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MARCO ZÁRATE ARCE MIGUEL OTINIANO TRUJILLO PAUL SANTAMARÍA JARAMILLO 1 2 3 Resumen El presente trabajo de investigación muestra buenas perspectivas para determinar el efecto anticancerígeno del agua alcalina a nivel experimental y pueda ser aplicada como terapia futura por la ciencia médica. El presente estudio se llevó a cabo en el laboratorio de Microbiología y Parasitología Médica de la Escuela de Medicina Humana donde se realizaron los ensayos piloto para determinar la capacidad anticancerígena del agua alcalina en Rattus rattus variedad albinus. Se utilizaron 16 ejemplares de ratas machos, los cuales se dividieron en 2 grupos de 8, siendo uno el grupo experimental y el otro el grupo control, y un ejemplar testigo. A la totalidad de la muestra (16 ratas) se le administró la solución de 2,2 difenil-picril-hidrazilo (DPPH) vía oral en dosis de 0.3 ml cada semana durante 1 mes. Luego al grupo experimental se le administró agua alcalina con sus alimentos como parte de su dieta y al grupo control se le dio agua destilada con sus alimentos como parte de la dieta, durante 4 meses hasta el sacrificio respectivo. Los resultados obtenidos nos muestran que la disminución de los pesos corporales de las ratas del grupo control es significativa en comparación con las ratas del grupo experimental, al igual que el peso de los órganos afectados. Concluimos que el agua alcalina tiene efecto paliativo y benéfico contra el cáncer, ya que no permite que el proceso patológico avance. Palabras clave Agua alcalina | efecto anticancerígeno | DPPH DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO ANTICANCERÍGENO DEL AGUA ALCALINA SOBRE LA INDUCCIÓN DE CÁNCER EN Rattus rattus VARIEDAD albinus 1 Médico cirujano. Maestro en Microbiología Clínica. Doctor en Microbiología. Docente asociado de Medicina humana de la UPAO, Trujillo. 2 Microbiólogo y parasitólogo. Candidato a magíster en Educación con mención en investigación y docencia universitaria. Docente e investigador. Jefe del laboratorio de prácticas de Microbiología y Parasitología Médica de la Universidad Privada Antenor Orrego de Trujillo. 3 Alumno del VII ciclo de Medicina Humana de la UPAO. Abstract The present research shows promise for determining the anticancer effect of alkaline water experimentally, to be applied as future therapy by medical science. The present study was carried out in the laboratory of Medical Microbiology and Parasitology, College of Human Medicine where trials were conducted to determine the anticancer ability of alkaline water in Rattus rattus albinus variety . 16 specimens of male rats, which were divided into 2 groups of 08, one experimental and the other control groups, and an exemplary witness were used. In the entire sample (16 rats) were given the solution of 2,2-diphenyl - picryl - hidrazil (DPPH ) orally at a dose of 0.3 ml every week for 1 month. Then the experimental group was given water with alkaline foods as part of their diet , and the control group was given distilled water with your meals as part of their diet for 4 months until the respective sacrifice. The encouraging results show that the decrease in the body weights of the rats in the control group is significant compared with the rats in the experimental group , like the weight of the affected organs. We conclude that alkaline water is beneficial palliative and anticancer effect not allowing the disease process advances. Keywords Alkaline water | anti-cancer effect | DDPH DEMONSTRATION EFFECT ANTICARCINOGENIC ALKALINE WATER ON THE INDUCTION OF CANCER IN VARIETY albinus Rattus rattus 335 Pueblo cont. vol.24 2 JULIO - DICIEMBRE 2013 [ ]

Efecto agua alcalina sobre el cáncer

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MARCO ZÁRATE ARCEMIGUEL OTINIANO TRUJILLO

PAUL SANTAMARÍA JARAMILLO

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Resumen El presente trabajo de investigación muestra buenas perspectivas para determinar el efecto anticancerígeno del agua alcalina a nivel experimental y pueda ser aplicada como terapia futura por la ciencia médica.

El presente estudio se llevó a cabo en el laboratorio de Microbiología y Parasitología Médica de la Escuela de Medicina Humana donde se realizaron los ensayos piloto para determinar la capacidad anticancerígena del agua alcalina en Rattus rattus variedad albinus. Se utilizaron 16 ejemplares de ratas machos, los cuales se dividieron en 2 grupos de 8, siendo uno el grupo experimental y el otro el grupo control, y un ejemplar testigo. A la totalidad de la muestra (16 ratas) se le administró la solución de 2,2 difenil-picril-hidrazilo (DPPH) vía oral en dosis de 0.3 ml cada semana durante 1 mes. Luego al grupo experimental se le administró agua alcalina con sus alimentos como parte de su dieta y al grupo control se le dio agua destilada con sus alimentos como parte de la dieta, durante 4 meses hasta el sacrificio respectivo. Los resultados obtenidos nos muestran que la disminución de los pesos corporales de las ratas del grupo control es significativa en comparación con las ratas del grupo experimental, al igual que el peso de los órganos afectados.

