Upload
voliem
View
220
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
fcfci H I L I K 1 ,
! W 'V r W '.H I F f J<s$
s k r i p s i '™ r: :t * vte- •■ A
WHENY UTOYO
ANALISIS PEHGAWET PADA MINUMAN SARI BUAH SIRSAK OALAM KEMASAN BOTOL GELAS
VANG BEREOAR 01 PASAR RESMI 01 WILAYAH SURABAYA SELATAN DENGAN METODE
KROMATOGRAFI LAPISAN T IP IS -D EN S ITO M ETR I
FAKULTAS FARMAS1 UN1VERS1TAS AIRLANGGA S U R A B A Y A
1995
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
ANALISIS PENGAWET PADA MINUMAN
SARI BUAH SIRSAK DALAM KEMASAN BOTOL GELAS
YANG BEREDAR DI PASAR RESMI DI WILAYAH SURABAYA SELATAN
DENGAN METODE KROMATOGRAFI LAPISAN TIPIS - DENSITOMETRI
SKRIPSI
Dibuat untuk memenuhi Tugas Akhir mencapai
gelar Saijana Farmasi pada Fakultas Fannasi
Universitas Airlangga
1995
Oleh :
Wheny Utoyo
058911121
Disetujui oleh pembimbing
Drs. Soebahagiono. Apt
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
KATA PENGANTAR
Segala puji, hormat dan syukur kami panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa
atas segala rahmat dan karunianya sehingga tugas akhir ini dapat kami selesaikan. Sebab
segala hikmat, nikmat dan kepandaian hanya bersumber dari padaNya.
Dalam kesempatan ini kami sampaikan rasa penghargaan dan terima kasih yang
sedalam-dalamnya kepada:
- Ibu Dra. Sri Poedjiarti, MS sebagai pembimbing kami yang telah dengan sabar dan
penuh pengertian memberikan dorongan, bimbingan, dan pengarahan dalam penelitian
dan penyusunan naskah tugas akhir ini.
- Bapak Drs. Soebahagiono sebagai pembimbing kami yang dengan penuh kesabaran
dan kesungguhan telah betkenan membimbing, mengarahkan dan memberi dorongan
kepada kami dalam penyelesaian tugas akhir ini.
- Bapak Drs. Harjana, Mac sebagai kepala Laboratorium Analisis Faimasi yang telah
berkenan memberikan sarana yang kami perlukan.
- Seluruh do sen penguji yang telah memberikan kritik dan saran demi kesempumaan
skripsi ini.
- Ibu Dra. Budi Suprapti sebagai dosen wali kami yang telah dengan sabar dan penuh
pengertian memberikan dorongan semangat, bimbingan, dan pengarahannya.
- Laboran Laboratorium Analisis Fannasi dan laboran Laboratorium Instrument
Fakultas Fannasi Universitas Airlangga yang telah membantu kami selama proses
penelitian.
- Kedua orang tua, kakak serta adik kami yang telah ikut membantu dan memberikan
dorongan baik moril maupun materiil sehingga tugas akhir ini dapat terselesaikan.
- n -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- Semua gahnVmt dan ralnm-relnm baik dalam lingVimgan Vflmpns maiipim linglcungan
terdekat kami yang turut serta memberikan dorongan semangat, kami ucapkan terima
Akhimya, skripsi ini kami persembahkan kepada Almamater tercinta Fakultas
Fannasi Universitas Airlangga dengan harapan semoga skripsi ini bermanfaat bagi
pengembangan ilmu pengetahuan.
Surabaya, Januari 1995
Penyusun
-Hi-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
DAFTAR ISI
LEMBAR PER5ETUJUAN............................... .................................................- i -
KATA PENGANTAR................. ...................................................................... - ii -
DAFTAR ISI..................................................... ............................................... - iv -
DAFTAR GAMBAR.........................................................................................- ix -
DAFTAR TABEL.............................................................................................- xii -
DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................- xiv -
BAB I : P E N D A H U L U A N .......................................................... - 1 -
1. Latar Belakang Masalah.......................................................... - 1 -
2. Permasalah&n............................................................ .............. - 4 -
3. Tujuan Penelitian ................................................................... - 4 -
BAB II : TINJAUAN PUSTAKA............................................................... - 5 -
1. Tinjauan Umum Tentang Pengawet........................................ - 5 -
1.1. Cara umum pengawetan makanan.............................. .. - 5 -
1.1.1. Pengawetan tanpa penambahan bahan pengawet.............. - 5 -
1.1.2. Pengawetan dengan cara penambahan bahan pengawet . . - 5 -
1.2..Keuntungan penggunaan pengawet Icimia ............................ - 5 .
1.3. Kerugiaa penggunaan pengawet k im ia................................. - 6
2. Tinjauan tentang pengawet yang ada pada minuman sari buah
sirsak .................................................................................... . 6 -
2.1. Asam Benzoat...................................................................... - 6 -
2.2. Natrium Benzoat ................................................................. - 7 -
2.3. Asam Salisilat ........... .......................................................... - 8 -* *
- ly ■
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
2.4. Methyl p-Hidroksi Benzoat (Nipagin) ................................. - 9
3. Tinjauan tentang minuman sari b u a h ..................................... >10
4. Tinjauan tentang ekstraksi ......................................................- 11
4.1. Teori dasar ...........................................................................- 11
4.2. Ekstraksi terhadap sampel minuman sari buah sirsak ......... - 13
5. Tinjauan tentang Kromatografi Lapisan Tipis ....................... -13
6. Tinjauan tentang Densitometri................................................. - 14
6.1. Analisis Kualitatif dengan Metode Densitometri ................ - 16
6.2. Analisis Kuantitatif dengan Metode Densitometri .............. - 16
7. Tinjauan Tentang Metode Pengambilan Sampel..................... - 17
BAB ID : METODE PENELITIAN.............................................................- 20
1. Bahan-bahan ........................................................................... - 20
2. Alat ........................................................................................ - 20
3. Metode A nalisis......................................................................- 21
3.1. Uji Kualitatif Terhadap Pengawet Yang Digunakan............- 21, * t
3.1.1. Uji Kualitatif Terhadap Asam Benzoat ............................ - 21
3.1.2. Uji Kualitatif Terhadap Asam Saiisilat ............................>21
3.1.3. Uji Kualitatif Terhadap Methyl p-hidroksi Benzoat
(Nipagin) ........................................................................... - 21
3.1.4. Uji Ion Na* Dalam Bentuk Garam Benzoat ..................... - 21
3.2. Pengambilan Sampel.............................................................- 22
3.2.1. Penelitian Lapangan dan Pencarian D a ta ..........................>22
3.2.2. Teknik Sampling...............................................................- 22
3.3. Pemilihan Fase Diam .......................................................... - 23
- v -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
3.4. Pemilihan fase mobil / pelaiut pcngembang....................... - 23 -
3.5. Teknik Penampak No4a........................................................ - 24 -
3.$. Pemilihan Panjang Gelombang maksimum..........................- 24 -
3.7. Ekstraksi Sam pel................................................................. - 24 -
3.8. Analisis Kualitatif Minuman Sari Buah Sirsak
Hasil Sampling....................................................................- 24 -
3.8.1. Penentuan Harga Rf dan Panjang Gelombang Maksimum
(A-mgiy) Sampel......................................................................- 24 -
3.8.2. Penentuan Bentuk Garam Jenis Pengawet Sampel . . . . . . . 25 -
3.9. Analisis Kuantitatif Minuman Sari Buah Sirsak
. Hasil Sampling . . . '............................................................... - 25 -
3.9.1 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Pengawet
Sampel............................................................................... - 25 -
3.9.2. Pembuatan Kurva Linieritas...............................................- 26 -
3.9.3. Penentuan Persen Recovery...............................................- 27 -
3.9.4. Analisis Pengawet Dalam Minuman Sari Buah Sirsak . . . - 28 •
4..Analisis Data . .........................................................................- 29 -
BAB IV : HASIL PENELITIAN............................................................... - 30 -
1. Uji Kualitatif Asam Benzoat, Na Benzoat, Asam Saiisilat,
Nipagin...................................................................................- 30 -
1.1. Panjang Gelombang Maksimum.......................................... - 30 -
1.2. Reaksi Pembentukan wama................................................. - 31 -
1.3. Reaksi Kristal dan Nyala Api Bunsen Na+ ....................... - 32 -
2. Cara Pengambilan Sampel......................................................- 33 -
- vi -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
3. Pemilihan Pelarut Pengembang ............................................ - 34 -
4. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ..........................- 34 -
5. Analisis Kualitatif Minuman Sari Buah Sirsak Hasil
Sampling ............................................................................... - 38 -
5.1. Penentuan Harga Rf dan Panjang Gelombang Maksimum . - 38 -
5.2. Penentuan Bentuk Garam Na Dari Sampel ....................... - 43 -
6. Analisis Kuantitatif Minuman Sari Buah Sirsak Hasil
Sampling ............................................................................... - 44 -
6.1. Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Asam
Benzoat...............................................................................- 44 -
6.2. Pembuatan Kurva Linieritas Asam Benzoat....................... - 49 -
7. Penentuan Persen "Recovery" .............................................. - 51 -
8. Penetapan Kadar Pengawet Dalam Sampel Minuman Sari Buah
Sirsak......................................................................................- 57 -
9. Analisis Data ........................................................................ - 66 -
9.1. Penentuan Koeflsien Variasi Data Persen "Recovery" Dari
Asam Benzoat....................................................................... - 66 -
9.2. Penentuan Kadar Sesungguhnya Dari Data Kadar Asam
Benzoat Dalam Sampel........................................................ - 67 -
BAB V : PEMBAHASAN........................................................................ - 69 -
BAB VI : KESIMPULAN.......................................................................... - 74 -
BAB VD : SARAN - SARAN......................................................................- 75 -
BAB VIE : RINGKASAN.............................................................................- 76 -
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................- 78 -
- vii -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
LAMPIRAN.............................................................. ....................................- 81 -
SINGKATAN....................................................................................................- 89 -
- viii-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
DA.FTAR GAMBAR
Gambar HoJoman
1 : Kyn® serapan terhadap panjang gelombang dari Asam Benzoat dengan konsentrasi 5 ppm (1), Nipagin dengan konsentrasi 5 ppm (2), dengan Spektrofotomcter.........................................................................................- 30 -
I : Kurva serapan terhadap panjang gelombang dari Asam Saiisilatdengan konsentrasi 1% dengan alat spektrofotomcter.............................. - 31 •
3 : Bentuk Igristal dari basil reaksi larutan baku yang mengandungNa+ yang direaksikan dengan pereaksi Zink Uranil Asetat...................... - 32 ■
4 : Kurva serapan terhadap panjang gelombang dari larutan standartAsam Benzoat dalam etanol dengan konsentrasi 602,40 ppm diamati dengan Pensitomater memberikan kmAf 22$ n m ..................................- 35
5 : Kurva serapan terhadap panjang gelombang dari larutan standartAsam Saiisilat dalam etanol dengan konsentrasi 803.40 ppm diamati dengan Densitometer memberikan A ^ 298 nm.................................... -36
6 : Kurva serapan terhadap panjang gelombang dari larutan standartMethyl p-Hydroksi Benzoat (Nipagin) dalam etanol dengan konsentrasi 602.40 ppm diamati dengan Densitometor memberikan Amik# 259 nm. - 37
7 : Pengamatan noda standart Asam Benzoat, Nipagin, Asam Saiisilatdan pengawet Asam Benzoat yang ada pada sampel sccara Kromatografi Lapisan Tipis....................................................................-40
8 : Kurva serapan terhadap panjang gelombang dari larutan standartAsam Benzoat dengan larutan sampel yang diamati dengan Densitometer pada A 200-400 nm .............................................................................- 42
9 : Contoh Bentuk kristal dari Na sampel yang direaksikan denganZink Uranil Asetat yang dilihat dengan mikroskop dengan
pembesaran 25 k a li ...............................................................................-43
10 : Kurva tinggi puncak kromatogram Asam Benzoat dengan konsentrasi50.20 ppm, 100.40 ppm, 200.80 ppm, 401.60 ppm, 602.40 ppm,803.20 ppm, dan 1004 ppm dengan Densitometer pada A,,^ 225 nm.... - 45 ■
II : Kurva tinggi puncak kromatogram noise blanko (larutan AsamBenzoat 0 ppm) dengan Densitometer pada Amiltf 225 nm..................... - 4$
Ix
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
: Kromatogram dan area dari Asam Benzoat konsentrasi 200.00 ppm,400.01 ppm, 600-01 ppm, 800.02 ppm, 1000.02 ppm, 1200.02 ppm,dan 1500.02 ppm dengan Densitometer pada A ^ 225 nm...................- 49 •
*: Kurva Linieritas antara kadar dan area dari Asam Benzoat dengan
perhitungan regresi............... .................................................................... - 51 -
: Kromatogram dan area dari sampel dengan replikasi 3 kali dengan penambahan pengawet 15.0010 mg yang diukur dengan Densitometer pada Amito 225 nm.....................................................................................- 53 -
: Kromatogram dan area dari sampel dan blanko dengan replikasi3 kali dengan penambahan pengawet 30.8992 mg yang diukur dengan Densitometer pada 225 nm............................................................ - 54 -
: Kromatogram dan area dari sampel dengan replikasi 3 kali dengan penambahan pengawet 49.9964 mg yang diukur dengan Densitometer pada A ,^ 225 nm...............................................................- 55 -
: Kromatogram dan area dari larutan baku dengan kadar 2,0001 tig,4.0001 [ig, 6,0001 ng dan 15,0002 (xg yang diukur dengan Densitometer <Jengan A ^ 225 nm.................................................................................- 56 -
: Kromatogram dan area dari sampel merk A dengan replikasi masing-masing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada AmillB 225 ra n . ............................................................................... -5 8
: Kromatogram dan area dari sampel merk B dengan replikasi masing-masing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada AmaM 225 nm........................................................................................... - 59 -
: Kromatogram dan area dari sampel merk B yang lain dengan replikasi masing-masing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada A ^ 225 nm.................................................................................. - 60 -
: Kromatogram dan area dari sampel merk C dengan replikasi masing-masing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada A ^, 225 nm ......................................................................................... - 61 -
: Kromatogram dan area dari sampel merk D dengan replikasi masing-masing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada A nv. 225 nm ......................................................................................... - 62 -
: Kromatogram dan area dari sampel merk D yang lain dengan replikasi masing-masing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada Aroak, 225 n m ............................................................................... - 63 -
- x -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
24 : Kjomatograxn dan area dari sampel merk E dengan replikasimasiflg-masijng 3 kali yang diukur dengan Densitometer pada A,w 225 nm..................................................................................
