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Zaragoza, 9 de Noviembre de 2010
María José Martínez Lorenzo
RETOS DE LA INGENIERIA TISULAR:
APLICACIÓN CLINICA
Tratamientos actualesTratamientos actuales
Técnicas que estimulan la médula ósea:
• Microfractura
• Mosaicoplastia
Artroplastia.
Alotrasplante.
Técnicas basadas en terapia celular:
•Implante de condrocitos autólogos
(ACI)
Técnicas basadas en terapia celular:
•Implante de condrocitos autólogos
(ACI)
Lesión
Biopsia de cartílagosano
Digestión enzimática
Cultivo durante 11-21 días(aumento del número de células)
Tratamiento con tripsina
Suspensión de 2,6 -5 x 106 células
Inyección de condrocitos autólogos en la lesión
Sutura de la lesión con cobertura de periostio
Extracción de periostio de tibia
medial
Estrategias de regeneraciEstrategias de regeneracióón y reparacin y reparacióónn
- n=8
- 5 ♀, 3 ♂- 74 ± 5,07
años
- Artrosis (OA)
- n=8
- 5 ♀, 3 ♂- 74 ± 5,07
años
- Artrosis (OA)
Procedencia: rodilla
Procedencia: rodilla
Cartílago articular
Pacientes Pacientes
MUESTRASMUESTRASMUESTRAS
Disgregación/DigestiónCultivo
Diferenciación hacia condrocitos
OBTENCIÓN, AISLAMIENTO Y CULTIVO DE CELULAS A PARTIR DE CARTILAGO
OBTENCIÓN, AISLAMIENTO Y CULTIVO DE CELULAS A PARTIR DE CARTILAGO
CD31-, CD34-, CD36-, CD117-, CD133/1-, HLA-DR-
CD13+, CD44+, CD59+, CD73+, CD90+, CD105+, CD151+,
CD166+
CD31-, CD34-, CD36-, CD117-, CD133/1-, HLA-DR-
CD13+, CD44+, CD59+, CD73+, CD90+, CD105+, CD151+,
CD166+
Fenotipo por citometría de flujo a pase 1Fenotipo por citometrFenotipo por citometríía de flujo a pase 1a de flujo a pase 1
Células de cartílago
MSC de tejido adiposo
Células de cartílago
MSC de tejido adiposo
COCULTIVOS MSC-Células de cartílago
MD1 (BMP-6+ TGFb)
MD1 (BMP-6+ TGFb)
MD1 (BMP-6+ TGFb)
Células de cartílago+
MSC
MSC de grasa
MSC de médula
COCULTIVOS –Medios de diferenciación
Células de cartílago+
MSC de tejido adiposo
MD1 (BMP-6+ TGFb)
MD2 (…)
MD4 (BMP-6)
MD3 (TGFb)
?
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COCULTIVOS –Medios de diferenciación