Concluimos que el agua alcalina tiene efecto paliativo y benéfico contra el cáncer, ya que no permite que el proceso patológico avance.

Palabras clave

Agua alcalina | efecto anticancerígeno | DPPH

DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO ANTICANCERÍGENO DEL AGUA ALCALINA SOBRE LA

INDUCCIÓN DE CÁNCER EN Rattus rattus VARIEDAD albinus

1 Médico cirujano. Maestro en Microbiología Clínica. Doctor en Microbiología. Docente asociado de Medicina humana de la UPAO, Trujillo.

2 Microbiólogo y parasitólogo. Candidato a magíster en Educación con mención en investigación y docencia universitaria. Docente e investigador. Jefe del laboratorio de prácticas de Microbiología y Parasitología Médica de la Universidad Privada Antenor Orrego de Trujillo.

3 Alumno del VII ciclo de Medicina Humana de la UPAO.

Abstract The present research shows promise for determining the anticancer effect of alkaline water experimentally, to be applied as future therapy by medical science.

The present study was carried out in the laboratory of Medical Microbiology and Parasitology, College of Human Medicine where trials were conducted to determine the anticancer ability of alkaline water in Rattus rattus albinus variety . 16 specimens of male rats, which were divided into 2 groups of 08, one experimental and the other control groups, and an exemplary witness were used. In the entire sample (16 rats) were given the solution of 2,2-diphenyl - picryl - hidrazil (DPPH ) orally at a dose of 0.3 ml every week for 1 month. Then the experimental group was given water with alkaline foods as part of their diet , and the control group was given distilled water with your meals as part of their diet for 4 months until the respective sacrifice. The encouraging results show that the decrease in the body weights of the rats in the control group is significant compared with the rats in the experimental group , like the weight of the affected organs.

We conclude that alkaline water is beneficial palliative and anticancer effect not allowing the disease process advances.

Keywords

Alkaline water | anti-cancer effect | DDPH

DEMONSTRATION EFFECT ANTICARCINOGENIC ALKALINE WATER ON THE INDUCTION OF CANCER IN VARIETY albinus Rattus rattus

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En los últimos años el cáncer es la principal causa de muerte entre los seres humanos. Es un problema para la ciencia médica por el incremento del número de muertes en sus distintas formas. En Latinoamérica ocupa el tercer lugar de las causas de muerte y en el Perú la segunda causa de muerte, siendo de vital importancia como problema de salud pública ya que el número de casos va aumentando.

El cáncer se debe a fallas en los mecanismos que controlan el crecimiento y proliferación celular por cambios llamados mutaciones en los genes de nuestras células. Un gran número de agentes son capaces de producir daño genético e inducir la transformación neoplásica de las células. Se incluyen carcinógenos químicos, radioactividad, virus oncogénicos, radicales libres de alimentos, fallas del sistema inmunológico, etc. La cirugía y la radioterapia curan cuando el cáncer está localizado, pero cuando las células cancerígenas se han extendido más allá de su sede inicial de origen se requieren métodos de tratamiento para destruir las células cancerígenas de todo el organismo, por esta razón se viene utilizando la quimioterapia, con frecuencia y eficacia. Sin embargo, el hecho de que todos los agentes quimioterápicos usados en el tratamiento del cáncer sean tóxicos para muchas células, limita su utilidad, por lo que se necesitan métodos de tratamiento que sean menos tóxicos.

El cáncer se desarrolla en un ambiente ácido y carente de oxígeno, es difícil que las células puedan desarrollarse en un ambiente de pH alcalino y por tanto cargado de oxígeno, lo cual las inhabilitaría o bloquearía su actividad metastásica. En las células cancerosas que proliferan con rapidez, la glucolisis procede a una velocidad mucho mayor que la requerida por el ácido cítrico. Por tanto se produce más piruvato que el que puede ser metabolizado. El resultado es una producción excesiva de lactato que favorece un entorno local relativamente ácido en el tumor. Las células cancerígenas se desarrollan en ambiente anaeróbico, es decir se desarrolla en ausencia de oxígeno libre y, consecuentemente, es difícil que pueda desarrollarse en un ambiente de pH alto alcalino y, por tanto, cargado de oxígeno.

