HEPATITIS BINTRODUCCIN.Hepatitis es un trmino que se utiliza
para definir inflamacin del hgado y puede ser causado por varios
virus como los de la hepatitis A, B, C, D y E. (2) La Hepatitis B
es una patologa que se le conoce como hepatitis del suero o
hepatitis de incubacin, esta se caracteriza por la asociacin de
fenmenos inflamatorios como:
Necrosis Hepato celular Fibrosis (1)
La hepatitis B es una enfermedad infecciosa de origen viral cuyo
responsable es el virus de la Hepatitis B (VHB), dicho virus
pertenece a la familia Hepadnaviridae y tiene un tamao aproximado
de 42nm, posee una envoltura lipoprotenica (antgeno de superficie
HBsAg) y una estructura central conocida como core (antgeno del
core HBcAg); produce infeccin aguda y crnica en el 90 y 10% de los
casos respectivamente pudiendo llegar a causar carcinoma hepato
celular o un estado de portador permanente.(1)
El desarrollo de la biologa molecular del virus B ha alcanzado
diversas variantes de este virus ( HBe Ag positivo),la mutacin
precoz que est creciendo en muchos pases, y las mutaciones
inducidas por diversos tratamientos como YMDD (inducida por
lamivudina). As mismo como la hepatitis C existen 8 genotipos que
se le atribuye a este virus que van desde la letra A hasta la H.
(1)
El VHB produce infeccin aguda y crnica las mismas que pueden
pasar a el recin nacido a travs de la madre en los nios y adultos
su transmisin se produce fundamentalmente por Va Parenteral y por
Va Sexual, sin embargo muchas personas se han infectado con
jeringas, agujas o bistures esterilizados de manera inapropiada e
incluso por tatuajes, esta enfermedad constituyendo un peligro para
el personal de Laboratorio Clnico y Hospitales. (1)
Despus de la infeccin por el VHB aparecen anticuerpos contra el
HBcAg de las clases Ig M y la Ig G la primera persiste de 3 a 12
meses dando a conocer Hepatitis Aguda y acaban por hacerse
indetectables mientras que la segunda persiste durante toda la vida
(inmunidad adquirda) indicando infeccin tratada o Hepatitis Crnica
si se presenta con el HBsAg.Las pruebas serolgicas en la actualidad
son muy utilizadas en el diagnstico de infecciones virales, son muy
sensibles, detectan mnimas cantidades de anticuerpos del virus.
(1)
Alrededor del 10% de adultos infectados crnicamente por VHB
presentan antgenos HBs y HBe y, de stos, un 20% desarrollan
hepatitis crnica activa, con riesgo elevado de aparicin de
cirrosis, carcinoma hepatocelular o ambos. En un 5-10% de stos
pacientes se produce seroconversin espontnea anti-HBe, mientras que
con tratamiento con interfern, la seroconversin se eleva al 30-40%.
En los portadores con anti-HBe, un 3-9% desarrolla hepatitis crnica
activa y un 1,5% cirrosis. La desaparicin del antgeno HBs del suero
de individuos con infeccin crnica por VHB es un hecho infrecuente.
Su incidencia anual es de un 0,4-2% en los pases desarrollados, y
de un 0,1% y el 0,7% en reas endmicas, donde la transmisin es,
sobre todo, perinatal. Sin embargo, estudios recientes han
demostrado que estos pacientes pueden desarrollar hepatitis B
fulminante, cirrosis y carcinoma hepatocelular, por la aparicin de
mutaciones en el gen X del VHB.
OBJETIVOS.Objetivo General: Conocer la importancia y la
problemtica de la Hepatitis B, as como la importancia del
laboratorio clnico en la ayuda de un diagnostico eficiente.
