Download pdf - 11850 DSB 分子間相互作用キャンペーンリーフレットp10%OFF キャンペーン 2013年4月30日（火）～2013年6月28日（金） Yeast two-hybridを利用した分子間相互作用解析を専門としている

10%OFFキャンペーン

2013年 4月30日（火）～ 2013年 6月２8日（金）

Yeast two-hybrid を利用した分子間相互作用解析を専門としているデュアルシステムズ社のキットを 10%OFF でご提供いたします。

期間

cDNAライブラリが！(DUALmembrane・DUALhunter 用 200μg）

スターターキットが！（ベイトベクター、プレイベクター、コントロール、cDNAライブラリ入り）

￥477,000　⇒ ￥429,300

￥400,000　⇒ ￥360,000

VP16

Bait Prey

Split-Ub

LexA

VP16LexA

BaitLexA

Gal4Prey

膜タンパク質解析なら・・・DUALmembrane システム

核タンパク質解析なら・・・DUALhunter システム

細胞質内のタンパク質解析なら・・・DUALhybrid システム

cDNAライブラリ構築なら・・・EasyClone cDNAライブラリ構築キット

スクリーニングにはスターターキットをおすすめします！ペアワイズキットもあります。

スクリーニングにはスターターキットをおすすめします！

DUALhybrid キットが！

あらかじめ発現量の多いハウスキーピング遺伝子を取り除いて false positive に隠れてしまう有意な相互作用を見逃さない！

VP16Split-Ub

LexA

VP16LexA

Ost4p

PreyBait

1306

キャ

ンペーンコー

ド

￥158,000　⇒ ￥142,200￥376,000　⇒ ￥338,400

ノーマライズ済み cDNAライブラリ構築キットが！

ｐ2

ｐ5

ｐ2

ｐ6

ｃDNAライブラリが！

￥253,000　⇒ ￥227,700

膜タンパク質の相互作用解析に最適！DUALmembrane システム

核タンパク質の相互作用解析に最適！DUALhunter システム

原理ベイト（Bait）

Cub

VP16LexA

Bait

プレイ（Prey）

Prey

NubG

ターゲットとなる膜タンパク質にユビキチンの C 末端側半分（ C u b ）および転写因子LexA-VP16 を融合させたものをベイトとして発現させます。転写因子を膜タンパク質に融合させているので、膜上に固定され、核までは到達しません。従って、酵母遺伝子にインテグレートされたレポーター遺伝子は活性化されません。

相手となるタンパク質（膜タンパク質もしくは細胞質タンパク質）にI3Gポイントミューテーションを持つユビキチンの N 末端側半分（NubG）を融合させたものをプレイとして発現させます。

ベイトとプレイが相互作用すると、CubとNubGがsplit-ubiquitinを形成します。酵母内のユビキチン特異的プロテアーゼがこのSplit-ubiquitinを認識して、ベイトから転写因子がタンパク分解により遊離します。遊離した転写因子が核内に移行し、酵母ゲノムのレポーター遺伝子を活性化させます。膜上で起こるタンパク質相互作用はこうしてレポーター遺伝子の活性へ変換されます。一般的に用いられるレポーター遺伝子は最少培地でセレクションされ、色により識別されるLacZのような遺伝子です。

相互作用

VP16

Bait Prey

Split-Ub

LexA

VP16LexA


CubCub

VP16LexA

Bait

Ost4p

プレイ（Prey）

NubG

Prey

ターゲットタンパク質のN末端にsmall membrane anchor（Ost4p）を融合させ、C末端にユビキチンのC末端側半分（Cub）および転写因子LexA-VP16を融合させたものをベイトとして発現させます。ベイトは酵母膜に挿入させます。転写因子を膜タンパク質に融合させているので、膜上に固定され、核までは到達しません。従って、酵母遺伝子にインテグレートされたレポーター遺伝子は活性化されません。

