Universidad Nacional Autónoma de MéxicoAnálisis morfo-fisiológico de Tagete

sp. inducida a estrés bioquímico por irrigación de aguas residuales.

Barrios E. F. J. Cano S. S. A.

Cayetano G. A. E. Chávez C. J. J.

Pérez. G. R. Vargas C. B. G.

Introducción

• El desarrollo de la agricultura en las ciudades provoca que se intensifique el uso de los recursos acuíferos, destinados a riego de cultivos de tipo ornato y hortalizas provocando escasez (Pérez, 2002).

• Las aguas residuales se definen como el deshecho de agua que ha sido utilizada en actividades humanas. La composición de estas suele tener materia orgánica y químicos. (Torre-Muñoz et al, 2009).

• La composición de estas suele tener materia orgánica y químicos de uso domestico y de comercios (Torre-Muñoz et al, 2009).

• El estrés bioquímico puede definirse como la alteración de las funciones metabólicas de las plantas debido a la presencia de agentes bióticos, abióticos, choque oxidativo, acumulación de metabolitos nitrogenados, los cuales ponen en riesgo la sobrevivencia de la planta (Basurto Sotelo et al, 2008).

• En particular es la Tagete sp. o flor de cempasúchil, la cual como algunos cultivos de interés económico podría verse afectada por el riego de aguas residuales debido a la escasez de un riego con agua limpia.

• De este modo suponemos que la irrigación con aguas residuales sobre el cultivo de Tagete sp. puede provocar sobre esta un estrés de tipo bioquímico

• Tiene efecto antiperlidico, efecto citotoxico.

• Tiene importancia en el ámbito apícola.

Autor (es) Lugar y año Asunto Trabajo

Del Villar et al

Chapingo, México 2007

Carotenoides en Tagete erecta.

Medios que buscan el mejoramiento de T. erecta. La extracción de carotenoides de esta mas la intervención de genes derivados de otras plantas, obtuvieron resultados de síntesis de carotenoide viables para aplicaciones humanas en medicina.

Goméz Goméz

Valle de Texcoco, 2011

Aguas residuales

Análisis sobre la problemática debido al creciente aumento de aguas residuales. Los procesos para el tratamiento del agua residual son muy complejos y muchas veces suelen estar incompletos

Serrato Cruz

Sierra Madre Oriental, 2005

Tagete erecta Cruce de plantas para fines comerciales y su mejoramiento. Se dieron organismos mejores y mas atractivos para el mercado de consumo mediante selección de generaciones.

Méndez , et al.

2006 Zanahoria, rábano y flor de marigold

Empleo alternativo de aguas residuales en hortalizas. Encontrando que el agua residual porta sustancias que pueden beneficiar el desarrollo de la planta.

Tapia Salazar et al.

2008 Tagete erecta Uso de pigmentos como aditivos para alimento de camarón. Notaron un crecimiento saludable en los camarones destinados para consumo humano

Autor (es) Lugar y año

Asunto Trabajo

Basurto Sotelo et al.

Chihuahua, 2008

Fisiologia del estrés en plantas.

Estudio sobre las respuestas de las plantas ante condiciones de estrés. Encontrando que las plantas poseen mecanismos muy desarrollados para poder adaptarse a la respuestas de estrés que le lleguen y así sobrevivir.

Mendez A. Marcial et al.

La Habana, Cuba, 2006

Aguas residuales y agricultura.

Análisis sobre el uso y posibles efectos de aguas residuales sobre cultivos de consumo humano. Los cultivos pueden ser consumidos con seguridad si el agua residual paso por un proceso de semi purificación, encontrando que los cultivos irrigados con aguas residuales directas son inapropiadas para consumo humano.

Objetivos• Objetivo General.• -Estudio morfofisiológico de Tagete sp luego de la

irrigación de aguas residuales, provocando un estrés bioquímico.

