Guia dae Laboratorio de Biologia

8/18/2019 Guia dae Laboratorio de Biologia

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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BÁSICAS

Guía de práctca!

BIOLOG"A CELULAR # MOLECULAR

$%&'(IIResponsable Blgo Lezama Vigo, Hélmer, MSc

Profesores Blgo. Nolasco Cárdenas, Oscar, MSc. (Coordinador)Blgo. Murrugarra Bringas, Victoria (Coordinador rácticas).Blgo. !lata Linares, Vic"#, MgBlgo. La $osa Loli, $a%ael, MgBlgo. &uintana Cáceda, Milagros, MSc.Blgo. Vadillo 'ález, 'ioana, MgBlgo. Sandoal e*a, 'ustao, MSc.&.+. $amrez $o-as, Luisa.Méd. Laa Salinas, olanda, Mg

Méd. !manzo L/ez, César (Coordinador seminarios)Méd. Mena Naarro, Cecilia&. +. Si%uentes Vás0uez, $o1ana, MSc.Blgo. Sánc2ez 3áila, 4o2anna, MSc.Blgo. Vicente Vicente, Nélida, 3r.Méd. 5las 5scudero, !liciaBlgo. +u-ita !larc/n, $icardo, 3r.

APELLIDOS) NOMBRES*+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++

GRUPO*+++++++++++DIA*++++++++++++ PROFESOR*++++++++++++++

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7N8$O39CC7:N

La ;iologa es la ciencia de la ida 0ue estudia la estructura # %unci/n de los organismos ios # sus

comonentes. Las alicaciones de la inestigaci/n ;ásica en ;iologa molecular son numerosas, desde la

tecnologa ara traslantar corazones, maniular genes, dise*ar %ármacos contra microorganismosat/genos 2asta actiidades como incrementar la roducci/n mundial de alimentos.

La gua de rácticas del curso de Biologa Celular # Molecular tiene como o;-etio entrenar al

estudiante en los rocedimientos de la;oratorio # desarrollar su ensamiento cient%ico, de manera 0ue lo

llee a comrender los términos ;ásicos de la Biologa Molecular.

5l estudiante de;e emlear esta gua en cada ráctica de la;oratorio # estar in%ormado so;re la

ráctica 0ue se lleará a ca;o en cada sesi/n, anticiadamente.

La gua se 2a diidido en tres artes de acuerdo a cada ealuaci/n arcial. La rimera arte

comrende la célula # comonentes celulares. La segunda arte inclu#e rocesos celulares como

resiraci/n, ermea;ilidad, diisi/n celular # la isualizaci/n de organelas. 5n la tercera arte se analizara

el roceso de meiosis, comrensi/n del c/digo genético # técnicas de maniulaci/n de ácidos nucleicos.

5l alumno de;e cumlir con los o;-etios lanteados al %inal de cada ráctica. !s mismo de;e

resentar su gua de ráctica terminada la misma, con las actiidades re0ueridas en la sesi/n de ráctica,

de;idamente desarrolladas.


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$O'$!M!C7:N 35 CON85N73O

Nº CONTENIDO

& I,tr-ducc.,

$ Or/a,0ac., de /rup-! de práctca

' B-!e/urdad1 Mcr-!c-pía t2c,ca! de 3a,pu4ac., 5e,6-7ue de 3ue!tra!

8 T2c,ca! de c-4-rac., 5 -9!er:ac., de c24u4a!Pr-car-ta!

; O9!er:ac., de c24u4a! Eucar-ta!

<De3-!trac., e=per3e,ta4 de4 6e,.3e,- de d6u!.,1Per3ea94dad ce4u4ar

>O9!er:ac., de 3-:3e,t-! ce4u4are!* Cc4-!!1O9!er:ac., de -r/a,e4a! ce4u4are!1 Mt-c-,dra)C4-r-p4a!t-) ?acu-4a!

@ Repa!-

EXAMENES PARCIALES

&% Act:dad e,03átca

&& Fer3e,tac.,

&$ Mt-!!

&' Fecu,dac.,

&8 E=tracc., de DNA1 E4ectr-6-re!!

&; C.d/- /e,2tc- 5 traducc., de pr-teí,a!

&< E!tud- de ra!/-! /e,2tc-! e, e4 -39re

&> EXAMENES FINALES

=


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PRÁCTICA Nº 1

BIOSEGURIDAD Y MICROSCOPIA

PRIMERA PARTE* BIOSEGURIDAD

5l tra;a-o en el La;oratorio re0uiere de la o;seraci/n de una serie de normas de seguridad 0ue

eiten osi;les accidentes de;ido al desconocimiento de lo 0ue se está 2aciendo o a una osi;le

negligencia de los alumnos 0ue estén en un momento dado, tra;a-ando en el La;oratorio.

! continuaci/n se enumeran una serie de medidas e indicaciones de seguridad 0ue de;en tomarse

durante las rácticas de la;oratorio.

NO$M!S 5$SON!L5S

1.Lea con atenci/n, antes de cada ráctica, las indicaciones de su gua. Siga todas las instrucciones a

menos 0ue el ro%esor realice alguna modi%icaci/n.

2.Cada gruo de rácticas se resonsa;ilizará de su zona de tra;a-o # de su material. Se tra;a-ará con

cuidado # de manera organizada. !s mismo se mantendrá cada mesa de tra;a-o limia, seca #

ordenada.

3.5s o;ligatorio la utilizaci/n de mandil 0ue le cu;ra ;razos, iernas # torso. 5stá ro2i;ido el uso de

sandalias, antalones # %aldas cortos en el la;oratorio. La ersona inaroiadamente estida ara

tra;a-ar en el la;oratorio no odrá ingresar.4.No se de;e llear las manos a la ;oca ni a la cara ues ueden estar contaminadas.

5.8oda ersona con ca;ello largo, de;erá su-etarlo # recogerlo, nunca de;e de estar li;re.

6.5stá terminantemente ro2i;ido %umar, tomar ;e;idas # comer en el la;oratorio.

7.5n caso de derrame, accidente o da*o aise inmediatamente al ro%esor.

8. !l término de cada ráctica limiar el área de tra;a-o # laar los materiales utilizados con agua de

ca*o. Laarse las manos meticulosamente con agua # -a;/n. +inalmente cerciorarse 0ue las llaes de

gas # agua estén cerradas.

$5!C87VOS &97M7COS

1. 9sar lentes de seguridad cuando tra;a-e con reactios 0umicos eligrosos 0ue uedan salicar o

derramarse.

2. !ntes de utilizar un comuesto, asegurarse ;ien de su necesidad, %i-arse ;ien en el r/tulo.

3. Como regla general, no coger ning>n roducto 0umico. 5l ro%esor o ro%esora te lo roorcionará.

4. Nunca deuela los so;rantes de los roductos a los %rascos de origen sin consultar con el ro%esor.

5. 5s mu# imortante 0ue cuando los roductos 0umicos de desec2o se iertan en la ila de desag?e,

estén de;idamente neutralizados, de;e de-arse 0ue circule or la misma, a;undante agua.

6. No tocar con las manos # menos con la ;oca, los roductos 0umicos.7. No ietear con la ;oca. 9tilizar una ;om;illa de succi/n.

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8. Los ácidos re0uieren un cuidado esecial. Cuando 0ueramos diluirlos, siemre ec2aremos el ácido

so;re agua.

9. Los roductos in%lama;les (gases, alco2ol, éter, etc.) de;en estar le-os de %uentes de calor. Si 2a# 0ue

calentar tu;os con estos roductos, se 2ará al ;a*o Mara, nunca directamente a la llama.

10.Maniule con recauci/n los solentes olátiles e in%lama;les como el éter, acetona # metanol. Nunca

eaore estos solentes en una 2ornilla al a;ierto. 9tilice siemre un sistema de condensaci/n

e%iciente.11.Si or accidente cae o se ierte so;re ti cual0uier ácido o roducto corrosio, láate inmediatamente

con muc2a agua # aisa al ro%esor.

12. !l rearar cual0uier disoluci/n se colocará en un %rasco limio # rotulado conenientemente.

13.Si %uera necesario durante la ractica encender un mec2ero, encienda el %uego en el la;oratorio solo

si no e1isten solentes in%lama;les en la ecindad. La ersona 0ue encienda el %uego de;e rimero

eri%icar 0ue no e1ista otra ersona 0ue este tra;a-ando con solentes in%lama;les en el la;oratorio.

M!85$7!L 35 V73$7O

6 9se material de idrio limio # no ra-ado.< 5l idrio caliente no se di%erencia a simle ista del idrio %ro. ara eitar 0uemaduras use guantes o

traos.= Si tienes 0ue calentar a la llama el contenido de un tu;o de ensa#o, o;sera cuidadosamente estas

dos normasA

8en e1tremo cuidado # cerci/rate 0ue la ;oca del tu;o de ensa#o no aunte a ning>n coma*ero.uede 2erir el l0uido # salir disarado, or lo 0ue odras ocasionar un accidente.

Calienta or la ared lateral del tu;o de ensa#o, nunca or el %ondo agita suaemente (mira la%igura).

5&97OS 5LDC8$7COS

6 Maniule cual0uier e0uio eléctrico con las manos secas # aseg>rese 0ue el área de tra;a-o tam;iéneste seca.

< Ning>n cord/n eléctrico de;e colgar %uera de la mesa de tra;a-o.

= Cuando desconecte alg>n e0uio del tomacorriente, -álelo or el enc2u%e # no or el cord/n.

987L7E!C7ON 35 B!L!NE!S

6 Cuando se determinan masas de roductos 0umicos con ;alanza, se colocará ael so;re los latosde la misma # si el roducto %uera corrosio, se utilizará una luna de relo-.

< Se de;e eitar cual0uier ertur;aci/n 0ue conduzca a un error, como i;raciones de;idas a goles,aaratos en %uncionamiento, solar so;re los latos de la ;alanza, etc.

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M!N79L!C7:N 35 5S5CGM5N5S

6 Maniule los microorganismos crecidos en una laca etri o tu;o de cultio con cuidado e1tremo.Siemre utilice técnicas de esterilidad (a la llama del mec2ero, guantes, alillos estériles, etc.).

< Nunca llear a la ;oca lantas o artes de ellas como semillas, %rutos # 2o-as.

