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XXIII CONGRESO NACIONAL DE , MICROBIOLOGIA SEM 11-14 JULIO-2011 SALAMANCA

XXIII CONGRESO NACIONAL DE MICROBIOLOGIA...membrana plasm.~lica. La sobreexpresi6n de dni2' 0 de prm" no causa defoclos en las cl!lulas. pcro la sobreexpresn'Jn de dm 1" en mulantos

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Page 1: XXIII CONGRESO NACIONAL DE MICROBIOLOGIA...membrana plasm.~lica. La sobreexpresi6n de dni2' 0 de prm" no causa defoclos en las cl!lulas. pcro la sobreexpresn'Jn de dm 1" en mulantos

XXIII CONGRESO

NACIONAL DE ,

MICROBIOLOGIA

SEM

11-14 JULIO-2011

SALAMANCA

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COM ITE CIENTIFICO

CONGRESO

SEM XXIII SALAMANCA

XXIII SEM SOCIEDAD ESPANOLA DE MICROBIOLOGiA

Enriqueta Arias Juan Jose Borrego Francisco Javier Carballo Ernesto Garcia Jose Antonio Gil Tomas Gonzalez Villa Ricardo Guerrero Jorge Lalucat Montserrat Llagostera German Larriba Ana Ma Martin Jose Pedro Martinez Jose Antonio Miron Maria Molina Juan Luis Munoz Jesus Murillo Amparo Querol Jose Luis Revuelta Asuncion de los Rios Luis Rodriguez Carlos Rodriguez-Vazquez de Aldama Yolanda Sanchez Eulogio Valentin Antonio Ventosa Miguel Vinas

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P.14. Hongos filamentosos y levaduras

HL P42 Es tud io do 13 felacion fu ncional cntrc las proleinas le lraspan Ooilp, Oni2p y Prmlp en cl proeeso de eonJug3cion de SchlzoS.lcch;Jromycos pombo

~. M.R. Shanfmoghad3m, N. De Leon, M. Hoya, C. Ooneel, J.A. Clemente· Ramos. E. Calpena , M.H. Valdivieso. [email protected] s. Depat1amenlo de lWl:fobiologia y Gcnelical lBFG Univcrsldad de SalamancaJCSIC.

Dnilp, Dnl2p y Prmlp son proteinas COil cualro dominlos Imnsmcmbranll (tolmsp:'!n) de Schilosaccharomyces pDmoo cuya expresi6n 50 induce dlm:Jnlo al proeaso de conjugac.cm. Adem<is, On;1p y Dni2p comparl!!n con l.ls claudinllS 18 presencia (Ie unas cisleinas en posicioncs conservadas del primer dominic 1!~lracc lu lar. Las Ires proleinas 51! localizan en un subdominto conCl'I:lto de fa membrana plasmatiC<!, en la zona de conlaclo urllm los p;;Jren lokls QUO osl~n conjugando. Dnilp y Dni2p coloca lizan Dnilp no 5 (1 localiza correclam(lnle en un mutanle dm"2 y Dni2p no S6 lucallza corroctarnon ll) (In un mutanl(l dnil . 10 que sugiere que Dni l p y Dni2p forman un complejo. La 10cal lzac06n de Prrnlp es independiente du Onilp y Oni2p, y viceversa. La ausoncia de Dnilp. de Dn i2P. 0 de amba~ proteinas conduce 1:1 un defeclo en la fu si6n celu lar durante la conjugacion que sOlo se manil iesta a ternparaturas medio·altas. La ausencia de Prm lp produce un dcfucto en 10 fusi6n cclular drlls ti oo a CliillQuior lumpuratum. Un anill isis al microscopio electr6n ico ha demoslrado qU(l en los mutantes dnil l . dnil dni2 y prml hay una grave desonJemzaoon de Is membrana ptasm;itica y de ta pared celular en Is zona de contaCIO entm los p.arcntakls. La sobreexpresiOn del gen dnil' os le lll!. y esla Ictalidad so aoomparla por la presencia de gran des invilginaciones IIfl la membrana plasm.~lica. La sobreexpresi6n de dni2' 0 de prm" no causa defoclos en las cl!lulas. pcro la sobreexpresn'Jn de dm 1" en mulantos dl,;21 0

prm li no es lellli porque Dni l p no sa Iocaliza en la membrana plasmlllica. Finalmonto, se han rcalizado ,malisis geneticos y se ha delerm;nado quo Onilp y Om2p acluan en la mlsma ruta funcional. miontras Que Prmlp aclva en una .ula diforonlo.

