Hamster Syrian
Kelompok I (kontrol normal)Tidak mendapat perlakuan zat uji, hanyamendapat makanan standar, dan minum.
Kelompok II (kontrol positif)Kelompok yang diberi induksi fruktosa,
pakan hiperkolesterol dan diberi obat pembanding antihiperkolesterol
kolestiramin
Kelompok III (kontrol negatif)Kelompok yang diberi induksi fruktosa,
pakan hiperkolesterol
Kelompok IV (Dosis I)Kelompok yang diberi induksi fruktosa,
pakan hiperkolesterol dan ekstrak β -glukandosis I (120 mg/kg BB)
Kelompok V (Dosis II)Kelompok yang diberi induksi fruktosa,
pakan hiperkolesterol dan ekstrak β -glukandosis II (240 mg/kg BB)
Kelompok VI (Dosis III)Kelompok yang diberi induksi fruktosa,
pakan hiperkolesterol dan ekstrak β -glukandosis III (480 mg/kg BB)
24 ekorhamster
s irian
@ 4ekor
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
52/76
43
Lampiran 4. Pembuatan Larutan Uji
1. Larutan ekstrak β -glukan larut air jamur tiram putih
Pembuatan larutan uji yang dibuat adalah ekstrak dilakukan setiap hari untuk
menjamin larutan ekstrak dalam keadaan baik.
Dosis 1 = 120 mg/kgBB
Untuk membuat larutan induk dengan dosis terendah yaitu dosis 1 (120
mg/kgBB = 18 mg/150 g BB) ekstrak ditimbang 200 mg dan dilarutkan
dengan suspensi Na CMC hingga 10 ml, sehingga diperoleh konsentrasi
20 mg/ml larutan. Banyaknya larutan ekstrak yang diberikan dari larutan
induk pada hamster per 150 g BB:
Volume (ml) = ℎ ( )150
x 1820 /
Dosis 2 = 240 mg/kgBB
Untuk membuat larutan induk dosis 2 (240 mg/kgBB = 36 mg/150 g BB)
ekstrak ditimbang 400 mg dan dilarutkan dengan suspensi Na CMC
hingga 10 ml, sehingga diperoleh konsentrasi 40 mg/ml larutan.
Banyaknya larutan ekstrak yang diberikan dari larutan induk pada
hamster per 150 g BB:
Volume (ml) = ℎ ( )
150 x
36
40 /
Dosis 3 = 480 mg/kgBB
Untuk membuat larutan induk dosis tertinggi yaitu dosis 3 (480 mg/kgBB
= 72 mg/150 g BB) ekstrak ditimbang 800 mg dan dilarutkan dengan
suspensi Na CMC hingga 10 ml, sehingga diperoleh konsentrasi 80
mg/ml larutan. Banyaknya larutan ekstrak yang diberikan dari larutan
induk pada hamster per 150 g BB:
Volume (ml) = ℎ ( )
150 x
72
80 /
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
53/76
44
2. Larutan obat pembanding kolesteramin
Konsentrasi larutan induk yang dibuat = 100 mg/ml
Volume suspensi yang dibuat per hari = 10 ml
Berat kolesteramin yang ditimbang = 10 ml x 100 mg/ml
= 1000 mg
Serbuk kolesteramin yang ditimbang 1000 mg dilarutkan dalam suspensi Na-
CMC hingga 10 ml. Dari 10 ml larutan diberikan volume untuk masing-
masing hamster :
Volume larutan (ml) =Berat hamster gram
150 gram BB x
74 mg
100mg/ml
=Berat hamster gram
150 gram BB x 0,74 ml
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
54/76
45
Lampiran 5. Skema Pengambilan Serum Darah Hamster
Hewan Uji
Dipuasakan ± 12 jam
Dibius dengan isofluran
Darah diambil melalui sinus orbitalis
Dimasukkan ke dalam mikrotube
Sentrifugasi pada 4000 rpm selama 15 menit
Serum darah
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
55/76
46
Lampiran 6. Prosedur Pengukuran Kadar Kolesterol Total
10 µl serum
1000 µl reagen enzim (kit)
Vortex
ditambah
Diamkan selama 10 menit, suhu kamar 20-25 C