相手となるタンパク質にI3Gポイントミューテーションを持つユビキチンのN末端側半分（NubG）を融合させたものをプレイとして発現させます。

相互作用

VP16Split-Ub

LexA

VP16LexA

Ost4p

PreyBait

スターターキット構成内容● pBT3-N bait vector または pBT3-SUC または pBT3STE＊1 5 μg● pPR3-N prey vector 5 μg● pOST1-NubI control prey vector 5 μg● pTSU2-APP control bait vector 5 μg● pNubG-Fe65 control prey vector 5 μg● NMY51 yeast reporter strain stab culture● HTX beta-galactosidase assay kit 1 kit● DS Yeast transformation kit 1 kit● cDNA library of your choice＊2 60 μg( スクリーニング２回分）

ベイトとプレイが相互作用すると、CubとNubGがsplit-ubiquitinを形成します。酵母内のユビキチン特異的プロテアーゼがこのSplit-ubiquitinを認識して、ベイトから転写因子がタンパク分解により遊離します。遊離した転写因子が核内に移行し、酵母ゲノムのレポーター遺伝子を活性化させます。膜上で起こるタンパク質相互作用はこうしてレポーター遺伝子の活性へ変換されます。一般的に用いられるレポーター遺伝子は最少培地でセレクションされ、色により識別されるLacZのような遺伝子です。

スターターキット構成内容● pDHB1 bait vector 5 μg● pPR3-N prey vector 5 μg● pOST1-NubI control prey vector 5 μg● pDSL-p53 control prey vector 5 μg● pDHB1-Large T control bait vector 5 μg● NMY51 yeast reporter strain stab culture● HTX beta-galactosidase assay kit 1 kit● DS Yeast transformation kit 1 kit● cDNA library of your choice＊3 60 μg(スクリーニング２回分)

2

＊1 ベイトベクターはターゲットタンパク質により適したベクターが異なります。ｐ3 の選択ガイドをご参照ください。＊2 cDNA ライブラリは p3 の商品リストよりお選びください。

＊3 cDNA ライブラリは p3 の商品リストよりお選びください。

DUALmembrane システムとDUALhunter システムは、スクリーニングに必要な試薬と cDNAライブラリがそろったスターターキットがおすすめです。これから酵母を用いた分子間相互作用研究を始めるお客様に便利にお使いいただけます。

選択ガイド　　DUALmembraneシステムはベイトベクター(ベイトタンパク質)ごとに商品が異なります。

該当商品なし

DUALmembranestarterキットN品番 P012XXベイトベクター: pBT3-N

DUALmembranestarterキットSTE品番 P014XXベイトベクター : pBT3-STE

pBT3-N

DUALmembranestarterキットSUC品番 P013XXベイトベクター : pBT3-SUC

DUALmembranestarterキットSTE品番 P014XXベイトベクター : pBT3-STE

いいえ

N-out & C-in ? いいえ

はい

はい

N-in & C-in ? いいえ

はい

N-in & C-out ? いいえ

はい

N-out & C-out ?