NIVELES DE RIESGO BIOLOGICO EN UN LABORATORIO

Clasi%icaci/n de microorganismos or gruos de riesgo ara el tra;a-o de la;oratorioA

Grupo de riesgo 1 (riesgo individual y poblacional escaso o nulo)Microorganismos 0ue tienen ocas ro;a;ilidades de roocar en%ermedades en el ser 2umano o losanimales.

Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo) !gentes at/genos 0ue ueden roocar en%ermedades 2umanas o animales ero 0ue tienen ocasro;a;ilidades de entra*ar un riesgo grae ara el ersonal de la;oratorio, la o;laci/n, el ganado o el

medio am;iente. La e1osici/n en el la;oratorio uede roocar una in%ecci/n grae, ero e1istenmedidas reentias # teraéuticas e%icaces # el riesgo de roagaci/n es limitado.

Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo) !gentes at/genos 0ue suelen roocar en%ermedades 2umanas o animales graes, ero 0ue deordinario no se roagan de un indiiduo a otro. 51isten medidas reentias # teraéuticas e%icaces.

Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado) !gentes at/genos 0ue suelen roocar en%ermedades graes en el ser 2umano o los animales # 0ue setransmiten %ácilmente de un indiiduo a otro, directa o indirectamente. Normalmente no e1isten medidasreentias # teraéuticas e%icaces.

B!$$5$!S 35 CON85NC7ON

Los la;oratorios resentan diersas ;arreras de contenci/n 0ue reienen el escae # disersi/nde agentes ;iol/gicos de riesgo.

Barrera primaria 5s a0uella 0ue rotege al ersonal # al am;iente inmediato del agente de riesgo(estimenta de uso e1clusio, ca;ina de ;ioseguridad # e0uios roistos de disositios de seguridad).

Barrera se!u"daria 5s a0uella 0ue rotege el am;iente e1terno contra los agentes de riesgo (dise*o della;oratorio e imlementaci/n de e0uios de seguridad de acuerdo al niel de Bioseguridad).

Barrera mi!ro#io$%gi!a 5s un disositio o sistema 0ue eita o limita la migraci/n de microorganismosentre los esacios situados a am;os lados del mismo # ermite controlar la concentraci/n de

microorganismos en el am;iente, dentro de lmites re%i-ados. 8iene como o;-etio roteger al oerador oal oerador # al roceso.

Barrera mi!ro#io$%gi!a par!ia$ 5s un disositio o sistema 0ue limita la migraci/n de microorganismosentre los am;ientes situados a am;os lados del mismo. 5n este tio de ;arrera se recomiendan re%iltros,+iltros H5! (+iltros de alta e%iciencia ara el control de artculas en susensi/n) as como ca;inas de;ioseguridad clase 7 o 77, lo cual deenderá del tio de tra;a-o 0ue se e%ect>a en un determinadola;oratorio.

Barrera mi!ro#io$%gi!a a#so$u&a 5s un disositio o sistema 2ermético, a rue;a de %iltraciones de aireo gas, 0ue eita en %orma total la migraci/n de microorganismos entre el am;iente con%inado or la ;arrera# el am;iente e1terior de la misma. La ;arrera micro;iol/gica a;soluta uede con%inar al roducto oroceso, de-ando al oerador %uera de la misma o iceersa. 5n este caso se recomienda una ca;ina de

;ioseguridad de tio 777.


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Barrera 'u(mi!a Son disositios o sistemas 0ue rotegen al oerador del contacto con su;stanciasirritantes, nocias, t/1icas, corrosias, l0uidos in%lama;les, sustancias roductoras de %uego, agenteso1idantes # sustancias e1losias. 5n este caso se recomiendan una ca;ina de seguridad 0umica.

Barrera )(si!a Son disositios o sistemas de rotecci/n indiidual o colectia 0ue rotegen contra lasradiaciones ionizantes, no ionizantes, ruidos, carga cal/rica, 0uemaduras # i;raciones e1cesias.

N7V5L5S 35 B7OS5'9$73!3

3e acuerdo con el niel de riesgo, el tio de la;oratorio, la ;arrera de contenci/n re0uerida, losrocedimientos # técnicas a usar, se 2an esta;lecido los siguientes nieles de Bioseguridad.

Ni*e$ de Bioseguridad I 5s a0uel 0ue corresonde a las actiidades desarrolladas en un la;oratorio;ásico, or ersonal adiestrado en los rocedimientos 0ue se e-ecutan en él. 5n este niel se tra;a-a conagentes clasi%icados en el 'ruo de riesgo 7 or resentar un eligro mnimo ara el ersonal della;oratorio # ara el am;iente. 5n el niel de Bioseguridad 7 no se re0uiere e0uio esecial ni un dise*oesec%ico de las instalaciones. 5l ersonal de estos la;oratorios es generalmente suerisado or uncient%ico con entrenamiento en micro;iologa.

Ni*e$ de Bioseguridad II 5s a0uel 0ue corresonde a las actiidades desarrolladas en un la;oratorio;ásico, or ersonal adiestrado en el mane-o de agentes de riesgo del gruo 77. 5s similar al niel 7 # en élse mane-an agentes de eligro moderado 2acia el ersonal # el am;iente, ero di%iere del niel 7 en lassiguientes caractersticasA6. 5l ersonal de la;oratorio tiene entrenamiento esec%ico en el mane-o de agentes at/genos.n tra;a-o.=. Se toman recauciones e1tremas con instrumentos unzo cortantes contaminados.@. Ciertos rocedimientos en los cuales ueden salicar los agentes o aerosoles se llean a ca;o enca;inas de tra;a-o micro;iol/gico.

Ni*e$ de Bioseguridad III 5s a0uel 0ue corresonde a las actiidades desarrolladas en el la;oratorio decontenci/n. 5l ersonal de;e contar con adiestramiento esec%ico ara el mane-o de agentes de altoriesgo clasi%icados en el gruo de riesgo 777. 5n el la;oratorio se realiza tra;a-o con agentes 0ue ueden

causar un da*o serio # otencialmente mortal como resultado de la in2alaci/n o e1osici/n a los mismos.5l la;oratorio cuenta con un dise*o # caractersticas eseciales tendientes a roteger al oerador # alam;iente. 8odos los materiales son maniulados utilizando estimenta # e0uio de rotecci/n siguiendorotocolos rigurosos. Los la;oratorios se mantienen con una resi/n de aire negatia, lo cual a#uda aimedir 0ue los agentes nocios escaen al am;iente.

Ni*e$ de Bioseguridad IVA 5s a0uel 0ue corresonde a las actiidades desarrolladas en el la;oratorio decontenci/n má1ima. 5ste niel es el 0ue se utiliza ara tra;a-ar con agentes ;iol/gicos clasi%icados en elgruo de riesgo 7V or reresentar un alto riesgo indiidual de contagio # 0ue además son un riesgo arala ida. Los agentes nueos 0ue resentan caractersticas antigénicas, atogénicas u otras similares aagentes de niel 777 # 7V son con%inados a niel 7V 2asta 0ue e1ista su%iciente in%ormaci/n cient%ica araesta;lecer a cual gruo de riesgo ertenecen.5l ersonal 0ue tra;a-a en los la;oratorios de niel 7V tiene entrenamiento esec%ico # e1tensio en el

mane-o de agentes in%ecciosos, # cuenta con entrenamiento ara tra;a-ar en el am;iente estéril #controlado. 5l la;oratorio cuenta con un dise*o # caractersticas eseciales tendientes a roteger aloerador # al am;iente. 8odos los materiales son maniulados utilizando estimenta # e0uio derotecci/n de caractersticas sueriores a las e1igidas ara el tra;a-o en un la;oratorio de niel 777. Lostra-es están dise*ados ara cu;rir la totalidad del cuero, resentan un sistema de resiraci/n indiidualasociado # una lee so;reresi/n interna ara eitar as la entrada accidental de artculas in%ecciosas.Los la;oratorios se mantienen con una resi/n de aire negatia, lo cual ayuda a impedir que los agentes

nocivos escapen al ambiente.

I


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TIPOS DE LABORATORIOS

5n relaci/n con el grado de riesgo los la;oratorios com;inan las caractersticas de dise*o,construcci/n, medios de contenci/n, e0uio, rácticas # rocedimientos de oeraci/n necesarios aratra;a-ar con agentes at/genos de los distintos gruos de riesgo. 3e esta manera los la;oratorios seclasi%ican en = categorasA

La#ora&orio #+si!oA 3iidido en dos gruos, el de niel de ;ioseguridad 6# el de niel de ;ioseguridad


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SEGUNDA PARTE*

MICROSCOPÍA Y ENFOQUE DE MUESTRAS

7. +9N3!M5N8O

La inenci/n del microscoio se atri;u#e a 4o2annes # Eac2arias 4ansen (6F) # eldescu;rimiento de la estructura celular de los organismos a $o;ert Hoo"e (6F). osteriormente, en6J= # con un microscoio mu# rudimentario Leeuen2oe" descu;ri/ un unierso enmarcado s/lo or decenas de micr/metros. 3esde a0uel entonces, el er%eccionamiento continuo al microscoio 2aermitido a la Ciencia ro%undizar cada ez más en el conocimiento de la ultraestructura celular # de lasrelaciones intercelulares.

M7C$OSCO7O COM95S8O

5l microscoio es un instrumento /tico 0ue se comone de una serie de lentes ara conseguir imágenes aumentadas de o;-etos diminutos 0ue or su e1trema e0ue*ez no son isi;les al o-o 2umano.

5l microscoio comuesto está constituido de un S7S85M! O87CO destinado a o;tener unaimagen aumentada del o;-eto, un S7S85M! M5C!N7CO 0ue sostiene los distintos elementos /ticos # loso;-etos 0ue se an a e1aminar # un S7S85M! 35 7L9M7N!C7:N.

C!$!C85$7S87C!S 35L M7C$OSCO7O

3ado 0ue la imagen del microscoio no es real sino irtual, se 2an determinado algunos términosde medida microsc/icaA

5n cual0uier microscoio el oder de resoluci/n de%ine su rendimiento /tico, or0ue es sucaacidad ara er como searados dos untos 0ue realmente lo están ero 0ue nuestro o-o s/lo uedeer como una entidad >nica (es decir es su caacidad de entregar imágenes ;ien ntidas).

