Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente Biología Ambiental
BIOLOGIA AMBIENTAL
PRACTICA DE LABORATORIO
PEDRO NEL PATIÑO PINILLA
Código: 93238403
CLAUDIA PATRICIA DORIA CAPERA.
Código: 1.013.655.299
Tutora:
BILMA ADELA FLORIDO CUELLAR
Magister.
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA (UNAD)
INGENIERÍA AMBIENTAL
CEAD IBAGUE
2015
Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente Biología Ambiental
INTRODUCCIÓN
La invención del microscopio establece el punto de partida para el descubrimiento de la
célula y el desarrollo científico de la teoría celular. Hombres como Rober Hooke, Loren
Oken, Jacob Scheiden, Teodor Schwan y Rodol Virchow, establecieron los primeros
postulados que dan fundamento al basto conocimiento que la biología ofrece para beneficio
de la humanidad.
En el siguiente informe se describe las actividades realizadas en el laboratorio de biología
ambiental, sobre el proceso de manejo del microscopio óptico compuesto, estaremos dando
a conocer las estructuras externas e internas de los diferentes objetos y células observadas
en la práctica de laboratorio, presentando fotografías del resultado de la observación.
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OBJETIVOS
GENERAL
Aprender a manejar el microscopio óptico de la mejor manera adecuada.
ESPECIFICOS
Conocer las partes que componen un microscopio óptico.
Realizar prácticas que permitan observar células vegetales.
Realizar prácticas que permitan observar células animales.
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MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
Procedimiento:
1. Recorte un cuadrado de 10 mm de lado de papel periódico, con letras impresas de
preferencia que contenga la letra “e” minúscula, colóquelo sobre la lámina y
deposite encima 2 a 3 gotas de agua y cúbralo con una laminilla. (Al colocar el
montaje en el microscopio la lámina debe quedar de tal manera que cuando usted
vea a simple vista las letras, las pueda leer).
Técnicas de enfoque
El enfoque es la operación primordial en el manejo correcto del microscopio óptico
compuesto. En el enfoque se ajustan las distancias focales del sistema de lentes, objetivo,
ocular y objeto. El procedimiento enumerado a continuación debe seguirse rigurosamente
cada vez que se va a usar el microscopio:
a. Encienda la luz del microscópico
b. Coloque el micro preparado sobre la platina sujetándolo con las pinzas, con los
botones de desplazamiento de la platina, centre el objeto sobre el eje central de la
platina coincidiendo con el eje óptimo del M.O.C.
c. Siempre con el Objetivo de Menor aumento 4X o 5X, acerque al máximo la
muestra al objetivo, manipulando el tornillo macrométrico.
d. Colocando los ojos abiertos en los oculares, aleje lentamente la platina del
objetivo, manipulando el tornillo Macrométrico, hasta que observe la formación
de una imagen. Una vez enfocado el objeto, defina la imagen con el tornillo
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(botón) micrométrico. (Un cuarto de vuelta hacia delante y hacia atrás es
suficiente y lo recomendable). Si no logro la imagen repita la operación desde el
item c.
e. Enfoque y defina la letra “e” impresa en el papel periódico con los objetivos de
4X o 5X y 10X o 20X. Realice un dibujo de los que observa.
f. Recorra los bordes de la letra elegida. Una mano maneja los botones de
accionamiento de la platina y la otra está sobre el micrométrico perfeccionando
cada vez y constantemente los poderes de definición y penetración.
g. Gire el revólver para pasar al objetivo de 40X y realice un dibujo de lo que
observa.
h. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta guía
destinado para ello
5X 20X
40 X
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Descripción de la observación:
Se observó la letra e de un papel periódico, desde tres diferentes lentes, comenzando, por el
lente de color rojo (5X), con este lente empezamos a observar, algunos puntos en blanco
dentro de la letra, que sin la utilización del microscopio no es posible. Con el lente de 20X,
ya se puede ver los pixeles que conforman la letra y con el lente de 40X, se observa un
trazo de la letra en forma de ziz zaz, y nos damos cuenta que la unión de ellas con las que
dan la forma a la letra e.
