Construyendo la excelencia

Programa Ingeniería AgronómicaExtensión Facatativá

Docente: Jennifer Gutiérrez

Estudiantes :Karen Franco

Biología molecular Quinto semestre

Universidad De Cundinamarca Facatativá 2015

PROPAGACIÓN IN VITRO DE POLIANTHES TUBEROSA L. CULTIVARS DE VARIEDAD (CALCUTTA SINGLE)

PUBLICADO: SEPTIEMBRE DEL AÑO 2013

PUBLICADO POR: Jitendriya Panigrahi, Mohammad Shahid L.

Saiyad

SE REALIZO EN: Department of Biotechnology, Shri A. N. Patel

P.G. Institute

PAGINA: INTERNATIONAL JOURNAL OF PLANTS, ANIMAL AND ENVIROMENTAL SCIENS

LINK: http://pakacademicsearch.com/pdf-files/env/78/76-79%20Volume-3,%20Issue-3,%20July-Sep-2013.pdf

RESUMEN

Esta tuberosa Tiene un gran potencial económico para corte de la flor de comercio e industria de aceite esencial, debido a su gran demanda, se ha cultivado en la mayor parte del los países tropicales y subtropicales.

El principal objetivo de la presente investigación fue desarrollar un protocolo fiable de gran escala para multiplicación de la tuberosa Polianthes variedad Calcuta Bajo condiciones in vitro mediante el uso de diferentes combinaciones y concentraciones de hormonas de crecimiento en Medio MS.

Entre las diversas hormonas utilizadas para la formación de brotes múltiples la mejor respuesta fue producido con medio MS que contenía 0,2 mg / l de BAP y kinetina con un promedio de 3,5 ± 0,2 brotes de Calcuta individual.

Brotes extirpados de las culturas de los brotes proliferantes fueron arraigados en medio MS de fuerza que tiene medio 0,5 mg / l de IAA y BAP. En brotes in vitro de plántulas enraizadas crecer exuberantemente bajo campo condiciones y llegaron a la floración después de 1 mes del trasplante.

INTRODUCCIÓN El nombre común de la planta utilizada, se deriva de la tuberosa latín Los principales constituyentes de nardo El aceite esencial que se produce es alcohol bencílico, ácido butírico,

eugenol, farnesol, benzoato de mentilo, geraniol y nerol utilizado como compuestos químicos (Benschop M. 1993)

Debido a su gran demanda, se cultiva actualmente en la mayoría de las zonas tropicales y subtropicales países del mundo Tuberosa generalmente se siembra en febrero y marzo. (Edwards., Michael. 2006)

La plantación de bulbos en el mes de Abril ha demostrado para registrar el rendimiento más alto de los picos y flores en el cv. single.

Fecha de siembra juega un papel importante en la regulación del crecimiento y la calidad de nardo.(Jowkar, M.M. and H. Salehi. 2006)

Nueve de las especies tienen flores blancas uno era blanco y rojo, y dos son de color rojo. L

El método convencional de propagación a través de las bombillas es bastante lento para satisfacer la creciente demanda. Por lo tanto, el objetivo principal de este estudio es desarrollar un protocolo fiable de gran escala de clonación de Polianthes tuberosa variedad Calcuta single.

MATERIALES Y METODOS

PREPARACIÓN DEL EXPLANTE Y ESTERILIZACIÓN

Las plantas se recogen por la Universidad Agrícola Navsari. Las plantas recolectadas se lavaron a fondo en agua corriente durante 15 minutos para eliminar las partículas del suelo. Los bulbos se cortaron de la parte de rizoma por la ayuda de un cuchillo.

Fue seguido por lavado en agua corriente del grifo para eliminar el detergente seguido por D / W de 2-3 veces. Ellos se transfirieron a continuación a otro vaso que contiene Bavistin con 2-3 gotas de 14-20 soluciones para 20 min.

En el paso 1, los explantes preparados se lavaron a fondo con agua del grifo corriente durante 2-3 veces para minimizar la pérdida de cultura debido a la contaminación microbiana y se empaparon con detergente durante 10 min.

LOS EXPLANTES FUERON ESTERILIZADOS EN DOS PASOS:

PASO 1

PASO 2 En el paso 2, realizadas bajo la unidad

de LAF, los explantes se lavaron a fondo con D / W estéril para 3-4 veces en una condiciones asépticas.

Para la esterilización de la superficie, los explantes se lavaron en solución de cloruro de mercurio 0,1% (HgCl2) durante 2 min.

Ellos fueron lavadas adecuadamente con D / W estéril para 3-4 veces dentro de la mesa de trabajo limpia para eliminar todo rastro de HgCl2 porque tiene naturaleza carcinógena

Ellos fueron lavadas adecuadamente con D / W estéril para 3-4 veces dentro de la mesa de trabajo limpia para eliminar todo rastro de HgCl2 porque tiene naturaleza carcinógena

Los explantes fueron inoculados en el medio MS suplementado con diferente niveles de auxinas y citoquininas concentración.