5l má1imo oder de resoluci/n del microscoio /tico es de ,< micr/metros (,< m), de;ido a0ue la longitud de onda de la luz utilizada (@I m) es un %actor limitante. 5l o-o 2umano tiene unoder de resoluci/n de aro1imadamente 6 micr/metros.

5l lmite de resoluci/n uede de%inirse como la distancia mnima 0ue de;e e1istir entre dos untosara 0ue se uedan distinguir como searados. 5l lmite de resoluci/n se uede calcular a artir de lasiguiente ecuaci/nA

PQ

L.$. R P R constante R .6

!.NQ R longitud de onda de luz !N R aertura numérica de cada lenteo;-etio es su caacidad ara catar la má1ima cantidad de la luzdi%ractada or el o;-eto. 3eende del ndice de re%racci/n del medio.

$ecuerdaA ! menor lmite de resoluci/n ma#or será el oder de resoluci/n$esoluci/n # magni%icaci/n Má1imas7nstrumento /tico $esoluci/n Magni%icaci/nO-o 2umano ,6 mmMicroscoio /tico ,< u


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77. OB4587VOS

$econocer las artes del microscoio /tico. Conocer su utilizaci/n ara la o;seraci/n de distintas muestras ;iol/gicas.

777. M!85$7!L5S MD8O3OS

5n el la;oratorio encontrarásA

Microscoio comuesto !ceite de inmersi/n muestras %i-adas

7V. $OC537M75N8O.

Se reconocerán las artes de un microscoio /tico. Se*alar las artes del mismo en el di;u-o ad-unto.

6. S7S85M! O87CO. 5l sistema /tico está constituido orA

O#-e&i*osA sistema de lentes conergentes 0ue act>a como una lente 0ue se encuentran montados en elreoler. Lo usual es 0ue cada microscoio tenga cuatro o;-etios de di%erentes aumentos ( @1,61, @1, 61) los 0ue se clasi%ican enA

O;-etios en secoA en los 0ue el aire se interone entre la lente # la rearaci/n.

O;-etios de inmersi/nA en el cual un l0uido (aceite) se interone entre la lente # la rearaci/n.

O!u$ar A 5l ocular es una lente conergente 0ue recoge la imagen intermedia roducida or el o;-etio #

%orma una nuea imagen irtual, derec2a, # amli%icada un cierto n>mero de eces ( eces,seg>n se indica en el roio ocular). Los aumentos más comunes son 6 # 6.


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Tor"i$$o i!rom&ri!oA Mecanismo de en%o0ue con recisi/n o a-uste %ino.

Base o 0ieA 5structura s/lida # esada 0ue sostiene # da esta;ilidad a todo el instrumento.

Co$um"aA Vástago ertical 0ue se articula con la ;ase # con el tu;o del microscoio # llea el mecanismode moimiento del mismo.

NO8! 7MO$8!N85. resta muc2a atenci/n al mane-o del microscoio 0ue tienes a tu cargo. 3e;es2acerlo cuidadosamente or0ue son aaratos mu# delicados # de-arás a consigna tu documento deidenti%icaci/n.

MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

6 Colocar el o;-etio de menor aumento en osici/n de emleo # ;a-ar la latina comletamente.

< Colocar la rearaci/n so;re la latina su-etándola con las inzas metálicas.

= Comenzar la o;seraci/n con o;-etio de menor aumento. Si la rearaci/n es de ;acterias emlear el

o;-etio de ma#or aumento (o;-etio de inmersi/n, er unto ).@ ara realizar el en%o0ueA

a. !cercar al má1imo la lente del o;-etio a la rearaci/n, emleando el tornillo macrométrico. 5sto

de;e 2acerse mirando directamente # no a traés del ocular, #a 0ue se corre el riesgo de incrustar el

o;-etio en la rearaci/n udiéndose da*ar alguno de ellos o am;os.

;. Mirando, a2ora s, a traés de los oculares, ir searando lentamente el o;-etio de la rearaci/n

con el macrométrico #, cuando se o;sere algo ntido la muestra, girar el micrométrico 2asta o;tener

un en%o0ue %ino.

F. asar al siguiente o;-etio. La imagen de;era estar #a casi en%ocada # suele ser su%iciente con moer

un oco el micrométrico ara lograr el en%o0ue %ino.

5l emleo del o;-etio de inmersi/n es siemre utilizando aceite de inmersi/n.

6


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TRABAJO GUIADO

1.- %ndi!ue tods ls prtes del mi"ros"opio

+5CH! !C878937N!L M!85$7!L !$87C7!C7:N+7$M!K S5LLO

$O+5SO$

6=


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6@


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PRACTICA Nº 2

PRIMERA PARTE* TECNICAS DE COLORACION1 PREPARACION DE MUESTRAS

I1 FUNDAMENTOS

La c-4-rac., 3p4ca 4a pe,etrac., de4 c-4-ra,te p-r 6e,.3e,- -!3.tc- 5 !u ac.,!e de9e a 6e,.3e,-! de a9!-rc., de partícu4a! - -,e!1 uí3ca3e,te 4a c-4-rac., e! 4au,., de 4a! 3-42cu4a! de4 c-4-ra,te c-, 4-! e4e3e,t-! c-,!ttu5e,te! de 4a c24u4a1 A4/u,a!re/-,e! ce4u4are! te,e, pH a4ca4,- 5 !e te, c-, 4-! c-4-ra,te! ácd-! -tr-! te,e, pHácd- 5 !e te, c-, c-4-ra,te! 9á!c-!1 S, e39ar/- e! ,ece!ar- !ea4ar 7ue ta,t- e4 ,c4e-c-3- e4 ct-p4a!3a te,e, caracterí!tca! a,6.terca! de 3a,era 7ue !e puede, ter) e4,c4e- c-, a4/u,-! c-4-ra,te! ácd-! 5 e4 ct-p4a!3a c-, a4/u,-! c-4-ra,te! 9á!c-!1

E4 3eca,!3- de c-4-rac., de 4a! 3ue!tra! 9-4./ca! puede, !er a6ectad-! p-r* Pure0a de4 c-4-ra,te C-,ce,trac., de4 c-4-ra,te pH de 4a !-4uc., de4 c-4-ra,te Te3peratura de4 3ed- a39e,te Su!ta,ca! adc-,a4e! 3-rde,te!J Te3p- de c-4-rac.,1

Los rearados microsc/icos, constitu#en una serie de rearados rutinarios de la;oratorios 0uetienen or o;-eto identi%icar en %orma ráida el contenido de un determinado tio de muestra, con la con la%inalidad de resoler alg>n ro;lema de interés articular. Los rearados microsc/icos más %recuentesen Biologa sonA

rearados Ten %rescoU rearados Ten secoU

Los rearados Ten +rescoU son rearaciones microsc/icas acuosas, 0ue se caracterizan or 0uela sustancia e1amen, no está ad2erida de un modo %i-o a la suer%icie de la lámina ortao;-eto # or lotanto, al ser maniulada ésta en di%erentes osiciones se corre el riesgo de erder u estroear el

rearado.Los rearados Ten secoU son a0uellos 0ue su%ren un rocesamiento reio (e1tensi/n, %i-aci/n #

coloraci/n), # se caracterizan or0ue la sustancia e1amen se 2alla ad2erida a la suer%icie de la láminaortao;-eto # or lo tanto, al ser maniulada ésta en di%erentes osiciones no se estroea o ierde lamuestra.

E! 3p-rta,te eerctar a4 e!tuda,te e, e4 3a,e- 5 ap4cac., de e!t-! 6act-re! 7ue,cde, 9á!ca3e,te e, 4a c-3p4e3e,tac., de4 apre,d0ae de4 e!tud- de e!tructura!ce4u4are!) de,tcac., de ted-! 5 3cr--r/a,!3-1

77. OB4587VO.

6. 3i%erenciar # e1licar el %undamento de las distintas coloraciones


16/56

7V. $OC537M75N8O

PREPARADOS EN FRESCO&1 C-4-car u,a /-ta de a/ua e!ta,cada - a/ua de K-rer- e, u,a 4a3,a$1 c-4-car u,a 4a3,44a cu9re-9et-!'1 -9!er:ar

PREPARADOS EN SECO&1 C-4-car 4a 3ue!tra e, 4a 4a3,a$1 Rea40ar 4a c-4-rac., re!pect:a'1 Secar a4 3ed- a39e,te81 -9!er:a 4a 3cr-!c-p-

6.3i;u-e lo o;serado en las muestras rearadas en la ráctica. 3i%erencie entre el rearado en %rescode un rearado en seco

Mue!tra*+++++++++ Mue!tra*+++++++++ C-4-rac.,*+++++++ C-4-rac.,*+++++++ Au3e,t-*++++++++ Au3e,t-*++++++++

PARTE 2: OBSERVACIÓN Y RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS PROCARIOTES,

7. +9N3!M5N8O

La rincial caracterstica de la célula rocariota es 0ue carece de n>cleo celular. Las ;acterias,los organismos rocariotes más reresentatios, comrenden

or una arte, esecies de imortancia médica uesto 0ueroducen una serie de in%ecciones # adecimientos en el2om;re # en los animales ero, or otra arte, una granma#ora reresenta ;ene%icios ara la agricultura, la industria #la salud 2umana # animal.

ara o;serar este tio de células se utiliza la 8inci/n'ram, técnica dise*ada or el médico danés Hans C2ristian'ram. 5sta consiste en oner en contacto las células;acterianas con colorantes ;ásicos como ioleta de genciana,utilizando la soluci/n de lugol como mordiente. 5sto %orma uncomuesto #odado 0ue se %i-a %uertemente en determinadas

;acterias. Seg>n la coloraci/n 0ue ad0uieran, las ;acterias seclasi%ican enA

6


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'$!M OS787V!SA se ti*en %uertemente con ioleta de genciana # ad0uieren una coloraci/n ioleta.'$!M N5'!87V!SA se ti*en mu# suer%icialmente or lo 0ue %ácilmente se decoloran con solentesorgánicos. Se utiliza adicionalmente la sa%ranina o %ucsina, 0ue se emlea como colorante de contraste,ad0uiriendo una coloraci/n rosada.