2. Realice un montaje similar al anterior, pero esta vez con un cuadrado de 10 mm
de lado de papel milimetrado, la tinta con que se imprimió debe quedar hacia
arriba.
Medición del campo del microscopio
Es importante conocer el tamaño del campo que nos permite observar cada objetivo para
poder determinar qué objetivo podemos utilizar para visualizar la muestra de interés. El
procedimiento enumerado a continuación nos permitirá conocer esta importante
información:
a. Enfoque con el objetivo de 4X, como aprendió en el punto anterior, el montaje del
papel milimetrado.
b. Coloque el micropreparado sobre la platina sujetándolo con las pinzas, con los
botones de desplazamiento de la platina, centre el objeto sobre el eje central de la
platina coincidiendo con el eje óptimo del M.O.C.
c. Ubique una de las líneas verticales del papel sobre el borde izquierdo del campo.
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d. Realice la medición del diámetro del campo óptico de este objetivo de
acuerdo con las marcas del papel.
e. Repita los pasos del a hasta el d para los objetivos de 10X o 20X y de 40X.
f. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta guía
destinado para ello.
5X 20X
En 5X: se observan 8 mm En 20X se observan 3 mm
40 X
En 40X observamos 2 mm
Poderes del microscopio óptico compuesto
Básicamente los poderes del microscopio óptico compuesto son los de resolución,
penetración, ampliación y definición.
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El poder de resolución es la propiedad definida por la distancia más pequeña que
separa dos objetos y en la que se pueden distinguir como elementos independientes.
El poder de penetración o profundidad de foco es la propiedad del objetivo de permitir
observar varios planos del micropreparado con la misma posición del foco.
El poder de ampliación: corresponde a la capacidad de aumento del objeto observado.
El poder de definición: es la capacidad del microscopio de formar imágenes con contornos
bien definidos.
Estos poderes se logran esencialmente con el tornillo micrométrico.
a. Haga un montaje seco de un trozo de 1 cm de lado de tela no coloque laminilla,
realice observaciones con los objetivos panorámicos del menor al mayor 4X o 5X,
10X o 20X y 40X, destaque las profundidades del objeto con el micrométrico.
b. Haga un montaje seco de cristales de azúcar y sal, no coloque laminilla obsérvelos a
diferentes aumentos y profundidades.
c. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta guía
destinado para ello.
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TELA
5X 20X
40 X
Descripción de la observación:
Se observó un trozo de tela, color negra, se miró desde tres lentes, empezamos por el lente
color rojo, que corresponde a 5X, como podemos ver en la imagen se visualizan dos fibras,
que a sus vez están integradas por micro fibrillas. En el lente de 20X, se puede observar que
esas micro fibrillas, están compuestas por micro fibrillas más delgadas. Y por último en el
lente de 40X, la imagen se distorsiona.
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AZÚCAR
5X 20X
40x
Descripción de la observación:
En esta práctica se observó unos gramos de azúcar, al igual que en los demás
procedimientos empezamos por el lente color rojo (5X), pudimos ver una imagen muy linda
muchas veces hemos mirado la azúcar, pero tal vez nunca habíamos podido ver los cristales
que la conforman, al aumentar o cambiar de lente la imagen se empieza a distorsionar. Fue
importante la aclaración de la docente, donde nos refería que esos lentes son más potentes y
se utilizan para aquellos organismos microscópicos.
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SAL
5X 20X
40X
Descripción de la observación:
Se observó solo algunos granos de sal, luego de analizar las imágenes tomadas
directamente del microscopio, creemos que tuvimos una falla en la sincronización de la
luz,(mucha luz.
Al momento de ver la sal, aumentada por medio de la ayuda del microscopio, pudimos
observar que son granos redondos e inmediatamente hicimos la comparación con la azúcar
y físicamente son muy diferentes. Nos causó curiosidad el ver que a diario manipulamos
este elemento, pero que en realidad nunca hemos visto la forma real de la sal.