El agua alcalina actúa como un tampón buffer que permite al organismo mantener un nivel de PH alcalino en la célula, rico en oxígeno y actúa el iminando desperdicios, desechos tóxicos, dificultando también el crecimiento de las células cancerígenas. Según estudios realizados en Japón, el agua alcalina es el antioxidante más efectivo que existe. Nuestro cuerpo necesita agua para poder eliminar las toxinas que producimos cuando digerimos los alimentos. Denham Harman hipotetizó que los radicales del oxígeno podían ser formados como productos de reacciones enzimáticas in vivo; Harman describió también a los radicales libres como “la caja de los males de Pandora”. Postuló la teoría de los radicales libres en el envejecimiento, basada en la premisa de que un proceso único y común (toxicidad de los radicales libres) modificable por factores genéticos y ambientales era responsable del envejecimiento y

I. Introducción

muerte de todos los seres vivos. Científicos japoneses descubrieron a finales del siglo XX que, al separar mediante el uso de la electricidad los iones en el agua, obtenían dos clases de agua, una muy rica en oxígeno y otra con menos contenido del mismo. Esta agua ayuda al cuerpo a mantener el pH normal y busca neutralizar y deshacerse de los radicales libres y desechos ácidos producidos por nuestro organismo.

En base a los antecedentes se ha realizado la presente investigación, con el fin de comprobar el efecto benéfico del agua alcalina sobre la inducción de cáncer en Rattus rattus variedad albinus corroborando la hipótesis de que el agua alcalina sí tiene efecto protector y de esta manera contribuir con una posible alternativa en la prevención de esta enfermedad, la cual es no tóxica y de bajo costo.

PROBLEMA :

¿Cuál es el efecto anticancerígeno del agua alcalina sobre la inducción del cáncer en Rattus rattus variedad albinus ?

OBJETIVOS:

HIPÓTESIS:

Demostrar el efecto anticancerígeno del agua alcalina sobre la inducción del cáncer en Rattus rattus variedad albinus.

Comparar la forma y crecimiento de los tejidos celulares de las células cancerosas en Rattus rattus v a r i e d a d a l b i n u s e n a m b o s g r u p o s d e experimentación.

El agua alcalina tiene un efecto anticancerígeno (protector) sobre la masa celular cancerígena inducida en Rattus rattus variedad albinus.

El agua alcalina no tiene un efecto inhibidor sobre la masa celular cancerígena inducida en Rattus rattus variedad albinus.

H1

H0

:

:

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6,7,8

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1. Población

Ratas machos Rattus rattus variedad albinus obtenidas del bioterio de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.

2 .Muestra

Para el presente estudio se utilizaron 16 ejemplares de Rattus rattus variedad albinus, los cuales se dividieron en 2 grupos de 8 ratas, siendo uno el grupo experimental y el otro el grupo control, y un ejemplar testigo.

3. Procedimiento

II. Material y métodos

3.1 Elaboración de la solución de difenil-picril-hidrazilo “DPPH” e inducción al cáncer: En una probeta se midió 1 L de metanol donde se diluyó 0.1 gr. de 2,2 difenil-picril-hidrazilo (DPPH). Luego de

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III. Resultados

Solución “A” (Bicarbonato de sodio). Se disolvió 84 g de NaHCO3 en suficiente cantidad de agua destilada completando 1 litro.Solución “B” (Carbonato de sodio). Se disolvió 106 g de Na2CO3 en agua destilada completando 1 litro.

Luego se preparó 1 L de agua alcalina, mezclando 76,8 ml de la solución “A” con 7,7 ml de la solución “B”, y se aforó con 915.5 ml de agua destilada.

3.3 Selección y administración de las soluciones a los grupos de estudio experimental y control:

Fueron divididos en dos grupos: experimental y control.Un grupo experimental cuya codificación fue: (E1, E2, E3, E4, E5, E6, E7, E8)Un grupo control cuya codificación fue: (C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8).A la totalidad de la muestra (16 ratas) se le administró la solución de 2,2 difenil-picril-hidrazilo (DPPH) vía oral en dosis de 0.3 ml cada semana durante 1 mes.

Luego al grupo experimental se le dio agua alcalina con sus alimentos como parte de su dieta hasta el sacrificio respectivo; al grupo control, en cambio, se le dio agua destilada con sus alimentos como parte de su dieta hasta el sacrificio respectivo.