Baca kadar denganFotometer Klinikal
Varta 506
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
56/76
47
Lampiran 7. Prosedur Pengukuran Kadar LDL
100 µl serum
1000 µl reagen LDL presipitan
Vortex
ditambah
Baca kadar denganFotometer Klinikal
Varta 506
Sentrifuse , 4000 rpm 15 menit
Supernatan 100 µl
1000 µl reagen enzim (kit)+
Diamkan ± 1 jam
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
57/76
48
Lampiran 8. Surat Determinasi Jamur Tiram Putih
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
58/76
49
Lampiran 9. Surat Keterangan Hamster Syrian
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
59/76
50
Lampiran 10. Perhitungan Susut Pengeringan, Kadar Air, Kadar Abu, danRendemen dari Ekstrak β-Glukan Larut Air Jamur TiramPutih
A. Susut PengeringanPerhitungan Susut PengeringanBerat botol timbang kosong (a) = 20,1027 gBerat botol timbang + 2 g ekstrak (b) = 22,1022 gBerat botol timbang + ekstrak akhir/konstan (c) = 21,9949 g
Susut Pengeringan =−
− x 100%
= (22,1022 − 21,9949)(22,1022 − 20,1027)
x 100%
=0,1073
1,9995 x 100%
= 5,37%
B. Kadar Air
No Berat sampel (gram) % DC Kadar air %
1 1,804 94,96 5,04
2 1,802 95,12 4,88
3 1,814 94,76 5,24
C. Kadar Abu
No. Berat krusibelkosong (gram)
Berat krusibel +ekstrak kering
(gram) W1
Berat krusibel +ekstrak keringkonstan (gram)
W2
Kadarabu %
1 33,0482 32,9367 34,876 33,0452 5,6773
3 33,0468Perhitungan :
% kadar abu = ℎ
X 100%
=( 2− 0)
( 1− 0)) X 100%
=(33,0468 − 32,9367)
(34,876 − 32,9367) X 100%
=0,1101
1,9393 X 100%
= 5,6773%
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
60/76
51
D. Rendemen
Serbuk simplisia kering = 1000 gram
Ekstrak kering = 85,56 gram% Rendemen =
X 100%
=85,56
1000 X 100%
= 8,556 %
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
61/76
52
Lampiran 11. Spektrum β -glukan dengan Metode KCKT
A. Spektrum β -glukan Standar
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
62/76
53
B. Spektrum β -glukan Larut Air Jamur Tiram Putih
8/19/2019 UJI AKTIVITAS ANTIHIPERKOLESTEROL EKSTRAK β-GLUKAN LARUT AIR JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus ostreatus (Jacq…
63/76
54
Lampiran 12. Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total (KT), LDL, Glukosa Awal dan Kadar Kolesterol Total, LDL AkhirHamster Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia yang Diberi Bahan Uji
KELOMPOKKT LDL GLUKOSA KT LDL
AWAL RERATA SD AWAL RERATA SD AWAL RERATA SD AKHIR RERATA SD AKHIR RERATA SD
NORMAL
1 67,11
65,19 2,07
49,94
51,04 1,25
114,53
110,91 9,78
61,72
65,94 3,45
51,32
53,56 3,87264,88 52,71 97,21 64,84 53,01
3 66,36 51,29 111,73 67,43 50,73
4 62,41 50,23 120,17 69,77 59,19
POSITIF
1 390,87
376,20 21,62
211,08
223,37 10,42
194,37
188,35 5,26
180,93
185,81 3,89
102,31
114,08 12,752359,43 235,21 188,33 189,6 121,91
3 398,52 227,79 189,17 184,52 127,914 355,98 219,43 181,55 188,21 104,22
NEGATIF
1 360,36
369,50 6,92
153,43
168,46 23,71
190,96
181,20 8,97
362,36
322,81 20,89
163,51
169,14 35,142376,17 200,48 185,65 321,95 206,76
3 368,21 147,89 177,67 344,14 137,164 373,26 172,04 170,52 - -
DOSIS 1
1 311,93
318,53 9,21
138,16
157,30 14,72
170,21
177,73 5,69
192,18
199,44 6,53
92,74
96,94 10,392309,82 173,09 18