MARCO TEORICO.HEPATITIS BEl virus B de la hepatitis es una
molcula de ADN que tiene una doble hebra circula, el virus de la
hepatitis b pertenece a la familia Hepadnaviridae, posee un dimetro
de 42nm. Este virus est envuelto en una nucleocpside y en una
envoltura lipdica donde se insertan protenas virales de superficie
infecciosas llamadas partculas Dane. Existen otras partculas vacas
circulantes de 22mm no infecciosas.El Virus de la Hepatitis B HVB
infecta principalmente a los hepatocitos, sin embargo, otras clulas
no escapan de este ataque, como las epiteliales biliares, pncreas,
rin, piel, bazo y clulas mononucleares en sangre perifrica. Todos
estos rganos, constituyen un reservorio extra heptico para
partculas HBV infecciosas. La partcula viral HBV se fusiona con la
membrana del hepatocito, liberando su nucleocpside en el
citoplasma.Las protenas virales de envoltura son mudadas a otro
sitio y la nucleocpside migra hacia el ncleo del hepatocito. El DNA
viral penetra hacia el ncleo donde es transformado en una molcula
proviral circular covalentemente cerrada (ccc DNA). El ccc DNA
sirve como templete para la subsecuente replicacin viral y
traslacin hacia la protena viral va pregenmica y RNA mensajero,
para ser exportadas hacia el citoplasma donde el ensamblaje viral
tiene lugar. El DNA viral se integra al cromosoma de la clula
husped, proceso que parece jugar un papel en la
hepatocarcinognesis.Este ciclo de vida viral es complejo y se
realiza gracias a la funcin de transcriptasa reversa de su
polimerasa. (3)
creening High Risk Populations to IdentifyHBV Infectad
Personas
Figura numero 1El virus de la hepatitis B es un componente
secundario del vibrin aqu las protenas HBe Ag y ABc Ag comparten la
mayor parte de su secuencia proteica. En el VHB la clula procesa de
forma distinta la HBeAg, aqu la molcula se libera directamente al
suero, no se auto ensambla y expresa distintos determinantes
antignicos.En el suero de las personas infectadas se libera
partculas que contienen HbsAg, las cuales superan el nmero de
vibriones. (4)
Figura Numero 2REPLICACION DEL VIRUS DE LA HEPATTIS BEl VHB
tiene un tropismo por el hgado muy definido y se replica a travs de
un intermediario de ARN, produce y secreta partculas que actan como
seuelos antignicos. La adhesin a los hepatocitos esta mediado por
las glucoproteinas HBsAg, tambin los receptores de las clulas
hepticas, como la transferrina, la endonexina heptica humana.Cuando
penetra en la clula anfitriona, la cadena parcial de ADN se
completa para transformase en un circulo completo de ADN
bicantenario, y el genoma se transmite al ncleo de la clula.El ADN
se transcribe en tres clases principales y dos secuencias
secundarias de ARN mensajeros superpuestos.Las Hb c y las Hb e son
protenas similares que se producen a partir de distintos codones de
inicio en la fase de ARNm relacionados.Despus se libera el antgeno
Hb e e incorpora el antgeno HBc al vibrin.El vibrin abandona el
hepatocito por exocitosis sin destruir la clula, pero no por lisis
celular. (4)
El virus de la hepatitis B no causa injuria celular directa,
excepto en circunstancias inusuales. La respuesta inmune del
husped, tanto celular como humoral, determina el curso de la
infeccin y el grado de dao heptico en hepatocitos infectados. Los
linfocitos T citotxicos (clulas CD8+) destruyen especficamente los
hepatocitos infectados con el virus B de la hepatitis, con el
posterior aumento de las clulas CD4+. (3)
TIPOS DE HEPATITIS BSe los ha clasificado segn la forma en la
que se contrae la hepatitisA.) HEPATITIS EPIDEMICACuando se contrae
en forma directa: ingestin de alimento en malas condiciones B.)