はい

N-out : N 末端の位置…細胞外N-in : N 末端の位置…細胞内C-out : C 末端の位置…細胞外C-in : C 末端の位置…細胞内

N 末端に切断可能なシグナル配列がある

リストへｃ

リストへaリストへa ｃ

リストへｂ

ベイトタンパク質

商品リスト希望販売価格　￥477,000　⇒　キャンペーン中の参考価格　￥429,300

DUALmembraneスタータキット cDNAライブラリ DUALhunterスタータキット pBT3-N pBT3-SUC pBT3-STE P01213 P01313 P01413 Human adult brain cDNA library (NubG-x) P01613 P01218 P01318 P01418 Human adult brain cDNA library (x-NubG) P01618 P01232 P01332 P01432 Normalized Human fetal brain cDNA library (NubG-x) P01632 P01210 P01310 P01410 Human adult colon cDNA library (NubG-x) P01610 P01217 P01317 P01417 Human adult kidney cDNA library (NubG-x) P01617 P01205 P01305 P01405 Human adult kidney cDNA library (x-NubG) P01605 P01212 P01312 P01412 Human adult liver cDNA library (NubG-x) P01612 P01221 P01321 P01421 Human adult lung cDNA library (NubG-x) P01621 P01230 P01330 P01430 Normalized Human spleen cDNA library (NubG-x) P01630 P01209 P01309 P01409 Human embryonal brain cDNA library (NubG-x) P01609 P01208 P01308 P01408 HeLa cell line cDNA library (NubG-x) P01608 P01202 P01302 P01402 Jurkat T cDNA library (NubG-x) P01602 P01219 P01319 P01419 LNCaP cells cDNA library (NubG-x) P01619 P01223 P01323 P01423 Mammary epithelial cells cDNA library (NubG-x) P01623 P01201 P01301 P01401 Mouse adult brain cDNA library (NubG-x) P01601 P01231 P01331 P01431 Normalized Mouse brain cDNA library (NubG-x) P01631 P01204 P01304 P01404 Mouse adult heart cDNA library (NubG-x) P01604 P01203 P01303 P01403 Mouse adult heart cDNA library (x-NubG) P01603 P01222 P01322 P01422 Mouse adult kidney cDNA library (NubG-x) P01622 P01216 P01316 P01416 Mouse adult spleen cDNA library (x-NubG) P01616 P01225 P01325 P01425 Mouse whole embryo, 11 days cDNA library (NubG-x) P01625 P01229 P01329 P01429 Normalized Mouse embryo cDNA library (x-NubG) P01629 P01224 P01324 P01424 Rat neonatal cardiomyocyte cDNA library (NubG-x) P01624 P01207 P01307 P01407 Arabidopsis thaliana cDNA library (NubG-x) P01607 P01211 P01311 P01411 C. elegans whole adult cDNA library (NubG-x) P01611 P01214 P01314 P01414 C. elegans whole eggs DNA library (NubG-x) P01614 P01220 P01320 P01420 D. melanogaster adult cDNA library (NubG-x) P01620 P01215 P01315 P01415 D. melanogaster embryo cDNA library (NubG-x) P01615 P01227 P01327 P01427 Medicago nodules cDNA library (NubG-x) P01627 P01226 P01326 P01426 Medicago nodules cDNA library (x-NubG) P01626 P01228 P01328 P01428 Saccharomyces cerevisiae cDNA library (NubG-x) P01628 P01299 P01399 P01499 cDNAライブラリなし P01699

a ｃｂ

＊4

＊4

＊4

＊4

＊5

＊4 ノーマライズ済み cDNA の詳細は、p6 をご参照ください。＊5 cDNA ライブラリが含まれないキットの希望販売価格￥381,000、キャンペーン中の参考価格￥342,900 ※ NubG-X ライブラリは NubG -プレイ融合タンパク質として発現し、X-NubG ライブラリはプレイ-NubG 融合タンパク質として発現します。

相互作用タンパク質がタイプ I 内在性膜タンパク質であることが既にわかっている場合を除き、まずは、NubG-X ライブラリから始めることをおすすめします。※ 商品リストにご希望の cDNA ライブラリがない場合は、p4 のペアワイズキットと p6 の cDNA 構築キットをご利用ください。

DUALmembrane、DUALhunter シリーズは、非営利目的の研究にご使用のお客様のみご購入いただけます。企業のお客様でご購入希望の方におかれましては、ライセンス契約の必要がございます。詳細は、コスモ・バイオ（株）までお問い合わせください。

Dualsystems Biotech AG　　メーカー略号：DSB

キャンペーン期間：　2013年 4月30日（火）～ 2013年 6月２8日（金） 3

＊品番内の X は cDNA ライブラリにより異なります。

　商品リストをご参照ください。

各種ベイトベクターとプレイベクターがそろって、全ての膜タンパク質クラスに使用可能です。cDNAライブラリと組み合わせてスクリーニングにもお使いいただけます。

構成内容● pBT3-N bait vector 5 μg● pBT3-C bait vector 5 μg● pBT3-SUC bait vector 5 μg● pBT3-STE bait vector 5 μg● pPR3-N prey vector 5 μg

