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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADORFACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
DETERMINACIÓN DE IgG CONTRA CHLAMYDIA EN ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR EN
EL PERIODO OCTUBRE 2015 - ENERO 2016
Trabajo de Fin de Carrera presentado previo a la obtención del Títulode Licenciada en Laboratorio Clínico e Histotecnológico
AUTORA: HIDALGO TIPÁN MARÍA JOSÉTUTOR: DR. CARLOS WLADIMIR TORRES SERRANO
QUITO, MAYO 2016
ii
DEDICATORIA
A Dios por guiarme, darme salud y vida para emprender
nuevos retos.
A mis padres Plinio y María del Carmen por su apoyo
incondicional en cada etapa de mi vida, por su amor
infinito que hace que cada día me esfuerce por ser mejor
para cumplir cada una de mis metas.
A mi hermano Juan Pablo por su paciencia y cariño que me
impulsa día a día para que paso a paso alcance cada uno
de mis propósitos.
iii
AGRADECIMIENTO
A la Facultad de Ciencias Médicas por su aporte en mi
formación como profesional. A mis amigos con los que
compartí sus aulas, sueños, risas, objetivos, por hacer más
llevadero el camino que casi estoy por culminar.
A mi tutor de proyecto de investigación Dr. Carlos Torres
por su ayuda en la elaboración y culminación de este
trabajo de titulación.
A mi familia por su preocupación y apoyo en esta importante
etapa de mi vida como profesional.
iv
AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL
Yo, MARÍA JOSÉ HIDALGO TIPÁN, en calidad de autor del trabajo de investigación de tesis
realizada sobre: “DETERMINACIÓN DE IgG CONTRA CHLAMYDIA EN ESTUDIANTES
DE LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR”,
por la presente autorizó a la Universidad Central del Ecuador, hacer uso de todos los contenidos
que me pertenecen o de parte de los que contienen esta obra, con fines estrictamente académicos
o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente autorización,
seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5, 6, 8 y 19; y,
demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su Reglamento.
Quito, 29 de Enero del 2016
_______________________María José Hidalgo TipánCI: 1717818494Telf: 0999778908 Mail:[email protected]
v
INFORME DE APROBACIÓN DEL TUTOR
En mi carácter de Tutor del trabajo de Grado, presentado por la señorita María José Hidalgo
Tipán, para optar el Titulo de Licenciada en Laboratorio Clínico e Histotecnológico, cuyo
título es “DETERMINACIÓN DE IgG CONTRA CHLAMYDIA EN ESTUDIANTES DE
LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR”.
Considero que dicho Trabajo reúne los requisitos y méritos suficientes para ser sometido a la
presentación pública y evaluación por parte del jurado examinador que se designe.
En la ciudad de Quito, a los 29 días del mes de enero del 2016.
______________________
Dr. Carlos Torres.
TUTOR DE TESIS
vi
ÍNDICE DE CONTENIDOS
DEDICATORIA___________________________________________________________ ii
AGRADECIMIENTO______________________________________________________ _iii
AUTORIZACION DE LA AUTORIA INTELECTUAL _____________________________iv
APROBACION DEL TUTOR ________________________________________________ v
ÍNDICE DE CONTENIDOS _________________________________________________ vi
LISTA DE ANEXOS _______________________________________________________ ix
LISTA DE FIGURAS _______________________________________________________ x
LISTA DE TABLAS ________________________________________________________ xi
LISTA DE GRAFICOS ______________________________________________________xii
RESUMEN______________________________________________________________ xiii
SUMARY_______________________________________________________________ xiv
INTRODUCCIÓN___________________________________________________________1
CAPÍTULO I ______________________________________________________________2
1. EL PROBLEMA_________________________________________________________ 2
1.1 Planteamiento del problema _______________________________________________ 2
1.2 Ubicación_______________________________________________________________3
1.3 Formulación del problema__________________________________________________4
1.4 Preguntas Directrices______________________________________________________5
1.5 Objetivo________________________________________________________________6
1.5.1 Objetivo general ________________________________________________________6
1.5.2 Objetivos específicos_____________________________________________________6
1.6 Justificación____________________________________________________________ 7
1.7 Limitaciones_____________________________________________________________8
CAPÍTULO II ______________________________________________________________9
2. MARCO TEÓRICO________________________________________________________9
2.1 Marco legal______________________________________________________________9
2.2 Agente________________________________________________________________10
2.3 Estructura______________________________________________________________12
vii
2.4 Características bacterianas_________________________________________________13
2.5 Inmunidad para Chlamydia Trachomatis______________________________________15
2.5.1 Respuesta inmune humoral_______________________________________________16
2.5.2 Respuesta inmune celular________________________________________________17
2.6 Patogenia______________________________________________________________17
2.7 Manifestaciones clínicas__________________________________________________ 18
2.7.1 Uretritis no gonocócica (UNG)___________________________________________18
2.7.2 Síndrome uretral en mujeres______________________________________________18
2.7.3 Epididimitis___________________________________________________________18
2.7.4 Proctitis______________________________________________________________19
2.7.5 Cervicitis mucopurulenta_________________________________________________19
2.7.6 Enfermedad pélvica inflamatoria___________________________________________19
2.7.7 Linfogranuloma venéreo_________________________________________________20
2.8 Método diagnóstico_______________________________________________________21
2.8.1 PCR________________________________________________________________ 21
2.8.2 Detección de antígenos.___________________________________________________22
2.8.3 Cultivo en línea celular. _________________________________________________22
2.8.4Inmunofluorescencia Directa.______________________________________________22
2.8.5 ELISA_______________________________________________________________23
2.9 Epidemiologia__________________________________________________________24
2.10 Técnica ELISA_________________________________________________________26
2.10.1 Fundamento__________________________________________________________26
2.10.2 ELISA Directo_______________________________________________________27
2.10.3 ELISA Indirecto_______________________________________________________27
2.10.4 ELISA Sándwich “DAS” (Double Antibody Sandwich)._______________________28
2.10.5 ELISA Sándwich “HADAS”.____________________________________________28
2.10.6 ELISA Competitivo.___________________________________________________29
2.11 Ventajas del ELISA______________________________________________________30
2.12 Inmunoglobulinas_______________________________________________________30
2.13 Tratamiento____________________________________________________________31
viii
CAPÍTULO III____________________________________________________________ 32
3. METODOLGÍA_________________________________________________________ 32
3.1Tipo de estudio___________________________________________________________32
3.2 Nivel de Investigación_____________________________________________________32
3.3 Universo y Muestra_______________________________________________________33
3.3.1Universo______________________________________________________________33
3.3.2Muestreo______________________________________________________________33
3.4 Técnica e instrumento de recolección de datos_________________________________33
3.4.1 Técnica_______________________________________________________________33
3.4.2 Procedimiento de ensayo_________________________________________________34
3.5 Tipos de análisis_________________________________________________________34
3.6 Consideraciones éticas___________________________________________________ 35
3.7 Operacionalización de las Variables__________________________________________35
3.7.1 Variables______________________________________________________________35
CAPÍTULO IV_____________________________________________________________38
4 RESULTADOS, ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN______________________________38
4.1 Discusión_______________________________________________________________53
CAPÍTULO V____________________________________________________________ 55
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES_________________________________ 55
5.1 Conclusiones____________________________________________________________55
5.2 Recomendaciones________________________________________________________56
CAPÍTULO VI____________________________________________________________ 57
6. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS___________________________________________57
6.1 Recursos_______________________________________________________________57
6.2 Recursos Humanos_______________________________________________________57
6.3 Recursos Materiales______________________________________________________57
6.4 Recursos Técnicos_______________________________________________________ 58
6.5 Recursos Económicos____________________________________________________ 58
6.6 Cronograma de Actividades________________________________________________ 59
BIBLIOGRAFIA___________________________________________________________ 60
ANEXOS________________________________________________________________ 68
LISTA DE ANEXOS
ANEXO N° 1
Toma de Muestras __________________________________________________________68
ANEXO N° 2
Centrifugación ____________________________________________________________ 68
ANEXO N° 3
Obtención de Sueros ________________________________________________________ 68
ANEXO N° 4
Procesamiento _____________________________________________________________68
ANEXO N° 5
Obtención de Resultados _____________________________________________________68
ANEXO N° 6
Encuesta _________________________________________________________________ 69
ANEXO N° 7
Formulario de Consentimiento ________________________________________________ 70
ix
LISTA DE FIGURAS
Figura N° 1
Comparación de Metodos utilizados para diagnórtico de Chlamydia Trachomatis_________ 21
Figura N° 2
Ventajas y Desventajas de la técnicas de diagnóstico descritas _______________________ 24
Figura N° 3
Operacionalización de la variables independientes ________________________________ 36
Figura N° 4
Operacionalización de la variables dependientes __________________________________ 36
Figura N° 5
Operacionalización de la variables intervinientes _________________________________ 37
x
xi
LISTA DE TABLAS
TABLA Nº 1
Distribución según sexo en estudiantes (%)_______________________________________38
TABLA Nº 2
Distribución según edad de estudiantes (%)_______________________________________39
TABLA Nº 3
Distribución según Semestre de Estudios (%)_____________________________________40
TABLA Nº 4
Distribución Estudiantes Según Inicio de Vida Sexual (%)___________________________41
TABLA Nº 5
Distribución de estudiantes según edad de inicio de su vida sexual (%)________________42
TABLA Nº 6
Distribución de estudiantes según número de compañeros sexuales que ha tenido (%)_____43
TABLA Nº 7
Distribución de estudiantes según el tipo de relación sexual (%)_______________________44
TABLA Nº 8
Distribución de estudiantes según ha presentado secreción vaginal o uretral_____________45
TABLA Nº 9
Distribución de estudiantes según utilizó preservativo en su última relación Sexual (%)___46
TABLA Nº 10
Distribución de estudiantes según sintomatología (%)______________________________ 47
TABLA Nº 11
Distribución de estudiantes según Nivel IgG contra Chlamydia (%)____________________48
TABLA Nº 12
Distribución de estudiantes según Nivel IgG y tipo de relación sexual (%)______________49
TABLA Nº 13
Distribución de estudiantes según Nivel IgG y número de compañeros sexuales (%)_______51
LISTA DE GRÁFICOS
GRÁFICO Nº 1
Distribución según sexo en estudiantes (%)_______________________________________38
GRÁFICO Nº 2
Distribución según edad de estudiantes (%)_______________________________________39
GRÁFICO Nº 3
Distribución según Semestre de Estudios (%)_____________________________________40
GRÁFICO Nº 4
Distribución Estudiantes Según Inicio de Vida Sexual (%)___________________________41
GRÁFICO Nº 5
Distribución de estudiantes según edad de inicio de su vida sexual (%)________________42
GRÁFICO Nº 6
Distribución de estudiantes según número de compañeros sexuales que ha tenido (%)_____43
GRÁFICO Nº 7
Distribución de estudiantes según el tipo de relación sexual (%)_______________________44
GRÁFICO Nº 8
Distribución de estudiantes según ha presentado secreción vaginal o uretral_____________45
GRÁFICO Nº 9
Distribución de estudiantes según utilizó preservativo en su última relación Sexual (%)___46
GRÁFICO Nº 10
Distribución de estudiantes según sintomatología (%)______________________________ 47
GRÁFICO Nº 11
Distribución de estudiantes según Nivel IgG contra Chlamydia (%)____________________48
GRÁFICO Nº 12
Distribución de estudiantes según Nivel IgG y tipo de relación sexual (%)______________50
GRÁFICO Nº 13
Distribución de estudiantes según Nivel IgG y número de compañeros sexuales (%)_______52
xii
xiii
RESUMEN
La infección por Chlamydia es una enfermedad de transmisión sexual que puede infectar
tanto a hombres como mujeres, en la mayoría de casos es asintomática causando daños graves
y permanentes en el aparato reproductor femenino, presentando complicaciones para gestar e
incluso haciendo imposible esto en un futuro.
El agente causal es Chlamydia Trachomatis es una bacteria gram negativa patógena para el
hombre, su ciclo vital transcurre en el interior de las células esta característica hace que escape
del sistema inmunitario.
Cualquier persona que ha iniciado su vida sexual o mantenga una vida sexual activa puede
infectarse con Chlamydia, se presenta con mayor frecuencia en adolescentes y adultos jóvenes
entre 15 y 24 años con conductas sexuales de riesgo.