HL P43 El Dominic CNH de Rgflp (GEF d!l Rholp en Sc/1ilos~cch~romyces pombe) C!i nccesario para su funcien en NETO (New End Take Off)

Sora MuflOl., ElVIra ManJ6n. Patricia Garcia y Yolanda Sanchez. Inslllu lO do BlOlogia funu onal y GenOmica. CSIClUOIversidad de Salamanca aud QuparlaOll!nlo do Mio obiologia y Genetics, Unlvef5idad da Salamaoca. E­mall: [email protected]

En levaduras. la GTPasa Rho tp regula I .. in togridad colubr OOQfOmando Ia disposicibn del cilocsquelelu de achna y microliJbulos con Ia 5ecre06n y la biosinlesls de la parcd celular en las zonar. de cfIlcimicnto. Nosol ros eslamos estudiando los prindpales actlvadores de Rholp (Rg l1 p, Rgl2p y Rg13) en S. pombe. Los Ires purtene<:l!n a la faml"a de proteinas GEF {guanine nuclOOllde !!xchange !actors) !jue actiJan mod~iC<lnde 01 estado dB uni6n a nucl06hdo de Is GTPasa y de es te modo inlluenciiln &llocatizaci6n y su activaciOn . RglIl> actlva a Ia GTPasa Rholp durante c l crecimientc poiarizado y pa.ticipa al monos on Ires proccsos diferenles: la sintesis do la pored celular. el mantl.lnimiento (11.1 ia in tcgridad ce lular y el crecimienlo r)(}~1rizado (1). Ftg fl P us una protelna con cuatro dominios allamenle conservados: DEP (DI s h e~e l l ed .

Egl- l 0 y Pleckslnn), OH (Obi Homology), PH (Plekstrin Homology) y CNH (Citron Kinasu Homology). De ellos solo se conoce la cont.ibuci6n dal domlnlo DH-PH qUI.l as asencia l para su lunci6n calalilic1:l. Nosotros homos obtcnido mutantes en cada UIlO de los dominios de la prolelna y hl.lmos vista qul.l el dominio CNH que esla pfI!S01ll1.l en protelnas dl.l serlali zaCl6n como NIK y citr6n kinasas, os esencial para la localizaCl6n dl.l la ploloina on el polo nuevo de crecimienlo. Las cl<lular. Que careccn da los ult i rno ~ t65 aminoacidos (8a) son mormpoiares igual que la cepa rgfl sin embargo Il dil arencia del mulanle nub que muestra un 30% de lisis. estas c~ lulas no pierclen 103 integndad. Hemos realizado mutag~ne6'6 par PCR dcgenara tJ lI dal oxtrema C-terminal y hem:Js VIsto (IUa la cl;mlnoci6n do los iJlllmos J.4 aa produce cekrlas Incapaces de activar 01 crecimienlO por el polo nuovo. EI domlllio OEP tambtCn es importanle en 103 locailldCl6n de Rgf lp pucslo Que la deleclon parcial de este dornmio libCfa ta mayor parte de Ia proteina Rgllp de los palos y la cencenlra en cI nucleo. Tanto en los mutantes oblenodos on 01 dominio CNH como los oblenldos ell al dominic OEP. las drferonclas on la 10caliza06n son debidas exclu5'Vamellta a 10 pcrdidll del ancla]e a la mombrana do tas proleinas metadas 0 a la lalta de interaccion con ouas proteinas, puOSlo que la canlldad de R911 -CNH y RglI-OEP ItS similar a Ia cantidad de Rgl1p SIlvestre.