3.4 Observación directa y sacrificio de los especímenes

Durante cuatro meses estuvieron vivos los especímenes, pasado el tiempo se procedió al sacrificio de los mismos para la observación directa de los órganos afectados por el DPPH.

3.5 Estudios anatomopatológicos

Se procedió a obtener los diversos órganos afectados para realizar los cortes histológicos y la lectura de los mismos por un especialista en patología.

Tabla 1: Pesos corporales promedio mensual de Rattus rattus variedad albinus (en gramos) de los grupos experimental y control

Tabla 2: Órganos afectados por el DPPH de Rattus rattus variedad albinus

Tabla 3: Pesos corporales de diferentes órganos aislados de Rattus rattus variedad albinus

G.E. = Grupo experimental G.C. = Grupo control G.T. = Grupo testigo

Pesos corporales promedio

TiempoGrupos

Experimental

Control

Testigo

1er Mes

215

214

216

2do Mes

209

201

218

3er Mes

192

181

215

4to Mes

178

154

216

198.5

187.5

216.25

Promedio(gr.)

Órganos

Hígado

Pulmones

Estómago

Intestino delgado

Intestino Grueso

Órganos

Hígado

Pulmones

Estómago

Intestino delgado

Intestino Grueso

G.E.

No

Si

Si

No

No

G.E.

5.3

1.9

3.25

11.3

7.5

G.C.

No

Si

Si

No

No

G.C.

6.6

2.7

6

11.1

7.3

G.T.

No

No

No

No

No

G.T.

5

1.2

1.7

11

7.2

esta solución patrón se utilizó 0.3 ml. de 2,2 difenil-picril-hidrazilo (DPPH) vía oral /kilogramo de peso para la administración a los grupos experimental y control, antes de su dieta.

3.2 Elaboración y administración del “agua alcalina”: se preparó 2 soluciones para la elaboración de agua alcalina:

Fotos de estómago de Rattus rattus tratado con y sin agua alcalina

Foto 1. Estómago de rata tratado con agua alcalina

Foto 2. Mucosa del fondo gástrico. Se observa el epitelio cilíndrico simple, lámina propia del tejido conectivo y la muscular de la mucosa. No se observan anormalidades.

DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO ANTICANCERÍGENO DEL AGUA ALCALINA SOBRE LA INDUCCIÓN DE CANCER EN Rattus rattus VARIEDAD albinus |

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Foto 3. Estómago de rata no tratado con agua alcalina Foto 4. Células muy congestionadas. Observación de células mucosas dañadas, al igual que el epitelio gástrico.

Fotos de pulmones de Rattus rattus tratados con y sin agua alcalina

Foto 5. Pulmones de rata tratados con agua alcalina Foto 6. Se observan los tabiques internos inter alveolares delgados y gruesos. La presencia de los mio fibroblastos evidencia lo normal de estas células.

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Foto 7. Pulmones de rata no tratados con agua alcalina Foto 8. Se observa en el bronquiolo una inflamación crónica, hay la presencia de linfocitos y células plasmáticas. Los tabiques internos inter alveolares están muy engrosados.

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IV. Discusión

El cáncer es un problema mundial de salud pública. La mayor parte de la mortalidad obedece a cáncer de pulmón, estómago, hígado, colon y mama. Entre los agentes anticancerígenos que ayudan a combatir esta enfermedad tenemos los principios activos que tienen las hortalizas y las frutas, así como los iones hidroxilos de aguas alcalinas que alcalinizan los medios ácidos neutralizándolos.

Los radicales libres actúan en el organismo alterando a las membranas celulares y atacando las proteínas, los lípidos o grasas ("oxidación") y material genético de las células, como el ADN. En el transcurso de los años, los radicales libres pueden producir una alteración genét ica sobre las célu las que se d iv iden continuamente contribuyendo a aumentar el riesgo de cáncer por mutaciones genéticas o bien disminuyen la funcionalidad de las células que no se dividen tanto, reduciéndose el número de mitocondrias, lo que es característico del envejecimiento.

En la tabla 1 presentamos los pesos promedio mensuales de los especímenes por grupo de estudio. En el grupo control observamos que conforme pasaron los meses se presentó una pérdida gradual del peso corporal. La evolución carcinogénica del presente modelo experimental asocia la pérdida del peso debido al desbalance energético y metabólico de la patología investigada.

En el grupo experimental, por el contrario, la leve caída del peso corporal promedio refleja un efecto paliativo benéfico del agua alcalina en contra de la evolución carcinogénica del modelo experimental. Esta consecuencia es atribuible al efecto anti carcinogénico del agua alcalina suministrada.

