VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DE INSTRUMENTOS …

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

“VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DE INSTRUMENTOS

EMPLEADOS EN CONTROL DE CALIDAD”

INFORME DE PRÁCTICAS PRE -PROFESIONALES

PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL

DE

QUÍMICO FARMACÉUTICO

AUTOR: Br. RUIZ WONG, OYUKI MABEL

ASESOR: Mg. RENGIFO PENADILLOS, ROGER ANTONIO

TRUJILLO - PERÚ

2014

Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación

Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/

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DEDICATORIAS



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A Dios y a la Virgen María…

Por haberme permitido llegar hasta este punto y haberme dado salud para lograr mis objetivos, además de su infinita bondad y amor que me llena de felicidad.

A mis padres Silvia y Freddy por el apoyo y comprensión que me brindaron a lo largo de todo el trayecto de mi vida personal y profesional. Por sus

consejos, sus valores, por la motivación constante que me ha permitido ser una persona de bien, pero más que

nada, por su amor.

A mis hermanos Piero, Jesús y Milagros por ser parte de mi vida y por brindarme siempre su apoyo

incondicional.

MABEL



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AGRADECIMIENTOS



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Ha sido un año lleno de esfuerzos y sacrificios, cerrada esta etapa, me queda agradecer principalmente a Dios por permitirme llegar a esta instancia del camino, en donde me vuelvo una profesional.

A todas aquellas personas que me han brindado su amistad, apoyo, ánimo y compañía en las diferentes etapas de mi vida. A aquellos que aunque ya no están aquí físicamente, pero que habitan en mis recuerdos y en mi corazón por todo el amor que me brindaron y por todas las bendiciones intercedidas.

A mí querido asesor, maestro y amigo:

Mg. Q.F. Roger Antonio Rengifo Penadillos; por todo el

apoyo incondicional brindado en todo este camino que

he recorrido hasta llegar a este objetivo esperado.

A Carlos, por siempre estar a mi lado en las buenas y en

las malas; por su comprensión, paciencia y amor,

dándome ánimos de fuerza y valor para seguir adelante.

MABEL



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ÍNDICE

Página

RESUMEN ..................................................................................................... i

ABSTRACT .................................................................................................... ii

INTRODUCCIÓN ............................................................................................ 1

MATERIAL Y MÉTODO ................................................................................. 6

RESULTADOS ............................................................................................... 17

DISCUSIÓN.................................................................................................... 22

CONCLUSIONES ........................................................................................... 25

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................... 26

ANEXOS



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RESUMEN

El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo verificar el

desempeño de los instrumentos de Control de Calidad en una Industria

Farmacéutica, tales verificaciones son requeridas por la USP 36 (Farmacopea

de los Estados Unidos de América, NF 31) y el Manual de Buenas Prácticas de

Laboratorio para el Control de Calidad de Productos Farmacéuticos. Entre

estos instrumentos están: Balanza Analítica, Espectrofotómetro UV-Vis y

Aparato de Disolución.

Para las pruebas de verificación de desempeño de la balanza analítica

se consideraron las estipuladas en la Norma Metrológica Peruana (NMP 003),

Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento No Automático; entre estas

pruebas tenemos los ensayos de Repetibilidad, Excentricidad y Pesaje.

En el caso del espectrofotómetro UV-Vis se tuvo como referencia la

Farmacopea Británica 2012, realizándose las pruebas de Control de Longitud

de Onda, Control de Absorbancias y Dispersión de Luz.

Así mismo la verificación de desempeño realizada al aparato de

Disolución fue según lo especificado en el certificado del Estándar de

Referencia de Prednisona USP, Tabletas de 10 mg.

Los instrumentos como la balanza analítica, espectrofotómetro UV-Vis y

aparato de disolución se desempeñaron conforme los parámetros

especificados.

Palabras clave: Verificación de Desempeño, Balanza Analítica,

Espectrofotómetro UV-Vis, Aparato de Disolución.



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ABSTRACT

The present research aimed to describe the various verifications of

performance that are made to the instruments of Quality Control in

Pharmaceutical Industry, such verifications are required by the USP 36

(Pharmacopoeia of the United States of America, NF 31) and Handbook of

Good Laboratory Practice for Quality Control of Pharmaceuticals. These

instruments are: Analytical Balance, UV-Vis Spectrophotometer and Dissolution

Apparatus.

For performance verification tests of the analytical balance were

considered those stipulated in the Standard Metrological Peruana (NMP 003)

Weighing Instruments No Automatic Operation; between these tests have

Repeatability tests, Eccentricity and weighing.

In the case of UV-Vis Spectrophotometer was reference to the British

Pharmacopoeia 2012, performing tests Wavelength Control, Control

Absorbance and Scattering of Light.

Also the performance verification on the dissolution apparatus was as

specified in the certificate of Prednisone Reference Standard USP, 10 mg

tablets.

Instruments such as analytical balances, UV-Vis spectrophotometer and

dissolution apparatus is conformally played according to the specified

parameters.

Keywords: Performance Verification, Analytical Balance, UV-Vis

Spectrophotometer, Dissolution Apparatus.



