PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN

CFGS Anatomía Patológica y Citología 51

UNIDAD DIDÁCTICA 12

DESHIDRATACIONES Y ACLARAMIENTOS. 1.- INTRODUCCIÓN. 2.- DESHIDRATACIÓN. 3.- ACLARAMIENTO O LÍQUIDOS INTERMEDIOS. 4.- MÉTODO DE DESHIDRATACIÓN, ACLARAMIENTO E IMPREGNACIÓN.

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1.- INTRODUCCIÓN. Para obtener cortes delgados y uniformes en el microtomo es necesario que las piezas adquieran una dureza determinada, por lo que los tejidos se impregnarán con una sustancia líquida que luego pase a una fase consistente. Este proceso se denomina inclusión. La CELOIDINA y la PARAFINA son las sustancias de inclusión más extendidas, pero ninguna de estas sustancias son miscibles en agua, lo cual obliga no solamente a una deshidratación previa sino, además, a un paso intermedio de un disolvente. 2. DESHIDRATACIÓN. La deshidratación se obtiene en la práctica mediante pasos sucesivos por alcohol de menor a mayor graduación (50º, 70º, 80º, 90º y 100º). Las piezas deben permanecer en la capa superior porque el agua es más pesada que el alcohol y se acumula en el fondo del frasco donde descansa la pieza. Interesará por tanto o bien colgar la pieza o agitar los frascos lo más frecuentemente posible. Si por cualquier motivo es necesario interrumpir la operación de deshidratación durante un cierto tiempo las piezas se dejarán en alcohol de 70º, ya que el alcohol de menos graduación macera y el de más concentración las endurece demasiado. Una deshidratación insuficiente siempre es nociva y, por otra parte, una permanencia demasiado larga en alcohol absoluto altera y endurece las piezas hasta el punto de volverlas quebradizas. También vuelve mayormente frágiles a las piezas un defecto de deshidratación o una insuficiente penetración de la parafina. 3. ACLARAMIENTO O LÍQUIDOS INTERMEDIOS. Una condición indispensable para una buena inclusión en parafina es, además, una buena deshidratación. La eliminación del alcohol utilizado para deshidratar las piezas se realiza por medio de unos líquidos llamados líquidos intermedios y se les deja actuar entre la serie de alcoholes y la impregnación en parafina. Se puede utilizar, Cloroformo, Benzol, Aceite de Cedro, Xilol, etc., los mejores resultados se obtienen con Xilol. Las piezas se dejan en el líquido intermedio según su naturaleza y resultados que deseemos, pues las piezas se vuelven frágiles y quebradizas si permanecen demasiado tiempo en contacto con el Xilol.

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4.- MÉTODO DE DESHIDRATACIÓN, ACLARAMIENTO E IMPREGNACIÓN.

TÉCNICA Después de la fijación:

1º Pasar por AGUA normal para limpiar el Formol. 2º Pasar por ALCOHOL de 50º (30 minutos).

3º Pasar por ALCOHOL de 70º (60 minutos).

4º Pasar por ALCOHOL de 80º (60 minutos).

5º Pasar por ALCOHOL de 96º (30 minutos).

6º Pasar por ALCOHOL de 100º (60 minutos).

7º Pasar por ALCOHOL de 100º (60 minutos).

8º Pasar por ALCOHOL de 100º (60 minutos).

9º Pasar por XILOL (60minutos).

10º Pasar por XILOL (60minutos).

11º Parafina: impregnar en estufa a 65º-70º (60 minutos).

12º Parafina: impregnar en estufa a 65º-70º (60 minutos).