Coleta de amostras de leite bovino
Med. Vet. MSc. Denize da Rosa FragaMara Iolanda Batistella Rubin
04/07/2011
Normativa 51 do Ministério da agriculturaEstratégias para melhoria da qualidade do leite
reduzir o número de células/mL até 2011
• Regulamenta a técnica de produção, identidade e qualidade do leite Tipo A
• Regulamenta a técnica de produção, identidade e qualidade do leite Tipo B
• Regulamenta a técnica de produção, identidade e qualidade do leite Tipo C
• Regulamenta a técnica de produção, identidade e qualidade do leite cru refrigerado
• Regulamenta a técnica de produção, identidade e qualidade do leite pasteurizado
Normativa 51 do Ministério da agriculturaEstratégias para melhoria da qualidade do leite
reduzir o número de células/mL até 2011
Teores mínimos de gordura no leite: 3,0%Teor mínimo de proteína: 2,9%
Estrato Seco Desengordurado: 8,4%
Região Sul:CCS até julho de 2011 - 750 mil
A partir de julho 2011janeiro de 2012
400 mil
Parâmetros físicos
• Cor (depende constituição e fase da lactação)
• Consistência (fluida)
– Aquoso, mucoso, caseoso, espumoso
• Sabor e odor
• Volume
• Caneca de fundo preto (Tamis)
• Mastite Subclínica
Análises microbiológicas
• Colheita• Culturas
– bactérias– fungos – algas
• Testes de sensibilidade “in vitro” - Antibiograma
Colheita de amostras para examebacteriológico e antibiograma
1. Desprezar os primeiros jatos
2. Assepsia do orifício do teto com algodão em álcool 70º
3. Colheita por ordenha de 5 a 20 mL em tubo estéril
4. Refrigerar e examinar em 24 horas
5. Enviar ao laboratório em caixa isotérmica
Parâmetros químicos• pH
• 6,6 (6,5-6,8)• colostro: 6,0-6,4• final da lactação: 6,8 ou mais• > 7,0: mamite (pH básico)
• Sódio e cloro– Aumenta nas mamites
• Potássio– Diminui – passagem pelo epitélio lesado
Parâmetros químicos
• Proteínas – Aumento da lactoalbumina e globulinas nas mastites - Proteínas de origem
sanguínea – perda integridade do epitélio mamário
– Diminuição da Caseína –degradação pelas proteases de origem bacteriana, dos leucócitos e do sangue
• Lactose – Diminui nas mamites – passagem para o sangue
Composição Química do Leite
Leite é composto de água + EST• 100.000 tipos diferentes de moléculas
• EST: Estrato Seco TotalProteína + Gordura + Cinzas + Lactose
• ESD: Estrato Seco Desengordurado
Composição Cabra lactante Vaca lactante Vaca (colostro)
Água 88% 87,2% 74,7%
Extrato seco total 12% 12,8% 25,3%
Gordura 3,5% 3,6% 3,6%
Proteínas 3,1% 3,3% 17,6%
Lactose 4,6% 4,9% 2,6%
Cinza 0,79% 0,8% 1,6%
Composição Química do Leite
Composição do leite bovino de diferentes raças
Composição Holandesa Jersey Pardo Suíço
Proteína 3,11 3,68 3,37
Gordura 3,23 4,49 3,65
Lactações analisadas
18.499 4.812 2.512
Fonte: Ribas, 1998
Composição Química do Leite
Exame microscópico do leite
• N° de células somáticas / mL de leite
• Métodos Diretos e Indiretos
• Avaliar as características morfológicas da células
somáticas
* Os primeiros jatos são desprezados
Parâmetros citológicos
IndiretosMastite Subclínica– California Mastitis Test (CMT)
Whiteside
Aprimoramento do CMT – tubo graduado
Princípio do CMT• Liberação do DNA dos leucócitos pela soda
DNA + Detergente gelificação da mistura
pela formação do complexo DNA + Detergente
• Indicador de pH - Púrpura de bromocresol
– pH ácido - amarelo
– pH neutro - azul claro
– pH alcalino - violeta
Prova do CMT Positiva
Início e Final da Lactação
Primeiros e últimos jatos de ordenha
Retenções de leite por deficiência de ordenha
Mastites
Uso de produtos homeopáticos em altas doses
Interpretação do California Mastitis Test para vacas (CMT)Schalm e Noorlander, 1957
Resultado Avaliação Número de Células somáticas por ml
(---) negativo Mistura sem modificação Até 200.000( --) traços Mistura com viscosidade fugaz-
desaparece com a movimentação150.000 a 500.000
(+ --) levemente positivo Reação demonstrando viscosidade da mistura
400.000 a 1.5000.000
(++ -) positivo A homogeneização da mistura demonstra ocorrência de
gelificação
800.000 a 5.000.000
(+++) fortemente positivo
Na mistura, além da gelificação, demonstra-se coagulação com
formação de massas gelatinosas
mais de 5.000.000
Resultado segundo os autores
Avaliação Número de células somáticas/mL e a
amplitude de variação(---) negativo Reação sem modificação 60.000 ( até 480.000)( --) traços Reação com líquido mucoso na
periferia do receptáculo270.000 (até 630.000)
(+ --) levemente positivo Reação com formação muco-floculenta, sem tendência a formação de cume central
660.000 (240.000 a 1.440.000)
(++ -) positivo Reação com formação de gel semi-líquido, com movimento em massas
e formação de cume central
2.400.000 (1.080.000 a 5.850.000)
(+++) fortemente positivo Reação com formação de massa gelatinosa convexa e presa ao
fundo do receptáculo
Mais de 10.000.000
Prova de CMT em Caprinos
(Schalm et al., 1971)
Parâmetros citológicos
• Método Direto
• Contagem de células somáticasmicroscópica direta
eletrônica
Exame microscópico do leite
• Método de Prescott e Breed
Método óptico - em desuso; quando utilizado: em pesquisas
• Contagem em câmaras hematimétricas
Diluir a amostra em líquidos especiais para contagem de hemáceas
ou de leucócitos. Muito demorado, não é adequado para grandes
volumes de amostras
• Contagem em contadores eletrônico
Coulter Counter
Fatores que afetam os índices produtivos e reprodutivos
Dieta com elevada taxa de proteína
O pHpH ee aa concentraçãoconcentração iônicaiônica dada secreçãosecreção uterinauterina durante a fase lútea podem serinfluenciados pela ingestão de dietas com elevados teores de proteína, reduzindo afertilidade de vacas leiteiras no pós-parto (BUTLER, 1998).