La di%erente tinci/n de ;acterias se de;e a la comosici/n di%erencial de sus aredes ;acterianas.Las ;acterias 'ram ositias oseen una ared celular con mureina # ácido teitoico. 5n cam;io, las 'ram

negatias tienen una ared muc2o más comle-a 0ue contiene, además del etidoglucano, unaasociaci/n de rotenas lidos # lioolisacáridos !demás de la coloraci/n esta técnica nos ermite distinguir en las ;acteriasA a) mor%ologaA cocos, ;acilos,esirilos, coco;acilos, i;rios, etc) ;) agruaci/nA ares, cadenas tétradas, racimos, sarcina !A %orma de ca*a o ;acilosBA $edondos en lneasA estretococosCA redondos en c>mulosA esta%ilococos3A $edondos en aresA dilococos5A +orma de esiralesA esirilos+A 5n %orma de comaA i;rios

77. OB4587VOS

$econocer los distintos tios de ;acterias seg>n se ti*an o no con la 8inci/n 'ram.

777. M!85$7!L5S

5ncontrarás en el la;oratorioA Microscoio /tico !lco2ol acetona Soluciones ara la tinci/nA +ucsina o sa%ranina

Violeta de genciana

!ceite de inmersi/n Lugol Mec2ero de alco2ol

7V. $OC537M75N8O

La tinci/n 'ram se realizará so;re las muestras de #ogur, sarro dentario # inagre (no industrial) 0ue losalumnos traerán.

Bacterias del #ogurt

5l #ogur es un roducto lácteo roducido or la %ermentaci/n natural de la lec2e. ! escala industrial serealiza la %ermentaci/n a*adiendo a la lec2e dosis del =@ de una asociaci/n de dos ceas ;acterianasAel Streptococcus termophilus, oco roductor de ácido, ero mu# aromático, # el Lacto;acillus ;ulgaricus,mu# acidi%icante. 5n esta rearaci/n se odrán, or tanto, o;serar dos mor%ologas ;acterianas distintas(cocos # ;acilos) # un tio de agruaci/n (estretococos, cocos en cadenas arrosariadas). !demás, eltama*o del lacto;acilo (unos =m de longitud) %acilita la o;seraci/n aun0ue no se tenga muc2a rácticacon el en%o0ue del microscoio.

Bacterias del inagre

5l inagre es una soluci/n acuosa rica en ácido acético resultante de la %ermentaci/n esontánea delino o de ;e;idas alco2/licas de ;a-a graduaci/n. La aceti%icaci/n del ino es roducida or ;acteriasaer/;icas del ácido acético, rincialmente Acetobacter aceti , aun0ue tam;ién Gluconobacter . Se trata de;acilos rectos con %lagelos olares.

6I


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Bacterias del sarro dental

5l sarro dental es un de/sito consistente # ad2erente localizado so;re el esmalte de los dientes. 5stáconstituido rincialmente or restos roteicos, sales minerales # ;acterias -unto con sus roductosmeta;/licos. La %lora ;acteriana de la caidad ;ucal es mu# aria;le deendiendo de las condiciones 0uese den en el momento de 2acer la rearaci/n, ero suelen a;undar ;acterias sar/%itas, udiéndoseo;serar gran ariedad de mor%ologasA esiro0uetas, coco;acilos, dilococos # ;acilos.

$ealizar los siguientes asos ara la tinci/n 'ram de cada una de las = muestras indicadas.

6 $ealizar una e1tensi/n de la muestra de cultio ;acteriano so;re un ortao;-etos< Secar ante un mec2ero.= Cu;rir el rearado con ioleta de genciana or 6 minuto.@ 5n-uagar la lámina con agua destiladaF !*adir lugol or 6 minuto. Laar con agua destilada # decolorar con alco2ol acetona.I !*adir %ucsina o sa%ranina # de-ar 0ue act>e or 6 minuto.J Laar con agua corriente, secar Colo0ue una gota de aceite de inmersi/n encima de la lámina cu;reo;-etos # o;serar al

microscoio con el o;-etio de inmersi/n.

PARTE PRACTICA

6. comletar el gra%ico

6J


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PRACTICA Nº3

&'()*+,C%N ) C/,( EUCARIOTES

7. +9N3!M5N8O

5n 6=, en ;ase a o;seraciones realizadas or los cient%icos alemanes Sc2leiden # Sc2an, selasm/ la teora celular, la cual rodu-o un cam;io radical en las ciencias ;iol/gicas. 5sta teora ostula0ue los Tcueros de todos los animales # egetales están %ormados de células # 0ue solo ueden aarecer nueas células or diisi/n de las células ree1istentesU. 3e a2 0ue los organismos or mu# sencillos 0uesean están constituidos or unidades ias denominadas células.

La célula eucariota es más comle-a 0ue la célula rocariota # contiene, a di%erencia de esta>ltima, n>cleo celular. Los organismos más simles (rotozoarios) están constituidos de una sola célulaeucariota mientras 0ue los más comle-os o multicelulares están %ormados or un gran n>mero de células

eucariota 0ue se 2allan organizadas en te-idos, /rganos # sistemas.

77. OB4587VOS

O;serar # caracterizar células eucariotas de tio egetal (eidermis de ce;olla # mucosa ;ucal). O;serar # caracterizar células eucariotas de tio animal (eitelio ;ucal, te-ido adioso # sangre).

777. M!85$7!L5S

5ncontrarás en el la;oratorio Microscoio /tico Cu;eta de tinci/n Lugol +rasco laador Mec2ero de !lco2ol !lco2ol a;soluto Lanceta estéril Hemato1ilina

+ormol 5osina Sudan 777

Wrig2t

Cu;eta de tinci/n

Ce;olla Hisoos 8ocino !gua estancada en %rasco oscuro

Láminas ortao;-eto # cu;reo;-eto

'otero Bistur u 2o-a de a%eitar

Leadura de an Materiales de disecci/nA ti-era, inza, estilete.

7V. $OC537M75N8O

@.6. O;seraci/n de células egetales (Células eiteliales de Allium cepa)Las células de la eidermis de las 2o-as internas del ;ul;o de la ce;olla, son de %orma alargada #

;astante grande. La ared celular celul/sica se destaca mu# clara te*ida or el colorante. Los n>cleos songrandes # mu# isi;les. 5n el citolasma se distinguen algunas acuolas grandes dé;ilmente coloreadas.

6 Seare una de las caas del ;ul;o de la ce;olla. Con a#uda de una inza desrenda la mem;rana

eidérmica 0ue cu;re la arte interna de la ce;olla # e1tiéndala en el ortao;-etos.< 9tilizando una 2o-a de a%eitar o;tenga una orci/n de medio centmetro cuadrado, c>;rala con una


21/56

gota de lugol, colo0ue cuidadosamente el cu;reo;-eto # o;sere en el microscoio.= $econozca las artes de la célula egetal.

@.cleo # con menos color el citolasma de las células. Dstesuele ser algo granuloso.

6 Con un 2isoo limio e1traiga suaemente la mucosidad de la caidad ;ucal.< 3eosite la mucosidad e1trada en el centro de una lámina ortao;-etos # e1tiéndalo con un %rotis.= !gregue unas gotas de !E9L de metileno # esere = minutos.@ 5limine el e1ceso de colorante utilizando agua # colo0ue un cu;reo;-etos.F O;sere la muestra a menor aumento # localiceA células asociadas # do;ladas. Luego isualice a ma#or aumento # reconozca los comonentes celulares.

@.F. O;seraci/n de células animales (8e-ido adioso)

5l Sudan 777 es un comuesto 0ue ti*e lidos de color ro-o intenso. 5n el te-ido adioso, 0ue contienegran cantidad de grasas, se o;serarán los adiocitos te*idos or el Sudan 777.

6 Con a#uda de un ;istur, cortar una %ina caa de grasa de tocino< Colocarla en un ortao;-etos # cu;rirla con unas gotas de %ormol. 3e-ar actuar @ minutos.= Laar la muestra con agua # cu;rirla con unas gotas de Sudán 777. 3e-ar actuar unos F minutos.@ Voler a laar la rearaci/n con agua, cu;rirla con un cu;reo;-etosF O;serar al microscoio.

@.. O;seraci/n de células animales (Sangre)

!l microscoio las células sanguneas se erán redominantemente los gl/;ulos ro-os, 2emates oeritrocitos te*idos de color ro-o or la eosina. No tienen n>cleo # son más delgados or el centro 0ue or los ;ordes. Los gl/;ulos ;lancos o leucocitos se identi%ican %ácilmente or la resencia de n>cleo, te*idode morado or la 2emato1ilina. Ha# arias clases de leucocitosA

Lin%ocitosA de tama*o aro1imado al de los gl/;ulos ro-os,tienen un solo n>cleo 0ue ocua casi todo el gl/;ulo. MonocitosAson los leucocitos ma#ores, oco %recuentes normalmente,n>cleo grande, redondo, son los más m/iles # su %unci/n

rincial es la %agocitosis. olimor%onuclearesA n>cleo%ragmentado o arrosariado. ueden ser eosin/%ilos, cona;undantes granulaciones te*idas de ro-o or la eosina,


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neutr/%ilos # ;as/%ilos.

Los eosin/%ilos, con granulaciones a;undantes de color ro-izo # el n>cleo te*ido de color azul marino.5stos gl/;ulos aumentan su n>mero en caso de arasitosis o rocesos alérgicos.

Los ;as/%ilos resentan un n>cleo te*ido de ro-o # las granulaciones del citolasma de color mu#oscuro. Las la0uetas no son isi;les #a 0ue recisan una técnica esecial de tinci/n.

5%ect>a los siguientes asos ara am;as coloraciones, Wrig2t # Hemato1ilina5osinaA

6 Con a#uda de una lanceta desec2a;le, realice una unci/n del ule-o del dedo anular de lamano iz0uierda, reia desin%ecci/n con algod/n # alco2ol.

< 8ome una gota de sangre # 2aga un %rotis %ino so;re el ortao;-eto= Colocar el %rotis e1tendido #a seco, so;re una ;ase lana en osici/n totalmente 2orizontal.

ara la coloraci/n de Wrig2tA

6 Coloree con unas gotas de colorante Wrig2t, inmediatamente agregar so;re el colorante el mismon>mero de gotas de agua destilada # mezclar ráidamente, solando suaemente 2asta 0ue se%orme una caa lateada.