25 : Kromatogram don axes dari sampel merk 5 yajag lam denganreplikasi masmg-mpsing 3 kali yang diukur dengan Densitometer pad|a A**, 225nm...........................................................................
i
■ 64 -
65 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
DAFTAR TABEL
Tabel . Halaman
1 : Hasil pengamatap dari larutan Asam Benzoat, Nipagin danAsam Salisilat dengan alat Spektrofotometer..............................................• 31 •
2 : Hasil pembentukan reaksi wama dari Asam Benzoat, AsamSalisilat dan Nipagin dengan berbagai pereaksi..........................................• 32 -
3 : Hasil pengambilan sampel di pasar resmi di wilayah SurabayaSelatan dengan menggunak&n cam Proporsional Area Random Sampling.. - 33 -
4 : Hasil analisis KLT dari zat Asam Benzoat, Asam Salisilat.Nipagin dengan pelarut pengembang campuran Aceton, Isopropanol,Amoniak 12% dengan berbagai komposisi.................................................- 34 ■
5 : Hasil pengam&tan Am)k, dari Asam benzoat, Asam Salisilat, danNipagin hasil KLT dengan menggunakan alat Densitometer...................... • 38 -
6 : Harga Rf hasil KLT dari larutan standart dan larutan sampeldengan pelarut pengembang Aceton : Isopropanol:Amoniak 12% = 7 : 2 : 2 ...........................................................................* 39 -
7 : Panjang gelombang maksimum larutan standart Asam Benzoat,Nipagin, Asam Salisilat dan pengawet yang ada pada larutan sampel hasil KLT dengan menggunakan alat Densitometer.................................. - 41 •
8 : Hasil pembentukan warna nyala api Bunsen dan pembentukankristal Na, dari sampel minuman sari buah sirsak yangdireaksikan dengan pereaksi Zink Uranil Asetat...................................... - 44 •
9 : Kadar larutan Asam Benzoat pada KLT dan tinggi puncakkromatogram yang diukur dari hasil pengukuran dengan Densitometer..... - 47 *
10 : Hasil pengamatan Asam Benzoat dengan berbagai kadar padaKLT dan area hasil pengukuran dengan menggunakan Densitometer..... -50
11 : Hasil penetapan kembali metode ekstraksi Asam Benzoat yang ditambahkan dalam inhuman sari buah sirsak (persen "Recovery"), rata-rata dan Standard Deviasi............................. - 52 -
12 : Hasil penetapan kadar Asam Benzoat dalam sampel minuman sari buah sirsak dengan berbagai merk (dinyatakan dalam gram % bobot perbobot) dengan replikasi 3 kali.................................................. - 57 •
-xji
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
13 : Hasil perhitungan koefidien variasi (KV) dari Persen "Recovery"Asam Benzoat dengan berbagai kadar....................................................... *66*
14 : Hasil penetapan kadar pengawet yang sesungguhnya dalamsampel minuman sari buah sirsak dan perhitungan dalam bentukgaram Na-nya.............................................................................................* $8-
■ nii •
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
PAFTAJR LAMP IRAN
Lampiran Halaman
1. Coatoh perhitungan persen perolehan kembali ("Recovery')............... - 81 -
2. Coatob perhitungan kadar pengawet dalam sari buah sixsak................ - 83 -
3. Tabel koefisien korelasi (r) pada derajad kepercaya&n 5% dap \% ...... - 84 -
4. PerMenKcs RI Nomor 722/Menke$/Per/IX/8$ tentang
bahan tambahan makanan.... ................................................................. ■ 85 -
$. Paftar Pasar Resmi yang dikelola oleh Pemda Kotamadya
Daerah Tingkat U Surabaya...................................................................- 87 -
Peta : Per Kecamatan Kotamadya Surabaya...................... ...................- 88 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
P E N D A H U L U A N
UAB I
X. I^itar Bclakang Masalah
Dalam era globalisasi saat ini dimana segala sesuatu dapat dijongkau dengan cepat
dan mudah, perkembangan ilmu pengetahuan dan kemajuan dibidang industri melaju
juga dengan cepat. Tidok terkecuali industri pengolahan makanan dan minuman,
dengan iklan-iklannya yang menarik yang dimuat dalam media massa, dimana banyak
produksi makanan dan minuman bermunculan dengan bennacam-macam kemasan dan
bentuk sediaan. Hal ini tangsung maupun tidok langsung dapat merangsang
masyaxakat untuk membclinya, karena selain menarik baik wama, gambar dan
wadahnya, juga harganya relatif murah. Tetapi macam-macam produk makanan dan
minuman tersebut selain menarik, juga harus aman bagi konsumen.
Selamapmses pembuatan, penyimpanan sampai beredar kepada konsumen banyak
faktor yang dapat meiusak makanan dan minuman. Diantaxanya yaitu bakteri, jamur,
kuman penyakit seperti golongan Coli.suhu, kelembaban, cahaya, dan tekanan. Untuk
menjaga kestabilan mutu makanan dan minuman ini, maka perlu dilakukan
pengawotan.(u)
Ada beberapa cara dalam proses pcngawetan makanan dan minuman, misalnya
dengan cara pemanasan yang berupa sterilisasi dan pasteurisasi, pendinginan,
pengeringan, pengasapan, penyinaran dan penambahan bahan kimia. Cara pengawetan
dengan penambahan bahan kimia merupakan cara pengawetan yang sering dilakukan,
karena cara ini relatif lebih murah dan nilai gizi makanan dan minuman relatif tidak
mengalami perubahan.(U,3) Walaupun demikian pengawetan dengan bahan kimia,
-1 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- I -
mempunyai batas waktu tertentu, sebab pengawet hanya menghambat tumbuhnya
mikroorganisme dan bukan mematikan mikroorganisme, inipun tidak semuanya dapat
dicegah. Yang perlu diperhatikan adalah zat kimia sebagai pengawet tidak diartikan
sebagai pengganti kebersihan dalam proses produksi makanan dan minuman.w
Sehubungan hal tersebut di atas maka penggunaan pengawet harus diawasi dengan
ketat, karena selain mempunyai sifat-'sifat yang menguntungkan, sifat pengawet ada
juga yang merugikan, misalnya dapat mcnimbulkan rasa mual dan muntah,
menjmbulkan alergi pada orang-orang tertentu, sifat toksik dan dapat menimbulkan
kajaker pada pemakaian yang tidak tepat dan dalam dosis yang tidak terkontrol.(u’3)
Makanan dan minuman yang biasa diawetkan dan dikonsumsi masyarakat adalah
sirop, ekstrak kopi cair, minuman ringan, minuman anggur beralkohol, kecap, jem,
selai, acar, asinan sayur, manisan buah, sosis, gelatin, keju, komet, daging, udang
beku, margarin dan terasi.(5)
Akhir-akhir ini di Surabaya sangat banyak beredar minuman sari buah yang
konsumennya dari segala lapisan masyarakat. Minuman tersebut dijual dalam
botol-botol berukuran sedang dengan nama dan jenis yang bennacam-macam,
diantaranya yaitu minuman sari buah sirsak. Minuman ini terdiri dari berbagai merk
dan sangat disukai masyarakat. Peredarannya sangat luas, mulai dari toko makanan
minuman, waning minum, depot-depot, dijajakan dengan kereta dorong dan pada
umumnya banyak terdapat di pasar-pasar. Harga minuman tersebut rclatif murah, yaitu
sekitar Rp. 350 - 750 /botol, tergantung pada merknya. Pada produk-produk dari
minuman ini ada yang sudah mencantumkan nomor pendaftaran dari Depart emeu
Kesehatan Republik Indonesia tetapi banyak juga yang belum. Umumnya produk
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
miniinym sari buah ini dibuat oleh industri nunah tangga, yang banyak terdapat di
Surabaya dan sekitamya, dimana syarat-syarat kebersihan bahan-bahan yang
ditambahkan dan kesehatannya masih diragukan. Berdasarkan hasil pengamatan yang
berupa wawancara pribadi, produk minuman ini dapat bertahan sampai ± 7 bulan.
Sehingga besar kemungkinan, produk minuman ini ditambahkan pengawet.
Menurut Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia
No.722/Menkes/per/IX/88 Tentang Bahan Tambahan Makanan, pengawet untuk
minuman ringan dan sari buah adalah asam benzoat, K/Ca/natrium benzoat, metil
p-hidroksi benzoat dan propil p-hidroksi benzoat/35 Disamping itu berdasarkan
penelitian-penelitian sebelumnya, penyalahgunaan asam saiisilat sebagai pengawet
yang dilarang oleh pemerintah masih sering terjadi.0^
Untuk produk-prpdukyang beredarperlu suatu pengawaaan/Quality Control, yaitu
meliputi analisis kualitatif dan kuantitatif. Metode analisis yang digunakan untuk
menentukan kadar pengawet asam benzoat, natrium benzoat, asam saiisilat dan nipagin
adalah KLT - Densitometri. Hal ini disebabkan metode ini masih jarang digunakan
untuk suatu analisis khususnya pengawet, sensitifitasnya tinggi, dan pelaksanaannya
relatif mudah.
Sampel minuman sari buah sirsak diambil dari pasar-pasar resmi yang menjual
produk tersebut di wilayoh Surabaya Selatan. Hal ini disebabkan pada wilayah
tersebut lebih banyak terdapat pasar yang menjual sampel tersebut, sehingga
penyebaran sampel minuman sari buah sirsak diharapkan menjadi lebih merata.
Pengambilan sampel dilakukan secara " proportional stratified random sampling ”
pada pasar-pasar tersebut di atas. Salah satu keuntungan dari metode ini adalah tidak
- 3 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
diperlukannya daftar dari geluruh unit populasi tetapi cukup daftar dari unit populasi
dalam area yang terpilih.m
2. Permasalahan
Berdasarkan lataj belakang yang telah diuraikan tersebut di atas, maka timbul
permasalahan-permasalahan sebagai berikut:
- Jenis pengawet apa yang terdapat pada minuman sari buah sirsak yang beredarf
di pasar-pasar resmi di wilayah Surabaya selatan.
- Apakah kadar pengawet dalam sari buah tersebut sudah memenuhi persyaratan
yang ditetapkan pemerintah.
3- Tujuan Penelitian
Pari permasalahan yang dikemukakan di atas, maka tujuan penelitian ini adalah
mengetahui jenis dan kadar pengawet yang ditambahkan pada minuman sari buah
sirsak yang beredar di pasar-pasar di wilayah Surabaya selatan dengan menggunakan
metode Densitometri. Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi
sampai sejauh mana produk tersebut memenuhi persyaratan yang telah ditetapkan
pemerintah, dalam hal ini pcraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia
No.722/MenKes/IX/88 Tentang bahan tambahan makanan, khususnya pengawet.
- 4 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
1. Tinjauan Umum Tentang Pengawet
1.1. Cara umum pengawetan makanan
Cara pengawetan makanan secara garis besar dapat dibagi menjadi dua cara
yaitu <g,9):
1.1.1. Pengawetan tanpa penambahan bahan pengawet
Pengawetan dengan cara ini dapat dilakukan dengan pemanasan, pendmginan,
radiasi dan mcnghilangkan udara (vakum) dengan mctode-metodc tertentu.
1.1.2. Pengawetan dengan cara penambahan bahan pengawet
Bahan pengawet yang ditambahkan dapat berupa pengawet dari alam misalnya
gar am dapur, asam asetat, asam laktat, asam askorbat, asam sitrat, rempah-rempah,
minyak atsiri atau bahan pengawet kimia. Tetapi pada umumnya bahan atau zat
yang ditambahkan ke dalam makanan merupakan bahan kimia. Penambahan bahan
pengawet dapat bersifat fungistatik atau bakteriostatik.
1.2. Keuntyngan penggunaan pengawet kimia (1,10)
- Mendapatkan makanan, minuman dengan nilai gizi yang relatif tidak mengalami
perubahan.
- Praktis karena tanpa proses pemanasan atau pendinginan.
* Lebih ekonomis ( biaya yang murah).
- 5 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
■ 6 -
1.3. Kcnigtan pcnggunaan pengawet kimia (l,10)
- Dapat menimbulkan efek toksis karena hasil peruraian pengawet.
- Daya pengawetannya terbatas.
- Kadang-kadang dapat memberi rasa yang kurang enak.
• Dapat menimbulkan kanker.
- Dapat menimbulkan alergi pada orang tertentu.
2. Tinjauan tentang pengawet yang ada pada minuman sari buah sirsak
Rumus molekul : C7H60 2
Berat molekul : 122,1
Sifat fisika - ldmia
Merupakan kristal putih berbentuk sisik atau jarum, tidak berbau atau sedikit
berbau benzaldehid, titik lebur pada suhu 121 - 124 °C <SM3'U).Larut dalam 350
bagian air, dalam 20 bagian air panas, dalam 3 bagian eter, dan sangat mudah larut
dalam aseton serta minyak. Kelarutannya akan bertambah dengan adanya asam sitrat
atau asam asetat01,13). Larutan asam benzoat dalam etanol memberikan serapan
maksimum pada panjang gelombang 272 nm (A,1 73).°J>
Sangat efektif untuk menghambat pertumbuhan jamur dan bakteri. Pada
2.1. Asam Benzoat
Rumus bangun
jCOOH
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
makanan atau minuman yang bersifat asam pH < 4, daya kerja asam benzoat
sebagai bahan pengawet sangat efektif, sedang pada makanan dengan pH 3,5
keefektifitasonnya sebagai pengawet adalah IQ kali lebih kuat daripada makanan
dengan pH 7, sedang pada makanan yang sangat asam efektifitasnya adalah 100 kali
lebih kuat daripada dalam makanan yang bersifat basa.<l,J,11>
Asam benzoat digunakan sebagai bahan pengawet pada makanan dan minuman,
dengan kadar pemakaian yang diijinkan adalah 600*1000 mg/kg makanan.(5)
Sebagai contoh makanan dan minuman yang menggunakan asam benzoat
sebagai bahan pengawet antara lain sari buah, jeli, jem, sirup, minuman ringan dan
manisan.(5>
1.1. Natrium Benzoat (lU2-1J-U)
Rumus bangun
COONa
' - 7 -
Rumus molekul : C7H50 2Na
Berat molekul : 144,1
Sifat fisika - kimia
Natrium Benzoat merupakan serbuk atau kristal yang berwama putih, berbau
atau hampir tidak berbau, rasa kelat dan agak manis. Mempunyai titik leleh 122,4°C.