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I. INTRODUCCIÓN

En la industria farmacéutica se usa una gran variedad de equipos e

instrumentos de laboratorio y sistemas analíticos computarizados, desde

simples evaporadores de nitrógeno hasta tecnologías complejas

multifuncionales para adquirir datos que ayuden a garantizar que los productos

son aptos para su uso previsto1.

Dependiendo de las aplicaciones, los analistas validan sus

procedimientos, calibran los instrumentos y realizan controles adicionales de

instrumentos, tales como pruebas de aptitud del sistema y análisis de muestras

para control de calidad del proceso analítico (quality control check samples o

muestras control), con el fin de garantizar que los datos adquiridos son

confiables1.

Con la creciente sofisticación y automatización de los instrumentos

analíticos, a los usuarios se les exige cada vez más la calificación de los

mismos.

La calificación de instrumentos analíticos (AIQ) es la colección de

pruebas documentadas de que un instrumento se desempeña adecuadamente

para su uso previsto. El uso de un instrumento calificado en los análisis

contribuye a la confianza en la validez de los datos generados1, 2, 3.

La calificación de instrumentos no es un único proceso continuo sino el

resultado de varias actividades diferenciadas. Por conveniencia, estas

actividades se pueden agrupar en cuatro fases: calificación del diseño (DQ),



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calificación de la instalación (IQ), calificación operativa (OQ) y calificación del

desempeño (PQ) 1, 2, 3.

La calificación del diseño (DQ) es la colección documentada de

actividades que definen las especificaciones funcionales y operativas del

instrumento y los criterios para la selección del proveedor, basándose en el uso

previsto de los mismos. La calificación del diseño (DQ) puede ser realizada no

sólo por el que desarrolla o fabrica el instrumento, sino también por el usuario1,

2, 3.

La calificación de la instalación (IQ) es la colección documentada de

actividades necesarias para establecer que un instrumento se entrega como

fue diseñado y especificado y está debidamente instalado en el entorno

seleccionado, y que este entorno es adecuado para el instrumento. La IQ se

aplica a un instrumento nuevo o de segunda mano, o a cualquier instrumento

existente que no ha sido calificado anteriormente. Partes relevantes de la IQ se

aplican también a un instrumento calificado que haya sido transportado a otro

sitio o esté siendo reinstalado por otras razones, tal como un almacenamiento

prolongado1, 2, 3.

Después de una IQ exitosa, el instrumento está listo para las pruebas

OQ. La calificación operativa (OQ) es la colección documentada de las

actividades necesarias para demostrar que un instrumento funcionará de

acuerdo con su especificación operativa en el entorno seleccionado en todos

los intervalos de operación previstos1, 2, 3.

La calificación de desempeño (PQ) es la verificación documentada de

que un instrumento se desempeña uniformemente de acuerdo con las



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especificaciones definidas por el usuario y es apropiado para el uso previsto.

Después de haber efectuado las pruebas IQ y OQ, la calificación de

desempeño demuestra la continua aptitud del instrumento para su uso

previsto1, 2, 3.

La PQ puede incluir controles de desempeño, que consiste en

establecer una prueba o serie de pruebas para verificar el desempeño

aceptable del instrumento para su uso previsto. Las pruebas PQ se basan por

lo general en las aplicaciones típicas del instrumento en el sitio de uso y

pueden consistir en el análisis de estándares o componentes conocidos. Las

pruebas se deben basar en métodos científicos y reflejar el uso general

previsto para el instrumento. Algunas pruebas de aptitud del sistema o análisis

con muestras control que se efectúan concomitantemente con las muestras de

prueba se pueden usar para demostrar que el instrumento se desempeña de

manera adecuada. Las pruebas PQ pueden semejarse a las efectuadas

durante la OQ, pero las especificaciones para sus resultados se pueden fijar de

manera diferente de ser necesario. Sin embargo, las especificaciones del

usuario para las pruebas PQ deben demostrar que el instrumento funciona sin

problemas para las aplicaciones previstas. Como en el caso con las pruebas

OQ, las pruebas PQ pueden ser modulares o integrales1.

La frecuencia de prueba depende de la robustez del instrumento y de la

criticidad de las pruebas efectuadas. Las pruebas pueden llevarse a cabo sin

programación-por ejemplo, cada vez que se usa el instrumento. También se

pueden programar a intervalos regulares. La experiencia con el instrumento

puede influir en esta decisión. Podría ser útil repetir las mismas pruebas PQ

cada vez que se usa el instrumento, para poder compilar la historia del



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desempeño del instrumento. Como alternativa, el instrumento se puede incluir

en un sistema de soporte integrado para garantizar que permanezca calificado

continuamente. Algunas pruebas de aptitud del sistema o análisis con muestras

control que se efectúan concomitantemente con las muestras de prueba

implican también que el instrumento se desempeña de manera adecuada1.

Teniendo consideración de lo antes mencionado, se realizaron pruebas

de verificación de desempeño de tres instrumentos de un laboratorio de control

de calidad, como: Balanza analítica, Espectrofotómetro UV-Vis, Aparato de

disolución.