(1 ) GARCIA, P., et al. -The Rholp exchangl! factor Rgllp signals upstroam from the Pmk 1 mitogen-actIVated prolein klnaso pOlhway In fiss ion yeasI' 2009 Mol Bioi Cell. 20: 721 ·73 1

Hl P44 Isolation and analysis of Iip2 gene from Trichoderma han./anum

Vaz M'. Belo. H' . Jorge. l. u, Gonzalez, F. ' . Monte, E. l and ChoupI" a. A. 11 Emait: [email protected] 'Instllulo Politecnico de Braganr;a. Escola Supenor Agrtll1a, Campus de Santa Apol6nia. Ap.artado 1172, 5301·854 Braganr;;a, Portugal. 'eIMO- Centro de Invos tiga~o de Mootanha, Campus de Santa Apolonia. Ap.artado 1172, 5301· 854 Bra9811~a. Portugal. 'Departamento de Mocroboologia y Genetica. Universidad de Satamanca. Plaza Doclores dB Ia Roina $In, 37007 SallllllanC<l. Spain. 'Centro de Invest;gaoon det Cancor. Campus Miguel de Unamuno J7007 Salamanca. Spain.

Trichoderma spp. covers a group of fungi extremely commOll ill so ils 01 al l climat;c areas. These fung i arc efficient enzyme producers. WIth industrial applica tions, or in nature, involved in tho degradation of tM co il Wil li of the phytopathogens as we ll as in Iho degradation of other fungi . organic matter and nutrienls secreled by roots TrichOderma st ra ins produce eX1raceliular enzymes and ant ibiot ics with anlifungal eHects. mainly T. hi.lrzianum, T. virens and T. viride. being by this way used as biocontrol agents. Among the degradation enzymes of the cell walls we find ~-1.3 and ~-1 ,6 glucanases, d\itinasos and protoases. Lipases cou ld also be in~olved in enzymatic a cti~ity re lated with biocontrol . This work mtention was the isolation and study ef tha lip2 gene from T hanianum. lip2 gene was cloned in an expression system, uSlIl[l the pET-2BfI(.) vector. and \he e~pression evaluation of \he lip2 protein was made In a SOS·PAGE gel at dillerent inductioo times. The obtained results in the cloning showed a 6564 bp band Indicating IM t lhe d oning was well succeeded. The protein expression was venl ied al 8 hours of Induction by the presence of a band With an eslimaled molecular weigh! of 44 kDa. in a SOS-PAGE gel.

Benitoz. T .• 01 aI. , Bioconlrol mlK:hanisms 01 Trichode/ma stra ins 200<1. International Microbiology. 7:249-260 Harman. G.E. Overview of mechanism s and uses 01 Trichoderma spp. 2006. Phytopathology, 96: 190·194 . Monle. E. Understanding Trichoderma: be ... ·lCen blotectmology and microbial ecoIo9 ~. 2001. International of Microbiology, 4 : 1-4.

Acknowledgements: The Projecl COM8ATINTAJSP2.Pl1102 intelleg IliA -Cross-Border Cooperal ion Spain-Portugal. financed by Th(l European Regional Development Fund, and the Projtlct -ldenllfi C<ltion, characterization and role of mOlecular factors associated with the mechanisms of inflJctlOll or F/lgaceae sp<!cies by Phytophthora cmnamomr (PTOCIAGR-AAMl6762BI20D6) FCT, supported this worK

HL P45 Characterintion or a g luc;:rnase Inhibitor protllin from Phyfophfhor3 c;nnamomi involved in planl defenSI! responses

Martons I.tAt. , . Martins. F '. Bolo. H.', Vaz, M.' and Cl lOuplna. A.'J

e ·mail: [email protected] ' Instil ulo Pohtccnico de Braganr;;a, Escola Superior AgraM, Cllmpus de Santa ApoIOnia. Ap.artado 1172, 5301 -854 Braganr;:a, Portugal. :CIMO- Centro de tnvcstigar;:oo de Montanha. Campus de Santa ApolOnia. Apartado , 172. 530 1· 85-1 Braganr;a . Portugal.