Mudah larut dalam air, larut dalam 90 bagian etanol 95%, mudah larut dalam
gliserol dan metanol. Larutan zat dalam air bersifat alkali pada lakmus (pH + 8).
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Natrium benzoat mempunyai daya hambat optimum pada sediaan dengan pH
4,5 atau lebih rendah. Lebih besar dari pH 4,5 daya antimikrobanya berkurang.
Sedangkan aktifitas antimikrobanya tergantung pada konsentrasi asam benzoat yang
tidak terdiaosiasi0,13) Pembcrian dengan dosis besar akan dapat menyebabkan rasa
mual dan muntah-muntah0,,u).Bersifat kurang mengiritasi dibonding asam benzoat.
Digunakan sebagai pengawet pada makanan dan mainuman dengan kadar
pemakaianyang diizinkan adalah 600-1000 mg/kg(3).Digunakon untuk mengawetkan
antara lain pekatan sari buah, minuman anggur beralkohol, anggur buah,.jem, saos
tomat dan minuman ringan.
2.3. Asam Saiisilat<aM1J)
Rumus bangun
- 8 -
COOH •
Rumus molekul : C ^ O j
Berat molekul : 138,1
Sifat Fisika - Kimia
Merupakan hablur ringan, tidak berwama atau serbuk berwama putih, hampir
tidak berbau, rasa agak manis dan tajam. Larut dalam air 1:550, dalom alkohol 1:4,
mudah larut dalam kloroform P dan dalam eter P, larut dalam larutan amonium
asetat P, dinatrium hidrogen fosfat P^calium sitrat dan natrium sitrat P.
Spektrum serapan ultraviolet : dalam larutan natrium hidroksida 0,5 N memberikan
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
serapan maksimum 300 nm ( E 1%, 1 cm 260 ), dalam larutan asam sulfat 0,1 N
memberikon serapan maksimum 302 nm ( E 1%, 1 cm 259 ) dan dalam larutan
methanol memberikon serapan maksimumpada 298 nm (A^ = 170b). Biasa
digunakan untuk sediaan Iuar karena bersifat baktcriostatik dan fungisidal serta
mengiritasi lambung.00
2.4. Methyl p-Hidroksi Benzoat (Nipagin)011213)
Rumus bangun :
■ 9 -
Rumus molekul : CgHg0 3
Berat molekul : 152.1
Sifat Fisika - Kimia
Merupakan kristal tidak berwama atau serbuk kristal, tak berbau atau dengan
bau enak, kurang berasa atau menghasilkan sensasi terbakar pada mulut dan lidah
cjiikuti dengan anestesi lokal. Suhu lebur 125-128 °C.
Kelarutan : 1 dalam 400-500 air, 1 dalam 20 air panas, 1 dalam 3-3,5 alkohol, 1
dalam 3 aseton, 1 dalam 40 kloroform, 1 dalam 10 ether, 1 dalam 3 propilenglikol,
1 dalam 60 gliserol hangat, memberikan larutan jemih pada pendinginan, sukar larut
dalam karbon tetraklorida, bebas larut dalam metil alkohol dan larutan alkali
hidroksida. Larutan nipagin dalam etanol memberikan serapan maksimum pada
panjang gelombang 257 nm (A,1 :1075a ).
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Nipogin sangat efektif dalam menghambat pertumbuhan jamur, bakteri dan
beberapa ragi. Digunakan sebagai bahan pengawet poda makanan dan minuman
dengan kadar pemakaian yang diijinkan adalah 250-1000 mg/kg bahan.(5)
3. Tinjauan tentang minuman sari buaha3,26)
Minuman sari buah secara umnm adalah buah-buahan segar yang sudah masak
dap belum memudar wamanya yang diambil sarinya dengan cara penyaringan dari
hasil remasan buah-buahan tersebut. Hasil penyaringan tersebut kemudian dilarutkan
/ diencerkan dengan larutan yang terdiri dari air, gula, pengawet dan bila perlu air
kapur sirih.
Bahan pengawet yang lazim digunakan asam benzpat dengan batas kadar
pemakaian sebesar 600 mg/Kg sebagai minuman ringan dan 1000 mg/Kg sebagai
pekatan sari buah.
Minuman sari buah banyak disukai masyarakat, hal ini disebabkan antara lain :
- banyak mengandung nilai gizi dan vitamin.
- sediaannya praktis.
- cocok untuk orang yang ingin berdiet makanan.
- tersedia diberbagai tempat.
- mempunyai harga yang bervariasi, dari yang murah sampai yang relatif mahal
karena dibuat dari tingkat industri kecil sampai dengan industri besar dan modem.
- 1 0 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
4. Tinjauan tentang ekstraksi
4.1. Toon dasar (1<,17>
Prinsip umum dari proses ekstraksi adalah hukum distribusi / partisi yang
menyatakan bila ke dalam suatu sistem yang terdiri dari dua macam cairan yang
tidak saling campur ditambah zat yang dapat larut dalam kedua pairan tersebut
dengan perbandingan yang tetap pada suhu tertentu.
Bila C, dan C2 adalah konsentrasi zat dalam kedua cairan tersebut maka dapat
dituliskan C/Cj = K, dimana K adalah koefisicn distribusi / partisi. Harga K didapat
dengan membandingkan kelorut&n zat di dalam pelarut pertama dengan pelarut
kedua pada suhu yang sama. Harga ini spesifik untuk setiap zat/solut, pasangan
pelarut/pasangan solven, suhu. Oleh karena itu harga K ini dapat digunakan sebagai
pcdomon pemilihan cairan pengekstraksi.
Kesempumaan hasil ekstraksi ini disamping tergantung pada koefisien partisi
juga dipengaruhi oleh volume cairan, berapa kali ekstraksi ini dilakukan dan
waktu/lama ekstraksi dilakukan. Hasil ini dapat digambarkan sebagai berikut: Bila
W0 gram zat dilarutkan dalam V ml air dan diekstraksi dengan pelarut organik yang
saling tidak campur sebanyak S ml sehingga bcrat zat yang tcrsisa dalam fasa air
setelali satu kali ekstraksi adalah Wt gram, maka konsentrasi zat dalam fasa air
adalah : W,/V gram /ml, dan konsentrasi dalam pelarut organik adalah
( W0 - Wi ) / S gram /ml, koefisien partisi dapat dituliskan sebagai berikut :
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
setelah dua kali ekstraksi
W 'v v
*
dimana W berat sisa zat dalam lapisan air, sehingga setelah n kali ekstraksi dapat
dinyatakan rumus:
dimana Wn adalah berat sisa dalam sisa zat dalam lapisan air setelah n kali ekstraksi
agar diperoleh harga Wn yang kecil maka n dan s harus diperbesor, dengan kata lain
ekstraksi akan lebih sempuma bila dilakukan beberapa kali dengan jumlah cairan
yang besar. Demikian pula jika kita lakukan ekstraksi dalam waktu yang lebih lama
maka kontak antara solut dan solven lebih besar dan kemampuan ekstraksi akan
meningkat.
Apabila kita membatasi perhatian pada distribusi dari solut A antara fasa air dan
fasa pelarut orgaaik, maka dapat dituliskan harga persen ekstraksi (E%) sebagai
berikut:
no, *00 ( A»> vo _ 100 D( Ai) v *( Ai) v» ".!>( V vo)
dimana D ~ K = koefisien distribusi, sedangkan Vo dan Vw masing-masing
atauKV+S
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
metniliki volume dari fasa pelarut organik dan fasa air.
Dengan demikian persen ekstraksi bergantung pada rasio volume kedua fasa dan
harga koefisien distribusinya.
4.2. Ekstraksi terhadap sampel minuman sari buah sirsak(18>
Pengambilan pengawet dari sampel minuman sari buah sirsak dengan cara
ekstraksi dikeijakan dengan terlebih dahulu mengencerkan sampel dengan
menggunakan menggunakan larutan NaCl saturasi. Sebagai pelarut digunakan eter,
dan untuk suasana asam ditambahkan larutan HC1 (36.5%-38%) dengan indikator
kertas lakmus untuk mempertinggi kelarutan pengawet dalam fasa eteroya.
Selanjutnya fasa eter yang mengandung pengawet ini dipisahkan dari fasa aimya,
untuk kemudian dicuci dengan air untuk menghilangkan sisa-sisa asam yang ikut
dalam fasa eter tersebut. Fasa eter dipisahkan dari fasa air hasil cucian, dan
kemudian diuapkan etemya hingga yang tertinggal hanyalah pengawetnya saja.
Dipilihnya eter sebagai pelarut organik pada ekstraksi ini, karena eter
mempunyai daya melarutkan pengawet yang baik terutama dalam suasana asam.
Selain itu eter sangat mudah menguap dengan titik didih 34,6 °C, sehingga mudah
dihilangkan setelah ekstraksi.00
5. Tinjauan tentang Kromatografi Lapisan Tipis(ls,J0,21)
Kromatografi adalah teknik pemisahan campuran zat yang berdasarkan atas
perbedaan kecepatan migrasi dari masing-masing komponennya pada fasa diam di
bawah pengaruh suatu pelarut yang bergerak.(20)
Jika fasa diam yang digunakan berupa lapisan tipis yang dilapisi adsorben makn
-13 •
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
teknik ini disebut kromatografi lapisan tipis. Mekanisme terjadinya pemisahan pada
kromatografi lapisan tipis dapat berdasarkan prinsip adsorbsi, partisi, pertukaran ion
maupun filtrasi, tergantung pada adsorben yang dipakai tetapi pada umumnya
berdasarkan mekanisme adsorbsi dan partisi.00'
Kromatografi lapisan tipis dapat digunakan untuk analisa kualitatif, antara lain
identifikasi campuran zat atas komponen-komponennya, identifikasi kemumian suatu
zat, deteksi adanya pemalsuan atau pengotoran suatu zat dan analisa suatu zat baik
tunggal maupun campuran.
Analisa kuantitatif dengan kromatografi lapisan tipis pada prinsipnya dapat
dilakukan dengan dua cara yaitu :
a. Penentuan tidak langsung dari noda kromatogram^0
Pada cara ini noda kromatogram yang terjadi dikerok dari lapisan tipis
kemudian diekstraksi dengan pelarut organik. Dari hasil ekstraksi yang didapat ini,
dilakukan penentuan kuantitatif dengan metode yang sesuai seperti kolorimetri atau
spektrofotometri, spektrofluorometri dan sebagainya.
b. Penentuan langsung dari noda kromatogram00
Cara ini dapat dilakukan dengan cara perbandingan luas noda contoh dengan
luas noda pembanding.
6. Tinjauan tentang Dcnsitomctri (l6,2CUlM
Densitometri merupakan salah satu metode optik yang digunakan untuk analisis
kualitatif dan kuantitatif suatu zat setelah dipisahkan terlebih dahulu antara lain
dengan metode kromatografi lapisan tipis. Metode didasarkan pada pengukuran cahaya
yang diserap/diemisi oleh molekul senyawa dalam noda kromatogram.
- 14 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-15 -
Pengukuran konsentrasi dapat dilakukan dengan cara sebagai berikut:
1. Membandingkan transmisi sinar tampak yang melewati noda sampel dengan noda
pembanding pada kromatogram. Cara ini hanya untuk noda-noda berwama
ataudiwamai lapisan tipis dibuat dan lempeng kaca yang tembus cahaya
harusbenar-benar homogen.
2. Membandingkan serapan sinar lembayung ultra atau sinar tampak yang dipantulan
dalam noda bahan atau sampel dengan noda pembanding
• 5. detektor
Untuk mendapatkan hasil yang paling baik, maka lapisan yang dipakai adalah silika
gel tanpa CaS04 sebagai pcngikat dan tanpa bahan yang berfluoresensi.
Keteranean gambar
1. sumber cahaya
2. monokromator
21
4cr;:zr“ ) 3. cermin
4. lapisan tipis
5. detektor
1. sumber cahaya
2. monokromator
3. cermin
4. lapisan tipis4
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
3. Membandingkan absorpsi fluoresensi sinar yang ditampilkan oleh noda sampel dan
pembanding (untuk bahan yang berfluoresensi).
- 1 6 -
6.1. Analisis Kualitatif dengan Metode Densitometri(‘’::,24>
Analisis kualitatif hasil pemisahan TLC, dilakukan atas dasar harga jarak noda
kromatogram contoh (Rf) dibandingkan dengan noda kromatogram baku. Apabila
harga jarak noda kromatogram sama bcrartj, zat pada sampel sama dengan zat pada
baku.
Analisis kualitatif dapat j uga dilakukan dengan densitometer yang didasarkan
atas dasar panjang gelombang moksimumnya. Jika suatu zat yang dianalisis
memi-liki panjang gelombang maksimum yang sama dengan
panjang gelombang baku, maka zat tersebut kemungkinan adalah sama dengan zat
baku.
6.2. Analisis Kuantitatif dengan Metode Densitometri(6’22,24)
Penggunaan Densitometri untuk tujuan kuantitatif didasarkan atas pengukuran
kerapatan optik noda kromatogram. Perhitungan kadar suatu zat yang dianalisis
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
dilalnil-fln dengan cara membandingkan luas kurva contoh dengan luas kurva zat
baku. Dengan catatan bahwa hubu-ngan antara luas kurva dengan konsentrasi telah
dilinierkan dengan perkalian suatu faktor yang telah diatur oleh sistem di dalam
Densitometer.
7. Tinjauan Tentang Metode Pcngambilan Sampel*75
Dalam suatu penelitian pada umumnya observasi atau eksperimentasi dilakukan
tidak terhadap populasi, tetapi dilakukan terhadap sampel.
Keuntungan /alasan pemakaian sampel adalah :
a. Mengurangi biaya.
b. Jika ada keterbatasan waktu dan tenaga.
c. Jika eksperimentasi/observasi bersifat merusak unit sampel maka jika digunakan
populasi akan sangan merugikan.
d. Jika populasi jumlahnya tak terbatas
e. Lingkup penelitian dapat diperluas dan diperdalam oleh karena jumlah yang
diobservasi dan diberi perlakuan lebih sedikit, dengan demikian informasi yang
diperoleh akan lebih teliti.