• Objetivo Particulares.• -Determinación de variaciones morfológicas en Tagete

sp luego de la irrigación de aguas residuales. (area foliar)

• -Determinación de variaciones fisiológicas en Tagete sp luego de la irrigación de aguas residuales. (cambios en las enzimas, glucosa, clorofila y fluorecencia)

Metodología• Se realizaran dos grupos de 10 plantas cada

grupo• El primero será el grupo control, el cual será

regado con una solución nutritiva con un sustrato de tezontle y perlita. Con un sistema de riego de gravedad.

• El segundo grupo se someterá a estrés con el riego de aguas residuales, el mismo sistema de riego y sustrato.

Medición de APX

APX

Buffer de fosfato a 50 mM para 200ml

Fosfato dibásico, ácido ascorbico

Fofato monobásico,PVP

Obtención de 3 hojas frescas

Homogeneizado, usando 1ml

Espectrofotómetro a 590nm

Medido por ciclos de 30seg durante 3 minutos

H2O2 5µl

Cuantificación de clorofila a y b

Se maceraran en frio 0.2 g de hojas empleando acetona al 80% como solvente

Las pasta resultante se filtrara y lavara con acetona hasta alcanzar un volumen de 100 ml.

Posteriormente se leerá a 645,652 y 663 nm utilizando acetona como blanco.

Cuantificación de Xantófilas. Se realizara la

extracción por maceración en frio

de las flores.

Utilizando como solvente una mezcla de tolueno,

hexano, acetona y etanol y KOH en metanol al

40%

Posteriormente se separara la fase

orgánica empleando Na2SO4

y hexano

Se cubrirá e incubara por 24 hrs,

Se filtrara y leerá en espectro a 474 nm

Cuantificación de Catalasa

Se obtendrá la muestra fresca de la planta

Se macerará en frio, y usando un

buffer de inhibición

Se usara un buffer y H2O2 como blanco

Centrifugara a 12000 rpm 10

min Se llevara al

espectrofotómetro para leer la reacción

a 240 nm

En el tubo de la muestra: 250 µl de muestra y 250 µl de

H2O2 y 1 ml de buffer

Referencia y fundamento

• P. Apostolova, I. Yaneva, ANTIOXIDATIVE DEFENCE IN WINTER WHEAT PLANTS DURING EARLY COLD ACCLIMATION, GEN. APPL. PLANT PHYSIOLOGY, SPECIAL ISSUE, 2006, 101-108

• El agua residual produce estrés y a la vez un aumento de un radical libre el H2O2 el cual es directamente proporcional al aumento de la catalasa, esto es una medida de prevención para la planta, la catalasa degrada el H2O2 a H20 y O para eliminar esa toxicidad que produce. La catalasa se encuentra en los cloroplastos de ahí que las muestras que se toman son de las hojas.

Cuantificación de carbohidratos

Disponer de una serie de tubos (8).

Tapar los tubos y colocarlos en baño María por

20 min y enfriar.

Agregar a cada tubo 1 ml de reactivo de

arsenomolibdato

Agregar a cada tubo 7.5

ml de agua destilada

Mezclar por inmersión y leer en espectrofotómetro usando el tubo 1 como blanco (540

nm)

Realizar la gráfica para la glucosa (tubos

1 a 5)

Interpolar el valor del problema y determinar su concentración.

GUAIACOL PEROXIDASAExtrac

tos enzimáticos crudo

s(La

actividad

peroxidasa en los extrac

tos libres de las célula

s)

Macerado

de la

muestra

Resuspencion en

buffer de fosfatos

Centrifugar a 12000g por 15 min.

MEZCLA DE REACCION

2ml de buffer

de fosfatos0.4ml

de H2O20.1ml

guaiacol1ml EEC

Medir absorbancia

A 450nmIntervalos de 30s

Durante 5min.

1 unidad de

GPX=cantidad

de enzima

que cataliza 1mmol

de guaiacol

por minuto.

Concentraciones

• Buffer de fosfatos: 0.1M pH6.5• H2O2: 10mM• Guaiacol: 1% Sustrato reductor•