< 3e-ar reosar la mezcla or J 6 minutos, o;serando la intensidad de color.= Lae con agua corriente # de-ar secar al medio am;iente, si es osi;le con la lamina en %orma

ertical.@ O;sere al microscoio. 9tilice el o;-etio de 6 ara la o;seraci/n de las células # n>cleos.F 3i%erencie las di%erentes %ormas de n>cleo en los neutr/%ilos, ;as/%ilos, eosin/%ilos, monocitos #

lin%ocitos. 3i;u-e cada %orma de n>cleo.

ara la coloraci/n de Hemato1ilina5osinaA

6 Colocar el %rotis de sangre so;re la cu;eta de tinci/n # a*adir unas gotas de alco2ol a;soluto #de-ar 0ue el alco2ol se eaore ara %i-ar la rearaci/n.

< Cu;rir con unas gotas de 2emato1ilina # de-ar actuar durante 6F minutos. 5itar la desecaci/n del

colorante agregando más l0uido.= Laar la rearaci/n # a*adir unas gotas de eosina de-ándola actuar 6 minuto.@ Voler a laar 2asta 0ue no 0ueden restos de colorante.F 3e-ar secar aireando el orta o ;ien al calor mu# lento de la llama del mec2ero. O;serar al microscoio. 9tilice el o;-etio de 6 ara la o;seraci/n de las células # n>cleos.

DESARROLLO

6. Xor 0ué los eritrocitos se ti*en con 5osina # los Leucocitos con Hemato1ilinaY ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ


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@ ( D9ue 4a! d!t,ta! 3ue!tra! -9!er:ada! e, 4a práctca




+5CH! !C878937N!LM!85$7!L

!$87C7!C7:N+7$M!K S5LLO

$O+5SO$


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PRACTICA Nº 4

PERMEABILIDAD CELULAR

7. +9N3!M5N8O

La mem;rana celular ermite el transorte de sustancias de manera selectia. Muc2as sustancias,además del agua, entran a la célula # salen de ella or e%ecto de los gradientes de concentraci/n, aun0ues/lo unas cuantas (CO< # Ocar al 6, se dice0ue la soluci/n < de az>car es 2iert/nica en relaci/n a la soluci/n 6. or el contrario, la soluci/n 6 es2iot/nica en relaci/n a la soluci/n < azucarada, es decir 0ue la concentraci/n del soluto es menor enrelaci/n con el otro medio. una soluci/n isot/nica, se cuando la concentraci/n de soluto es igual a la

concentraci/n de soluto de la otra soluci/n.

77. OB4587VO.


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Soluci/n 2iert/nica NaCl al


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So$u!i%" de Sa$ Agua de !a5o Agua des&i$ada

6ue*o


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PRACTICA N° 5

PRIMERA PARTE* OBSERVACIÓN DE MOVIMIENTO CELULAR. CICLOSIS

7. +9N3!M5N8O5l citolasma celular esta %ormado or el 2ialolasma # el mor%olasma. 5l 2ialolasma es un medio

acuoso, con un JF de agua en el cual esta disuelta gran cantidad de moléculas %ormando una soluci/ncoloidal r/tidos (!!, enzimas, rotenas estructurales), lidos, gl>cidos (olisacáridos, meta;olitos),ácidos nucleicos (nucle/tidos, nucle/sidos, !3N, !$N, !$Nt, !$Nr) sales e iones.

5l 2ialolasma es un medio dinámico, #a 0ue uede asar del estado de sol a gel acumulandomoléculas 0ue esta;lecen enlaces entre si # aumentando la iscosidad ueden inertirse el rocesoasando el 2ialolasma a sol al diluirse 2asta 0ue se searan las moléculas, esto ermite la creaci/n decorrientes internas o Ciclosis # algunas células ueden emitir rolongaciones del citolasma oS593OO3OS como /rganos de deslazamiento.

77. OB4587VOS

mero en células animales ero tam;ién ueden resentarse en células egetales, mientras0ue los clorolastos son e1clusios de células egetales # algunas ;acterias %otosintéticas. Las


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mitocondrias o1idan moléculas orgánicas utilizando o1geno del aire como acetor de electrones # %orman !8. Los clorolastos caturan energa de la luz # la trans%orman en !8 mediante el roceso denominado%otosntesis.

77. OB4587VOS


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PARTE PRACTICA

6. 3i;u-e # coloree las distintas muestras o;seradas en la ráctica. Mencionando el aumento total.

Mue!tra*+++++++++ Mue!tra*+++++++++ C-4-rac.,*+++++++

C-4-rac.,*+++++++ Au3e,t-*++++++++Au3e,t-*++++++++

Mue!tra*+++++++++ Mue!tra*+++++++++ C-4-rac.,*+++++++C-4-rac.,*+++++++

Au3e,t-*++++++++ Au3e,t-*++++++++


C-4-rac.,*+++++++ Au3e,t-*++++++++Au3e,t-*++++++++


$O+5SO$


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PRACTICA Nº 6

ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

PRIMERA PARTE* CATALASA

I1 FUNDAMENTO

La! e,03a! !-, pr-teí,a! cu5a 6u,c., e! ace4erar cata40arJ reacc-,e! 7uí3ca! 7ue-curre, de,tr- de 4a c24u4a 5 7ue e, au!e,ca de e44a! ,- !e 44e:aría, a ca9- - de 4-c-,trar- t-3aría, 3ucí!3- te3p-1 C-3- !e apreca e, 4a !/ue,te /ura) 4a! e,03a!!-, e!pecíca! para !u! !u!trat-!) 4-! cua4e! 7ueda, u,d-! c-3p4e3e,tara3e,te a4 !t-de u,., de 4a e,03a d-,de !-, 3-dcad-! e,03átca3e,te) 49erá,d-!e a4 ,a4 de 4areacc., 4-! pr-duct-! re!pect:-!1

La cata4a!a e! u,a e,03a 7ue !e e,cue,tra e, 4a! c24u4a! de 4-! ted-! a,3a4e! 5:e/eta4e!1 La 6u,c., de e!ta e,03a e, 4-! ted-! e! ,ece!ara p-r7ue dura,te e4

3eta9-4!3- ce4u4ar) !e 6-r3a u,a 3-42cu4a t.=ca 7ue e! e4 per.=d- de dr./e,-) H$O$a/ua -=/e,adaJ1 E!ta e,03a) 4a cata4a!a) 4- de!c-3p-,e e, a/ua 5 -=í/e,-) p-r 4- 7ue !e!-4uc-,a e4 pr-94e3a1 La reacc., de 4a cata4a!a !-9re e4 H$O$) e! 4a !/ue,te*

77. OB4587VO.


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' Se -9!er:ará u, ,te,!- 9ur9ue- de9d- a4 de!pre,d3e,t- de -=í/e,-18 D!cutr 4a 6-r3ac., de 9ur9ua! e, d!t,ta! 3e!a!) re4ac-,á,d-4- c-, 4a c-,ce,trac.,de cata4a!a1

()N, ,*)$ HIDROLISIS DE LA AMILASA

7. +9N3!M5N8O

Mediante esta e1eriencia amos a er la act:dad de -tra e,03a, la amilasa o tialina)pre!e,te e, 4a !a4:a1 E!ta e,03a acta !-9re e4 p-4!acárd- lmid#n) dr-40a,d- e4 e,4aceO(/4c-!ídc-) p-r 4- 7ue e4 a43d., !e ter3,ará p-r tra,!6-r3ar e, u,dade! de /4uc-!a1 E!3p-rta,te 7ue recuerde! 4a! reacc-,e! caracterí!tca! de /4cd-! para c-3pre,der e!tae=pere,ca1

II1 OBETI?OS1 C-3pr-9ar 7ue !.4- 9a- certa! c-,dc-,e! 4a! e,03a! 6u,c-,a,.pt3a3e,te cata40a,d- u,a reacc., e,03átca c-, !u !u!trat-1

III1 MATERIALES

E,c-,trará! e, e4 4a9-rat-r-1( tu9-! de e,!a5- ( Ba- 3aría(/rad44a! ( ?a!- de precptad-!(!-4uc., d4uda de a43d., 5 !acar-!a ( Lu/-4

7V. MD8O3OS

6. oner en una gradilla cuatro tu;os de ensa#o, numerados del 6 al @.


32/56

++++++++++++++++++++++++ ++++++++++++++++++++++++

ACTI?IDAD DE AMILASAA,-te !u! -9!er:ac-,e! 5 De,a c-,tr-4 de reacc., 5 te3peratura -pt3a

++++++++++++++++++++++++

++++++++++++++++++++++++++

++++++++++++++++++++++++++

++++++++++++++++++++++++++

++++++++++++++++++++++++++


$O+5SO$


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PRACTICA Nº 7METABOLISMO ANAEROBIO: FERMENTACIÓN

ALCOHÓLICA

7. +9N3!M5N8O

La resiraci/n celular es el roceso mediante el cual se o1idan moléculas energéticas (glucosa,rincialmente), emleando al o1geno como acetor %inal de electrones, # o;teniendo gran cantidad deenerga ara la realizaci/n de las %unciones celulares ;ásicas.

La %ermentaci/n, or el contrario, es un roceso anaer/;io 0ue imlica la rutura de alimentos or un roceso de degradaci/n 0umica 0ue no re0uiere o1geno. Los alimentos no son degradadoscomletamente 2asta CO


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77. OB4587VOS

car es o1idado 2asta CO


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DESARROLLO

6. Comlete el di;u-o # la ta;la. .

CO$

/4uc-!a

pHeta,-4

&bser"iones$


$O+5SO$


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37/56

PRACTICA Nº

37V7S7:N C5L9L!$ ITOSIS

7. +9N3!M5N8O

5l ciclo celular es un roceso 0ue consiste en la relicaci/n de material genético # %ormaci/n decélulas 2i-as. Comromete dos etaasA La rimera llamada inter%ase, donde no ocurre diisi/n celular roiamente dic2a # la segunda de diisi/n celular (er %igura). 3eendiendo del tio de células donde sellee a ca;o, la diisi/n celular toma el nom;re de Mitosis (si ocurre en células somáticas) o Meiosis (siocurre en células germinales).

La mitosis imlica cuatro etaasA ro%ase, Meta%ase, !na%ase # 8elo%ase. 5nlas dos rimeras ocurre la condensaci/n # ordenamiento de loscromosomas # en las dos >ltimas se llea a ca;o la distri;uci/n de loscromosomas. 5l resultado %inal son dos células 2i-as diloides (


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7V. $OC537M75N8O

Con J das de anticiaci/n a la ráctica rearar el cultio de ce;olla de la siguiente maneraA 5nun aso con agua, de re%erencia de ;orde oscuro, colocar una ce;olla mediana de tal manera 0ue 2agacontacto la arte terminal de la ce;olla con el agua # de-ar en lugar semioscuro.

rearaci/n de la Muestra

6 3isoner de gran n>mero de races de ce;olla, 2aciendo cortes de la arte terminal(aro1imadamente de .Fcm.) # deositar en una laca etri.