Persyaratan dalam melakukan sampling agar kesimpulan penelitian dari sampel dapat
mewakili / menggambarkan populasi, yaitu :
a. Digunakan azas probabilitas (random sampling).
b. Jumlah sampel yang memadai.
c. Ciri-ciri populasi dipenuhi secara ketat.
d. Variasi antar unit populasi sekecil mungkin.
- 17 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Teknik sampling dapat dibedakan menjadi dua cara yaitu ;
a. Random sampling.
b. Non random sampling.
Random Sampling
Random sampling dibedakan atas :
1. Simple random sampling
Populasi dianggap homogen dan tcrsedia daftar dan nomor urut dari seluruh unit
populasi. Unit sampel di-ambil secara lotre atau bilangan random. Keuntungannya
adalah : Harga rata-rara sampel merupakan estimator rata-rata populasi yang "unbias"
dan pelaksanaannyamudah. Kelemahannya adalah : sampel dapat sangat menyebar
atau sangat mengumpul, diperlukan daftar lengkap dan sampel tidak tipikal untuk
populasinya.
2. Systematic random sampling.
Populasi dianggap homogen dan tersedia daftar dan nomor urut dari seluruh unit
populasi. Pengambilan sampel nomor satu sama dengan seperti simple random
sampling, sedangkan sampel selanjutnya ditentukan secara sistematik. Keuntungan dan
kelemahan cara ini sama dengan simple random sampling.
3. Stratified random sampling.
Populasi heterogen dan tcrdiri dari strata/ lapisan yang homogcn. Jika jumlah unit
dalam setiap strata sama maka digunakan cara simple stratified random sampling,
tetapi bila tidak sama digunakan propertional stratified random sampling.
Keuntungannya adalah : stratifikasi akan meningkatkan presisi sampel terhadap
populasi dan pelaksanaannya mudah. Kelemahannya adalah : sampel dapat sangat
menyebar dan diperlukan daftar dan strata seluruh unit populasi.
- 18 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
•19*
4. Cluster random sampling ( " area random sampling * )
Populasi heterogen dan terdiri dari kelompok-kelompok (cluster) yang masih
mengandung unit populasi yang heterogen. Heterogenitas di dalam cluster sama
dengan populasinya. Dari cluster-cluster diambil secara random. Dari cluster terpilih
ini kemudian diambil unit populasi secra random sehingga diperoleh sampel.
Keuntungannya adalah : Penyebaran unit populasi dapat ditekan, tidak diperlukan
daftar dari seluruh unit populasi tetapi cukup daftar unit populasi dalam cluster atau
area yang terpilih. Kelemahannya adalah: sulit diperoleh cluster dengan heterogenitas
yang benar-benar sama.
5. Multistage random sampling
Cara ini adalah kombinasi dari simple - stratified - cluster random «nmp1it>g;
dengan urutan yang bervariasi.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB m
METODE PENELITIAN
1. Bahan-bahan
- Sampel minimum sari buah sirsak
- Asam benzoat p.a.
* Asam salisilat p.a
- Metil p-hidroksi benzoat / nipagin p.a.
- Asam klorida p.a
- Eter p.a.
- Etanol p.a.
- Asetone p.a.
- Isopropanol p.&.
- Ammonia p.a.
- Silika gel GFj* siap pakai
2. Alat
■ Schimadzu Dual Wavelength Chromato Scanner Model CS 930
- Terumo Microsyringe 10 pi
• Lampu Lembayung Ultra
- Ncraca Analitis (Saitorius-Wcrkc GMBH Type 2472.Fabr.Nr.501070)
- Shimadzu Double Beam Spectrophotometer UV 260
• 20 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
3. Metode Analisis
3.1. Uji Kualitatif Terhadap Pengawet Yang Digunakan
3.1.1. Uji Kualitatif Terhadap Asam Benzoat(l3,15,28,29)
- Dibuat larutan dengan konsentrasi 5 ppm dalam pelarut Methanol, kemudian
diukur panjang gelombang maksimumnya dengan Spektrofotometer .,
- Larutan Asam Benzoat dinetralisir, + FeCl3 akan terbentuk endapan Fe-Benzoat
coklat
- Titik lebur
3.1.2. Uji Kualitatif Terhadap Asam Salisilat<l3,l3,28,29)
- Dibuat larutan dengan konsentrasi 20 ppm dalam aqua suasana asam, kemudian
diukur panjang gelombang maksimumnya dengan alat Spektrofotometer.
- Larutan Asam Saiisilat + FeCl3 akan terbentuk wama ungu
- Larutan Asam Saiisilat + aqua Brom wama akan hilang
- Titik lebur
3.1.3. Uji Kualitatif Terhadap Methyl p-hidroksi Benzoat (Nipagin)0 3,28,29)
- Dibuat larutan dengan konsentrasi 5 ppm dalam etanol, kemudian diukur
panjang gelombang maksimumnya dengan Spektrofotometer.
- Larutan Nipagin dalam Methanol + FeCl3 akan terbentuk wama merah coklat.
- Nipagin ditambah dengan NaOH kemudian diasamkan + aqua Brom akan
menghilangkan wama.
- Titik lebur
3.1.4. Uji Ion Na* Dalam Bentuk Garam Benzoat*305
- Larutan Na Benzoat pada kawat Ni yang telah dibersihkan sebelumnya, pada
nyala api Bunsen maka akan terbentuk wama kuning kuat.
-21 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- Larutan Na Benzoat + rcagen Zink Uranil Asetat akan ter bentuk kristal beriian.
3.2. Pengambilan Sampel
3.2.1. Penelitian JLapangan dan Pencarian Data
Untuk tujuan penelitian ini dilakukan penelitian lapangan (survei) agar
diperoleh keterangan yang dapat mendukung data yang diperlukan. Survey
dilakukan di wilayah Surabaya Selatan, yaitu terhadap pasar resmi yang
menyediakan sampel minuman sari buah sirsak dalam kemasan botol.
3.2.2. Teknik Sampling
Pengambilan sampel minuman sari buah sirsak dalam botol menggunakan
metode " Proporsional Stratified Random Sampling " dengan berdasarkan atas
merk yang mencantumkan nomor pendaftaran dengan Sertifikat Penyuluhan (SP)
dan yang belum mencantumkan nomor pendaftaran (atau yang tidak/belum
mempunyai kode MD pada nomor pendaftoronnya) dari Departemen Kesehatan
Republik Indonesia pada pasar-pasar resmi di wilayah Surabaya Selatan.
Wilayah Surabaya Selatan dibagi menjadi 8 kecamatan yaitu Sawahan,
Wonokromo, Wonocolo, Karangpilang, Gayungan, Dukuh Pakis, Lakarsantri dan
Wiyung. Dari tiap-tiap wilayah kecamatan tersebut berdasarkan daftar pasar resmi
dari Pemda Kotamadya Dati II Surabaya (Lampiran), ditentukan pasar mnpg saja
yang menyediakan sampel minuman saribuah sirsak dalam kemasan botol.
Kemudian dilakukan pengundian/lotere dari pasar-pasar yang menyediakan sampel
tersebut secara proporsional. Untuk kecamatan Sawahan diwakili oleh pasar
Kupang Gunung dan pasar Pakis, Wonokromo oleh pasar Wonokromo Lama,
Karangpilang oleh pasar Karangpilang dan pasar Dukuh Kupang, Gayungan oleh
- 2 2 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
pasar Gayungsari, untuk kecamatan Lakarsantri pasarnya tidak menjual sampel
minuman sari buah sirsak sehingga tidak dipilik Sedangkan untuk Kecamatan
Dukuh Pakis, Wonocolo dan Wiyung berdasarkan daftar pasar Pemda Kotamadya
Dati II Surabaya tidak/belum terdapat pasar resmi.
Dari paaar-pasar tersebut diatas kemudian dilakukan pengundian terhadap
merk-merk sampel yang ada secara proporsiorxal berdasarkan jumlah merk sampel
pada pasar tersebut.
3.3. Pemilihan Fase Diam
Fase diam yang digunakan adalah pelat KLT sijika gel GFU4 siap pakai.
3.4. Pemilihan fase mobil / pelarut pengembang
Ditotolkan pada pelat kromatografi lapis tipis silika gel GF2J4 10 pil asam
benzoat, asam saiisilat dan nipagin dengan konsentrasi masing-masiztg 600 ppm.
Setelah noda pada pelat kering, dikembangkan dalam be j ana kromatografi yang telah
jenuh dengan pelarut pengembang. Apabila pelat sudah mencapai batas
pengembangan, pelat KLT diangkat dan dikeringkan pada subu kamar. Kemudian
diamati nodanya dengan sinar lembayung ultra.
Dalam penelitian ini telah dilakukan KLT dengan campuran pelarut
pengembang Aceton, Isopropanol, Amoniak 12% Hqlnrp bebcrapa macflm
perbandingan yaitu:
1. Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% = 6 : 2 : 2
2. Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% = 7 : 2 : 2
3. Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% = 7 : 2 : 3
4. Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% = 7 : 3 : 2
-2 3 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 24 -
3.5. Teknik Penampak Noda
Digunakan penampak noda cara fisika, yaitu dengan sinar ultraviolet.
3.6. Pemililian Panjang Gelombang maksimum*
Dari masing-masing larutan baku 600 ppm asam benzoat, asam salisilat dan
nipagin ditotolkan pada pelat silika gel GFW ukuran 20x20 cm sebanyak 10 ixl.
Selanjutnya dikeijakan seperti ad 3.4. dengan pelarut pengembang terpilih. Noda
yang dihasilkan diamati dengan densitometer pada panjang gelombang 200 - 400
nm, panjang gelombang maksimum ditunjukkan pada panjang gelombang yang
memberikan puncak maksimum.
3.7. Ekstraksi Sampel
Ditimbang 25 gram sampel minuman sari buah sirsak, masukkan ke dalam
corong pisah dan diencerkan menjadi 75 ml. Sediaan dibuat suasana asam dengan
penambahan HC1 dengan kertas lakmus sebagai indikator (biru menjadi merah).
Selanjutnya diekstraksi tiga kali dengan eter masing-masing sebanyak 50 ml.
Dimana kemudian fase eter diuapkan sampai habis, dan sisa penguapan yang
terbentuk dilarutkan 50 ml etanol(18\
3.8. Analisis Kualitatif Minuman Sari Buah Sirsak Hasil Sampling
3.8.1. Penentuan Harga Rf dan Panjang Gelombang Maksimum (ABlkl) Sampel
Sampel dalam botol dikocok sampai homogen dan ditimbang 25 gram
selanjutnya diekstraksi seperti 3.7. Dilakukan penotolan 10 \i\ berseling dengan
10 ^1 larutan baku, yang kemudian dilakukan seperti 3.4. hingga nampak noda.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Kemudian harga Rf dapat dihitung dan harga panjang gelombang maksimum
(Amaiu) dapat diperoleh dengan pengukuran menggunakan alat densitometer. Dari
harga Rf sampel yang dibandingkan dengan Rf baku, dan sampel yang
dibandingkan dengan A.malu baku dapat diketahui jenis pengawet yang
ditambahkan.
3.8.2. Penentuan Bentuk Garam Jenis Pengawet Sampel005
- Kawat Ni yang telah dibersihkan, dicelupkan pada larutan sampel minuman sari
buah sirsak, kemudian dibakar pada nyala api Bunsen.
* Larutan sampel sari buah sirsak yang telah disaring, direaksikan dengan reagen
Zink Uranil Asetat pada obyek gelas, kemudian dilihat bentuk kristal yang
terjadi di bawah pembesaran mikroskop.
3.9. Analisis Kuantitatif Minuman Sari Buah Sirsak Hasil Sampling
3.9.1 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Pengawet Sampel035
Ditimbang dengan seksama 50,0 mg pengawet standart (asam benzoat, asam
saiisilat atau nipagin). Kemudian dilarutkan dalam etanol sampai diperoleh volume
tepat 50,0 ml. Larutan ini mempunyai konsentrasi 1000 ppm. Dari masing-masing
larutan ini kemudian
- Dipipet 2,0 ml dan diencerican dengan etanol sampai volume 10,0 ml
Konsentrasi yang didapat adalah 200 ppm
- Dipipet 4,0 ml dan diencerkan dengan etanol sampai volume 10,0 ml.
Konsentrasi yang didapat adalah 400 ppm.
- Dipipet 15,0 ml dan diencerkan dengaji etanol sampai volume 25,0 ml.
Konsentrasi yang didapat adalah 6QQ ppm.
- 2 5 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- Dipipet 20,0 ml dan diencerkan dengan etanol sampai volume 25,0 ml.
Konsentrasi yang didapat adalali 800 ppm.
Larutan-larutan diatas dan pelarut etanol sejumlah 10 |il ditotolkan pada pelat
KLT selanjutnya dikeijakan seperti ad 3.4. Noda yang dihasilkan diukur pada alat
Densitometer dengan panjang gelombang maksimum terpilih. Kemudian dari datat
luas area dan konsentrasi yang ditotolkan pada pelat KLT di atas didapalkan
persamaan garis lurus y = bx + a , sehingga slope garis (S) dapat ditentukan.
Selanjutnya dari kromatogram pelarut saja didapatkan data h (tinggi blanko),
sehingga standart deviasi (SB) dapat dihitung berdasarkan rumus^ :
* 26 •
Pari pereamaan-persamaan diatas, jumlah batas deteksi alat (LOD) dan jumlah
batas kuantitasi (LOQ) dapat ditentukan berdasarkan rumus03*:
C=k.s
dimana k untuk LOD - 3
k untuk LOQ = 10
3.9.2. Pembuatan Kurva Linicritas
Larutan pengawet standart (asam benzoat, asam salisilat atau nipagin) 200
ppm, 400 ppm, 600 ppm, 800 ppm, 1000 ppm, 1200 ppm dan 1500 ppm
ditotolkan pada lempeng KLT, selanjutnya dikerjakan seperti 3.4. Kemudian
dihitung persamaan garis regresi dan koefisien korelasinya dengan rumus
persamaan regresi:
y = bx + a
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 2 7 -
riimAna a = intersept
b = slope ( kemiringan gajis )
y = luas area
x = konsentrasi zat yang ditotolkan
harga b dapat dihitung dengan rumus :
b =H ( x - x ) 2
a =y-bx
Koefisien korelasi:
f - ^(x-^>(yjfL \ / (x -x )4( y - y ) 2
3.9.3. Penentuan Persen Recovery
Setelah diketahui mac am pcngawet yang terdapat dalam sampel, kemudian
dilimbang 4 bush sampel masing-masing lebih kurang 30 gram. 3 buah sampel
sirsak hasil sampling diberi pengawet sejumlah 0,1700%, 0,1000%, 0,0500% berat
sampel/sediaan, dan satu buah sampel tidak ditambahkan pengawet. Selanjutnya
masing-masing sampel diekstraksi tiga kali seperti butir 3.7. Semua sampel yang
ditambahkan pengawet dilakukan replikasi 3 kali. §isa penguapan dilarutkan dalam
etanol sampai volume S0,0 ml. Larutan yang didapat ditotolkan 25 til pada pelat
KLT silika gel GF1J4, juga larutan baku dengan konsentrasi yang sesuai.