Alrededor del 85-90% de los casos de infección por Chlamydia tanto hombres como mujeres
pueden ser asintomáticos y en caso de existir algún síntoma podemos mencionar dolor y ardor
al orinar, descarga mucopurulenta, sangrado post coital, sangrado intermenstrual.
En Ecuador no existen datos de estudios de prevalencia de ETS y al ser reportado como agente
causal importante en otros países debe considerarse patógenop importante en la población
investigada.
Palabras clave: CHLAMYDIA TRACHOMATIS / BACTERIA GRAM NEGATIVA / SINTOMAS / ENFERMEDADES DE TRANSMISIÓN SEXUAL.
TEMA: “Determinación de IgG contra Chlamydia en estudiantes de la Facultad de Medicina de la Universidad Central Del Ecuador en el periodo Octubre 2015 - Enero 2016”
Autora: Hidalgo Tipán María JoséTutor: Dr. Carlos WladimirTorres Serrano
xiv
TITLE: “Determination of IgG antibodies against Chlamydia in students of the Faculty of Medicine of the Central University of Ecuador in the period October 2015 - January 2016”
Author: Hidalgo Tipán María José Tutor: Dr. Carlos Wladimir Torres Serrano
ABSTRACT
Chlamydia is a sexually transmitted disease that infects both men and women, in most cases
this disease is asymptomatic causing serious and permanent damage to the female reproductive
system, and can present as complications in gestation and even making pregnancy impossible
in the future. The cause of this desease is the gram negative bacterium Chlamydia trachomatis
which is pathogenic for humans; their life cycle takes place inside the cell, which makes it
possible to escape the immune system. Anyone who has started their sex life or maintains an
active sex life can become infected with Chlamydia, it occurs most frequently in adolescents
and young adults between 15 and 24 years who engage in risky sexual behavior. In about
85-90% of cases of Chlamydia both men and women can be asymptomatic, and if there are
any symptoms they will be pain and burning during urination, mucopurulent discharge, post
coital bleeding, breakthrough bleeding. In Ecuador there is no data from studies of prevalence
of sexually transmitted diseases (STDs), but it is a major causative agent in other countries,
therefore it should be considered an important pathogen in the research population.
KEYWORDS: CHLAMYDIA TRACHOMATIS / GRAM NEGATIVE BACTERIUM/
SYMPTOMS / SEXUALLY TRANSMITTED DISEASES
I CERTIFY that the above and foregoing is a true and a correct translation of the original
document in Spanish
Patricio Muñoz de la Torre
Certified Translator
ID: 1702770155
1
INTRODUCCIÓN
Entre las enfermedades de transmisión sexual es importante conocer y prevenir aquellas
asintomáticas como la infección por Chlamydia Trachomatis, tomando en cuenta los factores
de riesgo como: múltiples parejas sexuales, falta de información y uso del preservativo.
En la actualidad la promiscuidad especialmente en jóvenes menores de 25 años se ha
elevado significativamente siendo este un factor predisponente para el contagio por Chlamydia
Trachomatis.
Frente a la necesidad de tener datos cuantitativos del problema que se está abordando
he decidido realizar el trabajo de investigación, para levantar un breve diagnóstico en los
estudiantes de la Facultad de Ciencias Médicas de la Universidad Central del Ecuador, para
ello fue necesario realizar encuestas y tomar una muestra de sangre previo al consentimiento
informado del objetivo de este diagnóstico.
El análisis de las preguntas formuladas a los señores estudiantes, mostró una prevalencia
de 2.44 por mil estudiantes lo cual hace que mi investigación sea un importante aporte al
problema de salud por enfermedades de transmisión sexual.
Tomando en consideración la teoría y la práctica del tema se describirá en los siguientes
capítulos.
Capítulo I: Se refiere a establecer el planteamiento del problema, formulación del
problema, preguntas directrices, objetivos, justificación y limitaciones.
Capítulo II: Encontramos el marco teórico, fundamentación teórica de la Chlamydia y
las técnicas para detectar la misma.
Capítulo III: Metodología, diseño de la investigación, universo y muestra,
operacionalización de las variables, técnicas e instrumentación para la recolección de datos
Capítulo IV: Resultados, discusión.
Capítulo V: Conclusiones y recomendaciones
Capítulo VI: Aspectos administrativos, recursos, cronograma, anexos
2
CAPÍTULO I
1. EL PROBLEMA
1.1 Planteamiento del problema
Existen ciertas bacterias que viven en la vagina como Chlamydia Trachomatis, uno
de los agentes de transmisión sexual que pueden causar conjuntivitis en los recién nacidos
al pasar por el canal del parto y contagiarse de la misma al igual que otros agentes que no
se transmiten sexualmente pero que también pueden causar una conjuntivitis neonatal: entre
los cuales podemos nombrar los géneros Staphylococcus, Streptococcus, Enterobacteriaceae,
Haemophylus, Neisseria, Candida (Bas 2001)
La infección por Chlamydia es una enfermedad de transmisión sexual que puede infectar
tanto a hombres como a mujeres, en la mayoría de casos es asintomática causando daños
graves y permanentes en el aparato reproductor de una mujer, presentando complicaciones para
gestar o incluso hacer imposible que quede embarazada en el futuro.
Desde hace muchos años los gérmenes y microbios han encontrado las condiciones
óptimas para vivir y desarrollarse en nuestro organismo unos son totalmente amistosos, otros
son indispensables en nuestras vidas y otros son los que nos causan molestias siendo agresivos
e incluso atentan con nuestra vida, varios de estos microbios viven en las mucosas y regiones
genitales. (Melbourne 2005)
Las enfermedades que en conjunto afectan los órganos sexuales son llamadas
“Enfermedades venéreas”. La Chlamydia es una enfermedad de transmisión sexual se puede
contagiar mediante relación sexual, oral, anal, también puede ser transmitida de una mujer a su
feto durante el embarazo o en el nacimiento la infección se produce por una bacteria llamada
Chlamydia Trachomatis esta bacteria puede infectar las mucosas del cérvix, del ano, de la
uretra y de los ojos. (López 2002)
Durante la década del 60, los jóvenes promueven mediante un movimiento cambios
sociales y sexuales en su comportamiento teniendo a su disponibilidad pastillas anticonceptivas y
como consecuencia el intercambio de parejas y la promiscuidad. (Marbán, 2002). Se establecen
3
grupos sociales (la homosexualidad) para luchar por sus derechos mediante manifestaciones,
esto originó que resurgen las “enfermedades venéreas”. (Harcourt 2000)
En la actualidad los jóvenes llevan una vida en la cual confunden la libertad con
libertinaje es por eso que ahora tienen varias parejas sexuales siendo esta la principal causa
de contagio de la enfermedad, el stress por problemas y por estudios u otros son otra de las
causas ya que estas hace que se refugien en el alcohol y otras drogas con el fin de distraerse
hasta perder el conocimiento sin hacerse responsables de sus actos, llegando a tener relaciones
sexuales en dicho estado. La falta de información acerca de este tema es otro factor que precipita
el aparecimiento de esta enfermedad (White 2014)
Por lo que el riesgo de sufrir una infección por chlamydia es alto especialmente en los
jóvenes a esto le sumamos que siendo considerado un problema de salud pública aún no hay
estadística del nivel de infección por chlamydia en estudiantes universitarios en el Ecuador y
el subregistro por falta de información epidemiológica es alto. (White 2014)
1.2 Ubicación
Desde la antigüedad las enfermedades de transmisión sexual (ETS) fueron relacionadas
con amores prohibidos, que causaban signos y síntomas en las estructuras genitales humanas,
ligados a la promiscuidad y prostitución siendo predominante en los hombres de 20 a 30 años y
en personas de baja condición socio-económica, y se estabilizó en la década de los 80. (Martínez 1995)
Una de las enfermedades de transmisión sexual es la Chlamydia causada por una bacteria
que afecta con mas frecuencia a la gente joven , existen Centros para el Control y la Prevención
de Enfermedades (CDC), según estos se calcula que 1 de cada 15 mujeres sexualmente activas
de 14 a 19 años tiene Chlamydia. (Washington 1987)
Entre los síntomas que presentan las mujeres suelen ser leves o en muchas de ellas es
asintomático, en caso de presentar síntomas estos pueden ser con el aparecimiento de un fluido
vaginal, dolor al orinar, dolor durante la relación sexual, dolor en la parte baja del abdomen
y sangrado entre los periodos de menstruación, los hombres de presentar síntomas estos son
un fluido uretral, ardor al orinar, también pueden ser asintomáticos. (Scholes 1996) .Y en caso
4
de presentar complicaciones se menciona la infección propagada al epidídimo (el tubo que
conduce el esperma desde los testículos) causa dolor, fiebre y, rara vez esterilidad. (Ovalle 1998)
Es importante tratar una infección por Chlamydia ya que puede avanzar causando
problemas de salud especialmente reproductivos (infertilidad y embarazo ectópico), en
las mujeres hasta en un 40% puede propagarse al útero o las trompas de falopio causando
enfermedad inflamatoria pélvica (EIP) y daño permanente en los mismos y en los tejidos
circundantes. (Dorantes 2011)
Con la finalidad de prevenir las consecuencias de la infección por Chlamydia a las
mujeres embarazadas y sexualmente activas se recomienda realizar por lo menos una vez al
año una prueba para detección de Chlamydia. (Higa 2005)
Son pocos los casos en los cuales la infección por Chlamydia puede causar artritis acompañada
de lesiones en la piel, inflamación de los ojos y de la uretra (síndrome de Reiter). (Bartolomeo 2015)
Para realizar el diagnóstico de Chlamydia las pruebas son simples y sin dolor pueden
realizarse en pruebas de sangre, orina o mediante un hisopado de secreción, la obtención de la
muestra es muy importante y debe ser tomada observando los protocolos ya que la mala calidad
de la misma puede afectar la sensibilidad de las pruebas. (Entrocassi 2011)
Una de las pruebas utilizadas es ELISA comprende un inmuno ensayo ligado a una
enzima, está marcado con un Ag (antígeno) y busca un Ac (anticuerpo), en caso de ser positiva
forma una complejo Ag-Ac produciendo un cambio de color en la reacción por la adición de un
substrato, se puede observar a simple vista pero para su medición se utiliza un espectrofotómetro.
(GeoSalud 2015)
La técnica serológica más común es la microinmunofluorescencia indirecta, en la prueba
se utiliza como antígeno COMP (Complexes of Outer Membrane Proteins) de C. Trachomatis,
eliminando los Lípidos de superficie responsable de la mayor parte de las reacciones cruzadas
con otras especies de Chlamydia. Pero las técnicas de ELISA son más fáciles de realizar (Bas
2001)
5
1.3 Formulación del problema
¿Cuál es el porcentaje de muestra que presenta Chlamydia IgG mediante técnica de
ELISA en estudiantes de la Facultad de Medicina de la Universidad Central del Ecuador?
1.4 Preguntas Directrices
¿Qué es la Chlamydia?
¿Causas de la Chlamydia?
¿Cómo se transmite?
¿Cuáles son sus síntomas?
¿En qué consiste la técnica de ELISA?
6
1.5 OBJETIVOS
1.5.1 Objetivo general
Analizar la frecuencia de IgG contra Chlamydia mediante técnica de ELISA en
estudiantes de la Facultad de Medicina de la Universidad Central del Ecuador.
1.5.2 Objetivos específicos
• Determinar valores de IgG contra Chlamydia mediante ELISA en los estudiantes de la
Facultad de Medicina de la Universidad Central del Ecuador
• Identificar los factores que predisponen un contagio de Chlamydia en los estudiantes
de la Facultad de Medicina de la Universidad Central del Ecuador
• Establecer la prevalencia de infección por Chlamydia en estudiantes de la Facultad de
Medicina de la Universidad Central del Ecuador
7
1.6 Justificación
La Chlamydia es una infección de transmisión sexual considerada un problema de salud
por el daño que causa, es muy común en el mundo y es producida por una bacteria, cada año
se reporta alrededor de 90 millones de casos nuevos por esta infección. (Uriona 2010)
En EE. UU. fueron informados 1.412.791 casos de infecciones por C. trachomatis
durante el 2011, siendo más frecuentes en jóvenes menores de 25 años y mujeres en edad
reproductiva. En América Latina la información epidemiológica sobre el problema de las ETS
en particular de la infección por C. trachomatis en adolescentes y adultos jóvenes está limitada
a un pequeño número de estudios y a datos oficiales incompletos de los países de la región.