● pPR3-C prey vector 5 μg● pPR3-SUC prey vector 5 μg● pPR3-STE prey vector 5 μg● pOST1-NubI control prey vector 5 μg● pTSU2-APP control bait vector 5 μg

● pNubG-Fe65 control prey vector 5 μg● NMY51 yeast reporter strain stab culture● DS Yeast transformation kit 1 kit● HTX beta-galactosidase assay kit 1 kit※ cDNA ライブラリは含まれておりません

品名品番包装希望販売価格キャンペーン中の参考価格

DUALmembrane pairwise interaction kit P01501 1 kit ￥477,000 ￥429,300

膜タンパク質のペアワイズ相互作用解析に最適！DUALmembrane pairwise interaction キット

2分子間の相互作用解析に！ベイトベクター＆プレイベクター

関連商品： DUALmembrane・ DUALhunter システム用cDNAライブラリ

キャンペーン期間：　2013年 4月30日（火）～ 2013年 6月２8日（金）

＊6 コントロールプラスミドセットの希望販売価格￥101,000、キャンペーン中の参考価格￥90,900※ 既にスターターキットをお持ちのお客様には、ベイトベクターおよびプレイベクターがセットされた補完キットもあります。

各ベクターとコントロールベクターの単品販売があります。

60μg … スクリーニング 2 回分、200μg … スクリーニング 7 回分

ノーマライズ済み cDNA の詳細は、p6 をご参照ください。NubG-x ライブラリは NubG- プレイ融合タンパク質として発現し、x-NubG ライブラリはプレイ -NubG 融合タンパク質して発現します。はじめは NubG-x ライブラリのご使用をおすすめします。

品番品名 P03230 pBT3-N ベイトベクター Type II bait vector (N-terminal fusion) P03231 pBT3-C ベイトベクター Type I bait vector (C-terminal fusion) P03232 pBT3-SUC ベイトベクター Type I bait vector (C-terminal fusion) P03233 pBT3-STE ベイトベクター Type I bait vector (C-terminal fusion) P03234 pPR3-N プレイベクター Library vector (NubG-cDNA orientation) P03235 pPR3-C プレイベクター Library vector (cDNA-NubG orientation) P03236 pPR3-SUC プレイベクター Library vector (cDNA-NubG orientation) P03237 pPR3-STE プレイベクター Library vector (cDNA-NubG orientation) P03501 pDHB1 ベイトベクター P03234 pPR3-N プレイベクター P03243 DUALmembrane コントロールプラスミドセット (3 controls) pOst1-NubIControl prey、TSU2-APPControl bait、pNubG-Fe65Control prey P03505 DUALhunter コントロールプラスミドセット (3 controls) pOST1-NubI、pTSU2-APP、pNubG-Fe65

＊6＊6

希望販売価格　￥88,000　⇒　キャンペーン中の参考価格　￥79,200

品名品番

60 μg 200 μg Human adult brain cDNA library (NubG-x) P12221 P02221 Human adult brain cDNA library (x-NubG) P12227 P02227 Human adult colon cDNA library (NubG-x) P12215 P02215 Human adult kidney cDNA library (NubG-x) P12226 P02226 Human adult kidney cDNA library (x-NubG) P12208 P02208 Human adult liver cDNA library (NubG-x) P12220 P02220 Human adult lung cDNA library (NubG-x) P12230 P02230 Human embryonal brain cDNA library (NubG-x) P12213 P02213 HeLa cell line cDNA library (NubG-x) P12212 P02212 Jurkat T cDNA library (NubG-x) P12205 P02205 LNCaP cells cDNA library (NubG-x) P12228 P02228 Mammary epithelial cells cDNA library (NubG-x) P12232 P02232 Mouse adult brain cDNA library (NubG-x) P12201 P02201 Mouse adult heart cDNA library (NubG-x) P12207 P02207