Selanjutnya dikeijakan seperti ad 3.4. sampai didapatkan noda pada pelat KLT.
Noda yang dihasilkan diukur pada panjang gelombang maksimum terpilih dengan
densitometer hingga diperoleh data luas area dari sampel tersebut. Dari
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 2 8 -
kromatogram diperoleh data luas area sampel dan luas area baku.
Harga Persen Recovery dapat dihitung sebagai berikut:
--P
_ JUAht *061 = m T x rt
% "Recovery* - x 100 %
. Keterangan: •
= kadar pengawet yang didapatkan dalaxn sampel dengan penambahan
pengawet
C* = kadar dari baku standart
LAbi = area dari sampel tanpa penambahan pengawet
LA,p = area dari sampel dengan penambahan pengawet
LA* - area dari standart.
X = berat pengawet dalam sampel yang didapatkan kembali. ’
W = berat pengawet yang ditambahkan mula-mula.
3.9.4. Analisis Pengawet Palam Minuman Sari Quath Sirsak00
Sampel dalam bctol dikocok sampai homogen dan ditimbang kurang lebih 30
gram selanjutnya diekstraksi seperti pada butir 3.7. Larutan yang didapat
ditotolkan sebanyak 25 p.1 pada pelat lapis tipis silika gel OFV4 kemudian
dikerjakan sama seperti butir 3.4. disertai dengan penotolan 25 jj.1 larutan baku
dengan konsentrasi yang sesuai. Noda yang didapat areanya pada dengan
densitometer. Dari data luas area dan konsentrasi yang dibandingkan dengan baku
dapat dihitung kadar pengawet yang ditambahkan melalui nanus :
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Kadar sesungguhnya =0^ x - ~ -
dimana : C , = kadar pengawet dalam sampel
Ct = kadar larutaji baku
LA^ = area pengawet dalam sampel
LA* = area larutan baku
R * " recovery"
Untuk analisis kuantitatif, masing-masing sampel dilakukan replikasi sebanyak tiga
kali.
4. Analisis Data
Dari data-data yang didapat berdasarkan perlakuan tersebut diatas maka dilftlculran
penentuan Koefisien Variasi dari persen "Recovery", penentuan kadar sesungguhnya
pengawet dalam sampel berdasarkan data persen "Recovery" yang diperoleh, dan
konversi kadar pengawet dalam bentuk aslinya (garamnya) yang sesuai dengan
analisis kualitatif sampel minuman sari buah sirsak dalam botol.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB IV
HASIL PENELITIAN
1. Uji Kualitatif A*am Benzoat, Na Benzoat, Asam Saliiilat, Nipagm.
1.1. Panjang Gelombapg Maksimum
Pengamatan terhadap panjang gclombang maksimum dari larutan standart Asam
Benzoat, Asam Salisilat, dan Nipagia dengan Spektrofotometer dapat dilihat pada
gambar 1, gambar 2 dan tabel 1.
Gambar 1
Kurva serapan terhadap panjang gclombang dari Asam Benzoat dengan konsentrasi 5 ppm (1), Nipagin dengan konsentrasi 5 ppm (2), dengan Spektrofotometer.
4.c
- 30-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-31 -
Gambar 2
Kurva scrapan terhadap panjang gclombang dari Asam Saiisilat dengan konsentrasi 20 ppm dengan alat spektrofotometer.
Tabel 1: Hasil pengamatan dari larutan Asam Benzoat, Nipagin dan Asam Saiisilat dengan alat Spektjofotometer
Standart Hasil ( A ^ Literatur (XmA)
Asam Benzoat 226,8 nm 227,0 nm
Nipagin 256,4 nm 257,0 nm
Asam Saiisilat 302,2 nm 303,0 nm
1.2. ReaUsi Pembcjitykan wama
Pengamatan pembentukan wama dari Asam Benzoat, Asam Saiisilat dan Methyl
p-hidroksi Benzoat dengan bennacam-macam pereaksi dapat dilihat pada tabel 2.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Tab el 2 : Hasil pcmbentukan reakai wanua dari Asam Benzoat, Asam S&lisilat dan Nipagin dengan berbagai pereaksi
-3 2 -
Perlakuan Asam Salisilat Asam Benzoat Nipagin Keterangan 1
FeCljungu endapan coklat merah coklat Hasil
ungu endapon coklat merah coklat Literatur
Aqua Bromwarns hjlang (-) wama hilang Hasil
wama hilang (-) wama hilang Literatur
Titik Lebur159 °C 121 • 124 #C 125 - 128 #C Hasil
160 °C 121 - 124 °C 125 - 128 eC Literatur
1.3. Realui Kristal dan Njala Apl Buruen Na*
• Nyala api Bunsen membentuk wama hming kuat dengan edanya ion Na*.
• Reakfii dari Na* dengan pereaksi Zink Uranil Asetat sehingga terbentuk kristal
berbentuk berlian dapat dilihat pada gambar 3.
Bentuk kristal dari basil reaksi larutan baku yang mengandung Na yang direaksikan dengan pereaksi Zink Uranil Asetat
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
2. Cara Pengambilan Sampel
Cara pengambilan sampel minuman sari buah sirsak di pasar resmi di wilayah
Surabaya Selatan sebanyak 8 sampel dapat dilibat pada tabel 3.
-3 3 -
Tabel 3: Hasil pengambilan sampel di pasar resmi di wilayah Surabaya Selatan dengan menggunakan cara Proporsional Stratified Random Sampling
Lokasi Nama Pasar
Resmi
Pasar Terpilih Jumlah
Penjual
Jumlah
Sampel
Merk
Sampel
Sawahan P'akjs
Kupang (-)
Kupang Gunung
Simo Gunung
Tidar
Kupang Gunung
Pakis
3
2
1
1
C
D
Wonokromo Wonokromo Ban)
Wonokromo Lama
Wonokitri (-)
Bendul Merisi
Wonokromo Lama 4 2 A & E
Karangpilang Dukuh Kupang
Dukuh Kupang Brt
Karangpilang
Karangpilang (hwn)
Karangpilang
Dukuh Kupang
4
2
2
1
B&D
B
Gayungan Gay ung sari Gayungsari 3 1 E
Lalcarsantri Lakarsantri (-)
Dukuh Pakis (-)Wonocolo (-)
•
Wiyijng (-)lUmwaBnm
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-34 •
3. Pemilihan Pelarut Pengembang
. Dalam penelitian ini telah dilakukan KLT dengan pelarut pengembang seperti
tercantum pada tabel 4 :
Tabel 4 : Hasil analisis KLT dari zat Asam Benzoat, Asam Salisilat. Nipagin dengan pelarut pengembang campuran Aceton, Isopropanol, Amoniak 12% dengan berbagai komposisi
Pelarut Campuran Harga Rf
No. Aceton Isopropanol Amoniak 12% As.Benz As.Sal Nipagin
1. 6 2 2 0.44 0.65 0.69
2. 7 2 2 0.51 0.73 0.81
3. 7 2 3 0.42 0.65 0.67
4. 7 3 2 0.41 0.63 0.65
Dari berbagai macaxn komposisi pelarut pengembang diatas, maka pelarut
pengembang terpilih adalah:
Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% = 7 : 2 : 2
Karena dapat memberikan pemisahan noda dari Asam Benzoat, Asam Salisilat, dan
Nipagin dengan baik.
4. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Hasil pengamatan panjang gelombang maksimum dengan Densitometer dari
larutan standar Asam Benzoat, Asam Salisilat, dan Methyl p-Hidroksi Benzoat
(Nipagin) yang ditotolkan pada pelat tipis silika gel GFJ34 dan diamati pada panjang
gelombang 200 - 4Q0 nm, dapat dilihat pada gambar 4, gambar 5 dan gambar 6.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-35-
2'. £i0 cl.
1 . * ij ll
I .
— — ‘ 1 « .MM
. I . ' lUl
. . . ' < , I 1 ‘ I I
h5u u
Gambar 4
Kurva serapan tcrhadap panjang gelomhang dari larutan standart Asam Benzoat dalam etanol dengan konsentrasi 602,40 ppm diamati dengan Densitomatcr membcrikan A.nAj 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
36-
1.1 . ^ M 1:1__________________________________________________________________ _____________________ __________________________________- n . 2 * < -.1
; 0 C' o 0 J 1_|
Gambar S
Kurva scrapan terhadap panjang gelombang dari larutan standart Asam Salisilat dalam etanol konsentrasi 803.40 ppm diamati dengan Densitometer memberikan 298 nra.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-37-
1
I’l
•** .
0 .
*” 0 ♦£00
* •* /oec
*
Gambar 6
Benzoat (Nipagin) Haiam etanol dengan konsentrasi 602.40 ppm diamati dengan Densitometer memberikan XaAt 259 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 38 -
Tabd 5: Hasil pengamatan dari Asam benzoat, Asam Salisilat, dan Nipagin hasil KLT dengan menggunakan slat Densitometer
Pengawet
Asam Benzoat 225 am
Asam Salisilat 298 nm
Nipagin 259 nm
5. Analisis Kualitatif Minuman Sari Buah Sirtak Hasil Sampling
5.1. Penentuan Harga Rf dan Panjang Gelombang Maksimum
Sampel mimwwAn sari buah sirsak hasil sampling sebanyak delapan sampel
dianalisis secaia kualitatif, yaitu berdasarkan harga Rf dengan pelarut pengembang
Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% dengan perbandingan 7 : 2 : 2 dapat dilihat
pada tabel 6 dan gambar 7, dan berdasarkan panjang gelombang maksimum dapat
dilihat pada tabel 7 dan gambar 8.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
* 39 ■
Tabel 6 : Harga Rf hasil KLT dari larutan standart dan larutan sampel dengan pelarut pengcmhang Accton : Isopropanol: Amoniak 12% * 7 : 2 : 2 .
Larutan Standart /
sampel
Harga Rf
Asam Benzoat 0.51
Nipagin 0.81
Asam Saiisilat 0.73
Sampel A 0.51
I Sampel B 0.51
Sampel C 0.51
Sampel D 0.51
Sampel E 0.51
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 40 -
Gambar 7
Pengamatan noda gtandari Asam Benzoat, Nipagin, Asam Saliailat dan pengawet Asam Benzoat yang ada pada sampel secara Kromatografi Lapisan Tipis.
Keterangan:
AB - Asam Benzoat
Np * Nipagin
AS = Asam Salisilat
A, B, C, D, dan E = Sampel
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Tabd 7 : Panjang gelombang maksimum larutan standart Asam Benzoat, Nipagin, Asam Saiisilat dan pengawet yang ada pada larutan sampel hasil KLT dengan menggunakan alat Densitometer
-41 -
Larutan Pembanding / Harga
Sampel (nm)
Asam Benzoat 225
Nipagin 258
Asam Saiisilat 298
Sampel A 225
Sampel B 225
Sampel C 225
Sampel D 225
Sampel E 225
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-42-
£.000
i -:oo
H . *4
- kl.i'UMI
•u . , ■» M I_X--JOu 3».i0
- -m , r: i.i o 7 0
Gambar 8
Kurva serapan terhadap panjang gclombang dari larutan standart Asam Benzoat denganlarutan sampel A, B, C, D, dan E yang diamati dengan Densitometer pada A 200-400nm
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
5.2. Pcncntuan Bcntuk Garam Na Dari Sampel
Peneniuan bcnluk garam Na dari sampel menggunakan cara pcwamaan nyala
Bunsen yang memberikan hasil wama laming kuat yang sangat kentara, dan reaksi
dengan Zink Uranil Asetat yang memberikan hasil pembentukan kristal bertian
seperti pada gambar 9, dan tabel 8.
-43 •
4V -V- ■
Gambar 9
Contoh Bcntuk kristal dari Na sampel yang diicaksikan dengan Zink Uranil Asetat yang dilihat dengan mikroskop dengan pembesaran 25 kali
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-44 -
Tabd 8 : Hasil pembcntukan wama nyala api Bunsen dan pembentukan kristal Na,dari Hampel minimum ftnri huah niraak yang dirrjriffiikiin dengan pereakm ZinkUranil Asetat
Merk Sampel Wama Nyala Bunsen Bentuk Kristal
A Kuning ku&t Kristal beriian
B Kuning kuat Kristal beriian
C Kuning kuat Kristal beriian
D Kuning kuat Kristal beriian
E Kuning kuat Kristal beriian
6. Analisis Kuantitatif Minimum Sari Buah Sirsak Hasil Sampling
6.1. Penentuan Batai Deteksi dan Batas Kuantitari Asam Benzoat
Hasil pengamatan kromatogram larutan Asam Benzoat dalam ctanol konsentrasi
50.20 ppm, 100.40 ppm, 200.8 ppm, 401.6 ppm, 602.4 ppm, 803.2 ppm dan 1004
ppm serta noise blanko (larutan Asam Benzoat 0 ppm) dengan Densitometer pada
A.ra-£1225 nm dapat dilihat pada gambar 10 dan gambar 11.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-43-
2. 00O- 2 . 000
I . <500__
I
1.200_I
0.800—
0 . 4 0 O _
e. 0 oa_HM
-o'.; .u*7.0.
1 . 200
e . 8oo
I__ 0.-400
o. ♦ ♦m.* • (Ji ?♦*! <T i j i
1J. ,*'00
ii. <s»,nc,j«-rn.*,ic.>». 'X r - m.i ci'rv 'iiif* U <?. *.i' IT* »M •*'»
*fu > **:• f'- Ojlm ijf i »;v. ci
Gambar lfl
Kurva tinpoi puacak kromalogram Asam Benzoat dengan konaentian 50.20 ppm (1),100.40 ppm (2), 200.80 ppm (3), 401.60 ppm (4), 602.40 ppm (5), 803.20 ppm (6), dan1004 ppm (7) dengan Densitometer pada 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
I -46-
QQiX.