Oomycelos from the genus Phylophlhosa ille fungus·tiko plant p.athogans thai are devastating l or agricullure and nlltmal ecosystems. Oue 10 thelf part Icular physiological characleristics, no cll iclllnitrealmonls agalnsl dIseases caused by these microOf!janisms are presently availabkl . To develop such trealments. " appears essenlial to dissect the molecular IIlllchlln ism s that dll tcrminl.l the inleraction ootween Phytopflthora species and host plants. One of the most widely distributed Phytopi lihora specie. with nearty 1000 host species is Phylopllillora cinnamomi. This pathogan is ablo to sl!c fllle a glucanaso inhibitor prote in (GIP) H\at inhibit the actNlty 0/ endoglucanases (EGases). involved in plant delonse responses, including dunng the plant infection process of Castanea safiva Mill by P. clnnamomi. In Ihis work we report the sequencing and charaClarizalion of a class of glucanase inhibitor proteins secre ted by P. cinnamomi. The gip gene Irom P cinnamomi has a lotal length of 1301 bp comprising a 9dO bp ORF witch encodes a 313 aa protein. In order to understllnd Its lunctlon gene e~ore sslon was stUdied during growth in diflerent carbon sources (g lucose. cellulose and sawdust), by RT'QPCR and a lime course 01 GIP production was achieved Analysis of homologous e~pressi()I\ (in P. cinnamomf) and heteroklgous expression (in Picilia pasloris), was atso perlonnud. Wo also [(!port lunction gene expression if! vrro at differenl times ol ln leclion of C. salwa roots wiltl the lungus. These and other resu!!s will be presenled.

Heln. I. , el al.. The zlg ·zag·zig on oomywtc-planl mteraCllons. 2009, Moleculal PLanl Pa thology, 10(4): 547-562. Kamoun. S., A catalogue of the effector socrolome 01 ptant pathogen ic oomyceles. 2006 Annual Revlllw Phytop.alhologll;;a l, 44(10): 4t -60.

Acknowledgements: The Projects COM8ATtNTAlSP2.Pt l /02 Inlerreg li lA -Cross·Border Cooperation Spain-Ponugal. linanced by The European RegIonal Oevelopment Fund. and - Idenl~ication , ctoardclerizahOn and 1010 01 mOlocular factors associated with tho mechanISms 01 ''''action 01 Fagacelle specios by Phylophlhora cinnamomr (PTDCIAGR-AAI>N6762812006) FCT. supPOrled th,s work.

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P.14. Hongos filamentosos y levaduras

HL P46 MOLECULAR METHODS f OR IIlE NTIFICAI ION OF PATHOGENIC FACt ORS IN PHVTOPHrlfORA CINNA.\ 101.I/

Chounina A.1.l, Martins, F'., Vaz, M'" Dominguez, A .3 and Martins, I.M.' I , email: [email protected]! "n,tltulo poIitccnico de 8 raganr,;a, csoola superior agraria , campus de santa apol6nia, lCilTlQ' centro de Invesligar;Ao de montanha, campus do Santa Apol6nia. 1172. 5301.854 Braganlta, PortlJgal 'Oepartamento de Microbiologia ~ Genetlca, Universidad de Salamanca.Salam,mca, Spain

Th!,! cullu re 01 Ihe chcsll1ul tree Is extremely import;:ml in tim northern re y,on 01 Porlugal, (It;CUpymg a signific;ml proportion of useful ilgricultural oren. Ihe annual (Ivorago chestnu t product ion in Porlugal can reach 20 000 tons. naw plantation areilS have increaSlld if\ 11'11 lasl few dllcadlls. however Ihe ink disease CilUSOU by th ll oomycete Pllylophtllora r;innamomi has damago and killed many trllllS and up to now no concrele solutions have bean oUorod 10 control tho il lnoss. thll oornyceles form a phylogenelically distinct group 01 oukaryoti c micro-organisms that ineiudes some of the most notorious patlloaens 01 plants. among IIroso, member.; of the aenus Pilyfoplilliora COluse enormous economic 10s!;!ls on crop species as well as environmenta l damaga in notural acosysterns. P. cinnamomi is the most 'Nidely distributed Pliyfoplrlliora s~cie s, wilh naarly tO~D hosl Spi:cies fungicides raraly con trol them and the few anli-oomycete products aro OHOfl

