http://echa.europa.eu
Hogyan használhatók in vitro adatok a REACH tájékoztatási
követelményeinek teljesítéséhez
Webszeminárium a tájékoztatási követelményekről
2009. november 30.
http://echa.europa.eu
Áttekintés
• A REACH és az in vitro vizsgálatok
• Az in vitro módszerek alkalmazásának kritériumai a REACH keretében– Az in vitro módszertan alkalmassága
– Az in vitro módszertannal előállított adatok megfelelősége
• Hogyan használhatók in vitro adatok a tájékoztatási követelmények teljesítésére
• Hitelesített módszerek felhasználása
• Előhitelesített módszerek potenciális felhasználása
• Nem előhitelesített módszerek potenciális felhasználása
• Hogyan nyújthatók be in vitro adatok az IUCLID-ben– Példák
http://echa.europa.eu
A REACH és az in vitro vizsgálatok• Állatokon csak a legvégső esetben szabad
vizsgálatokat végezni (25. cikk (1) bekezdés).
• Az in vitro módszerek a REACH-en belül a 3R-stratégia részei: az állatokon végzett vizsgálatok helyettesítése, csökkentése és finomítása (Replace, Reduce & Refine), és alternatív módszerek népszerűsítése
Az in vitro vizsgálat a laboratóriumban, üveg vagy műanyag edényben elvégzett vizsgálat. Az in vitro az in vivo (élő szervezetben) ellentétje.
http://echa.europa.eu
Az in vitro módszerek alkalmazásának kritériumai a REACH keretében
Két szempontot kell figyelembe venni:
1. A módszertan alkalmassága
2. Az ilyen módszerrel előállított adatok megfelelősége
Lásd a REACH-útmutatót: B.4.3.1. szakasz
http://echa.europa.eu
Az in vitro módszertan alkalmassága
A REACH-ben az in vitro módszerek két kategóriája minősül alkalmasnak.
1. Hitelesített módszerek:• Nemzetközileg hitelesített módszerek (pl. vizsgálati módszerekről
szóló EK-rendelet vagy OECD-iránymutatások)• pl. a bőrirritációra/bőrkorrózióra vonatkozó in vitro vizsgálatok és in vitro
genotoxikológiai vizsgálatok, pl. Ames mutagenitásvizsgálat
2. Előhitelesített módszerek:• Nemzetközileg elfogadott előhitelesítési kritériumoknak
megfelelő in vitro vizsgálatok• pl. az előhitelesítési folyamatba való bevitel ECVAM-kritériumai• Az OECD GD 34-ben és a REACH-útmutató R.4.1. táblázatában
részletesebben megadott kritériumok
http://echa.europa.eu
Az in vitro módszertannal előállított adatok megfelelősége
• Figyelembe veendő szempontok:
– Az információkat hitelesített és tudományosan elfogadott in vitro vizsgálati módszertan alkalmazásával állítják elő
– Az előállított adatok felhasználhatók besorolási,
címkézési és/vagy kockázatértékelési célokra
http://echa.europa.eu
Hogyan használhatók in vitro adatok a tájékoztatási követelmények teljesítésére (1)
– XI. melléklet 1.4. szakasz• Az alkalmas in vitro módszerekkel szerzett eredmények
bizonyos veszélyes tulajdonság jelenlétéreutalhatnak
èA potenciális kockázattól függően vizsgálatokat igénylőazonnali megerősítésre lehet szükség.
Figyelmeztetés:– Ezek a vizsgálatok túlmutathatnak a VII. vagy VIII. mellékletben
előírt információkon – A vizsgálatokat igénylő javasolt megerősítés túlmutathat a
vonatkozó mennyiségi tartomány tekintetében a IX. vagy X. mellékletben előírt információkon
http://echa.europa.eu
Hogyan használhatók in vitro adatok a tájékoztatási követelmények teljesítésére (2)
– XI. melléklet 1.4. szakasz• Az alkalmas in vitro módszerekkel szerzett eredmények
bizonyos veszélyes tulajdonság hiányára utalhatnak
èA megfelelő mennyiségi szinten el kell végezni a megfelelő vizsgálatokat a negatív eredmény megerősítése érdekében, kivéve ha:
– a vizsgálatot a VII.–X. melléklet vagy e melléklet egyéb szabályai szerint nem kell elvégezni.
– További feltételek, amelyek esetében erre a megerősítésre nincs szükség
• Lásd a következő diát
http://echa.europa.eu
Hogyan használhatók in vitro adatok a tájékoztatási követelmények teljesítésére (4)
– XI. melléklet 1.4. szakasz– További feltételek, amelyek esetében erre a megerősítésre nincs
szükség:
• az eredmények olyan in vitro módszerből származnak, amelynek tudományos hitelességét hitelességi vizsgálat igazolja, a nemzetközileg elfogadott hitelesítési elvek szerint;
• az eredmények az osztályozás, címkézés és/vagy kockázatértékelés céljára megfelelnek; és
• az alkalmazott módszerről megfelelő és megbízhatódokumentáció áll rendelkezésre.
http://echa.europa.eu
Hitelesített módszerek felhasználása (1)
Miután nemzetközileg elfogadott hitelesítési elveknek (OECD 34. iránymutatás (OECD; 2005b)) megfelelően tudományosan hitelesítették, az in vitro vizsgálat teljes mértékben vagy részben helyettesítheti az in vivovizsgálatot, attól a céltól függően, amelynek tekintetében a vizsgálati módszert hitelesítették és elfogadták.
