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FUNDAMENTO
Esta prueba esta diseñada para determinar la sensibilidad de una sepa bacteriana frente a los distintos agentes microbianos (antibióticos).
MATERIAL- Cultivo puro de un microorganismo
- Placa de Petri con medio de Muller-Hinton
- Pinzas metálicas finas
- Hisopos estériles
- Discos antibióticos (de 4-6 tipos diferentes)
-Regla milimétrica
RECOMENDACIONES
1.- no tocar nada que vaya a tomar contacto con las muestras biologicas con las manos para evitar contaminaciones.
2.- el material a ser eliminado se debe desechar en contenedores especiales.
3.- todos los materiales o muestras deben estar perfectamente identificados (nombre, grupo, fecha e indicativo de tipo de muestra)
SIEMBRA DEL MICROORGANISMO
Con el hisopo estéril se toma la muestra a ser procesada y lo pasamos por toda la superficie de la placa sin profundizar, esto es para conseguir una siembra llamada en forma de césped o tapiz después tapamos la placa y rotulamos.
COLOCACION DE LOS DISCOS DE ANTIBIOTICO
Ahora con las pinzas previamente esterilizadas –NUNCA CON LAS MANOS- colocamos los discos de uno en uno suavemente sobre la placa sin tocar la superficie con las pinzas y cada disco separado de los anteriores de manera que al finalizar nos quede formado un hexágono.
INCUBACION Y OBSERVACION
Las placas se llevaran a incubar a 37°C durante 24 horas, tras este periodo se recogen las placas y SIN ABRIR se observa el crecimiento bacteriano.
MEDICION DEL HALO DE INHIBICION
Por la parte trasera de la placa y con la regla milimétrica se medirán los halos formados alrededor de los discos y se anotan los resultados.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Las bacterias sensibles al antibiótico no habrán podido reproducirse y por lo tanto no formaran colonias dejando un hueco alrededor del disco
BIBLIOGRAFIA
http://www.cuadernodeciencias.net/2012/05/practica-realizacion-de-un-antibiograma.html
https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-microbiologia/indice/estudio-de-la-sencibilidad-a-antimicrobianos/antibiograma