HEPATITIS DE INOCULACIONCuando se contrae durante un acto
teraputico que se comporte inyeccin sangre u otro material con
sangre contaminada con el virus. (5)
La mayora de las personas que adquieren el virus de la hepatitis
B se recupera sin consecuencias. Esta forma de infeccin, que dura
menos de 6 meses, se conoce como hepatitis B aguda. Por el
contrario, cuando la infeccin perdura por ms de 6 meses, se conoce
como hepatitis B crnica. Aproximadamente el 5% de los adultos que
adquieren la infeccin desarrollan la forma crnica.La probabilidad
de desarrollar una hepatitis B crnica depende de la edad y del
estado inmunitario (defensas) del sujeto, siendo mayor cuando se
adquiere en la infancia que cuando se adquiere siendo adulto. (4)
SNTOMAS DE LA HEPATITIS BEl periodo de incubacin dura de 6 a 24
semanas, con una media de 60 a 90 das y se relaciona con la
cantidad de carga viral del inoculo, el mecanismo de transmisin y
del husped. (1)Las manifestaciones clnicas de la infeccin por el
virus de la hepatitis B son muy variadas, y es importante hacer
nfasis en la frecuencia de esta infeccin que no puede dar ningn
sntoma por muchos aos lo cual no significa necesariamente que la
infeccin est controlada. El dao que produce el virus de la
hepatitis B en el hgado es tambin variable y depende de la
capacidad de reparacin del hgado y de la capacidad del organismo de
controlar la infeccin. Las consecuencias ms importantes de esta
infeccin en el largo plazo son el desarrollo deCirrosis Hepticay de
Carcinoma Hepatocelular. (6)Hepatitis B agudaLos sntomas de la
hepatitis B aguda se presentan despus de 1 a 4 meses de la
adquisicin del virus en la que muchas personas pueden no presentar
ningn sntoma. Entre los sntomas se incluyen: Cansancio. Disminucin
del apetito (anorexia). Nuseas. Ictericiao coloracin amarillenta de
la piel. Coluria. Dolor en la zona superior derecha del abdomen.
Dolor o inflamacin de las articulaciones.Estos sntomas
habitualmente desaparecen en un lapso de 3 meses.Una proporcin muy
baja de las personas con hepatitis B aguda (0.1 a 0.5%) desarrollan
una forma ms grave de la enfermedad caracterizada por falla del
hgado (hepatitis fulminante). (6)
Hepatitis B crnicaLa hepatitis B crnica frecuentemente es
asintomtica o slo se manifiesta por sntomas inespecficos como
cansancio o disminucin del apetito. Ocasionalmente se presentan
exacerbaciones de la actividad inflamatoria del hgado que pueden
traducirse en exacerbaciones de los sntomas.En la medida que la
infeccin produce un dao mayor en el hgado, pueden manifestarse los
sntomas de la cirrosis heptica.Un 10 a 20% de los pacientes pueden
tener manifestaciones extra-hepticas de la enfermedad, ms
frecuentemente vasculitis y glomerulonefritis. (6)Vas de transmisin
de la hepatitis BEl virus de la hepatitis B se transmite a travs
del contacto con sangre o fluidos corporales contaminados. El virus
de la hepatitis B puede ser transmitido por: Relaciones sexuales:El
virus de la hepatitis B se transmite mediante el contacto de
fluidos corporales como es el semen o secreciones vaginales entre
personas que tengan el virus. Transfusiones de sangre:No es muy
probable el contagio de la hepatitis b mediante una transfusin de
sangre, esto es debido a que existen pruebas pre-transfucinales que
van a prevenir el contagio.
Transmisin perinatal:Consiste en la transmisin del virus de la
hepatitis B de la madre al hijo, habitualmente cercano al momento
del parto. Drogas inyectables:El uso de jeringas y/o agujas
contaminadas es una importante va de contagio.
Tatuajes: perforaciones o piercing.
Contacto cercano:La infeccin puede producirse si sangre de una
persona infectada entra en contacto con las membranas mucosas
(ojos, boca, genitales) o con pequeas heridas de otra persona
Procedimientos mdicos:El virus de la hepatitis B puede
transmitirse por instrumentos contaminados durante procedimientos
mdicos invasivos como cirugas si no se aplican las precauciones
necesarias.(6)
EPIDEMIOLOGIA
Se estima que ms de un tercio de la poblacin mundial se ha
infectado por el VHB es decir unos 2.000 millones y de estos unos
200 a 400 millones son portadores crnicos. El 25% desarrollaran
alguna enfermedad heptica como la hepatitis crnica y cirrosis.Cabe
recalcar que esta problemtica ha ido cambiando en los ltimos aos
por dos fenmenos como es la vacunacin y las migraciones.La