< Colorear con orcena or 6 minutosA contiene orcena ! 0ue interrume el roceso si se está dandoen ese momento # re;landece la uni/n de las células muertas, as como orcena B 0ue ti*e lacromatina o material 2ereditario.

= Luego calentar la muestra s/lo 2asta 0ue emane aores or < eces consecutias con interalos deen%riamiento.

@ 8rasladar las races a di%erentes ortao;-etos, searar solo el áice (arte terminal de la raz) #agregar una gotita de orcena # cu;rir con el cu;reo;-eto.

F !retar la muestra suaemente con la #ema de los dedos. Secar el e1ceso de colorante con ael secante # llear al microscoio ara su o;seraci/n a menor

# ma#or aumento.

7nter%ase ro%ase 8emrana ro%ase 8arda Meta%ase !na%ase 8emrana

!na%ase 8arda 8elo%ase 8emrana 8elo%ase 8arda Citocinesis


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DESARROLLO

&1( d9ue 4a! 3ue!tra! -9!er:ada!1

Mue!tra*+++++++++ Mue!tra*+++++++++

C-4-rac.,*+++++++C-4-rac.,*+++++++ Au3e,t-*++++++++Au3e,t-*++++++++


C-4-rac.,*+++++++ Au3e,t-*++++++++Au3e,t-*++++++++

Mue!tra*+++++++++ Mue!tra*+++++++++

C-4-rac.,*+++++++C-4-rac.,*+++++++ Au3e,t-*++++++++

Au3e,t-*++++++++


$O+5SO$


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PRÁCTICA N°!

.ECUNDACI7N

I8 .UNDAENTO

La %ecundaci/n es el roceso de uni/n del /ulo # el esermatozoide, # en irtud de la cual seorigina el cigoto o célula 2ueo. La %ecundaci/n en la esecie 2umana es interna, ues se llea a ca;oen el interior del aarato reroductor de la 2em;ra, concretamente en las tromas de +aloio.

5n esta ráctica se o;serará el roceso de %ecundaci/n entre un gameto masculino(esermatozoides) # un gameto %emenino (oulo), de erizo de mar. Se odrán o;serar los gametos oCélulas reroductoras masculina # %emenina, cu#o n>cleo s/lo contiene uno de cada ar de cromosomas2omologos en una célula somática.

5l %*u$o es una célula redonda de gran tama*o. osee un n>cleo donde se alo-an loscromosomas ortadores de la in%ormaci/n genética materna, # un citolasma 0ue osee sustanciasnutritias ara alimentar al em;ri/n en sus rimeras etaas, en el caso de 0ue ocurra la %ecundaci/n.

5l esperma&o/oide, o gameto masculino, es una célula e0ue*a con caacidad de moimientoara oder alcanzar al /ulo.

Seg>n donde se encuentren el esermatozoide # el /ulo, e1isten dos tios de %ecundaci/nA

a) +ecundaci/n E9TERNA, cuando tanto el mac2o como la 2em;ra li;eran sus gametos al medioe1terno, 0ue es el agua, de manera 0ue los esermatozoides nadan en el agua 2asta encontrar a los/ulos. 5s lo tico de todos los animales inerte;rados acuáticos, # en los erte;rados se da en loseces # en los an%i;ios.

;) +ecundaci/n INTERNA, cuando el mac2o deosita sus esermatozoides en el interior de la 2em;ra, #se mueen or el organismo de la 2em;ra 2asta encontrar al /ulo. 5n el erizo de mar no 2a#dimor%ismo se1ual de modo 0ue e1ternamente no se les uede di%erenciar a las 2em;ras de los

mac2os. Las g/nadas %emeninas son de color ro-o inoso # las g/nadas masculinas son de color amarillo grisáceo. 5n am;os casos se encuentran en las zonas interam;ulacrales (celoma) u;icado


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en el interior del 2emis%erio suerior. ! traés de las glándulas genitales (F), las g/nadas secomunican al e1terior mediante el oro genital, or donde son derramados los 2ueos. La%ecundaci/n es e1terna or0ue los gametos se encuentran %uera de la caidad genital # el /ulo se%ecunda e1ternamente.

II8 OB:ETIVOS

7denti%icar gametos masculinos # %emeninos en erizo de mar. 5idenciar el roceso de la %ecundaci/n.

III8 ATERIALES

5ncontrarás en el la;oratorio Microscoio

laca etri ieta Bagueta8raer el alumno ortao;-etos Cu;reo;-etos 'oteros Materiales de disecci/nA ti-era, inza,estilete. 5rizos de mar VIVOS en ;aldes con taa # con agua de mar

IV8 0ROCEDIIENTO

4818 O#&e"!i%" de 7*u$os ; Esperma&o/oides

6. 9sando el material de disecci/n, cortar las >as del erizo a niel del ecuador todo el contorno radial eintroducir la unta de la ti-era ara er%orar # cortar transersalmente el caaraz/n or la zonacortical, o;teniendo < mitadesA el a;oral # el entral en el a;oral (lado suerior) en las lacasinterradiales (F) del celoma es donde se encuentra las g/nadas en sus resectias masas genitalesde color crema ara los M!CHOS # ro-o inoso ara las H5MB$!S.


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4828 o"&a-e ; o#ser*a!i%" de game&os

6. Colocar en un ortao;-eto, una gota de la muestra con /ulos # o;serar su %orma # color


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PRACTICA Nº 1"

PRIMERA PARTE* EXTRACCIÓN DE ADN

I1 FUNDAMENTO

E4 ADN e! u, p-4í3er- de de!-=r9-,uc4e.td-!) 7ue e, eucar-te! e! e4 c-3p-,e,tede 4a cr-3at,a - 3atera4 /e,2tc-1 E, 4a cr-3at,a e4 ADN !e e,cue,tra a!-cad- apr-teí,a! c-,-cda! c-3- ,uc4e-pr-teí,a! de tp- !t-,a!) pr-ta3,a! 5 e, 3e,-rpr-p-rc., c-, pr-teí,a! de tp- ácda!1 Para e=traer e4 ADN !, arra!trar !u! pr-teí,a!a!-cada! !e p-dría e3p4ear !-4uc-,e! ácda!1 S, e39ar/-) 2!ta! !-4uc-,e! p-dría, daar4a e!tructura de 4a e9ra) de 3-d- 7ue !e preere e3p4ear !-4:e,te! -r/á,c-! c-3-c4-r-6-r3-) e4 cua4 e=trae pr-teí,a! dea,d- ,!-4u94e a4 ADN1

La e=tracc., de ADN de u,a 3ue!tra ce4u4ar !e 9a!a e, e4 ec- de 7ue 4-! -,e!!a4,-! !-, atraíd-! aca 4a! car/a! ,e/at:a! de4 ADN) per3te,d- !u d!-4uc., 5p-!ter-r e=tracc., de 4a c24u4a1 Se e3pe0a p-r 4!ar r-3perJ 4a! c24u4a! 3eda,te u,deter/e,te) :acá,d-!e !u c-,te,d- 3-4ecu4ar e, u,a d!-4uc., ta3p., e, 4a 7ue !ed!ue4:e e4 ADN1 E, e!e 3-3e,t-) e4 ta3p., c-,te,e ADN 5 t-d- u, !urtd- de re!t-!3-4ecu4are!* ARN) car9-drat-!) pr-teí,a! 5 -tra! !u!ta,ca! e, 3e,-r pr-p-rc.,1

La! pr-teí,a! a!-cada! a4 ADN) de /ra, 4-,/tud) !e a9rá, 6racc-,ad- e, cade,a!3á! pe7uea! 5 !eparada! de 24 p-r acc., de4 deter/e,te1 S.4- 7ueda) p-r ta,t-) e=traer e4ADN de e!a 3e0c4a de ta3p., 5 deter/e,te1

La !ecue,ca /e,era4 de e=tracc., e! 4a !/ue,te*

& L9erac., de4 ADN e, 6-r3a !-4u94e p-r 3ed- de 4a de!trucc., de 4-! !!te3a!3e39ra,-!-! de 4-! ted-! 3e39ra,a ce4u4ar 5 ,uc4earJ1

$ Separac., de 4-! c-3p4e-! de ,uc4e-pr-teí,a p-r de,aturac., de 4a parte pr-teca1' Separac., de4 ADN de 4a! -tra! 3acr-3-42cu4a! p-r !-4u94dad d6ere,ca41


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8 Precptac., de4 ADN p-r ,!-4u94dad e, a4c--4 5 9aa! te3peratura!1

II1 OBETI?OS

& E4 -9et:- 6u,da3e,ta4 de e!ta práctca e! ut40ar u,a! !e,c44a! t2c,ca! para p-dere=traer e4 ADN de u, ted- a,3a4 5 p-r e4 a!pect- 7ue pre!e,ta) c-,r3ar !u e!tructura

9r4ar1$ A partr de 4a 4-,/tud e,-r3e de 4a! 9ra! ta392, !e c-,r3a 7ue e, e4 ,c4e- e4 ADN!e e,cue,tra rep4e/ad-1

III1 MATERIALES

E,c-,trará! e, e4 4a9-rat-r-*6 ( $ Tu9-! de prue9a de $% 34 ( ?a!- de precptac., de ;%%341< F Baguetas= 6 em;udo Medio de 2omogenizaci/nA@ 5tanol 2elado Lauril Sul%ato de Sodio (S3S o Hielo SLS) F g6 F ietas de 6ml Cloruro de Sodio J. II g

< Ba*o Mara Citrato de Sodio @.66 g% ( M-rter- c-, p4., ( EDTA %1$$ /& ( Ga!a e!ter4

I?1 PROCEDIMIENTO

Para 4a e=tracc., DE ADN de4 3a,t- de c-r-) c-, eta,-4) !e/ure3-! 4-! !/ue,te! pa!-!1