Una balanza analítica es un instrumento de pesaje de funcionamiento no

automático, el cual requiere la intervención de un operador durante el proceso

de pesaje para decidir si el resultado de pesaje es aceptable. Un instrumento

de pesaje de funcionamiento no automático puede: estar graduado o no

graduado; ser con indicación automática, con indicador semiautomático o sin

indicación automática4.

Las pruebas y valoraciones farmacopeicas requieren balanzas con

diferentes capacidades, sensibilidad y reproducibilidad. Por tanto, a una

balanza se le realizan pruebas de desempeño como repetibilidad, excentricidad

y pesaje; conforme están descritas en la Norma Metrológica Peruana,

Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento no Automático (NMP: 003-2009)4.

El espectrofotómetro UV-Vis es un instrumento analítico utilizado en la

espectrometría ultravioleta-visible, este mide la intensidad de luz que pasa a

través de una muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de pasar

a través de la muestra (Io). La relación I/Io se llama transmitancia, y se expresa



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habitualmente como un porcentaje (%T). Así mismo, la absorbancia (A) se

basa en la transmisión: A = - log (%T)5.

El espectrofotómetro UV-Vis, es utilizado para análisis cualitativos y

cuantitativos de compuestos químicos, que tienen gran importancia para los

diferentes sectores de la industria, uno de ellos la industria farmacéutica. Entre

las pruebas de verificación que se realiza a este tipo de instrumentos tenemos:

control longitud de onda, absorbancia y dispersión de luz1, 6.

El aparato de disolución, es un instrumento analítico utilizado para

realizar pruebas físicoquímicas de disolución de tabletas o capsulas, según la

metodología de análisis. Las pruebas de disolución pueden relacionarse con el

desempeño del fármaco in vivo1.

En Control de Calidad de una industria Farmacéutica se hace uso de

ciertos instrumentos necesarios para realizar los diferentes ensayos analíticos,

por tal motivo se realizan verificaciones de desempeño de cada instrumento,

con el fin de obtener resultados constantes, confiables, válidos y adecuados

para los fines previstos; estas verificaciones son realizadas según un programa

establecido.

Por lo anteriormente mencionado, se plantea los siguientes objetivos:

Objetivo general:

Realizar la verificación de desempeño de Instrumentos empleados en

Control de calidad.

Objetivos específicos:

Realizar la verificación de desempeño de una balanza analítica.

Realizar la verificación de desempeño del espectrofotómetro UV-Vis.

Realizar la verificación de desempeño de un equipo de disolución.



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II. MATERIAL Y MÉTODO

2.1. MATERIALES: 2.1.1. Instrumentos:

- Balanza analítica. Marca OHAUS Pioneer, Modelo PA214.

- Espectrofotómetro UV-VIS. Marca SHIMADZU, Modelo UV1700.

- Aparato de disolución. Marca DISTEK, Modelo 2100C.

- Equipo de filtración a vacío.

- Termo higrómetro calibrado. Marca CONTROL COMPANY, Modelo

4184.

- Termómetro calibrado. Marca BLAU BRAND.

2.1.2. Material de Laboratorio:

- El material de vidrio que se empleó fue el de uso común en el

laboratorio.

2.1.3. Material Químico:

- Estándar de Referencia USP de Prednisona tabletas 10 mg, Lote

Q2L493.

- Óxido de holmio 40 g/L en ácido perclórico 10% v/v.

- Solución estándar de cloruro de potasio 12 g/L p/v en agua.

- Solución estándar de dicromato de potasio 60,06 mg/L en ácido

sulfúrico 0,01 N.

- Solución estándar de dicromato de potasio 600,6 mg/L en ácido

sulfúrico 0,01 N.



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2.1.4. Otros:

- Membranas de filtración de 0,45 µm.

- Muestreadores (jeringas desechables).

- Papel filtro Whatman 42 o equivalente.

- Pesas calibradas, clase E2.

- Pinzas de acero.

- Guantes de látex y mascarillas.



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2.2. MÉTODO:

2.2.1. VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DE BALANZA ANALÍTICA:

La balanza analítica se encuentra en una ubicación adecuada con niveles

suficientemente bajos de vibración y corrientes de aire. Así mismo, se

constata que el instrumento se encuentra limpio, nivelado (burbuja de

nivel centrada) y operativo.

Se constata que la temperatura de ambiente se encuentre entre los 10° a

30°, con una humedad relativa entre 15% a 80%.

Se utilizan pesas calibradas de clase E2, las cuales se acondicionan a

temperatura ambiente antes de realizar los ensayos.

Se realizan principalmente tres ensayos de verificación: repetibilidad,

excentricidad y pesaje; con la finalidad de saber si el instrumento de

pesada es confiable al momento de realizar una medición.

Los errores máximos tolerados (EMT) dependen de la clase de exactitud

de la balanza y de la carga que se evalúa (Anexo 1)4.

2.2.1.1. Ensayo de repetibilidad:

Se realizan dos series de pesajes: una con una carga de

aproximadamente 50 % y otra con una carga cercana a 100 % de la

capacidad máxima de la balanza analítica. Cada serie consiste en 10

pesajes4.

Las lecturas se realizan cuando el instrumento está cargado4.

En caso de una desviación de cero entre los pesajes, se debe poner

el instrumento a cero sin determinar el error en cero4.