Hepatitis B es una enfermedad extremadamente infecciosa, es 100
veces ms infecciosa que el virus del VIH y est presente en todo el
mundo.La principal va de contagio es la promiscuidad en
adolescentes que causan un alto factor de riesgo.Segn indicadores
del Ministerio de Salud la tasa total de prevalencia de hepatitis B
en el Ecuador es de 32.6 %, lo cual es ms elevado de lo reportado
por el Foro Mundial de la Salud. En los trabajadores de petroleros
fue de 30.2 %, de los cuales 11.3 % resultaron crnicos, en los
adolescentes es 29.6%, con 5.9% de crnicos, en los trabajadores de
la salud la cifra lleg a 46 % con 9.5 de crnicos. (7)
PrevencinEn Ecuador la mejor forma de prevenir esta infeccin es
la vacunacin, adems de la modificacin de conductas individuales que
nos ponen en riesgo.La vacuna contra la hepatitis B es muy segura y
efectiva; adems es considerada como la primera vacuna "contra el
cncer" ya que nos protege de la hepatitis B que causa el 80% de
casos de cncer de hgado en el mundo. Se necesitan nicamente 3 dosis
para quedar protegido. Con ms de mil millones de dosis aplicadas,
los estudios mdicos y cientficos han demostrado que la vacuna
contra la hepatitis B es una de las ms seguras (7)
DIAGNOSTICO.El laboratorio clnico es de mucha importancia en el
diagnostico de la hepatitis b, se diagnostica en una persona que
tiene los sntomas de una hepatitis aguda, o a travs de la
investigacin de alteraciones de las pruebas hepticas en un paciente
sin sntomas.Debido a que muchas enfermedades hepticas pueden tener
manifestaciones clnicas similares a la hepatitis B, habitualmente
los exmenes de laboratorio son los que dan el diagnstico definitivo
(6)
Pruebas a realizar: Hemograma Generalmente en la hepatitis se
presenta una anemia.
Perfil heptico: ALT (Abanino amino transfer asa) AST (Aspartato
amino transferasa)
(Tambin conocidas como transaminasas, son exmenes que permiten
estimar el grado de inflamacin heptica. La ALT y la AST pueden
elevarse a valores sobre 1000 U/L en una hepatitis aguda y varan
desde el rango normal (menos de 40 U/L) hasta algunos cientos en la
hepatitis crnica).
ALP (Fosfatasa Alcalina) GGT (Gama glutamil transpeptidasa)
Pruebas Qumicas
Bilirrubina:Labilirrubinaes un producto de degradacin de la
hemoglobina de los glbulos rojos que es eliminada por el hgado. Su
elevacin indica una falla ms importante de la capacidad excretora
heptica y se manifiesta como ictericia.
Albmina:Laalbminaes la principal protena del plasma y es
producida en el hgado. Su disminucin habitualmente indica un dao
importante del hgado.
Hemostasia: en general el test de hemostasia va a mostrar
resultados alterados debido a que en el hgado se forman o se
sintetizan los factores de coagulacin cualquier dao en el hgado
afectara directamente la hemostasia corporal.
Tiempo de protrombina:Laprotrombinaes una protena producida por
el hgado que sirve para la coagulacin. Su medicin se expresa como
porcentaje del valor normal o como INR (international normalized
ratio). El INR normal es 1. A medida que disminuye la produccin de
protrombina el INR aumenta.
Pruebas Inmunolgicas
Marcadores virales:
El virus de la hepatitis B puede detectarse mediante exmenes que
detectan directamente protenas producidas por el virus (antgenos) o
la respuesta inmunolgica producida por el organismo contra el virus
(anticuerpos).El antgeno de superficie de hepatitis B(HBsAg)est
presente tanto en la infeccin aguda como crnica.Los anticuerpos
anti-core pueden ser de tipo IgG o IgM(IgM anti-HBc). La presencia
de IgM anti-HBc generalmente indica una infeccin aguda. La deteccin
del antgeno e(HBeAg)es un indicador de infeccin activa y de
replicacin viral. Su deteccin es importante durante el tratamiento,
ya que su desaparicin indica que la replicacin viral ha sido
controlada. En algunos pacientes puede haber variantes del virus
que sufren una mutacin (mutantes pre-core) y no producen HBeAg, a
pesar de existir infeccin activa. (6)
Carga viral:La deteccin y cuantificacin del DNA (material
gentico) viral es una excelente forma de monitorizar el grado de
replicacin viral. Se usa frecuentemente para monitorizar la
respuesta a terapia. (6)
Biopsia heptica:La obtencin de un fragmento de hgado para
anlisis microscpico es una excelente manera de determinar el grado
de dao existente en el hgado, importante para decidir la terapia.