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2. LA CÉLULA
Procedimiento:
Observación de las células vegetales (Cebolla)
a. Tome un trozo pequeño de epidermis de cebolla, de 1 cm de lado aprox. Y colóquelo
sobre una lámina portaobjetos.
b. Cubra el trozo de epidermis de cebolla con 2 a 3 gotas de azul de metileno. Luego retire
cuidadosamente el colorante con agua.
c. Realice un montaje húmedo de la muestra teñida.
d. Enfoque y realice la observación a menor aumento 4X o 5X.
e. Enfoque luego a aumento 10X o 20X y luego 40X de manera que se vean con claridad
las células.
f. Dibuje lo que observa en todos los aumentos
5X 20X
40 X
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Observación de células Animales (Epitelio bucal)
En el revestimiento interno de la mejilla existen unas células escamosas o planas que
forman el epitelio. Su función es la mantener la humedad y dar protección a la cavidad oral.
Utilizamos estas células porque son fácilmente removibles.
a. Realice un montaje húmedo de sus propias células escamosas: colocando una gota de
azul de metileno en el centro de la lámina.
b. Con el extremo delgado de un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla, de
abajo para arriba.
c. Ponga el producto del raspado en la gota de azul de metileno y esparza suavemente,
luego cubra la muestra con una laminilla o lámina cubreobjetos.
d. Dibuje lo que observa en todos los aumentos y resalte la presencia de la membrana
celular, núcleo, membrana nuclear, nucléolo y citoplasma.
5X 20X
40 X
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Observación de microorganismos (procariotas y eucariotas)
En los cuerpos de agua dulce tales como estanques, humedales, lagos y lagunas habitan un
sin número de formas vivientes unicelulares, que van desde bacterias, hongos, protistos
hasta algas microscópicas. Descubra como en una gota de agua de un ecosistema acuático
habitan diversas formas de vida.
a. Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna
b. Cúbrala con una laminilla
c. Observe en todos los aumentos diferenciando todos los organismos que encuentre.
d. Dibuje lo observado distinguiendo cada uno de los organismos.
5X 20X
40 X
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I. METABOLISMO CELULAR
Procedimiento:
Productos de la Fotosíntesis
La elodea es una planta multicelular acuática, que habita en los estanques de agua y es
utilizada en los acuarios como planta ornamental, su hoja es de forma lanceolada.
a. Tomar una ramita de Elodea sp. colocarla en el interior del vaso de precipitado y
cubrirla con agua
b. Introducir el embudo invertido en el vaso de precipitado, de manera que la Elodea
sp. quede en su interior.
c. Colocar un tubo de ensayo lleno de agua invertido cubriendo el pico del embudo.
d. Realizar una marca donde se encuentra el nivel del agua en el tubo de ensayo al
inicio con un marcador indeleble
e. Encender la lámpara cerca al montaje y dejarlo 45 minutos, realizar observaciones
permanentes del montaje durante este tiempo.
f. Al finalizar los 45 minutos observar, dibujar y anotar todo lo que sucedió en el
montaje.
Nota: esta práctica no se realizó.
Observación de Cloroplastos
a. Cortar una hoja de Elodea sp. desde la base.
b. Colocarla extendida sobre una gota de agua en la lámina portaobjetos.
c. Cubrirla con la lámina cubreobjetos teniendo cuidado de que no se forme burbujas
en el montaje.
d. Observarla al microscopio con el objetivo de 4X o 5X. Dibujar y describir
detalladamente la observación.
e. Observarla al microscopio con el objetivo de 10X o 20X. Dibujar y describir
detalladamente la observación.
f. Observarla al microscopio con el objetivo de 40X Dibujar y describir
detalladamente la observación.
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5X 20X
40X
Descripción de la observación:
La observación de la hoja de Elodea, es una de las imágenes más fascinantes que pudimos
ver en esta práctica y es donde uno se da cuenta de la importancia de una herramienta como
lo es el microscopio.
En las imágenes pudimos ver específicamente dos cosa, la primera tiene que ver con la
pared celular y su respetiva organización para formar el tejido de la hoja, de igual manera
se podía ver de una forma muy clara los cloroplastos que era el objetivo principal de la
observación de esta hoja, los cloroplastos se podían visualizar como un puntico en cada
célula, lo reconocimos gracias a la asesoría de la docente.