品名品番

60 μg 200 μg Normalized human fetal brain cDNA library (NubG-x) P12304 P02304 Normalized human spleen cDNA library (NubG-x) P12302 P02302 Normalized mouse brain cDNA library (NubG-x) P12303 P02303 Normalized mouse embryo cDNA library (x-NubG) P12301 P02301

品名品番

60 μg 200 μg Mouse adult heart cDNA library (x-NubG) P12206 P02206 Mouse adult kidney cDNA library (NubG-x) P12231 P02231 Mouse adult spleen cDNA library (x-NubG) P12224 P02224 Mouse whole embryo, 11 days cDNA library (NubG-x) P12234 P02234 Rat neonatal cardiomyocyte cDNA library (NubG-x) P12233 P02233 Medicago nodules cDNA library (NubG-x) P12236 P02236 Medicago nodules cDNA library (x-NubG) P12235 P02235 Arabidopsis cDNA library (NubG-x) P12210 P02210 C. elegans whole adult cDNA library (NubG-x) P12218 P02218 C. elegans whole eggs DNA library (NubG-x) P12222 P02222 D. melanogaster adult cDNA library (NubG-x) P12229 P02229 D. melanogaster embryo cDNA library (NubG-x) P12223 P02223 Saccharomyces cerevisiae cDNA library (NubG-x) P12237 P02237

ノーマライズ済みcDNAライブラリ





4

包装希望販売価格キャンペーン中の参考価格　 60μg ￥208,000 ⇒ ￥187,200 200μg ￥400,000 ⇒ ￥360,000


従来の yeast two-hybrid システム、細胞質内のタンパク質相互作用解析に最適！DUALhybrid システム

ベイトベクター＆プレイベクター


プレイ（Prey）

OFF

BaitLexA

OFF

Gal4Prey

ターゲットタンパク質をDNA結合タンパク質LexAドメインに融合させたものをベイトとして発現させます。LexAドメインはベイトをレポーター遺伝子の上流の特定のDNA配列に局在させます。

相手となるタンパク質を転写因子Gal4の活性化ドメインに融合させたものをプレイとして発現させます。

相互作用

BaitLexA

Gal4Prey

ベイトとプレイの相互作用により、DNA結合ドメインLexAと転写因子Gal4の活性化ドメインとのハイブリッド（two-hybrid）が形成されます。このハイブリッド転写因子がレポーター遺伝子を活性化させます。一般的に用いられるレポーター遺伝子は最少培地でセレクションされ、色により識別されるLacZのような遺伝子です。

構成内容

関連商品： DUALhybrid システム用

cDNAライブラリ60μg … スクリーニング 2 回分、200μg … スクリーニング 7 回分

品名品番

60 μg 200 μg Human adult colon cDNA library (pGAD-DS) P12102 P02102 Human hepatocellular cell cDNA library (pGAD-DS) P12106 P02106 HeLa cell line cDNA library (pGAD-DS) P12103 P02103 LNCaP cDNA library (pGAD-DS) P12104 P02104 Mouse embryo 11d cDNA library (pGAD-DS) P12101 P02101 Mouse adult heart cDNA library (pGAD-DS) P12107 P02107 Arabidopsis thaliana cDNA library (pGAD-DS) P12109 P02109 Caenorhabditis elegans whole adult cDNA library (pGAD-DS) P12105 P02105 Saccharomyces cerevisiae cDNA library (pGAD-DS) P12108 P02108

品名品番

60 μg 200 μg Human Fetal Brain cDNA library P12402 P02402 Mouse Brain cDNA library P12401 P02401