1 .6 0 0__
i . 1 *
0 . GOO_1»-*r■1,. r, • i u'i
C. 4 0('_! i_l * j r - 1 • i * i ■ f •• 6. .«
O. 000
n --0. £0«J_ 2.0
. 0.000
.-0 . 200 50. 0
g y < - :.iv \ n r » <LUi •at > a
Gambar 11
Kurva tinggi puncak kromatogram noise blanko (ctanol) dengan Densitometer pada k mAt
225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Hasil pcngftirmtan tinggi puncak kromatogram Asam Benzoat dalam pelarut
etanol pada gamhar 10 Han tinppi puncak kromalogram noise blanko pada gamhar
11 dapai dilihat pada tabel 9.
Tabel 9: Kadar laiutan Asam Benzoat pada KLT dan tinggi puncak kromatogram yang diukur dari hasil pengukuran dengan Densitometer
- 4 7 -
Kadar (yg) Tinggi Puncak
Kromalogram
0.000 0.8
0.502 1.0
1.004 12
2.008 23
4.016 4.6
6.024 63
8.032 7.9
10.042 8.7
r “ 0.9928 B -0 .8 5 5 9 A "0.7163
Persamaan regresi y « Bx + A
- 0.8559x + 0.7163
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 48.
L O D = *-^
h /S- k ~t ~
_» 0 .8 /5 0. 8559
= 0.5608 |ig
L O Q = ^
= 10 ° ' g / 50. 8559
1.8694 fig
dimana : LOD = Betas Detcksi
LOQ = Bataa Kuantitaai
k ■= konstanta ; 3 untuk LOD
10 untuk LOQ
h = tinggi blanko
S = slope (tg aiah)
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-49
6.2. Pambuatan Kurva Ltnlaritas Asam Benzoat
Hasil pengamatan kromatogram dan area larutan Asam Benzoat dalam etanol
Hmgftti konsentrasi 200.00 ppm, 400.01 ppm, 600.01 ppm, 800.02 ppm, 1000.02
ppm, 1200.02 ppm, dan 1500.02 ppm diukur dengan Densitometer pada 225
nm dapat dilihat pada gambar 12.
, **CM3L
1 .
- 1*1, n 1.
__ I . I. OM
-- h , 4m'ii n • r * i «
Gambar 12
Kromatogram dan area dari Asam Benzoat konsentrasi 200.00 ppm (1), 400.01 ppm (2),600.01 ppm (3), 800.02 ppm (4), 1000.02 ppm (5), 1200.02 ppm (6), dan 1500.02 ppm (7) dengan Densitometer pada A.,,*, 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Dari basil pcngamatan kxomatogram pada gambar 12 diperoleh harga kocfuden
korelasi kadar terhadap area dengan perhitungan persamaan regresi, dapat dilihat
pada tabel 10.
Tabel 10: Hasil pcngamatan Asam Benzoat dengan berbagai kadar pada KLT dan area hasil pcngukuran dengan menggimakan Densitometer
-5 0 .
I X - kadar (ng) y** area .
2.0000 20284.760
4.0001 43715.340
6.0001 63664.540
8.0002 84811.700
10.0002 101751.800
12.0002 118853.800
13.0002 136344.100
Koefisien regresi (r) -0 .9 9 3 9
Slope (B) - 9034.7362
Intersep (A) - 7775.7577
Harga r tabel pada a “ 0.05 dan d.f - 7-2 adalah 0.754. Harga r hitung
adalah 0.9939 berarti r hitung lebih besar dari pada r tabel (lampiran3). Jadi
antaia kadar dengan area teidapat korelasi yang linicr.
Persamaan garis regresi:
y -B x + A
- 9034.7362x + 7775.7577
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 51 •
x Serlbu
Kadar
Gambar 13
Kurva Linieritas antara kadar dan area dari Asam Benzoat dcngpn perhitungan regresi
7. Penentuan Persen "Recovery”
Hasil Pengamatan penetapan kembali Asam Benzoat dalam minuman sari buah
sirsak dapat dilihat pada tabel 11, aedangkan haml pengamatan kmmntngram dan area
dari Asam Benzoat serta standar dapat dilihat pada gambar 14, gambar 15, gambar
16 dan gambar 17.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 52 •
Tabel 11: Hasil penetapan kembali metode ckstraksi Asam Benzoat yang ditambahkan dalam minuman sari buah sirsak (persen "Recovery").
ReplikasiBerat
seaungguhnya(mg)
Beratdidapatkan
(mg)
Kadar (%)
SDRata-rata
1 is.ooto 11.8494 78.8494
2 15.0010 12.0647 80.4259 79.1078 1.2098
3 13.0010 11.7080 78.0481
1 30.8992 26.5457 85.9106
2 30.8992 26.1476 84.6222 85.8670 1.2236
3 30.8992 26.9034 87.0683
1 49.9964 42.2661 84.5382
2 49.9964 42.5507 85.1076 85.5158 12334
3 49.9964 43.4477 86.9016
Dari data di atas didapat rata-rata Persen "Recovery" = 83.4969%
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-53-
<X
«xU JCL.<£
C ' t - l ,,‘ i ^ > l , ‘i T» !•»!•> tf>f U •♦».*(—* 17, * 1> I'TOi
—<M r i n
— Or-<'■ u ' *£• CC*I
Gam har 14
Kromatogram dan area dari sampel dengan replikast 3 kali (1,2,3), blanko (4) dan baku(5) dengan pengawet 15.0010 mg yang diukur dengan Densitometer pada
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 54 •
i__ 1 . 600
t . £€>n
j n,©00
. *t 1.10
-n. ;:oo l ♦> l ♦ »J
»s i * *,O '*T< I* •*•'»*> lj ► 1 , A , Mt; *................... , »111 Oll'f' . • -«l tii. 'Vh<«ty -o -••••'.«i*>f*. •} (j .►•!►!< •-*1 * 'CM
O v* t .t7 «“» . . . . . . . . .ii.Ul !•••< I't • -•V ’.1 1
t r*'«t h <*rn .<11/1,
Gwnhar IS
Kromatogram dan area dari sampel, blanko (4) dan baku (5) dengan replikasi 3 kali(1,2,3) dengan penambahan pengawet 30.8992 mg yang diukur dengan Densitometerpada XnA, 22S nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-55-
_ 0. 40'i
**
'V« ’I
>*.• >| I M » t4 1*4 <1 |I • l.-I.M •! ......♦*1| >H>|. .'I'lJt
Ij , MIJ M
- 0 . 2 0 t i L _
t . G•0* Ji'in
1 MM. M \ JV 4 M
I . » .nn
I III *1' I
G am har 16
Kromatogram dan area dari sampel, blanko (4) dan baku (5) H™g»n replikasi 3 kali0>2,3) dengan penambahan pengawet 49.9964 mg yang diukur dengan Densitometerpada Anakt 225 nm
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-56-
*. fctOCu.
1 . 6GCu_
1 . 206—
0. •0O_
a . 400__
0.000---
-a .200-4
I . tdO
__ o .e o o
t-----r
1 . £00
— 0 .4 0 0
TOTOi
0 . 000 £ <j>coojK^ . -OJVIO
-0.200G« 0
a!
Gambar 17Kromatogram dan area dari larutan baku dengan kadar 2,0001 ng (1), 4,0001 tig (2),6,0001 iig (3) dan 15,0002 iig (4) yang diukur dengan Densitometer dengan ^ 2 2 5nm
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-37
8. Penetapan Kadar Pengawet Dalam Sampel Minuman Sari Buah Sirtak
Hasil pcngamatan penetapan kadar Asam Benzoat dalam sampel minuman sari
buah sirsak dapat dilihat pada tabel 12, kromatogram dan area Asam Benzoat dapat
dilihat pada gambar 18, gambar 19, gambar 20, gambar 21, gambar 22, gambar 23,
gambar 24 dan gambar 25.
Tabd 12 : Hasil penetapan kadar Asam Benzoat dalam sampel minuman sari buah girsak dengan berbagai merk (dinyatakan dalam gram % bobot perbobot) dengan replikasi 3 kali
Merk K&ndung&nKadar (•/•)
SD1 2 3 rata-rata
A Asam Benzoat 0,0592 0,0577 0,0644 0,0604 3,5162.10*
B Asam Benzoat 0,0209 0,0198 0,0186 0,0198 1,1504.10°
B Asam Benzoat 0,0176 0,0194 0,0190 0,0187 9,4516.10'*
C Asam Benzoat 0,0199 0,0197 0,0183 0,0193 8.7178.10-4
D Asam Benzoat 0,0234 0,0234 0,0296 0,0254 3,5796.10*
D Asam Benzoat 0,0239 0,0232 0,0229 0,0233 5,1316.10*
E Asam Benzoat 0,0258 0,0243 0,0215 0,0239 2,1825.10-*
E Asam Benzoat 0,0204 0,0192 0,0199 0,0198 6,0278.10*
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 38 -
I:. 1*111 *
l . 600.
t . COO_
0 . iiOOL_
n . 400.
O. 00H_ki- p u ■ u
1
i M . I
>1*9 . * t
i > - - l ................... t
* l-1 ■ i <1 • I;J ............M l I . «U • • • * t• i I »>*. l« 4 l*»i .
t . II * f «• • • M«
-u. 203 . 0 M
Gambar 18
Kromatogram dan area dari sampel meric A dengan replikasi 3 kali (1*2,3) dan baku (4)yang diukur dengan Densitometer pada 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 5 9 -
1 0__
1
1 . jLUl
u. :jmi
H . . j liu-l
■ I I I! '■ \ MiM „ Hlil **>• •u-u
-M . .’ill t_______ .. -n .“* 4 . 0 1 i h i . t i | 1 v « , 0
3 - . -l i t > t. >t i - i
Gambar 19
Kromatogram dan area dari sampel merk B dengan replikasi 3 kali yang diukur dcDgan Densitometer pada Am(k( 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 60 *
Cl
<£ '
|<i Al r->QO —
* 1 « '• « Bio — is. ioro r-'M-o i» »r I -- CO (l i f vl Ci © 05 PO
V*J IT) <J. (VJ CT>I?* <?i <?» ©nm v inN
cvi rr> ir;
Gambar 20
Kromatogram dan area dari sampel dan baku (4) merk B yang lain dengan replikasi 3 kali (1,2,3) yang diukur dengan Densitometer pada A,UiAj 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 61.
£ . 00i3_
1.6 00_j
1 . 2 fKX _ |__ 1 . "'ini
Gambar 21
Kromatogram dan area dari sampel merk C dengan replikasi 3 kali (1,2,3) dan baku (4)yang diukur dengan Densitometer pada 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 62-
11 . MMM
I*i f ~r«ii -i -r a,o i r - r> t it • r - -r i hir<ir*-«r,<i -o i o y -t < —« r i r ~ ; •-« i « j ■—* <*J f « j * M
. m » *• i «M.1 ;v,. r.
Gamhar 22
Kromatogram dan area dari sampel meric D dengan replikasi 3 kali (1,2,3) dan baku (4)yang diukur dengan Densitometer pada Arariia 225 nm.
TOTh
L 10
5’1?
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 63 •
;■. o>'io
1 . ftuo_
l .200_ __ 1.?Q0
o . eoei__
0. 4Dri_
). UI.'U—/
-0.105.0
0 . BOO
ii. 400
Gambar 23
Kromatogram dan area dari sampel dan baku (4) merk D yang lain dengan replikasi 3kali (1,2,3) yang diukur dengan Densitometer pada 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
-64-
■ ♦ « « • • (wir<('.«n-cc*« i— O-J |
—. II. J M (l
• *. • MLU -ii. m ri
iti. i
• «.* r t ^ i r . -.v. i*r, t •’ J ' l ' <1 ' I ' O i T , I *-«
0.i i <.i ’J’i <'vi OJ M , ojj.vr-rvrt*r r-5 i jr.u*« c . i « <.4L« ••£» j * r
‘ • 0 < * ' j f . n i. I f . J■-•"•ll — »\l j £4'-|I
iijr.oKino [ iiC. -IVTtr-N. I o I t- II I
Gambar 24
Kromatogram dan area dari sampel merk E dengan replikasi 3 lr»li (1,2,3) Am baku (4) yang diulcur dengan Densitometer pada 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
* 65 •
l.COQ—
1.200_
C . 800__
0 .4 0 0 __
e. e e a _ /
•0.200.1 9 8 .0
— t.cee
__ 1 .2 9 0
,1 2 l3
■11
_ o.eoa
__ O.40O
r><g/s* NMW-*-*
<x
— 0.000
I I
Ki oc» r>-r\. to c&ioow-*thtO II1)<V*<NJfUW-*
mnnon
.-0.200157.0
£ S ^Z l c v j « * o o c o y <\j #*» «r «r
Gambar 25
Kromatogram dan area dari sampel dan Baku (4) merk E yang lain dengan replikasi 3kali (1,2,3) yang diukur dengan Densitometer pada 225 nm.
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
- 6 6
9. Analisis Date
9.1. Penentuan Koeflsien Variasi Dari Date Persen "Recovery” Analisis Asam
Benzoat Dalam Sampel
Dari haail penetapan kembali WaA>r Asam Benzoat yang ditambahkan dalam
sampel minuman sari buah sirsak (tabel 11) dapat dihitung koeflsien variasi (KV)
dengan rumus sebagai berikut;
KV= 100 % x
Hasilnya dapat dilihat pada tabel 13.