Producto de la Respiración
a. Servir en el vaso de precipitado, aproximadamente un tercio del volumen de la
solución de cal 0.5%.
b. Introducir el pitillo.
c. Soplar y producir burbujas durante 3 a 5 minutos.
d. Observar qué sucede y describirlo detalladamente.
Nota: esta práctica no se realizó.
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CUESTIONARIO – ANÁLISIS DE RESULTADOS
I. MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
1. ¿Cómo se observan las imágenes en el microscopio óptico compuesto? ¿Por
qué?
RTA: las imágenes vistas a través del microscopio se pueden observar de una forma mucho
más a fondo, para nosotros es como la radiografía de los objetos, que a la simple vista
humana no se puede ver. Mediante el microscopio podemos ver las imágenes desde lo más
profundo de su estructura, se puede ver cómo está conformada.
¿Por qué? Esto se debe principalmente a los lentes de aumento que maneja el microscopio,
los cuales nos permite que se den algunas características o propiedades entre ellas tenemos:
Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden
verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es
menor a una décima de milímetro. En el microscopio viene limitado por la longitud de
onda de la radiación empleada; en el microscopio óptico, el poder separador máximo
conseguido es de 0,2 décimas de micrómetro (la mitad de la longitud de onda de la luz
azul), y en el microscopio electrónico, el poder separador llega hasta 10 Å.
Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo respecto
a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de las
aberraciones de las lentes utilizadas.
Ampliación del microscopio. En términos generales se define como la relación entre el
diámetro aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si
el microscopio aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100
veces mayor linealmente que el tamaño real del objeto (la superficie de la imagen será
1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que está proporcionando un
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microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular
empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y un ocular de 10X, la
ampliación con que estamos viendo la muestra será: 45X x 10X = 450X, lo cual quiere
decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces, también expresado como 450
diámetros.
2. Indique los poderes del microscopio que identifico en los montajes de la tela, la
sal y el azúcar. Explique brevemente cómo los identificó.
En la tela: en este montaje se identificó 3 poderes que se prestaron para observar el
pedacito de tela los cuales fueron el de resolución, nos permitió visualizar mejor las fibras
como objetos independientes de las otras fibrillas; el de penetración, que nos permitió ver
más de cerca estas fibrillas; y el de ampliación, que visualizó las micro fibrillas que
componen las fibras de la tela.
En la azúcar: de igual forma en este montaje seco se reconoció el uso de los 3 poderes que
en el punto anterior como la resolución, en donde pudimos ver que cada partícula era
independiente de las demás; el de penetración, se podía mirar más a fondo de cada una de
las partículas; y el de ampliación que nos amplió la imagen de estas partículas para su
mejor visualización.
En la sal: sucede exactamente lo mismo que en los puntos anteriores, se identificó los 3
poderes los cuales son: el de resolución, el de penetración y el de ampliación
Nota: no se identificó el poder de definición ya que cada vez que acercábamos la imagen
con los objetivos de mayor capacidad se veían cada vez más distorsionada la imagen debido
a que estos objetivos son diseñados para ver objetos más pequeños o microscópicos, como
bacterias. Etc.
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ll. LA CÉLULA
1. Indique los organelos que identificó en las células vegetales. ¿Por qué pudo
observar esos y no otros? (Revisar qué componentes o moléculas de la célula
tiñe el azul de metileno).
RTA: En la observación con el microscopio, pudimos identificar la pared celular y los
cloroplastos de la Elodea ps según las imágenes tomadas con la cámara, son los mismos
organelos que se tiñen con el azul de metileno, siendo más fácil de ver con los objetivos
de menor alcance.
2. Indique los organelos que identificó en las células animales. ¿Por qué pudo
observar esos y no otros? (Revisar qué componentes o moléculas de la célula
tiñe el azul de metileno).
RTA: Se observó la membrana celular, núcleo, membrana nuclear y citoplasma los
mismos organelos que se tiñen con el azul e metileno y los más visibles sin necesidad
de usar los objetivos de mayor aumento.
lll. METABOLISMO CELULAR
1. ¿Qué tipo de sustancias espera encontrar en el tubo de ensayo del montaje
“productos de la fotosíntesis” al final del experimento? ¿Por qué?