Az elfogadás egyik fő kritériuma az ilyen vizsgálat(ok) felhasználásával előállított információk megfelelősége az osztályozás és címkézés és/vagy a kockázatértékelés céljából.
http://echa.europa.eu
Hitelesített módszerek felhasználása (2)
A REACH-rendelet VII–X. melléklete több hitelesített in vitro módszert tartalmaz.
Példák szabványos tájékoztatási követelményekreVII. melléklet: – bőrkorrózió in vitro vizsgálata és bőrirritáció in vitro vizsgálata– szemirritáció in vitro vizsgálata.
VIII. melléklet:- mutagenicitás in vitro vizsgálata (citogén vizsgálat, mikronukleus
vizsgálat vagy mutációs vizsgálat emlős sejteken)
Kerülni kell a maró anyagokkal, maró hatást okozókoncentrációban/dózisban történő in vivo vizsgálatokat.
Hitelesített módszerek felhasználása (3)
• Azok a további hitelesített vizsgálati módszerek is értékes információkkal szolgálhatnak, amelyek nem részei a REACH mellékleteiben megadott szabványos tájékoztatási követelményeknek, mint például:
– bőrön át történő felszívódás in vitro vizsgálata
– fototoxicitás in vitro vizsgálata
– pirogenitás in vitro vizsgálata
http://echa.europa.eu
Előhitelesített módszerek potenciális felhasználása (1)
A REACH-rendelet XI. mellékletének 1.4. szakasza szerint fel lehet használni kellő mértékben kidolgozott, de még nem hitelesített módszereket (pl. az előhitelesítési folyamatba való belépés ECVAM-kritériumai),
ha:• az előállított eredmények megfelelnek az osztályozás,
címkézés és/vagy kockázatértékelés céljára;• a módszerről megfelelő és megbízható dokumentáció áll
rendelkezésre.
http://echa.europa.eu
Előhitelesített módszerek potenciális felhasználása (2)
• A vizsgálattól, alkalmazási területétől és a vizsgált anyagtól függően a pozitív eredmények elfogadhatók lehetnek
• Azokat az eredményeket, amelyek nem mutatnak ki egy adott veszélyes tulajdonságot, a negatív eredmény megerősítése céljából a mennyiségi tartománynak megfelelő vizsgálattal meg kell erősíteni – Pl. a bőrszenzibilizáció in vitro vizsgálata esetén a
pozitív eredmények elfogadhatók, de a negatív eredményeket in vivo vizsgálattal meg kell erősíteni
Az előhitelesített módszerek terén eddig szerzett tapasztalatok
• Eddig bőrirritáció és szemirritáció in vitro vizsgálatára vonatkozó beadványokat kaptunk
– A benyújtott adatok jó minőségűek voltak, és tartalmazták:
• a részletes jegyzőkönyvet
• a vizsgálati körülményeket
• az eredmények értelmezését
• a következtetéseket
http://echa.europa.eu
http://echa.europa.eu
Nem előhitelesített módszerek potenciális felhasználása (1)
• A nem előhitelesített (vagyis az előhitelesítési folyamatba még be nem vitt) módszerekkel nyert in vitroadatok hasznosak lehetnek a bizonyítékok mérlegelésén alapuló megközelítésben èmegbízhatóságuk értékeléséhez szakértői megítélés szükséges
• A felhasznált módszer optimalizálási szintjének lehetőleg meg kell felelnie nemzetközileg elfogadott kidolgozottsági kritériumoknak, pl. a vizsgálatok előminősítési folyamatba való belépésének ECVAM-kritériumainak. A módszerről megfelelő és megbízhatódokumentációt kell átadni.
Nem előhitelesített módszerek potenciális felhasználása (2)• Alkalmas in vitro módszerek hitelesítésének
kidolgozottsági kritériumai
– a vizsgálati módszer létjogosultsága
– a vizsgálati módszer végpontja és a szóban forgó (biológiai) jelenség közötti kapcsolat
– a vizsgálati módszer részletes jegyzőkönyve
– a vizsgálati módszer eredményessége, referenciaanyagok felhasználásával (pontosság értékelése)
– teljesítményértékelés
– laboratóriumon belüli és laboratóriumok közötti megismételhetőség
– relevancia
– a vizsgálati módszer adatminősége és adatok rendelkezésre állása
http://echa.europa.eu
http://echa.europa.eu
Nem előhitelesített módszerek potenciális felhasználása (3)
• Az in vitro vizsgálatokból származó információk általában a hatásmechanizmusba nyújthatnak betekintést – A fejlett in vitro vizsgálatokból származó információk értékes
tájékoztatást adhatnak, ami segíti a kockázatértékelési folyamatot
• Például az olyan új technológiák fejlődésével, mint az -OMIKA technológiák (genomika, proteomika):
èegy anyag vagy anyagosztály potenciális toxicitása meghatározott hatásmódjának / hatásmechanizmusainak (molekuláris útvonalak) értékelése
èa kereszthivatkozás és a kategóriák felépítésének elősegítése
http://echa.europa.eu
Hivatkozások
• Vizsgálati módszerekről szóló EK-rendelet
• A vegyi anyagok vizsgálatára vonatkozó OECD-iránymutatás
• TSAR (alternatív vizsgálati módszerek nyomon követő rendszere; felülvizsgálat, hitelesítés és jóváhagyás a vegyi anyagokra vonatkozó uniós jogszabályok összefüggésében)
• ECVAM (Európai Alternatív Vizsgálati Módszerek Hitelesítésével Foglalkozó Központ)