Tabel 13 : Hasil perhitungan koefisicn variasi (KV) dari Persen 'Recovery" Asam Benzoat dengan berbagai kadar pengawet
NoBerat
sesungguhnya(mg)
Rata-rata Persen
"Recovery" (x)SD KV (%)
1 15,0010 79,1078 1,2098 1,5293
2 30,8992 85,8670 1,2236 1,4250
3 49,9964 85,5158 1,2334 1,4423
Dari data di atas didapat rata-rata koeflsien variasi ■= 1,4655 %
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
9.2. Penentuan Kadar Scsungguhnya Dari Data Kadar A*am Benzoat Dalam
Sampel
Hasil pcnctapan kadar Asam Benzoat dalam sampel minuman sari buah sirsak
(tabel 12), dimana berdasarkan hasil "Recovery* metode ekstraksi (tabel 11) dapat
dihitung kadar Asam Benzoat yang scsungguhnya yang ada dalam sampel mmumm
sari buah sirsak (tabel 14) dengan rumus sebagai berikut:
• 67 -
100Kadar sesungguhnya = kadar x - ~ -
Contoh peihitungan untuk sampel mcrk A :
Kadar scsungguhnya =0, 0604 x 10083 , 4969 =0,0723
Dan dari kadar scsungguhnya Asam Benzoat yang didapatkan, dapat dihitung kadar
dari bentuk Natrium Benzoat-nya scsuai haail kualitatif dari sampel minuman sari
buah sirsak (tabel 8) dengan rumus scbagi berikut:
Kadar Na Benzoat ~ r-j-xkadar sesungguhnya
Contoh peihitungan untuk sampel A :
Kadar Na Benzoat = - jili- ix O , 0723
=0.0853 %
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
• 68-
Tabd 14 : Hatil penetapan kadar pengawet yang aeiungguhnya dalam sampel minuman sari buah sirsak dan perhitungan dalam bentuk garamNa-nya
MerkSampel Kandungan
Kadarrat*-rata
(%)
Konversi Ice recovery
<*)
Konversi ke Na Benzoat
(%)
A Asam Benzoat 0,0604 0,0723 0,0853
B Asam Benzoat 0,0193 0,0231 0,0273
c Asam Benzoat 0,0193 0,0231 0,0273
D Asam Benzoat 0.0244 0,0292 0,0345
E Asam Benzoat 0,0219 0,0262 0,0309
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB V
PEMBAHASAN
Pada penelitian ini dilakukan annlims pengawet sari buah sirsak
kemasan botol gelas yang beredar di pasar resmi di wilayah Surabaya Selatan.
Pcngambilan sampel dilakukan dengan sistcm Proporsional Stratified Random
Sampling dimana Surabaya Selatan dibagi dalam delapan wilayah (kecamatan), yang
masing-masing memilikibebcrapa pasar. Kemudian dari pasar-pasar yang menyediakan
sampel disetiap kecamatan divmdi untuk menentukan pasar yang terpilih sebagai lokasi
pcngambilan sampeL Oleh karena jumlah pasar yang menyediakan sampel disetiap
kecamatan tidak sama, maka jumlah pasar yang diambil disetiap kecamatan scbanding
dengan banyaknya pasar yang menyediakan saoopel pada masing-masing kecamatan. Hal
ini dilakukan dengan pertimbangan untuk menekan penyebaran unit populasi, sehingga
memudahkan dalam pcngambilan sampel. Banyaknya penjual minimum sari buah sirsak
dalam botol gelas disetiap pasar terpilih tidak mitm, maka pcngambilan jumlah
sampel untuk masing-masing pasar juga scbanding dengan banyaknya penjual sampel
yang ada pada sctiap pasar terpilih. Sampel yang diambil adalah minuman gari buah
sirsak dalam botol gelas berdasarkan meric yang pada nomor pendaftarannya tidak
mencantumkan kode MD. Pengumpulan sampel sccara proporsional stratified random
sampling pada pasar teipilih di Surabaya Selatan diperolch sebanyak 8 sampel (5 meric)
Analisis kualitatif terhadap standart Asam Benzoat, Asam Salisilat, dan Methyl p-
hidroksi Benzoat (Nipagin) yang digunakan, dilakukan dengan Spektrofotometer yaitu
dengan megukur panjang gelombang maksimumnya dan diperolch untuk Asam
Benzoat ~226,8 nm, Asam Salisilat = 302,2 nm dan Methyl p-hidroksi Benzoat = 256,4
• 69 ■
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
nm. Sedangkan berdasarkan literatur untuk Asam Benzoat = 227,0 nm, Asam Saiisilat
=303,0 nm dan Methyl p-hidroksi Benzoat = 257,0 nm. Untuk ion Na+ dilakukan uji
nyala api Bunsen menghasilkan wama kuning kuat, dan uji pembcntukan kristal dengan
reagen Zink Uranil Asetat yang menghasil\kan kristal bentuk berlian. Sedangkan
berdasarkan literatur untuk uji nyala api menghasikan wama kuning kuat dan uji kristal
dengan Zink Uranil Asetat menghasikan kristal bentuk berlian. Jadi standart Asam
Benzoat, Na Benzoat, Asam Saiisilat, dan Methyl p-hidroksi Benzoat yang digunakan
memcnuhi syarat <M,13’2S*30).
Fase diam yang digunakan adalah silika gel GFW siap pakai. Larutan pengembang
/fase mobil yang digunakan adalah campuran dari Accton: Isopropanol: Amoniak 12%
dengan perbandingan 7 : 2 : 2 karena dapat memisahkan dengan baik. Penampak noda
yang digunakan adalah sinar ultraviolet.
Pemilihan panjang gelombang maksimum (Xm-£ ) dilakukan dengan cars pengamatan
spektra noda kromatogram pada daerah panjang gelombang sinar lembayung ultra, yaitu
200-400 nm dengan alat Densitometer. Panjang gelombang maksimum ditunjukkan oleh
panjang gelombang yang memberikan harga serapan maksimum. Dari hasil pengamatan
spektra noda kromatogram Asam Benzoat, Asam Saiisilat dan Methyl p-hidroksi Benzoat
(Nipagin) hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) didapatkan panjang gelombang
maksimum (A .,^ Asam Benzoat = 225 nm, Asam Saiisilat = 298 nm dan Methyl p-
hidroksi Benzoat = 259 nm. Sehingga pada penelitian ini pengamatan noda kromatogram
Asam Benzoat dilakukan pada panjang gelombang 225 nm, noda kromatogram Asam
Saiisilat pada panjang gelombang 298 nm dan noda kromatogram Nipagin pada panjang
gelombang 259 nm.
- 70 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Pada penelitian ini riigunakan pelarut peogekstraksi eter dan residu hasil ekstraksi
dilamtkan dakm etanol. Kemudian ditotolkan pada pelat lapis tipis silika gel G F^
dieluasi menghasilkan noda yang dapat memisah dengan baik (gambar ). Dari noda
yang dihasilkan dapat diketahui jenis pengawet dengan cara membandingkan harga Rf
dan panjang gelombang maksimumnya dengan standart. Noda lainnya berdasarkan harga
Rf dan panjang gelombang maksimumnya adalah sakarin.
Pada pemeriksaan secara kualitatif dari 8 sampel (5 meik) minuman sari buah sirsak
scmuanya mftngandimg Asam Benzoat, yaitu dengan membandingkan harga Rf sampel
dengan harga Rf standart dan dengan membandingkan panjang gelombang
maksimumnya. Dari reaksi pembentukan kristal bentuk berlian dengan Zink Uranil
Asetat dan perubahan wama nyala api Bunsen menjadi kuning kuat dapat diketahui
bahwa sampel mengandung ion Na+.
Hasil pengukuran Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Asam Benzoat
menggunakan lempeng KLT silika gel G F^ dengan pelarut pengembang Aceton :
Isopropanol : Amoniak 12% = 7 : 2 : 2 , dengan menggunakan alat Densitometer
(Simadzu Dual Wave Length Scanner model CS-930) diperoleh LOD dari Asam Benzoat
= 0,5608 |j.g dan LOQ dari Asam Benzoat = 1,8694 jighal ini berarti analit terkecil dari
Asam Benzoat yang masih dapat terdeteksi oleh alat Densitometer yang digunakan pada
penelitian ini adalah 0,5608 (ig. Sedangkan jumlah analit terkecil dari Asam Benzoat
yang masih dapat ditetapkan secara kuantitatif adalah 1,8694 ng. Sehingga penetapan
kadar pengawet Asam Benzoat pada penelitian ini dapat dikeijakan dengan menggunakan
alat Densitometer.
Pada pembuatan kurva linicritas Asam Benzoat diperoleh kurva linieritas dengan
persamaan regresi y = 9034/7362X + 7775,7577 dan harga koefisien regresi (r) =
- 71 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
. 7 2 -
0,9939. Koefisien regresi (r) dari tabel dengan derajad kepercayaan 95% (a=0,05) dan
derajad bebas (d.f = 2) adalah 0,7540. Dengan membandingkan r hitung dan r tabel
dimana r hitung lebih besar dari r tabel, dapat disimpulkan adanya hubungan yang linier
antara Wadar dengan area. Sehingga dapat dilakulcan perhitungan penetapan kadar
dengan cara membandingkan area sampel terhadap area standart atau dengan
menkonversikan area ke dalam persamaan regresi kurva linieritas.
Untuk penetapan perolehan kembali ("Recovery") kadar Asam Benzoat, digunakan
sampel minuman sari buah sirsak hasil sampling sebagai blanko, kemudian dari sampel
yang Kama ditambahkan Na Benzoat yang mengandung Asam Benzoat masing-masing
0,05%, 0,10% dan 0,17%. Hasil perhitungan didapatkan "Recovery" untuk Asam
Benzoat sebesar 83,4969%. Dari hasil "Recovery" yang didapat, dapat disimpulkan
bahwa akurasi metode yang digunakan dalam penelitian ini cukup baik, dimana
"Recovery" yang didapatkan memenuhi pcrsy aratan persen perolehan kembali yaitu tidak
kurang dari 80% dan tidak lebih dari 120%
Dari analisis data diperolch harga kocfisicn variasi (KV) rata-rata Asam Benzoat =
1,4655%. Harga koeflsien variasi (KV) rata-rata yang diperolch pada penelitian ini
memenuhi persy aratan yaitu tidak lebih dari 5% Hal ini menunjukkan bahwa presisi
dari metode yang dilakukan masih memberikan hasil yang baik.
Pemeriksaan kuantitatif Wadar pengawet dalam sampel minuman sari buah sirsak
yang secara kualitatif diketahui mengandung Asam Benzoat (dalam bentuk Na Benzoat),
menggunakan perlakuan yang sama seperti pada penetapan "Recovery". Dari hasil
penetapan kadar temyata didapatkan hasil yang bervariasi sebab sampel terdiri dari
berbagai macam merk yang berlainan. Dari data yang diperoleh pada tabel 14Jcadar
Asam Benzoat berkisar antara 0,0193% - 0,0604% b/b. Kemudian kadar Asam Benzoat
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Halam sampel-sampcl terscbut dikonvcrsikan tcrhadap persen "Recovery” untuk
mcngetahui seberapa banyak jumlah Asam Benzoat yang sesungguhnya ada pada
minuman sari buah sirsak dalam kemasan botol yang diperjualbelikan di pasar-pasar
resmi tersebut. Hasil peihitungan konversi untuk Asam Benzoat beridsar antara 0,0231 %-
0,0723% b/b. Sedangkan hasil perhitungan konversi dalam bentuk Na Benzoat sesuai
dengan analisis kualitatifaya beddsar antara 0,0273% - 0,0853%.
Dari analisis kuantitatif temyata pengawet yang didapatkan pada minuman sari buah
sirsak Halam botol dengan merk A yang didapat dari pasar Wonokromo Lama diwilayah
kecamatan Wonokromo mengandung Asam Benzoat dengan kadar 0,0723% b/b.
Sedangkan untuk merk B diperoleh 2 sampel sesuai dengan sistem random sampling
didapat dari pasar Karangpilang dan pasar Dukuh Kupang diwilayah kecamatan
Karangpilang mengandung pengawet Asam Benzoat dengan kadar rata-rata 0,0231% b/b.
Untuk merk C didapat dari pasar Kupang Gunung diwilayah kecamatan Sawahan,
mengandung pengawet Asam Benzoat dengan kadar 0,0231% b/b. Untuk merk D
diperoleh 2 sampel yang didapat dari pasar Pakis di wilayah kecamatan Sawahan dan
pasar Karangpilang diwilayah kecamatan Karangpilang mengandung pengawet Asam
Benzoat dengan kadar rata-rata 0,0292% b/b. Untuk merk E diperoleh 2 sampel yang
didapat dari pasar Wonokromo Lama diwilayah kecamatan Wonokromo dan pasar
Gayungsari diwilayah kecamatan Gayungsari, mengandung pengawet Asam Benzoat
dengan kadar rata-rata 0,0262% b/b. Dari data-data tersebut diatas temyata pengawet
yang ditambahkan pada minimum sari buah sirsak dalam kemasan botol gelas masih
memenuhi syarat yang ditetapkan pemerintah melalui PerMenKes RI
No.722/Menkes/Per/IX/88 Tentang Bahan Tambahan Makanan khususnya pengawet.
- 73-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB VI
KESIMPULAN
Dari hasil analisis pengawet dalam minuman sari buah sirsak dalam botol yang
beredar di pasar-pasar rcsmi di wilayah Surabaya Selatan, dapat disimpulkan :
1. Pengawet yang ditambahkan dalam minuman sari buah buah sirsak dalam botol yang
mempunyai nomor pendaftaran SP (non-MD) atau yang belum mempunyai nomor
pendaftaran dan beredar di pasar-pasar resmi di wilayah Surabaya Selatan adalah
Asam Benzoat Han menganAmg ion Na*.
2. Kadar pengawet Asam Benzoat adalah bervariasi tergantung dari merknya, berkisar
antara 0,0231-0,0723 gram % bobot peibobot yaitu merk A = 0,0723% b/b, merk B
= 0,0231% b/b, merk C = 0,0231% b/b, rneik D = 0,0292% b/b dan merk E -
0,0262% b/b atau jika dalam bentuk Natrium Benzoat berkisar antara 0,0273-0,0853%
bobot perbobot.
3. Pengawet Asam Benzoat yang ditambahkan Halam sampel minuman sari buah sirsak
dalam botol memenuhi Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia
No.722/Menkes/Per/D(/88 tentang Bahan Tambahan Makanan khususnya pengawet.
-74-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB v n
SARAN-SARAN
Berdasarkan hasil yang diperoleh dalam penelitian yang telah dilakukan dapat
digflrnnkan :
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk sampel minuman sari buah sirsak dalam
botol di lokasi lain.
2. Dapat dilakukan penelitian lebih lanjut untuk sampel-sampel lain yang menggunakan
pengawet Asam Benzoat, Natrium Benzoat, Nipagin dan Asam Saiisilat dengan
metode Kromatografi Lapisan Tipis - Densitometri.
- 7 5 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
BAB Yin RINGKASAN
Telah dilakukan penelitian terhadap minuman sari buah sirsak Halam kemasan botol
gelas dengan nomor pendaftaran non-MD atau yang belum mencantumkan nomor
pendaftaran yang beredar di Surabaya Selatan. Penelitian meliputi analisis kualitatif
maupun analisis kuantitatif terhadap kandungan pcngawctnya.