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Resultados: La diferencia entre los resultados de varios pesajes de la

misma carga no debe ser superior al valor absoluto del error máximo

tolerado (EMT) del instrumento para esa carga (Anexo 1)4.

2.2.1.2. Ensayo de excentricidad:

Consiste en determinar las variaciones que tiene el instrumento

cuando el mismo objeto es colocado en diferentes puntos del plato

receptor de carga4.

El valor nominal de la carga a utilizar es 1/3 de la capacidad máxima.

Es preferible usar pesas grandes antes que varias pesas pequeñas,

las pesas más pequeñas se colocan encima de las grandes4.

Es suficiente aplicar la carga sólo en los segmentos excéntricos, no

en el centro del receptor de la carga4.

Se coloca la carga en 5 puntos como se describe en la siguiente

figura:

Resultados: Los errores corregidos de las indicaciones obtenidas para

las diferentes posiciones de la carga deben cumplir con los errores

máximos tolerados (EMT) del equipo para esta carga (Anexo 1). En

instrumentos especiales (clase de exactitud I), se determina el error

inicial E0 antes de cada medición; donde este E0 es calculado con

cero o con una carga cercana a cero (por ejemplo 1 mg) 4.



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2.2.1.3. Ensayo de pesaje:

En esta prueba se determina si existe error más allá del permitido a lo

largo de toda la escala de medición en el instrumento4.

Se aplican las cargas a partir de cero hasta la capacidad máxima

inclusive e igualmente se retiran las cargas de ensayo hasta cero4.

Se utilizan 10 cargas, incrementando y disminuyendo

progresivamente la carga4.

Resultados: Los errores en cada valor de carga deben ser menores o

iguales al error máximo tolerado (EMT) del instrumento para esta

carga (Anexo 1). En instrumentos especiales (clase de exactitud I), se

determina el error inicial E0 antes de cada medición; donde este E0 es

calculado con cero o con una carga cercana a cero (por ejemplo 1

mg) 4.



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2.2.2. VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DEL ESPECTROFOTÓMETRO UV-

VIS:

Antes de realizar cada una de las pruebas se verifica la operatividad del

instrumento.

Se realizan tres pruebas que nos permiten verificar el buen desempeño

del espectrofotómetro, que son las siguientes:

2.2.2.1. Control de la longitud de onda:

Se utiliza una solución estándar de óxido de holmio con una

concentración de 40 g/L en ácido perclórico 10% v/v1, 7.

Se realizan las lecturas en el modo de Transmitancia y con un rango

de medición de 190 a 800 nm1, 7.

Se obtiene el espectro de Transmitancia de la solución estándar en

cubetas de 1 cm de paso óptico, a una temperatura de 20 °C1, 7.

Se emplea cubetas vacías como blanco1, 7.

Resultados: Se observa los porcentajes de transmitancia (%T)

mínimos y se verifica los correspondientes al perclorato de holmio en

las siguientes longitudes de onda1, 7:

Longitud de onda (nm)

Tolerancias (nm)

241,15 287,15

361,50 536,30

±1 ±1 ±1 ±3



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2.2.2.2. Control de la absorbancia:

Se realiza el control de absorbancia a 235 nm, 257 nm, 313 nm, 350

nm y 430 nm. Para el control de la absorbancia a 235 nm, 257 nm,

313 nm y 350 nm, se utiliza una solución estándar de dicromato de

potasio 60,06 mg/L en ácido sulfúrico 0,01 N, mientras que para el

control de la absorbancia a 430 nm, se utiliza una solución estándar

de dicromato de potasio 600,6 mg/L en ácido sulfúrico 0,01 N.

Se realizan las lecturas en el modo de Absorbancia y con un rango de

medición de 190 a 800 nm1, 7.

Se obtiene el espectro de absorción de la solución estándar en

cubetas de 1 cm de paso óptico, a una temperatura de 20 ±1°C.

Se emplea ácido sulfúrico 0,01N como blanco1, 7.

Resultados: Se calcula para cada longitud de onda, mediante

la expresión1, 7:

( )

Dónde:

= Absorbancia específica de una sustancia disuelta a una

concentración de 10 mg/mL, en una celda de 1 cm.

A = Absorbancia a la longitud de onda respectiva.

C = Concentración de dicromato de potasio (mg/mL).

Las absorbancias específicas para cada longitud de onda se indican

en la siguiente tabla1, 7:



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2.2.2.3. El límite de dispersión de luz:

Se utilizó una solución de cloruro de potasio 12 g/L p/v en agua1, 7.

Se realizan las lecturas en el modo de Trasmitancia y con un rango de

medición de 190 a 800 nm1, 7.

Se obtiene el espectro de Transmitancia de la solución estándar en

cubetas de 1 cm de paso óptico, a una temperatura de 25° ± 1° 1, 7.

Se emplea cubetas vacías como blanco1, 7.

Resultados: Se selecciona la longitud de onda de 198 nm y se

comprueba que el %T sea ≤ 1%1, 7.