(Occhionero 2015)
La mayoría de los infectados tanto hombres y mujeres lo desconoce por ser asintomática
(70-90%), sin saber que causa secuelas reproductivas por lo cual se requiere métodos de
diagnósticos sensibles y específicos. (World Health Organization 1995). El diagnóstico
temprano de Chlamydia es fácilmente tratable evitando la diseminación a otras personas.
(Huneeus, Pumarino 2009). Entre el 5% y 9% de mujeres sexualmente activas son portadoras
asintomáticas y llega a un 28% en las adolescentes. (Pin 2015)
Por eso debido a la gran cantidad de personas que padecen la enfermedad las
Organizaciones de Salud Pública norteamericanas y europeas recomiendan un tamizaje anual de
Chlamydia Trachomatis en menores de 25 años y en personas con factores de riesgo. (Huneeus,
Joesoef 2006)
El impacto de estas infecciones puede deberse a cambios en el comportamiento sexual;
como vida sexual temprana, número de parejas sexuales, la falta de uso de preservativos, y la
falta de información. (Pin 2015).
En caso de presentar síntomas en las mujeres puede ser dolor abdominal, ardor al
orinar, en los hombres puede infectar el epidídimo, puede provocar una infección urinaria
tanto en hombres como en mujeres produciendo una enfermedad inflamatoria pélvica y como
consecuencia la infertilidad o problemas en el embarazo, los niños nacidos de madres infectadas
de Chlamydia pueden padecer infecciones oculares y neumonía. (Martínez 2001).
8
Uno de los países que presenta 4 millones de casos anualmente es Estados Unidos, con
un costo estimado en USD. 2,4 billones lo que le hace un problema de salud pública. (Martínez
1995). Los costos son atribuidos al tratamiento de las secuelas, a menudo irreversibles de la
infección en la mujer, como son la Enfermedad Inflamatoria Pelviana(EIP), los embarazos
ectópicos y la infertilidad, constituyendo la infección de transmisión sexual (ITS) más cara
después de la infección por el VIH.( Martínez 1995)
Es por eso que para el tamizaje de Chlamydia se puede obtener muestras de sangre,
orina, hisopado, la obtención de la misma requiere cuidado ya que influye en la sensibilidad del
diagnóstico. (Martínez. 1995)
Realizar un diagnóstico temprano de Chlamydia es importante siendo fácilmente
tratable y así evitando la diseminación a otras personas. (Huneeus 2009). Entre el 5% y 9%
de mujeres sexualmente activas son portadoras asintomáticas y llega a un 28% en las
adolescentes. (Pin 2015)
Por todos los datos obtenidos es necesario hacer un estudio de Chlamydia Trachomatis
en los jóvenes ya que inician su vida sexual a temprana edad y tienen varios compañeros
sexuales siendo estos algunos de los factores de riesgo
Por tanto el propósito de este proyecto de investigación es determinar la frecuencia de
Chlamydia Trachomatis IgG a través de la técnica de ELISA en los estudiantes de la Facultad
de Ciencias Médicas de la Universidad Central del Ecuador.
1.7 Limitaciones
Entre las limitaciones de este proyecto de investigación es la poca bibliografía que
existe y los escasos estudios realizados, una limitación importante es la falta de tiempo de los
estudiantes por sus diferentes actividades académicas.
9
CAPÍTULO II
2. MARCO TEÓRICO
2.1 Marco legal
Chlamydia Trachomatis es una bacteria gram negativa aerobia, no móvil patógeno del
humano su ciclo vital transcurre en parte interior de las células, pueden adherirse a determinados
epitelios produciendo infecciones. Existen tres especies de Chlamydias patógenas para el
hombre: Chlamydia Trachomatis, que produce infecciones fundamentalmente en los epitelios
genital y urinario, C. Psittaci y C. Pneumoniae, que producen fundamentalmente infecciones
respiratorias. (Hammerschlag 2002)
El presente trabajo analiza el contagio de Chlamydia Trachomatis en los jóvenes con
vida sexual activa siendo este considerado un problema de salud pública que aún no cuenta con
subregistros.
Se considera a C. Trachomatis una bacteria patógena sólo para el hombre, causante de
una enfermedad de transmisión sexual (ETS), la infección se presenta con mayor frecuencia
en mujeres adolescentes y adultas jóvenes, solteras y con conductas sexuales de riesgo, más de
50 millones de casos ocurren en el mundo y aproximadamente 3 millones de casos ocurren en
los Estados Unidos anualmente. (Butler 2005)
Se han realizado estudios poblacionales que han mostrado una prevalencia de 2,6% a
4,74%, mientras que en estudios clínicos, las tasas son aún más altas 5% a 15%. Las infecciones
por C. Trachomatis pueden producir complicaciones ginecológicas; como Enfermedad
Inflamatoria Pélvica (EIP) que se asocia a infertilidad tubaria, embarazo ectópico, dolor pélvico
crónico, complicaciones obstétricas y neonatales. (Miller 2004)
Cualquier persona que ha iniciado su vida sexual o mantenga una vida sexual activa
puede infectarse con Chlamydia, se presenta con mayor frecuencia en los adolescentes y
adultos jóvenes entre 15 a 24 años que tengan compañeros sexuales nuevos o múltiples y que
no acostumbran a utilizar preservativos u otros métodos anticonceptivos de barrera. (Joesoef 2006)
10
Entre 50% y 80% de los portadores de C. Trachomatis carecen de sintomatología
uroginecológica, haciendo difícil su diagnóstico precoz, sin embargo la detección temprana
es muy importante ya que estas infecciones son fácilmente tratables con dosis únicas de
antimicrobianos que previenen secuelas y la diseminación a otras parejas sexuales. (Emans 2005).
Tomando en cuenta el gran porcentaje de personas que atraviesan esta enfermedad
de forma asintomática, las Organizaciones de Salud Pública norteamericanas y europeas
recomiendan el tamizaje de C. Trachomatis anual en todos los menores de 25 años y en personas
con factores de riesgo. (La Montagne 2004)
2.2 Agente
Chlamydia Trachomatis es una bacteria aerobia gram negativa, es parásito obligatorio
intracelular de las células eucariotas al poseer esta característica escapan a menudo del sistema
inmunitario, pertenece al Orden Chlamydial, Familia Chlamydiaceae, una característica
distintiva de las Chlamydias es presentar un ciclo biológico diferente al de todas las bacterias.
El ciclo inicia con el Cuerpo Elemental (CE) o partícula extracelular que es la parte infecciosa
y metabolicamente inactiva, mide 0.2 a 0.4 µm, al cabo de 2 a 3 horas el CE se diferencia en
Cuerpo Reticular (CR) o intracelular, metabolicamente activo mide aproximadamente 1.0 µm,
además Chlamydia trachomatis, es el patógeno bacteriano más prevalente de las Infecciones de
Transmisión Sexual (ITS) a nivel mundial, los últimos datos reportados por el (CDC) establecen
que se producen 3 millones de infecciones nuevas cada año en Estados Unidos, los grupos de
edades en que se registran mayor número de casos oscila entre 15 a 20 años. (Nogales 2007)
El costo de las infecciones por Chlamydia no tratadas y sus complicaciones está
calculado en 2 millones de dólares solo en Estados Unidos. (Frontela 2002)
Alrededor del 85% al 90% de los casos de infección por Chlamydia Trachomatis tanto
en la mujer como en el hombre son asintomáticas y pueden persistir por algunos meses o años.
En la mujer a pesar de la ausencia de síntomas un malestar mínimo puede ser un signo de
infección local, los dos síntomas más comunes son la descarga mucopurulenta desde el cérvix
y una hipertrofia ectópica cervical. La infección en la uretra y en el tracto genital inferior puede
11
causar disuria, descarga vaginal anormal o sangrado post-coital, mientras que la infección del
tracto genital superior (endometritis o salpingitis) pueden manifestarse con un sangrado uterino
intermenstrual y un malestar pélvico, las infecciones por Chlamydia no tratadas en las mujeres
pueden tener severas complicaciones reproductivas que incluyen infertilidad, embarazos
ectópicos y dolor pélvico crónico. Durante el embarazo está asociada a partos prematuros,
rotura prematura de membranas, recién nacidos de bajo peso, muerte neonatal y endometritis
post-parto. (Peipert 2003)
Mientras en el hombre la manifestación clínica más frecuente de infección por Chlamydia
Trachomatis es la uretritis no gonocócica constituyendo entre un 35% al 50% de los casos
de uretritis no gonocócica en hombres heterosexuales. Los signos y síntomas en el hombre
incluyen descarga uretral mucopurulenta, disuria, o prurito uretral. Otros síndromes clínicos
en el hombre incluyen, epididimitis aguda, proctitis aguda, conjuntivitis y síndrome de Riter,
infertilidad masculina, prostatitis crónica y estenosis uretral, estos son posibles resultados de la
infección. La transmisión vertical de Chlamydia Trachomatis se presenta del 60% al 70% en
los hijos de madres infectadas y el riesgo de adquirir conjuntivitis por Chlamydia Trachomatis
en estos neonatos varía entre el 18% al 70%. (Valencia 2000)
Las ETS principalmente, la producida por Chlamydia Trachomatis, puede contaminar
y producir una infección al recién nacido al pasar por el canal del parto, infección ocular o
respiratoria, existen reportes que mencionan que entre el 22 al 50% de los niños nacidos de
una madre infectada desarrollará conjuntivitis de inclusión y entre un 10 a 20% una neumonía.
(Zelaya-Trebejo 2001)
En el Ecuador no existen datos o estudios de prevalencia de ETS producidas por
Chlamydia Trachomatis, al ser reportada como uno de los agentes causales más importantes de
ETS en otros países se lo debe considerar como patógeno importante en la población investigada.
La introducción de los métodos de biología molecular en los laboratorios de microbiología
clínica es un gran apoyo a la hora de obtener diagnósticos sensibles y específicos en el menor
espacio de tiempo posible. Estos métodos no sustituyen ninguno más bien complementan los
métodos microbiológicos tradicionales que en conjunto dan resultados más fiables y eficaces.