Pengambilan sampel minuman sari buah sirsak dilakukan dengan sistem Propors ional
Stratified Random Sampling dimana Surabaya Selatan dibagi menjadi 8 daerah
(kecamatan) dan dari masing-masing kecamatan dipilih pasar secara random untuk lokasi
pengambilan sampel. Sampel dipilih secara random dari pasar terpilih secara
proporsional sesuai dengan jumlahnya dan dari sampel-sampel teisebut pcngawctnya
dianalisis secara kualitatif maupun kuantitatif.
Analisis kualitatif dilakukan selain dengan pereaksi kimia (untuk bentuk garamnya)
juga dengan membandingkan harga Rf sampel dengan Rf standart. Dari analisis kualitatif
sampel hasilsampling ini, temyata scmua sampel hanya mengandung pengawet Asam
Benzoat (atau Natrium Benzoat jika dalam bentuk garamnya) dimana Rf standart untuk
Asam Benzoat 0,51 scdangkan untuk sampel didapatkan harga Rf 0,51. Analisis tersebut
diatas dilakukan dengan metode Kromatografi Lapisan Tipis dengan fase diam silika gel
GFj^ dan pelarut pengembang Aceton : Isopropanol: Amoniak 12% = 7 : 2 : 2 . Selain
itu dilakukan juga dengan membandingkan panjang gelombang maksimum (Xmakj) sampel
dengan panjang gelombang maksimum standart yang dilaloiknn dengan alat
Densitometer, dimana standart Asam Benzoat 225 nm scdangkan untuk sampel
didapatkan AmikJ 225 nm.
- 7 6 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Analisis kuantitatif dilakukan dengan cara Densitometri dengan pengukuran area
pada k miSu terpilih, dimana dari pengukuran tersebut dapat disimpulkan ksndungan Asam
Benzoat dalam sampel minuman sari buah sirsak dalam kemasan botol adalah 0,0193% -
0,0604% b/b atau jika dikonversikan dalam bentuk Natrium Benzoat kadamya adalah
0,0273% - 0,0853% b/b.
•77-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
D APTAR PUSTAKA
1. David Pearson, 1970 . The Chemical Analysis of Foods, 6fcEd, Chemichal Publishing Company, Inc New York, hal. 27 - 47
2. Anonim, 1976, Analisa dan Tehnoloffi Bahan MaVanan Penataran Dmu dan Tehnologi Bahaa Makanan, Institut Tehnologi Bandung, Royal Tropical Institut Anstcrdam, Kelompok Qmu dan Tehnologi Bahan Makanan Institut Tehnologi Bandung, hal 133 - 146.
3. Lackman L„ 1986. The Theory and Practice of Industrial Pharmacy. 3*, Lea and Febriger, Philadelphia, hal. 520 - 521.
4. William. O. Cochran, 1991, Teknik Penarikan Sampel, cdisi III, Peneijemah Rudiansyah, Peneibit Univenritas Indonesia (UI Press), hal. 20 - 25
5. Depertemen Kesehatan Republik Indonesia, 1988, Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia No. 722/MenKea/IX/88. Tentang Bahan Tambahan Makanan 1988, hal 3 - 4.
6. Touchstone. J, Dobbins F. Murrell, 1983, Practice of Thin Laver Chrornqfogp p hy, 2U Ed. John Wiley and Sons Inc, New York, hal. 169 - 171.
7. Zainuddin. M, 1989, Mctode Sampling. Fakultas Farmasi Universitas Airlangga, Surabaya, hal. 1 - 13.
8. Jacobs Morris B„ 1951, The Chemistry and Technology of Food and Food Products. 2”* Ed. Vol.HI, Interscience Publishers, Inc, New York, hal. 1936 - 1941.
9. Meyer L.H., 1960, Food Additive in Food Chemistry. Rcinhold Publishing Corporation, New York, hal. 358
10. Jacobs M.B. 1958, The Chemical Analysis of Food and Food Products. 3* Ed. D. Van Nostrand Company, Inc Price ton, New Jersey, hal. 149 • 170.
11. Martindale, 1989, The Extra 29* Ed. The Pharmaceutical Press, London, hal. 1355, 1365.
12. The United States Pharmacopeia. 1980, 20* Revision United State Pharmacopoial Convencon, Inc, hal. 73.
13. British Pharmacopoiea. 1980, Her Majesty's Stasionary Office, London, hal. 51,286.
14. The Merck Index, 1986, An Encyclopedia of Chemicals and Drugs. 8* Ed. Published by Merck and Co., Inc, Rahway N. J. USA. hal. 155, 1126.
- 7 8 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
15. Clarice, FGC, 1978, Isolation and Indentifioation of Drugs. Pharmaoeutioal Press, London, hat 965, 1096.
16. Skoog, Douglas A and Wet Donalt, M 1980, Principles of Instrumental Analysis. 3* Ed. Saunders College, Stanford University, hal.837 - 841.
17. Pecsok, Shield, Chaims, Ms. William 1976, Modem Methods of Chemvcal Analysis r 2nd Ed. John Wiley and Sonsjnc New York, Chichester, Brisbane, Toronto Singapure Printed in The USP, hal. 28 • 40.
18. Official Methods of Analysis of The Assaciation of Official Analytical Chemist. 15* Ed. 1990. hal. 1141* 1158.
19. Karel Macek, 1972, Pharmaceutical Application of Thin I .aver and Paper Chromatofarafi. 3th Ed. Eisevier, Publishing Company Amsterdam, hal. 47-49, 534 -631.
20. Stahl, E. 1969, Thin Laver Chromatography. 2nd Ed. Springer Verlag, Heidelberg, New York, hal. 638 - 648.
21. Treiber, Laszlo R, 1987, Quantitative. Thin Layer Chromatography and Industrial Aplication. Journal of Chromatographic Science, Vol. 36, hal. 21 - 29, 61 - 64.
22. Mufya. M , 1983, Pemakaian " Thin I.aver C,hromatftgg*nner " Untuk Analiaa Kuantitatif. bulletin ISFI Jatim tahun XV. No. 1-2, hal 15 - 24.
23. Can G.Hal., Wahlich J.C., 1990, A practical approach to method validation in pharmaceutical analysis. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, vol. 8, No. 8-12, hal. 613 - 618.
24. Bambang Soekardjo, Siswandono,1980, Analisa Kuantitatif Denaan Kromatoerafi Lapisan Tipis. Bulletin ISFI Jatim,Tahun XII, No. 1-2, hal 9 - 13.
25. Agus Ibnu Saud H.M, 1981, Pembina Home Industry. Pembina Kaiya Putra Nusantara, Salatiga, hal. 41 - 42.
26. Nainggolan S., 1990, Jouce dan Theraoi Ke^batan Oriental Associates, Jakarta, hal. 26 - 29.
27. Niniek Pumomo S, 1978, Minuman Rinnan. Beraoa Jauh Merugikan Kcschatan. Bulletin ISFI Jatim, Tahun X,No.6, hal 205 - 204.
28. Basics Test for Pharmaceutical Suhtancea Geneva -.The World Health Organization 1986, hal.25, 154.
29. Kovar, Auterhoff, 1987, Identifikasi obat. Penerbit TTB Bandung, hal. 95,101102,159-160.
- 7 9 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
30. Vogel, 1985, Buku Teks Analisis Anorymik Kualitatif Makro dan Semimikro. Kalman Media Pusaka, Jakarta, faal.310-311.
31. Pearson's, 1981, Chgnycal Analysis of Food. 8® Ed, Scientific & technical, New York, hal. 82 - 90.
- 80 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Lampiran 1
Contoh perhitungan persen perolehan kembali ("recovery") metode ekstraksi .
Misalnya sampel n
Dari pengamatan area kromatogram Asam Benzoat hasil replikasi kc dua didapatkan data
sebagai berikut:
= kadar pengawet dalam sampel dengan penambahan pengawet
C„, - kadar baku standart untuk sampel — 30,00 mg (dalam SO ml)
Cy = kadar pengawet dalam sampel tanpa penambahan pengawet
C*, = kadar baku standart untuk blanko 19 3,33 mg (dalam 50 ml)
LA,p = area dari sampel dengan penambahan pengawet - 132731,60
LA^i = area dari standart 1 = 136344,10
LAy ^ area dari sampel tanpa penambahan pengawet = 18609,10
LA*, = area dari standart 2 12 20284,76
X 12 berat pengawet yang didapatkan kembali ~
W Q berat pengawet yang ditambahkan mula-mula = 30.8992 mg
Wv ■= berat sampel *= 30,0013 gram
W u = berat blanko = 30,0021 gram
Perhitungan dapat dilakukan sebagai berikut:
c» =x £ r xc« ' g » »■ oo -
* 1«3’ 33 = 3- 0580
dalam 30,0013 gpun = 3,0580 = 3, 0579 mg
•81 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
pengawet yang diperoleh kembali- X ” 29,2055 - 3,0579 “ 26,1476 mg
Jadi % "Recovery" - -^x 100 %
- x 100%= 84>6222%
-82-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Lunpiran 2
Contoh perhitungan kadar pengawet Adam sampel minuman sari buah sirsak
Misalnya sampel D ke dua / sampel D yang lain
Dari pcngamatan area kromatogram sampel D hasil replikasi ke dua didapatkan data
sebagai berikut:
C,p = kadar pengawet dalam sampel
C„ = kadar standart = 5,00 mg ( dalam SO ml)
LA^ = area pengawet Halam sampel = 26920,53
LA* “ area standart “ 19298,43
R = "Recovery" “ 83,4969 %
W , ■ berat sampel = 30,0005 gram
Perhitungannya dapat dilakukan sebagai berikut“
C = ° 26920 » 53 x 5, 00 = 6, 9749 mg«p LA* * 19298 , 43 ^
Halnm gram % bobot perbobot - 6> ^ q^ 00 x 100 %“<>, 0232 %
Kadar sesungguhnya = 0, 0232 x 83 - j |g g - =0, 0278 %
-83-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Lampinui 3
Tabel kocfisien korclasi (r) pada derajad kepercayaan 5% dan 1%
«** %% i*111 1 0 0 0IW IM•)• titin .«i?1U |)4
•>0 » .1 ) 4U4 )U431 111•o i . . mi l l .>04I I I M4U1 .141tl4 .Mlu i .in.441 .104.441 ' .(104M .1)$
.444 .Mt4]3 .14*
.41) . t ) )
.411 , t ) t
.404 .I I I314 . |« t.144 .414141 .441
'41 • • ♦ 1. Ofctit ■ It 1*4 Ui«#u i*jl
$% I t
1* 1)4 414i t I t ) .410i t .141 •44Ji t H I .444w J4 | ■**»a U I .43)u •111 .414M . u t .411u .111 .40)40 .104 11141 .144 .3)1M .1)1 1*4t l .141 340to ■Ito l i t)0 111 30140 III ■111M .lo t I t )
too l i t i Ul i t .174 ■111IW 111 .101u » .141 114100 .13* .111100 .111 .141400 .04* 111too .044 I II
* 84 -
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Lamplran 4
VII. PENCAVET (PRESERVATIVE)
----- ’---- “TNAMA BAHAN
TAMBAHAN MAKANAN
BAHASAINDONESIA
l Asam Benzost
BAKASAINGGRIS
Benzoic Acid
JEKIS / BAHAK
MAKANAN
X . Kecap
2. Minuman ring.an
3. Acar ketimun dalam botol
5. Pekatan sari nana*
t. Sags Tomot
7. Mftkanon In In
BATAS MAKSIMUM
PENGGUNAAN
600 mg/kg
600 mg/kg
1 g/kg, tunggal atau campuran de< ngan Kallum dan Natrium Benzoat atau dengan Kali- \jm Sorbat
1 g/kg, tunggal atau campuran dengan gsramnya atau dengan Asam Sorbat dan garam- nya '
1 g/kg, tunggal atau campuran dengan garamnya atau dengan Asam Sorbat dan garamnya dan senyava sglfjt. tetapi senyawa sul(it tldak lebih dari 500 mg/kg
1 f / k e
1 &/kg
-85 •
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
J
No
NAMA BAHAN TAMBAHAN MAKANAN
BAHASAINDONESIA
BAHASAINGGRIS
JEN1S / BAHAN
MAKANAN
BATAS MAKSIMUM
PENCCUNAAN
16
Me til p-Hl-BroksT^en- T o f t ' ' ~r
( l anTutan)
Natrium Berizoat
SodiumBenzoate
2 .
3.
Acar ketimun dalam botol ; Kecap
Ekstrakcalr
kopi
4. Pasta tomat; Sari buah
5. M&kanan lalnnya kecyali :a. dagingb. lkanc. unggas
250 mg/kg
450 mg/kg
1 g/kg
1 &Ag
1. Lihat Kalium Benzoat
2. Jem dan Je-ll
3« Kecap
4, Mlngman ringan
5. Saus tomat
6.. Makonan lain
Lihat Kalium Benzoat
1 g/kg, tunggai atau campuran de- ngan Asair, Sorbat dan garam kalium- nya, atau dengan ester dari asam para hidroksiben- zoa t
600 mg/kg
600 mg/kg
1 g/kg
1 e/kg
- 86 ■
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Lampiran S
t t l .11 M M h i «tf »tf I t ' M >H »rt *t» M *H »tf »d H I M N | 'r f »«J *H *H '*• *rl *rf »* M W M
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
♦ ‘ •"> •" • ' • •* •*♦•'!• M •»♦••*! *»••••••♦••♦ I ♦ • • ••' ««i •
i | |j[ | a a a a a a a a « a « « « « « H I'l H H M
.y? s ?
mU I
' ■• -J M u IM H H n b w H H H HW UwC*wwt | *^ l ; »g a g &' 8 § a i S 2 2 2 I S 2 3 8 g S 8 & S 8 | £ § | § 8 2 k S §
S » 5 3 $ ! S 3 » t 3 3 i s ® I ^ R t i a S S ^
UIWHw.„WMMh'WWMMaWl£MWMM!JWK'C| fMlfl(1«)W«>^W|y
Ifr
Vf6
i * l i i f i i i i>« x * C.
I i 53 3«
n
• H n
!r
A-
aSO><
a
- 87-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
Lampiran 6
PE
TA
iMCAM
KTAH KOlflMAOYA
IO*A
&«rA
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO
SINGKATAN
DF ” Degree of Fredoom
KLT “ Kromatografi Lapisan Tipis
LOD “ Limit of Detection
LOQ " Limit of Quantitation
ppm * part per million
Rf “ Retention of factor
SD ” Standart Deviasi
I
-89-
ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA
SKRIPSI ANALISIS PENYAKIT PADA MINUMAN SARI BUAH ... WHENY UTOYO