overcome by resis tant p3lhogen varianlS. Ihere are no eradicallon melhods aVllllabt!;l to coml:la t those species. Oomyceles species can manipul<lte biochemical and phYSiological processes in their host plants through a divarse array of v,rulonce or avirulence molecules, known as effectors. in suscapt iblo plants, these elfectors promote infection by suppressing delense responses. ~nhancing suscepliblilly, Of inducing disease symptoms. Alterna tively, in resistant plants, ellectotS are recognized by the products of plant resistance genes, result ing in host cull death and eliectlVe defense responses known a~ the hypersensitive response (hI) We .... e idCfltiliOO and d .aracteri.zed some proteins involved in mechanisms 01 inlectl()t. by P. cinnamami: endo-l,3·betaillucanase (cornplele cd,), exo­glueanase (partial cds); glucanase inhibitOf protein (gip) (complele cds); necrosit;-lnducing phytophthora prolein 1 (nppl) (complelO CdS ), IHlnsglutaminase, under the projecls identification, characterization and role 0' molecular faclors assooaled wi lh the mechanisms of infection of fagaceae species by P. doni/momi, p1(l d agr-aarn/6762Srm06, fund ing by fct; combating by molecolar methods 10 ink-<lisease 01 chestnul and other regional CUIlUICS, Combalinla/sp2.pl 1102 . Inlerreg ilia, funding hy Fed"r, among olhers. Several l ec ~lIIo l ogies , surn reverse IransCliplase per, in VII'O (!xprossion lechnology. ar'tu bioin forrnatics toolS have been used to sludy the expression 01 sc tec tod genes from fungi during infection. In th is work we in tend to in tegra le Ihe necessary biolnformatics lools Ihat WSfe used in Ihis invesligalion. These tools include the usc of databases and associalud homolQgy programs a~ Fasla and Clustal, lind several programs for suquence analyS iS lind ( I e~ign of e~petlm e nt s such PCR.

HL P47 La o llgomclizacion de ells3 en la regu la cion de la sin les;s de qullln1l en S1Iceharomyces cerevisisae

SIIr:rislfm C Arcones, I., Ronooro, C. e-mail: csacris@usa\.es DeparUlmenlO de ' Aicrobiologia y Genctlca, IBFG (UOIvcrsidad du SalamancalCSIC).

Chs3 us la principat quilin sintasa de Saccharomyces cerovISl(le. Es una protelna con vatlos dominlos trans membrana que roqulele de una sene de proleinas acccsorias a 10 largo de la nIta de seaee,6n para su lIegada a la membrana plasmatica (MP) en una con formadOn acUva Mediante ensayos de do~ hihri(loS dsspu/is conT,rmados mediante Inmunoprecipi laci6n hemos dumostrado quu Chs3 forma oTig6rneros. La interacc l6n pro te i ~a su produce a Iraves del extrema N·terminol de 10 prot[Jim. y poracen ser imprescindibles los primeros 125 ami n o~'.Icidos de Iii misma. La forma truncada de 101 proleina en 105 primeros 125 aminoaeidos ( 126-Chs3) prusl.!l1ta una mayor retenci6n un el reticulo undeplasrn ico (RE), sugiriendo que la correcta ol i gome ri~aci6n de Cns3 es necus!lria para la salida cfi ~io nl e del mismo. La sobreexpresi6n de Chs7, 10 chaperona uspecilica de CIos3, alivia la re tencion obsltNada Itn et RE, permitiendo la Ilegada de la prot ltina 126·ChsJ a la MP. Una vet que 126-Chs3 Ilega a 10 MP es eopaz de promover la s;ntesis de quitlna hasta n,veles silveslres. Sill embargo, la proteina truncada se endoei la defi cien temente 10 que promueve su acumulaei6n IInormal en la MP que va acomparlada de su redistribuclon a 10 largo de la misma, reduclMdosa su acumulaci6n en 01 cuello . En su conjull to, estos resullados permltcn reeoncitiar la resi~ te ncia a ca lee fluor de la cepa 126·Chs3 con la mayor !:Icumulaci6n de osta prOle ina en la MP y la mayor canlidad de CSIII. Por L<1 nto, la 0Ii!i OfnBn~acI6n de Chs3 es nocesaria tan to para el corre<:to empa!juc tam,cnlo de 10 protcina en vesiCUlas de tipo COPIt que Ie permltan salir del RE, corne para garantilar su correcto reciclado endocitico un!! vez 1I0goda II Ie MP. Estos datos lelucrzon 10 irllpurtanciil del c.orrecto plegamlento protelco de las qui\in sintasas en la regul<lcion de la biosintesis de quillna en hongos, en este caso directamente ligado a la f..,nnacron de otigomefos proleicos.