(Nogales 2007)
12
2.3 Estructura
Todas las Chlamydias tienen un ciclo reproductivo común pueden encontrarse como
cuerpo elemental o cuerpo reticulado. El cuerpo elemental (CE), que es la forma infecciosa
de casi 0.3um de diámetro con nucleoide electrodenso, sus proteínas tienen fuertes enlaces
cruzados, poseen gran afinidad por las células epiteliales del huésped en las cuales penetran
con rapidez es probable exista receptores, mecanismos de entrada y adhesinas incluyendo la
proteína principal de la membrana externa (MOMP) a la MOMP glucosilada y otras proteínas
de superficie. Los mecanismos por los cuales se piensa que la bacteria penetra a la célula
huésped son variados: endocitosis mediado por receptores dentro de cavidades cubiertas de
clatrina y pinocitosis a través de cavidades sin cubierta. (Morse 2008)
Después de la entrada a la célula huésped los puentes disulfuro de las proteínas de
membrana CE dejan de presentan enlaces cruzados y el cuerpo elemental se reorganiza
convirtiéndose en un Cuerpo Reticulado (CR) que es la forma replicativa, mide 0.5 a 1.0um,
crece y se divide mediante fisión binaria, posteriormente la vacuola entera se llena de CE
derivados de los CR para así formar una inclusión citoplasmática, los CE recién formados
pueden ser liberados por la célula huésped para infectar células nuevas, el ciclo de desarrollo
toma de 24 a 48 horas (Morse, Butel 2008)
La pared celular externa de la Chlamydia es semejante a la pared de las bacterias gram
negativas, la cual posee una cantidad alta de lípidos, es rígida pero no posee el contenido típico
de peptidoglucano. (Morse, Brooks 2008)
En los cuerpos elementales y reticulados se encuentra el ADN y ARN, los cuerpos
reticulados contienen casi cuatro veces más ARN que ADN en tanto que los cuerpos elementales
tienen cantidades casi iguales de ambos y la mayor parte de su ADN se concentra en el nucleoide
central, mientras que la mayor parte de su ARN se encuentra en los ribosomas. (Morse 2008)
13
2.4 Características bacterianas
Hace muchos años la Chlamydia fue considerada como un virus debido a que es un
parásito obligatorio intracelular de las células eucariotas y puede atravesar filtro de 0,45 µm,
posee un ADN, ARN y ribosomas de diferente tamaño diseminado por el citoplasma por lo
tanto sintetizan sus propias proteínas y ácidos nucleicos, la célula de Chlamydia Trachomatis
está limitada por una membrana externa y una interna la cual se asemeja a la pared celular de
las Gram negativas. La membrana presenta proteínas extra celulares ricas en cisteína, las cuales
están unidas en forma cruzada mediante puentes disulfuro en los CE (Cuerpos Elementales)
para proveer una integridad estructural de resistencia frente a situaciones de estrés mecánico y
osmótico, los CR (Cuerpos Reticulares) son frágiles en comparación con los CE. (Ostos 2003)
También presenta antígenos específicos de especie que inducen la fagocitosis, no tienen
actividad metabólica y no pueden replicarse fuera de las células huésped. Su membrana externa
está constituida por los Lipopolisacáridos (LPS), la proteína mayor de la membrana externa
(MOMP), adhesinas y el heparan sulfato, el LPS contiene el antígeno O, su estructura es similar
al del LPS rugoso que se encuentra en algunas bacterias entéricas, LPS y la MOMP son proteínas
que activan la aparición de anticuerpos. En su lugar la resistencia de la pared externa se debe
a un retículo de puentes disulfuro formado entre los aminoácidos cisteína y metionina, de los
cuales son particularmente ricas las proteínas de la membrana exterior, contiene D-alanina y
carbohidratos además de péptidos enlazados a grupos sulfidrilo. (Cervantes 2009)
Las proteínas ricas en cisteína incluyen, la proteína MOMP presente en la membrana
externa, tiene síntesis atenuada y su casi exclusividad intracelular puede ayudar a proveer una
relativa invisibilidad de la vigilancia inmune. La MOMP se expresa en la envoltura del cuerpo
elemental, tiene un peso molecular de 40 kDa, constituye el 60% del total de las proteínas de la
membrana externa. (Wiley 2004)
La transformación de CR a CE está acompañada por las síntesis de 4 proteínas, la
omp2 de membrana externa rica en cisteína, la omp3 y la histona h1 como proteínas Hc1 y
Hc2, estas proteínas unen al cromosoma chlamydial y RNAm mediante la condensación del
ácido nucleico que inhibe la transcripción y transducción. (Wiley 2004) La proteína Omp2 es
la segunda más importante de la pared celular, se encuentra en el espacio periplásmico, con
14
un peso molecular de 69 kilo Daltons (kDa) codificada por el gen omp2, proporciona a las
Chlamydias integridad semejante a la del péptidoglucano. Los CR no contienen esta proteína
de 60 kDa, sólo se encuentra en el CE por poseer restos azufrados que le confiere resistencia
y rigidez. La Omp3 es una lipoproteína codificada por el gen omp3 con un peso molecular
12-15 kDa es una proteína hidrofílica, que sirve de enlace entre la Omp2 y los fosfolípidos
de la membrana externa y ayudan en la adhesión a las células del huésped, los CR no tiene
esta proteína. Omp2 y Omp3 están unidas por puentes disulfuro, junto con la MOMP forman
una estructura compleja supra molecular que provee al CE una envoltura con alta rigidez y le
confiere estabilidad osmótica que no se ha visto en los cuerpos reticulares. (Cervantes 2009)
La Chlamydia se adhiere a la base de los microvellos de la célula eucariota por la
interacción de un componente proteico de la célula huésped y de allí se interna por un mecanismo
de endocitosis sobre la cual la Chlamydia elimina vesículas maduras dentro de una vacuola
parasitófora especializada o una inclusión que no es fusogénica con las membranas endosómicas
y lisosómicas, correspondiendo a la teoría del mecanismo de fagocitosis tipo “zipper” en el cual
se requiere un contacto directo entre receptores celulares y proteínas bacterianas. La segunda
teoría se inclina hacia un mecanismo de endocitosis regulado por vesículas recubiertas por
clatrina por una vía similar a la que regula la endocitosis de macromoléculas en la célula, y
posiblemente un híbrido de los dos mecanismos es el responsable de la entrada de la Chlamydia.
(Gerard 2002)
Por microscopia electrónica, se ha observado en la membrana externa de las Chlamydias
unas proyecciones hemisféricas semejantes a cilios especializados de superficie cuyo diámetro
es de aproximadamente de 40 nm, su altura de 30 nm y la distancia entre cada una de ellas de
25nm. Las proyecciones están separadas por pequeñas depresiones con bases planas, al parecer
se encuentran en el cuerpo elemental y le sirven para adherirse a las células huésped. También
existen proyecciones puntiagudas que son formas intermedias entre CE y CR, se originan debajo
de las depresiones de la membrana plasmática y se extienden a través del espacio periplásmico
de la membrana externa, esto sugiere que estas púas podrían ser conexiones entre la célula
huésped y la Chlamydia.
15
Las Chlamydias poseen antígenos específicos que son proteínas de membrana externa,
se pueden detectar anticuerpos contra estos antígenos con la técnica de fijación de complemento,
inmunofluorescencia y otros. (Ostos 2003)
2.5 Inmunidad para Chlamydia Trachomatis
La Chlamydia es un potente inmunógeno que estimula respuestas inmunes humoral
y celular, el resultado de la infección depende de la interacción y el balance de las citoquinas
secretadas por los linfocitos activados las alteraciones inmunes inducidas por la Chlamydia
pueden ayudar para su sobre vida en el huésped infectado e inducir infecciones persistentes.
(Fehlner 2002)
Las Células T juegan un rol importante en el desarrollo de la inmunidad adaptativa
a la infección por Chlamydia Trachomatis y el interferón gamma (IFNγ) el cual cumple la
función protectora, el mecanismo por el cual el INFγ controla la infección in vitro es por una
interferencia con la capacidad replicativa de Chlamydia Trachomatis. El tratamiento de las
células epiteliales con niveles altos de INFγ inhibe completamente el crecimiento, mientras
que concentraciones menores inducen el desarrollo morfológico de CR aberrantes que se han
implicado en una persistencia de la enfermedad. (Sánchez 2009)
El IFNγ, un producto típico de las células Th1 ha sido descrito como el factor más
imponente en la defensa contra Chlamydia, mientras que la susceptibilidad a la enfermedad
ha sido relacionada al aumento en la expresión de inter leuquina IL-10 como marcador de la
activación de las células Th2. (Fehlner,2002)
El ciclo vital de las chlamydias se caracteriza por presentar una partícula infectante
o corpúsculo elemental que penetra en la célula y forma una vacuola que rápidamente se
transforma en corpúsculo inicial, este se divide formando una verdadera colonia dentro del
citoplasma después de 24 a 48 horas, esta inclusión invade casi toda la célula envolviendo al
núcleo. (Prieto 2006)
Estos microorganismos producen en su pared dos tipos de antígenos, los antígenos de
grupo, de naturaleza polisacárida y los antígenos específicos de tipo, que permiten separar
16
las dos clases de Chlamydias: Chlamydia Trachomatis, Chlamydia Psittaci. Algunos datos
sugieren que las infecciones del tracto genital confieren por lo menos inmunidad parcial frente
a la reinfección. (Sánchez 2009)
Mientras a nivel celular los polimorfonucleares destruyen a Chlamydia Trachomatis, los
macrófagos permiten su proliferación en su interior, las Chlamydias estimulan la producción de
citoquinas cuya consecuencia es la producción de interferón-g, este estimula a los macrófagos
e inhibe en ellos la replicación de las Chlamydias, aunque sobreviven en su interior, se cree
que éste sería un mecanismo de persistencia de la infección “in vitro” Chlamydia Trachomatis
induce una infección persistente. Si estas infecciones persistentes ocurren en el hombre, los
cambios cíclicos en las citoquinas inhibidoras, la replicación de las Chlamydias, la producción
de antígenos y la respuesta de hipersensibilidad podrían explicar la inflamación crónica y la
cicatrización, en ocasiones asociada con las infecciones por Chlamydias. (Prieto 2006)
2.5.1 Respuesta inmune humoral
Al presentar una infección genital por Chlamydia trachomatis se produce una fuerte
reacción local con acumulación de polimorfonucleares y producción de anticuerpos séricos
y locales, en el suero podemos encontrar una respuesta convencional, detectando IgM una
semana después de la infección e IgG otra semana más tarde, las IgG son las que van a persistir
durante años, aunque en algunos casos descienden a niveles no detectables al cabo de dos años
es por eso que esta inmunoglobulina no se correlaciona con la evolución de la infección, tiene
un valor diagnostico pero no pronóstico. (Prieto 2006)
Varias de las personas presentan anticuerpos IgG frente a Chlamydia Trachomatis,
siendo más frecuente en los pacientes de las clínicas de enfermedades de transmisión sexual,
debido a que dicha infección es silenciosa, su diagnóstico puede ser malo o tardío. (Prieto
2006)
En caso de una reinfección es dudoso el valor de anticuerpos séricos, aunque “in vitro”
éstos pueden neutralizar la infectividad. Si la infección es por el mismo serotipo, no se detectar
IgM, se encuentra una producción local de IgA, especialmente en cérvix. (Gerard 2002)
17
La evaluación serológica es importante en el diagnóstico del linfogranuloma venéreo.
La prueba de fijación del complemento, mide los anticuerpos contra los antígenos de grupo
(lipopolisacáridos), el mayor problema que presenta es su carencia de especificidad. (Costa
2004)
La presencia de anticuerpos IgM para Chlamydia es infrecuente en adultos con infección
del tracto genital, mientras que la prevalencia de anticuerpos IgG para Chlamydia es lta en
adultos que han iniciado su vida sexual o sexualmente activos, incluyendo aquellos que no
tienen una infección genital y se puede deber a una infección previa. (Zapata 1997)
2.5.2 Respuesta inmune celular
Aun no se conoce bien este tipo de respuesta, la respuesta inmune puede limitarse a resolver
una infección aguda, mientras que en otros casos resulta una infección crónica y persistente, se
desconoce los factores que determinan una u otra circunstancia La infección genital produciría
una inmunidad protectora parcial y de corta duración. (Prieto 2006)
2.6 Patogenia
C. Trachomatis infecta preferentemente el epitelio columnar de las mucosas de vías
respiraorias, genitales y los ojos, esta infección induce inmunidad, pero a menudo persiste
durante meses o años, si el paciente no recibe tratamiento. (Roca 2007)
Las infecciones pueden presentar algunos síntomas o ser asintomáticas como por ejemplo
la afección de las Trompas de Falopio provocan inflamación crónica y desestructuración de las
mismas llegando a ocasionar infertilidad. La etiopatogenia de este proceso no es bien conocida,
aunque se cree que podría estar relacionado con una reacción autoinmune desencadenada por
determinadas proteínas del germen. (Roca 2007)
18
2.7 Manifestaciones clínicas
Entre las manifestaciones clínicas producidas por Chamydia en los genitales
tenemos:(Roca 2007)
2.7.1 Uretritis no gonocócica (UNG)
Es un diagnóstico de exclusión tradicionalmente aplicado a las uretritis que ocurren
en los varones y que no están producidas por N. gonorrhoeae. El síntoma fundamental de
la uretritis es la presencia de exudado uretral, en muchos pacientes dicho exudado sólo es
perceptible al levantarse por las mañanas, otros síntomas son la disuria y el prurito en el meato
uretral el mismo que suele estar eritematoso y suele ser doloroso al tacto, se presenta en hasta
el 10% de varones jóvenes sexualmente activos (Simpson 2004)
2.7.2 Síndrome uretral en mujeres
C. Trachomatis puede producir en las mujeres un cuadro de uretritis, similar al de
los hombres, con una sintomatología similar a la cistitis, consistente en disuria, polaquiuria,
tenesmo vesical y piuria, en ausencia de los gérmenes que habitualmente ocasionan cistitis.
(Falk 2005)
2.7.3 Epididimitis
El principal agente etiológico de esta es C. Trachomatis, se manifiesta en varones
heterosexuales menores de 40 años sexualmente activos y en varones homosexuales la
epididimitis está producida muchas veces por bacilos Gram negativos, especialmente coliformes,
transmitidos por medio del coito anal. Entre los síntomas de la epididimitis producida por C.
Trachomatis se presenta dolor escrotal unilateral, fiebre, aumento de tamaño y dolor en el
epidídimo. (Drury 2004)
19
2.7.4 Proctitis
La proctitis causada por C. Trachomatis se presenta especialmente en homosexuales
que practican el coito anal receptivo y en mujeres heterosexuales que practican el coito anal.
