EMPLA AG, spolecnost s rucenim omezenym EKOLOGICKE LABORATORE EMPLA

Zkusebni laborator C. 1110 akreditovaml podle CSN EN ISOIIEC 17025: 2005

Analyticka laborator - ekotoxikologicka laborator

Za Skodovkou 305 , 50311 Hradee Knllove, tel. +420495218875, fax: +420 495 217 499

Protokol smi bYt bez pisemneho souhlasll finny EMPLA rcprodukov<in pouze jako celek

PROTOKOL 0 ZKOUSCE c.T 49/20 11 (OEe D 30t-D)

Zadatel: SLOCHEM, spol. s r.o.,

FarskY Mlyn 2, P.O.BOX 25, 917 01 Trnava

Zkouseny vzorek: ADIL-SA (HA)

Evidencni Cislo vzorku: EMPLA-2508

Cislo objednavky: 255/1 1

Zkousku provedl: Ivona Cefelinova

Datum vystaveni protokolu: 12.4.2011

Protokol vypracovaJ: lng. Katefina Benediktova

Zodpovedny pracovnik: lng. Stanislav Eminger, CSc., vedouci ekologickych laboratofl

Strana: 1 Celkem stran: 7

Provedeni: Testovani bylo provedeno podle nonny OECD, Paris 1981, Test Guid line 301 D pro testovaru chemickYch hitek s nazvem "Biologicka rozlozitelnost -Zkouska v uzavrenych lahvickach." AkreditoVan)T postup c. 308, SOP ET 8.

Podstata zkousky: Roztok zkousene latky jako jediny zdroj organickeho uhliku a energie v mineralnim mediu byl naockovan relativne malym mnozstvim smisene kulhuy mikroorganismu. Roztokem byly zcela naplneny lahvicky, ktere se uzavrely a inkubovaly ve true ph konstantni teplote. Biologicky rozldad byl sledovan analyzou rozpusteneho kysliku v prubehu 28 dnu. Ivlnozstvi spouebovaneho kysliku po korekci na slepy pokus byl vyjamen jako % CHSKcr (chemickou spouebou kysliku), popnpade jako % TSK (teoreticke spoueby kysliku).

Metoda analyzy rozpusteneho kysliku: Membranovou kyslikovou elekirodou.

Zkusebni podminky: Inkubace BSK lahvicek probihala v tennostatu ve true ph teplote 20°C - 25 °C.

Inokul um: Zdrojem in kula byl ftllrovany odlok z mestske COY v Hradci Knilove, 24hodin intenzivne provzdusnovany. Vysledmi koncentrace inoh-Illa v reakcni smesi byla 2,0 ml/l.

T 4912011 Strana: 2

Provedenizkoosky:

1. Pocatecni CHSKCr testovane latky: 6,5 mg/I.

2. Koncentrace zasobnibo roztoku testovane latky: 1000 mg/l.

3. CHSKcr testovane 18tky: 0,746 mg/mg leitky.

4. Mnozstvi testovane latky V testu: 8,7 mlIl zeisobniho roztoku.

5. Nazev pouzite referencni latky: Benzoan sodnY.

6. Pocatecni CHSKCr referencni latky: 6,5 mg/I.

7. Koncentrace zasobniho roztoku referencni hitky: 1000 mg/i.

8. CHSKCr referencni latky: 1,61 mg/mg hitky.

9. Mnozstvi referencni latky v testu: 4,1 ml/l zasobniho roztoku.

Vy jadrovani vysJedkU:

Vsechny namerene hodnoty byly shmuty do tabulek VyPocet hodnot biologicke rozlozitelnosti by! proveden tak, ze se nejprve vypoCitala spotreba kysliku v ka.zdem casovem intervalu odectenim koncentrace kysliku slepeho pokusu (priunema hodnota ze dvou tanoveni) od spotreby kysliku zplisobene zkousenou slouceninou (pro kazdou lahvicku). Takto ziskany vYsledek byl vydelen koncentraci zkousene Iatky (mg zkousene latky v lahvi) a tim se ziskala specificka BSK v mg kysliku na mg lath.y. Procentni biologicka rozlozitelnost byla vypoCitana jako podiJ specificke BSK a CHSKcr (v mg kysliku na mg zkousene latky).

Nakonec byla vypocitana p:rU.mema hodnota biologicke rozlozitelnosti v procentech ze soubemyoh zkousek. Stejny postup vYpoctu byl pouZit i pro srovnavaci (referencni) littku.

Na zaver byly sestaveny prehledne grafy, kde byly vyneseny priimerne hodnoty procentickeho biologickeho rozkladu v zavislosti na case (kfivka biologickeho rozkladu). z teto kfivky lze odecist parametIy popisujici biologickY rozklad, zvhlste lag fcizi, dobu rozkladu a maximaIni stupeii rozkladu.