Longitud de Onda

(nm)

Tolerancias

430 350 313 257 235

15,9

107,3 48,6

144,5 124,5

15,7 – 16,1

105,6 – 109,0 47,0 – 50,3

142,8 – 146,2 122,9 – 126,2



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2.2.3. VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DEL APARATO DE DISOLUCIÓN:

Antes de realizar cada una de la prueba se verifica la operatividad del

equipo.

Para esta prueba se utilizan Estándares de Referencia de Prednisona

tabletas USP (10 mg de contenido nominal de prednisona por tableta),

estas tabletas no pueden ser remplazadas por equivalentes.

La verificación del equipo se realiza con los aparatos que se utilizan, tales

como Aparato 1 (Canastillas) y/o Aparato 2 (Paletas)1, 8.

Los rangos de aceptación para esta verificación dependen de la vigencia

del certificado de las tabletas de Prednisona USP utilizadas.

Preparación del estándar:

Se pesa aproximadamente 25 mg de Prednisona estándar, y se lleva

a una fiola de 100 mL, se disuelve con 4 mL de alcohol, se sonica y

calienta a 50 º, se deja enfriar, luego se enrasa con agua, y se agita.

De esta solución se mide 2 mL, llevándose a una fiola de 50 mL, se

enrasa con agua y se agita.

Preparación de la muestra:

Se mide 5 mL de cada porción filtrada, se vierte a una fiola de 10 mL,

enrasándose y agitándose.

Preparación del medio de disolución:

Se calienta una cantidad adecuada de agua a alrededor de 41- 45 °,

mientras se agita suavemente1, 8.

Se filtra al vacío a través de una membrana de filtración de 0,45 μm

de porosidad en un matraz de filtración adecuadamente equipado con



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un dispositivo de agitación, se continúa aplicando el vacío mientras se

agita durante cinco minutos adicionales1, 8.

La temperatura del medio de disolución no debe caer por debajo de

37 ° antes de la iniciación de la prueba 1, 8.

Siempre que sea posible el medio no debe agitarse antes de la

iniciación de la prueba con el propósito de equilibrio1, 8.

Procedimiento:

Se determina la cantidad de Prednisona, disuelta en 500 mL de medio

de disolución, durante 30 minutos, a 50 rpm y con una temperatura de

37 °± 0,5 °; en cada recipiente1, 8.

Se extrae una alícuota de la muestra, y se filtra inmediatamente con

papel Whatman 42 o equivalente1, 8.

Se realiza las lecturas de las absorbancias del estándar y las

disoluciones de las muestras a 242 nm1, 8.

Se realiza la prueba por duplicado (etapa 1 y etapa 2) para cada uno

de los aparatos, sumando un total de 14 vasos1, 8.

Resultados: los cálculos se realizan en Microsoft Excel,

determinándose la media geométrica (MG) y el coeficiente porcentual

de varianza (% CV) (Anexo 3)1, 8.

Etapa 1: x1, x2,..., xn; en escala logarítmica natural: Lnx1, Lnx2,..., Lnxn

Etapa 2: xn+1, xn+2,..., x2n; en escala logarítmica natural: Lnxn+1,

Lnxn+2,..., Lnx2n



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Dónde:

x = cantidad disuelta de Prednisona en cada vaso, expresada en

porcentaje.

EXP: exponencial

VAR: varianza

RCUAD: raíz cuadrada

100: Factor de conversión a porcentaje.



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III. RESULTADOS

3.1. VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DE BALANZA ANALÍTICA:

Cuadro 1: Ensayo de repetibilidad de balanza analítica con una capacidad máxima de 210 g.

Nº Pesada Serie 1

Carga: 100 g Serie 2

Carga: 200 g I (g) E (g) I (g) E (g)

1 100,0003 0,0003 200,0002 0,0002 2 100,0002 0,0002 200,0002 0,0002 3 100,0002 0,0002 200,0001 0,0001 4 100,0004 0,0004 200,0003 0,0003 5 100,0005 0,0005 200,0003 0,0003 6 100,0004 0,0004 200,0003 0,0003 7 100,0004 0,0004 200,0003 0,0003 8 100,0003 0,0003 200,0002 0,0002 9 100,0004 0,0004 200,0003 0,0003 10 100,0004 0,0004 200,0003 0,0003

|Diferencia Máxima| 0,0003 0,0002 |E.M.T.| NMP:003-2009 2 mg Leyenda: I = Indicación, E= Error, E.M.T.= Error Máximo Tolerado, NMP: 003-2009 = Norma Metrológica Peruana. Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento No Automático.

Cuadro 2: Ensayo de excentricidad de balanza analítica con una capacidad máxima de 210 g.

Ubicación

Determinación de E0 Determinación del Error corregido Carga

Mínima* (g)

I (g) E0 (g) Carga (g) I (g) E (g) Ec (g)

1 2 3 4 5

0,0010 0,0009 0,0010 0,0009 0,0011

0,0000 -0,0001 0,0000 -0,0001 +0,0001

70,0000 70,0001 70,0001 70,0000 70,0000

0,0000 +0,0001 +0,0001 0,0000 0,0000

0,0000 +0,0002 +0,0001 +0,0001 -0,0001

0,0010 70,0000

* valor entre 0 y 10e (d<e ≤10d; d=0,0001g; e=0,0010 g) e = división de escala de verificación, d=división de escala. NMP:003-2009

E.M.T. NMP:003-2009 ± 2 mg

Leyenda: I = Indicación, E = Error, E0 = Error inicial, Ec = Error corregido (E-E0), NMP: 003-2009 = Norma Metrológica Peruana. Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento No Automático.