Los síntomas más frecuentes son el dolor perianal, tenesmo rectal y emisión de secreciones
mucosas, ocasionalmente sanguinolentas por el ano, al realizar la tinción de Gram de estas
secreciones muestra la presencia de leucocitos, mientras que la anoscopia pone de manifiesto
una ligera inflamación que afecta al ano y a la zona más distal del recto. (Weir 2005)
2.7.5 Cervicitis mucopurulenta
La cervicitis por C. Trachomatis es un proceso generalmente asintomático muy frecuente
en mujeres sexualmente activas. Al realizar el examen citológico muestra un predominio de
neutrófilos, pero también puede observarse un infiltrado inflamatorio compuesto por linfocitos,
plasmocitos e histiocitos, y presencia de exudado mucopurulento endocervial de color
amarillento, en el que se detectan leucocitos con la tinción de Gram (Falk 2005)
2.7.6 Enfermedad pélvica inflamatoria
Alrededor del 50% de casos de enfermedad pélvica inflamatoria (EPI) son producidos
por C.Trachomatis, esta enfermedad se produce como consecuencia de la diseminación de
microorganismo por todo el aparato genital femenino entre sus manifestaciones está el dolor
hipogástrico y metrorragias. A partir de una cervicitis se producen sucesivamente endometritis,
salpingitis y peritonitis pélvica. (Wiesenfeld 2005)
20
2.7.7 Linfogranuloma venéreo
Es una infección crónica de transmisión sexual, pero también existen casos de contagio
por contacto personal, a través de fómites o tras la exposición al germen en el laboratorio, el
contagio de esta enfermedad ocurre con mayor frecuencia en personas menores de 30 años
y que han iniciado su vida sexual. Su incidencia es baja en los países desarrollados y está
disminuyendo en todo el mundo, pero sigue siendo endémica en muchos países, especialmente
de África, Asia y América. (Spaargaren 2005)
A partir de los 3 días a 3 semanas después del contagio se produce una infección
genital primaria, consistente en una pequeña lesión vesicular, papular o ulcerada, rodeada de
un halo eritematoso y no dolorosa, se localiza en los genitales externos del hombre o de la
mujer. La mayor parte de las veces esta lesión pasa inadvertida, especialmente en las mujeres,
y se resuelve espontáneamente, sin dejar cicatriz, en unos cuantos días. Esta infección primaria
puede ocurrir, aunque con mucha menor frecuencia, en otros lugares como la uretra, el cuello
del útero o el recto. (Mabey 2002)
Desde el lugar de la infección primaria el microorganismo pasa a los linfáticos
regionales, de modo que de 2 a 12 semanas después del contagio, acaba ocasionando una
linfadenitis, generalmente en la región inguinal, consistente en el aumento progresivo del
tamaño de los ganglios linfáticos, la piel que recubre a las zonas afectadas suele estar inflamada
y adherida a los tejidos subyacentes, y en la misma acaban apareciendo fístulas que drenan
material purulento. Varios meses más tarde, aun sin tratamiento, el proceso tiende a regresar,
y la inflamación finalmente desaparece, pero deja considerables cicatrices, muchas veces de
aspecto nodular. (Spaargaren 2005)
Durante la fase de linfadenitis se presenta síntomas generales, como fiebre, cefalea,
anorexia y dolor difuso. En ocasiones también ocurren conjuntivitis, artritis, meningitis
aséptica, encefalitis, hepatitis o eritema nudoso. (Mabey 2002)
21
2.8.1 PCR
La técnica se fundamenta en la replicación de hebras de ADN como propiedad natural
de la ADN-polimerasa para lo cual se emplea ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas
para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación, luego
se deja que vuelvan a unirse a polimerasas para que vuelvan a duplicarlas. En el proceso de
detección de un agente infeccioso por amplificación genética se desarrolla normalmente en 3
etapas (Costa 2004)
Primera etapa: Consiste en la extracción y purificación de los ácidos nucleicos del
microorganismo de la muestra biológica.
Segunda etapa: La amplificación de un segmento seleccionando del genoma
del microorganismo mediante reacción en cadena de la polimerasa, es decir, la PCR
propiamente dicha.
Tercera etapa: Se lleva a cabo la detección de los fragmentos amplificados en la
PCR (amplicones) por electroforesis en gel de agarosa y tinción con bromuro de etidio, o
mediante hibridación con sondas específicas. En general todo este proceso suele durar de
1 a 4 horas. (Costa 2004)
Sensibilidad EspecificidadCultivo sobre células de Mac Coy 80% 100%Citología característica por Giemsa 71% 67%Enzimo inmuno ensayo 70% 95%Inmunofluorescencia Indirecta 57% 81%
Reacción en cadena de la Polimerasa 88% 100%
Fuente: Felicita M 2010
2.8 Método diagnóstico
Para el diagnostico de Chlamydia Trachomatis existen algunos métodos desde los
clásicos hasta las nuevas técnicas moleculares de diagnóstico las mismas que buscan sensibilidad,
especificidad y rapidez en el resultado.
Figura N° 1 Comparativa de Métodos Utilizados para Diagnóstico de Chlamydia Trachomatis
22
2.8.2 Detección de antígenos.
Podemos distinguir dos grupos de técnicas, las basadas en la tinción directa de
las muestras con anticuerpos monoclonales marcados con fluoresceína (DFA) y los
enzimoinmunoensayos (EIA).
Se basan en el uso de anticuerpos específicos dirigidos principalmente frente al antígeno
MOMP y en menor medida frente al LPS y tiene especificidad cercana al 100%, la sensibilidad
es del 85-90%, respecto al cultivo y no requiere un medio de transporte específico, entre sus
desventajas podemos mencionar que la interpretación de los resultados es subjetiva y requiere
personal experimentado, baja reproducibilidad y el volumen de muestras no puede ser elevado.
La técnica de EIA se basa en la detección del antígeno a través de una señal colorimétrica
generada por la reacción del antígeno con el anticuerpo. Por lo general son muy utilizadas por
ser técnicas sencillas y automatizadas por lo que son de elección en la mayoría de laboratorios
que no pueden implementar las técnicas moleculares pero con un elevado número de muestras.
(Alonso 2012)
2.8.3 Cultivo en línea celular.
Hasta finales del siglo XX, el cultivo celular ha sido considerado gold standard para
el diagnóstico de C. Trachomatis su principal ventaja es la posibilidad de realizar estudios
de resistencia a antimicrobianos y entre sus desventajas son difíciles de estandarizar, son
técnicamente exigentes, requieren varios días de incubación (3-7 días). (Galán 2012)
2.8.4 Inmunofluorescencia Directa.
Las nuevas técnicas de detección de antígenos ya sea por Inmunofluorescencia Directa
(IFD) o ELISA han facilitado enormemente el trabajo de diagnóstico. Al respecto la IFD es
una técnica que depende del antígeno que se emplee. Así existen los antígenos LPS o las OMP
23
(proteínas de membrana externa), siendo estas últimas las más específicas. La técnica requiere
de personal especializado en microbiología para poder interpretar correctamente los cuerpos
de inclusión, y además un microscopio de fluorescencia que no tienen todos los hospitales. La
sensibilidad de la IFD está alrededor del 70% y la especificidad del 90%. (Fernández 2012)
2.8.5 ELISA
Es un imnunoensayo basado en la reacción antígeno (con la que viene marcado el
pocillo) y anticuerpo (presente en la muestra)
Los anticuerpos no unidos por reacción con el antígeno son eliminados a través de
un proceso de lavado, posteriormente la globulina anti-humana reacciona con el complejo
antígeno-anticuerpo, y la que no se une es eliminada nuevamente por lavados, la unida
reacciona con el sustrato (TMB), dando como resultado una reacción de color azul, que cambia
a amarillo tras la adición de la solución stop. (Fernández 2007)
Características:
• Todos los reactivos a excepción de la solución de lavado vienen listos para su uso.
• No se precisa dilución previa de la muestra.
• Las soluciones de dilución de muestras y de conjugado están coloreadas como ayuda a
la realización de la técnica.
• Los pocillos para cada prueba son individuales y no son reusables.
24
2.9 Epidemiologia
Chlamydia Trachomatis es el patógeno más prevalente en las ITS en el mundo occidental
con una prevalencia del 2% - 35 % en mujeres embarazadas a nivel mundial, y es el agente
etiológico que subclínicamente menos se diagnostica. La Chlamydia actualmente se considera
como el patógeno de trasmisión sexual más frecuente. La salpingitis aguda constituye una
complicación más seria por Chlamydia en la mujer y es responsable de la esterilidad por
obstrucción tubárica en mujeres en edad fértil. (Kinghorn 2000).
La OMS reporta una prevalencia global del 4.4% al 6.6%, en EE.UU, del 3 al 11%, en
Europa del 2 al 9% y en América Latina del 6 al 40%. (Zemilman 2006)
Otras de las complicaciones son la enfermedad inflamatoria pélvica, producción de embarazos
ectópicos e infertilidad, constituyendo la infección de transmisión sexual más cara después
del VIH. La OMS indica que 90 millones de casos nuevos aparecen cada año en el mundo;
La infección ha aumentado en las últimas dos décadas, ocurriendo la mayor prevalencia en
adolescentes de 15 a 20 años. Es un problema de salud de la mujer, por el daño reproductivo
que causa, la proporción de mujeres contaminadas es de 6 a 1en relación a los hombres.
Fuente: Alonso, Galán 2012.
Ventajas y Desventajas de las Técnicas de Diagnóstico Descritas para C.
25
Asímismo, se sabe que los nuevos casos de infección por Chlamydia son más o menos cuatro
veces más que la suma de los casos nuevos de herpes genital y papiloma genital (Paavonen
1999).
En los EE.UU se estima cada año 4 millones de nuevos casos y 50.000 mujeres quedan
estériles. Aunque la uretritis no gonocócica (UNG) no es debida solamente a chlamydia, se le
atribuye en los países Europeos y en EE.UU ser la causa de un 50% de UNG y responsable
de un 45% de los casos de epidídimo-orquitis agudas. Se calcula que un 7% de los hombres
asintomáticos se les puede detectar Chlamydia Trachomatis, mientras que las mujeres son más
asintomáticas que los hombres, con un 14%. En estudios realizados en Inglaterra, se calculó
que el riesgo de infección es pequeño con un 3% cuando se tiene en el caso de las mujeres,
un solo compañero sexual, pero significativamente más grande (33%) cuando se tiene 2 o
más compañeros sexuales en un mes. Respecto al impacto económico de la infección por C.
Trachomatis, se calcula que los costos directos e indirectos en EE.UU se acercan a los 2.4
billones de dólares (Arango 2001).
La prevalencia de la infección por Chlamydia varía de acuerdo a la edad, comportamiento
sexual y clase social. En mujeres jóvenes con cervicitis se ha estimado que un 28% de este
grupo pueden desarrollar complicaciones como la enfermedad pélvica inflamatoria, además
las mujeres que presentan cervicitis pueden evolucionar a salpingitis, es la infertilidad, cuya
incidencia oscila entre el 13% - 75% después de varios episodios de infección por Chlamydia
Trachomatis. Es así como se ha demostrado con mujeres con problemas de infertilidad,
especialmente a nivel de oclusión distal ovárica, poseían altos niveles de anticuerpos anti
chlamydia. También la salpingitis incrementa de 7 a 10 veces el riesgo del embarazo ectópico.
En un programa de screening en clínicas de planificación familiar en el norte y centro de
California, se encontró que entre un 5.5 a 22.5% de mujeres tenían positividad para Chlamydia.
La detección del antígeno de Chlamydia Trachomatis se debe implementar como técnica
rutinaria en toda sospecha de ITS y en mujeres embarazadas sometidas a control ginecológico.
Algunos asocian las infecciones por Chlamydia con displasia cervical y con el carcinoma
vulvar. Adicionalmente, C. Trachomatis es considerada como un facilitador del ingreso del
virus de inmunodeficiencia humana (VIH) y del virus papiloma humano (VPH) al epitelio
26
cervical y ha sido implicada como posible factor en la etiología del cáncer cervical debido a
que los virus se adquieren más fácilmente en presencia de células inflamatorias en el tracto
genital. (De Lucena 2008)
2.10 Técnica ELISA
2.10.1 Fundamento
Esta técnica se basa en el uso de antígenos o anticuerpos marcados con una enzima, de
modo que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunológica como enzimática. Al
estar marcado uno de los componentes (antígeno o anticuerpo) con una enzima e insolubilizado
sobre un soporte (inmunoadsorbente) la reacción antígeno-anticuerpo que se forma quedará
inmovilizada y fácilmente revelada mediante la adición de un substrato especifico que al actuar
la enzima producirá un color perceptible a simple vista y cuantificable mediante el uso de un
espectrofotómetro.