T 4912011 Strana: 3

1. Vysledky zkousky - ADIL-SA (HA)

Stanoveni koncentrace rozpusteneho kysliku

Druh stanoveni

Testovana polozka

s inokulem

S1epe stanoveni s inoku lem

Pocet

nasazeni

. 2.b]§

Prfuner

. 2.b]§

Prfuner

Koncentrace rozpusteneho kysliku V mg!1 pO X dnech

I 0 dnil I 7 dnil I 14 dnu I 2 1 dnu I 28 dnu I

9.07 3.90 3.57 3.35 3.16

9.07 4.08 3.47 3.36 3. 13

9.07 3.99 3.52 3.36 3.15

9.00 8.51 8.4! 8.39 8.19 9.02 8.54 8.40 8.30 8.21

9.01 8.53 8.41 8.35 8.20

Biologicka rozlozitelnost:

JednotIiva nasazeni VypoCtena biologicka rozlozite1nost po x dnech ADIL-SA (RA) odmi j 7 dnil I 14 dnu J 21 dnii I 28 dnil

1.nasazeni 0% 72.1% I 75.3% I 77.8% I 78.5%

2.nasazeni 0% 69.3% I 76.8% I 77.6% I 78.9%

Prumer techto nasazeni 0% 70.7% I 76.1% I 77.7% I 78.7%

Biologicka rozlozitelnost ADIL-SA (HA)

100

C 90

-

-

78.70%77.70%76.10%..... U) 80 70.70% 0 70c 4i ;t: 60 >N 0 50 N

402 'ro 30 ~

.!:! 20OJ (5 10 (D

0

0 7 dnu 14 dnu 21 dnu 28 dnu

Biologicka rozlozitelnost po X dnech

T 49/2011 Strana: 4

Iednotliva nasazeni Benzoan sodny

Vypoctena biologicka rozlozitelnost po x dnech o dnu I 7 dnli I 14 dnii I 21 dnu I 28 dnli

l. nasazeni 0°1., 0 I ns;;o I 79. 5% 81.5% 87.7%)

2.nasazeru

Prlllner teehto nasazeni 70.3% 78.8% 81.3% 87.5%

2. Vysledky zkousky - Referencni latka

Stanoveni koncentrace rozpusteneho kysliku

Koncentrace rozpusteneho kysliku v mg/I po x dnech

I 0 dnli I 7 dnli I 14 dnli I 21 dnll I 28 dnu I

9.03 3.83 3. 26 3.07 2.52 9.03 4 . 12 3.3 5 3.09 2 .55

9.03 3.98 3.31 3.08 2.54

Testovana polozka

s inokulem

. 2.

Priimer ~ 9. 00 8.51 8.4 1 8.39 8. 19 9. 02 8.54 8.40 8.30 8.21

9.01 8.53 8.41 8.35 8.20

S\epe stanoveni s inokulem

. 2.

Priuner ~ Biologicka rozlozitelnost:

.-------------------~

Biologicka rozlozitelnost Benzoan sodny

100

j j ~ j

87. 50%- 90 - 81.30% 78.80% C 80 ­ 70.30% III -0

c 70 ]! 60 ~ 0 N 0 : ....

-!II ~ 30 .2 C) 20 '0 10 iii 0

0 7 dnu 14 dnu 21 dnu 28 dnu

Biologicka rozlozitelnost p O X dnech

T 49/2011 Strana: 5

Druh stanoveni , Poeet

nasa zClli

Testovany vzorek: ADIL-SA (HA)

Biologiclci odbouratelnost

staooveoa die OECD 301-D = 78,70/0 za 28 doo.

Vybodnoceni: U testovaneho vzorku doslo po 28 d.llech k 78,7% bioJogicke

rozlozitelnosti.

Referentni hitka: Benzoan sodny

Biologicka odbouratelnost

stanovena die OECD 301-D = 87,5% za 28 do u.

Vyhodnoceni: Referenclli IMka se dobIe rozkladit.. Po 28 dnech doslo celkove k 87,5%

biologicke rozlozitelnosti . .liz po 14 dnech testovimi bylo dosaZeno 78,8 % biologicke

rozlozilelnosli Byla tim splnena kriteria pro odbomatelnost referellcm latky.

T 49/2011 Strana: 6

Platnost zkousky :

1. Ubytek koncentrace kysliku pfi slepem stanoveni nesmi po 28 dnech presahnout 1,5 mg/1. Pn tomto testu bylo dosaieno maximalniho ubytku kysliku pn slepem stanoveni po 28 dnech 0,81 mg/I.

2. Zbytkova koncentrace rozpusteneho kysliku v lahvickach nesmi byt nikdy nizsi nez 0,5 mg/I. Pri tomto testu bylo dosaieno nejnizsi zbytkove koncentrace rozpusteneho kysHku v lahvickach 2,52 mg/I, a to u referencni latky.

3. Zkouska je platna, jestlize na konci zkousky jsou mezne rozdily v hodnobich u dvou soubeznych stanoveni mensi nez 20 % . V tomto testu na konci zkousky nebyly rnezne rozdily v hodnotach u dvou soubemych stanoveni vyssi nez 20 %.

4. BiologickY rozklad referencni slouceniny musi dosahnout 60 % po 14 dnech inkubace. Biologick}r rozklad referencni slouceniny v tomto testu dosahl 78,8 % po 14 dnech inkubace.

Zkusebna prohlasuje, ze v)rsledky zkousek se t)rkaji jen zkousenych predmem.

""'­

V Hradci K ralove dne: 12.4.2011 lng. Stanisl Eminger, e sc. vedoucl ekologickych laboratofl

T 491201 1 Strana: 7