Explantes esterilizados (bombillas) fueron extirpados de los dos extremos, con una multa 1forceps y bisturí estériles

Todas las culturas se mantuvieron en una sala de cultivo con aire acondicionado a una temperatura de 25 ± 40 C con una intensidad de luz de 2500-3000 luz (aproximadamente) proporciona luz fría.

El fotoperiodo mantener tenía 16 horas de luz y 8 horas de oscuridad y relativa humedad del 45-50%.

INDUCCIÓN DE BROTES Y MULTIPLICACIÓN

En esta primera serie de experimentos, los bulbos de rizoma de Calcutta Single se cultivaron en el medio MS suplementado con combinación de mg dos hormonas diferentes, a saber BAP y kinetina de la concentración (0,2 a 2,5) /l.

Los disparos que proliferan se subcultivaron en medio fresco como una sola sesión o en un grupo de cinco y diez brotes para estudiar el efecto de inóculo inicial sobre la tasa de multiplicación de brotes.

ACLIMATACIÓN DE IN-VITRO CRIADO PLÁNTULAS

los brotes de las plántulas fueron sacados, Las raíces de los tubos de cultivo, su sistema radicular se lavo debajo del grifo con agua para eliminar los rastros

fueron trasplantados en una mezcla para macetas que comprende la tierra del jardín y el moho de la hoja (3: 1) en macetas de barro de 10 cm

se mantuvo durante 30 días en la sala de endurecimiento donde fueron aclimatados cultivándolas por primera vez

en alta humedad (99% RH) y poco a poco la humedad se redujo a 70% durante un período de 30 días.

El endurecido plantas en macetas se mantuvieron en invernadero durante aproximadamente 2 meses y finalmente transferidos al campo.

RESULTADOS

EFECTO DE BAP Y KINETINA

Como comparación con el control, entre las diversas hormonas utilizadas para la formación de brotes múltiples, la mejor respuesta fue producida con medio MS que contenía 0,2 mg / l de BAP y kinetina con un promedio de 3,5 ± 0,2 brotes de Calcutta Single mientras que 2,0 mg / l de BAP y kinetina con una longitud del tallo de 6,2 ± 0,3 cm. (Tabla 1-y Figura 1).

EFECTO DE IAA Y BAP

La mejor enraizamiento apareció en combinación de 0,5 mg / l de IAA y 05 mg / l de BAP se cultivaron con el medio MS; mientras que el control no mostró ningún resultado aparente. Estos resultados se muestran en la (Tabla 2).

CONCLUSIONES Como la preocupación de crecimiento, el nivel de hormona endógena

es mayor en la variedad individual CalcuTta, ya que requiere solamente una pequeña concentración de hormona exógena que es 0,2 mg / l de BAP y 0,2 mg / l de Kinetina por su inducción de brotes y multiplicación y simultáneamente para la inducción de la raíz

Los niveles de IAA se mantuvieron bajas durante las primeras etapas de la bombilla de la brotación en P.tuberosa L. pero aumentaron

rápidamente después de eso. La drástica reducción en el contenido de AAB libre en los tejidos se correlacionan con flores la iniciación y el desarrollo de la flor en P. tuberosa. De acuerdo con investigaciones anteriores, que reveló que un

específico la biosíntesis de metabolitos secundarios y la acumulación en una planta está en función de las hormonas que implican en la planta diferenciaciones de crecimiento en diferentes etapas de desarrollo. Por lo tanto, la incorporación de los reguladores del crecimiento de plantas específicas como IAA, kinetina y BAP en un medio de crecimiento (MS) puede apoyar la síntesis de compuestos químicos de la intereses, especialmente compuestos relacionados con perfumes y aromas en P. tuberosa L.

El presente estudio es el primero en describir un protocolo de regeneración directa de Calcuta individuales que emplean los brotes. Los sistema de micro propagación ha asegurado establecimiento efectivo, multiplicación rizo génesis y aclimatación de esta variedad y podría ser explotada para multiplicar genotipos elite y desarrollar estrategias in vitro para la explotación de este hierba ornamental y medicinal.

REFERENCIAS

Benschop M. 1993. Polianthes. In: The physiology of flower bulbs (De Hertogh A., Le Nard M., Eds). Elsevier Publ, Amsterdam, the Netherlands.

pp. 589-601. [2] Edwards., Michael. 2006. Fragrances of the world. Crescent House Publishing.

[3] Huang K. L., I. Miyajima, H, Okubo, T.M. Shen and T.S. Huang. 2001. Breeding of colour tuberose (Polianthes) and cultural experiments in Taiwan. Acta Horticulturae 570, 367 -371.

Nhut, T., Van, B., Silva, J. 2002. Changes of shoot regeneration potential of oriental hybrid lily. Adv Horti Sci, 9: 79–82.