Pasos generales de un ELISA.
1. Tapizado del pocillo con el antígeno o anticuerpo.
2. Adición de la muestra problema con la mezcla de antígenos o anticuerpos.
3. Unión del antígeno o anticuerpo específico al anticuerpo o antígeno tapizado en el
pocillo
4. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de antígeno o anticuerpo no unido
5. Adición del anticuerpo secundario marcado con la enzima
6. Unión del anticuerpo secundario al antígeno o anticuerpo
7. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de enzima no unida
8. Adición del substrato
9. Unión del substrato a la enzima
10. Desarrollo del color
11. Adición de solución stop
27
Existen varios tipos de ELISA:
Anticuerpos marcados:
• ELISA Directo
• ELISA Indirecto
• ELISA sándwich
• Doble (DAS)
• Heterólogo (HADAS)
Antígeno marcado
• ELISA competitivo
2.10.2 ELISA Directo
Permite la detección del antígeno con un anticuerpo específico conjugado con una
enzima como sistema de marcaje. Consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble (“tapizado”) de antígenos específicos. Luego lavar para
eliminar los antígenos no fijados.
• Adicionar los anticuerpos marcados (“conjugados”) con una enzima, si los anticuerpos
reaccionan con los antígenos, el complejo quedará solubilizado.
• Seguidamente lavar para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Posteriormente adicionar un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima
marcadora y luego de su periodo de incubación adicionar la solución stop.
• Finalmente realizar la lectura mediante un espectrofotómetro
2.10.3 E.L.I.S.A Indirecto
Se utiliza para la detección de anticuerpos y consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de antígenos específicos para los anticuerpos que serán
estudiados, lavar para eliminar los antígenos fijados deficientemente o no fijados.
• Adicionar el suero problema, de esta manera reaccionarán los anticuerpos
28
específicamente con los antígenos fijados al soporte, luego lavar para eliminar los
anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Después adicionar el anti-anticuerpos conjugados con una enzima, los cuales reaccionan
con los anticuerpos específicos añadidos anteriormente y que se encuentran fijados a los
antígenos., lavar para eliminar los anti-anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Posteriormente adicione el substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima
marcadora, después coloque la solución stop.
• Realice la lectura con la ayuda de un espectrofotómetro.
2.10.4 ELISA Sándwich “DAS” (Double Antibody Sandwich).
Consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de anticuerpos específicos del agente patógeno a detectar.
Lavar para eliminar los anticuerpos no fijados.
• Adicionar la muestra problema, de tal forma que si está presente el antígeno, reaccione
específicamente con los anticuerpos fijados al soporte, lavar para eliminar los antígenos
que no hayan reaccionado y los restos de la muestra no fijados.
• Luego adicionar los anticuerpos específicos del antígeno a detectar (deben tener un epítopo
diferente de los anticuerpos con los que se han tapizado el soporte) conjugados con una
enzima, los cuales reaccionan con los antígenos añadidos con la muestra problema y que
se encuentran fijados a los anticuerpos, lavar para eliminar los anticuerpos marcados
que no hayan reaccionado.
• Adicionar un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora, luego colocar
la solución stop.
• Hacer la lectura mediante un espectrofotómetro
29
2.10.5 ELISA Sándwich “HADAS”.
Consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de anticuerpos específicos del agente patógeno a detectar,
lavar para eliminar los anticuerpos fijados deficientemente o no fijados.
• Adicionar el suero de la muestra a examinar, de tal forma que si está presente el
antígeno, reaccionará específicamente con los anticuerpos fijados al soporte, lavar para
eliminar los antígenos que no hayan reaccionado y los restos de la muestra no fijados.
• Adicionar anticuerpos específicos del antígeno a detectar (deben tener un epítopo
diferente de los anticuerpos con los que se han tapizado el soporte), los cuales
reaccionan con los antígenos añadidos con la muestra problema y que se encuentran
fijados a los anticuerpos. Lavar para eliminar los anticuerpos que no hayan reaccionado.
• Adicionar anticuerpos conjugados con una enzima anti-anticuerpos empleados
anteriormente, lavar para eliminar los anti-anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
• Adicionar un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora y luego
colocar la solución stop.
• Realizar la lectura con un espectrofotómetro.
2.10.6 ELISA Competitivo.
Consta de las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble de anticuerpos específicos del agente patógeno a detectar.
Lavar para eliminar los anticuerpos no fijados.
• Adición en concentración conocida de una mezcla de antígenos del anticuerpo
utilizado anteriormente, marcados con una enzima y antígenos
desconocidos objeto de estudio. Paralelamente, añadir únicamente antígenos del
30
anticuerpo usado en el paso anterior, marcados con una enzima. Lavar para eliminar los
antígenos que no hayan reaccionado.
• Adicionar un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora. Colocar la
solución stop.
• Realizar la lectura mediante un espectrofotómetro del producto final coloreado de ambas
pruebas y comparar los resultados. Si las lecturas de ambas pruebas son análogas, el antígeno
estudiado no tienen nada que ver con los anticuerpos empleados para tapizar el soporte.
• Si hay diferencia en las lecturas de ambos pocillos, el antígeno estudiado, está relacionado
serológicamente con el anticuerpo empleado para tapizar el soporte y la diferencia de densidad
óptica, es proporcional a la concentración del antígeno problema en la muestra.
La fase sólida debe ser de fácil manejo y reproducibilidad de la unión de antígenos o
anticuerpos sobre su superficie. Las microplacas de 96 pocillos y un volumen de 350μL son
especialmente ventajosos para procesar un elevado número de muestras y una vez tapizadas,
el material inmovilizado permanece reactivo mucho tiempo siempre que se mantenga seco y a
baja temperatura. Normalmente se utilizan microplacas de poliestireno de fondo plano.(Cultek
2006)
2.11 Ventajas del ELISA
• Versátil
• Ahorro de tiempo
• Es de gran sensibilidad, especificidad, sencillo y reproducible
• Puede detectar sustancias en nanogramos y picogramos
2.12 Inmunoglobulinas
Los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunológico para atacar a los
antígenos, como las bacterias, los virus y los alérgenos (Ingraham 412).
31
El cuerpo genera diferentes inmunoglobulinas para combatir cada antígeno. Los cinco
tipos de anticuerpos son los siguientes: (Madigan, Martinko, Parker 2003)
Inmunoglobulina A (IgA), presente en grandes concentraciones en las membranas
mucosas, particularmente en las paredes internas de las vías respiratorias y el tracto
gastrointestinal, como también en la saliva y las lágrimas.
Inmunoglobulina G (IgG), el tipo de anticuerpo más abundante en los líquidos
corporales. Brinda protección contra las bacterias y las infecciones virales.
Inmunoglobulina M (IgM), se encuentra principalmente en la sangre y en el líquido
linfático. Es el primer anticuerpo que el cuerpo genera para combatir una infección.
Inmunoglobulina E (IgE), se la asocia principalmente con las reacciones alérgicas. Se
encuentra en los pulmones, la piel y las membranas mucosas.
Inmunoglobulina D (IgD), existe en pequeñas cantidades en la sangre y es el anticuerpo
del que menos conocimiento se tiene.
Por lo general tanto la IgA como la IgG y la IgM se miden simultáneamente. Al
evaluarse juntas, le brindan al médico información importante sobre el funcionamiento del
sistema inmunológico, especialmente en lo relacionado con las infecciones y las enfermedades
autoinmunes
2.13 Tratamiento
La Chlamydia se trata con antibióticos. El tratamiento antibiótico recomendado es la
doxiciclina, dos dosis diarias durante siete días o la azitromicina en una única dosis. Se pueden
utilizar otros medicamentos alternativos, pero no son tan eficaces como la azitromicina y la
doxiciclina. Las personas en tratamiento para la Chlamydia no deben tener relaciones sexuales
durante siete días después de una terapia de dosis única (azitromicina) o hasta haber completado
los siete días de antibióticos (doxiciclina). Los pacientes pueden ser infectados nuevamente si
sus compañeros sexuales no reciben tratamiento.
32
CAPÍTULO III
3. METODOLGÍA
3.1Tipo de Estudio
El presente trabajo de investigación será de tipo bibliográfico, documental y de campo.
A continuación se dará a conocer cada una de las especificaciones.
• BIBLIOGRÁFICA: Se sustentara en la base teórica de la investigación, mediante
consultas a fuentes bibliográficas, textos especializados, entre otros como fuentes informáticas
e internet.
• DOCUMENTAL: La información necesaria para los objetivos propuestos en este trabajo
de investigación se obtendrá mediante revistas, folletos, trípticos, que nos orienten en la
concreta valoración del paciente
• OBSERVACIÓN: Debido a que se evaluara y se determinara los niveles de IgG en los
estudiantes se utilizara la observación como técnica para obtener sus resultados una vez
procesado.
3.2 Nivel de Investigación
Este estudio tendrá un nivel observacional de cohorte transversal
Técnicas e Instrumentos de Investigación
La técnica de toma de muestra y ELISA se realizó aplicando normas Bioéticas, controles
de calidad, calibraciones para determinar el nivel de concentración de IgG en el laboratorio de
Genética de la Facultad de Ciencias Médicas.
33
3.3 Universo y Muestra
3.3.1Universo
Para la realización de la investigación sobre “DETERMINACION DE IgG
CONTRA CHLAMYDIA EN ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA DE LA
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR” se tomó como universo a todos los estudiantes
de la Facultad.
3.3.2 Muestreo
La muestra fue de 140 Estudiantes de la Facultad de Medicina obtenido por muestreo aleatorio simple de universo finito
Criterios de inclusión
Ser estudiante de la Facultad de Medicina No estar tomando corticoides
Criterios de Exclusión
Tener enfermedad viral aguda. Estar tomando inmunodepresores.
3.4 Técnica e Instrumento de Recolección de Datos
3.4.1 Técnica
Se utilizó Kit comercial para IgG ELISA Inmuno ensayo enzimático para la determinación cuantitativa de Ig G en suero y plasma humanos, Marca DIA PRO In control EIA test de Elisa IgG para chlamydia Trachomatis
34
3.4.2 Procedimiento de Ensayo
1. Equilibrar todos los materiales y reactivos preparados a la temperatura habitación
antes de su uso.
2. Añadir 100 ul de congujado * en el NSB (no específica vinculante) pozos. (* Utilice
el mismo diluyente utilizado para elaborar normas en la sección 10, o bien tampón de
ensayo o medio de cultivo tisular).
3. Añadir 100 ul de control positivo, negativo y 100 ul muestras a los pocillos apropiados.
4. Añadir 50 ul de tampón de ensayo en pocillos NSB.
5. Tocar suavemente la placa para mezclar. Sellar la placa e incubar a 37ºC durante 60
minutos
6. Vaciar el contenido de los pozos y lavar añadiendo 400 ul de tampón de lavado 1X
a cada uno. Repetir el lavado 2 más veces para un total de 3 lavados. Después del
lavado final, vaciar o aspirar los pozos, y toque firmemente la placa en un toalla sin
pelusa de papel para eliminar cualquier tampón de lavado restante.
7. Añadir 100 ul de cromógeno sustrato en todos los pocillos
8. Tocar suavemente la placa para mezclar. Sellar la placa e incubar a 37ºC durante 20
minutos
9. Añadir 100 ul de Ácido Sulfúrico al 5% en todos los pocillos
10. Tocar suavemente la placa para mezclar. Sellar la placa e incubar a 37ºC durante 10 a
20 minutos
11. Medir la densidad óptica con un fotómetro a 450 nm (Longitud de onda de referencia:
600-650 nm) dentro de los 60 min de haber agregado la Solución de Parada.
3.5 Tipos de Análisis
El análisis que se utilizara para la elaboración de esta investigación será de tipo
cuantitativo mediante estadística descriptiva con tablas, gráficos, medidas de tendencia central,
promedios, medianas, porcentajes y medidas de dispersión con desvíos estándar, análisis de
estimación y Chi cuadrado.