En la tabla 2 observamos que el difenil picril hidrazilo (DPPH) originó daño celular en los pulmones y estómago de ambos grupos de estudio. Por lo que podemos deducir que este agente químico produce efecto cancerígeno a nivel de esos órganos, ya que hay escasos trabajos acerca de los órganos que afecta el DDPH.

Existen trabajos previos realizados con el 1,2 dimetilhidroxina, que originó cáncer al colon, así como el 3,4 benzopireno que afectó la mucosa gástrica del estómago. Se sabe que el DDPH actúa como radical libre potencial, cuyo mecanismo es adherirse a nivel intracelular originando mutaciones del ADN, dando como consecuencia el daño celular.

En la tabla 3 se observó que los órganos afectados por el DDPH han sido los pulmones y el estómago, resultados que se evidencian con las muestras patológicas observadas tanto a nivel macroscópico y microscópico en los cortes histológicos realizados.El agua ionizada, al producir iones de hidroxilo ayuda a la producción de oxígeno, neutraliza los dañinos radicales libre, aumenta nuestro nivel de energía, corrige el balance ácido-alcalino, hidrata las células y, en términos generales, reduce muchos de los síntomas del envejecimiento.

En otras investigaciones se ha demostrado los efectos significativos del HCO3 sobre la formación de metástasis y el tumor pH extracelular, en donde el tratamiento con bicarbonato no tuvo efecto en la

química sanguínea, lo que indica que el pH sistémico se compensó plenamente en estos animales no conduciendo a alcalosis metabólica sistémica y que la inhibición de la metástasis tumoral se debió al aumento del bicarbonato en el líquido intersticial ya sea de los tumores primarios o metastásicos. De acuerdo con estas predicciones, un experimento de dosis - respuesta con un punto final de 30 días mostraron que concentraciones tan bajas como 50 m mol / l reducen la incidencia de metástasis espontáneas. El efecto más grande, sin embargo, es a 200 m mol / l e inclusive a mayor dosis, ya que en dicho estudio a 200 m mol /l la inhibición fue incompleta. 18 El cáncer es un conjunto de enfermedades de origen multifactorial. Se caracteriza principalmente por un crecimiento anormal, una proliferación acelerada y no controlada de las células, con capacidad de formar un tumor y metástasis en diferentes tejidos. El estrés oxidante y el proceso tumoral se encuentran estrechamente relacionados a través de la oxidación del material genético. Desde 1990 distintos estudios apuntan a que una pequeña cantidad de oxidantes, tales como el peróxido de hidrógeno, juegan un papel crucia l como segundos mensajeros en la transducción de señales para la activación, diferenciación y proliferación celular. Parece ser que la inducción o inhibición de la proliferación celular depende de los niveles de oxidantes y antioxidantes en la célula. En un ambiente con un nivel reducido de estos agentes se estimula la proliferación; sin embargo, un ligero cambio hacia un ambiente oxidado induce la apoptosis o necrosis celular. Por lo que se puede decir que la apoptosis es inducida por un estímulo moderado de oxidantes y la necrosis por un efecto oxidante intenso.

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DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO ANTICANCERÍGENO DEL AGUA ALCALINA SOBRE LA INDUCCIÓN DE CANCER EN Rattus rattus VARIEDAD albinus |

El difeni l picr i l hidrazi lo (DPPH) -agente cancerígeno- afectó a estómago y pulmones de Rattus rattus variedad albinus.

Los órganos pulmones y estómago han sido afectados morfológicamente y con incremento de peso en Rattus rattus variedad albinus.

A nivel patológico se observan células dañadas por el difenil picril hidrazilo (DPPH).

El agua alcalina tiene efecto protector sobre la masa celular cancerígena inducida en Rattus rattus variedad albinus.

V. Conclusiones

VI . Agradecimientos

En primer lugar agradecemos a Dios Todopoderoso por ser el gestor de la vida y dador de todo lo que nos rodea; en segundo lugar, al Vicerrectorado de Investigación de la Universidad Privada Antenor Orrego por impulsar y apoyar los trabajos de investigación, razón de ser de la universidad.

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VII . Referencias bibliográficas

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DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO ANTICANCERÍGENO DEL AGUA ALCALINA SOBRE LA INDUCCIÓN DE CANCER EN Rattus rattus VARIEDAD albinus |

Administración del DPPH a las ratas albinas

VIII. AnexosPreparación del DPPH

Preparación del agua alcalina

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Sacrificio de las ratas albinas y obtención de los órganos afectados