81&1 H-3-/e,0ac., de4 Ted-

E4 32t-d- para de!,te/rar e4 ted- de9e e!tar adaptad- a 4a! caracterí!tca! de

2!te1 Para /ra,de! :-43e,e! de ted-! 94a,d-!) !ue4e, u!ar!e 4cuad-ra! e!e,ca43e,te/ua4e! a 4a! 4cuad-ra! d-32!tca!1 Para :-43e,e! 3e,-re!) e, /e,era4 e! !uce,te u,MORTERO 5 u, p4.,1

Ted-! 3á! re!!te,te!) c-3- p-r ee3p4- ue!- - de,te) ,ece!ta, trata3e,t-!3ecá,c-! e!peca4e!1 A7ue44-! ted-! c-, c24u4a! cu5a pared ce4u4ar e! re!!te,te) c-3-p-r ee3p4- :e/eta4e!) -,/-! - 9actera!) re7uere, ta392, c-,dc-,e! drá!tca!1 U,- de4-! 32t-d-! 3á! ut40ad-! c-,!!te e, c-,/e4ar 4a 3ue!tra e, ,tr./e,- 4í7ud- 5)3a,te,2,d-4a c-,/e4ada) pu4:er0ar4a c-, u, 3-rter-1 A!í) ade3á! de de!,te/rar 4a3ue!tra) !e 4-/ra 7ue 2!ta !e 3a,te,/a a 3u5 9aa te3peratura dura,te e4 trata3e,t-)c-, 4- cua4 !e e:ta 4a acc., de e,03a! e,d./e,a! 7ue pudera, de/radar e4 3atera4 de,ter2!1

E, e!ta práctca !e e3p4eará u, 32t-d- de ruptura c-, 3-rter- !, c-,/e4a3e,t-J1La pr,cpa4 :e,taa de e!te 32t-d- e! 7ue !e adapta 9a!ta,te 9e, a ted-! 3u5 d:er!-!1A!3!3-) dad- 7ue !e -pera a te3peratura a39e,te) 4a! r9-,uc4ea!a! ce4u4are! puede,de/radar parca43e,te 4a! 3-42cu4a! de ARN1 Para a5udar a 4a !-4u940ac., de 4-!c-3p-,e,te! ce4u4are!) a 4a ruptura de 3e39ra,a! 5 de c-3p4e-! pr-t2c-!) 4a !-4uc., de4!! c-,te,drá u, deter/e,te .,c- d-dec4!u46at- de !-d-) SDSJ1 E!te deter/e,te d!per!a4-! c-3p-,e,te! de 4a! 3e39ra,a! 5 de!,atura40a 4a! pr-teí,a!1

La !-4uc., de 4!! c-,te,e ade3á! e4 a/e,te 7ue4a,te de cat-,e! d:a4e,te!) EDTA1E!t-

3pde 4a acc., de 4a! ADNa!a! depe,de,te! de M/$ J) au,7ue ,- te,e e6ect-! !-9re 4a3a5-r parte de 4a! r9-,uc4ea!a!1

Se/ur 4-! !/ue,te! pa!-!*


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& La! c24u4a! !e -3-/e,0ará, e, u, 3-rter- e3p4ea,d- e4 3ed- de -3-/e,0ac.,1 ESOBLIGATORIO e4 u!- de /ua,te! e, t-d- 3-3e,t- para e:tar 4a c-,ta3,ac., de 4a3ue!tra c-, DNAa!a pr-:e,e,te de4 !ud-r de 4a! 3a,-! 7ue pueda de/radar ,ue!tra!3ue!tra! de ADN1

$ Se 4!ará, 4a! c24u4a! a/re/a,d- &% 34 de 4a !-4uc., de -3-/e,0ac., p-r cada /ra3-de ted- c-, 7ue !e ,c. e4 pr-ce!-1 L-! c-3p-,e,te! c-3- e4 SDS) per3trá p-r u,a

parte 4a !eparac., de 4a! pr-teí,a! a!-cada! a 4a cr-3at,a 5 p-r -tra parte 4a rupturade 3e39ra,a!1 E4 NaC4 pr-duce e4 e!ta44d- de 4-! ,c4e-! para 49erar a!í 4a! 9ra! decr-3at,a1 E4 EDTA e! u, a/e,te 7ue4a,te 7ue ,act:a a 4a! DNAa!a!1

' I,cu9ar 4a 3e0c4a e, u, Ba- María a


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de 4a 3-42cu4a 7ue !e ,:e!t/a) 5 a4/u,a! -tra! e!tá, 9a!ada! e, d6ere,ca! e, pe!-!3-4ecu4are! - car/a! ,eta!) - a :ece! u,a c-39,ac., de 4a! d-! pr-pedade!1 L-!32t-d-! e4ectr-6-r2tc-! puede, d!ear !e para e=p4-tar cua47uera de 4-! d-!) - a39-!pará3etr-!) au,7ue 4a! d6ere,ca! e, ta3a- !-, 4a! pr,cpa4e! e, e4 ca!- de 4a!!eparac-,e! de ácd-! ,uc4ec-!1

La e4ectr-6-re!! e, /e4e! de a/ar-!a e! u,a t2c,ca c-3, e, 4-! 4a9-rat-r-! de

B-4-/ía M-4ecu4ar1 E4 pr-ce!- c-,!!te e, 4a ap4cac., de u,a d6ere,ca de :-4tae a u,a3ue!tra de ADN 7ue !e e,cue,tra ,3er!a e, u, /e4 de a/ar-!a) 5 e!ta a !u :e0 e, 9aadap-r u, 9uer deter3,ad-1 La /e,erac., de p-4-! -pue!t-! pr-:-ca 4a 3/rac., de4 ADNde4 p-4- car/ad- ,e/at:a3e,te Cát-d-J a4 p-4- car/ad- p-!t:a3e,te A,-d-J) de9d- a7ue e4 ADN te,e u,a car/a ,eta ,e/at:a1

L-! /e4e! de a/ar-!a !-, e4 3ed- 3á! p-pu4ar para !eparac-,e! e4ectr-6-r2tca! deácd-! ,uc4ec-! de 3eda,- 5 /ra, ta3a-1 La! c-,ce,trac-,e! 3á! típca! de a/ar-!a:a, de %1' a!ta $1; Q) 5 e!ta c-,ce,trac., depe,de de 4-! ta3a-! de 4-! ácd-!,uc4ec-! a !eparar1 Au,7ue 4-! /e4e! de a/ar-!a carece, de 6uer0a 3ecá,cae!peca43e,te 4-! 3á! d4ud-!J) 4a 3a,pu4ac., !e 6ac4ta p-r e4 u!- de /e4e! -r0-,ta4e!)4-! cua4e! puede, !er !-p-rtad-! p-r 4á3,a de :dr- - de p4á!tc-

E4 /e4 re!u4ta,te e! 6-t-/raad- e, u, aparat- 44a3ad- tra,!4u3,ad-r) pre!e,ca de9r-3ur- de etd-) para p-,er e, e:de,ca 4-! 6ra/3e,t-! de ADN e, e4 /e41 E, 4a pre!e,tepráctca a,a40are3-! 4a 6-t-/ra6ía de u, /e4 de a/ar-!a 5 -9!er:are3-! 4a! d!t,ta!9a,da! de ADN 7ue e, 24 aparece,) d!cute,d- 4a ra0., p-r 4a! 7ue u,a! aparece, 3á!arr9a 7ue -tra!1 Rea40are3-! u, a,á4!! c-3- e4 7ue !e ace e, e,!a5-! de da/,.!tc-3-4ecu4ar 5 de c4-,ac.,1

II1 OBETI?OS

(C-3pr-9ar 4a 3-:4dad de4 ADN e, u, /e4 de a/ar-!a(A,a40ar 4a ut4dad de e!ta t2c,ca e, e,!a5-! de 9-4-/ía 3-4ecu4ar ap4cada

III1 MATERIALES # MÉTODOS

A,a40are3-! 4a !/ue,te Lá3,a de u, /e4 de a/ar-!a 5 d!cutre3-! cuá4 e! e4!/,cad- 5 4a ,terpretac., de e!a! 9a,da! e, e4 /e41

DESARROLLO

&1( D9ue !u! re!u4tad-!


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$1(D!cuta 5 re!ue4:a 4-! !/ue,te! e,u,cad-!

E, e4 /e4 aparece, ' carr4e! - ca44e!) cada u,- c-, u,a 3ue!tra d!t,ta M) & 5 $J1 L-!p-c44-! !-, ec-! e, e4 /e4 para ,tr-ducr aí 4a 3ue!tra de ADN1

6 7u2 a5 e, e4 pr3er carr4 ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++< e, 4a 3ue!tra &) 7u2 ta3a- apr-=3ad- te,e, 4a! 9a,da! de ADN +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ = p-r 7u2 aparece RNA e, a4/u,a! ,ue!tra! 5 p-r 7u2 aparece ta, a9a-) c-3parad- a4ADN +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ @ 7u2 !/,cad- te,e 7ue a4/u,a! 9a,da! !ea, 3á! /rue!a! 7ue -tra!

+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ F 7u2 u9era e!perad- e,c-,trar ! c-rría u, /e4 c-, !u ADN rec2, e=traíd- D9ue4-1 ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ


$O+5SO$

1 2


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PRACTICA Nº 11CÓDIGO GENÉTICO Y TRADUCCIÓN DE PROTEÍNAS

I8 .UNDAENTO

5l roceso de traducci/n, es decir, sntesis de novo de rotenas, ocurre en el citolasma,esec%icamente en los ri;osomas del retculo endolasmático rugoso (en 2umanos). La sntesis de unarotena re0uiere 0ue reiamente el !$Nm de ese gen 2a#a sido transcrito en el n>cleo # e1ortado alcitolasma. !0u el !$Nm, 0ue contiene la in%ormaci/n genética necesaria ara codi%icar la rotena, seasociará a los ri;osomas del $5$ # con la interenci/n de una comle-a ma0uinaria roteica as comode los !$Nt esec%icos ara cada aminoácido, se lleará a ca;o la traducci/n.