HL P48 Idcnlificacion mOlecular de hvngos produeloros de miC:OloJeinas en c:ulliyos de maj~ Iransgimico y convenclonal on Espai\a

Arias, 11.1.1, Farinos_ G. P. l , Patino, B.2 e-mail: [email protected] es 1 Departamento de Biologia Medioambicntal, Centro de Investigaciones Biol6gicas, CStC. Rarni,o de Maeltu 9, 28040 Madli<!. 2 Departamento de Microbiolog ia lit. Facu ltad de CienclIIs BioIOglcas, Univelsidad Complutense de Madnu. Jose Antooio Novais 2, 28040 Madrid.

La contaminaoon de cllltivos de maiz por hongos proouctores de mlCOtox~.a s es un problema que afecla principalmenle a la salud pUblica, pel O taml:li(!n causa pl'l rdidas en la agriCllllura . en la illdustria de ltansformaet6n de sus productos y en la ganadmia. La identificacion de las espccios hingic.1S implicadas y su dislribuci6n geog r<llica y climfllica nos permite predecir el eslablecimillnlo de delerminadas especies y el riesgo potencial de con taminaci6n con toxinas de esle al irnento. Uno de los principalos g{meros hingicos loxigenos que alecta al m.1l ~ duranlo III etapa de placosBcha es Fusarium spp., predudor de lumonisinas y tricotecenos, entra Olras tox inas Desde 1998 en Espaiia se cul tlva comercialmellte un malz modificado gcnclicamenle que expresa la loxina CrylAb de Bacillus thu~ngiensis (malz St) . Estemail es resistente ados especies de lopid6pteros que son imporlantes plagas del cu ltivo: los taladros Sesamia nonagrioldes y Ostnnia nubilalis. EI dal'lo prOOucido por estos insactos es un factor quo puede predisponor a la contaminaci6n pm micotoxinllS. ya quO producen heridas que favorcccn Ia colonizaci6n por Fusarium. POt ella, uno de los posiblos beneficles indircctos du la adopciOn del fllai~ Bt podr;a ser la reduceoCn de las conCCfl tracioncs de micotoxinas, al rOOucirse el nivel de dal'lo producido por estas pl1l9as. EI objO tlVO de esle estudio es compasar las especoes de hongos productores de mlcotoxinas presentes en mazorcas procedentes de campos comerciales de maiz Bt y no Bt do distinlas zonas geogralicas ue Espana. Las mazorcas se rocogieron justo antes de la rccoleccl6n del maiz. Una VOl procesadas las muestl3s, la idenli/icacion ue los hongos se realizo mediante mclodos rnolect.llares, ulilizando ccba!!Ofes y protocolos espeei/icos de PCR dlsel'lados en nuestro laboratorio Se han anali~ado 16 especies de lIon9OS pertenecientcs a los g6neros Fusarium y Asperg illus, habiCndose dl!ll!dado ufliCflmente hasta el momento F verticililoides, F. prolileralum, F. subglutinans, F. gramlnearum, Asperg illus flavus y A. niger. con algunas ~,;rere n c,as de frecuencia de aporici6n dll cspecies en tre el mail transgcnic:o y el corlVencional.