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Cuadro 3: Ensayo de pesaje de balanza analítica con una capacidad máxima de 210 g.

Carga Creciente Decreciente E.M.T. (g)

NMP:003-2009 I (g) E (g) Ec (g) I (g) E (g) Ec (g)

1 mg 0,0010 0,0000 ± 1 1 g 1,0000 0,0000 0,0000 1,0001 +0,0001 +0,0001 ± 1 2 g 2,0002 +0,0002 +0,0002 2,0003 +0,0003 +0,0003 ± 1 5 g 5,0001 +0,0001 +0,0001 5,0001 +0,0001 +0,0001 ± 1 10 g 10,0001 +0,0001 +0,0001 10,0000 0,0000 0,0000 ± 1 20 g 20,0002 +0,0002 +0,0002 20,0000 0,0000 0,0000 ± 1 50 g 50,0001 +0,0001 +0,0001 50,0001 +0,0001 +0,0001 ± 1 70 g 70,0000 0,0000 0,0000 70,0001 +0,0001 +0,0001 ± 2 100 g 100,0001 +0,0001 +0,0001 100,0002 +0,0002 +0,0002 ± 2 150 g 150,0002 +0,0002 +0,0002 150,0003 +0,0003 +0,0003 ± 2 210 g 200,0003 +0,0003 +0,0003 200,0003 +0,0003 +0,0003 ± 3 Leyenda: I = Indicación, E = Error, Ec = Error corregido (Ecarga “n” - Ecarga “1 mg”), NMP: 003-2009 = Norma Metrológica Peruana. Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento No Automático.



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3.2. VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DEL ESPECTROFOTÓMETRO UV-Vis:

Cuadro 4: Control de longitud de onda de espectrofotómetro UV-Vis.

Longitud de onda de referencia

(nm)

Tolerancias (nm) BP

Longitud de onda del %T mínimo (nm)

I II III

241,15 287,15 361,50 536,30

± 1 ± 1 ± 1 ± 3

241,100 287,000 361,200 536,300

241,100 287,000 361,200 536,300

241,100 287,000 361,200 536,200

Leyenda: I, II, III (Lecturas); BP = Farmacopea Británica.

Cuadro 5: Control de absorbancia de espectrofotómetro UV-Vis.

Longitud de onda Tolerancias

de BP

Absorbancia

(nm) I II III I II III

430 15,7 – 16,1 0,951 0,951 0,951 15,834 15,834 15,834 350 105,6 – 109,0 0,640 0,644 0,639 106,560 107,226 106,394 313 47,0 – 50,3 0,292 0,292 0,293 48,618 48,618 48,785 257 142,8 – 146,2 0,873 0,874 0,874 145,355 145,521 145,521 235 122,9 – 126,2 0,755 0,755 0,755 125,708 125,708 125,708

Leyenda: I, II, III (Lecturas); Absorbancia específica de una sustancia disuelta a una concentración de 10 g/L, en una celda de 1 cm; BP = Farmacopea Británica.

Cuadro 6: Control de dispersión de luz de espectrofotómetro UV-Vis.

Longitud de onda (nm)

Tolerancia (%T) BP

% T

I II III

198 ≤ 1 0,293 0,244 0,281 Leyenda: I, II, III (Lecturas); BP = Farmacopea Británica.



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3.3. VERIFICACIÓN DE DESEMPEÑO DEL APARATO DE DISOLUCIÓN:

Cuadro 7: Absorbancias del Estándar de Prednisona según su concentración.

Estándar Pesos (mg) Concentración

(mg/mL) Absorbancias

ST1 25,228 0,00991157664 0,422 ST2 25,181 0,00989311128 0,425 ST3 25,381 0,00997168728 0,432

Figura 1: Concentración vs Absorbancia del Estándar de Prednisona.

y = 42,956x - 2E-05 R² = 0,9998

-0,100

0,000

0,100

0,200

0,300

0,400

0,500

0,000 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,012

Ab

sorb

anci

a

Concentración

Absorbancias

Absorbancia

Lineal (Absorbancia)



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Cuadro 8: Absorbancias obtenidas de las muestras de cada vaso de los Aparato 1 (Canastillas) y Aparato 2 (Paletas).

Vaso

Absorbancias

Aparato 1 Aparato 2

Etapa 1 Etapa 2 Etapa 1 Etapa 2

1 2 3 4 5 6 7

0,268 0,304 0,292 0,309 0,288 0,323 0,318

0,267 0,323 0,315 0,321 0,289 0,265 0,271

0,142 0,146 0,152 0,149 0,143 0,150 0,151

0,139 0,145 0,139 0,146 0,150 0,148 0,147

Cuadro 9: Medias geométricas y coeficientes porcentuales de varianza de los Ln de los porcentajes de disoluciones de cada vaso de los Aparato 1 (Canastillas) y Aparato 2 (Paletas).