35
3.6 Consideraciones Éticas
Para la recolección de datos se contó con consentimiento informado por escrito, bajo
normas de manejo ético, moral y profesional. Siguiendo lo estipulado en la cuarta carta de
Helsinki
3.7 Operacionalización de las Variables
3.7.1 Variables
Variable Independiente
Determinación de IgG para Chlamydia
Variable Dependiente
Nivel de IgG contra Chlamydia
Variables Intervinientes
• Sexo
• Edad
• Inicio de vida sexual
• Número de compañeros sexuales
• Sintomatología de infección por clamidia
36
OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
Figura N° 3 Operacionalización de las Variables Independientes
Figura N° 4 Operacionalización de las Variables Dependientes
VARIABLESDEFINICIÓN
CONCEPTUALDEFINICIÓN
OPERACIONALINDICADORES
UNIDAD DE ANÁLISIS
TÉCNICA E INSTRUMENTOS
Variable Independiente
Determinación de IgG para Chlamydia
Mediante los anticuerpos IgG sabremos si los estudiantes han tenido infección por Chlamydia
Determinación de anticuerpos IgG en suero en los estudiantes
•Si•No
Sintomatología• Dolor bajo del abdomen. •Sangrado entre periodos. •Secreción vaginal o uretral
Procesamiento del suero mediante técnica de ELISA
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
VARIABLESDEFINICIÓN
CONCEPTUALDEFINICIÓN
OPERACIONALINDICADORES
UNIDAD DE ANÁLISIS
TÉCNICA E INSTRUMENTOS
Variable Dependiente
Nivel de IgG para
Chlamydia
Las IgG son los anticuerpos más abundantes en los líquidos
corporales, indican una
infección pasada.
Cuantificación de los niveles de IgG
para obtener un resultado
•Positivo•Negativo
Factores predisponentes
de riesgo
•Obtención de una muestra de sangre
•Encuesta•Permiso de
consentimiento
37
VARIABLESDEFINICIÓN
CONCEPTUALDEFINICIÓN
OPERACIONALINDICADORES
TÉCNICA E INSTRUMENTOS
Sexo
Variable biológica y genética que divide a los seres humanos en dos posibilidades: masculino y femenino
Frecuencia de pacientes
encontrados en relación al género
del paciente
MasculinoFemenino
Encuesta
Edad
Tiempo que ha transcurrido desde el nacimiento de un ser
vivo
Frecuencia de pacientes
encontrados en relación a los años
de vida
Menores de 25 años Encuesta
Inicio de vida sexual
Indica la primera vez(edad) en que una
persona ha tenido contacto sexual con
otra
Edad de su primera relación sexual
Edad Encuesta
Número de compañeros
sexuales
Cantidad de personas con las que ha tenido algún tipo de relación
sexual.
Promedio de personas con las que ha tenido relaciones
sexuales
Número Encuesta
Figura N° 5 Operacionalización de las Variables Intervinientes
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
38
CAPÍTULO IV
4. RESULTADOS, ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN
La tasa de prevalencia de infección con Chlamydia es de 2,44 por mil estudiantes.
TABLA Nº 1 Distribución según sexo en estudiantes (%)
CHI CUADRADO P= 0,62 no estadísticamente significativo
Análisis parcial: Se observa que en cuanto al sexo la mayoría de estudiantes son del
sexo femenino con 62,1 % y del masculino con el 37,9 % aunque no se encontró una diferencia
estadísticamente significativa p=0,62
GRÁFICO Nº 1
AÑOS Frecuencia Porcentaje
Femenino 87 62,1Masculino 53 37,9
Total 140 100,0Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN SEXO
FEMENINO MASCULINO
62,1 37,9
39
TABLA Nº 2 Distribución según edad de estudiantes (%)
GRÁFICO Nº 2
PROMEDIO 21,1 ± 3,2 Años
Años Frecuencia Porcentaje18 2 1,419 20 14,320 49 35,021 26 18,622 20 14,323 4 2,924 4 2,925 9 6,426 4 2,929 2 1,4
TOTAL GENERAL 140 100,0Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGÚN EDAD
P O R C E N T A J E
18 1,4
1,4
14,3
14,3
35,0
18,6
2,9
2,9
6,4
2,9
20
22
24
26
0 5 10 15 20 25 30 35
Análisis parcial: Se observa que un 35% de estudiantes tienen 20 años siendo el grupo
etario más frecuente seguido de los de 21 años con el 18,6 % y de los de 22 y 19 años con
14,3 %. El Promedio fue de 21,1 ± 3,2 Años. No se encontró diferencia estadísticamente
significativa entre los grupos etarios p=0, 37.
40
TABLA Nº 3 Distribución según Semestre de Estudios (%)
GRÁFICO Nº 3
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se observa que el semestre más frecuentemente es el tercero con el
63%, seguido por los de Sexto semestre con un 37 %.
Semestre Frecuencia Porcentaje
3 Semestre 88 62,9
6 Semestre 52 37,1
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN SEMESTRE
3 Semestre6 Semestre
37%
63%
41
GRÁFICO Nº 4
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN HA INICIADO SU VIDA SEXUAL
NoSi|
65%35%
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se reporta según inicio de vida sexual el 65 % ya han iniciado su vida
sexual y el 35 % no ha tenido relaciones sexuales todavía.
TABLA Nº 4 Distribución Estudiantes Según Inicio de Vida Sexual (%)
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Inicio de vida sexual Frecuencia PorcentajeNO 49 35,0SI 91 65,0
TOTAL GENERAL 140 100,0
42
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
TABLA Nº 5 Distribución de estudiantes según edad de inicio de su vida sexual (%)
Edad de Inicio de Vida Sexual
Frecuencia Porcentaje
11 1 1,1
13 1 1,1
14 3 3,315 12 13,2
16 10 11,017 11 12,1
18 22 24,219 13 14,3
20 14 15,4
22 2 2,2
23 2 2,2Total general 91 100,0
GRÁFICO Nº 5
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN EDAD DE INICIO DE VIDA SEXUAL
0
5
10
15
20
25
1,1
11 13 14 15 16 17 18 19 20 22 23
1,1
3,3
13,2
11,012,1
14,315,4
2,2 2,2
AÑOS
PORCENTAJE
24,2
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se observa que el 24,2% tiene el inicio su vida sexual a los 18 años,
seguida de los de 20 años con 15,4 años, siendo el promedio de 17,6 ± 3,8 años.
43
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
TABLA Nº 6 Distribución de estudiantes según número de compañeros sexuales que ha tenido (%)
Numero de Compañeros Sexuales Frecuencia Porcentaje5 O MÁS 11 7,9
4 8 5,73 14 10,02 22 15,71 36 25,7
NINGUNO 49 35,0Total General 140 100,0
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGÚN NÚMERO DE COMPAÑEROS SEXUALES
5 o más
Tres
Cuatro
Uno
Dos
Ninguno
7,9
5,7
10,0
15,7
25,7
35,0
0 5 10 15 20 25 30 35
GRÁFICO Nº 6
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se observa que en cuanto al número de compañeros sexuales la mayoría
de estudiantes ha tenido uno con el 25.7% seguido de dos con el 15, 7% lo que incida una
frecuencia baja de estudiantes promiscuos
44
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN TIPO ULTIMA RELACION SEXUAL
Anal Oral Vaginal Ninguna0,7
8,6
55,7
35,0
0
10
20
30
40
50
60
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
TABLA Nº 7 Distribución de estudiantes según el tipo de relación sexual (%)
GRÁFICO Nº 7
Tipo de Ultima Relacion Sexual Frecuencia PorcentajeANAL 1 0,7ORAL 12 8,6
VAGINAL 78 55,7NINGUNA 49 35,0
Total general 140 100,0
Análisis parcial: El tipo más frecuente fue el vaginal con el 55,7% seguido del oral con
el 8,6% y un 0,7% que practica las relaciones anales
45
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN PRESENCIA SECRECION VAGINAL O
URETRAL
Si
No
28,5
71,4
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se observa que el 28,6% de estudiantes presentaron secreción vaginal o
uretral, frente a un 71,4% que no la presentaron
TABLA Nº 8 Distribución de estudiantes según ha presentado secreción vaginal o uretral
GRÁFICO Nº 8
Ha Presentado Secrecion Vaginal o Uretral
Frecuencia Porcentaje
NO 100 71,4
SI 40 28,6
Total general 140 100,0
46
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
TABLA Nº 9 Distribución de estudiantes según utilizó preservativo en su última relación Sexual (%)
En su Ultima Relacion Sexual
Uso PreservativoFrecuencia Porcentaje
NO 46 50,5SI 45 49,5
Total general 91 100,0
GRÁFICO Nº 9
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN UTILIZACIÓN PERSERVATIVO
NoSi
49%51%
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se reporta que más de la mitad de estudiantes no utilizan preservativo
es decir un 51% como medida de protección en sus relaciones sexuales.
47
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN PRESENCIA SINTOMATOLOGIA
AsintomáticoSintomático
12%
88%
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
TABLA Nº 10 Distribución de estudiantes según sintomatología (%)
GRÁFICO Nº 10
Sintomatologia Frecuencia Porcentaje
ASINTOMATICO 123 87,9
SINTOMATICO 17 12,1
Total general 140 100,0
Análisis parcial: Se observa que el 12 % de los estudiantes presentan sintomatología
compatible con infección por Chlamydia.
48
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN INTERPRETACION IgG CONTRA CHLAMYDIA
NegativosPositivos
7,9
92,1
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: Se aprecia que la mayoría de estudiantes, un 92,1% son negativos para
IgG contra Chlamydia, pero ya se aprecia que un grupo importante del 7,9% de los estudiantes
ya ha sufrido alguna vez una infección por Chlamydia aunque ninguno reporto haber sido
diagnosticado de padecer infección por Chlamydia, lo que da una tasa de prevalencia de 2,44
por mil estudiantes.
TABLA Nº 11 Distribución de estudiantes según Nivel IgG contra Chlamydia (%)
GRÁFICO Nº 11
Nivel Ig G Frecuencia Porcentaje
NEGATIVO 129 92,1
POSITIVO 11 7,9
Total general 140 100,0
49
TABL
A N
º 12
Dis
tribu
ción
de
estu
dian
tes s
egún
Niv
el Ig
G y
tipo
de
rela
ción
sexu
al (%
)Interpretación IgG
TIP
O D
E R
EL
AC
ION
SE
XU
AL
Tota
l
gene
ral
AN
AL
OR
AL
VAG
INA
L
FREC
UEN
CIA
POR
CEN
TAJE
FREC
UEN
CIA
POR
CEN
TAJE
FREC
UEN
CIA
POR
CEN
TAJE
NEGATIVOS
110
012
7571
91,0
84
POSITIVOS
00
425
79,
011
Total general
110
016
100
7810
095
Elab
orad
o po
r: H
idal
go T
ipán
Mar
ía Jo
sé, 2
016
p= 0
,62
no e
stad
ístic
amen
te si
gnifi
cativ
a m
edia
nte
Chi
cua
drad
o
50
GRÁFICO Nº 12
0
20
40
60
80
100
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN TIPO RELACIONES SEXUALES E INTERPRETACIÓN
NegativosPositivos
100 75
25
91
9
Anal Oral Vaginal
Análisis parcial: El análisis nos permite interpretar que no hay diferencia entre los niveles
de IgG contra Chlamydia y tipo de relación sexual se probó mediante Chi cuadrado donde se
ve una probabilidad no estadísticamente significativa.
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
51
TABL
A N
º 13
Dist
ribuc
ión
de es
tudi
ante
s seg
ún N
ivel
IgG
y n
úmer
o de
com
pañe
ros s
exua
les (
%)
Interpretacion Ig G
NU
MER
O D
E CO
MPA
ÑER
OS
SEXU
ALES
5 O
MÁS
CUAT
RO
TRES
DOS
UN
O
Tota
l gen
eral
FRE
C.
%FR
EC
.%
FRE
C.
%FR
EC
.%
FRE
C.
