UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SÁN NICOLÁS DE HIDALGOFACULTAD DE QUÍMICO FARMACOBIOLOGÍA

CURVA DE CALIBRACIÓN DE LA CREATININA

EQUIPO: 8Kevin Israel Herrejón Mora

Manuel Antonio Aguilera Arana

Profesor:MSP. Rodrigo Díaz Balcázar

Materia de Bioquímica Clínica

CREATININA

La creatinina es un compuesto orgánico nitrogenado de deshecho, producto de la degradación de la creatina y excretado en la orina.

DEGRADACIÓN DE LA CREATINA A CREATININA

La creatina es un metabolito que se sintetiza en el páncreas, hígado y riñones, su principal función es almacenarse en todos los músculos y facilitar la formación de Pcr y así producir energía para los músculos.

RIÑON

GFR (filtración glomerular)LA TASA DE FILTRACION DEPENDE:

Flujo sanguíneo al gloméruloLa presión efectiva a través del lecho capilar glomerularLa presión tubular

FILTRACION EN RELACION CON LA CREATININASe libera en la sangre a una tasa constanteNo se reabsorbe Solo se secreta en mínimas cantidades Su excreción es proporcional a la GFR

oLa creatinina es llevada por la sangre a los riñones los cuales la filtran del cuerpo en la orina, es por este motivo que podemos medir la [] de creatinina directamente en orina oLa cantidad de creatinina que aparece, depende de su masa muscular, por tanto, esta concentración será constante para cada individuo, si no varia su masa muscular

VALORES DE REFERENCIASujetos Concentraci

ón Neonatos 0.3 - 1.2

mg/dlInfantes 0.2 - 0.4

mg/dlNiños 0.3 - 0.7

mg/dl Adolecentes 0.5 – 1 mg/dl

Mujeres adultas

0.5 – 1.1 mg/dl

Varones adultos

0.6 – 1.2 mg/dl

Orina Hombres

Mujeres

Creatinina

1.0 – 2.0 g/24hrs

0.8 – 1.8 g/24hrs

¿Qué indican los resultados anómalos de [] de creatinina?

Podrían indicar:

Insuficiencia renalDaño de las células tubulares del riñónEscaso flujo de sangre hacía los riñonesDaño alas unidades de filtración de los riñonesConducto de la vejiga obstruidoDesnutriciónDeshidrataciónIncluso Insuficiencia cardíaca

EXAMÉN CLÍNICOEn una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico. Niveles altos de creatinina son indicativos de patología renal

Curva de CalibraciónLa curva de calibración es la relación representada gráficamente entre la absorbancia y la concentración de la solución patrón colocando las absorbancias en el eje de las “Y” la concentración en el eje “X”. Se construye con el fin de calcular la concentración de la muestra problema.

Solución patrón: Es una solución química de concentración conocida.Blanco: Es una muestra de concentración cero, a la cual se le aplica el mismo tratamiento dado a la muestra patrón

Método de extrapolación de la

lectura.

El punto de corte será el correspondiente a la concentración

de la muestra problema.

Obtenida la lectura se busca este valor en la curva y se traza una

línea hasta cortar la recta.

Ejemplo:Se realizan patrones a diferentes concentraciones conocidas, buscando la linealidad, se leen al espectrofotómetro y se determina la curva, para posteriormente leer la muestra y determinar su []

En el caso de la creatinina debemos añadir un reactivo: el picrato alcalino

X Y XY X2 Y2

0.25 0.032 0.008 0.0625 0.001024

0.5 0.026 0.013 0.25 0.000676

n=5 1 0.019 0.019 1 0.000361

1.5 0.009 0.0135 2.25 0.000081

2.0 0.006 0.012 4 0.000036

Sumatorias

5.25 0.0092 0.0655 7.5625 0.002178

Medias 1.05 0.0184

Formulas para determinar los valores de m y b en la ecuación general y=mx+b

CURVA DE CALIBRACIÓN(Variables Aceptables a la

Linealidad)

Método Jaffé. Colorimétrico - cinético PRINCIPIO DEL MÉTODO: El ensayo de la

creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato alcalino descrito por Jaffé.

Mezclar igual volumen de reactivo R1 y reactivo R2 para obtener nuestro reactivo de trabajo RT

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: Normal y Patológico

0 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 20

0.005

0.01

0.015

0.02

0.025

0.03

0.035

f(x) = 0.0153 x + 0.00229999999999999R² = 1

Curva de calibracion de la creatinina

Series1Linear (Series1)Linear (Series1)Muestra Problema

Determinación de la [] de creatinina

Método enzimático En la primera reacción, se usa creatinasa y sarcosina

oxidasa en la hidrólisis enzimática de la creatina endógena para producir peróxido de hidrógeno, el cual es eliminado por catalasa. En la segunda reacción, la catalasa es inhibida por la azida sódica, se añaden creatininasa y 4- aminoantipirina (4-AA), y únicamente la creatina generada a partir de la creatinina por la creatininasa se hidroliza secuencialmente por la creatinasa y sarcosina oxidasa, para producir peróxido de hidrógeno. Este nuevo peróxido de hidrógeno formado se mide en una reacción acoplada catalizada por la peroxidasa, con N-etil-n-sulfopropil-mtoluidina (TOPS)/4- AA como cromógeno (quinonimina)

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: Normal y Patológico

ConclusionesComo conclusiones nos quedamos

destacando la importancia que tiene llevar a cabo curvas de calibración para la determinación de analitos. Para ofrecer así fiabilidad en los resultados de laboratorio que se solicitan. Es importante para evaluar el estado de los reactivos y el equipo y disminuir al mínimo los posibles errores y de esa forma brindar al paciente un servicio de calidad.

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MARBAN María Antonia Dosal, Marcos Villanueva.INTRODUCCIÔN A LA

METROLOGÎA QUÎMICA CURVAS DE CALIBRACIÓN EN LOS MÉTODOS ANALÍTICOS, Marzo 2008, Disponible en:http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/CURVASDECALIBRACION_23498.pdf

www.academia.edu/3632352/DETERMINACION_ESPECTROFOTOMETRICA_DE_CREATININA