Vaso

Aparato 1 Aparato 2

Etapa 1 Etapa 2 Etapa 1 Etapa 2

%D Ln %D %D Ln %D %D Ln %D %D Ln %D

1 62,3939 4,1335 62,1611 4,1297 33,0619 3,4984 32,3635 3,4770 2 70,7744 4,2595 75,1975 4,3201 33,9930 3,5262 33,7602 3,5193 3 67,9809 4,2192 73,3352 4,2950 35,3898 3,5664 32,3635 3,4770 4 71,9384 4,2758 74,7319 4,3139 34,6914 3,5465 33,9930 3,5262 5 67,0497 4,2054 67,2825 4,2089 33,2947 3,5054 34,9242 3,5532 6 75,1975 4,3201 61,6955 4,1222 34,9242 3,5532 34,4586 3,5398 7 74,0335 4,3045 63,0922 4,1446 35,1570 3,5598 34,2258 3,5330

MG 69 34 Tolerancias 57 – 84 20 – 36 %CV 7,6 2,9 Tolerancias 9,4 6,4 Leyenda: %D = Porcentaje de disolución; MG = Media Geométrica de los Ln %D; %CV = Coeficiente porcentual de varianza de los Ln %D.



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IV. DISCUSIÓN

En este informe se detalla las diferentes pruebas de verificación

realizadas a tres instrumentos: balanza analítica, espectrofotómetro UV-Vis y

aparato de disolución.

A la balanza analítica se le realizaron tres ensayos de verificación de

desempeño: repetibilidad, excentricidad y pesaje, según los especificado en la

Norma Metrológica Peruana: Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento No

Automático (NMP 003). Estos ensayos fueron hechos con la finalidad de saber

si el instrumento de pesaje es confiable al momento de realizar una medición4.

En el cuadro 1, se expresan los resultados del ensayo de repetibilidad

realizado en dos series (serie 1: carga de 100 g y serie 2: carga de 200 g), en

donde se evidencia que las diferencias máximas halladas entre las lecturas de

varios pesajes de la misma carga, no son superiores al valor absoluto del Error

máximo Tolerado (EMT) del instrumento para esa carga (|2mg|), siendo los

resultados para la serie 1: |0,0003 g| y serie 2: |0,0002 g|; por lo tanto se

declara conforme el ensayo de repetibilidad.

En el cuadro 2, se detallan los resultados obtenidos del ensayo de

excentricidad, para cada una de las cinco posiciones del platillo descritas en el

procedimiento, empleando una carga de 70 g. Los errores corregidos de las

indicaciones obtenidas en las diferentes ubicaciones de la carga cumplen con

los EMT del equipo para esta carga (± 2 mg). Estos resultados fueron:

Ubicación 1: 0,0000 g; Ubicación 2: + 0,0002 g; Ubicación 3: + 0,0001 g;

Ubicación 4: + 0,0001 g; Ubicación 5: - 0,0001 g; por lo tanto se declara

conforme el ensayo de excentricidad.



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En el cuadro 3, se presentan los resultados obtenidos para cada una de

las diez cargas utilizadas en el ensayo de pesaje (1 g, 2 g, 5 g, 10 g, 20 g, 50 g,

70 g, 100 g, 150 g, 200 g); los pesos se recogieron incrementando y

disminuyendo progresivamente las cargas. Así tenemos, que el error generado

por la carga mínima es 0,0000 g; y los errores para cada carga (creciente;

decreciente) son: 1 g (0,0000 g; + 0,0001 g); 2 g (+ 0,0002 g; + 0,0003 g); 5 g

(+ 0,0001 g; + 0,0001 g); 10 g (+ 0,0001g; 0,0000 g); 20 g (+ 0,0002 g; 0,0000

g); 50 g (+ 0,0001g; + 0,0001 g); 70 g (0,0000g; + 0,0001 g); 100 g (+ 0,0001g;

+ 0,0002 g); 150 g (+ 0,0002g; + 0,0003 g); 210 g (+ 0,0003g; + 0,0003 g).

Estos resultados se encuentran dentro de los EMT (1 mg a 50 g = ± 1 mg; 70 a

150 g = ± 2mg; 210 g = ± 3 mg) para cada una de las cargas empleadas, por

consiguiente se declara conforme el ensayo de pesaje.

Para la verificación de desempeño del espectrofotómetro UV-Vis se

consideraron las pruebas de: control de longitud de onda, control de

absorbancia y control de dispersión de luz, según lo estipulado en la

Farmacopea Británica7.

En el cuadro 4, se expresan los resultados del control de la longitud de

onda del espectrofotómetro UV-Vis, determinados con una solución estándar

de óxido de holmio 40 g/L en ácido perclórico 10% v/v (Anexo 2). Así tenemos

que los resultados obtenidos demuestran que existe concordancia entre las

longitudes de onda que indica el instrumento y las longitudes de onda de

referencia (241,15 nm; 287,15 nm; 361,50 nm; 536,30 nm), por lo tanto se

declara conforme el control de longitud de onda.