%
NEGATIVOS
1090
,91
787
,50
1477
,78
2083
,33
3391
,67
86
POSITIVOS
19,
091
12,5
04
22,2
24
16,6
73
8,33
11
Total general
1110
08
100
1810
024
100
3610
059
7
Elab
orad
o po
r: H
idal
go T
ipán
Mar
ía Jo
sé, 2
016
52
GRÁFICO Nº 13
0
20
40
60
80
100
PORCENTAJE DE ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE MEDICINA SEGUN NÚMERO DE COMPAÑEROS SEXUALES E
INTERPRETACION DE IgG
NegativosPositivos
10090,91
9,09
87,50
12,50
77,78
22,22
83,33
16,67
91,67
8,33
5 o más Cuatro Tres Dos
N ú m e r o d e C o m p a ñ e r o s S e x u a l e s
Porcentaje
UnoElaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Análisis parcial: El análisis nos permite determinar que en la mayor cantidad de positivos
se observa en los que han tenido tres compañeros (22;22%), pero hay diferencia entre los
niveles de IgG contra Chlamydia y numero de compañeros sexuales se probó mediante Chi
cuadrado donde se ve una probabilidad estadísticamente significativa con una menor a 0,05.
53
4.1 Discusión
La infección genital por Chlamydia Trachomatis es considerada en la actualidad una de las
causas más frecuentes de Infecciones Transmisibles Sexualmente (ITS) a nivel mundial. CDC
2006-2011
Este estudio es descriptivo de cohorte transversal, realizado en 140 estudiantes de la
Facultad de Medicina a los cuales se realizó encuestas y se extrajo 5 cc de sangre para obtener
suero para realizar determinación de IgG contra Chlamydia Trachomatis, la muestra se tomó
en las aulas de la escuela de la ciudad de Quito y se trasladó conservando la cadena de frio
al laboratorio de Genética de la Facultad de Ciencias Médicas donde se procesó las muestra
mediante técnica de ELISA en el Equipo ELISYS Uno
Se Observa que en cuanto al sexo la mayoría de estudiantes fueron del sexo Femenino con
62,1 % y del masculino con el 37,9 % aunque no se encontró una diferencia estadísticamente
significativa p=0,62
Se determina que un 35 % de estudiantes tienen 20 años siendo el grupo etario más
frecuente seguido de los de 21 años con el 18,6 % y de los de 22 y 19 años con 14,3 %. El
Promedio fue de 21,1 ± 3,2 Años. No se encontró diferencia estadísticamente significativa
entre los grupos etarios p=0, 37.
Se observa que el semestre más frecuentemente es el tercero con el 63%, seguido por los
de Sexto semestre con un 37 %.
Se reporta según inicio de vida sexual el 65 % ya han iniciado su vida sexual y el 35 %
no ha tenido relaciones sexuales todavía. Y se observa que el 24,2% inicio su vida sexual a los
18 años, seguido de los 20 con 15,4 años, siendo el promedio de 17,6 ±3,8 años.
Se determina que en cuanto al número de compañeros sexuales la mayoría de estudiantes
ha tenido uno con el 25,7% seguido de dos con el 15, 7% lo que determina una frecuencia baja
de estudiantes promiscuos.
Que la mayor cantidad de positivos se observa en los que han tenido tres compañeros
(as), pero hay diferencia entre los niveles de IgG contra Chlamydia y numero de compañeros
sexuales se probó mediante Ji cuadrado donde se ve una probabilidad estadísticamente
significativa con una probabilidad menor a 0,05.
54
Se ha demostrado que existe una fuerte asociación entre el número de parejas sexuales y
el riesgo de adquirir alguna ITS.
Joffe et al.1992, encontraron que haber tenido 5 o más parejas incrementa 8 veces el riesgo
de infectarse en relación con aquel individuo que solo ha tenido una pareja. En la población de
ingresantes universitarios aquí estudiada, los estudiantes con 7 o más parejas tuvieron casi 15
veces más probabilidad de infección por C. Trachomatis (OR = 14,71;1,23 < OR < 183,31)
El tipo más frecuente fue el vaginal con el 55,7% seguido del oral con el 8,6% y un 0,7%
que practica las relaciones anales.
Se observa que el 28,6% de estudiantes presentaron secreción vaginal o uretral.
Se reporta que más de la mitad de estudiantes no utilizan preservativo (51%) como medida
de protección en sus relaciones sexuales. Se observa que el 12 % de los estudiantes presentan
sintomatología compatible con infección por Chlamydia.
Se aprecia que la mayoría de estudiantes 92,1% son negativos para IgG contra Chlamydia
pero ya se aprecia que un grupo importante del 7,9% de los estudiantes ya ha sufrido alguna
vez una infección por Chlamydia aunque ninguno reporto haber sido diagnosticado de padecer
infección por Chlamydia y da una tasa de prevalencia de 2,44 por mil estudiantes. Similar
a lo que reporto Occhioneroa 2014 que el 3,5 %, de positividad contra Chlamydia esta se
encuentra en el rango de los valores hallados por otros autores en poblaciones similares. En
argentina, Rodríguez Fermepín et al.2002 hallaron una prevalencia del 0,89 %, y Entrocassi
et al.2005 informaron el 0 %, ambos en estudiantes de la Universidad de Buenos Aires. Por su
parte, Farinati et al. 2008 observaron una prevalencia del 4,5 % en alumnos de la Universidad
de Córdoba. En México, Dorantes Peña et al. 2011 informaron el 1,04 % de prevalencia en
estudiantes de la Universidad Autónoma de Morelos. En la literatura se observan prevalencias
mayores, sin embargo, esos datos se obtuvieron en estudios realizados entre adolescentes y
jóvenes de la población general Corbeto E 2011, Di Bartolomeo S 2011 , Rodríguez Fermepín
et al.2002 , Huneeus A . 2009. Los resultados antes referidos situarían a los estudiantes
universitarios como un grupo con comportamientos sexuales posiblemente de menor riesgo.
Que no hay diferencia entre los niveles de IgG contra Chlamydia y tipo de relación sexual
se probó cuadrado donde se ve una probabilidad mediante Ji no estadísticamente significativa
55
CAPÍTULO V
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1 Conclusiones
Se determinó que el 92,1% son negativos para IgG contra Clamidia pero ya se aprecia que
un grupo importante del 7,9% de los estudiantes ya ha sufrido alguna vez una infección por
Chlamydia aunque ninguno reporto haber sido diagnosticado de padecer la infección.
Identificó algunos de los factores predisponentes para la infección por Chlamydia entre
ellos podemos mencionar, el inicio temprano de las relaciones sexuales, la baja utilización
de métodos anti-conceptivos de barrera, los cambios frecuentes de pareja sexual y la falta
de consulta a los profesionales especializados alertan sobre la necesidad de incrementar la
vigilancia y desarrollar acciones de concienciación y prevención en esta población.
Se identificó el grupo más vulnerable, para la infección por Chlamydia son los menores de
25 años debiado a sus conductas sexuales.
Con el estudio se estableció una taza de prevalencia de 2,44 por mil estudiantes.
56
5.2 Recomendaciónes
Se recomienda continuar investigando en este campo, con el fin de obtener datos estadísticos
que puedan ser generalizados a toda la población ecuatoriana y que como país podamos tener
nuestras propias estadísticas.
Apoyar una campaña nacional para la prevención de infección por Chlamydia y la
aparición de recién nacidos con afecciones que es la complicación mayor de la infección por
Chlamydia, como sucede actualmente en otros países del mundo.
Informar a la población acerca de la infección por Chlamydia sus causas, formas de
transmisión, manifestaciones clínicas y complicaciones.
Impartir charlas acerca de las enfermedades de transmisión sexual con el fin de prevenir el
contagio, y hacer conciencia con los jóvenes.
57
CAPÍTULO VI
6. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS
6.1 Recursos
En el presente capítulo se describe los recursos utilizados en el proyecto de investigación
realizado en el Laboratorio de Genética de la Universidad Central.
6.2 Recursos Humanos
6.3 Recursos Materiales
Asesor de Tesis Dr. Carlos TorresDocente de la Carrera de Laboratorio Clínico
PacientesLaboratorio de Genética de la Universidad Central Facultad de Medicina
Estudiantes de la Universidad Central Facultad de Medicina
Investigadora María José Hidalgo Egresada de la Carrera de Laboratorio Clínico
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
MATERIALES RESPONSABLE
Laboratorio de Genética de la Universidad Central Facultad de Medicina
Dr. Carlos Torres
Jeringas, algodón, tubos de 5cc sin anticoagulante, reactivo Chlamydia IgG
María José Hidago
MATERIALES DE OFICINA INVESTIGADORA
Encuestas, hoja des consentimiento InvestigadoraElaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
58
6.4 Recursos Técnicos
6.5 Recursos Económicos
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
RECURSOS TÉCNICOS RESPONSABLE
Computadora Investigadora
Impresora Investigadora
Internet Investigadora
Proyector Investigadora
Equipo ELISA Investigadora
CANTIDAD RECURSOS MATERIALES Y TÉCNICOS VALORES USD VALOR TOTAL
2 Reactivo Chlamydia 280 560,0
2 Paquetes tubos tapa roja 15,0 30,0
140 Jeringas 0,20 28,0
Guantes 3,0 3,0
Comunicación 20,0 20,0
4 meses Servicio de Internet 25,0 25,0
4 meses Movilización 0,25 40,0
650 hojas Impresiones 0,10 65,0
300 hojas Fotocopias 0,03 9,0
uno Flash Memory 12,0 12,0
5 Anillados 25,0 25,0TOTAL 817,00
59
6.6 Cronograma de Actividades
ACTIVIDAD DESCRIPCIÓN DURACIÓN1 2 3 4
Elaboración ProtocoloAnálisis de información recibada y redacción de avances
Elaboración de herramientas
Verificación y validación de la información,
Estandarizaciónde técnicas y herramientas
Análisis de documentos históricos, y de informes de labores institucionales
Toma de muestra Elaboración de tablas estadística Procesamiento de muestra
Cálculo de indicadores
Elaboración base dedatos
Procesamiento de datos apoyo estadístico específico
Análisis de resultados Preparación de documento borrador
Informe final Redacción de documento definitivo
Redacción de tesis Redacción de informe para publicación
Elaborado por: Hidalgo Tipán María José, 2016
60
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Revista Peruana de Enfermedades Infecciosas y Tropicales. 1, (Septiembre), Lima – Perú
68
ANEXOS
Proceso de recolección de muestras y análisis:
Toma de muestras Centrifugación
Obtención de sueros
Procesamiento
Obtención de resultados
Elaborado por María José Hidalgo, 2016
Obtención de Sueros
Procesamiento
69
Encuesta de Proyecto de Investigación “ DETERMINACION DE IgG CONTRA
CLAMIDIA EN ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS DE
LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR”.
Fecha:_____________________________
Nombre ___________________________ Código:
Edad ________
Marcar con una X la respuesta
Sexo Masculino___ Femenino ____
En que Semestre esta: 1 __ 2__ 3__ 4__ 5__ 6__ 7__ 8__
Ha sido diagnosticado de padecer de infección de Clamidia SI___ NO___
Ha iniciado su vida sexual: SI__ NO__ a que edad _____
Cuantos compañeros sexuales ha tenido: 1 2 3 4 5 5 o mas
Su última relación sexual Fue: Vaginal oral anal
Ha presentado un fluido uretral. SI__ NO__
Ha presentado ardor al orinar. SI__ NO__
Ha presentado secreción vaginal. SI__ NO__
Ha presentado Dolor y / o sangrado durante las relaciones sexuales
SI__ NO__
Ha presentado Sangrado entre períodos SI__ NO__
Ha presentado Periodos más abundantes de lo habitual SI__ NO__
En la última relación sexual utilizó preservativo SI__ NO__
Resultado de Prueba ELISA IgG Clamidia : Positivo ____ Negativo ___
70
Fecha: ………………………………………..
FORMULARIO DE CONSENTIMIENTO INFORMADO
DE PROYECTO DE INVESTIGACION “DETERMINACION DE IgG CONTRA
CLAMIDIA EN ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS DE
LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR”.
Estamos invitando a usted y a otras personas a participar de un proyecto de investigación
científica que permitirá entender mejor la enfermedad por Clamidia y su prevención para lo
cual llenara una encuesta y se le sacara 5 ml de sangre por venopunción.
La información obtenida es confidencial y anónima: en ningún lugar se hará público
el nombre de las personas participantes ni sus características. Sólo serán publicados datos
generales para el estudio
Su participación será muy agradecida y contribuirá a la prevención del Clamidia. Si
usted acepta participar de este estudio, le agradeceremos que preste su conformidad por escrito
completando y firmando el Formulario
Yo, ……………………………………………………………………………
Acepto donar una muestra de sangre y proveer información general para el proyecto
explicado arriba, de cuyos objetivos fui informado.
Nombre y apellido No.CI Firma
