1. ANTIBIOGRAMA
Dra. Natalia Izurieta Cergneux
PRCTICA NO. 4 - LABORATORIO DE BACTERIOLOGA Y MICOLOGA

2. DEFINICIN
Prueba in vitro que determina la sensibilidad de un microorganismo frente a diferentes antibiticos.
SENSIBLE
RESISTENTE
3. OBJETIVOS
4. MTODOS - ANTIBIOGRAMA
5. 6. CONCENTRACIN INHIBITORIA MNIMA
Es la mnima concentracin de un antimicrobiano que inhibe la multiplicacin y crecimiento visible de una cepa bacteriana en un medio de cultivo.
7. CONCENTRACIN BACTERICIDA MNIMA
Para determinar la CBM se seleccionan tubos donde no haya turbidez y se siembra el contenido en un medio de cultivo slido y se observa si hay o no crecimiento.
LA CBM corresponde a aquella dilucin donde no hay crecimiento bacteriano.
8. CIM Y CBM
CONTROL
SIN AB
AB
AB
AB
AB
AB
S/C
S/C
S/C
S/C
C/C
C/C
C/C
C/C
S/C
C/C
S/C
C/C
9. MTODO DE DILUCION
Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de concentraciones decrecientes de un mismo antibitico.
Se observa el crecimiento de los microorganismos mediante la aparicin de turbidez
10. MTODO DE DIFUSIN
Es el mtodo ms empleado en el laboratorio.
Se trabaja a partir de un microorganismo debidamente aislado e identificado(CULTIVO PURO)
11. MTODO DE DIFUSINPRINCIPIO DEL MTODO
12. 13. SELECCIN DE LAS COLONIAS
Es el paso ms importante.
Se selecciona de 3 a 5 colonias del microorganismo.
14. 15. PREPARACIN DEL INCULO Y ESTANDARIZACIN DE LA SUSPENSIN
En ambos mtodos, la turbidez de la suspensin debe ser estandarizada al estndar 0,5 de McFarland (que corresponde a aproximadamente 1,5 X 10 -8 CFU/ml).
16. SUSPENSIN DIRECTA DE LAS COLONIAS
Se trabaja con cultivos jvenes.
En esta tcnica se estandariza el inculo al mismo tiempo que se prepara la suspensin.
SS CALDO COMN
3 A 5 COLONIAS
AJUSTAR TURBIDEZ
0,5 ESCALA DE McFARLAND
ESTABILIZAR 15 MIN.
17. FASE LOGARTMICA DE CRECIMIENTO
Se usa para la mayora de microorganismos de rpido crecimiento.
3 A 5 COLONIAS
SS CALDO COMN
INCUBACIN A 35 0 C2-6 HORAS
AJUSTAR TURBIDEZ
0,5 ESCALA DE McFARLAND
18. 19. PREPARACIN PARA LA INOCULACIN
Losdiscos deben permanecer a temperatura ambiente durante 1-2horas.
El agar de eleccin para esta prueba es el agar Mueller-Hinton (MHA).
20. INOCULACIN DE LA PLACA
2
1
3
21. INOCULACIN DE LA PLACA
1ml de
inculo
22. APLICACIN DE LOS DISCOS DE ANTIBITICOS
MTODO MANUAL
23. MTODO AUTOMTICO
24. APLICACIN DE LOS DISCOS DE ANTIBITICOS
1
8
7
2
9
3
6
5
4
25. MEDICIN DE LAS ZONAS DE INHIBICIN