Taxa de Reabsorção Embrionária
27,70%
66,66%
16,66%
0%10%20%30%40%50%60%70%80%
setembro outubro novembro
Meses
Per
cent
ual
Fonte: Rosa, 2007
Fatores que afetam os índices produtivos e reprodutivos
0
50
100
150g1 (21/29)
g1 (8/8)
g2 (16/29)
g2 (0/8)a
b
c
d
D i e t a
Balanceada Desbalanceadagestação aos 25-50 dias (g1)
Balanceada Desbalanceadagestação aos 51-75 dias (g2)
% p
renh
ez d
e va
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Hol
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a-so
m (U
S)
Percentual de prenhez avaliada entre25-50 dias (g1) e reconfirmadaentre 51 e 75 dias (g2) em vacas Holandesas submetidas à dietabalanceada e desbalanceada no período da inseminação artificial(Rosa, 2007)
2. Cadastro
• Cadastro– Planilha de cadastro– Confirmação do cadastro por email– Solicitação de material
3. Avaliação da propriedade
• Ficha de avaliação• Visita pelos setores da propriedade• Pontos fortes e fracos• Plano de ação• Metas a atingir
Análises dos laudos• Gordura• Proteína• Inversão (gordura / proteína = fome)• Relação proteína com alta CCS• Relação proteína com altas temperaturas• Gordura pós parto= maior que 4,5%= cetose• Acidose= diminui gordura= cuidado mudança de dieta• Curvas de gordura e proteína perfil oposto à produção de
leite• Baixa produção de leite aumenta a gordura• NU elevado excesso de proteína na dieta ou falta de energia• Diminui a lactose com aumento da CCS
Contagem de Células Somáticas
Busca-seIdentificar a mastite subclínica: % animais
CCS > 300.000 cél/mL < 15
Propriedade GOR PROT LACT ST ESD CCS NU
A (HO) 3,453,23
3,463,11
4,474,56
12,211,5
8,818,35
370 13,511-16
B (JE) 3,554,49
3,273,68
4,324,83
12,0814,42
8,539,93
230 17,5
C (Mista) 3,06 3,23 4,27 11,52 8,46 922 19,6
• Diminui produção de leite
• Diminui a caseína do leite (queijo)
• Gordura poucos estudos
• Lactose diminui
Alta CCS
As células somáticas possuem enzimas resistentes a pasteurização, diminuindo o tempo de prateleira dos produtos
Análises
• Avaliar a produção e a composição do leite em conjunto;
Período pós-parto e previsão de parto;
• No mínimo duas análises consecutivas;
Custos
1- Fatura mínima: O valor mínimo para faturamento é de R$ 35,00. A cada 45 dias será feito o somatório das análises e, caso o somatório dos serviços realizados no período não totalize este valor, será emitida a fatura mínima.
2- Descarte de amostras: Amostras (com bronopol) com mais de 5 dias entre a data da coleta e a data de recebimento serão consideradas impróprias visto que os resultados estarão comprometidos. Será solicitado o reembolso no valor de R$ 0,50 por amostra referente as despesas de frascos, reagentes e transporte. Amostras para CBT (azidiol) e/ou ATB (sem conservante) com temperatura de recebimento acima de 10oC também serão descartadas e solicitado reembolso no valor de R$1,00 por amostra.
3- Planilha de campo: Para que possamos processar as amostras com maior agilidade e confiabilidade nas informações, é fundamental o envio do formulário de “Planilha de campo” devidamente preenchida e junto com as amostras.
4- Não retorno de material de coleta: Para que possamos manter nossos custos operacionais é fundamental o uso racional dos materiais de coleta. Gerencie o seu estoque de material de coleta. Para materiais não retornado poderá ser solicitado reembolso.
Fonte: Clinica do Leite/ Esalq/ USP/Piracicaba/SP