RTA: no se hizo la práctica.
2. ¿Dónde se ubican los cloroplastos en las células vegetales? ¿Por qué?
Al microscopio óptico pueden ser observados, en fresco y sin teñir, y aparecen
generalmente como unos orgánulos discoidales en los que, ocasionalmente, se distinguen
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en su interior unos cuerpos densos o grana. Se encuentran localizados en el citoplasma.
No tienen un lugar fijo, aunque frecuentemente se encuentran entre la pared vacuolar y la
membrana plasmática. Están sometidos a movimientos de ciclosis debido a las corrientes
citoplasmáticas, pero también pueden presentar movimientos activos de tipo ameboide o
contráctil relacionados con la iluminación.
3. ¿Por qué cambia la solución de cal? Y ¿Qué organelo de nuestras células
interviene en la formación de ese precipitado?
RTA: no se hizo la práctica.
PREGUNTA INTEGRADORA:
Si lo llaman para la evaluación y propuesta de un plan de manejo de un humedal que está
siendo contaminado por el vertimiento de aguas residuales de una planta procesadora de
grasas y aceites. ¿Cuáles de los conceptos (tipos de organismos y procesos metabólicos)
trabajados en esta práctica consideran que usted debe tener en cuenta como ingeniero
ambiental, para proponer una solución para la recuperación y mantenimiento de este
sistema y por qué?
RTA: Lo primero que tengo que se hacer es un diagnostico o evaluación del impacto
ambiental que ha ocurrido en el agua, Para conocer el estado de las aguas del humedal es
necesario recoger una serie de muestras que reflejaran la calidad del agua tras el respectivo
análisis de los parámetros físico-químicos. Con el fin de garantizar homogeneidad y
continuidad en los análisis en todo el cuerpo de agua, Para el muestreo se analizara los
siguientes parámetros:
Temperatura agua y ambiente, humedad relativa, transparencia agua, pH, turbidez (cualitativo),
color (cualitativo), olor (cualitativo).En laboratorio: color (cuantitativo), turbidez (cuantitativo),
conductividad, oxígeno disuelto ,DQO, DBO5, sólidos, acidez, alcalinidad, dureza, nitratos, hierro, fosfatos,
cloruros y nitritos.
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Una vez determinado el grado de contaminación, recomendaríamos el cierre de la fuente que está generando
la contaminación en este caso la procesadora de aceites y grasas. Seguidamente haría un plan de
contingencia para absorber el material superficial y por ultimo plantearía un manejo de fitorecuperación y
fitoremediación y de esta manera tratar de descontaminar el humedal.
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CONCLUSIONES
Una vez terminada la práctica de biología ambiental podemos concluir:
Como futuros ingenieros ambientales, es de suma importancia conocer el manejo
adecuado del microscopio.
En nuestra labor profesional, muy posiblemente tendremos que hacer estudios de
evaluación, donde el manejo del microscopio será fundamental para este tipo de
actividades.
La importancia de algunos tips aprendidos en la práctica, como por ejemplo, la
utilización del azul de metileno para identificar mejor algunas estructuras, son
herramientas que permitirán un mejor desempeño de nosotros a nivel profesional.
Realizar diferentes observaciones, con diferentes elementos, genero mejor habilidad
en nosotros como estudiantes.
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BIBLIOGRAFIA
Biología. LOS CLOROPLASTOS. Organelos (2013) consultado el 17 septiembre 2015.
Disponible en: www.infobiologia.net/p/cloroplastos.htm
Claves. FITORREMEDIACIÓN Y FITORECUPERACION. (2010) consultado el 17
septiembre 2015. Disponible en: http://digital.csic.es/bitstream/10261/16683/1/eco.pdf
Guía. LABORATORIO. Componente practico. (2015) consultado el 17 septiembre 2015.
Disponible en: http://campus02.unad.edu.co/ecapma01/course/view.php?id=529
Video. MICROSCOPIO. Virtual (2012) consultado el 17 septiembre 2015. Disponible en:
https://www.udel.edu/biology/ketcham/microscope/
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