(6)
MATERIALES Y METODOSLas tcnicas enzimticas, qumicas y serolgicas
actuales permiten detectar a los pacientes infectados por el virus
de hepatitis b ,tambin ayudan dichas tcnicas mencionadas en los
pacientes infectados mediante los antgenos del VHB y la respuesta
de anticuerpos con distintos grados de sensibilidad y
especificidad.Los materiales a usar sern:
SUERO NO HEMOLISADO
Adems:Reactivos De Perfil Heptico ALT y AST GGT ALPReactivos De
Protenas AlbuminaInmunologa Microelisa
FUNDAMENTO DE LAS PRUEBAS A REALIZAR
Aminotransferasas
TGO Y TGP Las aminotransferasas (AST y ALT) cataliza la
transferencia del grupo amino del aspartato al 2-oxoglutarato, y de
la Alanina 2-oxoglutarato, formando oxalacetato y glutamato. La
concentracin cataltica se determina, empleando la reaccin acoplada
de la malato deshidrogenasa (MDH), a partir de la velocidad de
desaparicin del NADH. (8)
Gamaglutamil transpeptidasa:
La -glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza a
la -GT L--glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida y la glicilglicina
transformndola en L--glutamilglicilglicina y
5-amino-2-nitrobenzoato que se puede cuantificar determinado en el
fotocolormetro.(8)
Fosfatasa Alcalina:
Las fosfatasas alcalinas (FAL) catalizan la hidrlisis del
pnitrofenilfosfato (p-NFF) con la formacin de p-nitrofenol y
fosfato inorgnico, actuando el tampn alcalino como aceptor del
grupo fosfato. La reaccin se controla cinticamente a 405 nm a
partir de la velocidad de formacin del p-nitrofenol, proporcional a
la actividad FAL presente en la muestra. (8)
Bilirrubinas:La bilirrubina reacciona especficamente con el cido
sulfanlico diazotado produciendo un pigmento color rojo-violceo
(azobilirrubina) que se mide fotocolorimtricamente a 530 nm. Si
bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con
el diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere
la presencia de un desarrollador acuoso (Reactivo A) que posibilite
su reaccin. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina
total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe
agregarse benzoato de cafena al medio de reaccin.
(8)Inmunologa:
La tcnica es un ensayo inmunoenzimtico ampliamente empleado en
el rea mdica para la cuantificacin de molculas especialmente de
aquellas que experimentan cambios en diferentes estados como pueden
ser infecciones por bacterias, virus, hongos o parsitos o fases
activas de enfermedades autoinmunes.Se pueden medir anticuerpos,
inmunoglobulinas contra antgenos de patgenos, toxinas, etc.
Mtodo de Ensayo para la Determinacin del Antgeno de Superficie
delVirus de la Hepatitis B (HBsAg) en Suero Humano
Fundamento HBsAg (Human)
La prueba de HBsAg est basada en un ensayo tipo sndwich en los
micro pozos cubiertos con anticuerpos monoclonales de ratn (acr)
contra HBsAg. La muestra reacciona simultneamente con los acr
inmovilizados y con los anticuerpos policlonales anti-HBs (cobayo)
conjugados con peroxidasa de rbano.Si el HBsAg est presente en la
muestra, el complejo contenido peroxidase es capturado en la
superficie de los micro pozos. Luego de la incubacin el conjugado
no unido es removido por el lavado.La solucin de substrato es
agregada y durante la posterior incubacin se desarrolla un color
azul. La intensidad de color, la cual cambia a amarillo luego de
parar la reaccin con una solucin cida, es proporcional a la
cantidad de HBsAg en la muestra.
CONCLUSIN
La parte del laboratorio cinco es muy importante en la Hepatitis
B, ya que va a servir como ayuda al mdico a diagnosticar dicha
enfermedad, as mismo, va a participar en una prevencin oportuna, ya
que es una enfermedad que est empezando a surgir con fuerza en
nuestra sociedad por las costumbres de las persona.
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http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0016-35032008000100019&lang=pt.
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5. Hepatitis B. Accedido 20 de abril de 2015.
http://es.slideshare.net/blacksaturn/hepatitis-b-9662965?related=3.
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Accedido 25 de abril de 2015.
http://telegrafo.com.ec/sociedad/item/ministerio-de-salud-activa-plan-para-controlar-hepatitis.html.
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