En el cuadro 5, se definen los resultados del control de absorbancia a

430 nm, 350 nm, 313 nm, 257 nm y 235 nm (Anexo 2). Los resultados de las



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Absorbancias específicas ( ) calculadas, demuestran que el equipo cumple

con los parámetros de absorción indicados a diferentes longitudes de onda y

concentraciones, por consiguiente se declara conforme el control de

absorbancia.

En el cuadro 6, se expresan los resultados del límite de dispersión de

luz, determinados con una solución estándar de cloruro de potasio 12 g/L p/v

en agua (Anexo 2). Estos resultados son menores al 1% de transmitancia a la

longitud de onda de 198 nm; lo que quiere decir que le equipo se desempeña

conformemente en esta prueba.

La verificación de desempeño del aparato de disolución se desarrolla

según lo especificado en el certificado de estándar de referencia de Prednisona

USP tabletas de 10 mg (Anexo 3)8.

En la figura 1, se muestra la curva de calibración graficada teniendo en

cuenta las absorbancias en relación a las concentraciones del estándar de

Prednisona, obteniéndose un coeficiente de correlación de 0,9998; lo que

indica una linealidad excelente. Con la ecuación de la recta se obtuvieron los

porcentajes de disolución de cada vaso, según las pruebas realizadas en el

aparato 1 (canastillas) y aparato 2 (paletas), expresados en el cuadro 9. Así

mismo, en dicho cuadro, se evidencia los resultados de la media geométrica

(MG) y el coeficiente porcentual de varianza (%CV), los cuales cumplen con los

parámetros especificados en el certificado del estándar de Prednisona, por lo

tanto se declara que el aparato de disolución se desempeña de manera

correcta.



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V. CONCLUSIONES

1. El desempeño de la balanza analítica es conforme a lo establecido por la

Norma Metrológica Peruana de Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento

No Automático.

2. El desempeño del espectrofotómetro UV-Vis es conforme a lo establecido

por la Farmacopea Británica.

3. El desempeño del aparato de disolución es conforme a lo establecido por la

Farmacopea de los Estados Unidos.



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VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Farmacopea de los estados unidos de América. USP 36 (NF 31). 2013.

2. Ministerio de Salud. Documento Técnico: Manual de Buenas Prácticas de

Laboratorio para el Control de Calidad de Productos Farmacéuticos.

Resolución Ministerial N° 485-2013/MINSA. Lima, 5 de Agosto del 2013.

3. Ministerio de Salud. Documento Técnico: Manual de Buenas Prácticas de

Manufactura de Productos Farmacéuticos. Resolución Ministerial N° 055-

99. SA/DM. Lima, 8 de Febrero de 1999.

4. Norma Metrológica Peruana. Instrumentos de Pesaje de Funcionamiento

No Automático. NMP 003. R.001-2009/SNM-INDECOPI. Lima, 07 de

Diciembre del 2009.

5. Espectrometría ultravioleta-visible. Espectrometría. com. Revista en

Internet. [Acceso el 16 de Marzo 2014]. Disponible en:

http://www.espectrometria.com/espectrometra_ultravioleta-visible

6. Metrología Aptica: Espectrofotómetros de Ultravioleta-Visible. La Guía

MetAS. Metas & Metrólogos Asociados. Abril 2007. [Acceso el 16 de Marzo

2014]. Disponible en: http://www.metas.com.mx/guiametas/La-Guia-MetAs-

07-04-espectrofotometria.pdf

7. British Pharmacopoeia. Ultraviolet and Visible Absorption

Spectrophotometry. Edition 7. 2012. Appendix II B.

8. Certificate. USP PREDNISONE TABLETS RS. 10 mg nominal prednisone

content per Tablet. Lot Q2L493. For Dissolution Performance Verification

Test (PVT). 15 de Julio 2013.



http://www.espectrometria.com/espectrometra_ultravioleta-visible

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ANEXO 1

Errores máximos permitidos según la NMP: 003-2009



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ANEXO 2

Pruebas de Verificación de Desempeño del Espectrofotómetro UV-Vis

Control de Longitud de Onda

N° Valle Longitud de onda (nm)

28 241,15

25 287,15

23 361,50

17 536,30



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Control de Absorbancia

N° Longitud de onda (nm)

1 350

2 313

3 257

4 235


1 430



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Límite de Dispersión de Luz


1 190



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ANEXO 3



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ANEXO 4

Cálculos de Disolución de Prednisona

Calculo de la concentración del estándar secundario de Prednisona:

Dónde:

F ST: Factor de estándar

W ST: Peso del estándar secundario de Prednisona

P ST: Potencia del estándar secundario de Prednisona (98,22%)

2: Alícuota extraída (mL)

100 y 50: Volumen de aforos (mL)

Cálculo del factor de muestra (FM):

Dónde:

500: Volumen de medio de disolución por cada vaso (mL)

5: Alícuota extraída (mL)

100: Porcentaje



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Ecuación de la recta:

( ) ( ) ( ) ( )

Dónde:

Abs ST (1, 2, 3): Absorbancia de estándar

b: Pendiente

a: Intercepto

R: Coeficiente de correlación

Cálculo del porcentaje de disolución (%D):

( )

Dónde:

Abs M: Absorbancia de la muestra de cada vaso.



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