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5l !$Nm orta los codones, triletes de nucle/tidos, 0ue codi%ican ara un aminoácido. Mientras0ue los !$Nt ortan los anticodones, 0ue le indican 0ué aminoácido an a ortar # llear 2asta elcomle-o !$Nmri;osomasenzimas. 5l c/digo genético es la com;inaci/n de triletes 0ue tienen lain%ormaci/n necesaria ara codi%icar un aminoácido. 51isten @ codones en el c/digo genético, 0uecodi%ican ara los


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IV8 mero de codones de inicio ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ ;. n>mero de codones de %inalizaci/n ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ c. aminoácidos codi%icados or 6 s/lo cod/n ZZZZZZZZZZZZZZZZZZ d. aminoácidos codi%icados or < codones ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ e. aminoácidos codi%icados or más de = codones ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ %. X0ué cam;ios se 2an roducido en el c/digo genético de mitocondrias en 2umanosY ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ g. Lista de aminoácidos esenciales # no esenciales


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ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ

4828 Dis!u&a !o" su pro)esor ; respo"daXor 0ué algunos aminoácidos son codi%icados or 6 s/lo cod/n mientras 0ue otros son codi%icados or< o más codonesY

ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ

4838 Los siguie"&es pro#$emas de#er+" ser so$u!io"ados e" !$ase !o" a;uda de$ pro)esor

Primer problema: Transcripción y traducciónSe tiene la siguiente secuencia de !3N (cadena codante) 0ue es arte del gen detrans%errina.

F^ !8''C!8CC8!C'!8C!'8!8CC8!8!C'C =^ ___ (5L '5N CON87N`!)

3etermineA

6. la secuencia no codante del resectio trozo del gen ZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ


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PRACTICA Nº 12

5S8937O 35 $!S'OS '5ND87COS 5N 5LHOMB$5

7. +9N3!M5N8O

Las caractersticas de un organismo son el resultado de la 2erencia # de la interacci/n de losgenes. Los rinciios de la genética esta;lecidos or Mendel # Morgan # otros inestigadores se alicana todos los organismos iientes, incluido el 2om;re.

3e la misma manera 0ue en otros, algunos rasgos 2umanos son determinados or genesdominantes # otros or genes recesios. Lo rasgos dominantes generalmente se encuentran con ma#or %recuencia 0ue los 0ue se de;en a genes recesios. 5n la transmisi/n de la ma#ora de los caracteres2ereditarios, están inolucrados arios genes, ero a menudo la ariaci/n de un solo gen, roduce laariaci/n de una sola caracterstica lo 0ue da lugar a dos %ormas distintas de e1resi/n.

!lgunos genes (# su mani%estaci/n) están ligados al se1o, es decir 0ue la caracterstica resectias/lo se e1resa en uno de los se1os. +recuentemente el masculino (2emo%ilia or e-emlo). 5n este casoel gen en cuesti/n se encuentra localizado en el cromosoma (el cromosoma se consideraTgenéticamente acoU). 5n otros casos la mani%estaci/n genotica es in%luenciada or el otro se1o (.e.calicie, es dominante en el ar/n # recesio en la mu-er).

5n este caso los genes resectios están localizados en un cromosoma autos/mico, ero su

e1resi/n esta condicionada a la acci/n secundaria de genes u;icados en el cromosoma .

77. OB4587VOS

6. 3eterminar el %enotio (e1resi/n de las caractersticas) # su ro;a;le genotio (7n%ormaci/n genéticaen el cromosoma resectio) tanto como sea osi;le.


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=. 8a;ule en la 2o-a de tra;a-o el n>mero de alumnos con cada rasgo genético estudiado 3ON35 S57NCL9!A rasgo estudiado, genes inolucrados, dominancia o recesi/n, estado del gen e1resado(2omocigoto o 2eterocigoto), etc.

$!S'OS '5N587COS ! S5$ 5S8937!3OS

7N355N375N85S 35L S5O

6. 5nrollar la lenguaA algunas ersonas tienen la atitud de enrollar la lengua en %orma de 9. 5sto escausado or un gen dominante (5). La gente 0ue no osee este gen s/lo uede curar la lengualigeramente 2acia a;a-o.

a en el elo.

@. Me*i0ue do;lado 2acia adentroA 9n gen dominante (B) 2ace 0ue la >ltima %alange del me*i0ue se%le1ione 2acia el dedo anular. 3escanse am;as manos tendidas so;re la mesa, rela-e los m>sculos #o;sere si su me*i0ue está %le1ionado o recto.

F. 7ris igmentadoA Cuando una ersona es 2omocigota ara cierto gen recesio () no 2a# igmento enla arte anterior de los o-os # en cam;io se muestra una caa azul detrás del iris. 5sto determina 0uelos o-os sean azules. 9n alelo dominante de este gen () 2ace 0ue el igmento se deosite en lacaa anterior del iris # enmascara el color azul en grado aria;le. Otros genes determinan lanaturaleza # densidad e1actas de este igmento, originando los o-os ardos, ioleta, erde # otroscolores. NotaA !lgunas eces la caa detrás del iris es gris # esto de;erá considerarse como noigmentado.

. elo de la %alange mediaA algunas ersonas tienen elo en la segunda %alange de la mano mientrasotras ersonas no. La ausencia comleta del elo en todo, se de;e a un gen recesio (m) # suresencia se de;e a su alelo dominante (M). arece 0ue 2a# un n>mero aria;le de estos alelos 0uedeterminan si el elo de;e crecer en uno, dos, tres o cuatro dedos. 5ste elo uede ser mu# %ino #será necesario usar una lua # mirar cuidadosamente en todos los dedos, antes de decidir si estáausente en alguno de los dedos.

I. M>sculo almar largoA Cuando una ersona es 2omocigota ara cierto gen recesio (l), resenta unm>sculo almar largo, el cual uede ser detectado e1aminando los tendones 0ue corren en la carainterna del ante;razo (altura de la mu*eca) cierre el u*o %uertemente # do;le la mano 2acia delante.ale los tendones. Si 2a# tres, usted tiene el m>sculo almar largo. Si solo 2a# dos (el medial másgrande no e1iste) usted no tiene este m>sculo. 51amine am;as mu*ecas ues a eces está resenteen un ;razo # no en el otro, a causa de las ariaciones en la e1resi/n de los genes. Si lo encuentra

en uno o am;os ;razos, osee dos genes recesios. Si no está resente en am;as mu*ecas tiene elgen dominante (L).

J. +orma del ca;elloA la %orma natural del ca;ello de una ersona uede ser lacia, ondulada o cresa,con ariantes intermedias. 5l mecanismo or el cual se origina la %orma del ca;ello es algo comle-o,ero uede asumirse 0ue los resonsa;les de esta caracterstica son un ar de genes condominancia incomleta. !sumiendo 0ue la %orma de su ca;ello no 2a sido modi%icada or tratamientoarti%icial, anote el genotio resectio seg>n el siguiente c/digoA

CCR ca;ello cresoCcR ca;ello onduladoccR ca;ello lacio.

. ulgar desarticula;leA algunas ersonas tienen la 2a;ilidad de desarticular las %alanges de sus dedosulgares, a causa de 0ue los ligamentos de esta articulaci/n son sumamente %lo-os, caracterstica 0ue


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es dominante so;re ligamentos %irmes. 5sta circunstancia ermite retirar el dedo ulgar 2acia atrássacándolo de su articulaci/n. 5nsa#e la osi;ilidad de desarticular el ulgar de cual0uiera de susmanos S7N a#uda de la otra mano e identi%i0ue su genotio resectio asA 44 o 4- R ulgar desarticula;le -- R ulgar no desarticula;le.

6. Color del ca;elloA el color del ca;ello es determinado or la interacci/n de un gran n>mero de%actores sin em;argo, si consideramos solo las ma#ores categoras de color cailar, estas ueden

e1licarse or la interacci/n de dos ares de genes (2erencia di2i;rida)A (3Z) igmento ardoresente, (dd) igmento ardo ausente, (rr) igmento ro-o resente. 3e acuerdo con la le# de ladistri;uci/n indeendiente, un indiiduo cual0uiera uede tener alguna de las siguientescom;inaciones de genes # colorA

33$$, 33$r, 3d$$ A ca;ello oscuro (negro)3d$r, 3drr, 33rr A ca;ello casta*o u oscuro con tintes ro-izosdd$r A ca;ello ru;io3r. A ca;ello claro (color arena)

7N+L95NC7!3OS O$ 5L S5O

66. Segundo dedo más corto 0ue el cuartoA mantenga sus dedos -untos # onga sus manos so;re una2o-a de ael, de modo 0ue sus dedos descansen en ángulo recto con una lnea 2orizontal, 0ue usted2a trazado antes so;re el ael. Muea su mano 2acia arri;a o 2acia a;a-o 2asta 0ue el e1tremo delcuarto dedo (anular) to0ue escasamente la lnea. Mire su segundo dedo (7ndice) # ea si toca lalnea.si no lo 2ace el segundo dedo es más corto 0ue el cuarto. Se cree 0ue este segundo dedo máscorto es el resultado de un gen in%luenciado or el se1o del indiiduo. Seg>n esto el gen es dominanteen lo arones # recesio en las mu-eres. Sc ara el gen corresondiente al segundo dedo corto Slara el gen corresondiente ara el segundo dedo largo.

6n el siguiente cuadroA

'enotios +enotiosVar/n Mu-er

VV Ba-o ContraaltoV Bartono Meso sorano 8enor Sorano

6=. CalicieA esta es otra caracterstica in%luenciada or el se1o # es controlada tam;ién or un ar dealelos. !un0ue esta caracterstica no suele mani%estarse antes de los = a*os, sus osi;ilidadesersonales de calicie ueden resumirse or la resencia o ausencia de esta caracterstica entre losmiem;ros ma#ores de su %amilia tanto or la lnea materna o aterna. 5sta;lezca su ro;a;legenotio guiándose or el siguiente cuadroA

'enotios +enotiosVar/n Mu-er

HH calo calaH2 calo normal22 normal normal


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L7'!3OS !L S5O

6@. Ceguera ara el color (daltonismo)A tio más com>n de daltonismo es 2eredado como carácter recesio ligado al se1o. uesto 0ue el gen es ortado solamente or el cromosoma es necesarioindicar el cromosoma al eseci%icar el genotio. Son osi;le genotios # %enotiosA

+enotios 'enotiosMu-er Var/nNormal Nn N

3alt/nico nn n

DESARROLLO

NOMB$5AZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ'$9OAZZZZZZZZZZZ M5S!AZZZZZZZZZZZ +5CH!AZZZZZZZZZ$O+5SO$AZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZZ

6. !note su genotio # %enotio de cada caracterstica ealuada.

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