キャンペーン期間：　2013年 4月30日（火）～ 2013年 6月２8日（金）





5



ノーマライズ済みcDNAライブラリ

ノーマライズ済み cDNA の詳細は、p6 をご参照ください。

cDNA ライブラリと組み合わせてスクリーニングにもお使いいただけます。

※ cDNA ライブラリは含まれません。

各ベクターとコントロールベクターの単品販売があります。


pGAD-HA prey vector P03103 5μg ￥64,000 ￥57,600pY3H bridge vector P03104 5μg ￥64,000 ￥57,600pLexA-N bait vector P03105 5μg ￥64,000 ￥57,600pLexA-C bait vector P03106 5μg ￥64,000 ￥57,600control plasmid set P03107 3 X 5μg ￥64,000 ￥57,600

● pLexA-N bait vector 5 μg● pLexA-C bait vector 5 μg● pGAD-HA prey vector 5 μg● pY3H bridge vector 5 μg● pLexA-p53 control bait vector 5 μg● pLexA-laminC control bait vector 5 μg● pACT-large T control prey vector 5 μg● NMY51 yeast reporter strain stab culture


DUALhybrid kit P01004 1 kit ￥158,000 ￥142,200

10%OFFキャンペーン

cDNAライブラリを構築する簡便キット、ノーマライズステップ入り！EasyClone ノーマライズ済みcDNAライブラリ構築キット

■

スクリーニング結果の比較

ノーマライズしていない

ノーマライズしている

Bait ヒト p53 ヒト p53

ライブラリヒト結腸ヒトノーマライズ済ユニバーサル

スクリーン 3 1スクリーンしたクローン数 43 million 3.5 million相互作用因子数 436 43高い相互作用 0 12既知の相互作用因子 1 3

アプリケーション例

標準的なヒト結腸ライブラリ■ ノーマライズ済みヒトユニバーサルライブラリ

ノーマライズ済み cDNAライブラリを用いたyeast two-hybrid スクリーニング

N 末端をトランケートしたヒト p53 をベイトとして酵母 two-hybridスクリーニングを行った。使用したのは以下の 2 種類のライブラリ

A　First strand cDNA 合成

5' mRNA AAAA 3'3'-end adapter

AAAATTTT

AAAATTTTCCCC

Easyclone RT

TTTT

B I PlugOligo incorporation PlugOligo

IP solutionGGGG T

p

GGGGCCCC

Tp

AAAATTTT

C 　PCRによるds cDNAの調製

GGGGCCCC

PCR Primer M1

Ampliflied cDNA

AAAATTTT

B　PlugOligoの取り込み PlugOligo

IP solutionGGGG T

p

GGGGCCCC

Tp

AAAATTTT

C I ds cDNA preparation by PCR

GGGGCCCC

PCR Primer M1

Ampliflied cDNA

AAAATTTT


EasyClone normalized cDNA library construction package P01011 5-10 反応分￥376,000 ￥338,400Easy Clone cDNA library costruction kit P01010 20 反応分￥254,000 ￥228,600EasyClone PCR kit P01012 100 反応分￥78,000 　￥70,200


キャンペーン期間：　2013年 4月30（火）～ 2013年 6月２8日（金）6

実験の流れ

特長　平均インサートサイズ：1.4 kb 以上　High Conplexities (1×106 ～ 5×107 independent clones)　独自の5’アダプターアニーリング方法により全長cDNAが得られます。

■

■

■

ノーマライズとは？あらかじめ調製した RNA サンプルから発現量の多い RNA（主にハウスキーピング遺伝子）を取り除くステップです。false positive となる相互作用因子を除くことで、本来の有意な相互作用を見逃しません。ノーマライズステップに必要な試薬が含まれない cDNA ライブラリ構築キットの取り扱いもあります（品番 P01010）。

　● 使用範囲･･･記載の商品は全て、「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。

　● 希望販売価格･･･「希望販売価格」及び「キャンペーン中の参考価格」は参考であり、販売店様からの実際の販売価格ではございません。実際の販売価格は、ご注文の際に販売店様にてご確認ください。

(11850)