Esta investigaci6n h.1 sido financiada por el MICINN a lravcs del proyecto AGL2009·08B113

HL P49 Alteraciones lenolipicas, Irans~ripcionalll$ y en rulas de , eflalizaeion del mutante de g licosilaeion mnrr9.o. de Candida albkans

{: iv,r.ns c .· Duriin, l.; L6pe~ , M.C; Dominguez, A. [email protected] Departamento de Microbiologia y GenehG>l , CIETUS, IBFGlCSIC, UniverslCfad de Sal<lmanca.

La N·glicosilaoon de pmteinas es una moollicaoon que sufren les protelnas durante su paso por 10 luta de secreciOn; muct\8S de elIas seran exportadas a 1.0 superficie celular. En levaduras, Ia lona m<ls Odema de til pered oolutal se enCUCfl lrll enriquecid .o en manoproteinas, las cualcs conshluycn del 30 al 40QIo del PIISO seco de la misma. Tcnlelldo en euenta quo III fl ared calular jucga un papel muy irnporlanle en procesos como la plasticidad morfel6gica y la adhes,60 y Vlfulencia en Candido albir:;ans, al Iratorse (lei primer punto de conlaclo con el l,uesped, el estudio de las alleraciones en mullllltll~ afucta,jos en la N-glicosllad6n de prole inas con lribuira a proiundizar en los mecanismos (te d,rerenc ia06n morfolOgic!l y virulcncia de este hongo p<1t6ge [1 0 oportuni sta de hu manes EI mulante Camnng carece de una ·manosi ltrall sferasa que catal iza Ia adlclon de manosas en enlaces J- 1.6 en el Complejo de Golg i, una ve~ af;auida I" primera man a l nucleo oligosacaridico de las gliceprOloinfls un este organulo. Esto mutante es inca pal de lIevar II cabo 111 transiClon morfolOgica, presento altefaciol1es en la superficie de la pared celular y una capac;dad ue viru lencia alenuada. rcspecto a la cepa parenlal, en un modelo murino de infeccoOn sistemica. Oe los anaiisis de los perfiles globalcs de trallscripcl6n dcl mutante, respecto a Ia cepa pllrcntal. crl?ciendo como levadura a 2S"C, cabo dltstacar la sob ree ~presi6n de genes relacionados con pnrOO ce lular, quo podria expticalse como una respuesta adaptahva compensatoria y la subuXIJreslOn de genes de biogeneSIs y enS.lmblale de ribosomas y de gltnes lelacionados con las mitoconrJrias. En condICiones de inducci6n de la tolarnentaci6n a J7"C, y entre los genes menos expresados en el muranle, lamblcn se cncoentra muy rcprcsentada esla ultima Cllt(!9oria, mlcntras que muchos de los genes de la ruta de ta glicohsis se encuentl1ln sobree~presados.

Las categorias <kl secreoon, IranSpOrje vesicular asi como de elecimlcnto filarnantoso, estan significallvameflte rcprescntadas por genes menos cxpresados en fll metante, 10 que pedria erqlllcar su incapacidad para lormar hi/as vcrdaderas. Hcma$. observado_ mediante expellmcnlos de Western bIQlllng", que duranle el cfCcimiento a 28"C CStO mutante prescnta aclivadas las MAP kinasas Cekl (de la ruta rle seri"l,zaoon de creomiento Iilamentoso) y Mkc 1 (de inlegridad celular) . Nuestros resultados apoyan l<I Idea de {jUII defectos en la e~tensi6n de las cadenas oligosaCOlr ldicas e ~ternas do las glicoprote inas, desoncadunan respuustas celulares a trilv ill; de es tas n,tas do seilahzaci6n

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